Bioqumica do sangue

O METABOLISMO E A NECESSIDADE DE OXIGENIO: o papel da hemoglobina essencial para a vida dos animais, que necessitam de alta quantidade de atp, que vai servir para vrios processos: trabalho mecnico, gerar gradiente de concentrao, etc; os animais precisam de um metabolismo eficiente para a produo de atp; quem faz o transporte de o2 so as hemcias = eritrcitos, no seu interior carregam a molcula denominada hb que tem capacidade de conduo de o2; HEMCIAS: no seu interior h diversas molculas de hb, e na hb que vo se ligar as molculas de o2; quando chega a regio rica em oxignio (pulmes), a hb vai se ligar a esse o2; ao chegar a um tecido que h mais co2 que o2, a hb se desliga do o2 deixando-o no tecido e se ligando ao co2; quando tem muito o2, liga, quando tem muito co2, desliga do o2; para realizar metabolismo aerbio, so necessrias uma quantidade suficiente de hb, qualquer deficincia vai causar um desequilbrio; patologias = anemias, onde geralmente h falta de hb, a pessoa fica mais cansada, no tem muita disposio, por falta da oxigenao dos tecidos; as hemcias em seu estado maduro na maioria dos mamferos, so anucleadas e so desprovidas de uma srie de organelas, sendo a principal a mitocndria; a maioria anucleada (com exceo do camelo); acreditase que essa questo de ter ou no o ncleo uma questo evolutiva, aqueles que no tem ncleo so mais evoludos; um eritrcito anucleado um eritrcito ideal; se no h mitocndria, em termos de metabolismo, no h ciclo de Krebs, dentre outros metabolismos; se a hemcia no tem ncleo, no h mais informao gentica, sendo impossvel fazer sntese de novas protenas; essas clulas tendem a ter um tempo de vida muito curto; o tempo de vida das hemcias em humanos, de 120 dias, em bovinos 160, em galinhas 30 (hemcias nucleadas), equinos 140 dias, sunos 62 dias, caprinos 64-118 dias, coelhos 65-70 dias, gatos 77 dias; a clula se renova com a sntese de protenas, quando a clula no consegue trocar suas molculas, renovar suas protenas, essa clula necessita ser substituda constantemente; a destruio dessas clulas pode ser na medula ssea, bao ou fgado (hemocaterese = destruio); as

clulas do sistema retculo endotelial fazem o processo de destruio dessas clulas; HEMOGLOBINA: uma protena formada por 4 cadeias polipeptdicas (4 subunidades), a hemcia do animal adulto tem 2 subunidades alfa e 2 subunidades beta; cada subunidade tem um grupo prosttico, que o grupo heme; o grupo heme uma molcula orgnica que contm em seu interior uma molcula de ferro; a hb no exerce sua funo sem seu grupo prosttico ( como se fosse uma relao enzima coenzima); o grupo heme vai fazer a ligao com o o2; O METABOLISMO NOS ERITRCITOS: se a hemcia tem capacidade de transporte de o2, no faz sentido ela utilizar esse o2; a hemcia no utiliza o2, at pq no tem mitocndrias; quais as vias metablicas que encontramos nas hemcias? Elas obtm seu atp basicamente atravs da via glicoltica (transformao da glicose em piruvato), contudo essa via glicoltica gera uma baixa quantidade de atp; se h via glicoltica (nica via produtora de energia), o NADH produzido na via (na produo de 1,3 bifosfoglicerato partir de gliceraldeido 3 fosfato), se tivesse mitocndria, NAD+ ia ser regenerado pelas lanadeiras, como no h mitocondria, o NADH utilizado na transformao de piruvato em lactato, que utiliza NADH e libera NAD+, que ir entrar novamente na via glicoltica; hemlise = rompimento de hemcias; animais que tm algum defeito na lactato dh por exemplo, que transforma piruvato em lactato, iro ter uma menor produo de energia, j que o NAD+ no vai ser regenerado e a gliclise vai trabalhar em uma menor velocidade; uma parte do NADH produzido na via glicoltica pode ser regenerado de outra forma; a hb que carrega o o2 est ligado a um ferro +2; na presena de agentes oxidantes, a hb do animal que est ligada ao Fe+2 pode ser oxidada, perde um eltron e forma Fe+3; a hb ligada ao Fe+3 no transporta oxignio; parte do NADH produzido na via glicoltica acaba sendo utilizado na regenerao desse Fe+2; a hb que est ligada ao Fe+3 chamada de metaemoglobina; o NADH pode ser usado para converter metaemoglobina em hemoglobina; se a metaemoglobina ganhar eltron ela vira novamente hb, esse eletron pode vir do NADH, passar pelo citocromo b5, que vira um citocromo b5 reduzido, esse eltron contido no citocromo passa para a

metaemoglobina, que vira hemoglobina; o NADH que doou esse eltron fica oxidado, volta a sua forma NAD+; estamos em contato com agentes oxidantes o tempo todo, ento todos os animais tm um pouco de metaemoglobina; outra via presente no eritrcito: via alternativa ao destino da glicose = via das pentoses fosfato, a glicose 6 fosfato pode entrar na via das pentoses fosfato, inclusive nas vias de regenerao; com a via das pentoses fosfato h a produo de NADPH, que utilizado na regenerao da glutationa (sistema antioxidante); a glutationa tem que estar reduzida, agindo como agente antioxidante, o agente oxidante que chega oxida a glutationa reduzida, no oxidando compostos celulares mais importantes; nas hemcias esse processo antioxidante muito importante, pois se o animal entrar em contato com agente oxidante, haver a oxidao de lipdeos, deixando a membrana da hemcia frgil, ocorrendo a lise; outra via: converso de parte da molcula 1,3 fosfoglicerato em 2,3-bifosfoglicerato que vai ser um regulador da afinidade da hb pelo o2; quando a 2,3-bifosfoglicerato entra em contato com a hb, a hb abandona o o2, deixando-o no tecido; EFEITO DO 2,3-BPG NA LIGAO DO O2: muito importante nas trocas gasosas entre me e feto na placenta; o animal adulto, possui hb com 4 subunidades (duas alfa e duas beta); a hb fetal diferente, ao invs de ter cadeia beta, tem cadeia gama (duas subunidades alfa, duas gama); quando o animal nasce, a cadeia gama aos poucos vai sendo substituda pela cadeia beta; importante que a hb do feto seja diferente da do adulto; quando chega a hb da me na placenta, h um estmulo muito grande para que o eritrcito que chegou ali produza 2,3-BPG, que vai interagir com a estrutura da hb materna, fazendo-a desligar do o2, deixando-o livre naquela regio; o 2,3BPG no tem efeito na hb do feto, j que possui estrutura diferente; a hb fetal, est com alta afinidade por o2, ao chegar no ambiente cheio de o2 se liga a ele; A ESTRURUTRA DA HB: quando o 2,3BPG se liga ao grupo heme, h uma mudana na conformao da molcula diminuindo sua afinidade com o o2; GRUPO HEME: ESTRUTURA ORGNICA COMPLEXA se retiro o tomo de ferro, fica uma estrutura orgnica chamada de protoporfirina IX; existem

vrios tipos de porfirina; toda porfirina tem um ncleo que chamado de ncleo tetrapirrlico; se h quatro anis pirrlicos juntos, h um ncleo tetra pirrlico; todas as porfirinas tm substituintes ligados aos anis pirrlicos, as variaes nesses substituintes iro determinar diferente porfirinas; a protoporfirina IX; tem como substituintes quatro grupos metil, dois grupos propionil (PR), e dois substituintes vinil (V); s o ncleo tetrapirrlico, sem os substituintes = porfina; pra formar o grupo heme = protoporfirina IX + Fe+2; como o ferro se associa com essa estrutura? O tomo de ferro consegue fazer at 6 ligaes coordenadas; o ferro ir fazer 4 ligaes com o ncleo tetrapirrlico, ir sobrar duas ligaes; uma delas vai interagir com a protena da hb, e a outra fica livre para se ligar ao o2; cada subunidade = globina, cada globina contm um grupo heme, cada grupo heme carrega 1 o2, logo cada hemcia carrega 4 o2; SNTESE DO GRUPO HEME: a sntese pode ocorrer em todos os tecidos, pois todos os tecidos tm citocromo, alguns tem mais outros tem menos; a sntese do heme ocorre muito mais em alguns tecidos como medula ssea (pois l que haver produo dos reticulcitos = hemcia imatura), e no fgado (devido a alta quantidade de citocromos); o grupo heme sintetizado partir da glicina e succinil-coa; a primeira enzima vai condensar glicina ao succinil (delta-ALA sintase), essa enzima faz a condensao e elimina CO2; esse succinil est ligado coa por questes energticas; com a condensao h formao de delta-ala; a delta ala sintase tem uma coenzima, o PLP (piridoxal fosfato), que derivado da vitamina B6 (pirodoxina); se faltar B6, a ao da enzima fica comprometida, no h formao de delta-ala, no forma grupo heme, comea a faltar hb funcional, as hemcias vo comear a carregar menos o2, falta de hb = anemia; as hemcias pela falta de hb podem ficar menores e mais plidas (a hb d cor avermelhada), resultando em anemia microctica hipocrmica; Duas molculas de delta-ala vo se condensar, havendo formao de um anel = anel pirrlico, que vai formar o ncleo tetrapirrlico; porfobilinognio = 1 anel pirrlico; a enzima uma desidratase, delta-ala desidratase; com a formao do porfobilinognio, haver a condensao de quatro dessas molculas, formando o ncleo tetrapirrlico =

porfirinognio; formou o porfirinognio, os substituintes presentes no so prprios da protoporfirina IX, haver uma srie de reaes que iro converter acetil em metil, dois propionil so mantidos, outros dois so convertidos em vinil; protoporfirina IX = 4 metil, 2 vinil, 2 propionil; chegou na protoporfirina IX, falta inserir o grupo heme, a enzima = ferroquelatase ou heme sintase, que vai inserir o tomo de ferro formando o grupo heme; porfirias: patologias relacionadas com algum defeito em enzimas que participam da produo de grupos heme; DEGRADAO DO GRUPO HEME: inicia com a captura das hemcias que j cumpriram seu tempo de vida; so capturadas no fgado, bao, h um conjunto de clulas especializadas na degradao dos eritrcitos = clulas do sistema retculo endotelial; essas clulas faro a captura da hemcia, rompe a clula, pega a hb, haver separao do grupo heme da poro protica (globina), a poro proteica vai ser degradada gerando aminocidos (que seguiro diversas vias); o grupo heme que veio da hb, ou pode ter vindo da mioglobina, de citocromos, uma enzima remove o carbono na forma de monxido de carbono (CO) e tira tb o tomo de ferro; o produto liberado se chama bilirrubina; o acmulo de bilirrubina acaba gerando ictercia; a bilirrubina insolvel, no pode ficar circulando, se tiver que circular se associa com a albumina, muita coisa insolvel circula com a albumina; a bilirrubina chega ao fgado; se a clula do sistema retculo endotelial est no fgado, no h esse passo de associao com albumina; a bilirrubina desliga da albumina, no fgado, e sofre conjugao = ligao da bilirrubina com cido glicurnico, que um acar derivado da glicose; dois cidos glicurnicos vo se ligar bilirrubina tentando deixa-la mais solvel para elimin-la do organismo; forma-se bilirrubina conjuga = bilirrubina + cido glicurnico; qualquer dano heptico, comea a ter um prejuzo na produo da bilirrubina; a ictercia no uma doena de base, ocorre devido a outra patologia, uma doena secundria; quando no conjuga a bilirrubina, ela comea a se acumular, e comea a se depositar, tornando pele amarelada, mucosa = ictercia; os mamferos quando nascem no tem todas as enzimas funcionais, ainda esto se tornando funcionais, comum recm-nascidos terem ictercia; a bilirrubina conjugada lanada junto com a bile no intestino, se o animal tem vescula biliar essa bile vai para vescula biliar

ficar armazenada at ser necessrio sua secreo; no intestino, a bilirrubina conjugada convertida em urubilinognio, por ao bacteriana; urubilinognio pode permanecer no intestino dando origem a estercobilina, que um pigmento que d colorao caracterstica s fezes; o urubilinognio pode ser convertido tambm em urobilina nos rins, sendo eliminado na urina; Mais detalhado: removido um tomo de ferro e um carbono do grupo heme, a protoporfirina IX se abre, o ncleo pirrlico fica aberto; o pigmento formado a biliverdina que um pigmento de colorao verde (em casos de hematomas, h formao desse pigmento, por isso a colorao verde, ocorre isso pois haver degradao do sangue extravasado); a biliverdina ir formar a bilirrubina (hematoma amarelado), a bilirrubina vai ser conjugada no fgado com o cido glicurnico formando a bilirrubina conjugada, que vai compor a bile, e ser lanada no intestino; no intestino a bilirrubina conjugada, por ao das bactrias vai ser convertida em urobilinognio (que incolor), h duas possibilidades, pode permanecer no intestino e virar estercobilina, ou pode ir pro rim e formar urobilina; tanto estercobilina quanto urobilina tm cor, do colorao s fezes e urina; a bilirrubina no conjugada considerada bilirrubina livre (mesmo que conjugada albumina, esse livre se refere a no conjugao); animais, podendo apresentar-se amarelada, castanha ou verde, dependendo da quantidade de bilirrubina; composta por siasi biliares, pigmentos biliares, mucinas (glicoprotenas, do carter viscoso); DOENAS: PORFIRIAS so doenas de carter gentico, os animais que tem porfiria apresentaro algum defeito em alguma enzima que tem papel de sntese do grupo heme; se o indivduo tem falta de uma enzima X, comea a acumular precursores iniciais, que vo se depositando nos tecidos; os intermedirios resultam na toxicidade do organismo; as porfirias podem ser eritropoiticas ou hepticas; eritropoiticas: defeitos genticos mais evidentes na formao dos eritrcitos; as hepticas so mais frequentes em animais e o defeito metablico mais proeminente no fgado; porfiria vem do grego porfirus, que significa prpura, devido urina dos pacientes afetados apresentarem essa colorao, no s a urina, mas os dentes e ossos tambm; o problema da doena que essa reao

geraria calor, que seria to intenso que ocorreria a necrose do tecido; essas doenas no so muito comuns, j foi descrita em bovinos sunos e felinos; quando se descobre essa doena, evita-se o cruzamento desses animais, para isolar o gene; sinais clnicos em bovinos: colorao do osso mais avermelhada, devido deposio dos intermedirios da sntese do grupo heme; os dentes tambm ficam mais avermelhados, assim como a urina; as lendas de vampirismo tem muito a ver com essa patologia: dentes vermelhos, e a pessoa no podia se expor luz, devido a reao qumica que produz calor, como se vc queimasse, h necrose dos tecidos, a pessoa ficava com hbitos mais noturnos, dentes vermelhos, gerando lendas sobre vampiros; esses indivduos tm defeito na enzima, mas no um defeito total, seno seria incompatvel com a vida; ICTERCIAS: caracterizada pelo acmulo dos pigmentos biliares, nos tecidos, mucosas, a pele e as mucosas ficam com colorao amarelada, devido ao acmulo da bilirrubina; quando h esse acmulo de pigmentos biliares chamado de hiperbilirrubinemia; comeou a acumular em determinado tecido, extravasa, indo pro sangue, tecidos, mucosa; existem diferentes tipos de ictercia; hemoltica: ocorre devido a destruio excessiva de hemcias (hemlise excessiva), pode ser causada por uma parasita, ou doena gentica, que leva a uma hemlise excessiva; se hemolisou demais os eritrcitos, h muita hb pra ser destruda, havendo muita bilirrubina, etc; ictercia heptica: presena de agentes txicos, um animal se expos a uma substancia que vai ser metabolizada no fgado, h muita substncia que txica para o fgado, iro destruir os hepatcitos (o paracetamol hepatotxico, no pode ser usado constantemente) causando defeito em enzimas hepticas, no s nas que fazem a converso da bilirrubina, h tambm reao inflamatria, havendo a obstruo de alguns ductos, como o ducto biliar; na ictercia heptica, no necessariamente um agente txico que causa danos aos hepatcitos, podem ser outras coisas; ictercia obstrutiva: obstruo do ducto biliar, havendo comprometimento para mandar a bilirrubina para o intestino delgado; parmetros bioqumicos observados nos 3 tipos de ictercia: ictercia hemoltica: se fizer dosagem h aumento de bilirrubina no plamsa (livre) e na bilirrubina conjugada, e h aumento no urobilinognio na urina tambm; na ictercia heptica h aumento de bilirrubina livre, conjugada e

urobilinognio na urina, assim como na ictercia hemoltica; aumenta-se a bilirrubina livre pois as enzimas que fazem a conjugao esto comprometidas; aumenta a bilirrubina conjugada tambm, pois o fgado ainda conjuga um pouco, mas h a obstruo dos ductos, sobrando bilirrubina conjugada; a bilirrubina conjugada que conseguiu passar para o intestino, vira urobilinognio, um pouco vira estercobilina, o restante volta para o fgado, uma boa parte no consegue voltar para o intestino, vai para os rins, acumulando urobilinognio; na ictercia heptica h uma obstruo parcial dos ductos hepticos; na ictercia obstrutiva, h obstruo total dos ductos hepticos, no se encontra urobilinognio na urina, j que no nem formado, pois a bilirrubina no consegue ir para o intestino para ser transformada em urobilinognio; a bilirrubina conjugada estar aumentada