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XV Congresso de Iniciao Cientfica da UFPE 29 a 31 de outubro de 2007

40321 - PLANEJAMENTO E SNTESE DE FRMACOS ANTITUMORAIS SIMBITICOS SELETIVOS: OBTENO DE FTALIL-AMINOCIDOS

Marcos Antonio Quidute de Moraes1 ; Ana Cristina Lima Leite2
1

Estudante do curso de Farmcia-CCS-UFPE; marcosaqm@hotmail.com , 2Docente/Pesquisador do Depto. de Farmcia-CCS-UFPE; ana.leite@pq.cnpq.br

Resumo: Os relatos de REA da Talidomida e anlogos revelam o potencial farmacofrico do anel ftalimdico, ao mesmo tempo, denotam o perfil toxicofrico do grupamento glutarimida. Em conseqncia, o ncleo ftalimida, vem sendo explorado visando-se agentes antiinflamatrios e antitumorais mais potentes e menos txicos. Merece destaque ainda o conhecimento de que pequenos resduos de L-aminocidos vm sendo utilizado como grupos transportadores na latenciao de agentes farmacolgicos menos txicos. Em um estudo de relao estrutura atividade preliminar, neste trabalho esto descritos a sntese e a avaliao das atividades antiinflamatrias, citotxica e imunomodulatria de derivados do tipo N-aminoacdicos-1,3isoindolinadionas. Os produtos foram obtidos atravs da condensao entre o anidrido ftlico e os respectivos L--aminocidos. Todos os produtos foram avaliados em relao a atividade antiinflamatriain vivo utilizando o ensaio do bolso de ar em camundongos por via oral, na dose de 100 mg.Kg-1, utilizando-se a Talidomida como droga padro. Foram realizados ainda ensaios in vitro frente as clulas tumorais MB-MDA 435, HCT-8 e SF-295, assim como para limhagens de clulas de mamferos BALB-c e C57BL/6. Os resultados apontaram os derivados N-(cido propanico)-1,3-isoindolinadiona (FF-03) e N-(3-fenil-cido propinico)-1,3isoindolinadiona (FF-04) como os mais potentes antiinflamatrios desta srie, com percentual de inibio comparvel com a Talidomida. A avaliao do derivado FF03 na dose de 10 mg.Kg-1 no ensaio antiinflamatrio demonstrou potncia semelhante ao padro. Todos os derivados mostraram baixo nvel de citotoxicidade em esplencitos de mamferos bem como nenhum dos compostos foram capazes de inibirem o crescimento das linhagens testadas na concentrao de 25 g.mL-1. Palavra chave: ftalil aminocidos: antitumoral e antiinflamatrio INTRODUO Diversas classes de compostos orgnicos despertam especial interesse devido versatilidade estrutural de suas molculas. Modificaes estruturais podem torn-las mais e ativas e menos txicas que os compostos prottipos. A Talidomida, derivado ftalimdico, foi introduzida como hipntico e sedativo, revelando propriedades antiinflamatrias e teratognicas.
O N N O O H O

Esquema 1: Estrutura qumica da ()Talidomida.

As imidas cclicas so compostos que contm o grupo CO-N(R)-CO-, sendo R um tomo de hidrognio, grupos alquila ou arila. Tais compostos podem ser divididos em subclasses, incluindo as maleimidas, succinimidas, glutarimidas, ftalimidas, naftalimidas, etc., e seus respectivos derivados.

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Por vrios anos, as ftalimidas, tm ressurgido e atrado ateno da comunidade cientfica, devido, principalmente, s suas potencialidades teraputicas tais como: hipolipidmica 1, hipotensiva 2, antiviral 3, antimicrobiana 4, anticonvulsiva 5, analgsica6 entre outras. Em 2002, Barreiro e colaboradores 6 descreveram a sntese de duas sries de derivados da ftalimida, planejados como novos anlogos aquirais da Talidomida, funcionalizados com as sulfonamidas e amidas (Esquema 3). A atividade antiinflamatria in vivo na dose de 10 mg/kg mostrou que os derivados do tipo sulfonamidas so mais potentes do que seus bioissteros, as amidas, e a abertura do anel isoindlico leva a inatividade frente a este ensaio biolgico. Para esta srie, o derivado LASSBio 468 revelou excelente atividade antiinflamatria, com o mecanismo de ao mediado pela modulao dos nveis de TNF-, sendo este derivado 50% mais potente que a talidomida.
O N N O O H
Hibridaao M o lecular

inib id or d o TNF-

O O N O S N O

de da

C H3 O C H3 O O S O

X
B ioissteros

Esquema 3: Planejamento novos anlogos Talidomida, proposto por Barreiro e colaboradores.

inib id or d a PDE-4

O O N O
X = S , LASS Bio-468

C N X

Sabendo-se tambm que alguns dos mais potentes compostos analgsicos e antiinflamatrios so cidos propinicos substitudos, derivados N-ftalimidas foram sintetizados por possuir tais propriedades. Ns planejamos uma srie de compostos derivados N-ftalimdicos contendo uma poro com L- Aminocidos. MATERIAIS E MTODOS Em balo de fundo redondo, imerso em banho de gelo (aproximadamente 0C), colocou-se o Ftalil-aminocido em diclorometano e deixou-se sob agitao at completa solubilizao do mesmo. Ento, adicionou-se o DCC, HOBt e a base (TEA), seguida a tiazolinona. Acompanhouse a reao por CCD e aps cerca de 4 horas desligou-a.
O O N CH C R
S DCC, HOBt N O TEA, DMF, OC, 2-4hs

+ CF3COO
OH

H3N

N H

O Resultados: S N CH C As reaes de obteno dos derivados N-ftaloil-aminocidos so simples, prticas e NH NH R econmicas, visto que no se utiliza solvente e que a reao se procede N rapidamente (30 O O minutos) com rendimentos timos;

R=H (FF-01) R = CH3 (FF-02) R = CH(CH3)CH2CH3 (FF-03) R = CH2CH2CO2H (FF-04)

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Nas tabelas abaixo temos os resultados das atividades antitumorais e antiinflamatrias. Compostos FF-01 FF-02 FF-03 FF-04 MDA/MB-435 -4.72(0.25) 5.01(22.38) 14.95(1.32) 12.92(5.96) %InibioSEM HCT-8 -0.61(2.30) 6.11(2.88) 15.02(3.67) 6.53(2.88) SF-295 3.98(15.39) 12.21(4.26) 20.00(6.01) 14.42(7.63)

Tabela 1: Atividade antiproliferativa dos compostos FF-01-04 em clulas MDA-MB435, HCT-8 e SF-295 na concentrao de 25 g/ml.

Os compostos foram testados em uma concentrao simples (25 g/ml) e a cultura foi incubada por 48h. Os resultados acima mostram que nenhum dos compostos sintetizados foi capaz de inibir os crescimentos das linhagens celulares tumorais na concentrao de 25 g.mL-1, j que uma droga para ser dotada de atividade antitumoral ela tem que inibir 32% ou mais das linhagens celulares.
Tabela 2: antiinflamatria FF-01-04 e

Nesta derivados (FF-01-04), o ativo contm a aminocida 03). Este inibiu a induo uma baixa dose com potncia comparada a da droga padro-base, a talidomida.

Compostos (100mg/Kg) Veculo FF-01 FF-02 FF-03 FF-04 Thl Thl(10mg/Kg) 5(10mg/Kg) 8(i.p)

% Inibio ------------45.50 38.43 65.50 61.70 72.13 76.30 64.70 76.00

PMNLa(105/cm3) (n=6; aps 6h)b 53.981.4 28.182.4 33.18 2.3 17.942.0 20.641.4 15.022.2 12.752.2 19.032.5 13.342.2

Atividade dos compostos talidomida (Thl).

srie de ftalimdicos composto mais poo isoleucina (FFcomposto inflamatria em de 10 mg/kg,

DISCUSSO Em sumrio, a grande dificuldade de nosso trabalho foi, justamente, a metodologia da condensao dos N-ftaloil-aminocidos com a tiazolinona (obtida no subprojeto 1) devido ao fato inovador das reaes de condensao dos Ftalilaminocidos com a tiazolinona, sendo esta de pouca reatividade bsica, a ausncia de uma metodologia especfica nos levou a desenvolver um estudo sistemtico de rotas sintticas.

CONCLUSO Uma srie de oito N-ftaloil-amnocidos foi sintetizada empregando uma metodologia simples e economicamente vivel; Dos produtos testados, os compostos N-(3-metil-cido pentanico)-1,3isoindolinadiona (FF03) e N-(3-fenil-cido propinico)-1,3-isoindolinadiona (FF-04) foram os mais ativos no teste do bolso de ar utilizando a dose de 100mg/Kg por via oral; Nenhum dos compostos apresentou atividade citotxica frente s linhagens tumorais, tambm no foi citotxica para linhagens das clulas de mamferos em ensaio in vivo. Seria fundamental importncia avaliar a toxicidade aguda in vivo para o derivado N-(3-metil-cido

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pentanico)-1,3- isoindolinadiona (5) e comparar com perfil de toxicidade para droga padro, talidomida; Realizar os ensaios de atividade imunomodulatria frente ao TNF-, como feramenta para elucidar os mecanismos de aes para estes compostos; Obter os derivados do tipo amida ( que so considerados bioissteros clssicos dos cidos carboxlicos) para estes derivados, utilizando as clssicas reaes de aminlise com cloroformiato de i-butila (IBCF) em meio bsico, na presena de amnia gasosa ( fornecida pelo refluxo de NH4OH). AGRADECIMENTOS Ao PIBIC e CNPq, pelo suporte financeiro. REFERNCIAS 1- (J. M. Charpman, S. D. Wyrick, P. J. Voorstod, J. H. Magner, G. H. Cocolas, I. H. Hall J. Med. Chem. 26 (1984) 237-245; 2- J. B. Press, W. B. Wright, P. S. Chan, J. W. Marisco, M. F. Hang, J. Tauber, A. S. Tomcufeik J. Med. Chem. 29 (1986) 816-825; 3- J. M. Holffman, J. S. Wai, C. M. Yhomas, R. B. Levin, J. A. OBrien, M. E. Goldman, J. Med. Chem. 35 (1992) 3784-3795; 4- G. Orzesko, B. Kaminska, A. Orzeszko, Il Farmaco 55 (2000) 619-712 J. Vamecq, K. van Derpoorten, J. H. Poupaert, E. de Clercq Life Sciences 63 (1998) 267-278; 5- R. Antunes, H. Batista, R. M. Srivastava, G. Thomas, C. C. Arajo Bioorg. Med. Chem. Lett. 8 (1998) 3071-85; 6- L. M. Lima, P. Castro, A. L. Machado, C. A. M. Fraga, C. Lugnier, V. L. G. de Moraes, E. J. Barreiro. Synthesis and Anti-Inflamamatory Activity of Phthalimides Derivatives, Designed as New Thalidomide Analogues. Bioorg. Med. Chem. 10 (2002) 3067-3073.