Isospora belli Cryptosporidium spp Cyclospora cayetanensis

Apicomplexa
Filo: Apicomplexa Classe: Sporozoea

Ordem: Coccidiida/ Eucoccidiida

Subordem: Eimeriina Famlia:

Sarcocystidae Sarcocystis hominis Eimeriidae Isospora belli, Cyclospora caeytanensis Cryptosporidiidae- Crysptosporidium spp

Ciclo Vital
Ciclo assexuado e sexuado
Esporozota adeso pelo complexo apical invaso

celular crescimento- esquizogonia esquizonte merozotos Merozotas: pode dar novo ciclo sexuado ou produzir ciclo sexuado.

Ciclo Vital
Ciclo sexuado:
Merozotos diferenciao em gametcitos

microgametcitos (masculino) e macrogametcitos (feminino) fecundao ovo ou zigoto oocisto Oocisto liberao de esporozotos incio de um novo ciclo.

Coccdios
Vrias espcies de Eimeriina causam doenas em aves,

gado e outros animais. Galinhas, patos, pombos, perus e faises so infectados por mais de 20 espcies. Fcil caracterizao do gnero pela presena de oocistos com 2 esporocistos de 4 esporozotas cada. Ingesto de carne de animais parasitados resulta na eliminao dos oocistos pelos humanos sem que isso cause patologia pois atravessam o tubo sem desencistarem.

Coccdios
Espcies que parasitam o homem :

Isospora belli
Cryptosporidium spp Cyclospora cayetanensis

Sarcocystis hominis
Sarcocystis suihominis

Isospora belli
Ingesto de oocistos esporulados e liberao dos

esporozotos Invaso e diviso por esquizogonia Leso celular e liberao dos merozotas Diferenciao em gametcitos Oocistos
Elipticos com extremidades estreitas
Medem 30 x 12 m Encontrados nas fezes na forma imatura com presena de

massa citoplasmtica nucleada e cheia de granulaes, com regies polares livres

Oocisto
A clula nica divide-se em duas com produo do

esporoblasto No solo:
Esporogonia. Os esporoblastos produzem membrana

cstica produzindo o esporocisto. Maturao completa ocorre quando cada esporocisto produzir 4 espoozotos.

Ciclo evolutivo

Oocisto de Isospora belli

Ilustrao disponvel em Rey, 2010

Ilustrao disponvel em http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/HTML/ImageLibrary/Cystoisosporiasis_il.htm

Oocisto imaturo corado com safranina

Ilustrao disponvel em http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/HTML/ImageLibrary/Cystoisosporiasis_il.htm

Oocisto imaturo analisado por microscopia de fluorescncia

Ilustrao disponvel em http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/HTML/ImageLibrary/Cystoisosporiasis_il.htm

Patologia
Podem ser assintomticas Infeces benignas com invaso de clulas epiteliais e das

criptas de Lieberkuhn do ID com reao inflamatria da mucosa Quando sintomtica: perda do apetite, astenia, dor de cabea, nusea, evacuaes com clicas e dores abdominais. Incio pode ser sbito com febre e diarreia Cura espontnea e completa em aproximadamente 40 dias AIDS: diarria debilitante que pode levar a morte.

Oocisto de Isospora belli em corte de duodeno

Ilustrao disponvel em http://pathology5.pathology.jhmi.edu/micro/v18n09.htm

Merozotos e gametcitos presentes nas clulas intestinais

gametcitos

merozoitos

Ilustrao disponvel em http://www.annals.org/content/121/9/663/F1.expansion.html

Cryptosporidium spp
Filo: Apicomplexa Classe: Sporozoa

Subclasse: Cocidia
Ordem: Eucocidiida Subordem: Eimiriina

Famlia: Criptosporidiidae
Gnero: Cryptosporidium

Cryptosporidium spp
Parasitos encontrados em grande nmero de animais:

mamferos, aves, rpteis e peixes As espcies de aves e mamferos podem contaminar o homem. Protozorio causador da diarreia So lcool-cidos resistentes Transmisso ocorre pela ingesto ou inalao de oocistos esporulados

Ciclo evolutivo
Ingesto de oocisto Liberao de 4 esporozotos no intestino delgado

Invaso do esporozoto na membrana celular sem

invaso citoplasmtica. Formao de vacolo parasitforo intracelular e extracitoplasmtico Reproduo assexuada dentro do vacolo com produo de meronte 1 liberao do merozoto 1invaso celular - meronte 2 liberao do merozoto 2.

Ciclo evolutivo
Merozto 2 micro e macrogameta zigoto

esporocisto de parede delgada e esporocisto de parede espessa Esporocisto de parede espessa: eliminado nas fezes Esporocisto de parede delgada: rompimento dentro do intestino causando auto-infeco

Ilustrao disponvel em http://www.coccidia.icb.usp.br/disciplinas/BMP222/aulas/Sarcocystis_Cryptosporidium_2011.pdf

Ilustrao disponvel em www.coccidia.icb.usp.br

Oocistos presentes nas clulas epiteliais - intestinais. ID de ovelha

Ilustrao disponvel em www.coccidia.icb.usp.br

Meronte de Cryptosporidium com membrana externa destruda, expondo merozotos. Intestino delgado de ovelha micrografia eletrnica de varredura

Ilustrao disponvel em www.coccidia.icb.usp.br

Medem aproximadamente 3 a 6 m

Ilustrao disponvel em http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/HTML/ImageLibrary/Cryptosporidiosis_il.htm

Ilustrao disponvel em http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/HTML/ImageLibrary/Cryptosporidiosis_il.htm

Ilustrao disponpivel em http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/HTML/ImageLibrary/Cryptosporidiosis_il.htm

Patologia
Criptosporidiose Oocistos aderidos a microvilosidades: sindrome de m absoro Imunocompetentes: quadro benigno e autolimitante com durao de 10 dias. Sintomas mais severos em crianas Diarreia aquosa com 3 a 10 evacuaes dirias que pode durar de 1 a 30 dias Dor abdominal, anorexia, febre, dor de cabea, nusea e vmito

Patogenia
Imunodeficientes:
Diarreia crnica que pode durar meses Desequilbrio eletroltico Mortalidade elevada

Resistncia a antimicrobianos

Cyclospora cayetanensis
Filo: Apicomplexa

Classe: Sporozoea
Ordem: Eucoccidiida Famlia: Eimeriidae

Gnero: Cyclospora

Cyclospora cayetanensis
Formas evolutivas:
Esporozotos Trofozotos Merozotos

Gametcitos
Oocistos com dois esporoztos

Cyclospora cayetanensis
Tipo de reproduo: Assexuda: esquizogonia Sexuada: gametogonia e esporogonia Reservatrio: Homem

Cyclospora cayetanensis
Ciclo evolutivo Ingesto de cistos esporulados contendo 2 esporcistos com 2 esporozotos Liberao dos esporozotos e invaso celular (ID) Diferenciao em trofozotos e multiplicao por esquizogonia Formao do esquizonte e liberao dos merozotos Novo ciclo ou produo de gametcitos Formao de oocisto no esporulado eliminado nas fezes Esporulao ocorre em dias semanas em temperatura de 22 a 32C

Cyclospora cayetanensis
Oocisto semelhante ao de Cryptosporidium

Esfrico, membrana dupla , apresentando 8-10 m de

dimetro (2x maiores do que os oocistos de Cryptosporidium) Utilizao de morfometria com micrmetro ocular para identificao das espcies

Ilustraes disponveis em http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/html/ImageLibrary/Cyclosporiasis_il.htm

Oocisto de C. cayetanensis corado com safranina

Oocisto de C. cayetanensis visvel microscopia de UV

Patologia
Assintomticos Sintomticos: Diarreia: autolimitada que dura 3 a 4 dias com aproximadamente 4 a 10 evacuaes dirias e explosivas; podem ocorrer recadas frequentes durante um perodo de 2 a 3 semanas Aspecto no sanguinolento, mas com presena de fleuma

Patologia
Outros sintomas: dor abdominal, nuseas e vmitos, perda de peso, fadiga, febre baixa Em indivduos imunocomprometidos o quadro

diarreico crnico e intermitente

Espcie

Forma encontrad a nas fezes

Tamanho (m)

Estrutura do oocisto

Isospora belli

Oocisto no 30 x 12 esporulado

2 esporocistos com 4 esporozotos 4 esporozotos

Cryptosporidium parvum

Oocisto esporulado

46

Cyclospora cayetanensis

Oocisto no 8 -10 esporulado

2 esporocistos com 2 esporozotos cada

Diagnstico
Pesquisa de anticorpos circulantes: Elisa e IFI

Microscopia por contraste de fase ou luz UV:

autofluorescncia

Filtro: 330-365 nm (oocistos de colorao azul ) 450-490 nm (oocistos de colorao verde)

Pesquisa de oocisto em material de bipsia intestinal

Diagnstico
Pesquisa de oocisto nas fezes
Mtodo de Sheather Mtodo de Willis Colorao especial de Kinyoun (modificado)

Mtodo de Henriksen e Pohlenz

Ziehl-Neelsen Mtodo da safranina

Diagnstico
Mtodo de Sheather Preparar uma diluio de material fecal 1:2 com soluo fisiolgica Filtrar o material e tranfer-lo para tubo cnico at atingir metade do tubo Completar o tubo com soluo saturada de acar Cobrir o tubo com papel lamnula de plstico ou papel celofane transparente e homogeneiz-lo por agitao Retirar a lamnula e coloc-la sobre uma lmina para anlise em microscopia em objetiva de 40

Diagnstico
Mtodo de Willis Colocar 10g de fezes num frasco de Borrel ou no prprio recipiente onde esto as fezes Homogeneza-las com um pouco de soluo saturada de sal (NaCl) ou de acar Completar o volume at a borda do frasco. Colocar na boca do frasco uma lmina, que dever estar em contato com o lquido. Deixar em repouso por 5 minutos. Findo esse tempo, retirar rapidamente a lmina, deixando a parte molhada voltada para cima. Cobrir com lamnula, corar com Lugol e examinar com objetiva 10x.

Diagnstico
Colorao especial de Kinyoun modificado (a frio)
Anlise de Cryptosporidium spp e I. belli Oocistos coram-se do rosa ao vermelho, ao prpura

sobre fundo verde

Preparar esfregao (no espesso) com uma ou duas gotas de fezes (frescas ou concentradas por mtodo de MIFC) Deixar secar a temperatura de 60C Fixar com lcool metlico por 30 seg (secar temperatura ambiente) Corar com corante de Kinyoun por um minuto

Diagnstico
Lavar com gua destilada Soluo lcool cido (cido

sulfrico)por dois minutos Lavar com gua destilada Corar o fundo com soluo de verde de malaquita a 3% por dois minutos Lavar com gua destilada Deixar o esfregao secar e montar com resina sinttica Examinar em objetiva de imerso

Diagnstico
Mtodo de Henriksen e Pohlenz
Esfregao permanente corado indicado para pequisa de

coccidioses intesinais Utilizado para verificao da morfologia Pesquisa de organismos omitidos na visualizao de exame a fresco Arquivo

Diagnstico
Mtodo de Henriksen e Pohlenz Preparar um esfregao delgado com parte do sedimento obtido aps centrifugao. Deixar secar a temperatura ambiente. Fixar com lcool metlico por 5 minutos. Deixar secar a temperatura ambiente. Corar com o corante de Kinyoun (a frio), durante uma hora. Lavar em gua corrente.

Diagnstico
Diferenciar com soluo aquosa de cido sulfrico a 2%

(30 segundos a um minuto) at que no saia mais corante da lmina. Lavar em gua corrente. Corar o fundo com soluo de verde malaquita a 5%, por 8 minutos. Lavar em gua corrente e secar. Examinar com objetiva de imerso.

Diagnstico
Ziehl-Neelsen ( quente)
Aquecimento da fucsina fenicada usada na colorao Preparar a amostra com fezes frescas ou preservadas Deixar secar a temperatura ambienteou pelo aquecimento Corar com fucsina-fenicada aquecendo a lmina at a emisso de

vapores por cinco minutos Escorrer o corante e lavar com gua corrente Diferenciar com sol. aquosa de cido sulfrico a 5% por 30 segundos

Diagnstico
Lavar com gua corrente. Corar o fundo com soluo de azul de metileno a 0,3%

por um minuto Lavar com gua corrente e secar Montar resina sinttica.

Diagnstico
Mtodo da safranina
Oocistos corados de vermelho alaranjado com fundo

azul ou verde. Colorao uniforme para Cyclospora cayetanensis

Diagnstico
Preparar um esfregao delgado com o material obtido por

concentrao (MIFC) Secar a temperatura ambiente Mergular as laminas em soluo aquosa de safranina a 1% a aquecer no forno de microondas em potencia alta por 30 Lavar com gua corrente por 30 Mergulhar a lmina em sol aquosa de verde de malaquita ou azul de metileno1% por 1. Lavar em gua corrente por 30. Montar em resina sinttica

Referncia bibliogrfica
DE CARLI, Geraldo Attlio. Parasitologia Clnica.2.Ed.So

Paulo: Ed. Atheneu, 2207. 906p NEVES, David Pereira. Parasitologia humana. 11.Ed.So Paulo: Editora Atheneu, 2005. 494p. REY, Luis. Bases da Parasitologia Mdica. 3.Ed.Rio de Janeiro: Guanabara Koogan.2010.391p. PEREIRA, J. T.; SOCCOL, V. T.; COSTA, A. O.; CASTRO, E. A.; OSAKI, S. C.; PAULINO, R. C..Cryptosporidium spp.: para controlar necessrio conhecer. Departamento de Patologia
Bsica Universidade Federal do Paran. Revista Sade e Ambiente / Health and Environment Journal, v. 10, n. 2, dez. 09

www.dpd.cdc.gov www.coccidia.icb.usp.br http://pathology5.pathology.jhmi.edu/micro/v18n09.htm