QO423

Introdução a Espectrometria de
Massas
Prof. Fabio Gozzo
 Introdução
• Espectrometria de massas (MS, do inglês Mass
Spectrometry) é o estudo da matéria através
da formação de íons em fase gasosa que são
caracterizados pela relação m/z (relação
massa/carga).
Aplicabilidade
Usos da MS
 Instrumentação
Introdução
Fonte de Analizador
de Detector
Ionização de m/z
amostras
Vácuo

Direto EI B Multiplicador e-
GC CI Q MCP
HPLC APCI Tof
CE APPI IT
ESI LIT
MALDI ICR
…. Orbitrap
…
 Qual é a massa de um átomo ?

M=5

• 1H (1p, 1e) = 1.0079

• 2H (1p, 1n, 1e) = 2.0141
• 4He (2p, 2n, 2e) = 4.0026
4He/ 2H = 1.98 !!
Componentes do átomo

Como o núcleo
não explode ?!!
4 Forças Universais

E = MC2
 Fusão de um núcleo

E
Repulsão
Eletromagnética

+ +
0
x

Atração
Força Nuclear
Quando dois prótons se funde …
Qual é a massa de um átomo ?

Massa

Soma das massas das partículas

Energia liberada na formação do átomo (núcleo)

E = MC2
 Defeito de Massa
• Nenhum átomo (c/ excessão do 12C) tem
massa inteira
• Diferença é chamada de Defeito de Massa
Defeito de Massa
Energia de Ligação do Núcleo e
Defeito de Massa
 Unidade de Massa Atômica (u)
• u = 1.6605 x 10-27 kg ( 1/12 12C)
• Proton: 1.6726×10-27 kg (1.0073 u)
• Nêutron:1.6749 x 10-27 kg (1.0086 u)
• Elétron: 9.1093 × 10-31 kg (0.0005u)
• 1 Da = 1 u
 Tipos de Massas Atômicas
• Nominal:
– Massa aredondada em 1 u:
• H = 1, C = 12, O= 16
• Média
– Massa média dos isótopos:
• H = 1.0079, C = 12.0107, N = 14.0067
• Monoisotópica:
– Massa do isótopo mais abundante:
• H = 1.0078, C = 12.0000, N = 14.0030
 Massas Moleculares Exatas
• Consiste na soma das massas atômicas
monoisotópicas
• É única para cada fórmula:
– N2 = 28.0061
– C2H4 = 28.0313
– CO = 27.9949
– B2H6 = 28.0656
 Isótopos Naturais
• Substâncias Orgânicas:
• 1H (99.98%), 2H (0.01%)
• 12C (98.93%), 13C (1.07%)
• 14N (99.63%), 15N (0.37%)
• 16O (99.80%), 18O (0.20%)
• 32S (94.93%), 34S (4.29%)
• 35Cl (75.78%), 37Cl (24.22%)
• 79Br (50.69%), 81Br (49.31%)
 MS e Padrão Isotópico
• MS mede isótopos individuais e não massas
médias
• Substâncias apresentam várias massas
dependendo da composição isotópica
• Composição isotópica varia de acordo com a
composição química
 O Espectro de Massas

Intensidade relativa ao
sinal mais intenso (100%)
Sinal mais intenso:
Pico base

Relação m/z de cada íon

 Padrão Isotópico: Efeito do C
M M
M

C10H22 C20H42
CH4
M+1
M+1 M+1
M+2
17 284

C50H102 C100H202 C150H302

706
 Padrão Isotópico: Efeito do C

C20H42 C20H28 C20H28N2O4

284 270

No de carbonos ~ I(M+1)-10%

Ex: Intensidade do M+1 = 22  No de carbonos ~ 22-10% = 20

Aumento do Número de C
 OeN
• Oxigênio e Nitrogênio tem abundância bem
menor que C e H
• Oxigênio afeta a intensidade do M+2 (16O x
18O)

• Nitrogênio pode afetar M+1 em moléculas

ricas em N
 Efeito dos Halogênios
• 37Cl é 33% do 35Cl
• 81Br é 50% do 79Br
• F e I não têm isótopos naturais

CH3Cl CH3Br
 Cl e Br
C15H31Cl
C20H41Br

C15H30Cl2
C20H40Br2
 Regra do Nitrogênio
• Uma molécula orgânica neutra só terá massa
ímpar se ela tiver número ímpar de átomos de
nitrogênio:

– C2H4O: 44
– CH3CONH2: 59
– C6H4(NH2)2: 108
– C10H22O: 158
 Instrumentação
Introdução
Fonte de Analizador
de Detector
Ionização de m/z
amostras
Vácuo

Direto EI B Multiplicador e-
GC CI Q MCP
HPLC APCI Tof
CE APPI IT
ESI LIT
MALDI ICR
…. Orbitrap
…
 Ionização por Elétrons (EI)

• Moléculas neutras, na fase gasosa (dessorção térmica), a

uma pressão típica de 10-5 torr, são bombardeadas por
elétrons, com energia típica de 70 eV. Ocorre
principalmente a retirada de um elétron formando íons
M+.
• M + e- (70 eV) M+. (~ 5-10 eV) + 2e- (~60- 65 eV)
 EI: Características
• Processo unimolecular. Os íons formados são rapidamente extraídos da
fonte de ionização pelo eletrodo de repulsão ("repeller“).

• Íons moleculares são formados com excesso de energia interna e se

fragmentam total ou parcialmente.

• EI é bastante popular: produz tanto o íon molecular (massa) como

também fragmentos (estrutura); espectros reprodutíveis; bibliotecas de
espectros de EI a 70 eV; estável; fácil de operar; alta sensibilidade.

• Aplica-se a moléculas de média e baixa polaridade e baixo peso molecular

(~500u), voláteis e termo-estáveis: moléculas orgânicas relativamente
pequenas.

• Quando o íon molecular não é observado (devido a dissociação completa),

existe um processo dissociativo exotérmico e portanto M+. é uma espécie
instável.

• EI ocorre em ~10-16 s. Uma em cada 103-105 moléculas que entram na

fonte de EI é ionizada.
Energia dos Ions
Espectro de Massas
Energia dos Elétrons
 Fragmentação
105
100

77
O

50

51

120

43

39
27 74
63 91
45 85 98 102
0
20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130
(mainlib) Acetophenone
 Fragmentação
124
100

OH
288

246
50 O

147
91
41 79
55 105 203
67
29
133 165 228

187 213 273

173 255
0
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300
(mainlib) Androst-4-en-3-one, 17-hydroxy-, (17á)-

Testosterona
 Isômeros 43
43 100
100

41

50 29 57 50
71

85

57

29
100
15 39
53 71 100
2 62 65 85 15 37 50 63 77
0 0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
(mainlib) Heptane (mainlib) Hexane, 2-methyl-

43 57
100 100

43

41
71
50 50

85
29

27
29 41 55 39

39 15
57 69
15 37 50 53 62 65 84 100 2 12 63 77 81 99
0 0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
(mainlib) Pentane, 3-ethyl- (mainlib) Butane, 2,2,3-trimethyl-
 Fragmentação
• Quatro mecanismos básicos:
– Dissociação sigma
– Clivagem alfa
– Clivagem indutiva
– Fragmentação remota
• Possibilidades de rearranjo
– Rearranjo de McLafferty
 Dissociação Sigma
57
100

43

71
50

85

41

29

99 113 170
127
14 141
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180
(mainlib) Dodecane
 Dissociação Sigma
57
100

50

41
29
71
27 85
32 39 69 82 99 112 155
0
20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180
(mainlib) Decane, 2,2-dimethyl-
 Clivagem Alfa
43
100

58

50
O

15

42
27 39
14 29 41 44 59
16 18 31 52 55 57
0
10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70
(mainlib) Acetone
100
43
Clivagem Alfa 100
57

29

O O
50 50

72
86
29
27
27 57
15 28 42 44
26 39 71 73 15 18 41 50 62 65 68 71 84
0 0
10 20 30 40 50 60 70 80 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
(mainlib) 2-Butanone (mainlib) 3-Pentanone

43
100

50

86
41

27
71
28 31 39 42 87
53 56 59 67 70
0
20 30 40 50 60 70 80 90 100
(mainlib) 2-Butanone, 3-methyl-
100
Rearranjo de McLafferty
43
43
100

50
58
50

86

27 41 58 71 29 41
15 39
17 34 49 52 60 63 67 73 27 100
39 71 85
0 15
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 18 31 37 50 55 67 83 91
0
(mainlib) 2-Pentanone
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
(mainlib) 2-Hexanone
100
43
Rearranjo de McLafferty
58

50

41 71

39
27
55 85 128
53 113
15 77 81 95 99
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140
(mainlib) 2-Octanone
57
100

29

50
27

85
41
72

114
39 43

15 31
19 45 63 78 91 98
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130
(mainlib) 3-Heptanone
 Compostos Aromáticos
78
100

50

77
51

39
38 63 74 79
26 49
15 40 53
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90
(mainlib) Benzene
 Compostos Aromáticos
91
100

92

50

39 65
51 63
38 41 89
27 45 52 55 64 74 77 83 86 94
0
20 30 40 50 60 70 80 90 100
(mainlib) Toluene
100
Compostos Aromáticos 91

50

106

51 65 77
39 63
27 74 89
15 86
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120
(mainlib) Ethylbenzene 91
100

50

120

65 78
39 51 105
15 27 57 63 85 89 115
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130
(mainlib) Benzene, propyl-
 Compostos Aromáticos 91
100

50

134

65
39 105
27 51 78
43 63 89 115
15 32 57 69 74 128
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150
(mainlib) Benzene, butyl- 91
100

50

148

65 105
29 41
78
51 57
15 43 63 89 119 133
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160
(mainlib) Benzene, pentyl-