3. Invitado
Esta revista no se hace responsable por las ideas o conceptos de los autores cuyos trabajos se publican.
Se permite la reproducción parcial o total de esta publicación, siempre que se indique su procedencia.
Diseño de portada, cortesía del Br. Roberto Cáceres, Departamento de Microbiología, Escuela de Química Biológica.
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VOL. 4 No. 1 REVISTA CIENTÍFICA INSTITUTO DE INVESTIGACIONES QUÍMICAS Y BIOLÓGICAS
EDICION ESPECIAL FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACIA
AÑO 2009 UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA
PRESENTACIÓN
La Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia inmersa dentro de una institución de Educación
Superior pública como la Universidad de San Carlos de Guatemala, debe jugar un papel protagónico
dentro de las transformaciones requeridas en el país, inmerso desde principios de este siglo en la
“Sociedad del Conocimiento”, entendiéndola como un tipo de sociedad en la cual la creación de
conocimiento es una de las fuentes principales de la riqueza y del bienestar social de una nación y
en la que se debe transitar promoviendo el descubrimiento, la creación y la comunicación de
conocimientos sobre la ciencia, la naturaleza, la sociedad y el ser humano.
Por consiguiente, si la generación de conocimiento es la fuente principal de la riqueza y del bienestar,
las políticas de generación de conocimiento nuevo, son uno de los ejes fundamentales de la organización
política de estas sociedades.
Es por esto que es cada día más urgente la introducción de proyectos de investigación en el
proceso mismo de la enseñanza universitaria.
Esta edición nos presenta resultados generados por nuestras Unidades de Investigación en las
áreas de salud, ambiente y ciencia básica. No se pretende brindar únicamente información, conscientes
de que esta en sí misma no vale nada, hay que descifrarla, convertirla en ideas y procesos cerebrales
que sirvan de fundamento para generar nuevas investigaciones, que aporten conocimiento científico
nuevo y soluciones a la problemática nacional.
La fortaleza de nuestro sistema educativo depende de una nueva generación de investigadores de alta
calidad, cuya preparación exige un cambio cultural.
Por ello es que se están haciendo todos los esfuerzos posibles para transformar nuestro Personal
Académico en docentes-investigadores, invirtiendo en la formación doctoral de más de veinticinco
profesores, quienes al finalizar sus estudios enriquecerán nuestro incipiente Sistema de Investigación.
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Cóbar O.
Departamento de Química Orgánica, Laboratorio de Investigación en Productos Naturales
Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad de San Carlos de Guatemala
ocobar@usac.edu.gt
La Resonancia Magnética Nuclear es actualmente la técnica de rutina para determinar la estructura de moléculas
orgánicas. Esta determinación no solo incluye la conectividad de los átomos en la molécula, sino también la
configuración relativa de los centros quirales que esta posea (Jacobsen, N. 2007).
Los glicósidos son metabolitos secundarios ampliamente distribuidos en la naturaleza, reportándose su existencia
tanto en el mundo terrestre como marino (Cutler, S.; Cutler, H. 2002; Blunt, J. et al. 2009). Se les asigna una gran
variedad de actividades biológicas, que van desde antimicrobianos, cardiotónicos, antitumorales, hasta anti-
inflamatorios, siendo esta última la más reportada recientemente (Cutler, S.; Cutler, H. 2002).
Los extractos polares son ricos en glicósidos que poseen entre 2 y 6 unidades (en algunos casos más) de
monosacáridos. Aglicones monoglicosidados, generalmente acetilados en una o más posiciones del monosacárido,
se encuentran en las fracciones hexánicas o clorofórmicas de los extractos (Jones, W.; Kinghorn, D. 2006).
Existen trabajos recientes que permiten deducir sin ambigüedad la información estructural clave sobre la posición
de las distintas unidades de carbohidratos sobre un aglicón, vía el análisis de desplazamientos químicos, patrones
de acoplamiento y multiplicidad de las señales (Bagno, A. et al. 2007).
Rutinariamente, el desplazamiento químico de los protones, proporciona información sobre su ambiente químico,
estereoquímica relativa del centro quiral en donde se encuentra, e incluso, la constitución y conformación de la
molécula (Bose-Basu, B. et. al. 2007).
Combinando toda esta información y analizándola detenidamente como una identidad espectral, es posible conocer
la posición de las cadenas glicosidadas en el aglicón y la secuencia de monosacáridos en las mismas.
13
Lo anterior se realiza con ayuda de la información que proporciona el RMN- C y de los datos bidimensionales,
principalmente COSY, NOESY, HMQC y HMBC (Jiménez, C. 2008).
Normalmente, la identidad de los monosacáridos individuales, se deduce a través del análisis del hidrolizado
o
respectivo (HCl al 1N a 48-50 C durante tres horas para 0.5 mg del glicósido) por GC-MS quiral, utilizando
patrones puros de monosacáridos para comparar (Leavitt, A.; Sherman, W. 1982).
En este trabajo se pretende ilustrar de una manera simple, cómo elucidar la estructura de un diterpeno
monoglicosidado natural, aislado del gorgonio caribeño Eunicea sp., que posee propiedades citotóxicas (10-4-10-5
M contra varias líneas celulares cancerosas) y anti-inflamatorias a niveles comparables a indometacina (Cóbar, O.
et. al. 1997).
El glicósido muestra una fórmula molecular de C30H48O8, obtenido a partir del espectro de HRFABMS, que indica
la existencia de siete grados de insaturación.
El espectro infrarrojo muestra absorciones atribuibles a grupos hidroxilo (3438 cm-1) y éster carbonilo (1748 cm-1).
El espectro de RMN-1H (300 MHz en CDCl3) muestra a campo alto, la presencia de seis grupos metilos como singletes
a δ 1.22, δ 1.55, δ 1.56, δ 1.63, δ 2.05 y δ 2.11 (los dos últimos asignables a metilos localizados en grupos éster
acetato), cuatro grupos metileno (todos multipletes a δ 1.27, δ 1.65, δ 1.86 y δ 2.20) y un metino multiplete a δ 1.45.
A campo bajo se observan diez señales claramente resueltas: dos metilenos a δ 4.10 (dd, J = 2.4, 12.0 Hz) y δ 4.19
(dd, J = 6.1, 12.0 Hz) y ocho metinos a δ 3.41 (t, J = 8.46 Hz), δ 3.59 (ddd, J = 2.5, 6.1, 9.1 Hz), δ 3.68 (t, J = 9.16
Hz), δ 4.45 (d, J = 4.5 Hz), δ 4.87 (t, J = 9.8 Hz), δ 4.93 (t, J = 6.6 Hz), δ 5.00 (t, J = 6.7 Hz) y δ 5.07 (t, J = 6.7 Hz).
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Las demás señales están solapadas en la región comprendida entre δ 2.0 y δ 2.2 (Figura 1).
El espectro de RMN-13C (75 MHz en CDCl3) muestra siete metilos que resuenan a δ 15.3, δ 15.5, δ 15.6, δ 20.7 y
δ 20.9 (los dos últimos atribuibles a metilos sobre éster acetato), δ 24.0 y δ 24.5, ocho metilenos a δ 24.0, δ 24.7,
δ 28.2, δ 28.3, δ 37.8, δ 38.8, δ 39.4, y δ 62.8, nueve metinos a δ 47.7, δ 70.9, δ 71.6, δ 74.5, δ 74.7, δ 96.7, δ 125.1,
δ 125.7 y δ 125.8 y seis carbonos cuaternarios a δ 81.6, δ 133.1, δ 133.5, δ 134.1, δ 170.6 y δ 170.7 (los dos últimos
atribuibles a grupos carbonilo de éster acetato) (Figura 2).
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La existencia de un esqueleto diterpénico se deduce por la presencia de cinco grupos metilo no adscritos a éster
acetato, siete metilenos no-oxigenados, cuatro carbonos cuaternarios no atribuibles a grupos carbonilo, tres metinos
vinílicos y un metilo que absorbe a campo alto.
La resonancia en el espectro de RMN-13C a δ 96.7 (d) que puede asignarse a un carbono anomérico y cinco señales
en la región comprendida entre δ 62-75, sugieren la existencia de una hexosa en la molécula.
La presencia de un grupo acetal y numerosos carbonos oxigenados, analizados en conjunto con la fórmula molecu-
lar, son fuertes indicativos de la presencia de un fragmento de 10 átomos de carbono adicionales al diterpénico, lo
que sugiere que estructuralmente la molécula contiene una hexosa diacetilada unida a un aglicón diterpénico.
La elucidación vía RMN de la estructura y conformación de la hexosa, se inicia con el análisis de las correlaciones
1
que muestran los protones oxigenados en el espectro del 1H- H COSY (ver Figura 3).
Designando como “pivote” o “señal punto de partida” al protón anomérico, (δ 4.45, d, J = 7.65 Hz, H-1´), se
observa que correlaciona con el triplete ubicado a δ 3.41 (J = 8.7 Hz, H-2´) quien a su vez lo hace con la señal a δ
3.68 (t, 9.16, H-3´).
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La secuencia de correlaciones sucesivas continúa con el protón H-3´ por su correlación con el que resuena a δ 4.87,
(t, 9.67, H-4´) y este a su vez con el multiplete a δ 3.59 (ddd, 2.51, 6.14, 9.18, H-5´) y este con ambos protones H-
6´ (δ 4.10, dd, 2.46, 11.99/δ 4.19, dd, 6.14, 12.00). Finalmente, se observa la correlación entre ambos protones H-
6´ para terminar la secuencia.
Lo anterior nos permite asignar, sin ambigüedades, los protones asociados a la hexosa de la molécula.
Con los protones glicosídicos debidamente identificados, se procede a asignar los carbonos respectivos mediante
el análisis del espectro de 1H-13C HETCOR (CSCM) (ver Figura 4).
La conformación beta del enlace glicósidico entre la hexosa y la porción diterpénica de la molécula, se puede
inferir por el desplazamiento químico y constante de acoplamiento del protón anomérico (δ 4.45, d, J = 7.65 Hz),
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que claramente indica su posición axial. Un desplazamiento químico superior a 4.8 ppm y una constante de
acoplamiento 3JH-H menor de 4 Hz indica que la posición del protón anomérico es ecuatorial.
El espectro de PS-NOESY, específicamente en el área correspondiente a los protones del azúcar (ver Figura 5),
muestra correlaciones fuertes entre los protones H-1´ y H-3´, H-1´ y H-5´ , H-3´ y H-5´, H-2´ y H-4´, que
conjuntamente con la magnitud de las constantes de acoplamiento de dichos protones (3JH-H entre 6.5 y 9.1 Hz), son
evidencia inequívoca de la relación 1,3-diaxial que existe entre ellos.
Organizando la información espectral y las inferencias efectuadas hasta ahora, es posible asignar la presencia de
una glucosa en forma de piranosa y con una conformación beta en su enlace glicosídico.
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Queda ahora por determinar la posición de los dos grupos éster acetato que posee la molécula. El desplazamiento
a campo bajo de los protones H-4´ (δ 4.87) y H-6´ (δ 4.10 y δ 4.19), que normalmente se encuentran en la zona
de 3.5-3.0 ppm respectivamente en CDCl3 y las correlaciones encontradas entre los protones H-4´ y H-6´ con las
señales de RMN-13C a δ 170.6 y δ 170.7, adscritas a los grupos éster-carbonilo en el espectro de HMBC, localizan
respectivamente ambos grupos sobre los carbonos C-4´ y C-6´ del residuo glicosídico.
Hay que puntualizar que la aplicación rutinaria de RMN es un método no-quiral, por lo que no puede distinguir
entre las series “D” o “L” de un monosacárido.
Por convención, las hexosas de la serie “D” son aquellas que poseen el grupo hidroxilo sobre el carbono quiral de
mas alta numeración a la derecha en el sistema de proyección de Fischer (quedando ubicado el grupo CH2OH en
posición ecuatorial en la conformación de silla).
Los que lo poseen a la izquierda, se asignan a la serie “L”.
La utilización de reactivos desplazantes de Lantánido puede discriminar entre ellos. Teóricamente es posible hacerlo
debido al diasterotopismo causado por la inducción asimétrica, que en la práctica, requiere comparación con datos
de la literatura de moléculas con conocida configuración absoluta en su azúcar (Eliel E.; Wilen, S. 1994).
Basado en el análisis elucidativo efectuado, es confiable entonces asignar la porción glicosídica del glicósido-
diterpénico como β-D-4,6-diacetilglucopiranosa.
La identidad de esta hexosa fue confirmada por análisis del hidrolizado en una columna quiral por GC-MS
(Cóbar, O. et. al. 1997).
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RESUMEN
Fue evaluada la actividad de dos extractos del hongo comestible Grifola frondosa (Dicks.:Fr.) S.F. Gray, conocido
comúnmente como maitake sobre el sistema inmune humano. Se estudió la actividad inmunomoduladora de los extractos
acuoso y etanólico obtenidos del cuerpo fructífero del hongo sobre los linfocitos por medio de un ensayo linfoproliferativo y
fueron realizados ensayos hemolíticos in vitro para probar su influencia sobre las vías clásica y alterna del sistema de
complemento.
El ensayo de linfoproliferación fue realizado colocando linfocitos purificados expuestos a los extractos y cultivados
para una evaluación final colorimétrica con XTT, una sal de tetrazolio que es reducida a un compuesto coloreado y soluble por
la actividad enzimática mitocondrial presente en células vivas.
Para la evaluación de los extractos sobre el sistema de complemento fueron utilizados ensayos hemolíticos basados en
la ruptura de eritrocitos por el complejo de ataque a la membrana (CAM) generado tras la activación del sistema de complemento.
La absorbancia de la hemoglobina liberada por los eritrocitos fue el parámetro de medición de la actividad del sistema de
complemento.
Ambos extractos de G. frondosa mostraron actividad estimuladora de la linfoproliferación, observándose mayor actividad
en el extracto etanólico. Los bioensayos sobre el sistema de complemento demostraron una acción inhibitoria en ambos
extractos y sobre las dos vías del complemento, clásica y alterna.
SUMMARY
The activity on human immune system of two extracts obtained from the edible mushroom Grifola frondosa (Dicks.:Fr.)
S.F. Gray, commonly known as maitake, was evaluated. The immunomodulative activity of both extracts, aqueous and
ethanol, obtained from the fruitful body of the mushroom over human lymphocytes was studied by a lymphoproliferation
assay and also two in vitro hemolytic assays were performed to prove their influence over complement system, both classic
and alternative pathways.
Lymphoproliferation assay was performed with purified human lymphocytes exposed to the extracts and cultured for a
final colorimetric test by XTT, a tetrazolium salt that yields a coloured soluble compound when reduced by mitochondrial
enzymes from living cells.
To evaluate the extracts over complement system hemolytic assays were performed based on red blood cells lyses by
the membrane attack complex (MAC) which is formed by triggering the complement system.
Both extracts of G. frondosa showed stimulating activity to lymphocytes and more activity was observed in ethanol
extract. Complement assays showed inhibitory activity in both extracts over classic and alternative complement pathways.
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Cálculos
La actividad sérica fue calculada y
expresada como porcentaje de hemólisis, así como
la concentración inhibitoria al 50% (CI50). Se
realizó la gráfica de % de inhibición vrs. log de
concentración, con la recta de regresión lineal
obtenida y se extrapoló el valor del 50% de
inhibición para obtener la CI50.
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Tabla No.4
Ensayo hemolítico de la vía clásica del complemento
Se resalta la línea base, que es la obtenida por el con- Porcentaje de hemólisis de los eritrocitos en presencia del extracto
acuoso del hongo Grifola frondosa
trol positivo.
Fuente: Datos experimentales Dil Rep 1 Rep 2 Rep 3 Rep 4
1:3 18,21 17,90 16,82 18,83
1:9 27,16 28,70 23,77 24,23
Determinación de actividad sobre el sistema de 1:27 28,86 29,78 30,25 31,33
complemento 1:81 32,72 31,33 31,48 31,33
Fueron realizados dos ensayos para 1:243 35,96 36,42 36,27 36,11
1:729 34,72 37,96 36,88 35,96
determinar la actividad de los extractos etanólico 1:2187 39,20 35,49 39,04 34,88
y acuoso del hongo sobre la vía clásica y la vía Fuente: Datos experimentales
alterna del complemento. En cada una de las vías
se corrieron cuatro repeticiones utilizando 7 En la vía alterna los resultados fueron
diluciones (1:3, 1:9, 1:27, 1:81, 1:243, 1:729 y parecidos, aunque en ésta el porcentaje de
1:2187), con una concentración inicial del extracto hemólisis del suero activo en presencia del hongo
de 500 g/mL. superó el 50%, no duplicó el porcentaje de
El porcentaje de hemólisis de los actividad del suero sin el hongo. Para la vía alterna
eritrocitos en la vía clásica del complemento no la actividad hemolítica del suero sin la adición del
alcanzó el 50% para ninguno de los dos extractos extracto etanólico fue de 56.9%, y para el extracto
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acuoso fue de 61.1%. Las tablas No.5 y 6, Yamada y colaboradores, se demostró que la
muestran que la actividad del suero aumenta fracción D posee actividad antitumoral debido al
conforme se reduce la concentración del hongo aumento en la concentración de IL-1, así como
en ambas vías. por el incremento en la producción de macrófagos,
Muchas investigaciones han reportado que G. linfocitos T que exhiben citotoxicidad específica
frondosa y sus extractos poseen una remarcada contra antígeno y células NK. Por otra parte, en
actividad antitumoral por activación del sistema este estudio se observó un detrimento en la
inmune. En esta investigación se demostró el respuesta hipersensible, la cual fue asociada a la
efecto in vitro de los extractos sobre los linfocitos supresión del crecimiento tumoral (3, 4).
humanos y sobre el sistema de complemento. Adachi y colaboradores realizaron
Ambos extractos indujeron la proliferación de investigaciones sobre como uno de los compuestos
linfocitos e inhibieron la actividad hemolítica del extraídos a partir del cuerpo fructífero de este
complemento. hongo, una glucoproteína denominada MT – 2,
aumenta la actividad de células del sistema inmune
Tabla No.5 en ratones. Estos investigadores descubrieron que
Ensayo hemolítico de la vía alterna del complemento la administración intraperitoneal de dicho
Porcentaje de hemólisis con el extracto etanólico de G. frondosa
compuesto incremento entre 50% y 80% la
Dilución Rep 1 Rep 2 Rep 3 Rep 4 cantidad de linfocitos T, y de un 80 % a un 200 %
1:3 59,73 58,36 55,89 62,88
1:9 61,78 62,19 63,29 68,77
la cantidad de células NK (5).
1:27 64,93 64,11 64,25 71,51 Se publicó que la fracción D, al ser
1:81 65,75 66,58 66,99 72,88 administrada por vía oral a pacientes con SIDA,
1:243 68,77 68,36 69,86 75,34
1:729 70,41 72,05 74,47 76,03 indujo a un incremento en las células T, mientras
1:2187 75,75 78,36 79,73 81,92 que en otros se interrumpió la disminución de estas
células. Shidima y colaboradores usaron la
Tabla No. 6 fracción D como terapia complementaria para
Ensayo hemolítico de la vía alterna del complemento
Porcentaje de hemólisis de los eritrocitos en presencia del
perros con cáncer tratados con cirugía y/o
extracto acuoso del hongo Grifola frondosa quimioterapia. En este estudio, la fracción D
condujo, en el 59 % de los casos, al incremento
Dilución Rep 1 Rep 2 Rep 3 Rep 4
1:3 51,10 52,61 53,12 54,76
de la fracción linfocítica en sangre periférica,
1:9 55,14 57,42 55,78 60,08 induciendo la producción de citokinas
1:27 62,10 61,72 61,72 66,27 relacionadas a la activación de la respuesta inmune
1:81 64,00 66,15 64,50 66,02
1:243 69,18 71,21 69,06 71,59 celular. En 85% de los casos con un incremento
1:729 72,34 73,99 73,10 75,13 en la fracción linfocítica, no se observó recurrencia
1:2187 78,41 78,04 75,51 80,56 durante un período de 10 meses de observación.
Fuente: Datos experimentales En contraste, en los casos sin aumento de la
fracción linfocitica, en la mayoría se observo
Los resultados aquí expuestos, concuerdan con recidivas (6, 7).
una serie de hallazgos publicados por otros Este estudio logró determinar que los
investigadores. En los estudios realizados con extractos de G. frondosa aumentan la proliferación
animales por Hishida y colaboradores, y por de linfocitos in vitro, entre 1.2 y 1.6 veces. Esto
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concuerda con los datos reportados por Namba y unión a las membranas biológicas, inhibiendo la lisis
colaboradores en 2000, en un estudio realizado de los eritrocitos. Sin embargo para demostrar esto
para evaluar el efecto de la fracción D en pacientes debe hacerse evaluaciones por medio de otro tipo de
con VIH. A pacientes confirmados con VIH se ensayo (9).
les monitoreó el conteo de CD4, medición de Reconociendo la limitante de que se trabajó
carga viral, síntomas de infección por VIH, con extractos crudos, el presente trabajo aporta datos
estatus de enfermedades oportunistas, y suficientes para justificar investigaciones posteriores
sensación de bienestar. Después de administrar dirigidos por un lado a determinar los principios
fracción D por 360 días, se reportó en 20 activos y sus mecanismos de acción, y por otro realizar
pacientes un incremento en el conteo de CD4 de ensayos in vivo necesarios para establecer la
actividad del hongo en modelos animales, así como
entre 1.4 y 1.8 veces, así mismo, se reporto en
el diseño de ensayos clínicos.
10 pacientes un descenso en la carga viral. En
adición, el 85% de los pacientes reportaron un
incremento en su sensación de bienestar, con REFERENCIAS
respecto a varios síntomas y enfermedades
secundarias causados por el VIH (8). 1. Hobbs C. Medicinal Mushrooms an Exploration
Nosotros encontramos una diferencia of Tradition, Healing, and Culture. 2 ed. Londres:
estadísticamente significativa entre la actividad de Botanica Press, 1995. 208p.
ambos extractos, siendo el extracto etanólico el que
mostró mayor actividad. Varios investigadores, como 2. Zhunag C, Solomon PW. Medicinal Value of
Kato en 1983, Ohno en 1986, Suzuki en 1984, Iino en Culinary – Medicinal Maitake Mushroom Grifola
1985 y Mizuno en 1986, utilizaron diferentes solventes frondosa (Dicks.:Fr.) S.F. Gray
orgánicos para extraer los polisacáridos contenidos en (Aphyllophoromycetideae). Review. Int J Med
el cuerpo fructífero de G. frondosa, logrando purificar Mushr 2004; 6:287 – 313.
varios tipos de compuestos con actividad antitumoral
e inmunomoduladora (2). 3. Hishida I., Nanba H., Kuroda H. Antitumor ac-
En cuanto a su actividad sobre el sistema de tivity exhibited by orally administered extract
complemento, los resultados demuestran que la from fruit body of Grifola frondosa (Maitake).
presencia del hongo Grifola frondosa está Chem Pharm Bull 1988; 36: 1819 – 1827.
fuertemente ligada a una acción inhibitoria del en
ambas vías (clásica y alterna). Debido a que ambas 4. Yamada Y., Nanba H., Kuroda H. Antitumor ef-
vías del complejo de ataque a la membrana (CAM) fects of orally administered extracts from fruit
se ven inhibidas, es posible que la regulación del body of Grifola frondosa. Chemoterapy 1990;
complemento ocurra a partir del complejo C3 común 38:790 – 796.
para ambas vías. La acción reguladora del hongo
puede estar relacionada con la activación de la 5. Adachi K., Nanba H., Korouda H. Potentiation
proteína de unión C4 (C4bp) y el factor I, encargados of host-mediated antitumor activity in mice by
de la regulación de C4b o bien, otro punto de Beta – glucan obtained from Grifola frondosa
regulación puede estar relacionado con la activación (Maitake). Chem Pharm Bull 1987; 35: 262 –
de las proteínas vitronectina, clusterina o el factor J, 270.
que interactúan con el complejo C5b67 evitando su
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Inventario de mercurio metálico presente en hospitales públicos y privados con capacidad mayor
de 50 camas, ubicados en la Ciudad de Guatemala
RESUMEN
El mercurio (Hg) es un metal líquido a temperatura ordinaria, además de ser el único metal conocido que
se mantiene líquido a 0ºC. Todas sus formas (fundamental, orgánica e inorgánica) son tóxicas, con una
especial afinidad por el riñón y el sistema nervioso (9:719; 21). Aún siendo tóxico tiene bastantes
aplicaciones en el sector salud, de ahí la importancia de realizar un inventario de este metal en los hospitales
públicos y privados con capacidad mayor de 50 camas, ubicados en la Ciudad de Guatemala, por tratarse
de los centros del cuidado de la salud más grandes.
El estudio fue de tipo descriptivo y la información fue recolectada a través de una encuesta al personal de
cada uno de los servicios de los hospitales participantes, a través de la cual se identificaron las fuentes de
mercurio metálico presentes en cada uno de los servicios y se cuantificó el número de cada una de ellas.
Posteriormente, con datos teóricos, se procedió a convertir las unidades contadas de cada uno de los
focos del metal en cuestión en gramos, para presentar los resultados en dicha unidad, mostrando así la
cantidad de mercurio metálico presente en cada uno de los hospitales, por fuente y por la totalidad de los
12 hospitales incluidos en el estudio (8 públicos y 4 privados).
El resultado del inventario realizado fue de 26,781 g (26.781kg) de mercurio metálico en los 12 hospitales
participantes. La principal fuente de mercurio metálico fueron los esfigmomanómetros (39.09%), seguido
por los termómetros (23.15%) y el mercurio utilizado en la colocación de amalgamas dentales (21.26%).
Se encontró una relación lineal directa entre el número de camas de los hospitales y la cantidad de
mercurio en cada uno de ellos, ésta última también relacionada con la variedad de especialidades con las
camas que cada centro asistencial cuenta. También se pudo concluir que los servicios de odontología,
emergencia, intensivo, cirugías y bodega son en general las áreas hospitalarias con mayor carga de mercurio
metálico.
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ultravioleta), mercurio metálico utilizado en termómetros óticos y frontales también están siendo
amalgamas dentales y aparatos interruptores utilizados como alternativa a los primeros en
(tubos de rayos X, baróstatos de sistema de vacío mención en la minoría de los casos, el instrumento
y de calderas, switches de plataforma de con mercurio no ha sido sustituido en su totalidad.
calentamiento y termostatos). Estas alternativas se emplean únicamente en
determinadas áreas, siendo una de ellas, pediatría.
La cantidad de unidades de esfigmomanómetros
no es muy elevada, pero debido a la considerable Todos los hospitales incluidos en el estudio
cantidad de mercurio metálico que contienen contienen mercurio metálico correspondiente al
(aproximadamente 81g por cada unidad) (12), alumbrado, esto posiblemente, a que en el mercado
incrementa la contribución de los niveles del metal aún no se cuenta con lámparas fluorescentes libres
pesado en cuestión, aún cuando la mayoría de los de dicho metal, solamente hay alternativas con
hospitales participantes en el estudio utilizan menor contenido del mismo. Los centros
esfigmomanómetros anaeroides en mayor asistenciales A (191.2g), K (162.3g) y L (33.4g)
proporción que los de mercurio. Estos resultados son los que mostraron el mayor contenido de
presentan similitud parcial con lo encontrado en mercurio relacionado con el alumbrado, debido a
los inventarios de mercurio realizados en 1999 en que son los de mayor tamaño e iluminación. En
seis hospitales del norte de California (14), ya que número, ésta fue una de las fuentes más abundantes,
los esfigmomanómetros fueron las principales pero por su bajo contenido del metal (0.006625g
fuentes de mercurio en estos centros. en promedio) las cantidades en gramos no son tan
elevadas, como para las otras fuentes.
Con el inventario solamente se encontraron sondas
Senkstaken Blakemore como fuentes Los termómetros y las lámparas fluorescentes
gastroenterólógicas, pues este tipo de fuente ha sido fueron las únicas fuentes de mercurio elemental
sustituida por materiales no tóxicos, como tungsteno; que se encontraron en los 12 hospitales.
observándose que los hospitales J (20g), K (60g) y
L (20g) fueron los únicos que cuentan con ellas. El inventario permitió determinar que en general
los servicios hospitalarios con mayor contenido
Los manómetros, clasificados como fuentes no de mercurio metálico fueron los de cuidados
clínicas, están presentes solamente en 5 de los intensivos, emergencias, área de odontología,
hospitales participantes en el estudio, siendo el B cirugías y desde luego el área de bodega, pues
el que hace mayor uso de ellos (800g). cuenta con los suministros de los hospitales. Del
servicio de odontología es importante mencionar
Los 12 centros asistenciales utilizan termómetros de que en los 5 hospitales que cuentan con dicha área,
mercurio para control de la temperatura corporal de ésta constituye el sitio con mayor concentración
los pacientes, siendo los hospitales K (1384g) y L del citado metal pesado.
(2723g) los que cuentan con mayor cantidad de los
mismos. Algunos de los nosocomios no requieren Los resultados de este estudio proporcionan
grandes cantidades de esta fuente de mercurio información sobre la cantidad de mercurio metálico
metálico, pues los usan eventualmente. Los que se utiliza en 12 de los hospitales más grandes de
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la Ciudad de Guatemala, la cual puede ser útil para y privados anualmente para tener un dato
conocer el riesgo de exposición y contaminación con actualizado sobre la presencia del metal pesado
este metal, y hacer un llamado para controlar las en los centros asistenciales e ir determinando
emisiones de este material tóxico y establecer su disminución al unirse los hospitales a la
controles del mismo e ir disminuyendo poco a poco Campaña Mundial de eliminación de mercurio
el uso que se le está dando. en el sector salud.
• Cotizar y realizar un análisis económico para
CONCLUSIONES evaluar la factibilidad de los hospitales de
sustituir las fuentes de mercurio por las
1. El inventario de mercurio metálico realizado alternativas libres del mismo.
en 12 hospitales (8 públicos y 4 privados) • Fomentar la creación de empresas que se
reveló que la cantidad de mercurio metálico dediquen al reciclaje de lámparas
presente en conjunto es de 26.781kg. fluorescentes, mientras aparecen alternativas
2. Los esfigmomanómetros son la principal totalmente libres del metal en cuestión.
fuente de mercurio metálico en los hospitales • Implementar una ley nacional o política
participantes, representando el 39.09% de la pública que favorezca la eliminación del
totalidad del mercurio metálico contabilizado. mercurio de todas aquellas fuentes del
3. Los termómetros y el mercurio utilizado en mismo que puedan ser sustituidas por
la colocación de amalgamas dentales son la alternativas menos peligrosas y de igual o
segunda y tercera fuentes principales de similar eficacia.
mercurio metálico en los hospitales
incluidos en la investigación, mostrando AGRADECIMIENTOS
23.15% y 21.26% del total detectado,
respectivamente. Agradecimiento especial a las autoridades y per-
4. Los servicios de odontología, emergencia, sonal de los 12 hospitales sin cuya valiosa
intensivo, cirugías y bodega son en general colaboración este estudio no hubiera podido
las áreas hospitalarias con mayor carga de llevarse a cabo. Se mencionan sin un orden
mercurio metálico. específico:
Hospital Centro Médico Militar, Hospital Gen-
RECOMENDACIONES eral San Juan de Dios, Hospital Antituberculoso
“San Vicente”, Hospital de Salud Mental “Dr.
• Realizar estudios de emisiones de mercurio Carlos Federico Mora”, Hospital Nacional de
en el ambiente, principalmente a nivel de aire, Ortopedia y Rehabilitación de Lisiados “Dr.
agua, peces y sedimentos marinos. Jorge Vohn Ahn”, Hospital Infantil de
• Capacitar al personal de salud sobre la forma Infectología y Rehabilitación, Unidad de
adecuada de recolectar los desechos de Cirugía Cardiovascular de Guatemala
mercurio, dónde y cómo colocarlos para su (UNICAR), Sanatorio Nuestra Señora del Pi-
posterior tratamiento. lar, Sanatorio Hermano Pedro, Hospital Centro
• Realizar inventarios de mercurio metálico, Médico, Hospital Privado de las Américas y
orgánico e inorgánico en hospitales públicos Hospital Roosevelt.
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ANEXOS
Tabla No. 1: Esta tabla muestra los resultados totales (en gramos) del inventario de mercurio metálico,
clasificando los datos por fuente de mercurio metálico, por hospital y presentando también la cantidad
total por todos los centros asistenciales estudiados. Además, se presentan los porcentajes de mercurio
metálico que corresponden a cada tipo de fuente con base en el total encontrado (26781g) y a cada
hospital.
Gráfica No. 1
A continuación se observa una gráfica de barras mostrando las frecuencias de mercurio metálico (en gramos) encontradas
en cada uno de los hospitales estudiados, pudiéndose notar la diferencia existente entre cada uno de ellos.
Gramos de mercurio
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Gráfica No. 2
Esta gráfica permite observar las frecuencias de mercurio metálico encontradas en los 12 hospitales participantes en el
estudio, permitiendo comparar la cantidad correspondiente a cada tipo de fuente del metal en cuestión.
Gramos de mercurio
Gráfica No. 3
A continuación se observa una gráfica de dispersión en la que se relacionan las variables número de camas y gramos de
mercurio metálico para los 12 hospitales participantes en el estudio. Además, se muestra la línea de tendencia, notándose
una relación lineal directa entre las variables.
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RESUMEN
Se presenta una revisión bibliográfica de las publicaciones sobre macrohongos, en las cuales se identificaron especies de
gasteromycetes de Guatemala, en un lapso de 60 años (1948 a 2008). En este período, solamente se documentaron 21 especies
pertenecientes a 12 géneros, con un acumulado de 0.35 especies/año. Además, se presentan nuevas localidades para las
especies citadas, como producto de la revisión de especimenes herborizados. Con estos datos se realizo un análisis de la
distribución, hábitat y localidades de los géneros y especies, enfatizando la importancia de continuar el estudio tanto de
distribución, como de ecología de este grupo de hongos.
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“Ruben Mayorga Peralta”, del Departamento de conformado por tesis de graduación, así como informes
Microbiología, Escuela de Química Biológica, finales de investigación y documentos publicados por
Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, utilizando la Universidad de San Carlos, como producto de
las técnicas estándar en micología (Largent, 1977). Las investigaciones realizadas. En este sentido, se deben
esporas se midieron en KOH al 5%. Las especies y la impulsar las publicaciones internacionales, con el fin
sinonimia se revisaron de acuerdo con el Index de incluir las especies del país, dentro de los listados
Fungorum (http://www.indexfungorum.org/Names/ de la biodiversidad fúngica mundial.
Names.asp). Hasta el año 2008, no se cuenta con ninguna monografía
de este grupo de hongos, sin embargo, algunos géneros
RESULTADOS Y DISCUSION como Calostoma y Scleroderma, cuentan con datos y
recolectas suficientes como para elaborar documentos
La revisión bibliográfica comprendió un período de
que traten sobre las especies del país.
60 años, contados a partir de la primera publicación
En cuanto a la acumulación de especies, solamente se
referente a macrohongos, que data del año 1948, hasta
reportan 0.35 especies/año, dado que se ha
el 2008. Las especies de gasteromycetes enlistadas
documentado 21 especies en 60 años. Este dato es
fueron 21, pertenecientes a 12 géneros. En contraste,
indicativo de los pocos estudios realizados, lo cual
Costa Rica, posee un catálogo de 103 especies
contrasta con la gran diversidad de macrohongos con
inventariadas hasta el año 2005 (Calonge, et al, 2005),
que cuenta el país. Si los reportes siguen la tendencia
en tanto que México, cuenta con aproximadamente 200
actual, harán falta muchos años para conocer la
(Esqueda-Valle, M, et al, 2000).
totalidad de riqueza que conforma este grupo de hongos
Cyathus olla, Lycoperdon perlatum y Scleroderma
en nuestra región.
verrucosum, fueron las especies de más amplia
Respecto a las especies que fueron encontradas en
distribución, encontrándose en diferentes tipos de bosques
nuevas localidades, éstas muestran un patrón de
y localidades. Dentro de las especies con distribución
distribución relacionado con el tipo de vegetación. Así,
restringida se encuentran Calostoma cinnabarinum y
Calostoma cinnabarinum (Fig. 1) antes reportado solo
Tulostoma brummale, así como Lycoperdon marginatum
para Baja Verapaz ahora también se sabe que se
y varias especies de Geastrum, por lo que hace falta
encuentra en los bosques nubosos de Quiché. De igual
realizar más estudios para documentar la mayor cantidad
forma, Calvatia cyathiformis (Fig. 2), Geastrum
de datos posible, con el fin de determinar la distribución
pectinatum, y Pisolithus arhizus, anteriormente
real de cada una de las especies de gasteromycetes que se
reportados solo para el departamento de Guatemala,
desarrollan en Guatemala (Tabla 1).
también se encuentran en Huehuetenango y
Por otra parte, el mayor número de reportes se ha
Totonicapan, así como en Chimaltenango y
realizado en el bosque de Pinus-Quercus, bosque de
Chiquimula, respectivamente.
Pinus, bosque tropical y bosque nuboso, con un
Por otra parte la distribución de Lycoperdon
mínimo en el bosque de Abies guatemalensis. No
marginatum restingida al departamento de San Marcos,
existen reportes de gasteromycetes en las zonas áridas
ahora se amplía a regiones de Quetzaltenango y
o semiáridas del país, puesto que aún no se tiene
Huehuetenango. Este último, también constituye una
información de géneros como Batarrea y Podaxis, los
nueva área de distribución para L. perlatum (Fig. 3).
cuales típicamente se encuentran en este tipo de hábitat
Por lo anterior, se puede inferir que las especies
(Calonge, 1998).
fúngicas se distribuyen en su mayoría en las zonas del
En cuanto a las publicaciones en las cuales se citan
altiplano y están directamente relacionadas con la
especies de gasteromycetes, solo existen dos en revistas
vegetación, en este caso con los bosques de Pinus sp,
extranjeras, (Sharp, 1948; Sommerkamp & Guzmán,
P. oocarpa, Quercus sp, Abies guatemalensis y
1990), mientras que el resto de documentos está
Cupressus lusitanica (Tabla 2).
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1
DP: Departamentos: Avz = Alta Verapaz, Bvz = Baja Verapaz, Chi = Chimaltenango, Esc = Escuintla, Gua = Guatemala, Hue = Huehuetenango, Izb = Izabal,
Pet = Petén, Qtz = Quetzaltenango, Sac = Sacatepéquez, Sam = San Marcos, Tot = Totonicapán. 2 Vegetación: P-Q = Pinus-Quercus, BN = Bosque nuboso,
BT = Bosque tropical, P = Pinus, Ag = Abies guatemalensis. *ND = no indicado.
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Tabla 2. Nuevas localidades para algunas especies de gasteromycetes citadas para Guatemala.
1
Departamentos: Chi = Chimaltenango, Hue = Huehuetenango, Chq = Chiquimula, Qtz = Quetzaltenango, Tot = Totonicapán.2 Vegetación: P-Q = Pinus-
Quercus, Ag = Abies guatemalensis, P-Ag = Pinus-Abies guatemalensis, C = Cupressus lusitanica, P = Pinus, Po = Pinus oocarpa.
Con relación al número de especies por género, Tabla 3. Número de especies por género.
Geastrum y Lycoperdon cuentan con 4 especies cada
uno, seguido por Scleroderma con tres especies, Géneros No. especies Porcentaje
Laternea con dos especies y los ocho géneros restantes Geastrum 4 19.0 %
poseen solamente una especie. Por otra parte, existe
un gran número de géneros cuya presencia aún no se Lycoperdon 4 19.0 %
ha documentado en el país. Estos datos contrastan con Scleroderma 3 14.2 %
lo reportado para otros países de la región, entre ellos
Laternea 2 9.4 %
Costa Rica, que cuenta con 18 especies de Geastrum,
16 de Cyathus y 9 de Lycoperdon (Calonge, et al, Astraeus 1 4.8 %
2005), en tanto que México posee 14 especies de Calostoma 1 4.8 %
Geastrum (Pérez-Silva, et al, 1999).
Calvatia 1 4.8 %
Se puede observar que el departamento más rico en Crucibulum 1 4.8 %
especies de gasteromicetes es Guatemala, seguido por
Huehuetenango y Totonicapán, siendo Quiche el de Cyathus 1 4.8 %
menor riqueza. Cabe mencionar que estos datos pueden Pisolithus 1 4.8 %
contener un gran sesgo debido a que la mayor cantidad Tulostoma 1 4.8 %
de muestreos se ha realizado en estos tres
departamentos. Por otra parte, de los 22 departamentos Vascellum 1 4.8 %
que conforman el país, solamente existen datos para
14 de ellos, quedando un vacío de información para
los 8 restantes.
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1 2
Figuras 1-3. 1. Calostoma cinnabarinum. Se identifica por el basidioma de color anaranjado hasta rojo carmín. Presenta un
pseudoestípite perforado, con una cabeza globosa. Ejemplares recolectados en Macalajau, Uspantán, Quiche. 2. Calvatia
cyathiformis. Basidiomas jóvenes y adultos con el característico exoperidio beige purpuráceo, con pseudoestípite. Ejemplares
recolectados en el departamento de Huehuetenango. 3. Lycoperdon perlatum. Basidiomas subglobosos a piriformes con
exoperidio ornamentado con espinas cónicas. Ejemplares recolectados en el departamento de Huehuetenango.
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Alonzo L, Arroyo G, Benito M, Duarte A, Matta V, Nave F, Pernilla L, Polanco S, Rodas G, Ruiz R.
Escuela de Química Biológica, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia,
Universidad de San Carlos de Guatemala
RESUMEN
Con el objetivo de determinar la relación que existe entre la presencia de Helicobacter pylori en biopsia con las
patologías gástricas detectadas por endoscopias, se realizó la presente investigación. Para ello se recopilaron datos de 1468
pacientes que se sometieron a este procedimiento y a quienes se le realizó biopsia gástrica en busca de la bacteria.
La recolección de datos se efectuó por consulta de los registros médicos de los pacientes evaluados por los
gastroenterólogos que colaboraron con el presente estudio y se obtuvo información acerca de: edad, género, diagnóstico y
presencia o ausencia de Helicobacter pylori en la biopsia realizada.
Del total de 1468 pacientes, se encontró que 536 (36.5%) fueron hombres y 932 (63.5%) mujeres. Los resultados
para Helicobacter pylori fueron positivos en 778 pacientes (53%) y negativos en 690 (47%). La patología gástrica que se
observó con mayor frecuenica fue la gastritis crónica no atrófica en 415 pacientes (28.2%) seguida de la gastritis no especificada
por el médico en 294 pacientes. El rango de edad en la que se presentó una mayor proporción de infección con Helicobacter
pylori, fue de 41 a 50 años, no encontrando diferencia entre la presencia de Helicobacter pylori y el género.
Se considera importante y necesario que en Guatemala se emplee una clasificación estándar para futuros estudios,
como la clasificación de Sydney para determinar la presencia de Helicobacter pylori y su consiguiente implicación en el
desarrollo de una patología gástrica, especialmente cáncer.
En conclución, el 53% de los pacientes que se sometieron a una endoscopía presentaron un resultado positivo para la
presencia de Helicobacter pylori (778/1468), porcentaje bastante alto y que correlaciona con el porcentaje de positividad encontrado
en la población.
INTRODUCCIÓN
La infección ocurre a nivel mundial pero
Helicobacter pylori es una bacteria con muestra grandes variaciones geográficas. En los
forma de espiral, Gram negativo, móvil, curva, países en vías de desarrollo puede llegar a ser tan
presente en la mucosa gástrica. Coloniza las muco- alta como el 90%, mientras que en los países
sas no secretoras de ácido del estómago y de la parte desarrollados esta es menor y oscila entre el 25 y
alta del tracto intestinal, incluyendo el duodeno [1]. el 50 %[2]. Se estima que la infección es adquirida
antes de los diez años y que la prevalencia aumenta
Es una bacteria microaerofílica que se con la edad, sin embargo en países en desarrollo y
cultiva en medios con baja tensión de oxígeno (3- con condiciones socioeconómicas bajas, la tasa
15%) y alta concentración de CO2 (3 – 10%). Al de infección en niños es muy elevada, llegando
microscopio se observa con colorantes hasta un 80% [3-4].
cromogénicos, por ejemplo bromuro de etidio,
mostrando imágenes muy definidas sobre su El modo de transmisión no ha sido del todo
morfología. definido, pero existen evidencias que sugieren una
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transmisión de persona a persona y por ingesta de poblaciones de 11 países europeos, Japón y los
comida o agua contaminada. Aunque no se conoce Estados Unidos se encontró una estrecha relación
un reservorio animal para Helicobacter pylori ha entre las prevalencias entre estas dos patologías,
sido aislado a partir de gatos. estimándose que el 10% de incremento en la
prevalencia de la infección se asociaba con el 27%
Su prevalencia depende en gran medida de de aumento del cáncer gástrico [9]. Además, el
factores ambientales y del hospedero, por lo que linfoma (MALT) de células B puede experimentar
afecta en mayor medida a países en desarrollo, y se una regresión después de la erradicación del H. py-
considera una enfermedad socioeconómica. lori, lo que ha sugerido que esta bacteria puede jugar
un papel etiológico en este tipo de linfoma [10].
Helicobacter pylori es moderadamente
invasivo y coloniza la superficie de la mucosa gástrica. En Guatemala existe poca información que
El microorganismo se protege de los ácidos relacione las patologías de tipo gástrico detectadas
estomacales gracias a la propia capa de mucus gástrico, por endoscopía con la presencia de Helicobacter
después de la colonización y una combinación entre pylori, por lo que se consideró importante realizar
la producción de sustancias patógenas y la propia este estudio con el fin de establecer esta
respuesta del hospedero produce inflamación, asociación.
destrucción de tejido y ulceración [1].
MATERIALES Y MÉTODOS
Las patologías con las que se asocia con más
frecuencia son la gastritis en sus variedades crónica Para el estudio se contó con la colaboración
activa, folicular, erosiva y atrófica. Se considera que de médicos gastroenterólogos de clínicas privadas
más que comprometer el funcionamiento de la mu- de la ciudad de Guatemala. Se solicitó la información
cosa gástrica, el daño provocado más bien induce sobre los resultados de obtenidos en la endoscopía y
cambios malignos en ella [5]. de la investigación de H. pylori por biopsia.
Estudios epidemiológicos indican que las Durante el período de enero a agosto del
gastritis crónicas debidas a infecciones por 2008 se obtuvo una muestra constituida por 1,468
Helicobacter pylori que no han sido tratadas, pueden pacientes. La recopilación de datos fue en Excel,
determinar la aparición de cánceres gástricos por el incluyéndose información sobre edad, género,
daño causado a la mucosa gástrica, lo que ha llevado diagnóstico de patología gástrica y presencia o
a que en junio del 1994 la Agencia Internacional de ausencia de Helicobacter pylori en la biopsia.
Investigaciones del Cáncer-OMS reconociera al H.
pylori como carcinógeno del grupo I, el rango de El diseño del estudio fue de tipo
peligrosidad más alto otorgado [6-8]. descriptivo, retrospectivo y para el análisis de
datos se relacionaron los parámetros anteriores.
Por otro lado se ha encontrado mucha
similitud entre la epidemiología de la infección por RESULTADOS
H. pylori y la del cáncer gástrico. En un estudio
realizado por el grupo EUROGAST en 17 Los resultados de los 1468 pacientes
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fueron tabulados y los diferentes diagnósticos Del total de 1468 pacientes, 536 (36.5%)
agrupados según la clasificación Sidney para gas- fueron hombres y 932 (63.5%) mujeres (Tabla 1).
tritis crónicas [11]. Para aquellas patologías que no En relación a los resultados para Helicobacter
entraban dentro de esta clasificación se agregaron pylori 778 (53%) fueron positivos y 690 (47%)
otras categorías. negativos.
Tabla No. 1. Resultado para Helicobacter pylori de acuerdo al género y patología gástrica encontrada
GC*: Gastritis Crónica. Fuente: Datos Experimentales ya que en conjunto representan el 47% de los casos
positivos (Tabla 2).
El rango de edad en el cual se observó
mayor positividad para H. pylori fue de 41-50 años
con 188 casos, correspondiente al 12.8%. Le sigue
el rango de 31 a 40 años con un total de 173 casos
lo que corresponde al 11.7 % (grafica 1).
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Positivo Negativo
Patología gástrica Total
No. % No. %
GC no atrófica 356 85.8 59 14.2 415
GC atrófica 21 43.8 27 56.2 48
GC de tipo química 9 3.9 219 96.1 228
GC erosiva 47 70.1 20 29.9 67
Gastritis inactiva e inespecífica 7 3.4 202 96.9 209
Otras gastritis crónicas mixtas 136 68.4 63 31.6 199
GC no especificada por el médico 198 67.4 96 32.6 294
Gastritis aguda 2 100 0 0 2
Adenocarcinoma 1 20 4 80 5
Endoscopía normal 1 100 0 0 1
Total 778 51.2 690 48.8 1468
Fuente: Datos experimentales
GC: gastritis crónica
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En conclusión, el 53% de los pacientes que 6. International Agency for Research on can-
fueron sometidos a una endoscopía presentaron cer. Schistosomes, liver flukes and
un resultado positivo para la presencia de Helicobacter pylori. Lyon: JARG.
Helicobacter pylori (778/1468) dato bastante alto 1994;61:177-241.
y que correlaciona con el porcentaje de
seropositividad encontrado en otros estudios para 7. NIH Consensus Conference. Helicobacter
la población en general. pylori in peptic ulcer disease. NHI Consen-
sus Development Panel on Helicobacter py-
AGRADECIMIENTOS lori in peptic ulcer disease. JAMA.1994;
272:65-69.
Por su colaboración y apoyo para el
desarrollo de la presente investigación a los 8. Hernández M. Helicobacter pylori. La bac-
doctores: Nery Mencos, Helio Lee, Luis Jerez, teria que más infecta al ser humano. Rev
Rolando Hernández, Luis Castillo, Carlos Oliva, Cubana Aliment Nutr 2001:15 (1): 42-54.
Erick Hernández Mogollón y Carlos Salvatierra. 9. Eurogast Study Group. An international as-
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sociation between Helicobacter pylori infec- 13. Asaka M et al. Gastric cáncer. En. Mobley
tion and gastric cancer. Lancet. LT, Menz GL and Hazelli SL. Helicobacter
1994.341:1359-62. pylori: physiology and genetics. American
Society for Microbiology Press, Washington
10. Graham DY. Evolution of concepts regard- DC. 2001. Pp 481-498.
ing Helicobacter pylori: from a cause gastri- 14. Tachiro J et al. Gastric cancer detected after
tis to a public health problem. Am. J. Helicobacter pylori erradication. Digestive
Gastroenterol.1994;89(4):469-72. Endoscopy. 2007; 19:167-173.
15. Huang JQ, et al. Metanalysis of the relation-
11. Gisbert J y Pajares García J. Tratamiento ship between CagA seropositivity and gastric
de las enfermedades gastroenterológicas. cáncer. Gastroenterology. 2003;125:1636.
Doc. Tec. AEG. 2004 octubre. 30 pp. 16. Sipponen P, Kekki M, Siurala M. The Sydney
System: epidemiology an natural history of
12. Breuer TH, Malaty D &raham Y. The epi- chronic gastritis. J. Gastroenterol Hepatol.
demiology of H. pylori-associated gas- 1991;6: 244-51.
troduodenal diseases. En: Ernst PB, 17. Sipponen P, Riihelä M, Hvvärinen H, Seppälä
Michetti P, Smith D. The Immunobiology K. Chronic nonatrophic (“superficial”) gas-
of H. pylori: from pathogenesis to preven- tritis increases the risk of gastric carcinoma.
tion. Lippincott-Raven Publishers. Philadel- Scand. J. Gastroenterol. 1994:29:336-40.
phia. 1997. Pp 1-14.
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Carrascoza F, Paz A,
Departamento de Citohistología
RESUMEN
La entrada del virus de inumunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1) a un linfocito Th CD4+ se inicia por la interacción del
trímero viral gp160, el cual contiene en su extremo la glicoproteína gp120. Ésta interactúa directamente con el receptor CD4
del linfocito y posteriormente el complejo CD4-gp120 reacciona con un correceptor presente en los linfocitos ThCD4+.
Esta investigación propone un mecanismo de reacción entre la glicoproteína gp120 en su segmento V3 al interactuar con el
segundo segmento extracelular en el correceptor CCR5, para ello se han utilizando programas computacionales de enlace
proteína-ligando para obtener detalles de las reacciones bioquímicas existentes entre estas regiones, con estos análisis se ha
podido explicar la orientación CCR5-gp120 que forma este complejo. Además se ha diseñado un modelo molecular
computacional que explica y es coherente con los resultados obtenidos entre esta investigación y las investigaciones previas.
Los resultados encontrados muestran que existen regiones en el segmento V3 de gp120 que interactúan con el segundo
segmento extracelular en CCR5, además de confirmar las regiones que interactúan en gp120 con los primeros 15 aminoácidos
del correceptor CCR5. Esta propuesta explica mejor lo que ocurre en las cepas X5, X5/R4 y R4 de VIH que seleccionan
entre diferentes correceptores (CXCR4 y CCR5 respectivamente) y sugiere que existen aminoácidos en V3 de gp120 cuya
función es la orientación específica a un enlace estabilizado por todas las regiones de reacción entre gp120 de VIH-1 y el
correceptor CCR5.
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– Algunas imágenes de gráfica molecular fueron producidas utilizando el programa UCSF Chimera package de el Resource for Biocomputing, Visualiza-
tion, and Informatics de la University of California, San Francisco (soportado por NIH P41 RR-01081).
10
Rango de mutación: Es un punto flotante desde 0 a 1, representando la probabilidad de que un gen particular sea mutado. Este parámetro generalmente es pequeño.
Rango de Traslape: Este es un numero variable desde 0 hasta 1 denotando el rango de traslape. El rango de traslape es el número esperado de pares en
la población que intercambiarán material genético. Corregir este valor a 0 torna el Algoritmo Genético en un método de programación evolucionaria (EP),
pero EP puede requerir probablemente un incremento concomitante en el rango de mutaciones del algoritmo genético con el objeto de ser eficiente.
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Gráfica No.2
Izquierda: Detalle de la conformación de la CORRIDA 1, Rango 1/100, se puede apreciar en detalle la conformación de CCR5 respecto a gp120, claramente
se encuentra posicionado entre V3, la hoja de enlace y la sección V1/V2. Esta es conformación elegida por el programa como Rango 1/100 lo que se
interpreta como la primera posición elegida por el programa en base a la energía de enlace más baja (-3.77 Kcal/mol), y ha sido descartada por encontrarse
posicionada en medio de las tres regiones más reactivas de gp120. El análisis que condujo a tomar la conformación de rango 2/100 como conformación
óptima para esta corrida se detalla en la sección Discusión de Resultados. Los puentes de hidrógeno son representados como puntos verdes, los aminoácidos
que intervienen por parte de gp120 son de color verde, CCR5 está esquematizado como estructuras de líneas, gp120 fue esquematizado como estructura
Ribbon, todas las interacciones atómicas intermoleculares han sido marcadas en esferas de colores, rojo-oxígeno, amarillo-azufre, azul-nitrógeno, gris-
carbono.
Derecha: Detalle del enlace CCR5- 7-15 a gp120, Corrida 1, Rango 2/100. En el rango 2/100 ya no existe una interacción directa con el segmento V3,
únicamente con ARG440 que pertenece a la hoja de enlace y la sección V1/V2 en los aminoácidos PRO206-SER209.
Gráfica No. 3
Izquierda: Interacción en Corrida 2 Rango 1/100. Es posible apreciar el contacto del GLN422 mediante puente de hidrógeno con ASN13, así como también
el puente de hidrógeno existente entre TYR15 y ILE423 de la región de la hoja de enlace en gp120, estas interacciones son ayudadas por ILE9 en CCR5 y por
LYS432 en gp120.
Derecha. Contexto de la Corrida 2 Rango 14/100. CD4 se observa en color rojo y esquema Ribbons, gp120 de VIH se representa en color azul y en esquema
de Ribbons, y CCR5 1-15 está representado en estructura de líneas.
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Propiedad C3R1 C4R1 C4R2 C4R3 C4R4 C4R8 C4R9 C5R1 C5R2
Energía Enlace -1.47 -4.58 -4.22 -3.68 -3.57 -2.86 -2.83 -0.81 0.4
Energía Intermolecular -6.74 -6.14 -7.96 -6.9 -5.48 -3.85 -3.65 -7.76 -6.81
Energía Interna -7.86 -11.57 -9.39 -9.91 -11.22 -12.14 -12.3 -6.17 -6.27
Energía Torsional 13.13 13.13 13.13 13.13 13.13 13.13 13.13 13.13 13.13
Energía Extendida de No Enlace 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
Cluster RMS 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
Ref RMS 7.24 6.62 15.54 12.1 9.67 5.82 9.6 7.2 7.2
bl 3 C ó l C d 3
Gráfica No. 4
Gráfica No. 5
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Gráfica No. 6
Izquierda: Interacción en Corrida 4, Rango 3/100: En esta conformación ECL2 también se encuentra distribuido a lo largo de sí y
confirma la alta reactividad de las regiones de la hoja de enlace y la región V1/V2 lo que puede sugerir que esta región es de suma
importancia para la orientación de ambas proteínas durante el mecanismo de enlace gp120-CCR5.
Derecha: Interacción en Corrida 4, Rango 4/100: Esta es una de las interacciones energéticas más baja que también muestra una concordancia
con las propiedades físicas y mecánicas de ECL2 en cuanto a la conformación que se espera guarde este segmento. Se puede observar que
CCR5 7-15 interacciona con la región media de V3 y con ARG440 de gp120 que es uno de los aminoácidos que ha destacado en la
interacción con CCR5. Si embargo ECL2 se encuentra al revés respecto a su orientación con CCR5 en la interacción global gp120-CCR5.
Gp120 ha sido representado en color gris y en estructuras Ribbons.
Gráfica No. 7
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Gráfica No. 8
Izquierda: Interacción en Corrida 6, Rango 1/100: Puede observarse la interacción electa por el programa Autodock como la óptima tomando
como referencia la energía intermolecular reportada para este enlace que es -4.06 Kcal/mol. El segmento V3 de gp120 se observa de color
celeste y en esquema Ribbons, al igual que CCR5 que se presenta de color rojo. Los aminoácidos de ambas proteínas que entran en contacto
han sido representadas en estructura de líneas. Es posible distinguir un puente de hidrógeno representado por puntos verdes entre GLY314
y TYR184, es importante hacer notar que la posición física en este modelo, no encaja con la descripción propuesta por Liu et. al. (2003) en
el archivo 1OPW.pdb.
Derecha: Interacción en Corrida 6, Rango 13/100: Esta es la primera interacción encontrada que posee un orden coherente con el esquema
general propuesto. Se observa que está estabilizada por un puente de hidrógeno formado entre GLY321-HIS175, e interacciones entre
TYR318-LYS171 e GLY314-ARG168. El segmento V3 se encuentra representado en color Azul, gp120 en celeste y CCR5 en fucsia. Los
aminoácidos que interactúan están representados en esquemas de líneas y tanto V3 como CCR5 en esquema Ribbons.
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Gráfica No. 9
Izquierda: Interacción en Corrida 6, Rango 14/100: Otra interacción no muy diferente en el estado energético intermolecular, pero presenta
una mejor posición en contexto de V3 en relación con CCR5 y gp120. Aquí las interacciones importantes están descritas por ASN302,ARG304-
HIS175, THR320-LYS171, ASN308-GLN170 y por ARG315-SER189. El segmento V3 de gp120 se presenta de color Azul, CCR5 de color
morado, gp120 de color celeste y al fondo puede apreciarse CD4 en color rojo. Todas las proteínas se encuentran en esquemas Ribbons y
los aminoácidos que interactúan en esquemas de líneas.
Derecha: Detalle en la Interacción de la Corrida 7, Rango 3/100: un acercamiento de esta interacción revela los aminoácidos importantes en
la estabilización de este complejo, entre los aminoácidos que interactúan se puede distinguir: ILE309,LYS305-TYR3; GLY314-LYS276,
PRO313-ASN273, GLN312-SER272,ASN266.
Gráfica No. 10
Detalle de la Interacción en Corrida 8, Rango 1/100: se aprecia un
acercamiento de la mejor interacción en esta corrida. Los enlaces
destacados son descritos a continuación: GLU172-ASN300, GLY173-
THR303, LEU174 mediante puente de hidrógeno a ARG304, TYR176-
SER306, ILE307. El segmento V3 de gp120 ha sido ilustrado en color
azul y en esquema Ribbons, el segmento ECL2 de CCR5 ha sido
descrito en color gris y también en esquema Ribbons. Las interacciones
han sido señaladas con esferas y los puentes de hidrógeno con lineas
punteadas verdes.
La gráfica representa la situación teórica de la mejor conformación de
enlace entre el segmento ECL2 del correceptor CCR5 y el segmento
V3 de gp120, la mayoría de las mejores conformaciones de las 200
evaluaciones hechas a este segmento apoyan esta conformación que a
pesar de poseer una energía de enlace positiva (5.97 Kcal/mol) se
encuentra en un contexto bastante lógico respecto a las propuestas de
la conformación post enlace hasta ahora desarrolladas como en el caso
de Liu et al. (2003). V3 Se representa en color azul y en esquema
Ribbons mientras que ECL2 se presenta en color lila y en esquema
Ribbons también. Los choques intermoleculares se señalan con esferas,
y los puentes de hidrógeno con lineas punteadas verdes.
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Tabla No. 5
Comparación entre las corridas relacionadas con la interacción entre ECL2 de CCR5 y V3 de gp120
RMS: Root Mean Square (Raíz Cuadrada Media)
Todas las energías han sido estimadas en Kcal/mol.
E. Ext de No Enlace: energía extendida de no enlace.
Gráfica No. 11
Vistas laterales del la unión propuesta entre gp120 de VIH-1 al correceptor CCR5. Es posible observar que la conformación del segmento
V3 ha cambiado, que el segmento N-terminal de CCR5 está enlazado a la región V1/V1 cercana a la hoja de enlace en gp120, y que en el
caso del segundo segmento extracelular el enlace ha ocurrido a través de los aminoácidos 304-320 de la región V3 en gp120.
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Para recrear el contexto en el que se encuentra el veces su valor de energía de enlace como se
complejo gp120-CD4 previo al enlace del observa en las corridas posteriores.
correceptor CCR5 se realizaron una serie de La Corrida 2 ha desplegado una serie de
mediciones llamadas “Corridas” cuyos resultados interacciones donde la mayoría de las mejores
se interpretan a continuación. soluciones se basan en un contacto de CCR5 7-15
con las posiciones aminoacídicas 322-432 en
Corrida 1 y Corrida 2 gp120, y todas estas interacciones son finalmente
menos favorecidas energéticamente (en lo que a
En estas corrida se evaluó la interacción de CCR5 energía de enlace se refiere) que las interacciones
(aminoácidos del 7-15) con las áreas de gp120- desplegadas en la Corrida 1.
CD4 descritas como reactivas, las gráficas 2 y 3 C1R2 es una solución notable en la que se
muestran las mejores conformaciones encontradas establecen interacciones entre TYR15-LYS205,
para esta corrida. En la gráfica 2 se observa que TYS14-PRO306 y ASN13 que permanece
CCR5 7-15 se ha enlazado en medio de las tres estabilizando a la relación TYS14-PRO206,
regiones más activas de gp120, donde sobresale resultado que es coherente por lo reportado Liu
TYS14 que forma un puente de hidrógeno con S.Q. et.al. (2003).
LYS305 que está en la región V3, lo cual provoca Este resultado de C1R1, donde se establece la
la expansión del ligando desde V1/V2 hasta V3. interacción de CCR5 7-15 cercana a V3, también
Se observa en la tabla No.2 que C1R1 es quien puede ser comparado con los resultados reportados
libera más energía de enlace ( -3.77Kcal/mol) y por Chin-Chin Huang, quien apoya el hecho de
quien posee también mejor liberación de energía que CCR5 7-14 interactúa plenamente con V3 y
intermolecular (-9.25 Kcal/mol), seguido por su base, siendo fuertemente atraído CCR5 7-15
C2R1 con -8.2 Kcal/mol de energía intermolecuar, por la región de la hoja de enlace y sin tener una
ambas corridas No. 1 necesitan menos energía interacción significativa con el sistema V1/V2.
para realizar una torsión (10.43 Kcal/mol). En cambio, el estudio de Liu S. Q. et.al. (2003)
Si la posición de enlace de los aminoácidos 7-15 en su experimento de modelaje molecular teórico
en la región N-terminal de CCR5 es la que indica establece que el segmento CCR5 7-15 interactúa
la Corrida 1, Rango 1, entonces sería necesario en pleno con el sistema V1/V2 y es fuertemente
plantearse la situación en la que debería de entrar atraído por la hoja de enlace, pero permanece
el segundo segmento extracelular de CCR5 para CCR5 completo en un contexto que explica
contactar con el segmento V3 de gp120, ya que también la interacción que CCR5 tiene con gp120,
como se observa en la Corrida No.8 las mejores en este archivo 1OPW.pdb la interacción del
posiciones reactivas de ECL2 en CCR5 contra V3 segmento ECL2 de CCR5 con V3 no es propuesta
en gp120 se encuentran en la misma región que pero sí sugiere su orientación.
en la Corrida 1 Rango 1, en otras palabras, CCR5 Basándose en los reportes anteriores y tomando
7-15 desplazaría por impedimento estérico a ECL2 en cuenta los resultados obtenidos en la presente
en CCR5, lo cual sería posible si la energía global evaluación, se puede inferir lo siguiente:
de enlace fuera menor, pero los enlaces de ECL2 1- que definitivamente la región de la hoja de en-
de CCR5 a otras regiones de V3 en gp120 como lace ejerce una atracción muy fuerte sobre CCR5
la cresta de V3 por ejemplo, aumentan hasta 3 y 4 7-15.
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2- que la sección V1/V2 atrae a CCR5 7-15 y es En la Corrida 4 si se permitió las torsiones de la
capaz de orientar y muy probablemente es capaz cadena peptídica para analizar a fondo la función
de formar un complejo estable V1/V2 y hoja de de los aminoácidos del segundo segmento
enlace con CCR5 7-15, siempre y cuando guarde extracelular de CCR5 que son descritos junto a
una lógica conformacional y energética con todo los aminoácidos de la región N-terminal como los
el correceptor CCR5. más importantes en CCR5 para su interacción con
3- En cuanto al segmento V3, se sugiere que podría gp120. En la Corrida 5 la cadena peptídica de
actuar como un orientador, puesto que LYS305 ECL2 permaneció fija mientras que a las cadenas
forma un importante puente de hidrógeno con R laterales se les otorgó torsiones flexibles y
TYS14 de CCR5, pero para afirmar dicha además se observó su interacción específica con
interacción es necesario observar primero el la hoja de enlace y con el segmento V1/V2 de
comportamiento de la segunda región extracelular gp120. Los resultados obtenidos son analizados a
de CCR5. continuación:
4- El papel de ARG440 en la hoja puente es La tabla No.3 es una comparación de datos donde
sumamente importante para la atracción del C3R1 pertenece a una interacción de gp120 con
correceptor y probablemente para su enlace un ECL2 rígido mientras que los demás datos C4
también, el problema en el análisis al rededor de pertenecen a un ECL2 flexible en su cadena
ARG440 es que es una arginina tan activa que peptídica y los datos C5 a una interacción de ECL2
atrae por igual a ECL2 como se verá mas adelante, flexibles en su cadena lateral R.
lo que hace necesario utilizar más datos para C4R1 se ha distribuido entre las tres regiones más
concluir certeramente cual es su interacción for- reactivas de gp120 (hoja de enlace, V3 y V1/V2)
mal. mostrando dos puentes disulfuro entre CYS178
Es importante hacer notar que aunque el segmento de ECL2 y CYS205 de gp120, además de un
N-terminal 7-15 de CCR5 no interactúa puente de hidrógeno importante entre ARG440 y
directamente con V3 e incluso con la hoja puente, TYR176, teniendo invadida la región V3 por
el simple acercamiento de CCR5 7-15 a esta región impedimento estérico, lo importante de esta
puede tener la energía potencial necesaria para corrida es observar la estabilidad del enlace
activar las conformaciones necesarias en el adquirido por la formación de los enlaces antes
segmento V3 y en la hoja de enlace, lo cual mencionados, siendo de importancia para ECL2
prepararía a estas regiones para interactuar con CYS178 y TYR176.
cualquier otra región en CCR5. En el caso de C4R3 es interesante observar el
posicionamiento que alcanza nuevamente
Corridas 3, 4 y 5 CYS178 con CYS205, en donde a pesar de que
según la gráfica No.6 Izquierda, no se reporta una
En estas corridas se evaluó la interacción de ECL2 interacción directa entre estos aminoácidos, estos
con todas las regiones activas gp120 concernientes quedan bien orientados. Además solamente se han
a CCR5, la diferencia entre estas corridas fue el aplicado movimientos torsionales a las cadenas
nivel de torsiones y grados de libertad en la peptídicas de ECL2 y no a sus cadenas R laterales,
rotación de los enlaces en ECL2. En la Corrida 3 lo cual implica que en una interacción real es prob-
no se permitió torsiones aleatorias significativas. able el contacto directo entre estas cisteínas.
ττ
Dato no presentado en tablas, fue calculado por el programa Autodock 4.0
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En cuanto a C4R4 es posible observar respecto a una interacción real, aunque en tal caso,
nuevamente el papel que desarrolla CYS178 la Corrida 4 demostró ampliamente que de igual
sobre ARG440, aminoácidos que presentan un manera el área de V1/V2 era de bajo interés para
contacto distante que contribuye a la estabilidad la sección ECL2 de CCR5.
del confórmero, luego es posible distinguir En un resumen de las corridas 3,4 y 5 se puede
interacciones importantes en la región de decir que las conformaciones C4R4 y C4R9
aminoácidos GLN170, LYS171, GLU172, sobresalen demostrando que a pesar de la absoluta
GLY173 con la región de V3 TYR318, THR319, movilidad de la cadena peptídica concebida a
GLY321, GLU322, donde además se guarda en ECL2, las más bajas energías conformacionales
ECL2 una conformación arqueada semejante a de este ligando calzan con la conformación del
la presente en ECL2 en estado nativo, lo cual estado nativo de ECL2 y en interacción con V3,
realza su importancia como posible solución a hecho que es de suma importancia. Otras energías
la interacción real entre ECL2 y V3. de enlace más bajas han sido obtenidas en las
C4R8 fue escogida por su conformación arqueada regiones V1/V2 y la hoja de enlace, pero sin una
que es muy similar a la presente en ECL2 en su conformación estructural lógica en ECL2, y en
estado nativo, es aún más semejante que su las corridas C3R1 donde la conformación de ECL2
homologa C4R4 discutida previamente, de hecho no varía, se han reportado energías de enlace
la posición en la que se presenta respecto a gp120 menores a -1.41 Kcal/mol.
es como la que se esperaría que tuviera en una Por otro lado la Corrida 5 sirvió para constatar la
interacción real, e interactúa directamente con la baja competitividad que presenta el segmento
región V1/V2 de gp120, sin embargo su energía ECL2 en una interacción directa con V1/V2
de enlace es la menor de todas las presentadas en tomando en cuenta que se trata de un modelo de
esta serie de la Corrida 4, y su energía interna (- enlace teórico.
6.13 Kcal/molττ) es una de las más estables de
todas las conformaciones presentadas lo cual es Corridas 6 y 7
interpretable como una confirmación de la Las Corridas 6 y 7 estuvieron orientadas a
estabilidad de la conformación nativa. encontrar interacciones específicas entre las
C5R1 posee una de las energías de enlace más regiones activas de CCR5 y el segmento V3, para
bajas dentro de este grupo de comparaciones, los lo cual se tomó únicamente este segmento de
datos aportados por C5R1 y C5R2 apuntan al gp120 y se hizo enlazar a las dos regiones
hecho de que definitivamente el segundo segmento extracelulares más importantes de CCR5, la región
extracelular ECL2 de CCR5 no tiene una N-terminal y ECL2, con lo cual se busca en primer
interacción real con el segmento V1/V2 de gp120 lugar confirmar las soluciones obtenidas en las
lo cual crea una concordancia con el trabajo corridas anteriores, y en segundo lugar poder
presentado por Liu S. Q. Y sus colaboradores en realizar una interacción directa de V3 en un
2003 6. modelo ideal libre de cualquier impedimento
Únicamente es necesario recalcar en esta corrida estérico que pueda provocar la conformación
que C5R1 y C5R2 tienen ligandos ECL2 con nativa o no nativa de gp120. En la Corrida 6 la
cadenas peptídicas rígidas lo cual presenta cierta energía de enlace y la energía interna de todas las
desventaja en este modelo de enlace teórico soluciones fue 11500000.0, dato que es
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incoherente por lo cual se descarta, el motivo que En cuanto a la corrida 7, las soluciones tomadas
pudo ocasionar este error es una mala posición de C7R1 y C7R3 ayudaron a entender los resultados
la malla electrónica, lo cual obligaría a que du- encontrados por Chin-Chin Huan et.al. (2005), en
rante las interacciones el ligando topara con la los que se establece una interacción entre CCR5
malla, circunstancia en la cual, estos datos pueden 7-15 y el segmento V3.
encontrar una explicación. Sin embargo es posible C7R1 es en efecto la conformación mejor
evaluar las comparaciones mediante la energía in- favorecida en cuanto a energía de enlace, pero al
termolecular desplegada, en tal caso, la Corrida 6 analizar la posición de V3 en contexto con CCR5
rango 1 es la solución energética más favorable, se observa que V3 se interna en la región de mem-
pero su posición física está fuera de contexto brana de CCR5 lo cual no debe suceder, y además
respecto a la interacción propuesta previamente la región N-terminal de CCR5 se incrustaría en el
por Liu S. Q. et. al. 2003. (Observar la Gráfica núcleo de gp120 lo cual no ha sido reportado.
No.8 Izquierda). C7R3 establece una solución interesante en la que
En C6R13 se puede observar que la interacción V3 no solamente interacciona con el segmento N-
se encuentra localizada hacia la parte media de terminal de CCR5 sino también con el primer
V3 principalmente por los aminoácidos GLY 321, segmento extracelular , en una región que esta muy
TYR 318 y GLY314 que reaccionan con los cerca de la propia región intracelular de CCR5
aminoácidos de CCR5 HIS175, LIS171, ARG168. pero no en ella. Esta solución despliega una
Esta es la primera interacción coherente en el energía de enlace de 22.43 Kcal/mol lo cual es un
contexto del complejo CCR5-gp120-CD4 nivel de energía considerable en comparación a
encontrada en la Corrida 6 y es necesario recalcar las corridas anteriormente evaluadas, e implica que
que se encuentra en la posición 13 en relación a la el ligando y el correceptor deben absorber esta
energía interna, lo que hace necesario realizar más energía para formar los enlaces y puentes de
análisis para corroborar este dato. Los datos de la hidrógeno referentes a su interacción, lo cual es
Corrida 6 por tanto deben ser analizados en posible dentro del medio celular, pero no es fa-
conjunto con la corrida 8 en la cual se tomó vorable energéticamente, este punto es de ser
únicamente a los segmentos V3 de gp120 y ECL2 tomado en cuenta durante la evaluación de la
de CCR5 en una interacción ideal que utilizó a Corrida 8 antes de albergar una conclusión. Las
V3 como ligando y a ECL2 como receptor (ver el interacciones que se observan en la Gráfica No.9
análisis de la corrida 8). Derecha son THR303,LYS305, ILE309 – TYR3;
En C6R14 la interacción es sumamente semejante GLY314- LEU277; ARG315-SER272, ASN278;
a la desplegada en C6R13, donde resalta el hecho PRO313-ASN273.
de que a pesar de que hay una mayor interacción
entre V3 y ECL2, disminuye la cantidad de energía Corrida 8
intermolecular liberada siendo de -2.12 Kcal/mol
en comparación a -3.04 Kcal/mol desplegadas por En la corrida número 8 fue evaluado el papel de
C6R13. Las interacciones en C6R14 son: ARG304 ECL2 al interaccionar con V3 en un modelo
- HIS175; ILE323-HIS175, GLU322-HIS175, teórico ideal, lo cual significa que no se han
THR320-LYS171, ASN308-GLN170 (Observar la tomado en cuenta ninguna de las otras secciones
Gráfica No.9 Izquierda). de ambas proteínas, únicamente se trata de
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en los rangos de la Corrida 6 no se detalla tal un tipo de enlace en V3 dada la alta reactividad
interacción exactamente, pero es necesario que presenta esta región esencialmente en las
recordar que ambas cadenas laterales R en la posiciones ya mencionadas 300-308, pero además
Corrida 6 permanecieron rígidas. Un análisis en las regiones 317-324 la cual es una región
gráfico de las interacciones de Van der Walls de altamente flexible.
ambas cadenas demuestra que en efecto, en la Por otra parte lo anterior implica que la región N-
corrida 6, rangos 13 y 14 no existe una interacción terminal debe ser la encargada de reaccionar
en los aminoácidos de posición exacta 306 y 322, directamente con las regiones de hoja de enlace y
pero sí hay interacciones para C6R1 en309/318; V1/V2 presentes en gp120 de VIH-1, encontrando
para C6R13 en 314, 321 y para R6C14 304, 308, como principales regiones reactivas ARG440 y
320 y 323. Una razón probable de esta inexactitud los aminoácidos en posición 208-200 quienes
es la rigidez conformacional a la que están entran en contacto con los aminoácidos de CCR5
limitadas las interacciones en el programa 7-15.
Autodock 4. Un análisis minucioso entre las gráficas de las
En C8R1 si existe una interacción directa de interacciones en C8R1 y C4R4, ambas referentes
SER306 con ECL2, C8R1 tiene una interacción al encuentro entre ECL2 de CCR5 y V3 de gp120
con V3 muy completa, lo cual debe ayudar a la en complejo con CD4, muestran dos sitios
gran estabilidad en la que resulta su energía de esenciales de reacción, uno, el ya discutido en
enlace. C8R1 donde los aminoácidos participantes de V3
Tampoco se descarta la posibilidad de que las son la región 300-305, en el otro caso C4R4
posiciones 306 y 322 en el segmento V3 orienten muestra una región opuesta de interacción en V3,
al segmento ECL2 de CCR5 durante el proceso la región 318-322 y 305. En C4R4 se ha permitido
de enlace sin la obligatoriedad de que exista una la flexibilidad absoluta de la cadena peptídica de
interacción específica en el complejo final, pues ECL2, y eso explica también las bajas energías
al parecer otros aminoácidos como los presentes de enlace obtenidas referente a esta corrida,
en la cresta del segmento ECL2 tienen una función aunque la energía intermolecular no ha sido mejor
de orientación también antes que de enlace, y hay que en C8R1, la energía interna (-11 Kcal/mol
que recordar que precisamente los aminoácidos contra 0.0 Kcal/mol desplegadas en C8R1) se
que se encuentran en la cresta del segmento V3 explica también por la misma flexibilidad
(la secuencia PGRAFY) son los más invariables concedida en la libertad de torsiones a esta cadena
de esta región variable. peptídica ECL2 en C4R4, pero esto también la
En resumen para la Corrida 8, se puede describir aleja un tanto de la realidad conformacional
a la secuencia de aminoácidos 300-308 en la posible para ECL2. La corrida 4 se diseñó con el
región V3 de gp120 como los responsables de la objetivo de observar las preferencias de enlace
interacción directa con la región ECL2 presente particular de cada aminoácido en ECL2, y esta
en CCR5, lo cual permite interpretar también que información indica que las mejores interacciones
deben existir en la región V3 otros aminoácidos en ECL2 las tienen las posiciones aminoacídicas
cuya función es orientar al segmento ECL2 du- 169-173 que han sido una región de alto contacto,
rante el proceso de enlace. Además es necesario por lo que es de esperarse que en una interacción
observar que es posible la formación de más de real de ECL2 contra V3, esta sea la región que
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busque interactuar con V3 de gp120, de hecho, al planteados por Liu S.Q. Y sus colaboradores, el
observar C8R1 los aminoácidos que interactuaron segmento N-terminal es el primero en encontrar
por parte de ECL2 fueron las posiciones 172-174 al segmento V1/V2 y la hoja puente de gp120
y 179, lo que confirma que el par 172-173 de ECL2 comenzando la interacción entre el complejo CD4
es sumamente importante en su reacción para y gp120, lo siguiente es el acoplamiento de esta
estabilizar el producto complejo ECL-V3. Por cadena de aminoácidos, este momento exacto sería
otro lado, en V3 de gp120 el aminoácido LYS305 un intermediario previo al entrar en contacto con
ha sido el único común entre C4R4 y C8R1. Luego el segmento ECL2 y según la regla 11/25 y los
se observa que las dos áreas opuestas a lo largo de argumentos previamente explicados, podría
V3 son muy reactivas para ECL2 alcanzando encontrarse CD4-gp120 en un movimiento
menor energía intermolecular C8R1 con el relativo a CCR5 al que se encuentra semi unido
contacto en la región 300-305 en comparación a por un pivote de giro que sería el segmento CCR5
C4R4 que presenta una interacción en la región N-terminal unido a V1/V2, pero este movimiento
318-322 de V3 pero con una diferencia poco de incertidumbre caracterizará la próxima
significativa, el impedimento en realidad es de tipo interacción según el lado en que arribe V3 al
conformacional para C4R4. segmento ECL2 de CCR5, el cual también podría
Observando nuevamente la regla 11/25 puede estar regido por el campo energético de los
sugerir este dato que cuando las posiciones 11 aminoácidos de la región V3.
y 25 de V3 están cargadas positivamente Al realizar una comparación con los resultados
entonces la cepa se comporta como X4 porque obtenidos por Paul R. Gorry (2007) 9 los
ECL2 puede arribar al choque con V3 por aminoácidos importantes en V3 de gp120 son
cualquiera de los dos lados y encuentra la misma TYR308, ASP321/ILE317 (aparte de LYS442,
respuesta. Esta explicación sería consistente con GLU444 y TYR330 que están en otras regiones
el hecho de que, para cepas X4/R5, lo que de gp120). Estas posiciones 308, 321 y 317 son
sucede es que uno de ambos aminoácidos en semejantes a las reportadas en R6C1, R6C13 y
posición 11 ó 25 se encuentra cargado C6R14. Estos resultados señalan que no hay una
positivamente, de manera que si ECL2 se acerca interacción específica entre ECL2 y V3, pero si
por el lado positivo, la cepa se comportará como se puede decir que V3 no solo es altamente afín a
X4, mientras que si arriba por el lado negativo ECL2 sino que parece estar diseñado de tal manera
se comportará como R5, y si ambos lados, el 11 que ofrece un epítopo de contacto diferente según
y el 25 se encuentran cargados negativamente la situación en que se encuentra al enlazar a ECL2,
o neutro, la cepa que reaccionaría sería distinguiendo tres áreas importantes en V3: a- las
únicamente R5. En conclusión en V3 existe más posiciones 300-305; b- las posiciones 307-308;
de un sitio en donde puede interactuar con c- las posiciones 314-322.
ECL2, por lo que existe la formación de El mismo trabajo de Paul R. Gory (2007)9 enseña
diferentes epítopos inducidos en V3 para los que las posiciones en V3 por él estudiadas: 308,
correceptores CXCR4 y CCR5. 317 y 321 no son ni suficientes, ni indispensables,
Esta conclusión permite proponer una mecánica por lo que se propone que trabajan en conjunto para
de interacción de V3 con ECL2. Siendo enlazar efectivamente a ECL2. En acuerdo con este
consistente con los tres modelos teóricos trabajo C6R14 es la única respuesta donde
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interactúan en pleno las regiones mencionadas y el campo electrostático generado en gran medida
que a pesar de que la posición física de V3 no sea por la ARG315 que se encuentra precisamente en
probablemente la mejor respecto a ECL2, esta la cresta de V3 que junto con PRO313 que son
interacción es la más cercana a una interacción real aminoácidos potencialmente atractivos a algunos
donde participarían todas las partes aquí en CCR5 como LEU174. Una vez que el
mencionadas, y que además posee una energía in- acercamiento entre estos grupos cargados se da,
termolecular muy aceptable (-3.04 Kcal/mol). ECL2 se debe reorientar en busca de un enlace
estable por medio de semi reacciones reversibles
Mecanismos de interacción y de reacción del entre los aminoácidos de ambas regiones hasta
segmento variable V3 de gp120 con el correceptor alcanzar un punto de equilibrio cambiando la
CCR5 conformación de los ángulos dihedrales en los
Los resultados obtenidos concuerdan con los aminoácidos de la región 169-173 de ECL2 con la
desarrollados por el grupo de Liu S.Q. En 2003, en finalidad de estabilizar el sistema.
este trabajo se describe cómo el acercamiento del
complejo CD4-gp120 a CCR5 se da por el extremo Mecanismos de Reacción
N-terminal de CCR5 el cual se encuentra extendido Para las mejores soluciones encontradas que son:
hacia el espacio exterior de la membrana celular, C8R1, C6R14 y las interacciones descritas en
por lo cual la serie de aminoácidos que entran en C4R4, se presenta a continuación un detalle de
contacto en primera instancia serían SER6 y SER7 los mecanismos de reacción para determinar la
– VAL120 LYS121 LEU122 de gp120 (190). estabilidad de los productos formados, puesto que
como se ha mencionado Autodock posee
Esta interacción debe permitir el acercamiento de limitantes en la libertad de rotación de enlace.
la ARG440 de gp120 en la hoja de enalce, hacia
TYS14 de la región N-terminal de CCR5 en una Análisis de C4R4
desprotonación del oxígeno del grupo sulfato que
resulta en una resonancia sumamente estable para C4R4 provee información importante para
el grupo sulfotirosilo, de la misma manera que para observar cuáles interacciones entre V3 y ECL2
la arginina, estableciendo un enlace salino. El efecto de CCR5 son las responsables del aumento de la
de esta interacción TYS-ARG debe desencadenar estabilidad por liberación de energía de enlace en-
un efecto domino que reorienta a un plegamiento tre estas secciones protéicas, por lo cual, se
de toda la sección N-terminal en CCR5, obligándola detallan a continuación los mecanismos de
a unirse cuando menos en las regiones 1-15 del reacción entre los enlaces sugeridos por el
correceptor CCR5 a la región V1/V2 de gp120 programa Autodock.
liberando energía de enlace por las interacciones La Gráfica No.6 Derecha muestra que existen
de Van der Walls generadas y por la formación de interacciones entre TYR318 y LYS171 las
puentes de hidrógeno. Este debe ser el momento cuales son producto de las fuerzas Van der
crucial para el enlace en V3, puesto que mientras Walls generadas por inducción dipolo-dipolo
que la región N-terminal se encuentra en inducido entre la amina de cadena lateral
plegamiento, V3 de gp120 se está acercando hacia presente en LYS171 y el carbono de cadena
el segundo segmento extracelular orientándose por lateral de TYR318, según lo propone el mismo
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don existentes entre la cadena R de ARG304 y el que favorecen la estabilidad de esta unión,
además SER171 participa por medio de un
hidrógeno hidroxílico presente en su grupo R, el
R
R HN O
NH2 O
O NH
R
NH O O
NH2
R
HO
H3C O H3C O
R R
NH
ILE307 ILE307
NH
O R O R
TYR176 TYR176
O O O
H NH2 R
R
NH2 NH2
O
O OH
THR320 LYS171 HN
NH
R R
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ASN300 Referencias
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6. Sophia Rits-Volloch, Gary Frey, Stephen C. 10. 195- Paul R. Gorry, Rebecca L. Dunfee,
Harrison and Bing Chen. Restraining the Megan E. Mefforda, Kevin Kunstmand, Tom
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(2006) 25, 5026–5035. drew Mehlea, Joann Taylor, Michael Farzana,
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Structural and functional characteriza- Suzanne M. Croweg and Dana Gabuzdaa.
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“Ay a la parte del poniente deste pueblo (Santiago Atitlán) un bolcán grande (Volcán San Pedro) que la propia halda del
llega a la laguna y bate el agua della en la misma halda y cerca la dicha laguna la dicha halda del bolcán tres leguas,
antes mas que menos. Es alto y derecho y agusado a modo de pan de açucar. Tiene muchas quebradas que baxan de arriba
abaxo cabsadas de las lluvias e aguas que decienden de la punta del quando llueve. Del medio del para abaxo no tiene
ninguna arboleda. Todo lo demás del para arriba es poblado de árboles grandes de pinales y encinales y alisos y
madroñales. Puedese subir a él por muchas partes. En lo alto haze una manera de plaçuela que serán de alto de quinientos
pasos. En la cumbre del haze frío aunque nunca jamás se ha visto nieve en ninguno de estos bolcanes. Algunos religiosos
han subido en la cumbre deste bolcán y lo han visto y puesto una cruz en lo alto del”.
Resumen
El presente estudio analizó la distribución de la vegetación en el volcán San Pedro en términos de su riqueza, composición,
estructura y abundancia, con base en la posible relación que esta guarde con los cambios de exposición y altitud observados en
el volcán. Para el efecto, el área con cobertura vegetal se dividió en tres pisos de altitud a partir de los 2,400 msnm hasta la
cumbre a 3,020 msnm, y en cuatro secciones verticales en relación a los cuatro puntos cardinales, dando como resultado el
arreglo del área en 12 sub-áreas o estratos relativamente más homogéneos (en cuanto a altitud y exposición). En total se
obtuvo una muestra de 36 unidades experimentales (parcelas de Whittaker de 0.1 Ha), correspondiendo 3 parcelas por cada
estrato.
Se logró la colecta de 1,038 números de herbario, que incluyen 415 especies agrupadas en 102 familias. Las familias más
abundantes fueron: Asteraceae con 72 especies (17.5%), Orchidaceae 27 (6.6%), Poaceae 19 (4.6%), Solanaceae 15 (3.6%) y
Fabaceae 13 (3.2%). Además, por los hábitos de crecimiento observados fueron agrupadas en Hierbas (149 especies - 36%),
Arbustos (91 sp. - 22%), Epifitas (56 sp. -14%), Árboles (52 sp. -13%), Lianas (45 sp. -11%), y otros hábitos (18 sp. – 18%).
El análisis de agrupamiento empleando como medida de similitud al Índice de Sørensen, el análisis de clasificación con
Twinspan y el de ordenación con DCA (PC-ORD Versión 3.12 y Past Versión 1.14), sustentan la posible existencia de dos
ensambles vegetales, producto de los cambios de exposición y altura: la asociación Quercus pilicaulis / Arbutus xalapensis /
Ceanothus azureus - Galium mexicanum – Salvia lasiantha; y la asociación Saurauia subalpina / Meliosma dives / Synardisia
venosa – Solanum appendiculatum – Maianthemun flexuosum.
La elevada riqueza vegetal promedio (41 spp / 0.1 Ha) registrada en el bosque del volcán San Pedro presenta serias amenazas
relacionadas al cambio en el uso del suelo, como los son el efecto de borde y la perdida de conexión con otros fragmentos, por
lo que se recomienda implementar estrategias de conservación y manejo que eviten un mayor deterioro del área.
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Análisis de resultados
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2
Área total con bosque natural 3.78 Km (378 Ha)
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Los resultados del muestreo sistemático en y senderos la que, al abarcar una mayor cantidad
parcelas sirvieron para establecer el número de hábitats, demuestra ser capaz de percibir un
acumulado de especies por unidad de esfuerzo, mayor número de especies, condición que se ve
y estimar el número total de especies esperadas apoyada por el hecho que muchas especies
para el área. El índice jackknife (PC-ORD, dentro del volcán, ya sea por factores naturales
1997) fue uno de estos estimadores, dicho índice (hábitats reducidos, gradientes ambientales
en su primer orden estima un número de 207 pronunciados, y fuerte competencia
especies, mientras que en segundo orden un to- interespecífica) o antropogénicos (reducción,
tal de 244 especies. De la misma forma, la curva fragmentación y degradación del hábitat),
de acumulación de especies calculada con base presentan una distribución muy restringida, por
en el supuesto de procesos de nacimientos lo que no son lo suficientemente perceptibles.
puros1 de Díaz-Francés, Soberón y Gorostiza Lo que es confirmado por la cantidad de
(2003) con el programa SpAcc2, indica que los especies que se reportan con una o dos
resultados se acoplan con mejor ajuste al ocurrencias (50 y 11 respectivamente) (gráfica
modelo logarítmico. La curva construida 2). Todo lo anterior no solamente pone en
presenta de 1 a 25 parcelas un crecimiento evidencia la efectividad de la técnica de
constante en la cantidad de especies, luego del muestreo, sino también la variabilidad que los
cual se encuentra la asintota (gráfica 1). Sí se estimadores pueden llegar a tener en función a
contrasta el número de especies observadas en la forma en la que se realizó la colecta de datos.
las parcelas (158) y esperadas con base en el No obstante, es importante señalar el posible
estimador jackknife en los dos órdenes (207 y efecto que pueda estar teniendo en la
244), es posible observar que este llega a distar subestimación, la gran variabilidad en el número
en 49 y 86 especies respectivamente. En el peor acumulado de especies que se observa tanto
de los casos (jackknife de segundo orden), la dentro como entre estratos. Ya que los datos con
eficiencia del muestreo en parcelas sería del los que se construye una curva de acumulación
65% (el 35% de las especies no fueron de especies, deben ser el resultado de un
percibidas por el muestreo dentro de las esfuerzo de colecta constante, condición que
parcelas). Si bien el número de especies difícilmente se puede garantizar entre áreas
encontradas en la colecta en parcelas es menor heterogéneas. Por esta misma razón, y para
a la cantidad de especies esperadas, llama la poder realizar una adecuada comparación entre
atención el hecho que esta estimación sea mucho los resultados registrados para los distintos
menor al número total de especies encontradas estratos del volcán, fue necesario validar esta
en el área (415). Lo cual se debe a que tanto la comparación por medio de la curva de
curva de acumulación de especies como los rarefacción, curva que estableció en 360
estimadores fueron generados con base en el individuos el tamaño de muestra o cantidad de
número acumulado de especies registrado esfuerzo en el que las variaciones en la riqueza
dentro de las parcelas de 0.1 Ha, mientras que observada en los distintos estratos se atribuye
el número total de especies es producto de la completamente a las variaciones propias de los
colecta tanto en parcelas, como en brechas y sitios, y no a variaciones atribuidas al esfuerzo
senderos. Por lo tanto, es la colecta en brechas de colecta (cuadro 1).
1
Esta curva se basa en procesos estocásticos de nacimientos puros, como modelos teóricos para construir curvas de acumulación de especies. (Soberón y Llorente, 1993 en Díaz-Francés
y Soberón, 2005)
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Gráfica 2
A B
Rangos de distribución observados en las especies vegetales del área natural del volcán San Pedro; (A) Especies observadas por rangos de
exposición, y (B) Especies observadas por rangos de altitud.
Cuadro 1
IA IIA IIIA IVA IB IIB IIIB IVB IC IIC IIIC IVC
Riqueza total por estrato 62 44 42 46 50 25 34 41 49 50 55 51
Riqueza estandarizada con
53.6 35.7 37.7 43.4 43.8 21.3 29.9 36.6 44.0 46.9 50.1 51.0
rarefacción
Abundancia total por estrato 860 1710 860 540 810 870 590 710 540 470 510 360
Abundancia estandarizada con
360 360 360 360 360 360 360 360 360 360 360 360
rarefacción
Estandarización con la técnica de rarefacción del esfuerzo de muestreo por estrato, en el bosque natural
del volcán San Pedro. Exposición: I. Noreste, II. Sureste, III. Suroeste, y IV. Noroeste. Piso altitudinal: A.
2,900 msnm, B. 2,700 msnm, y C. 2,500 msnm.
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Cuadro 2 Gráfica 3
Familia Sp. %
1 Asteraceae 72 17.52
2 Orchidaceae 27 6.57
3 Poaceae 19 4.62
4 Solanaceae 15 3.65
5 Fabaceae 13 3.16
6 Lamiaceae 11 2.68
7 Polypodiaceae 11 2.68
8 Rubiaceae 11 2.68
9 Bromeliaceae 10 2.43
10 Otras (93) 222 54.01
Otras familias mantienen una presencia continua, Dinámica de la riqueza de especies por familia botánica* a lo largo
de los dos gradientes ambientales en el volcán San Pedro. Estratos,
no obstante con diferentes especies, como es el Exposición: I. Noreste, II. Sureste, III. Suroeste, y IV. Noroeste.
caso de la familia Fagaceae (Encinos). En este Piso altitudinal: A. 2,900 msnm, B. 2,700 msnm, y C. 2,500 msnm.
grupo fue posible observar un intercambio de En los recuadros se resalta los sitios con mayor humedad (celeste)
y con mayor exposición al sol (anaranjado).
especies a lo largo de los gradientes ambientales
de tal modo que ningún hábitat dentro del volcán
La dinámica que se pudo observar en otras
deja de presentar más de algún tipo de encino.
familias en el bosque del volcán, difiere al
Mientras la especie de encino Quercus pilicaulis
caso de los encinos, ya que su distribución se
es la que claramente domina en el bosque de la
ve interrumpida por variaciones ambientales,
ladera noreste del volcán, en la ladera noroeste es
y el nicho vacante es ocupado gradualmente
la especie Quercus crispifolia la que logra ocupar
por familias con características funcionales
el nicho vacante, en donde llega a convertirse en
similares, pero con adaptaciones ambientales
una de las especies que dominan el bosque. Este
diferentes. Condición que puede apreciarse en
hecho es confirmado por el estudio sobre la
las familias: Solanaceae y Saurauiaceae por
diversidad taxonómica y funcional de los encinos
un lado, y Asteraceae, Lamiaceae y Poaceae,
de Cavender-Bares (2004), el cual aporta fuerte
por el otro. En donde se observa una
evidencia que prueba que ciertas especies de
disminución de la riqueza de especies, en
encinos se especializan en nichos particulares por
Solanaceae y Saurauiaceae, a medida que
medio de acuerdos en rasgos funcionales, y esta
aumenta la riqueza de Asteraceae, Lamiaceae
partición de nichos contribuye a la alta diversidad
y Poaceae. Las primeras son familias que
de encinos a nivel de paisaje.
presentan especies arbustivas tolerantes a la
sombra, mientras que las segundas son de
hábito principalmente herbáceo, que crecen
en áreas con claros o en laderas con mayor
exposición solar, áreas donde el dosel del
bosque no es denso (gráfica 3).
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(eigenvalue de 0.82) del primer eje de ordenación traslape de especies del 25 al 40%, mientras que
producto de DCA, sugiere un cambio en la en el gradiente de exposición del 18 al 51%. Razón
composición de especies entre sitios definido por por la que sería arbitrario definirlos de forma
un gradiente ambiental. Los bajos valores de la discreta. Además de los dos grupos principales fue
raíz característica para los ejes 2 y 3 (0.32 y 0.22 posible identificar ciertos sitios que corresponden
respectivamente), corroboran la importancia del a zonas perturbadas con especies propias, y que
primer eje para explicar la variación observada. se identifican como ensamble de especies de zo-
Con base en el gráfico de ordenación de los sitios nas de regeneración.
de muestreo y especies, se pudo inferir que el
primer eje corresponde al gradiente de exposición
(humedad), y el segundo al gradiente de altitud
(temperatura) (figura 4). En este gráfico, en el
extremo izquierdo del primer eje se observan tanto
las especies vegetales afines a ambientes con
mayor humedad como los sitios localizados en la
ladera con menor incidencia de radiación solar.
En la sección intermedia se presentan los sitios
que corresponden a zonas de transición o de
regeneración, mientras que en el extremo derecho
se concentran las especies y los sitios que se
localizan en las laderas con mayor incidencia de
radiación solar. En cuanto al segundo eje de
ordenación, resalta el hecho que este logra explicar
una mayor variación entre sitios a medida que
aumenta la humedad ambiental (base del
triángulo). Esto permite inferir que el aumento de
la humedad ambiental propicia una mayor
diferenciación entre sitios con diferente altitud,
mientras que en la ladera menos húmeda la
diferencia de altitud no genera variación entre las
distintas localidades.
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Figura 4
Mayor Elevación
VerbeApl
CestrPac
Urera sp C
III.A.2 Buddleja
Oreopana
III.A.1
I.B.1
Phoebe s
Clethram
B
III.A.3 Chiranth
IV.B.1 Alnus ac II.B.2
2 CestrGua
I.A.2 I.A.3 Arbutus
I.A.1 II.B.3 II.A.3 II.B.1
III.B.1 II.A.1
I.C.1 I.B.3
s
Phoebe S IV.A.3 IV.C.1
QuerPili
I.C.2 II.A.2 II.C.1
i S y n a r d i s I.B.2 Fuchsia I.C.3 II.C.2
IV.A.1
x Meliosma
A
IV.A.2
III.B.3 IV.B.2 A
Pinus ps QuercAac
III.B.2 SaurauSu
III.C.3
Prunus s II.C.3
SaurauOr
IV.B.3 III.C.1 C l e t h r a
Ocotea s
Cestrum IV.C.3
IV.C.2 III.C.2
Menor Elevación (msnm)
Parathes
Urera ca Oreopaxa
QuerCris
Tournefo
Billia h Ostrya v
Verbesin Ardisia
Montanoa
Garrya l
Viburnum
Rhamnus
Axis 1
Menor exposición solar (mayor humedad) Mayor exposición
solar Humedad
Gráfico del Análisis de Correspondencia Rectificado (DCA). Ordenación indirecta de Parcelas (Triángulos) y Especies (X) a lo largo de
los gradientes representados por los dos ejes principales, eje 1 (0.82 Eigenvalue) asociado al gradiente de humedad, y eje 2 (0.32)
asociado al gradiente de altura. Agrupaciones: A. Parcelas asociadas a la región del volcán con mayor humedad; B. Parcelas asociadas
a la región del volcán con menor humedad; y C. Parcelas que no presentan un patrón claro asociado al gradiente de humedad o altura
(zonas de regeneración).
Figura 5
Ubicación de los
principales
ensambles vegetales
en el bosque del
Volcán San Pedro.
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de restauración futuros (Berglund y Jonsson, 2005; Pedro Chiviliú y Esteban Vásquez, quienes
Vellend, et al., 2006). Hecho que es apoyado por colaboraron durante el levantamiento de
la teoría del seguro, que sugiere que una gran información de campo. A don Javier Méndez,
diversidad de especies puede disminuir la encargado del parque regional municipal
dinámica de perturbación dentro de una “Chuanimajuyú”, de San Pedro La Laguna,
comunidad, ya que la resiliencia de las Sololá. Al curador del herbario AGUAT,
comunidades se incrementa a mayor diversidad Facultad de Agronomía de la Universidad de
(Allison, 2004). San Carlos, Ing. Juan José Castillo por la
El tamaño poblacional a largo plazo es otro aspecto colaboración en la determinación de especies
que debe ser considerada en el caso del volcán, de palmas del volcán. A la Escuela de Biología,
ya que determina la adaptabilidad de la población. Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, en
Según Widén (1993), ciertas poblaciones vegetales especial al Lic. Fernando Díaz, por la
deberán de conservar tamaños mayores a 2,000 colaboración con el préstamo de equipo de
individuos para mantener niveles de adaptabilidad campo. Y al equipo de trabajo del herbario
que permitan la subsistencia de las especies BIGU, Escuela de Biología, por el apoyo en el
(Widén, 1993; citado por Reed, 2005). Reed trabajo de identificación y manejo de las
(2005) recomienda que las poblaciones en los muestras de herbario colectadas.
hábitats naturales deben ser protegidas para que
mantengan el 95% de la adaptabilidad original. Referencias
Con base en las estimaciones poblacionales
derivadas de los resultados del presente estudio,
1 Alroy J. Methods for removing sampling bi-
se deduce que por lo menos 20 especies
ases from diversity curves. Paleobiology.
(principalmente árboles) se encuentran en
1998; 20:191-207.
densidades por debajo de lo recomendado, algunas
de importancia ecológica como: Pinus
2 Berglund H, Jonsson BG. Verifying an Extinc-
pseudostrobus, Saurauia oreophila, Billia
tion Debt among Lichens and Fungi in North-
hippocastanum, Ocotea sp., Clethra pachecoana,
ern Swedish Boreal Forest. Conservation Bi-
Quercus acatenangensis, Phoebe sp. y Arbutus
ology. April 2005; Vol.19, 2:338-348.
xalapensis. Por lo que no solamente se deberá
considerar la protección de los hábitats naturales
3 Bermúdez M, Sánchez J, Eds. Identificación
del volcán, sino también la recuperación de las
de vacíos de información Botánica en
poblaciones naturales por medio de restauración
Centroamérica. Costa Rica: Museo Nacional
ecológica.
de Costa Rica, Red de Herbarios de
Mesoamérica y el Caribe, Y WWECA, Serie
Agradecimiento
Tec. No.4, 2000. 99p.
Se agradece a la dirección regional de CONAP
4 Calderón T, Valladares B, Véliz ME, Méndez
en Sololá, y a sus guardarrecursos, en la Reserva
C. Composición y Estructura Vegetal del
de usos múltiples de la cuenca del lago de
Volcán de Pacaya. Guatemala: USAC, Escuela
Atitlán, en particular a Marcos Porón, Domingo
de Biología. Doc. Téc. Np. 2005. 19 p.
Mendoza, Vicente Quixquinab, Rubén Sumosa,
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40. Bidens sp. /Her 70. Pluchea salicifolia (Mill.) S.F. Blake /Her
41. Bidens squarrosa Kunth /Li 71. Polymnia maculata Cav. /Her
42. Bidens triplinervia Kunth /33287 /Her 72. Psacalium pinetorum (Standl. & Steyerm.)
43. Calea integrifolia (DC.) Hemsl. /33221 / Cuatrec. /Arb
Arb 73. Rojasianthe superba Standl. & Steyerm. -
44. Calea ternifolia Kunth /33069 /Her Baj lel /Arb
45. Cirsium subcoriaceum (Less.) Sch. Bip. / 74. Roldana acutangula (Bertol.) Funston /Arb
33215 /Arb 75. Roldana aschenborniana (S. Schauer) H.
46. Conyza bonariensis (L.) Cronquist /Her Rob. & Brettell (Senecio quezalticus L. O.
47. Dahlia australis (Sherff.) P.D. Sorensen / Williams) /Arb
33251 /Arb 76. Roldana gilgii (Greenm.) H. Rob. &
48. Dahlia coccinea Cav. /33139 /Arb Brettell /33303 /Arb
49. Dahlia imperialis Roezl ex Ortgies /Arb 77. Roldana heterogama (Benth.) H. Rob. &
50. Eupatorium aschenbornianum S. Schaver / Brettell /33143 /Arb
Arb 78. Roldana petasitis (Sims) H. Rob. &
51. Eupatorium corymbosum Aubl. /Arb Brettell (Senecio petasitis (Sims) DC.) /
52. Eupatorium luxii B. L. Rob. /33235 /Arb Arb
53. Eupatorium morifolium Mill. /Arb 79. Sabazia sarmentosa Less. /33305 /Her
54. Eupatorium nubigenum Benth. /Arb 80. Salmea scandens (L.) DC. /33060 /Her
55. Eupatorium pycnocephalum Less./Arb 81. Schistocarpha seleri Rydb. /Arb
56. Eupatorium sp. /Arb 82. Schistocarpha sp. /Arb
57. Fleishmannia sp. /Her 83. Senecio barba-johannis DC. /Arb
58. Gnaphalium liebmanii Sch. Bip. ex Klatt / 84. Senecio cobanensis J.M. Coult.
Her (Telanthophora cobanensis (J.M. Coult.)
59. Gnaphalium liebmannii var. monticola H. Rob. & Brettell) /Arb
(McVaugh) D.L. Nash /33070 /Her 85. Senecio doratophyllus Benth /33255 /Arb
60. Gnaphalium salicifolium (Bertol.) Sch. 86. Senecio phorodendroides L. O. Williams
Bip. /Her (Pentacalia parasitica (Hemsl.) H. Rob. &
61. Gnaphalium sp. /Her Cuatrec.) /Epf
62. Hieracium irasuense Benth. /33277 /Her 87. Senecio sp. /Arb
63. Lasianthaea fructicosa (L.) K. M. Becker / 88. Sigesbeckia jorullensis Kunth /33212 /Her
Arb 89. Simsia sp. /Her
64. Liabum discolor (Hook. & Arn.) Benth. & 90. Sonchus oleraceus L. /Her
Hook. F. ex Hemsl. /33237 /Arb 91. Sp. 1 (Helianthae) /Arb
65. Liabum sp. /33323 /Arb 92. Spilanthes ocymifolia (Lam.) A.H. Moore /
66. Montanoa hexagona B.L. Rob. & Greenm. 33113 /Her
/33289 /Ár 93. Stevia lucida var. oaxacana (DC.) Grashoff
67. Montanoa hibiscifolia Benth. /33284 /Arb /Arb
68. Montanoa pteropoda S.F. Blake /Arb 94. Stevia polycephala Bertol. /33272 /Arb
69. Neomirandaea araliifolia (Less.) R.M. 95. Tagetes foetidissima DC. /33227 /Her
King & H. Rob. /33123 /Epf
83
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144. Tinantia erecta (Jacq.) Schltdl. /33114 /Her 169. Antidaphne viscoidea Poepp. & Endl. /
145. Tripogandra sp. /Her 33304 /HemiPst
Convolvulaceae Ericaceae
146. Ipomoea signata House /33196 /Li 170. Arbutus xalapensis Kunth /31925 /Ár
Crassulaceae 171. Gaultheria odorata Bredem. ex Willd. /
147. Echeveria guatemalensis Rose /33354 /Epf 31142 /Arb
148. Echeveria steyermarki Rose /Epp 172. Pernettya ciliata (Schltdl et Cham) Small /
149. Kalanchoe sp. /Epp 31875 /Arb
150. Sedum guatemalense Hemsl. /31161/Epf Euphorbiaceae
151. Sedum sp. /Epf 173. Acalypha guatemalensis Pax & K. Hoffm. /
Cucurbitaceae 3335 /Arb
152. Cyclanthera langaei Cogn. /31114 /Li 174. Acalypha sp. /34198 /Arb
153. Cyclanthera steyermarkii Standl. /Li 175. Acalypha trachyloba Müll. Arg. /31922 /
Cupressaceae Arb
154. Cupressus lusitanica Mill. /Ár 176. Euphorbia oerstediana (Klotzsch &
Cuscutaceae Garcke) Boiss. /31935 /Her
155. Cuscuta sp. /Pst 177. Euphorbia orizabae Boiss. /33263 /Her
Cyperaceae 178. Jatropha curcas L. /33137 /Ár
156. Carex donnell-smithii L. H. Bailey /33222 / 179. Phyllanthus sp. /34369 /Her
Her Fabaceae
157. Carex polystachya Sw. ex. Wahlenb. /Her 180. Canavalia hirsuta (M. Martens & Galeotti)
158. Carex sp. /Her Standl. /31789 /Li
159. Cyperus altemifolius L. /Her 181. Crotalaria sp.
160. Rhynchospora sp.1 /Her /34346 /Her
161. Rhynchospora sp.2 /Her 182. Dalea lutea var. gigantea (Rose ex Rydb.)
162. Uncinia hamata (Sw.) Urb. /Her Barneby /33280 /Arb
Dennstaedtiaceae 183. Dalea sericea Lag. /Arb
163. Dennstaedtia sp. /33316 /Her 184. Desmodium orbiculare Schltdl. /33257 /
164. Pteridium aquilinum (L.) Kuhn /31167 / Her
Her 185. Desmodium skineri Benth. ex Hemsl. /Her
Dioscoreaceae 186. Desmodium sp. /Her
165. Dioscorea dicranandra Donn.Sm. /Her 187. Diphysa sp. /34353 /Her
Dryopteridaceae 188. Eriosema sp. /34252 /Her
166. Phanerophlebia macrosora (Baker) 189. Lupinus montanus Kunth /33198 /Her
Underw. /31967 /Her 190. Phaseolus macrolepis Piper /34350 /Li
167. Polystichum ordinatum (Kunze) Liebm. / 191. Phaseolus polyanthum Greenm /34197 /Li
34333 /Her -Epf 192. Teramnus sp. /33310 /Li
Equisetaceae Fagaceae
168. Equisetum hyemale L. /31881 /Her 193. Quercus acatenangensis Trel. /31157 /Ár
Eremolepidaceae 194. Quercus crispifolia Trel. /34275 /Ár
195. Quercus peduncularis Née /Ár
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196. Quercus pilicaulis Trel. /31156 /Ár 222. Anthericum eleutherandrum (K. Koch)
197. Quercus tristis Liebm. /31146 /Ár H.E. Moore /33052 /Epp
Garryaceae 223. Maianthemum amoenum (H.L. Wendl.) La
198. Garrya laurifolia Hartw. ex Benth. /33266 Frankie /Epf
/Ár 224. Maianthemum flexuosum (Bertol.) La
Gentianaceae Frankie /Her
199. Halenia decumbens Benth. /33258 /Her Lomariopsidaceae
Geraniaceae 225. Elaphoglossum sp. /Her
200. Geranium andicola Loes. /33236 /Her Lophosoriaceae
Hippocastanaceae 226. Lophosoria quadripinnata var.
201. Billia hippocastanum Peyr. /31929 /Ár quadripinnata (J.F. Gmel.) C.Chr. /31821 /
Hydrangeaceae Arb
202. Philadelphus myrtoides Bertol. /31137 /Li Lythraceae
Hydrophyllaceae 227. Cuphea pinetorum Benth. /34268 /Her
203. Wigandia urens (Ruíz & Pav.) Kunth / Malpighiaceae
33241 /Arb 228. Gaudichaudia albida Schltdl. & Cham. /
Iridaceae 33253 /Arb
204. Orthrosanthus monadelphus Ravenna. /Her 229. Malpighia glabra L. /33116 /Arb
205. Sisyrinchium convolutum Nocca /Her Malvaceae
Lamiaceae 230. Malvaviscus arboreus Cav. /31953 /Arb
206. Cunila polyantha Benth /33273 /Her 231. Sida cordifolia L. /34120 /Her
207. Hyptis americana (Poir.) Briq. /Her Melastomaceae
208. Hyptis urticoides Kunth /Her 232. Heterocentron subtriplinervium (Link &
209. Salvia cinnabarina M. Martens & Galeotti Otto) A. Braun & C.D. Bouché /33145 /
/33268 /Arb Her
210. Salvia curtiflora Epling. /Arb 233. Leandra subseriata (Naudin) Cogn. /Arb
211. Salvia excelsa Benth. /33264 /Arb Mimosaceae
212. Salvia lasiantha Benth. /33288 /Arb 234. Acacia pennatula (Schltdl. & Cham.)
213. Salvia polystachia Cav. /Her Benth. /33064 /Arb
214. Salvia sp.1 /Arb 235. Calliandra grandiflora (L’Hér.) Benth. /
215. Salvia sp.2 /Arb 31961, 33111 /Arb
216. Salvia urica Epling /33071 /Her 236. Mimosa albida Humb. & Bonpl. ex Willd. /
Lauraceae 33061 /Her
217. Cinnamomum salvinii Kosterm. (Phoebe Myrsinaceae
salvinii (Mez) Lundell) /31973 /Ár 237. Ardisia sp. /33320 /Ár
218. Litsea glaucescens Kunth / 31133 / Ár 238. Parathesis sp. /34375 /Ár
219. Litsea guatemalensis Mez / 31141/ Ár 239. Synardisia venosa (Mast.) Lundell /31810 /
220. Ocotea sp. /34357 /Ár Ár
221. Phoebe sp. /34272 /Ár Myrtaceae
Liliaceae 240. Ugni montana (Benth.) O. Berg /33234 /
Arb
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297. Brachypodium mexicanum (Roem. & 325. Pleopeltis macrocarpa var. interjecta
Schult.) Link /33144 /Her (Weath.)
298. Bromus exaltatus Bernh./Her A.R.Sm. /34223 /Epf
299. Bromus laciniatus Beal /Her 326. Polypodium alansmithii R.C. Morán /
300. Calamagrostis guatemalensis Hitchc. / 34142 /Epf
33293 /Her 327. Polypodium hartwegianum Hook. /Epf
301. Festuca amplissima Rupr. /33267 /Her 328. Polypodium longepinnulatum E. Fourn. /
302. Festuca megalura Nutt. /Her 31791 /Epf
303. Lasiacis divaricata (L.) Hitchc. /Arb 329. Polypodium sp. /34215 /Her
304. Lasiacis sp. /Arb Prunaceae
305. Melinis minutiflora P. Beauv. /33271 /Her 330. Prunus salasii Standl. /31815 /Ár
306. Muhlenbergia presliana Hitchc. /Arb 331. Prunus serotina sub sp. Capuli (Cav.)
307. Paspalum sp. /Her McVaough /33063 /Ár
308. Pennisetum purpureum Schumach. /33262 Pteridaceae
/Her 332. Adiantum andicola Liebm. /33067/Her
309. Poa annua L. /33242 /Her 333. Bomeria pedata (Sw.) E. Fourn. /Epp
310. Setaria parviflora (Poir.) Kerguélen /Her 334. Cheilanthes pyramidalis Feé /34354 /Epp
311. Trisetum deyeuxioides (Kunth) Kunth /Her 335. Notholaena sp. /34210 /Epp
312. Trisetum sp. /Her 336. Pellaea sagitata (Cav.) Link /33300 /Epp
313. Vulpia bromoides (L.) Gray /33232 /Her 337. Pellaea ternifolia (Cav.) Link /33240 /Epp
314. Zeugites munroanus Hemsl. /Her 338. Pteris cretica L. /31164 /Her
Polemoniaceae 339. Pteris sp. /33317 /Her
315. Cobaea lutea D.Don /34206 /Li Pyrolaceae
Polygalaceae 340. Chimaphila maculata (L.) Pursh /33226 /
316. Monnina xalapensis Kunth /33225 /Arb Her
317. Polygala costaricensis Chodat /33119 /Her Ranunculaceae
318. Polygala panniculata L. /33050 /Her 341. Clematis dioica L. /31955 /Li
Polygonaceae 342. Clematis grossa Benth. /33291 /Li
319. Muehlenbeckia tamnifolia (Kunth) Meisn. / 343. Thalicthrum guatemalense C. DC. & Rose
33219 /Arb /31958 /Her
Polypodiaceae Rhamnaceae
320. Campyloneurum amphostenon (Kunze ex 344. Ceanothus azureus Desf. ex DC. /31944 /
Klotzsch) Fée /31942 /Epf Arb
321. Campyloneurum sp. /Epf 345. Rhamnus capreifolia Schltdl. /33066 /Ár
322. Campyloneurum xalapense (Feé) H. Christ 346. Rhamnus discolor Lesq./33356 /Ár
/33254 /Epp Rosaceae
323. Pleopeltis angusta Humb. & Bonpl. ex. 347. Alchemilla procumbens Rose /34268 /Her
Willd. /31790 /Epf 348. Holodiscus argenteus (L.f.) Maxim /31520
324. Pleopeltis interjecta (Weath.) Mickel & /Arb
Beitel /31814 /Epf 349. Rubus alpinus Macfad. /Li
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350. Rubus hadrocarpus Standl. & Steyerm. / 375. Smilax lanceolata L. /Li
34359 /Li 376. Smilax mollis Humb. et Bonpl. ex Willd. /
351. Rubus sp. /Li Li
Rubiaceae 377. Smilax sp. /Li
352. Borreria Laevis (Lam.) Griseb /Her Solanaceae
353. Borreria sp. /Her 378. Cestrum guatemalense C.V. Morton /33259
354. Bouvardia leiantha Benth. /33112 /Her /Ár
355. Chiococca phaenostemon Schlcht. /Ár 379. Cestrum pacayense Francey /33203 /Ár
356. Crusea coccinea DC. /34364 /Her 380. Lycianthes quichensis (J.M. Coult. &
357. Didymaea microphylla L.O. Williams / Donn.-Sm.) Bitter /34368 /Arb
33328 /Li 381. Lycianthes sp. /34201 /Arb
358. Galium mexicanum var. platyphyllum 382. Lycianthes tricolor (Sessé & Moc. ex
Greenm /Li Dunal) Bitter /Arb
359. Galium uncinulatum DC./Li 383. Solandra grandiflora Sw. /Epf
360. Relbunium aschenbornii (Nees & S. 384. Solanum appendiculatum Dunal /34220 /Li
Schamer) Hamsl. /33294 /Li 385. Solanum fontium Standl. & Steyerm. /
361. Rondeletia cordata Benth. /33322 /Arb 31171 /Her
362. Spermacoce sp. /Her 386. Solanum hartwegii Benth. /33207 /Arb
Rutaceae 387. Solanum morelliforme Bitter & Münch /
363. Zanthoxylum aguilarii Standl. & Steyerm. / 34261 /Epf
33201 /Li 388. Solanum nigrescens M. Martens & Galeotti
364. Zanthoxylum harmsianum (Loes.) P. /31803 /Her
Wilson /Li 389. Solanum nigricans M.Martens & Galeotti /
Sabiaceae 33275, 31783 /Arb
365. Meliosma dives Standl. & Steyerm. /31131 390. Solanum nudun Dunal /Epf
/Ár 391. Solanum sp. /Epf
Sapindaceae 392. Solanum wendlandii Hook. f. /31937 /Li
366. Serjania sp. /33324 /Li Sterculiaceae
Saurauiaceae (Actinidaceae) 393. Chiranthodendron pentadactylon
367. Saurauia oreophila Hemsl. /33140 /Ár Larreategui /31116 /Ár
368. Saurauia subalpina Donn. Sm. /31160 /Ár Thelypteridaceae
Scrophulariaceae 394. Thelypteris sp. /34242 /Her
369. Castilleja integrifolia L. f. /33059 /Her Tiliaceae
370. Lamourouxia dependens Benth /33274 / 395. Heliocarpus donnellsmithii Rose /Ár
Her 396. Triumfetta dumetorum Schlecht. /34125 /
371. Lamourouxia multifida Kunth /33072 /Her Her
372. Sibthorpia repens (L.) Kuntze /Li Ulmaceae
Selaginellaceae 397. Trema micrantha (L.) Blume /31904 /Ár
373. Selaginella sp. /34259 /Epp Urticaceae
Smilacaceae 398. Phenax hirtus (Sw.) Wedd. /33146 /Her
374. Smilax jalapensis Schltdl. /Li 399. Phenax mexicanus Wedd. /33138 /Her
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Ár: Árboles (DAP mayor a 10 cm); Arb: Arbustos (DAP mayor a 1 y menor a 10 cm); Her: Herbáceas (DAP menor a
1 cm); Li: Lianas (Escandentes, Bejucos, trepadoras, etc.); Epf: Epifitas; Epp: Epipétricas; Pst: Parásitas;
HPst: Hemi Parásitas.
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Acevedo L ., Arroyo G.
RESUMEN
La vaginitis es el proceso patológico que con mayor frecuencia afecta a mujeres en edad reproductiva y puede ser
responsable, en algunos casos, de complicaciones y secuelas serias para la salud de la mujer. En Guatemala, no se tiene
conocimiento preciso de la frecuencia de estos procesos, ni tampoco de los agentes que lo causan, razón por la cual se llevó a
cabo esta investigación.
Se realizó un estudio prospectivo en 594 pacientes que asistieron a la clínica de Papanicolaou de la Asociación
Pro Bienestar de la Familia (APROFAM) en la ciudad de Guatemala, las cuales fueron evaluadas clínicamente y
mediante pruebas de laboratorio para determinar la presencia de microorganismos patógenos.
Utilizando una metodología de laboratorio sencilla y estrictas definiciones de caso, se determinó que 305
pacientes (51.3%) padecían de vaginitis. Vaginosis bacteriana fue la principal cause de vaginitis en el 33% de los
casos (196 pacientes), otros padecimientos incluyeron vaginitis inespecífica en 11.8% (70 pacientes) vaginitis por
Candida sp. En 4.2% (25 pacientes) y vaginitis por Trichomonas vaginalis en 2.4% (14 pacientes). El presente
trabajo establece una base importante para el manejo de las pacientes con vaginitis y señala la importancia de la
vaginosis bacteriana en nuestro medio.
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TABLA 1
INCIDENCIA Y ETIOLOGÍA DE VAGINITIS INFECCIOSA
Clínica de Papanicolaou, APROFAM
DIAGNOSTICO* NÚMERO PORCENTAJE SIGNOS-SÍNTOMAS**
Tricomoniasis 14 2.4 8 (57.1%)
Candidiasis 25 4.2 25 (100.0%)
Vaginosis bacteriana 196 33.0 119 (60.7%)
Vaginitis inespecífica 70 11.8 37 (52.7%)
Normal 289 48.7 NA
TOTAL 594 100.0 -
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TABLA 2
SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD DE PRUEBAS DE LABORATORIO EN EL DIAGNÓSTICO DE 98
PACIENTES CON VAGINOSIS BACTERIANA
Clínica de Papanicolaou, APROFAM
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Tabla 3
CARACTERÍSTICAS DIAGNOSTICAS DE LA PRUEBA DE PAPANICOLAOU COMPARADA
CON EL MÉTODO MICROBIOLÓGICO*
Clínica de Papanicolaou, APROFAM
Diagnóstico +/+** +/- -/+ -/- Sens Espe VP+ VP- Kappa
Tricomoniasis 4 4 0 292 50% 100% 100% 99% 0.66
Candidiasis 8 8 14 270 50% 95% 36% 97% 0.43
Vaginosis bacteriana 64 34 4 198 65% 98% 94% 85% 0.71
Vaginitis inespecífica 20 5 141 134 80% 49% 12% 96% 0.17
Normal 35 118 11 136 23% 93% 76% 54% 0.31
* =Tinción de Gram, examen en fresco, prueba de aminas y pH
**=Método microbiológico/Papanicolaou. Sens = sensibilidad. Espe=especificidad.
VP+=valor predictivo positivo. VP-=Valor predictivo negativo. Kappa=Índice de correlación
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definitivas al respecto. Un estudio específico del clave en el 94.9%, para una tinción de Gram com-
tipo y grado de sintomatología observado en patible con VB en el 91.8%, para una prueba de
pacientes con vaginitis por tricomonas es deseable aminas positiva en el 90.8% y para un pH mayor
para definir mejor el espectro clínico de esta de 4.5 en el 88.8%. Desafortunadamente, una sola
entidad en las pacientes guatemaltecas. prueba no puede utilizarse para establecer el
De las 70 pacientes con vaginitis inespecífica, diagnóstico dado que frecuentemente pacientes
el 47.1% estaban asintomáticas. Este dato es con otros diagnósticos puedan tener resultados
interesante, pero dado que esta entidad positivos en una sola de ellas, es decir baja
probablemente representa diversas causas de especificidad. La especificidad puede aumentarse
vaginitis, serán necesarios más estudios al utilizando combinaciones de pruebas, así
respecto, para llegar a conclusiones válidas. Debe combinaciones de dos pruebas positivas tienen
también cuestionarse si el método estándar una sensibilidad razonable (81.4% a 86.7% en
microbiológico utilizado en este estudio, es este estudio) aunque aún se observan resultados
suficientemente sensible o si la baja especificidad falsos positivos. El criterio de Amsel (13)
está dada por una sensibilidad mayor de la prueba consistente en al menos 3 de 4 pruebas positivas
comparativa (Papanicolaou). Un estudio (presencia de células clave, prueba de aminas
específico de vaginitis inespecífica sería de interés positiva, pH mayor de 4.5 y secreción homogénea
para aclarar estos puntos y establecer criterios y adherente de color grisáceo) es el
diagnósticos específicos (11). internacionalmente aceptado, teniendo una
sensibilidad de hasta el 100% y especificidad de
En contraste, el 100% de las pacientes con 98% (6). En este estudio se corrobora esto,
candidiasis estaban sintomáticas, ya que por considerándose recomendable utilizar al menos
definición de caso, se requería de síntomas para 2 criterios en el diagnóstico de VB, que en este
establecer el diagnóstico. El requerir la presencia caso serían la prueba de aminas positiva y la
de síntomas para diagnosticas vaginitis por Can- presencia de células clave en el examen en fresco
dida se justifica porque la cuantificación de este de la secreción vaginal, ya que estas pruebas son
germen en frotes de secreción vaginal está sujeta aplicables sin requerir mayor tecnología, ni
a subjetividad, y la sola presencia de levaduras aparatos sofisticados y tomar en cuenta la
no establece el diagnóstico, dado que con presentación clínica del flujo que orienta
frecuencia se detectan éstas, en muestras de inicialmente la investigación de VB.
fluidos vaginales en mujeres normales como
parte de la microbiota (12). TINCION DE PAPANICOLAOU EN EL
DIAGNÓSTICO DE VAGINITIS
En general, los resultados del presente estudio
confirman la utilidad de los criterios de Amsel Contrario a lo reportado en diversos estudios
en el diagnóstico de VB (13). Las pruebas que (14, 15), la tinción de Papanicolaou no fue un
se realizan según este criterio son en lo indi- método eficiente de diagnóstico de vaginitis
vidual, frecuentemente positivas en pacientes que causado por las diferentes entidades en la
se demuestra tienen VB. En esta investigación población estudiada, en las condiciones de
se obtuvieron resultados positivos para células trabajo de la clínica. Si bien es cierto que la
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