Practica N 4 Identificacin Cualitativa De Aminocidos Marco Terico Por la estructura peptdica y la presencia de determinados grupos (grupos R), las

protenas pueden reaccionar con una variedad de agentes originndose productos coloreados. Estas reacciones son la base para la determinacin cuantitativa y cualitativa de las protenas. Por presentarse variaciones en la composicin de los aminocidos de las diferentes protenas, se manifiestan diferentes colores y grados de intensidad para una misma reaccin, ntimamente relacionado con la naturaleza de la protena analizada. Reaccin de Nihidrina Reacciona con todos los -aminocidos cuyo pH se encuentra entre 4 y 8, dando una coloracin que vara de azula a violeta intenso. Esta prueba es positiva tanto para protenas como para aminocidos. En aquellos casos donde no da positiva la prueba de Biuret y da positiva la de nihidrina, indica que no hay protenas, pero si hay aminocidos libres. Reaccin Xantoproteica Los aminocidos que contienen un ncleo aromtico forman nitroderivados de color amarillo cuando se calientan con cido ntrico concentrado. Las sales de estos derivados son de color naranja intenso en medio alcalino. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un lcali, se torna de color amarillo oscuro. La fenilalanina, tirosina y en cierto grado el triptfano, as como todas las protenas que los contienen, dan positiva la prueba. Reaccin de Millon Reaccin especfica para el grupo fenlico, por lo tanto, cualquier compuesto fenlico que no est sustituido en la posicin 3,5 como la Tirosina, producen resultados positivos en esta reaccin , de manera que solo las protenas que tienen este aminocido ofrecen resultados positivos. En esta prueba los compuestos mercricos en medio fuertemente acido se condensan con el grupo fenlico formando un compuesto de color rojo ladrillo o rojizo. La prueba no es satisfactoria para soluciones que contienen sales inorgnicas en gran cantidad, ya que el mercurio del reactivo de Millon es precipitado y se vuelve negativo. Reaccin de Hopkins-Cole Esta reaccin es especfica para el aminocido Triptfano. La condensacin del anillo indlico del Triptfano con el aldehdo presente en el reactivo de Hopkins-Cole produce un color violeta. Por lo tanto, las protenas que lo contienen producirn un color violeta al combinarse con el reactivo de Hopkins-Cole. Reacciones para Cistena y Cistina. Cuando los aminocidos y las protenas que contienen grupos tilicos se calientan en medio fuertemente alcalino, el azufre presente reacciona para formar sulfuros. Este sulfuro puede detectarse por la formacin de un precipitado negro de sulfuro de plomo por adicin de acetato

de plomo. Los grupos tioles tambin reaccionan con el nitroprusiato de sodio en presencia de exceso de amoniaco para dar un complejo de color rojo. Prueba para Arginina Este aminocido contiene un grupo guanidina en la cadena lateral, este grupo reacciona con el reactivo de Sakaguchi (-naftol/agua de bromo) en medio alcalino para dar un complejo de color rojo. Prueba de Biuret Es aquel que detecta la presencia de protenas, pptidos cortos y otros compuestos con dos o ms enlaces peptdicos en sustancias de composicin desconocida. El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de protenas, y vira a rosa cuando se combina con polipptidos de cadena corta. Frijol El valor nutritivo del frjol, se ha considerado como una de las principales fuentes protenicas cada 100g de frijol contiene 21.8g de protenas, tales como metionina, faseolina y lisina. El contenido de protena del frjol vara de acuerdo a la variedad; en general, es de un 24%, superando al maz y a la papa en cantidad y calidad de la protena, encontrndose en los cotiledones la mayora de sus componentes qumicos, tales como los carbohidratos, protenas, grasas, vitaminas y minerales. El frjol tiene una gran cantidad de protenas, por lo que puede reemplazar a la carne, con un costo muy inferior.

Resultados Prueba Bioqumica Sustancia Ensayada Patrn Positivo (Glicina) Patrn Negativo (Agua Destilada) Cotiledones Extracto Resultado + + +

Nihidrina

+ (Tirosina) Patrn Negativo (Agua Destilada) Cotiledones Extracto + +

Xantoproteica

Millon

Patrn Positivo (Tirosina) Patrn Negativo (Agua Destilada) Cotiledones Extracto

+ + +

Hopkins-Cole

Patrn Positivo (Triptfano) Patrn Negativo (Agua Destilada) Cotiledones Extracto

+ + +

Nitroprusiato

Patrn Positivo (Cistena) Patrn Negativo (Agua Destilada) Cotiledones Extracto

+ + -

Referencias http://www.esmas.com/salud/home/recomendamos/750687.html http://bean.idaho.gov/spanish/nutrition.html http://www.biodiversidad.gob.mx/Biodiversitas/Articulos/biodiv89art2.pdf http://www.buenastareas.com/ensayos/Determinaci%C3%B3n-De-Aminoacidos-yProteinas/756691.html http://tuylaquimica.files.wordpress.com/2012/02/reactivos-y-proteinas.pdf