Bol. R. Soc. Esp. Hist. Nat. Sec. Biol.

, 107, 2013, 39-46

ISSN: 0366-3272

Bioacumulacin de arsnico en tejidos animales por consumo de aguas contaminadas experimentalmente*

Arsenic bioaccumulation in animal tissues after consumption of contaminated water experimentally
Amparo Herrera, Javier Pineda, y M. Teresa Antonio
Departamento Fisiologa (Fisiologa animal II). Facultad de Ciencias Biolgicas. Universidad Complutense de Madrid 28040 Madrid mantonio@bio.ucm.es

Recibido: 14-diciembre-2011. Aceptado: 17-enero-2013. Publicado online: 24-enero-2013. Palabras clave: Arsnico, Bioacumulacin, Gestacin, Lactancia, Cras, Antioxidantes, Laboratorio Keywords: Arsenic, Bioaccumulation, Gestation, Lactation, Pups, Antioxidant, Laboratory Resumen El consumo de aguas contaminadas con arsnico (As) produce la acumulacin de este en los tejidos, provocando daos en los organismos que se encuentran expuestos a l. El objetivo de nuestro trabajo es conocer qu cantidades de As pueden llegar a acumularse en los tejidos y cmo se distribuyen en el organismo tras el consumo directo de aguas contaminadas, o indirecto, a travs de la placenta y la leche materna; as como la influencia que la administracin de un suplemento vitamnico tendra sobre la bioacumulacin del compuesto. Para ello, tomamos dos grupos de ratas Wistar gestantes, cuya agua de bebida fue contaminada con arsenito sdico en una dosis de 50 ppm o con una mezcla de arsnico y el suplemento vitamnico (vitamina C, E y zinc). Al final de la lactancia, se extrajeron los rganos y se cuantific la cantidad de As acumulado utilizando un mtodo colorimtrico basado en el protocolo de Gutzeit (Merck). Segn los resultados obtenidos, la bioacumulacin de As es significativamente mayor en las madres; en cuanto a su distribucin, parece tener una clara preferencia por el bazo, frente a hgado, rin y cerebro. Por ltimo, el suplemento vitamnico administrado a las madres parece ser el responsable de una disminucin del 30% en la cantidad de As acumulado. Abstract Arsenic (As) is a metalloid widely distributed worldwide. This element appears in rocks of the Earths crust, where it passes to groundwater depending on changes in pH, oxygen concentration and temperature of the water percolating through the ground. The use of this water results in the accumulation of As in plant and animal tissues, entering in the food chain and causing damage to the organisms that are exposed to it. In humans, consumption of this water is associated with the appearance of certain types of cancer, cardiovascular and metabolic diseases and nervous system and reproductive function disorders. The aim of our study was to determine what amount of As may be accumulated in tissues after consumption of contaminated water directly, or indirectly through the placenta and breast milk, and investigate the influence that vitamin supplementation would have on the bioaccumulation of this element. For this purpose, we polluted the drinking water of pregnant Wistar rats with sodium arsenite at a dose of 50 mg / l during the period of gestation and lactation. The other group, in addition of the dose of arsenic, has been administered an antioxidant supplement consisting of vitamin C (2000 mg/l), vitamin E (500 mg/l) and zinc (20 mg/l). At the end of lactation (postnatal day 21), the organs were dissected: liver and spleen of mothers, and liver, spleen, kidney and brain of the pups. These organs were mineralized by dry digestion; they were maintained at 600650 C until were reduced to ashes. These ashes were resuspended in 10% sulfuric acid for the quantification of arsenic using a colorimetric method based on the Gutzeit protocol (Merck). According to the results obtained, about the distribution of arsenic in the body of the pups, we observed that the arsenic tends to accumulate preferentially in the spleen compared to the organs of the study (Fig. 3). This result could be explained on the basis of the capacity of this element to bind itself to red blood cells, and the spleen being the primary organ of clearance of the latter. * Presentado en la XIX Bienal RSEHN, UCLM, Toledo 2011. Bol. R. Soc. Esp. Hist. Nat. Sec. Biol., 107, 2013

40

A. Herrera, J. Pineda, M.T. Antonio

On another note, the bioaccumulation of As is significantly higher in mothers than in pups (Fig. 1), which shows only 10-20% of the total accumulated by their mothers; a possible explanation is that the pups have only received As through the placenta and during the 21 days of lactation excreted part of the arsenic accumulated. Finally, the antioxidants administered to mothers seems to be responsible for a 30% decrease in the amount of As accumulated in comparison to the mother who only received arsenic in drinking water (Fig. 2). This result suggests that the antioxidants we have administered have a barrier effect on the absorption of arsenic and they could facilitate its metabolism and excretion, thus reducing the levels of this toxic in the organism.

1. Introduccin
El arsnico (As) es un elemento metaloide perteneciente al grupo VA de la tabla peridica. Su rango de oxidacin abarca desde -3 hasta +5, lo que le permite combinarse con un gran nmero de elementos formando compuestos tanto orgnicos como inorgnicos (Sprando, 2007). Presenta una amplia distribucin en el medio, ya que se encuentra formando parte de la corteza terrestre en una proporcin estimada de 3,4 ppm, pudiendo aparecer en estado puro, o lo que es ms frecuente, en combinacin con ms de 150 minerales distintos, siendo el ms comn la arsenopirita (FeAsS) (Fowler et al., 2007). La mineralizacin de la roca y la actividad de algunos microorganismos provocan la solubilizacin del arsnico, por lo que su presencia en el agua a muy bajas concentraciones (menos de 1-2 g/l) es frecuente (Duker et al., 2005). Sin embargo, en algunas ocasiones, la concentracin de arsnico en las aguas puede incrementarse de forma significativa, como sucede en los acuferos de zonas ricas en mineral de azufre o en sedimentos de origen volcnico donde se han registrado concentraciones superiores a los 12 mg/l; muy por encima del lmite de los 10 g/l de As que establece la OMS como seguro para aguas de consumo humano (Who, 2011). Determinados cambios en las caractersticas fsico-qumicas del medio pueden favorecer la solubilizacin de este arsnico inmovilizado en las rocas (Fowler et al., 2007; Sharma & Sohn, 2009); condiciones reductoras, cambios en el pH, un aumento de la concentracin de carbonato o la actividad microbiana favorecen la disolucin de sales de arsnico como el arsenito sdico o el arseniato en las aguas (Sharma & Sohn, 2009). Las masas de agua ms afectadas por este fenmeno son los acuferos, donde se han notificado concentraciones de hasta 5 ppm de arsnico (Who, 2001). Adems de este aporte natural de arsnico al agua, encontramos un aporte de origen antropognico que ha desequilibrado y acelerado el ciclo biogeoqumico de este elemento (Roy & Saha, 2002). El uso de pesticidas y herbicidas elaborados a partir de compuestos de arsnico y, sobre todo la actividad minera, suponen un aporte extra de este mineral al suelo (Fowler et al., 2007), el cual ser lavado por las aguas de escorrenta alcanzando as lagos y cursos fluviales, o filtrado a travs de las capas del suelo hasta alcanzar los acuferos.
Bol. R. Soc. Esp. Hist. Nat. Sec. Biol., 107, 2013

El arsnico se distribuye por la superficie de todo el planeta, por lo que se citan casos de aguas contaminadas en numerosos lugares: Bangladesh, India, Taiwn, Vietnam, China, Argentina, Mxico, Chile, USA, etc. (Brinkel et al., 2009; Naraharisetti et al., 2009). La regin ms afectada del planeta es el delta del Ganges, entre Bangladesh y la zona oeste de Bengala donde se estima que ms del 50% de los pozos que abastecen a la poblacin se encuentran contaminados (Maiti & Chatterjee, 2000) y el nmero de personas que se abastece de ellos podra superar los 100 millones (Who, 1999). Si consideramos todos los territorios afectados del planeta, aproximadamente el 5% de la poblacin mundial consume agua con cantidades de arsnico superiores a las recomendadas por la OMS (Xu et al., 2008). El consumo de estas aguas produce la acumulacin de As en tejidos animales y vegetales, entrando as en la cadena trfica y provocando daos en los organismos que se encuentran expuestos a l. Estos daos varan mucho en funcin de la especie, el tiempo de exposicin al txico, su concentracin y la forma qumica en la que este se encuentre (Who, 2001). En poblaciones humanas, la principal va de exposicin es a travs del agua de bebida contaminada con especies de As, siendo las ms frecuentes arsenitos y arsenatos, resultando los primeros una de las formas ms txicas de este elemento (Fowler et al., 2007). El agua es considerada la principal fuente de intoxicacin, pero tambin se han producido numerosos envenenamientos por el consumo de alimentos, como peces y crustceos marinos y dulceacucolas, leche y carne procedentes de ganado criado en reas contaminadas, o cereales cultivados en estas mismas regiones (Smith et al., 2000; Castro & Mndez, 2008; Xi et al., 2010). El consumo durante perodos de tiempo prolongados de cantidades moderadas de arsnico, da lugar al desarrollo de un sndrome conocido como arsenicosis, patologa cuyos sntomas ms significativos son: alteraciones de la piel (hiperqueratosis), aparicin de diversos tipos de cncer, enfermedades cardiovasculares, diabetes, alteraciones del sistema nervioso y de la funcin reproductora (Vizcaya-Ruiz et al., 2009; Saha & Ghosh, 2009). Estos sntomas suelen aparecer tras el consumo de aguas con concentraciones de unos 0.05 mg/l, durante perodos de cinco a diez aos (Who, 1999). Este sndrome no se manifiesta de igual forma en todas las zonas afectadas aunque la

Bioacumulacin de arsnico en tejidos animales por aguas contaminadas

41

concentracin de arsnico del agua sea la misma, ya que la dieta parece jugar un importante papel en el desarrollo de la enfermedad (Smith et al., 2000); en el caso de la India, el recrudecimiento de la enfermedad se ha relacionado directamente con la carencia de vitaminas A y C (Aragons et al., 2001). El efecto positivo que parecen ejercer los antioxidantes como las vitaminas C, E y otros (Kadirvel et al., 2007), los ha convertido en uno de los tratamientos recomendados por la OMS para paliar el efecto de esta enfermedad en las reas ms afectadas como Bangladesh ya que pueden contrarrestar el principal mecanismo de accin del txico: la produccin de radicales libres en la clula generando en esta estrs oxidativo con el consiguiente dao a ADN, protenas, membranas y dems estructuras biolgicas (Smith et al., 2000). En muchos de los pases afectados, el ndice de natalidad es muy elevado y la rente per cpita muy baja, lo cual implica que son muchas las mujeres en estado de gestacin o lactancia que se encuentran expuestas a elevados niveles de arsnico cada da para las que se deben buscar soluciones econmicas y accesibles. El incremento del consumo de alimentos ricos en antioxidantes, como las frutas y verduras, podra ayudar a paliar los efectos de la exposicin al txico; por lo que un sencillo gesto como es el cambio en los hbitos alimenticios de las mujeres de la zona afectada podra servir para paliar sus sntomas y los de su descendencia. A pesar del problema existente, son escasos los estudios realizados para analizar qu cantidad de arsnico es absorbida por la madre y en qu proporcin pasa al individuo en desarrollo; as como el papel que juega la administracin de vitaminas, en la absorcin y acumulacin del txico. Por tanto, el objetivo del presente trabajo es ampliar la informacin existente acerca de qu cantidades de As pueden llegar a acumularse en determinados rganos tras el consumo directo de aguas contaminadas por parte de las madres, o indirecto, a travs de la placenta y la leche materna en el caso de las cras; as como la influencia que la administracin de un suplemento vitamnico podra tener sobre la acumulacin del metaloide.

dieta para hembras en periodo de cra suministrada por Panlab y agua, administrados ad libitum. Se seleccionaron hembras jvenes de 200250 g de peso para ser cruzadas con los machos; para determinar el primer da de gestacin se realiz un frotis vaginal para verificar la presencia de espermatozoides. En este momento (da 1 de gestacin), los animales fueron divididos en tres grupos a cada uno de los cuales se administr un tratamiento diferente disuelto en el agua de bebida: - Grupo 0: o control; no recibe ningn tratamiento. - Grupo 1: reciben una dosis de 50 mg/l (50 ppm) de arsnico en forma de arsenito sdico (Merck). - Grupo 2: reciben la misma dosis de arsnico que el grupo 1 combinada con una dosis de antioxidantes compuesta por 20 mg/l de Zn en forma de cloruro de cinc (Panreac) + 500 mg/l de vitamina E (Solgar) + 2 g/l de vitamina C (Redoxon). Las cantidades ingeridas por cada animal se calcularon segn la siguiente frmula:
dosis ingerida (mg(kgda) consumo agua (mlda)concentracin txico o vitamina (mg/l) Peso corporal (g)

El tratamiento se prolong a lo largo del perodo de gestacin (21 das) y lactancia (21 das). En el da 42, los animales fueron sacrificados y se extrajeron los siguientes rganos: hgado y bazo de las madres; e hgado, bazo, rin y cerebro de las cras, los cuales fueron congelados a -20C hasta su procesamiento.

2.2 Preparacin de las muestras

Se disgregaron unos 200 mg de tejido en un mortero junto con 0,5 ml de solucin de nitrato magnsico al 20% y 10 mg de xido de magnesio para evitar la evaporacin del arsnico acumulado en la muestra, y se dej secando en estufa a 60 C durante 2 horas. A continuacin, las muestras se mineralizaron por digestin seca en horno mufla, permaneciendo a 600 C durante 6 horas. Las cenizas obtenidas se resuspendieron con cido sulfrico al 10% para la cuantificacin del As contenido en las mismas.

2. Material y Mtodos
2.1 Animales
El estudio fue realizado en ratas Wistar (Rattus norvegicus B.) distribuidas por Harlan Interfauna Ibrica S.A. Los animales fueron atendidos por personal especializado conforme a las normas de la Gua para el Cuidado y el Uso de Animales de Laboratorio del National Institutes of Health; se mantuvieron en las instalaciones del CAI Animalario de la Facultad de Ciencias Biolgicas de la Universidad Complutense con ciclo de luz invertida y temperatura constante en torno a 21C,

2.3 Cuantificacin de arsnico

Se utiliz el kit comercial Merckoquant para la cuantificacin de arsnico (Merck). Se trata de un mtodo colorimtrico semicuantitativo. La tcnica, se basa en que el arsnico tri- o pentavalente (arsenitos y arseniatos), en presencia de cinc, se combinan con un cido fuerte formando hidruro de arsnico gas. La reaccin del gas con el bromuro de mercurio fijado en las tiras reactivas provoca la aparicin de coloracin amarillo-parda tanto ms
Bol. R. Soc. Esp. Hist. Nat. Sec. Biol., 107, 2013

42

A. Herrera, J. Pineda, M.T. Antonio

intensa cuanto mayor sea la cantidad de arsnico desprendido por la muestra. AsIII/V + Zn + HAAsH + HgBr

2.4 Anlisis de datos

Los datos fueron analizados con el paquete estadstico Statgraphics Centurion XV. Se realiz un anlisis de la varianza (ANOVA) para corroborar si las diferencias establecidas por los distintos factores (va de exposicin, tratamiento, rgano) eran o no significativas.

3. Resultados
Las dosis de cada uno de los tratamientos consumidos por las madres durante la gestacin y lactancia se muestran en la Tabla I.
Tabla I. Dosis media ingerida diariamente por las madres, durante la gestacin y la lactancia; los datos se expresan en mg /kg peso /da. Los datos se muestran como media desviacin estndar. Mean dose consumed daily by mothers during pregnancy and lactation (mg/kg body weight/ day). All values are expressed as mean SD. Dosis recibida Grupo 0 Grupo 1 As As Grupo 2 Zn Vitamina C Vitamina E Gestacin 4.41 0.92 5.18 1.16 2.07 0.46 207.21 46.28 51.80 11.57 Lactancia 11.05 3.51 11.53 3.59 4.61 1.43 461.32 143.45 115.33 35.86

Figura 1. Comparacin entre la cantidad de arsnico (expresada en g/g de tejido) acumulada por madres y cras en bazo (Fig.1a) e hgado (Fig. 1b). Los datos se muestran como media error estndar; ** p-valor < 0.01. Comparison between the amounts of arsenic (mg/g of tissue) accumulated by mothers and pups in the spleen (Fig. 1a) and in the liver (Fig. 1b). All values are expressed as mean SEM; **p-value < 0.01.

Se analiz la acumulacin de As en funcin de la va de exposicin al txico: directa a travs del agua de bebida en el caso de las madres, o indirecta, a travs de la placenta y la leche materna como sucede en las cras. Vemos en la Figura 1 como las madres muestran un incremento de la concentracin de arsnico altamente significativo (p < 0,01) en dos de los rganos analizados e independientemente del tratamiento administrado: F = 68,95; F = 76,23 para el bazo del grupo tratado con arsnico o arsnico + antioxidantes, respectivamente (Fig. 1a); y F = 45,54; F = 99,21 en el caso del hgado de los mismos grupos (Fig. 1b). Con respecto al efecto del tratamiento antioxidante administrado, en la Figura 2 se muestra como las madres del grupo que recibi el doble tratamiento, han acumulado una cantidad signifiBol. R. Soc. Esp. Hist. Nat. Sec. Biol., 107, 2013

Figura 2. Comparacin entre la cantidad de arsnico (expresada en g/g de tejido) acumulada por las madres en bazo e hgado, en funcin del tratamiento recibido. Los datos se muestran como media error estndar; * p-valor < 0.05. Comparison between the amounts of arsenic (mg/g of tissue) accumulated by mothers in the spleen and in the liver, depending on the treatment received. All values are expressed as mean SEM; * p-value < 0.05.

Bioacumulacin de arsnico en tejidos animales por aguas contaminadas

43

Figura 3. Distribucin del arsnico acumulado por las cras en los distintos rganos; expresado en g As/g de tejido. Los datos se muestran como media error estndar; ** p-valor < 0.01. Distribution of arsenic accumulated by pups in various organs (mg As / g of tissue). All values are expressed as mean SEM; ** p-value < 0.01.

cativamente menor (p < 0,05) de arsnico tanto en hgado como en bazo (F = 5,62 y F = 6,06), con respecto a las que slo recibieron el txico. No sucede lo mismo en las cras donde el tratamiento con antioxidantes no parece tener ningn efecto sobre la bioacumulacin del metaloide (Fig. 3). En cuanto a la distribucin del arsnico en el organismo de las cras (Fig. 3), se observa como el txico muestra una preferencia altamente significativa (p < 0,01; F = 66,68) por rganos como el bazo o el rin, frente al hgado o el cerebro.

4. Discusin
La acumulacin de arsnico en el organismo se encuentra condicionada por la va de exposicin, resultando la toma directa por va oral muy efectiva para la absorcin del txico (Fowler et al., 2007; Flora et al., 2009). Segn algunos estudios, en el epitelio intestinal se absorbe entre un 70-90% del As ingerido; esta cantidad vara en funcin de si se coadministra o no con alimentos, as como de la naturaleza de los mismos (Hughes et al., 2009), registrndose los valores ms altos en animales que haban permanecido en ayunas horas antes de la ingesta del txico (Who, 2001). En este caso, el As les fue administrado directamente a las madres a travs del agua de bebida y dada la cantidad de As acumulado en sus rganos, parece que la absorcin del metaloide en el intestino ha sido elevada; especialmente durante el perodo de lactancia, momento en el cual duplicaron su ingesta de agua y, por consiguiente, la de arsnico. Sin embargo, las cras analizadas muestran valores casi un 80% ms bajos que los de sus madres. La explicacin podemos encontrarla en el

hecho de que reciben el txico a travs la placenta o de la leche materna, segn del momento del desarrollo en que nos encontremos, por lo que la eficacia con la que el txico alcance el organismo depender de su capacidad para atravesar estas barreras. La placenta, parece ser fcilmente travesada por el As (Who, 2001; Fowler et al., 2007), ya que las cantidades de As registradas en la sangre de la madre son muy similares a las encontradas en el cordn umbilical del individuo en desarrollo (Concha et al., 1998). Otros autores aseguran que las cantidades de As acumuladas por la placenta son muy superiores a las encontradas en cualquiera de los rganos del feto, por lo que podra tener un leve efecto barrera (Devesa et al., 2006). En cualquier caso, este es el momento de su desarrollo en el que ms expuesto se encuentra el individuo, pudiendo llegar a producirse graves malformaciones en el feto o incluso abortos (Raqib et al., 2009). Tras la realizacin de algunos estudios epidemiolgicos, se concluy que en el caso de la leche materna, la cantidad de As excretada supone apenas un 20% del As transportado en sangre (Concha et al., 1998; Xi et al., 2010); por lo que la exposicin al txico que sufre el lactante en este momento crucial de su desarrollo, es mnima. Por esta razn, la OMS recomienda a las mujeres residentes en las zonas ms afectadas por la contaminacin, amamantar a sus hijos durante el mayor tiempo posible (Concha et al., 1998), a fin de proporcionarles un alimento seguro durante las primeras etapas de su desarrollo cognitivo, disminuyendo as la incidencia del retraso en el aprendizaje y otras disfunciones asociadas a la exposicin directa al As en nios de muy corta edad (Akhtar et al., 2007). As pues, el momento en el que ms As consume la madre coincide con el perodo de lactancia, etapa en la cual el individuo en desarrollo se encuentra ms protegido; esto explicara por qu la cantidad de txico que llega a acumularse en el organismo de las cras es inferior a la acumulada por sus madres, las cuales se encuentran expuestas permanentemente y de forma directa al arsnico. Se han observado significativas diferencias entre la cantidad de As acumulada por las madres que recibieron un suplemento vitamnico con respecto a las que no fueron suplementadas, registrndose en las primeras valores un 30-40% ms bajos, a pesar de que la cantidad de txico ingerida es muy similar en ambos grupos. La explicacin a este suceso podemos encontrarla en los beneficios que la ingesta de los antioxidantes proporciona al organismo de la madre. El principal mecanismo de toxicidad del As parece ser la generacin de radicales libres que oxidan y degradan las estructuras celulares (Pi et al., 2002). La vitamina C es muy conocida por su capacidad para reducir a las especies reactivas oxidantes evitando as que estas hagan diana en lpidos, ADN o protenas; la vitamina E cumple
Bol. R. Soc. Esp. Hist. Nat. Sec. Biol., 107, 2013

44

A. Herrera, J. Pineda, M.T. Antonio

una funcin muy similar, jugando un papel destacado en la proteccin de las membranas celulares, gracias a su naturaleza liposoluble (Crdova et al., 2009). Adems, algunos autores consideran que estas sustancias podran ejercer una influencia beneficiosa sobre las enzimas implicadas en la detoxificacin y eliminacin de sustancias xenobiticas (Flora et al., 2011). Esta mejora del estado celular reduciendo el estrs oxidativo generado por el As, junto con la facilitacin de los mecanismos celulares de detoxificacin que promueven las vitaminas C y E, constituiran una posible explicacin respecto a por qu los animales que han ingerido el complejo vitamnico han acumulado menos As en sus tejidos. En cuanto al cinc (Zn), adems de actuar como cofactor de enzimas antioxidantes como la superxido dismutasa (Llanos & Ronco, 2009), fomenta la movilizacin del As acumulado en los tejidos (Misbahuddin et al., 2006), por lo que el enriquecimiento de la dieta con este elemento contribuira a reducir la concentracin del txico en los rganos. Con respecto a las cras, no se observan diferencias significativas en la cantidad de As acumulado segn hayan recibido o no el suplemento vitamnico, pero s en la acumulacin del txico en los distintos rganos. El As llega a travs de la placenta o de la leche materna, y se distribuye por todo el organismo viajando unido a las membranas de los eritrocitos; desde aqu es absorbido por las clulas de los distintos tejidos a travs de un sistema activo de transporte (Aposhian et al., 2004). Dentro de la clula, el As es metilado como primera fase de su detoxificacin para su posterior excrecin a travs de la orina en forma de arsnico orgnico metilado (DMA o MMA) (Fowler et al., 2007). Sin embargo, no todo el As ingerido es eliminado, acumulndose en distintos rganos o estructuras ricas en puentes disulfuro como la queratina de las uas o el pelo (Sprando et al., 2007). En cuanto a su distribucin entre los distintos rganos, el txico muestra especial afinidad por el bazo (Cui & Okayasu, 2008), rgano encargado del reciclaje de los eritrocitos envejecidos o daados (Schmits & Pfreundschuh, 2002); cuando el As se une a las membranas de los eritrocitos oxida los lpidos que las conforman, haciendo que pierdan flexibilidad y su funcionalidad (Aggarwal et al., 2009; Saha & Ghosh, 2009), por lo que al llegar al bazo estas clulas son retenidas para su destruccin y reciclaje, acumulndose en el rgano el As que contenan. El rin es el siguiente rgano en el que se acumulan grandes cantidades de As (Cui & Okayasu, 2008). La principal va de excrecin del txico se produce a travs de la orina; as, si la cantidad de As que llega al rgano es demasiado elevada o lo hace en forma de As inorgnico cuya solubilidad en la orina es ms baja que la de las formas orgnicas metiladas, el metaloide se acumular en el rgano (Fowler et al., 2007).
Bol. R. Soc. Esp. Hist. Nat. Sec. Biol., 107, 2013

En comparacin con el bazo o el rin, la cantidad de As acumulada por el hgado o el cerebro es mucho ms baja (Cui & Okayasu, 2008). Ambos rganos, tienen una elevada capacidad para metilar el As inorgnico, especialmente el hgado (Xi et al., 2010). Las formas metiladas del arsnico (DMA, MMA) son ms fciles de excretar que el As inorgnico por lo que su eliminacin en estos rganos resulta ms efectiva (Fowler et al., 2007). En el caso del cerebro, a este hecho, se aade la presencia de la barrera hematoenceflica; si bien algunos autores consideran que durante las primeras etapas del desarrollo fetal, cuando se encuentra an en estado inmaduro, permite el paso del As al embrin (Jin et al., 2006), una vez formada se incremente su eficacia (Jin et al., 2006; Xi et al., 2010), lo que disminuye el grado de exposicin al txico que sufre el cerebro. En futuros trabajos, resultara interesante realizar la cuantificacin de las distintas especies de As presentes en cada rgano, a fin de comprobar, entre otras cosas, la eficacia de los procesos de metilacin de cada uno de los tejidos analizados.

5. Conclusiones
La cantidad de As en los rganos de las cras es muy inferior a la acumulada por sus madres, cuyo organismo disminuye de forma ms o menos eficaz la transmisin del txico a las cras. La toma de suplementos vitamnicos por parte de la madre, no slo ayuda a combatir los efectos perniciosos del txico, sino que adems favorece la eliminacin del As y dificulta su acumulacin en los tejidos. Dentro del organismo de las cras, el As tiende a acumularse preferentemente en el bazo, seguido del rin; siendo el hgado y el cerebro los rganos que menos txico acumulan en sus tejidos. Agradecimientos Los autores desean mostrar su agradecimiento a las profesoras Dolores Trigo Aza (Departamento de Zoologa y Antropologa Fsica) y Esther Prez Corona (Departamento de Ecologa) de la Universidad Complutense por facilitarnos los medios necesarios para poder llevar a cabo la metodologa empleada en este trabajo. Tambin a Guillermo Frontera, por su ayuda en la revisin del resumen en ingls del manuscrito. Y a los revisores que con sus sugerencias contribuyeron a mejorar la calidad del manuscrito. Bibliografa
Aggarwal, M., Naraharisetti, S.B. & Sarkar, S.N. 2009. Effects of subchronic coexposure to arsenic and endosulfan on the erythrocytes of broiler chickens: a biochemical study. Archives of Envi-

Bioacumulacin de arsnico en tejidos animales por aguas contaminadas ronmental Contamination and Toxicology, 56(1): 139-148. Akhtar, N., Islam, M., Mannan, M.A., Misbahuddin, M., Khandker, S. & Ahmad, A. 2007. Evaluation of physical and mental development of children of arsenic exposed areas in Bangladesh. In: Misbahuddin, M. Ed. Applied research on arsenic in Bangladesh. Pgs. 15-30. WHO. Dhaka. Aposhian, H.V., Zakharyan, R.A., Avram, M.D., Sampayo-Reyes, A. & Wollenberg, M.L. 2004. A review of the enzymology of arsenic metabolism and a new potential role of hydrogen peroxide in the detoxication of the trivalent arsenic species. Toxicology and Applied Pharmacology, 198(3): 327-335. Aragons, N., Palacios, M., Avello, A., Gmez, P., Martnez, M. & Rodrguez, M. J. 2001. Nivel de arsnico en abastecimientos de agua de consumo de origen subterrneo en la Comunidad de Madrid. Revista Espaola de Salud Pblica, 75(5): 421-432. Brinkel, J., Khan, M.M.H. & Kraemer, A. 2009. A systematic review of arsenic exposure and its social and mental health effects with special reference to Bangladesh. International Journal of Environmental Research and Public Health, 6: 1609-1619. Castro-Gonzlez, M.I. & Mndez-Armenta, M. 2008. Heavy metals: Implications associated to fish consumption. Environmental Toxicology and Pharmacology, 26: 263-271. Concha, G., Vogler, G., Lezcano, D., Nermell, B. & Vahter, M. 1998. Exposure to inorganic arsenic metabolites during early human development. Toxicological sciences, 44: 185-190. Crdova, A., Ruiz, C.G., Crdova, C.A., Crdova, M.S., Guerra, J.E., Rodrguez, B.E. & Arancibia, K. 2009. Estrs oxidativo y antioxidantes en la conservacin espermtica. Revista Complutense de Ciencias Veterinarias, 3(1): 01-38. Cui, X. & Okayasu, R. 2008. Arsenic accumulation, elimination, and interaction with copper, zinc and manganese in liver and kidney of rats. Food and Chemical Toxicology, 46: 3646-3650. Devesa, V., Adair, B.M., Liu, J., Waalkes, M.P., Diwan, B.A., Styblo, M. & Thomas, D.J. 2006. Arsenicals in maternal and fetal mouse tissues after gestational exposure to arsenite. Toxicology, 224 (1-2): 147-155. Duker, A.A., Carranza, E.J.M. & Hale, M. 2005. Arsenic geochemistry and health. Environment International, 31(5): 631-641. Flora, S.J. 2011. Arsenic-induced oxidative stress and its reversibility. Free Radical Biology & Medicine, 51(2): 257281. Flora, S.J.S., Mehta, A., Gupta, R. 2009. Prevention of arsenic-induced hepatic apoptosis by concomitant administration of garlic extracts in mice. Chemico-Biological Interactions, 177(3): 227-233. Fowler, B.A., Chow, S.J., Jones, R.L. & Chen, C.J. 2007. Arsenic. In: Nordberg, G., Fowler, B.A., Nordberg, M. & Friberg, L. Eds. Handbook on the Toxicology of Metals. 3 ed. Pgs. 367-406. European Environment Agency. Copenhage. Hughes, M.F., Thomas, D.J. & Kenyon, E.M. 2009. Toxicology and Epidemiology of Arsenic and its Compounds. In: Henke, K.R. Ed. Arsenic. Envi-

45

ronmental Chemistry, Health Threats and Waste Treatment. Pgs. 237-275. Wiley. Chippenham. Jin, Y., Xi, S., Li, X., Lu, C., Li, G., Xu, Y., Qu, C., Niu, Y. & Sun, G. 2006. Arsenic speciation transported through the placenta from mother mice to their newborn pups. Environmental Research, 101: 349-355. Kadirvel, R., Sundaram, K., Manil, S., Samuel, S., Elango, N. & Panneerselvam, C. 2007 Supplementation of ascorbic acid and -tocopherol prevents arsenic-induced protein oxidation and DNA damage induced by arsenic in rats. Human & Experimental Toxicology, 26(12): 939-946. Llanos, M.N. & Ronco, A.M. 2009. Fetal growth restriction is related to placental levels of cadmium, lead and arsenic but not with antioxidant activities. Reproductive Toxicology, 27(1): 88-92. Maiti, S. & Chatterjee, A.K. 2000. Differential response of cellular antioxidant mechanism of liver and kidney to arsenic exposure and its relation to dietary protein deficiency. Environmental Toxicology and Pharmacology, 8(4): 227-235. Misbahuddin, M., Islam, A. M., Khandker, S., AlMahmud, I., Islam, N. & Anjumanara. 2006. Efficacy of Spirulina Extract plus zinc in Patients of chronic arsenic Poisoning: A Randomized Placebo-Controlled Study. The clinical Toxicology, 44: 1-7. Naraharisetti, S.B., Aggarwal, M., Ranganathan, V., Sarkar, S.N., Kataria, M. & Malik, J.K. 2009. Effects of simultaneous repeated exposure at high levels of arsenic and malathion on hepatic drug-biotransforming enzymes in broiler chickens. Environmental Toxicology and Pharmacology, 28(2): 213-218. Pi, J., Yamauchi, H., Kumagai, Y., Sun, G., Yoshida, T., Aikawa, H., Hopenhayn-Rich, C. & Shimojo, N. 2002. Evidence for induction of oxidative stress caused by chronic exposure of Chinese residents to arsenic contained in drinking water. Environmental health perspectives, 110(4): 331336. Raqib, R., Ahmed, S., Sultana, R., Wagatsuma, Y., Mondal, D., Hoque, A.M.W., Nermell, B., Yunus, M., Roy, S., Persson, L.A., Arifeen, S.E., Moore, S. & Vahter, M. 2009. Effects of in utero arsenic exposure on child immunity and morbidity in rural Bangladesh. Toxicology Letters, 185 (3): 197-202. Roy, P. & Saha, A. 2002. Metabolism and toxicity of arsenic: a human carcinogen. Current science, 82 (1): 38-45. Saha, S.S.M. & Ghosh, M. 2009. Comparative study of antioxidant activity of a-eleostearic acid and punicic acid against oxidative stress generated by sodium arsenite. Food and Chemical Toxicology, 47(10): 2551-2556. Schmits, R. & Pfreundschuh, M. 2002. Bazo. In: Pfreundschuh, M. & Schlmerich, J. Fisiopatologa y Bioqumica. Harcourt. Madrid. Sharma, V.K. & Sohn, M. 2009. Aquatic arsenic: Toxicity, speciation, transformations, and remediation. Environment International, 35: 743-759. Smith, A. H., Lingas, O.L. & Rahman, M. 2000. Contamination of drinking-water by arsenic in Bangladesh: a public health emergency. Bulletin of the World Health Organization, 78: 1093-1103. Sprando, R.L., Collins, T.F.X., Black, T., Olejnik, N., Ramos-Valle, M. & Ruggles, D. 2007. Bol. R. Soc. Esp. Hist. Nat. Sec. Biol., 107, 2013

46

A. Herrera, J. Pineda, M.T. Antonio 2011. Guidelines for drinking-water quality. Gutenberg. Malta. Xi, S., Jin, Y., Lv, X. & Sun, G. 2010. Distribution and speciation of arsenic by transplacental and early life exposure to inorganic arsenic in offspring rats. Biological Trace Element Research, 134(1): 84-97. Xu, Y., Wang, Y., Zheng, Q., Li, X., Li, B., Jin, Y., Sun, X. & Sun, G. 2008. Association of oxidative stress with arsenic methylation in chronic arsenic-exposed children and adults. Toxicology and applied pharmacology, 232(1): 142-149.

Acute toxicity of sodium arsenite in a complex food matrix. Food and Chemical Toxicology, 45 (9): 1606-1613. Vizcaya-Ruiz, A. De, Barbier, O., Ruiz-Ramos, R. & Cebrian, M.E. 2009. Biomarkers of oxidative stress and damage in human populations exposed to arsenic. Mutation Research, 674(1-2): 85-92. WHO [World Health Organization]. 1999. Arsenic in drinking water. Fact Sheet No. 210. WHO. Genve. 2001. Arsenic and arsenic compounds. 521 pgs. WHO. Geneva.

Bol. R. Soc. Esp. Hist. Nat. Sec. Biol., 107, 2013