Anda di halaman 1dari 14

Laporan Praktikum Sanitasi an Higiene

Hari/Tanggal: Kamis, 22 November 2013 P! "osen : #$# Nur%itri, "&& : 'rr Lukie T, STP : Nen( 'ar(ani, STP : 'a e )a(atri, STP &sisten : *i+k( &b ila,, &$' $

UJI KAPASITAS DISINFEKTAN/ANTISEPTIK DAN UJI DAYA BAKTERIOSTATIK SELEKTIF LARUTAN KRISTAL VIOLET

Kelompok -/ &P1 .nten Nibras / 3aisal 4usu5 &nan a Nurul &gustianingsi, Sitra 6ulan ari /30112012 /30112031 /30112102 /30112011

SUPERVISOR JAMINAN MUTU PANGAN PROGRAM DIPLOMA INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2013 BAB I

PENDAHULUAN
1.1 Tujua Pa a praktikum u!i kapasitas apaka, suatu isin5ektan / antiseptik ini bertu!uan untuk apat igunakan tanpa ke,ilangan

isin5ektan masi, tetap

e5ekti5itasn(a$ Selain itu bertu!uan untuk mengeta,ui a(a bakteriostatik selekti5 larutan kristal violet ter,a ap bakteri$

BAB II METODOLOGI
2.1 A!a" #a Ba$a A!a" 7 7 7 7 7 7 7 #a%an petri steril Tabung 9unsen Hot plate Tips pipet Pipet volumetrik 0rlenme(er Uj% &a'a(%"a( 28 bua, 20 bua, 8 bua, 1 bua, 1 kotak 1 selongsong 8 bua, Uj% #a)a *a&"+,%-("a"%& 28 bua, 8 bua, 8 bua, 1 bua, 1 kotak 1 selongsong 8 bua,

Ba$a 7 7 7 7 7 7 7 7 7 &:ua est Larutan kristal violet Suspensi Staphylococcus aureus Suspensi Escherichia coli Larutan pengen;er 'e ia N& 'e ia N9 3ormal e,i 2< .o ium 2<

7 7

6ipol 2< So klin 2<

Kebutu,an N& untuk u!i kapasitas isin5ektan/antiseptik 7 Total volume N& = 1 > 8 > 11 = ?00ml @ 10ml A;a anganB 7 )ram N& = 28g/ 1000ml > ?10ml = 18,2 g 7 Col$ &:ua es = ?31,8 ml Kebutu,an N9 kapasitas isin5ektan/antiseptik 7 Total volume N9 =1>8>D = 3?0ml @ 20ml A;a anganB 7 )ram N9 = 21g/1000ml > 200ml = 10 g 7 Col$ &:ua es = 200ml710 g = 3D0 ml 2.2 P,-(+#u, &+,ja 1. Uj% &a'a(%"a( #%(% .+&"a /a "%(+'"%& = ?10ml718,2 g

K- ",-! 0,1ml kultur E.coli / S.aureus Dml Lar5is


& &

Ma(% /01a(% / &+!-1'-& 1ml N9 2ml 1ml kultur ari 9 E # 1ml kultur ari 9 E " #
P

"

9 1ml ?0F 0,1ml 1ml

1ml 12 ml "isin5ektan 1ml Stl, 20F

1ml 20F

.nkubasi T= 300#, 2 ,ari &mati A Hitung B

N& N9

.nkubasi T= 300#, 2 ,ari &mati A Hitung B 2. Uj% #a)a *a&"+,%-("a"%& (+!+&"%. !a,u"a &,%("a! 2%-!+"

Media NA

10-3

10-4

10-5

Biarkan dingin

)ristal *iolet 0.1 +

9 l

Suspensi E.coli atau S.aureus Lakukan goresan langsung

!nku"asi #$3%oc t$ & 'ari A ati secara kualitati(

BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN


1$ K- ",-! '+ /a1a"a *a&"+,% Staphylococcus aureus #a Escherichia coli Tabel 3$ Hasil pengamatan kontrol bakteri S$aureus an 0$;olli P+ /a1a"a S. au,+u( E. 3-!!% u!i a(a bakteriostatik 4444 4444 1 ml 0$1 ml 1 ml 0$1 ml u!i kapasitas isin5ektan T9G" 181 8 18 Keterangan : @ Pertumbu,an se ikit @@ Pertumbu,an agak ban(ak/agak keru, @@@ Pertumbu,an ban(ak/keru, @@@@ Pertumbu,an sangat ban(ak / sangat keru, 2. Uj% #a)a *a&"+,%-("a"%& Tabel 2$ Hasil pengamatan u!i a(a bakteriostatik S. au,+u( E. 3-!!% 1003 1005 1006 1003 1005 @ @@ @@@ @ @@ @ @@ @@@ @ @@ @ @@ @@@ @ @@ @ @@ @@@ @ @@ @ @@ @@@ @ @@@ 7 @@ @@@ @@ @@ 7 @@ @@@ 7 @@ @ @@ @@@ @ @@

K+!-1'-& 1 2 3 2 1 ? 8

1006 @@@ @@@ @@@ @@@ @@ @@@ @@@ @@@

3. Uj% Ka'a(%"a( D%(% .+&"a / a "%(+'"%& Tabel 3$ Hasil pengamatan u!i kapasitas isin5ektan M+#%a NA M+#%a NB K+!-1'-& 07 207 507 807 07 207 507 1 12 1? D 23 @@@ @@ @@ 3ormal e,i 2 < @ 2 213 28 222 212 @@@ @@ @@@ 3ormal e,i 2 < @ 3 123 222 1 1 @@@ @@ @ .o ium 2< @ @ 2 1D0 0 1 220 @@@ @@ @@ .o ium 2< @ 1 123? ?-? -32 3D8 @@ @@ @@@

807 @@@ @@@ @@ @@ @@@

6ipol 2< ? 6ipol 2< So klin 8 So klin

1100 12 22 208 1D2 12

22110 ?38

221 1D? 80D

@@@ @@@ @ @@@ @

@@ @@ @ @@

@ @@@ @ @@ @@@

@ @@ @ @

3.2 P+1*a$a(a &ntimikroba a ala, suatu sen(a%a kimia k,as (ang konsentrasi ren a, mampu meng,ambat proses penting antimikroba a ala, sen(a%a kimia atau biologis (ang 9erbagai 5aktor (ang mempengaru,i peng,ambatan i,asilkan ole,

organisme ,i up termasuk struktur analogin(a (ang ibuat se;ara sintetik alam alam ke,i upansatu apat meng,ambat mikroorganisme spesies atau lebi, mikroorganisme ASis%an ono 1DD1 alam Hakim /B$ Sen(a%a pertumbu,an an aktivitasmikroba APel;+ar an #,an 1D8? alam Hakim /B$ men;akup kepa atan populasi mikroorganisme, kepekaan ter,a ap ba,an antimikrobial, volume ba,an (ang kan ungan ba,an isterilkan, laman(a ba,an antimikrobial iaplikasikan pa a mikroorganisme, konsentrasi ba,an antimikroba, su,u, an organik$ Protein akan mengurangi a(a ker!a esin5ektan se angkan panas memper;epat a(a ker!an(a$ 9er asarkan si5atn(a ba,an kimia (ang mematikan pertumbu,an isebut bakterisi al, se angkan ba,an kimia (ang meng,ambat pertumbu,an bakteri isebut bakteriostatik ALa( 1DD2 alam Hakim /B$ 9a,an antimikrobial apat bersi5at bakteriotstatik pa a konsentrasi ren a,, namun bersi5at baktersi al pa a konstetrasi tinggi$ Hat per%arna tertentu untuk pe%arnaan bakteri mempun(ai i,ambat atau a(a bakteriostatis$ "a(a ker!a ini biasan(a selekti5 ter,a ap bakteri gram positi5, %alaupun beberapa k,amir an !amur tela, imatikan, bergantung pa a konsentrasi +at pe%arna tersebut$ engan protein atau mengganggu "iperkirakan +at pe%arna itu berkombinasi mekanisme repro uksi sel$

3.2.1 Uj% #a)a *a&"+,%-("a"%& (+!+&"%. !a,u"a K,%("a! 2%-!+" Pa a prakaktikum u!i a(a bakteriostatik goresan langsung terli,at ba,%a me ia (ang menggunakan kristal violet 1073 terli,at pertumbu,an bakteri sangat se ikit$ Pa a kristal violet tingkat pengen;eran 1072 terli,at pertumbu,an bakteri agak ban(ak, se angkan kristal violet tingkat pengen;eran 1071 pertumbu,an bakteri sangat ban(ak$ Koloni (ang terbentuk pa a me ia N& engan Kristal violet berukuran ke;il$ 9erbe a engan pembiakan bakteri pa a me ia N& (ang umumn(a berukuran agak besar an men(ebar$ Hal ini ikarenakan si5at asar Kristal violet sebagai bakteriostatik (aitu peng,ambat pertumbu,an bakteri tanpa mematikann(a$ Kristal violet merupakan ;ampuran pe%arna pararosaniline alko,ol$ Pe%arna ini memiliki kelarutan (ang tinggi ter,a ap alko,ol se angkan pa a air keluratann(a sangat ren a,$ Kristal violet sering igunakan sebagai pe%arnaan gram an memberikan %arna biru ungu ter,a ap bakteri gram positi5$ 9er asarkan ,asil pengamatan kristal violet lebi, mu a, meng,ambat Escherichia coli Abakteri gram negati5B iban ingkan bakteri Staphylococcus aureus Agram positi5B$ Hal ini ikarenakan kan ungan in ing sel bakteri gram negati5 memilik lapisan pepti oglikan (ang relati5 tipis an memiliki pori7pori (ang lebi, lebar, se,ingga Kristal violet lebi, mu a, meng,ambat Escherichia coli. Se angkan in ing sel bakteri gram positi5 memiliki lapisan pepti oglikan relati5 tebal karena ikelilingi lapisan teichoic acid an pa a beberapa spesies mempun(ai lapisan polisakari a$ Namun, bakteri gram positi5 memiliki struktur (ang lebi, se er,ana iban ingkan gram negati5 relati5 (ang lebi, komplek$ 'ekanisme ker!a kristal violet sebagai bakteriostatik a ala, engan merusak in ing sel mikroba an meng,ambat sintesis en+im atau inaktivasi en+im$ an kon isi Se,ingga men(ebabkan ,ilangn(a viabilitas$ "in ing sel bakteri menentukan bentuk karakteristik, apabila ter!a i peruba,an tekanan osmotik lingkungan lainn(a maka sel bakteri akan mengalami lisis$ Gmumn(a sel mikroba alam memeli,ara kelangsungan ,i up perlu mensintesis protein (ang berlangsung i alam ribosom beker!a sama engan m*N& an t*N&$ 9a,an antimikroba seperti bakteriostatik mengganggu sintesis

protein an asam nukleat mikroba se,ingga akan meng,ambat pertumbu,an sel mikroba$ &sam nukleat merupakan bagian (ang sangat vital bagi perkembangbiakan sel$ Pertumbu,an sel keban(akan tergantung pa a sintesis "N& se angkan *N& iperlukan untuk transkripsi an menentukan in5ormasi sintesis protein an en+im$ 'aka ari itu Kristal violet sebagai bakteriostatik meng,ambat pertumbu,an bakteri engan merusak in ing sel terutama pa a bagian protein (ang mengan ung "N& an *N& untuk mengganggu sistemn(a$ 3.2.2 Uj% &a'a(%"a( #%(% .+&"a / a "%(+'"%& G!i kapasitas isin5ektan merupakan sala, satu meto e u!i (ang mengukur seberapa besar e5ekti5itas suatu ba,an isin5ektan sebagai bakteriostatik Te !a "esin5ektan bakteri an i e5inisikan sebagai ba,an kimia atau pengaru, 5isika (ang virus, apat !uga untuk membunu, atau menurunkan !umla, an apat igunakan untuk men;ega, ter!a in(a in5eksi atau pen;emaran !asa renik seperti mikroorganisme atau kuman pen(akit lainn(a$'isaln(a i ruma, sakit, etanol an etergen kation ipakai untuk ekontaminasi lantai, me!a, bangku in ing Se angkan antiseptik i e5inisikan sebagai ba,an kimia (ang

meng,ambat atau membunu, pertumbu,an !asa ASunatmo Te !a .,2012B$ Tetapi pa a ken(ataann(a ti ak semua ba,an ikenal ua ;ara, ;ara 5isik ApemanasanB

renik seperti bakteri, !amur an obat luka$ apat ber5ungsi

anlain7lain pa a !aringan ,i up$ 'isaln(a untuk ;u;i tangan esin5ektan

sebagai ba,an alam proses sterilisasi$ "alam proses

esin5eksi sebenarn(a

an ;ara kimia Apenamba,an ba,an

kimiaB$ 9an(ak !enis ba,an kimia (ang apat ber5ungsi sebagai esin5ektan, tetapi umumn(a ikelompokkan ke alam golongan al e,i atau golongan pere uksi, (aitu ba,an kimia (ang mengan ung gugus 7#IHJ golongan alko,ol, (aitu sen(a%a kimia (ang mengan ung gugus 7IHJ golongan ,alogen atau sen(a%a ter,alogenasi, (aitu sen(a%a kimia golongan ,alogen atau (ang mengan ung gugus 7KJ golongan 5enol an 5enol ter,alogenasi, golongan garam amonium kuarterner, golongan pengoksi asi, an golongan biguani a$ Pa a u!i ini, igunakan me ia N& an N9 untuk mengeta,ui peng,ambatan pertumbu,an bakteri$ Suspensi itamba,kan pa a interval %aktu 0, 20, 20, an

?0 menit serta sampel pa a

menit ke70

igunakan sebagai kontrol$ Sampel

iinkubasi pa a su,u 30L# selama 2 ,ari$ Kemu ian i,itung se;ara kuantitati5 !umla, koloni pa a ;a%an petri an iamati tingkat kekeru,an pa a tabung reaksi$ Suspensi iberi perlakuan engan isin5ektan iantaran(a: 5ormal e,i 2 <, io in 2 <, komersial 2<, komersial 0,2<$ /umla, koloni pa a u!i kontrol engan suspensi E.coli 1 ml lebi, se ikit aripa a 0,1 ml$ Hal itu ter!a i karena praktikan ti ak memasukkan suspense sesuai engan ketentuan atau bakteri (ang tela, mati akibat kea aan panas pa a lingkungan$ 9er asarkan u!i kuantitati5 engan me ia N&, umumn(a ter!a i penurunan !umla, koloni antara menit ke70 engan menit ke720, akibat ari penamba,an isin5ektan pa a menit ke720$ Namun per;obaan pa a kelompok - ti ak sesuai engan literatur, ,al itu ter!a i karena kesala,an prose ur (ang iterapkan$ Setela, menit ke720 ,ingga menit ke7?0 umumn(a !umla, koloni akan bertamba, karena penamba,an suspensi setiap 20 menit an kemampuan isin5ektan (ang semakin berkurang$ Hasil u!i ter,a ap berbagai !enis isin5ektan menun!ukkan kemampuan 5ormal e,i 2< melebi,i isin5ektan lain$ Hal itu karena kemampuann(a alam mere uksi !umla, bakteri an memperta,ankan kea aan %alaupun itamba,kan suspensi pa a interval %aktu tertentu$ 9er asarkan u!i kualitati5 engan me ia N9, umumn(a ter!a i penurunan

tingkat kekeru,an pa a interval 20 menit pertama, karena penamba,an an a(a ker!a isin5ektan$ Namun tingkat kekeru,an pa a sampel kelompok 1 sama antara menit ke70 an menit ke720, ,al itu iakibatkan karena pen(iapan isin5ektan (ang ti ak sesuai engan prose ur$ Sama ,aln(a engan u!i kuantitati5, ter!a i kenaikan tingkat kekeru,an mulai ari menit ke720 ,ingga menit ke7?0$ &kan tetapi, ,asil kelompok - ti ak sesuai engan literatur$ Hal itu ter!a i karena penamba,an suspensi (ang ti ak sesuai engan prose ur$

BAB IV PENUTUP
5.1 K+(%1'u!a 9er asarkan u!i a(a bakteriostatik apat isimpulkan ba,%a apat engan mu a, meng,ambat pertumbu,an bakteri gram Escherichia coli iban ingkan bakteri gram positi5$ Selain itu pengen;eran ren a, atau konsentrasi Kristal violet tinggi si5at tersebut akan beker!a maksimal$ Kristal violet negati5 (aitu pa a tingkat bakteriostatik

"isin5ektan apat meng,ambat membunu, atau menurunkan !umla, mikroorganisme$ +at akti5 (ang a a alam isin5ektan sangat menentukan e5ektivitas an 5ungsi serta target mikroorganime (ang akan imatikan$ 5.2 Sa,a Sebaikn(a praktikan apat men!aga setiap ker!a (ang ilakukan se;ara aseptik agar ,asil (ang i apatkan semakin akurat an sesuai engan literature$

DAFTAR PUSTAKA Hakim, /$ 2008$ Tana, "an Sabun Tana, Sebagai 9a,an &ntimikroba Ter,a ap &ir Liur &n!ing$ 9ogor : 3akultas Ke okteran He%an, .nstitut Pertanian 9ogor$ "iakses melalui : ,ttp://repositor($ipb$a;$i /bitstream/,an le/12321?-8D/ 201-/&08!,a$p 5$ &nonim$ 2010$ Laporan praktikum u!i sensiti5itas$ ,ttp://%%%$,asilbu a(a$;om M21 November 2013N &nonim$ 2013$ #r(stal Ciolet$ "iakses melalui :

,ttp://en$%ikipe ia$org/%iki/)entianOviolet$ M22 November 2013N Sunatmo Te !a .mas$ 200D$ 'ikrobiologi 0sensial 1$ /akarta A."B: Penerbit &r ( &gen;(

LAMPIRAN
1$ G!i a(a bakteriostatik selekti5 larutan Kristal violet ter,a ap bakteri Staphylococcus aureus Tingkat pengen;eran 1073 Escherichia coli Tingkat pengen;eran 1073

Tingkat pengen;eran 1072

Tingkat pengen;eran 1072

Tingkat pengen;eran 1071

Tingkat pengen;eran 1071

2$ G!i kapasitas isin5ektan / antiseptik "isin5ektan 0 menit "isin5ektan 20 menit

"isin5ektan 20 menit

"isin5ektan ?0 menit

"isin5ektan engan me ia N9