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VOL. 4 No. 1 REVISTA CIENTÍFICA INSTITUTO DE INVESTIGACIONES QUÍMICAS Y BIOLÓGICAS


EDICION ESPECIAL FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y FARMACIA
AÑO 2009 UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

JUNTA DIRECTIVA DE LA FACULTAD DE


CIENCIAS QUIMICAS Y FARMACIA CONTENIDO
DECANO: Ph D. Oscar Manuel Cobar Pinto
Pag.
Secretario: Lic. Pablo Ernesto Oliva Soto 1. Presentación

Vocal I: Licda. Lillian Raquel Irving Antillón. 2. Artículos científicos


Vocal II: Licda. Lilliana Vides de Urízar
2.1 RMN mono y di dimensional como herramienta para
Vocal III: Lic. Luís Antonio Gálvez Sanchinelli determinar la estructura del monosacárido en un glicósido
diterpénico.....………........................................................... 1
Vocal IV: Br. Andrea Alejandra Alvarado Álvarez
Cobar O.
Vocal V: Br. Aníbal Rodrigo Sevillanos Cambronero
2.2 Determinación de la actividad inmunomoduladora de dos
extractos del hongo Grifola frondosa (Dicks.:) S.F Gray,
mediante ensayos in vitro …………………………................... 8

2.3 Inventario de mercurio metálico presente en hospitales


públicos y Privados con capacidad mayor de 50 camas,
ubicados en la ciudad de Guatemala..………………………17
Contreras J, Guzmán C.

2.4 Gasteromycetes de Guatemala: Especies citadas en


Instituto de Investigaciones Químicas y Biológicas el periodo de 1948 a 2008…………………….....….....…....27
Morales O, Garcia E, Cáceres R, Bran M, Gurriarán N,
- IIQB - Flores R.

2.5 Asociación entre la presencia de Helicobacter pylori y


Dr. Jorge Luís De León Arana patología gástricas detectadas por endoscopia. ……………34
Director Alonzo L, Arroyo G, Benito M, Duarte A, Matta V, Nave F,
Pernilla L Polanco S, Rodas G, Ruiz R.

2.6 Interacción de linfocitos T CD4 con el segmento V3 de la


MSc. Aura Lissete Madariaga Monroy glicoproteína 120 presente en el virus de inmunodeficiencia
Coordinadora Unidad Técnica humana tipo 1………........................................................…41
Carrascoza J, Paz M.

Editora 2.7 Estudio de la vegetación del volcán San Pedro, Reserva


de usos múltiples de la cuenca del lago de Atitlán,
Sololá………………….................................................……65
Pardo P, Véliz M, Méndez C.

3. Invitado

3.1 Incidencia y etiología de vaginitis infecciosa en mujeres


Guatemaltecas…................................................................. 91
20708246 Acevedo L, Arroyo G.

Esta revista no se hace responsable por las ideas o conceptos de los autores cuyos trabajos se publican.
Se permite la reproducción parcial o total de esta publicación, siempre que se indique su procedencia.
Diseño de portada, cortesía del Br. Roberto Cáceres, Departamento de Microbiología, Escuela de Química Biológica.

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PRESENTACIÓN
La Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia inmersa dentro de una institución de Educación
Superior pública como la Universidad de San Carlos de Guatemala, debe jugar un papel protagónico
dentro de las transformaciones requeridas en el país, inmerso desde principios de este siglo en la
“Sociedad del Conocimiento”, entendiéndola como un tipo de sociedad en la cual la creación de
conocimiento es una de las fuentes principales de la riqueza y del bienestar social de una nación y
en la que se debe transitar promoviendo el descubrimiento, la creación y la comunicación de
conocimientos sobre la ciencia, la naturaleza, la sociedad y el ser humano.
Por consiguiente, si la generación de conocimiento es la fuente principal de la riqueza y del bienestar,
las políticas de generación de conocimiento nuevo, son uno de los ejes fundamentales de la organización
política de estas sociedades.

Es por esto que es cada día más urgente la introducción de proyectos de investigación en el
proceso mismo de la enseñanza universitaria.

Investigaciones que generen conocimiento, lo transfiera a través de educación y el aprendizaje, lo


disemine mediante publicaciones científicas y lo explote mediante su aporte a la innovación y
desarrollo tecnológico.

En este contexto, nuestra Unidad Académica “líder en el desarrollo de investigación científica


en el país”, con la claridad de que la generación del conocimiento es el alma de la Universidad,
presenta esta nueva edición de la Revista Científica de la Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia.

Esta edición nos presenta resultados generados por nuestras Unidades de Investigación en las
áreas de salud, ambiente y ciencia básica. No se pretende brindar únicamente información, conscientes
de que esta en sí misma no vale nada, hay que descifrarla, convertirla en ideas y procesos cerebrales
que sirvan de fundamento para generar nuevas investigaciones, que aporten conocimiento científico
nuevo y soluciones a la problemática nacional.

La fortaleza de nuestro sistema educativo depende de una nueva generación de investigadores de alta
calidad, cuya preparación exige un cambio cultural.

Por ello es que se están haciendo todos los esfuerzos posibles para transformar nuestro Personal
Académico en docentes-investigadores, invirtiendo en la formación doctoral de más de veinticinco
profesores, quienes al finalizar sus estudios enriquecerán nuestro incipiente Sistema de Investigación.

Nuestra visión en el campo de la investigación científica, es la renovación de las formas de relación


con el aparato tecnológico local y con las instituciones que toman decisiones en los ámbitos público

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y privado, orientando la articulación de un nuevo “contrato social” entre la práctica científica y el


desarrollo social de nuestro país.

Agradeciendo el aporte a la ciencia de nuestros investigadores, exhortamos a todos a continuar


trabajando por UNA FACULTAD MODERNA, ORIENTADORA DE LA CIENCIA Y TECNOLOGÍA
DE ESTE PAÍS Y CON PROFUNDA SENSIBILIDAD SOCIAL”.

Oscar Manuel Cóbar Pinto, Ph.D.


Decano

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RMN mono y bi dimensional como herramientas para determinar la estructura del


monosocárido en un glicósido diterpénico

Cóbar O.
Departamento de Química Orgánica, Laboratorio de Investigación en Productos Naturales
Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad de San Carlos de Guatemala
ocobar@usac.edu.gt

La Resonancia Magnética Nuclear es actualmente la técnica de rutina para determinar la estructura de moléculas
orgánicas. Esta determinación no solo incluye la conectividad de los átomos en la molécula, sino también la
configuración relativa de los centros quirales que esta posea (Jacobsen, N. 2007).
Los glicósidos son metabolitos secundarios ampliamente distribuidos en la naturaleza, reportándose su existencia
tanto en el mundo terrestre como marino (Cutler, S.; Cutler, H. 2002; Blunt, J. et al. 2009). Se les asigna una gran
variedad de actividades biológicas, que van desde antimicrobianos, cardiotónicos, antitumorales, hasta anti-
inflamatorios, siendo esta última la más reportada recientemente (Cutler, S.; Cutler, H. 2002).
Los extractos polares son ricos en glicósidos que poseen entre 2 y 6 unidades (en algunos casos más) de
monosacáridos. Aglicones monoglicosidados, generalmente acetilados en una o más posiciones del monosacárido,
se encuentran en las fracciones hexánicas o clorofórmicas de los extractos (Jones, W.; Kinghorn, D. 2006).
Existen trabajos recientes que permiten deducir sin ambigüedad la información estructural clave sobre la posición
de las distintas unidades de carbohidratos sobre un aglicón, vía el análisis de desplazamientos químicos, patrones
de acoplamiento y multiplicidad de las señales (Bagno, A. et al. 2007).
Rutinariamente, el desplazamiento químico de los protones, proporciona información sobre su ambiente químico,
estereoquímica relativa del centro quiral en donde se encuentra, e incluso, la constitución y conformación de la
molécula (Bose-Basu, B. et. al. 2007).
Combinando toda esta información y analizándola detenidamente como una identidad espectral, es posible conocer
la posición de las cadenas glicosidadas en el aglicón y la secuencia de monosacáridos en las mismas.
13
Lo anterior se realiza con ayuda de la información que proporciona el RMN- C y de los datos bidimensionales,
principalmente COSY, NOESY, HMQC y HMBC (Jiménez, C. 2008).
Normalmente, la identidad de los monosacáridos individuales, se deduce a través del análisis del hidrolizado
o
respectivo (HCl al 1N a 48-50 C durante tres horas para 0.5 mg del glicósido) por GC-MS quiral, utilizando
patrones puros de monosacáridos para comparar (Leavitt, A.; Sherman, W. 1982).
En este trabajo se pretende ilustrar de una manera simple, cómo elucidar la estructura de un diterpeno
monoglicosidado natural, aislado del gorgonio caribeño Eunicea sp., que posee propiedades citotóxicas (10-4-10-5
M contra varias líneas celulares cancerosas) y anti-inflamatorias a niveles comparables a indometacina (Cóbar, O.
et. al. 1997).
El glicósido muestra una fórmula molecular de C30H48O8, obtenido a partir del espectro de HRFABMS, que indica
la existencia de siete grados de insaturación.
El espectro infrarrojo muestra absorciones atribuibles a grupos hidroxilo (3438 cm-1) y éster carbonilo (1748 cm-1).
El espectro de RMN-1H (300 MHz en CDCl3) muestra a campo alto, la presencia de seis grupos metilos como singletes
a δ 1.22, δ 1.55, δ 1.56, δ 1.63, δ 2.05 y δ 2.11 (los dos últimos asignables a metilos localizados en grupos éster
acetato), cuatro grupos metileno (todos multipletes a δ 1.27, δ 1.65, δ 1.86 y δ 2.20) y un metino multiplete a δ 1.45.
A campo bajo se observan diez señales claramente resueltas: dos metilenos a δ 4.10 (dd, J = 2.4, 12.0 Hz) y δ 4.19
(dd, J = 6.1, 12.0 Hz) y ocho metinos a δ 3.41 (t, J = 8.46 Hz), δ 3.59 (ddd, J = 2.5, 6.1, 9.1 Hz), δ 3.68 (t, J = 9.16
Hz), δ 4.45 (d, J = 4.5 Hz), δ 4.87 (t, J = 9.8 Hz), δ 4.93 (t, J = 6.6 Hz), δ 5.00 (t, J = 6.7 Hz) y δ 5.07 (t, J = 6.7 Hz).

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Las demás señales están solapadas en la región comprendida entre δ 2.0 y δ 2.2 (Figura 1).

Figura 1. Espectro de RMN- H del glicósido-diterpénico


1

El espectro de RMN-13C (75 MHz en CDCl3) muestra siete metilos que resuenan a δ 15.3, δ 15.5, δ 15.6, δ 20.7 y
δ 20.9 (los dos últimos atribuibles a metilos sobre éster acetato), δ 24.0 y δ 24.5, ocho metilenos a δ 24.0, δ 24.7,
δ 28.2, δ 28.3, δ 37.8, δ 38.8, δ 39.4, y δ 62.8, nueve metinos a δ 47.7, δ 70.9, δ 71.6, δ 74.5, δ 74.7, δ 96.7, δ 125.1,
δ 125.7 y δ 125.8 y seis carbonos cuaternarios a δ 81.6, δ 133.1, δ 133.5, δ 134.1, δ 170.6 y δ 170.7 (los dos últimos
atribuibles a grupos carbonilo de éster acetato) (Figura 2).

Figura 2. Espectro de RMN- C del glicósido-diterpénico


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La existencia de un esqueleto diterpénico se deduce por la presencia de cinco grupos metilo no adscritos a éster
acetato, siete metilenos no-oxigenados, cuatro carbonos cuaternarios no atribuibles a grupos carbonilo, tres metinos
vinílicos y un metilo que absorbe a campo alto.
La resonancia en el espectro de RMN-13C a δ 96.7 (d) que puede asignarse a un carbono anomérico y cinco señales
en la región comprendida entre δ 62-75, sugieren la existencia de una hexosa en la molécula.
La presencia de un grupo acetal y numerosos carbonos oxigenados, analizados en conjunto con la fórmula molecu-
lar, son fuertes indicativos de la presencia de un fragmento de 10 átomos de carbono adicionales al diterpénico, lo
que sugiere que estructuralmente la molécula contiene una hexosa diacetilada unida a un aglicón diterpénico.
La elucidación vía RMN de la estructura y conformación de la hexosa, se inicia con el análisis de las correlaciones
1
que muestran los protones oxigenados en el espectro del 1H- H COSY (ver Figura 3).

Figura 3. Espectro H- H COSY (300 MHz en CDCl ) del glicósido-diterpénico


1 1
3

Designando como “pivote” o “señal punto de partida” al protón anomérico, (δ 4.45, d, J = 7.65 Hz, H-1´), se
observa que correlaciona con el triplete ubicado a δ 3.41 (J = 8.7 Hz, H-2´) quien a su vez lo hace con la señal a δ
3.68 (t, 9.16, H-3´).

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La secuencia de correlaciones sucesivas continúa con el protón H-3´ por su correlación con el que resuena a δ 4.87,
(t, 9.67, H-4´) y este a su vez con el multiplete a δ 3.59 (ddd, 2.51, 6.14, 9.18, H-5´) y este con ambos protones H-
6´ (δ 4.10, dd, 2.46, 11.99/δ 4.19, dd, 6.14, 12.00). Finalmente, se observa la correlación entre ambos protones H-
6´ para terminar la secuencia.
Lo anterior nos permite asignar, sin ambigüedades, los protones asociados a la hexosa de la molécula.
Con los protones glicosídicos debidamente identificados, se procede a asignar los carbonos respectivos mediante
el análisis del espectro de 1H-13C HETCOR (CSCM) (ver Figura 4).

Figura 4. Espectro de 1H-13C-HETCOR (CSCM a 300 MHz en CDCl3) del glicósido-diterpénico

La conformación beta del enlace glicósidico entre la hexosa y la porción diterpénica de la molécula, se puede
inferir por el desplazamiento químico y constante de acoplamiento del protón anomérico (δ 4.45, d, J = 7.65 Hz),

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que claramente indica su posición axial. Un desplazamiento químico superior a 4.8 ppm y una constante de
acoplamiento 3JH-H menor de 4 Hz indica que la posición del protón anomérico es ecuatorial.
El espectro de PS-NOESY, específicamente en el área correspondiente a los protones del azúcar (ver Figura 5),
muestra correlaciones fuertes entre los protones H-1´ y H-3´, H-1´ y H-5´ , H-3´ y H-5´, H-2´ y H-4´, que
conjuntamente con la magnitud de las constantes de acoplamiento de dichos protones (3JH-H entre 6.5 y 9.1 Hz), son
evidencia inequívoca de la relación 1,3-diaxial que existe entre ellos.

Figura 5. Espectro de PS-NOESY (300 MHz en CDCl ) del glicósido-diterpénico


3

Organizando la información espectral y las inferencias efectuadas hasta ahora, es posible asignar la presencia de
una glucosa en forma de piranosa y con una conformación beta en su enlace glicosídico.

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Queda ahora por determinar la posición de los dos grupos éster acetato que posee la molécula. El desplazamiento
a campo bajo de los protones H-4´ (δ 4.87) y H-6´ (δ 4.10 y δ 4.19), que normalmente se encuentran en la zona
de 3.5-3.0 ppm respectivamente en CDCl3 y las correlaciones encontradas entre los protones H-4´ y H-6´ con las
señales de RMN-13C a δ 170.6 y δ 170.7, adscritas a los grupos éster-carbonilo en el espectro de HMBC, localizan
respectivamente ambos grupos sobre los carbonos C-4´ y C-6´ del residuo glicosídico.
Hay que puntualizar que la aplicación rutinaria de RMN es un método no-quiral, por lo que no puede distinguir
entre las series “D” o “L” de un monosacárido.
Por convención, las hexosas de la serie “D” son aquellas que poseen el grupo hidroxilo sobre el carbono quiral de
mas alta numeración a la derecha en el sistema de proyección de Fischer (quedando ubicado el grupo CH2OH en
posición ecuatorial en la conformación de silla).
Los que lo poseen a la izquierda, se asignan a la serie “L”.

La utilización de reactivos desplazantes de Lantánido puede discriminar entre ellos. Teóricamente es posible hacerlo
debido al diasterotopismo causado por la inducción asimétrica, que en la práctica, requiere comparación con datos
de la literatura de moléculas con conocida configuración absoluta en su azúcar (Eliel E.; Wilen, S. 1994).
Basado en el análisis elucidativo efectuado, es confiable entonces asignar la porción glicosídica del glicósido-
diterpénico como β-D-4,6-diacetilglucopiranosa.

La identidad de esta hexosa fue confirmada por análisis del hidrolizado en una columna quiral por GC-MS
(Cóbar, O. et. al. 1997).

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REFERENCIAS 10. Leavitt, A.; Sherman, W. Direct gas-chromato-


graphic resolution of DL-myo-inositol 1-phos-
1. Bagno, A.; Rastrelli, F.; Saielli, G. Prediction of the phate and other sugar enantiomers as simple
H and 13C NMR Spectra of r-D-Glucose in Water
1 derivatives on a chiral capillary column. Carbo-
by DFT Methods and MD Simulations. Journal of hydrate Research, 1982, 103, 203-212.
Organic Chemistry, 2007, 72, 7373-7381.

2. Blunt, J.; Copp, B.; Hu, W-P.; Munro, M.;


Northcote, P.; Prinsep, M. Marine natural prod-
ucts. Natural Product Reports, 2009, 26, 170–244.

3. Bose-Basu, B.; Klepach, T.; Bondo, G.; Bondo, P.;


Zhang, W.; Carmichael, I.; Serianni, A. 13C-13C
NMR Spin-Spin Coupling Constants in Saccha-
rides: Structural Correlations Involving All
Carbons in Aldohexopyranosyl Rings. Journal of
Organic Chemistry, 2007, 72, 7511-7522.

4. Cóbar, O.M.; Rodríguez, A.D.; Padilla, O.L.; Sánchez,


J. The Calyculaglycosides; Dilophol-Type
Diterpene Glycosides Exhibiting Antiinflammatory
Activity from the Caribbean Gorgonian Octocoral
Eunicea sp. Journal of Organic Chemistry, 1997, 62,
7183-7188.

5. Cutler, S.; Cutler, H. Biologically active natural


products: pharmaceuticals. CRC Press, New
York, 2000, 268 pp.

6. Eliel, E.L.; Wilen, S.H. Stereochemistry of Organic


Compounds. Ch. 11th John Wiley and Sons Inc.
New York, USA. 1994, 750 pp.

7. Jacobsen, N. NMR spectroscopy explained:


simplified theory, applications and examples for
organic chemistry and structural biology. Wiley-
Interscience, Hoboken, N.J., 2007, 668 pp.

8. Jiménez, C. Estrategias en la Determinación


Estructural de Glicósidos y Poliglicósidos por
RMN. Manual de Determinación Estructural de
Compuestos Naturales. CYTED-Convenio Andrés
Bello, Colombia, 2008, 495-525 pp.

9. Jones, W.; Kinghorn, D. Extraction of Plant


Secondary Metabolites. Natural Product Isolation,
in Methods in Biotechnology, 2nd. Ed. Ch. 13th ,
Humana Press, USA, 2006, 323-352 pp.

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DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD INMUNOMODULADORA DE DOS EXTRACTOS


DEL HONGO
GRIFOLA FRONDOSA (DICKS.:FR.) S.F. GRAY, MEDIANTE ENSAYOS IN VITRO

Lorenzana R1, Mazariegos A1, Paz M1 y Sommerkamp I2


1
Unidad de Bioensayos, Depto. de Citohistología, Escuela de Química Biológica, Facultad de CCQQ y Farmacia, USAC. 2
Laboratorio Fitomykoterapéutico Lavra Mambré, Guatemala, C.A.

RESUMEN
Fue evaluada la actividad de dos extractos del hongo comestible Grifola frondosa (Dicks.:Fr.) S.F. Gray, conocido
comúnmente como maitake sobre el sistema inmune humano. Se estudió la actividad inmunomoduladora de los extractos
acuoso y etanólico obtenidos del cuerpo fructífero del hongo sobre los linfocitos por medio de un ensayo linfoproliferativo y
fueron realizados ensayos hemolíticos in vitro para probar su influencia sobre las vías clásica y alterna del sistema de
complemento.
El ensayo de linfoproliferación fue realizado colocando linfocitos purificados expuestos a los extractos y cultivados
para una evaluación final colorimétrica con XTT, una sal de tetrazolio que es reducida a un compuesto coloreado y soluble por
la actividad enzimática mitocondrial presente en células vivas.
Para la evaluación de los extractos sobre el sistema de complemento fueron utilizados ensayos hemolíticos basados en
la ruptura de eritrocitos por el complejo de ataque a la membrana (CAM) generado tras la activación del sistema de complemento.
La absorbancia de la hemoglobina liberada por los eritrocitos fue el parámetro de medición de la actividad del sistema de
complemento.
Ambos extractos de G. frondosa mostraron actividad estimuladora de la linfoproliferación, observándose mayor actividad
en el extracto etanólico. Los bioensayos sobre el sistema de complemento demostraron una acción inhibitoria en ambos
extractos y sobre las dos vías del complemento, clásica y alterna.

SUMMARY
The activity on human immune system of two extracts obtained from the edible mushroom Grifola frondosa (Dicks.:Fr.)
S.F. Gray, commonly known as maitake, was evaluated. The immunomodulative activity of both extracts, aqueous and
ethanol, obtained from the fruitful body of the mushroom over human lymphocytes was studied by a lymphoproliferation
assay and also two in vitro hemolytic assays were performed to prove their influence over complement system, both classic
and alternative pathways.
Lymphoproliferation assay was performed with purified human lymphocytes exposed to the extracts and cultured for a
final colorimetric test by XTT, a tetrazolium salt that yields a coloured soluble compound when reduced by mitochondrial
enzymes from living cells.
To evaluate the extracts over complement system hemolytic assays were performed based on red blood cells lyses by
the membrane attack complex (MAC) which is formed by triggering the complement system.
Both extracts of G. frondosa showed stimulating activity to lymphocytes and more activity was observed in ethanol
extract. Complement assays showed inhibitory activity in both extracts over classic and alternative complement pathways.

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INTRODUCCIÓN localización de las áreas donde crece. El maitake es


muy buscado por los cocineros por su excelente sabor
Los hongos han sido valorados desde hace y textura, mientras otras personas lo valoran por sus
muchos años por sus propiedades comestibles en beneficios terapéuticos (2).
países de Asia y Europa. En China, han sido
utilizados a través de generaciones como Diversos principios activos con demostrada
suplementos alimenticios y como tónicos para el actividad antineoplásica e inmunomoduladora han
sistema inmune, aumentando la longevidad y la sido aislados de más de 30 especies de hongos.
salud en general de las personas. En Japón los Muchos de los principios activos micóticos se
hongos silvestres habitan en la parte noreste, y relacionan químicamente a la estructura ß-D-glucano
también se pueden encontrar en restaurantes de (polímeros de D-glucosa con otros monosacáridos) o
clase alta debido a su excelente textura, sabor y ß-D-glucanos enlazados a proteínas (péptidos-
aroma. En países de Europa, los hongos son polisacáridos o proteoglicanos). A principios de la
altamente cotizados, debido a su amplia gama de década de los ochenta, el micólogo japonés Hiroaki
beneficios. Para los Yoruba, un grupo del noreste Nanba, de la Universidad Farmacéutica de Kobe llegó
de Nigeria, los hongos se han convertido en una a la conclusión que los polisacáridos del maitake tenían
parte importante de su mitología, así como parte un estructura única y demostró que su consumo
de sus medicinas naturales (1). lograba un pronunciado efecto antitumoral e
Se conoce una gran variedad de hongos con inmunomodulador, mayor que el de otros hongos
propiedades comestibles y terapéuticas, tales como medicinales, en modelos animales. En 1984 Nanba
Lentinula edodes (shiitake), Hericium erinaceus, Au- identificó en el micelio y cuerpo fructífero del maitake,
ricularia auricula, Flammulina velutipes, Tremella una fracción con capacidad de estimular a los
fuciformis, Volvariella volvaceae y Grifola frondosa macrófagos denominada fracción-D. Posteriormente
(maitake), tomando este último, gran relevancia en se aislaron diversos compuestos activos que han
los últimos años (1). En tiempos feudales, el maitake demostrado otras actividades biológicas, entre las que
era considerado tan valioso que se pagaba su peso se destacan: actividad contra la diabetes tipo 2,
en monedas de plata. Incluso actualmente los hipertensión arterial, hipercolesteremia y obesidad.
buscadores del hongo se reservan celosamente la Sin embargo, estas propiedades todavía están siendo
estudiadas, y hacen falta nuevos estudios que avalen
completamente las mismas (2).
Este estudio pretendió demostrar la
actividad inmunomoduladora de los extractos
etanólico y acuoso de Grifola frondosa sobre los
linfocitos humanos y el sistema de complemento a
través de un ensayo linfoproliferativo y ensayos
hemolíticos in vitro. Con esto se intenta aportar
los primeros datos experimentales en Guatemala,
que apoyen el consumo tanto comestible como
medicinal de este hongo y que proyecten la
Grifola frondosa realización de estudios clínicos posteriores.

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MATERIALES Y MÉTODOS ajustó la concentración a 5 x 106 células/ml con


RPMI-FBS. Fue utilizada una placa de
El universo de este estudio lo constituyó microtitulación de 96 pozos (8 filas x 12 columnas).
el cuerpo fructífero del hongo Grifola frondosa, En ésta se colocaron 50 uL de extracto sin diluir en
del cual se obtuvieron extractos acuosos y los dos primeros pozos de la primera fila, colocando
etanólicos. en el tercer pozo el blanco de muestra. Fueron
realizadas diluciones seriadas dobles de los tres
Ensayo linfoproliferativo pozos hasta la séptima fila, usando como diluyente
Este ensayo se realizó con una lectina con RPMI – FBS. Se realizó este mismo procedimiento
conocido efecto linfoproliferativo, como control con las demás repeticiones utilizando las columnas
positivo y una solución de linfocitos en ausencia 4 a 6, 7 a 9 y 10 a 12. En los primeros 6 pozos de la
de lectina como control negativo. El ensayo octava fila se colocaron controles positivos, y en
permitió cuantificar la linfoproliferación, los últimos 6 pozos de esta misma fila, se colocaron
aprovechando la capacidad que tienen las células los controles negativos. Se agregó a cada pozo 50
vivas (principalmente por acción de la actividad uL de lectina y se colocó la placa en un ambiente
enzimática mitocondrial) de reducir la sal de de microaerofilia. Después de 4 días de incubación
tetrazolio (XTT) a un compuesto coloreado y a 37 ºC, se reveló la placa con una solución de XXT
soluble, cuya intensidad, proporcional a la y se midió la densidad óptica a 490 nm en un
cantidad de células presentes, fue medida fotómetro de placas y se calculó el porcentaje de
espectrofotométricamente. linfoproliferación.
Los linfocitos fueron obtenidos a partir de
sangre periférica con anticoagulante EDTA, para Ensayos hemolíticos
lo cual se llevaron a cabo cuatro etapas de Fueron realizados ensayos para determinar
centrifugación en frío, seguidas de separación de la actividad del hongo sobre el sistema de
la capa de linfocitos y posterior re-suspensión en complemento, basado en la hemólisis de los
PBS de estas células. eritrocitos de carnero por el CAM generado tras
la activación del sistema de complemento, los
Luego de este proceso, fue contado el eritrocitos fueron los activadores y células diana;
número total de linfocitos por mililitro y luego se la absorbancia de la hemoglobina liberada se
utilizó como parámetro en la medida de la
actividad del complemento.

Determinación hemolítica para la actividad


sobre la vía clásica.
Fue preparada una suspensión de
eritrocitos de carnero en solución de Alsever
obteniéndose células empacadas después de
centrifugaciones en frío que se fueron re-
suspendidas en buffer de veronal con calcio y
Separación de linfocitos en gradiente de centrifugación (izquierda) y
ensayo de linfoproliferación con XTT (derecha) magnesio (VSB++).

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La placa es preincubada a 37ºC por 30 minutos


y después de agregada la suspensión de
eritrocitos de conejo es incubada nuevamente
30 minutos, centrifugada y evaluada
fotométricamente a 405 nm.

Cálculos
La actividad sérica fue calculada y
expresada como porcentaje de hemólisis, así como
la concentración inhibitoria al 50% (CI50). Se
realizó la gráfica de % de inhibición vrs. log de
concentración, con la recta de regresión lineal
obtenida y se extrapoló el valor del 50% de
inhibición para obtener la CI50.

Las respuestas medidas fueron las


siguientes: a. Positiva: si el extracto aumentó
(actividad estimuladora) o disminuyó
(actividad inhibidora) en un 50% la
Ensayo hemolítico para la evaluación de los extractos de Grifola concentración de hemoglobina comparado
frondosa
frente al resultado de la actividad sérica y si la
concentración de la muestra en estudio
La suspensión eritrocitaria fue necesaria para obtener un 50% de lisis
sensibilizada con anticuerpos contra eritrocitos de eritrocitaria (CI50) fue menor a 25μg/mL y b.
carnero (amboceptor) y luego del extracto fue Negativa: si la concentración de hemoglobina
agregado suero humano como fuente de producida por el extracto quedó inalterada
complemento. En los pozos de control se usó agua comparada frente al resultado de la actividad
como el 100% de hemólisis y como control sérica o la CI50 fue mayor a 16μg/mL.
negativo se usó suero inactivado. La placa
cubierta fue incubada a 37ºC por 60 minutos y
centrifugada a 2500 rpm por dos minutos. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Finalmente fue medida la densidad óptica (DO) a
405 nm en un fotómetro de placas. Determinación Cualitativa de la Actividad
Linfoproliferativa
Determinación hemolítica para la actividad La primera fase de este estudio, determinó
sobre la vía alterna la actividad linfoproliferativa in vitro de los
El ensayo difiere del anterior, en que extractos etanólico y acuoso de G. frondosa, a
esta vez son usados eritrocitos de conejo y un diferentes concentraciones. Los resultados se
buffer EGTA-VG (contiene Mg +2 y ácido muestran en la tabla No. 1.
etilenglicol-bisβ-aminoetileter-tetraacético).

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Tabla No. 1: Determinación de la actividad como 100 por ciento la linfoproliferación


linfoproliferativa in vitro de los extractos acuoso producida por la fitohemaglutinina (lectina
y etanólico de G. frondosa linfoproliferativa). La tabla No. 2 presenta los
porcentajes de linfoproliferación y los datos
Concentración Extracto Extracto estadísticos obtenidos a partir de ambos extractos
Acuoso Etanólico para las concentraciones que presentaron
x/n* x/n actividad.
1000 μg/ml 5/5** 5/5**
500 μg/ml 0/5 5/5** Tabla No. 2: Concentraciones con
250 μg/ml 0/5 0/5 actividad linfoproliferativa de los
125 μg/ml 0/5 0/5 extractos de G. frondosa
62.5 μg/ml 0/5 0/5
31.25 μg/ml 0/5 0/5 Extracto Desv
15.63 μg/ml 0/5 0/5 Acuoso* Media st. C.V Max. Min.
1000 ug/ml
* número de repeticiones con resultado positivo / total de 124.50 6.55 5.26% 138 115
repeticiones realizadas
**p = 0.03125 500 ug/ml 85.40 11.34 13.27% 106 71

A una concentración de 1000 μg/ml, am- Extracto Desv


bos extractos presentaron actividad en las 5 etanólico Media st. C.V Max. Min.
repeticiones ensayadas. El extracto etanólico,
además, mostró actividad a una concentración de 1000 ug/ml
500 μg/ml, también para las 5 repeticiones 156.40 6.24 3.99% 164 146
ensayadas. Todas las demás concentraciones
probadas dieron resultados negativos (por debajo 500 ug/ml
del control), lo que permite establecer una 125.10 5.09 4.07% 131 116
concentración efectiva mínima de 1000 μg/ml para
el extracto acuoso y de 500 μg/ml para el etanólico. * Actividad únicamente en concentración 1000 μg/ml
El valor de p, en las concentraciones con actividad
En esta tabla se puede observar que a
para ambos extractos, fue menor que el nivel de
significancia estipulado (0.05) siguiendo una concentraciones de 1000 μg/ml, el extracto
etanólico muestra 56 % de linfoproliferación por
distribución binomial con una probabilidad de
encima del control positivo, mientras que el
éxito a priori de 0.5. Esto indica que la respuesta
extracto acuoso muestra 24%. A una concentración
obtenida en este ensayo es causada por los
extractos. de 500 μg/ml, el extracto etanólico muestra un 25
% de linfoproliferación sobre el control positivo.
Los valores de dispersión de estos datos prueban
Determinación del Porcentaje de
Linfoproliferación que para estas concentraciones el ensayo tiene
validez estadística. Por otra parte, el extracto
El porcentaje de linfoproliferación que
acuoso, a una concentración de 500 μg/ml,
presentó cada extracto fue determinado tomando

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muestra un 15 % de linfoproliferación por debajo en sus distintas diluciones. En ambos extractos


del control positivo, pero sus parámetros de se observó que la actividad hemolítica aumentó
dispersión son muy elevados, por lo que no se conforme fue disminuyendo la concentración del
puede validar dichos resultados hongo. Para la vía clásica la actividad hemolítica
La gráfica No. 1 muestra las diferencias del suero sin la adición del extracto etanólico fue
entre las medias de ambos extractos, a las de 51.3%, y para el extracto acuoso fue de 35.6%
concentraciones descritas anteriormente. (Tablas No.3 y 4)

Gráfica No. 1 Medias de extractos etanólico y Tabla No.3


acuoso, a concentraciones de 1000 y 500 g/ml. Ensayo hemolítico de la vía clásica del complemento
Porcentaje de hemólisis de los eritrocitos en presencia del extracto
etanólico del hongo Grifola frondosa

Dil Rep 1 Rep 2 Rep 3 Rep 4


1:3 13,45 8,34 12,60 17,88
1:9 24,01 26,39 26,73 24,01
1:27 30,48 32,86 29,11 27,24
1:81 33,03 36,61 36,78 34,22
1:243 38,14 38,48 40,52 37,63
1:729 38,65 36,44 37,46 35,93
1:2187 43,76 41,03 39,33 35,93
Fuente: Datos experimentales

Tabla No.4
Ensayo hemolítico de la vía clásica del complemento
Se resalta la línea base, que es la obtenida por el con- Porcentaje de hemólisis de los eritrocitos en presencia del extracto
acuoso del hongo Grifola frondosa
trol positivo.
Fuente: Datos experimentales Dil Rep 1 Rep 2 Rep 3 Rep 4
1:3 18,21 17,90 16,82 18,83
1:9 27,16 28,70 23,77 24,23
Determinación de actividad sobre el sistema de 1:27 28,86 29,78 30,25 31,33
complemento 1:81 32,72 31,33 31,48 31,33
Fueron realizados dos ensayos para 1:243 35,96 36,42 36,27 36,11
1:729 34,72 37,96 36,88 35,96
determinar la actividad de los extractos etanólico 1:2187 39,20 35,49 39,04 34,88
y acuoso del hongo sobre la vía clásica y la vía Fuente: Datos experimentales
alterna del complemento. En cada una de las vías
se corrieron cuatro repeticiones utilizando 7 En la vía alterna los resultados fueron
diluciones (1:3, 1:9, 1:27, 1:81, 1:243, 1:729 y parecidos, aunque en ésta el porcentaje de
1:2187), con una concentración inicial del extracto hemólisis del suero activo en presencia del hongo
de 500 g/mL. superó el 50%, no duplicó el porcentaje de
El porcentaje de hemólisis de los actividad del suero sin el hongo. Para la vía alterna
eritrocitos en la vía clásica del complemento no la actividad hemolítica del suero sin la adición del
alcanzó el 50% para ninguno de los dos extractos extracto etanólico fue de 56.9%, y para el extracto

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acuoso fue de 61.1%. Las tablas No.5 y 6, Yamada y colaboradores, se demostró que la
muestran que la actividad del suero aumenta fracción D posee actividad antitumoral debido al
conforme se reduce la concentración del hongo aumento en la concentración de IL-1, así como
en ambas vías. por el incremento en la producción de macrófagos,
Muchas investigaciones han reportado que G. linfocitos T que exhiben citotoxicidad específica
frondosa y sus extractos poseen una remarcada contra antígeno y células NK. Por otra parte, en
actividad antitumoral por activación del sistema este estudio se observó un detrimento en la
inmune. En esta investigación se demostró el respuesta hipersensible, la cual fue asociada a la
efecto in vitro de los extractos sobre los linfocitos supresión del crecimiento tumoral (3, 4).
humanos y sobre el sistema de complemento. Adachi y colaboradores realizaron
Ambos extractos indujeron la proliferación de investigaciones sobre como uno de los compuestos
linfocitos e inhibieron la actividad hemolítica del extraídos a partir del cuerpo fructífero de este
complemento. hongo, una glucoproteína denominada MT – 2,
aumenta la actividad de células del sistema inmune
Tabla No.5 en ratones. Estos investigadores descubrieron que
Ensayo hemolítico de la vía alterna del complemento la administración intraperitoneal de dicho
Porcentaje de hemólisis con el extracto etanólico de G. frondosa
compuesto incremento entre 50% y 80% la
Dilución Rep 1 Rep 2 Rep 3 Rep 4 cantidad de linfocitos T, y de un 80 % a un 200 %
1:3 59,73 58,36 55,89 62,88
1:9 61,78 62,19 63,29 68,77
la cantidad de células NK (5).
1:27 64,93 64,11 64,25 71,51 Se publicó que la fracción D, al ser
1:81 65,75 66,58 66,99 72,88 administrada por vía oral a pacientes con SIDA,
1:243 68,77 68,36 69,86 75,34
1:729 70,41 72,05 74,47 76,03 indujo a un incremento en las células T, mientras
1:2187 75,75 78,36 79,73 81,92 que en otros se interrumpió la disminución de estas
células. Shidima y colaboradores usaron la
Tabla No. 6 fracción D como terapia complementaria para
Ensayo hemolítico de la vía alterna del complemento
Porcentaje de hemólisis de los eritrocitos en presencia del
perros con cáncer tratados con cirugía y/o
extracto acuoso del hongo Grifola frondosa quimioterapia. En este estudio, la fracción D
condujo, en el 59 % de los casos, al incremento
Dilución Rep 1 Rep 2 Rep 3 Rep 4
1:3 51,10 52,61 53,12 54,76
de la fracción linfocítica en sangre periférica,
1:9 55,14 57,42 55,78 60,08 induciendo la producción de citokinas
1:27 62,10 61,72 61,72 66,27 relacionadas a la activación de la respuesta inmune
1:81 64,00 66,15 64,50 66,02
1:243 69,18 71,21 69,06 71,59 celular. En 85% de los casos con un incremento
1:729 72,34 73,99 73,10 75,13 en la fracción linfocítica, no se observó recurrencia
1:2187 78,41 78,04 75,51 80,56 durante un período de 10 meses de observación.
Fuente: Datos experimentales En contraste, en los casos sin aumento de la
fracción linfocitica, en la mayoría se observo
Los resultados aquí expuestos, concuerdan con recidivas (6, 7).
una serie de hallazgos publicados por otros Este estudio logró determinar que los
investigadores. En los estudios realizados con extractos de G. frondosa aumentan la proliferación
animales por Hishida y colaboradores, y por de linfocitos in vitro, entre 1.2 y 1.6 veces. Esto

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concuerda con los datos reportados por Namba y unión a las membranas biológicas, inhibiendo la lisis
colaboradores en 2000, en un estudio realizado de los eritrocitos. Sin embargo para demostrar esto
para evaluar el efecto de la fracción D en pacientes debe hacerse evaluaciones por medio de otro tipo de
con VIH. A pacientes confirmados con VIH se ensayo (9).
les monitoreó el conteo de CD4, medición de Reconociendo la limitante de que se trabajó
carga viral, síntomas de infección por VIH, con extractos crudos, el presente trabajo aporta datos
estatus de enfermedades oportunistas, y suficientes para justificar investigaciones posteriores
sensación de bienestar. Después de administrar dirigidos por un lado a determinar los principios
fracción D por 360 días, se reportó en 20 activos y sus mecanismos de acción, y por otro realizar
pacientes un incremento en el conteo de CD4 de ensayos in vivo necesarios para establecer la
actividad del hongo en modelos animales, así como
entre 1.4 y 1.8 veces, así mismo, se reporto en
el diseño de ensayos clínicos.
10 pacientes un descenso en la carga viral. En
adición, el 85% de los pacientes reportaron un
incremento en su sensación de bienestar, con REFERENCIAS
respecto a varios síntomas y enfermedades
secundarias causados por el VIH (8). 1. Hobbs C. Medicinal Mushrooms an Exploration
Nosotros encontramos una diferencia of Tradition, Healing, and Culture. 2 ed. Londres:
estadísticamente significativa entre la actividad de Botanica Press, 1995. 208p.
ambos extractos, siendo el extracto etanólico el que
mostró mayor actividad. Varios investigadores, como 2. Zhunag C, Solomon PW. Medicinal Value of
Kato en 1983, Ohno en 1986, Suzuki en 1984, Iino en Culinary – Medicinal Maitake Mushroom Grifola
1985 y Mizuno en 1986, utilizaron diferentes solventes frondosa (Dicks.:Fr.) S.F. Gray
orgánicos para extraer los polisacáridos contenidos en (Aphyllophoromycetideae). Review. Int J Med
el cuerpo fructífero de G. frondosa, logrando purificar Mushr 2004; 6:287 – 313.
varios tipos de compuestos con actividad antitumoral
e inmunomoduladora (2). 3. Hishida I., Nanba H., Kuroda H. Antitumor ac-
En cuanto a su actividad sobre el sistema de tivity exhibited by orally administered extract
complemento, los resultados demuestran que la from fruit body of Grifola frondosa (Maitake).
presencia del hongo Grifola frondosa está Chem Pharm Bull 1988; 36: 1819 – 1827.
fuertemente ligada a una acción inhibitoria del en
ambas vías (clásica y alterna). Debido a que ambas 4. Yamada Y., Nanba H., Kuroda H. Antitumor ef-
vías del complejo de ataque a la membrana (CAM) fects of orally administered extracts from fruit
se ven inhibidas, es posible que la regulación del body of Grifola frondosa. Chemoterapy 1990;
complemento ocurra a partir del complejo C3 común 38:790 – 796.
para ambas vías. La acción reguladora del hongo
puede estar relacionada con la activación de la 5. Adachi K., Nanba H., Korouda H. Potentiation
proteína de unión C4 (C4bp) y el factor I, encargados of host-mediated antitumor activity in mice by
de la regulación de C4b o bien, otro punto de Beta – glucan obtained from Grifola frondosa
regulación puede estar relacionado con la activación (Maitake). Chem Pharm Bull 1987; 35: 262 –
de las proteínas vitronectina, clusterina o el factor J, 270.
que interactúan con el complejo C5b67 evitando su

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6. Stamets P. Growing Gourmet and Medicinal


Mushrooms. 3 ed. Canada: Ten Speed Press,
2000. 555p

7. Shidima T., Shnidman E., Shirota M. Usefulness


of anti – cancer complementary immune therapy
with DVM fraction. J Amer Holstic Vet Med
Assoc 2004; 23:17 – 20.

8. Namba H., Kodama N., Schar D., Turner D. Ef-


fects of Maitake (Grifola frondosa) glucan in HIV
– infected patients. Mycoscience 2000; 41: 293
– 295.

9. Berrón P, et al. El Sistema del Complemento,


Vías clásica y de la Lectina que se une a la
Manosa. Alergia e Inmunología Pediátrica 2003;
12:46
Pediátrica 2003; 12(2): 46-52.

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Inventario de mercurio metálico presente en hospitales públicos y privados con capacidad mayor
de 50 camas, ubicados en la Ciudad de Guatemala

Contreras J., Guzmán C.


Departamento de Toxicología, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia
Universidad de San Carlos de Guatemala

RESUMEN

El mercurio (Hg) es un metal líquido a temperatura ordinaria, además de ser el único metal conocido que
se mantiene líquido a 0ºC. Todas sus formas (fundamental, orgánica e inorgánica) son tóxicas, con una
especial afinidad por el riñón y el sistema nervioso (9:719; 21). Aún siendo tóxico tiene bastantes
aplicaciones en el sector salud, de ahí la importancia de realizar un inventario de este metal en los hospitales
públicos y privados con capacidad mayor de 50 camas, ubicados en la Ciudad de Guatemala, por tratarse
de los centros del cuidado de la salud más grandes.

El estudio fue de tipo descriptivo y la información fue recolectada a través de una encuesta al personal de
cada uno de los servicios de los hospitales participantes, a través de la cual se identificaron las fuentes de
mercurio metálico presentes en cada uno de los servicios y se cuantificó el número de cada una de ellas.
Posteriormente, con datos teóricos, se procedió a convertir las unidades contadas de cada uno de los
focos del metal en cuestión en gramos, para presentar los resultados en dicha unidad, mostrando así la
cantidad de mercurio metálico presente en cada uno de los hospitales, por fuente y por la totalidad de los
12 hospitales incluidos en el estudio (8 públicos y 4 privados).

El resultado del inventario realizado fue de 26,781 g (26.781kg) de mercurio metálico en los 12 hospitales
participantes. La principal fuente de mercurio metálico fueron los esfigmomanómetros (39.09%), seguido
por los termómetros (23.15%) y el mercurio utilizado en la colocación de amalgamas dentales (21.26%).
Se encontró una relación lineal directa entre el número de camas de los hospitales y la cantidad de
mercurio en cada uno de ellos, ésta última también relacionada con la variedad de especialidades con las
camas que cada centro asistencial cuenta. También se pudo concluir que los servicios de odontología,
emergencia, intensivo, cirugías y bodega son en general las áreas hospitalarias con mayor carga de mercurio
metálico.

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INTRODUCCIÓN del mercurio del sector salud, de ahí la importancia


de este trabajo, cuyos objetivos lograron
Desde hace tiempo la contaminación ambiental cumplirse.
con mercurio ha generado preocupación,
principalmente a nivel internacional, por lo que MATERIALES Y MÉTODOS
es importante conocer sobre los daños que este
metal pesado causa a la salud humana y al medio Diseño del estudio: el estudio fue de tipo
ambiente; y poner en práctica medidas que ayuden descriptivo prospectivo
a eliminarlo y disminuir la exposición al mismo.
Muestra del estudio: los hospitales públicos y
Europa, América del Norte y algunos países de privados con capacidad mayor de 50 camas,
América Latina (Brasil, Puerto Rico, Argentina) ubicados en la ciudad de Guatemala, que desearon
han realizado inventarios de mercurio a nivel de participar en el estudio, los cuales fueron 12 , de
la industria, minería y sector salud, entre otros, los cuales 8 son públicos y 4 privados.
para determinar la cantidad de mercurio manejado
en estas áreas y conocer qué porcentaje del mismo Metodología: Recolección de la información a
llega al ambiente, produciendo daños al mismo través de una encuesta realizada al personal de los
(5; 6; 10; 24; 29). El Ministerio de Ambiente de la 12 hospitales participantes. Los datos se obtuvieron
provincia canadiense de Ontario y la EPA, en todos los servicios de cada uno de los hospitales
declararon que las emisiones de los incineradores y por cada fuente de mercurio metálico conocida,
eran la cuarta mayor fuente de mercurio, se determinó la cantidad en gramos. Los valores de
confirmando que los establecimientos de salud son referencia en gramos para cada una de las fuentes
una de las principales fuentes de liberación de de mercurio se obtuvieron mediante revisión
mercurio a la atmósfera (50 toneladas anuales), bibliográfica (1; 2; 5; 7; 8; 11; 12; 13; 14; 18; 19;
por las emisiones de la incineración de los residuos 20; 28; 30). Al final se efectuó una propuesta a los
médicos (3; 4; 17; 24). directores de los hospitales participantes en el
estudio para la sustitución de la mayoría de insumos
Filipinas, India, Brasil, Cuba, Uruguay y Argen- que contienen mercurio y que son factibles de ser
tina comenzaron los pasos para la eliminación del sustituidos, presentando las alternativas para
mercurio en diversos establecimientos del cuidado hacerlo.
de la salud (24; 26).
OBJETIVOS
Todo lo anterior ubica a los hospitales y centros
de atención médica como fuentes de exposición a General: Realizar un inventario del mercurio
mercurio metálico, ya que un número consider- metálico presente en los hospitales públicos y
able de instrumentos que contienen este metal privados en estudio.
pesado se encuentran disponibles en los centros
asistenciales. Mostrando la necesidad que Gua- Específicos: 1. Determinar las principales fuentes
temala también realice inventarios de mercurio y de mercurio metálico en los 12 hospitales que
se una a este movimiento mundial de eliminación participaron en el estudio.

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2. Obtener datos cuantitativos acerca del mercurio DISCUSIÓN


metálico que se utiliza en los hospitales más
grandes de la ciudad de Guatemala participantes. Los resultados obtenidos revelan que el total de
mercurio metálico presente en los 12 hospitales
3. Proporcionar alternativas para la sustitución de incluidos en el estudio, fue de 26,781g (26.781kg),
los materiales hospitalarios que contengan cantidad que de ser descargada al ambiente
mercurio metálico por opciones más seguras y provocaría graves daños al mismo y a los seres
menos tóxicas. vivos, debido a que el mercurio metálico es muy
volátil (se evapora entre 20-25ºC) (16:169), y se
RESULTADOS absorbe en un 80% por los alveolos pulmonares;
se incorpora a los eritrocitos, depositándose
Con la realización de este estudio se encontró fácilmente en el cerebro y riñones y por las
que el total de mercurio metálico presente en los reacciones de oxidación y metilación que sufre,
12 hospitales incluidos en el estudio (tabla No.1), favorece la biomagnificación (bioacumulación
fue de 26,781g (26.781kg). Los centros progresiva del metal en los distintos niveles de la
asistenciales identificados como A (2.736kg), H cadena trófica)(9:721; 15; 22:7-9, 23; 25; 27).
(4.252kg), L (6.111kg)y K (6.907kg) fueron los
que presentaron mayor cantidad del metal pesado Los hospitales A,H,L y K (listados en orden
en cuestión, representando el 10.21%, 15.88%, ascendente) fueron los 4 hospitales con mayor
22.82% y 25.79% del total de mercurio contenido de mercurio metálico, esto se debe
encontrado, respectivamente (tabla No. 1 y posiblemente a que éstos cuentan con la mayoría
gráfica No. 1). de especialidades clínicas, teniendo además en
existencia la mayoría de fuentes de mercurio
Al evaluar las distintas fuentes de mercurio metálico consideradas en el presente estudio;
metálico incluidas en el estudio (sondas también debe mencionarse que se encontró una
gastrointestinales, termómetros, tendencia lineal directamente proporcional entre el
esfigmomanómetros, fuentes no clínicas, número de camas y la cantidad de mercurio
aparatos interruptores, amalgamas dentales y metálico, siendo los hospitales A, L y K, los centros
alumbrado) se concluye que los asistenciales de mayor capacidad ocupacional
esfigmomanómetros representan la principal incluidos en el estudio (gráfica No. 2).
fuente de este metal abarcando el 39.09% de la
totalidad de dicho metal pesado, y luego se Las fuentes de mercurio metálico tomadas en
ubican los termómetros con un 23.15%; cuenta para la realización de este trabajo fueron
posteriormente el mercurio metálico utilizado en los instrumentos gastroenterológicos (dilatadores
la elaboración de amalgamas dentales con un esofágicos, tubos cantor, Miller-Abbott, sondas de
21.26% y en menores cantidades se encontraron alimentación y tubos sengstaken blakemore),
los aparatos interruptores (9.48%), los aparatos esfigmomanómetros, aparatos no clínicos
de uso no clínico con un 5.02%, el alumbrado (barómetros, vacuómetros, manómetros y kits de
(1.63%) y las fuentes gastroenterológicas reparación de esfigmomanómetros), termómetros,
(0.37%). (gráfica No. 2). lámparas fluorescentes (lámparas de gas neón, de
sodio de alta presión/vapor de mercurio y lámparas
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ultravioleta), mercurio metálico utilizado en termómetros óticos y frontales también están siendo
amalgamas dentales y aparatos interruptores utilizados como alternativa a los primeros en
(tubos de rayos X, baróstatos de sistema de vacío mención en la minoría de los casos, el instrumento
y de calderas, switches de plataforma de con mercurio no ha sido sustituido en su totalidad.
calentamiento y termostatos). Estas alternativas se emplean únicamente en
determinadas áreas, siendo una de ellas, pediatría.
La cantidad de unidades de esfigmomanómetros
no es muy elevada, pero debido a la considerable Todos los hospitales incluidos en el estudio
cantidad de mercurio metálico que contienen contienen mercurio metálico correspondiente al
(aproximadamente 81g por cada unidad) (12), alumbrado, esto posiblemente, a que en el mercado
incrementa la contribución de los niveles del metal aún no se cuenta con lámparas fluorescentes libres
pesado en cuestión, aún cuando la mayoría de los de dicho metal, solamente hay alternativas con
hospitales participantes en el estudio utilizan menor contenido del mismo. Los centros
esfigmomanómetros anaeroides en mayor asistenciales A (191.2g), K (162.3g) y L (33.4g)
proporción que los de mercurio. Estos resultados son los que mostraron el mayor contenido de
presentan similitud parcial con lo encontrado en mercurio relacionado con el alumbrado, debido a
los inventarios de mercurio realizados en 1999 en que son los de mayor tamaño e iluminación. En
seis hospitales del norte de California (14), ya que número, ésta fue una de las fuentes más abundantes,
los esfigmomanómetros fueron las principales pero por su bajo contenido del metal (0.006625g
fuentes de mercurio en estos centros. en promedio) las cantidades en gramos no son tan
elevadas, como para las otras fuentes.
Con el inventario solamente se encontraron sondas
Senkstaken Blakemore como fuentes Los termómetros y las lámparas fluorescentes
gastroenterólógicas, pues este tipo de fuente ha sido fueron las únicas fuentes de mercurio elemental
sustituida por materiales no tóxicos, como tungsteno; que se encontraron en los 12 hospitales.
observándose que los hospitales J (20g), K (60g) y
L (20g) fueron los únicos que cuentan con ellas. El inventario permitió determinar que en general
los servicios hospitalarios con mayor contenido
Los manómetros, clasificados como fuentes no de mercurio metálico fueron los de cuidados
clínicas, están presentes solamente en 5 de los intensivos, emergencias, área de odontología,
hospitales participantes en el estudio, siendo el B cirugías y desde luego el área de bodega, pues
el que hace mayor uso de ellos (800g). cuenta con los suministros de los hospitales. Del
servicio de odontología es importante mencionar
Los 12 centros asistenciales utilizan termómetros de que en los 5 hospitales que cuentan con dicha área,
mercurio para control de la temperatura corporal de ésta constituye el sitio con mayor concentración
los pacientes, siendo los hospitales K (1384g) y L del citado metal pesado.
(2723g) los que cuentan con mayor cantidad de los
mismos. Algunos de los nosocomios no requieren Los resultados de este estudio proporcionan
grandes cantidades de esta fuente de mercurio información sobre la cantidad de mercurio metálico
metálico, pues los usan eventualmente. Los que se utiliza en 12 de los hospitales más grandes de

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la Ciudad de Guatemala, la cual puede ser útil para y privados anualmente para tener un dato
conocer el riesgo de exposición y contaminación con actualizado sobre la presencia del metal pesado
este metal, y hacer un llamado para controlar las en los centros asistenciales e ir determinando
emisiones de este material tóxico y establecer su disminución al unirse los hospitales a la
controles del mismo e ir disminuyendo poco a poco Campaña Mundial de eliminación de mercurio
el uso que se le está dando. en el sector salud.
• Cotizar y realizar un análisis económico para
CONCLUSIONES evaluar la factibilidad de los hospitales de
sustituir las fuentes de mercurio por las
1. El inventario de mercurio metálico realizado alternativas libres del mismo.
en 12 hospitales (8 públicos y 4 privados) • Fomentar la creación de empresas que se
reveló que la cantidad de mercurio metálico dediquen al reciclaje de lámparas
presente en conjunto es de 26.781kg. fluorescentes, mientras aparecen alternativas
2. Los esfigmomanómetros son la principal totalmente libres del metal en cuestión.
fuente de mercurio metálico en los hospitales • Implementar una ley nacional o política
participantes, representando el 39.09% de la pública que favorezca la eliminación del
totalidad del mercurio metálico contabilizado. mercurio de todas aquellas fuentes del
3. Los termómetros y el mercurio utilizado en mismo que puedan ser sustituidas por
la colocación de amalgamas dentales son la alternativas menos peligrosas y de igual o
segunda y tercera fuentes principales de similar eficacia.
mercurio metálico en los hospitales
incluidos en la investigación, mostrando AGRADECIMIENTOS
23.15% y 21.26% del total detectado,
respectivamente. Agradecimiento especial a las autoridades y per-
4. Los servicios de odontología, emergencia, sonal de los 12 hospitales sin cuya valiosa
intensivo, cirugías y bodega son en general colaboración este estudio no hubiera podido
las áreas hospitalarias con mayor carga de llevarse a cabo. Se mencionan sin un orden
mercurio metálico. específico:
Hospital Centro Médico Militar, Hospital Gen-
RECOMENDACIONES eral San Juan de Dios, Hospital Antituberculoso
“San Vicente”, Hospital de Salud Mental “Dr.
• Realizar estudios de emisiones de mercurio Carlos Federico Mora”, Hospital Nacional de
en el ambiente, principalmente a nivel de aire, Ortopedia y Rehabilitación de Lisiados “Dr.
agua, peces y sedimentos marinos. Jorge Vohn Ahn”, Hospital Infantil de
• Capacitar al personal de salud sobre la forma Infectología y Rehabilitación, Unidad de
adecuada de recolectar los desechos de Cirugía Cardiovascular de Guatemala
mercurio, dónde y cómo colocarlos para su (UNICAR), Sanatorio Nuestra Señora del Pi-
posterior tratamiento. lar, Sanatorio Hermano Pedro, Hospital Centro
• Realizar inventarios de mercurio metálico, Médico, Hospital Privado de las Américas y
orgánico e inorgánico en hospitales públicos Hospital Roosevelt.

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ANEXOS
Tabla No. 1: Esta tabla muestra los resultados totales (en gramos) del inventario de mercurio metálico,
clasificando los datos por fuente de mercurio metálico, por hospital y presentando también la cantidad
total por todos los centros asistenciales estudiados. Además, se presentan los porcentajes de mercurio
metálico que corresponden a cada tipo de fuente con base en el total encontrado (26781g) y a cada
hospital.

Gráfica No. 1
A continuación se observa una gráfica de barras mostrando las frecuencias de mercurio metálico (en gramos) encontradas
en cada uno de los hospitales estudiados, pudiéndose notar la diferencia existente entre cada uno de ellos.
Gramos de mercurio

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Gráfica No. 2
Esta gráfica permite observar las frecuencias de mercurio metálico encontradas en los 12 hospitales participantes en el
estudio, permitiendo comparar la cantidad correspondiente a cada tipo de fuente del metal en cuestión.

Gramos de mercurio

Gráfica No. 3
A continuación se observa una gráfica de dispersión en la que se relacionan las variables número de camas y gramos de
mercurio metálico para los 12 hospitales participantes en el estudio. Además, se muestra la línea de tendencia, notándose
una relación lineal directa entre las variables.

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GASTEROMYCETES DE GUATEMALA: ESPECIES CITADAS EN EL PERÍODO DE


1948 A 2008
Morales, O.1, García, E.1,2, Cáceres R.1, Bran, M.C.1, Gurriarán, N.1,2, Flores, R.1
1
Unidad de Biodiversidad, Tecnología y Aprovechamiento de Hongos, Departamento de Microbiología, Escuela de
Química Biológica, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad de San Carlos de Guatemala.
2
Escuela de Biología, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad de San Carlos de Guatemala.

RESUMEN

Se presenta una revisión bibliográfica de las publicaciones sobre macrohongos, en las cuales se identificaron especies de
gasteromycetes de Guatemala, en un lapso de 60 años (1948 a 2008). En este período, solamente se documentaron 21 especies
pertenecientes a 12 géneros, con un acumulado de 0.35 especies/año. Además, se presentan nuevas localidades para las
especies citadas, como producto de la revisión de especimenes herborizados. Con estos datos se realizo un análisis de la
distribución, hábitat y localidades de los géneros y especies, enfatizando la importancia de continuar el estudio tanto de
distribución, como de ecología de este grupo de hongos.

INTRODUCCION un grupo informal de hongos secotáceos y falsas trufas


(Dring, 1973; Alexopoulos, 1996).
Los gasteromycetes son un grupo artificial de hongos Actualmente, los análisis filogenéticos basados en
basidiomycetes que muestran un origen polifilético, ADNr, han demostrado que varios grupos de hongos
pero que, a pesar de ello, presentan algunos caracteres gasteroides están relacionados con el orden de los
comunes, los cuales son el eslabón capaz de mantener Boletales por evolución convergente, debido a la
esta clase con su propia identidad. Este grupo presenta morfología del cuerpo fructífero, por lo que la posición
basidios desprovistos de mecanismos para la descarga taxonómica de los gasteromycetes sigue siendo con-
de esporas (estatismosporas), mientras que la mayoría troversial (Binder & Bresinky, 2002).
de basidiomycetes producen basidiosporas que se El objetivo de este trabajo fue elaborar un listado de
descargan del basidio por la fuerza (balistosporas) las especies de gasteromycetes citadas para Guatemala,
(Calonge, 1998). tanto en publicaciones nacionales como extranjeras,
Aunque son muy variados en apariencia, los durante un período de 60 años (1948 a 2008), así como
basidiomas de estos organismos se caracterizan por documentar nuevas localidades para varias de las
que poseen una cubierta exterior o pared denominada especies reportadas.
peridio, la cual se abre naturalmente en varias
direcciones (luego que las esporas han madurado), o MATERIALES Y MÉTODOS
bien permanecen cerrados permanentemente y las
esporas se liberan solamente después de la Se revisaron un total de 7 documentos en los cuales se
desintegración del peridio, por medio de la acción de hace referencia a los gasteromycetes del país
agentes externos (Alexopoulos, 1996). (Sommerkamp & Guzmán, 1990; Aguilar, 1994;
En la clasificación de este grupo, Dring (1973), Fuentes, 1996; Bran et al, 1998; Rizzo, 1999; Márquez,
reconoció 9 órdenes. Sin embargo, Alexopoulos (1996) 2001 y Flores et al, 2002). Asimismo, se realizó un
consideró solamente 5: Lycoperdales, Tulostomatales, estudio de especímenes herborizados y que se
Sclerodermatales, Phallales y Nidulariales, además de encuentran depositados en la Colección de hongos

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“Ruben Mayorga Peralta”, del Departamento de conformado por tesis de graduación, así como informes
Microbiología, Escuela de Química Biológica, finales de investigación y documentos publicados por
Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, utilizando la Universidad de San Carlos, como producto de
las técnicas estándar en micología (Largent, 1977). Las investigaciones realizadas. En este sentido, se deben
esporas se midieron en KOH al 5%. Las especies y la impulsar las publicaciones internacionales, con el fin
sinonimia se revisaron de acuerdo con el Index de incluir las especies del país, dentro de los listados
Fungorum (http://www.indexfungorum.org/Names/ de la biodiversidad fúngica mundial.
Names.asp). Hasta el año 2008, no se cuenta con ninguna monografía
de este grupo de hongos, sin embargo, algunos géneros
RESULTADOS Y DISCUSION como Calostoma y Scleroderma, cuentan con datos y
recolectas suficientes como para elaborar documentos
La revisión bibliográfica comprendió un período de
que traten sobre las especies del país.
60 años, contados a partir de la primera publicación
En cuanto a la acumulación de especies, solamente se
referente a macrohongos, que data del año 1948, hasta
reportan 0.35 especies/año, dado que se ha
el 2008. Las especies de gasteromycetes enlistadas
documentado 21 especies en 60 años. Este dato es
fueron 21, pertenecientes a 12 géneros. En contraste,
indicativo de los pocos estudios realizados, lo cual
Costa Rica, posee un catálogo de 103 especies
contrasta con la gran diversidad de macrohongos con
inventariadas hasta el año 2005 (Calonge, et al, 2005),
que cuenta el país. Si los reportes siguen la tendencia
en tanto que México, cuenta con aproximadamente 200
actual, harán falta muchos años para conocer la
(Esqueda-Valle, M, et al, 2000).
totalidad de riqueza que conforma este grupo de hongos
Cyathus olla, Lycoperdon perlatum y Scleroderma
en nuestra región.
verrucosum, fueron las especies de más amplia
Respecto a las especies que fueron encontradas en
distribución, encontrándose en diferentes tipos de bosques
nuevas localidades, éstas muestran un patrón de
y localidades. Dentro de las especies con distribución
distribución relacionado con el tipo de vegetación. Así,
restringida se encuentran Calostoma cinnabarinum y
Calostoma cinnabarinum (Fig. 1) antes reportado solo
Tulostoma brummale, así como Lycoperdon marginatum
para Baja Verapaz ahora también se sabe que se
y varias especies de Geastrum, por lo que hace falta
encuentra en los bosques nubosos de Quiché. De igual
realizar más estudios para documentar la mayor cantidad
forma, Calvatia cyathiformis (Fig. 2), Geastrum
de datos posible, con el fin de determinar la distribución
pectinatum, y Pisolithus arhizus, anteriormente
real de cada una de las especies de gasteromycetes que se
reportados solo para el departamento de Guatemala,
desarrollan en Guatemala (Tabla 1).
también se encuentran en Huehuetenango y
Por otra parte, el mayor número de reportes se ha
Totonicapan, así como en Chimaltenango y
realizado en el bosque de Pinus-Quercus, bosque de
Chiquimula, respectivamente.
Pinus, bosque tropical y bosque nuboso, con un
Por otra parte la distribución de Lycoperdon
mínimo en el bosque de Abies guatemalensis. No
marginatum restingida al departamento de San Marcos,
existen reportes de gasteromycetes en las zonas áridas
ahora se amplía a regiones de Quetzaltenango y
o semiáridas del país, puesto que aún no se tiene
Huehuetenango. Este último, también constituye una
información de géneros como Batarrea y Podaxis, los
nueva área de distribución para L. perlatum (Fig. 3).
cuales típicamente se encuentran en este tipo de hábitat
Por lo anterior, se puede inferir que las especies
(Calonge, 1998).
fúngicas se distribuyen en su mayoría en las zonas del
En cuanto a las publicaciones en las cuales se citan
altiplano y están directamente relacionadas con la
especies de gasteromycetes, solo existen dos en revistas
vegetación, en este caso con los bosques de Pinus sp,
extranjeras, (Sharp, 1948; Sommerkamp & Guzmán,
P. oocarpa, Quercus sp, Abies guatemalensis y
1990), mientras que el resto de documentos está
Cupressus lusitanica (Tabla 2).

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Tabla 1. Especies de gasteromycetes reportados para Guatemala, años 1948 – 2008.

Especies DP1 VG2 Referencias


Astraeus hygrometricus (Pers.) Morgan Gua P, P-Q Sommerkamp & Guzmán, 1990
Calostoma cinnabarinum Corda Bvz BN Sharp, 1948; Sommerkamp &
Guzmán, 1990
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et al, 2004
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Geastrum cuadrifidum DC. ex Pers. Esc BT Aguilar, 1994
G. fimbriatum Fr. Pet BT Rizzo, 1999
G. pectinatum Pers. Gua P-Q Sommerkamp & Guzmán, 1990
G. triplex Jungh. Sam, Hue, Tot P Fuentes, 1996; Bran, et al, 1998;
Márquez, 2001, Flores, et al, 2002
Lycoperdon candidum Pers. Qtz P-Q Sommerkamp & Guzmán, 1990
L. echinatum Pers. Hue P Flores, et al, 2002
L. marginatum Vittad. Sam P Bran, et al, 2004
L. perlatum Pers. Gua, Sam, Tot, Chi P-Q, Sommerkamp & Guzmán, 1990;
P Fuentes, 1996; Márquez, 2001;
Morales, 2001
Laternea pusilla Berk. & M. A. Curtis Bvz BN Sommerkamp & Guzmán, 1990
L. triscapa Turpin Sac P-Q Herrera, 1991
Pisolithus arhizus (Scop.) Rauschert Gua P Sommerkamp & Guzmán, 1990
Scleroderma areolatum Ehrenb. Esc BT Aguilar, 1994
S. bovista Fr. Gua, Izb BT Sommerkamp & Guzmán, 1990
S. verrucosum (Bull.) Pers. Gua, Izb, Sac, Tot BT, Sommerkamp & Guzmán, 1990;
P-Q, Herrera, 1991; Márquez, 2001
P
Tulostoma brumale Pers. Hue Ag Flores, et al, 2002
Vascellum intermedium A. H. Sm. Gua P-Q Sommerkamp & Guzmán, 1990

1
DP: Departamentos: Avz = Alta Verapaz, Bvz = Baja Verapaz, Chi = Chimaltenango, Esc = Escuintla, Gua = Guatemala, Hue = Huehuetenango, Izb = Izabal,
Pet = Petén, Qtz = Quetzaltenango, Sac = Sacatepéquez, Sam = San Marcos, Tot = Totonicapán. 2 Vegetación: P-Q = Pinus-Quercus, BN = Bosque nuboso,
BT = Bosque tropical, P = Pinus, Ag = Abies guatemalensis. *ND = no indicado.

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Tabla 2. Nuevas localidades para algunas especies de gasteromycetes citadas para Guatemala.

1
Departamentos: Chi = Chimaltenango, Hue = Huehuetenango, Chq = Chiquimula, Qtz = Quetzaltenango, Tot = Totonicapán.2 Vegetación: P-Q = Pinus-
Quercus, Ag = Abies guatemalensis, P-Ag = Pinus-Abies guatemalensis, C = Cupressus lusitanica, P = Pinus, Po = Pinus oocarpa.

Con relación al número de especies por género, Tabla 3. Número de especies por género.
Geastrum y Lycoperdon cuentan con 4 especies cada
uno, seguido por Scleroderma con tres especies, Géneros No. especies Porcentaje
Laternea con dos especies y los ocho géneros restantes Geastrum 4 19.0 %
poseen solamente una especie. Por otra parte, existe
un gran número de géneros cuya presencia aún no se Lycoperdon 4 19.0 %
ha documentado en el país. Estos datos contrastan con Scleroderma 3 14.2 %
lo reportado para otros países de la región, entre ellos
Laternea 2 9.4 %
Costa Rica, que cuenta con 18 especies de Geastrum,
16 de Cyathus y 9 de Lycoperdon (Calonge, et al, Astraeus 1 4.8 %
2005), en tanto que México posee 14 especies de Calostoma 1 4.8 %
Geastrum (Pérez-Silva, et al, 1999).
Calvatia 1 4.8 %
Se puede observar que el departamento más rico en Crucibulum 1 4.8 %
especies de gasteromicetes es Guatemala, seguido por
Huehuetenango y Totonicapán, siendo Quiche el de Cyathus 1 4.8 %
menor riqueza. Cabe mencionar que estos datos pueden Pisolithus 1 4.8 %
contener un gran sesgo debido a que la mayor cantidad Tulostoma 1 4.8 %
de muestreos se ha realizado en estos tres
departamentos. Por otra parte, de los 22 departamentos Vascellum 1 4.8 %
que conforman el país, solamente existen datos para
14 de ellos, quedando un vacío de información para
los 8 restantes.

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Tabla 4. Riqueza de especies encontradas por REFERENCIAS


departamento.
1. Aguilar, M. 1994. Estudio de los macromicetos
Departamentos No. especies Porcentaje encontrados en la finca “San Luis” departamento
Guatemala 8 19.6% de Escuintla. Guatemala: Universidad de San Carlos
Huehuetenago 6 14.7% de Guatemala. (Tesis de graduación, Facultad de
Ciencias Químicas y Farmacia). 39p.
Totonicapán 4 9.7%
Baja Verapaz 3 7.3% 2. Alexopoulos C., C. Mims, M. Blakwell. 1996.
Quetzaltenango 3 7.3% Introductory Mycology. 4 . Ed. John Wiley &
th

Sacatepéquez 3 7.3% Sons, Inc. United States of America. 869p.


San Marcos 3 7.3%
3. Binder, M., Bresinsky, A. 2002. Derivation of a
Chimaltenango 2 4.8% polymorphic lineage of Gasteromycetes from
Escuintla 2 4.8% boletoid ancestors. Mycologia 94 (1): 85-98.
Izabal 2 4.8%
4. Bran, M., O. Morales, R. Flores, E. Rodríguez, J.
Petén 2 4.8% Salazar, R. Cáceres, C. Andrade, A. Quezada, C.
Alta Verapaz 1 2.4% Carranza. 2004. Hongos Comestibles de Guatemala:
Chiquimula 1 2.4% Diversidad, Cultivo y Nomenclatura Vernácula. (Fase
IV). Universidad de San Carlos de Guatemala,
Quiché 1 2.4%
Dirección General de Investigación. 60p.
Finalmente, se puede concluir que el estudio de los
gasteromycetes y los hongos en general aún es muy 5. Bran. M., R. Flores, E. Rodríguez, F. Culajay.
escaso en el país y se debe realizar más investigación. 1998. Hongos ectomicorrícicos asociados a Abies
El fin de inventariar las especies no implica solamente guatemalensis, Pinus rudis y Pinus ayacabuite
elaborar un listado e incrementar el conocimiento de la Sierra de los Cuchumatanes y su
científico, sino que además, al documentar la aprovechamiento para la producción de planta
distribución, ecología y hábitat de las mismas, haría forestal micorrizada (Fase I). Universidad de San
posible establecer los lineamientos para su conservación. Carlos de Guatemala, Dirección General de
Investigación. Guatemala. 23p.
AGRADECIMIENTOS
6. Calonge, F. Gasteromycetes, I., Lycoperdales,
Se agradece a las autoridades de la Facultad de Ciencias Nidulariales, Phallales, Sclerodermatales,
Químicas y Farmacia las facilidades brindadas para Tulostomatales. Flora Mycologica Iberica 3:1-
elaborar la presente publicación, así como a la Dirección 271.
General de Investigación por el financiamiento otorgado
a través de los proyectos PUIRNA y PUIDI. 7. Calonge, F., Mata, M., Carranza, J. 2005.
Contribución al catálogo de los Gasteromycetes
(Basidiomycotina, Fungi) de Costa Rica. Anales
del Jardín Botánico de Madrid 62 (1): 23-45.

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8. Dring, D. 1973. Gastromycetes. En: Ainsworth, 14. Márquez, E. 2001. Taxonomía de los
G. & Sussman, A. (eds). The Fungi 4B. 451-478. macromicetos encontrados en la Finca “El
Aprisco”, localizada en Chuipachec, Municipio
9. Esqueda-Valle, M., et al. 2000. Composición de de Totonicapán. Guatemala: Universidad de San
gasteromicetos en un gradiente de vegetación de Carlos de Guatemala. (Tesis de graduación,
Sonora, México. Anales del Instituto de Biología Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia). 75p.
Universidad Nacional Autónoma de México,
Serie Botánica 71 (2): 39-62. 15. Morales, O. 2001. Estudio Etnomicológico de la
Cabecera Municipal de Tecpán Guatemala,
10. Flores, R., M. Bran, E. Rodríguez, O. Morales, E. Chimaltenango. Guatemala: Universidad de San
Berdúo, L. Montes. 2002. Hongos Micorrícicos de Carlos de Guatemala (Tesis de graduación,
bosques de pino y pinabete. Universidad de San Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia). 92p.
Carlos de Guatemala, Dirección General de
Investigación. Guatemala. 50p. 16. Pérez-Silva, E., Herrera, T., Esqueda-Valle, M.
1999. Species of Geastrum (Basidiomycotina:
11. Fuentes, G. 1996. Caracterización de los Geastraceae) from Mexico. Revista Mexicana de
macromicetos que crecen en el Astillero Munici- Micología 15: 89-104.
pal de San Pedro Sacatepéquez, San Marcos.
Guatemala: Universidad de San Carlos de Gua- 17. Rizzo, E. 1999. Estudio taxonómico de la
temala. (Tesis de graduación, Facultad de Mycobiota del Parque Arqueológico Tikal. Gua-
Ciencias Químicas y Farmacia). 60p. temala: Universidad de San Carlos de Guatemala
(Tesis de graduación, Facultad de Ciencias
12. Herrera, K. 1991. Estudio Etnomicológico en la Químicas y Farmacia). 65p.
región de Chipotón Sacatepéquez. Guatemala: 18. Sharp, A. 1948. Some Fungi Common to the
Universidad de San Carlos de Guatemala, (Tesis Highlands of México and Guatemala and East-
de Graduación, Facultad de Ciencias Químicas ern United States. Mycologia 40: 499-502.
y Farmacia). 92p. 19. Sommerkamp, I., Guzmán, G. Hongos de Gua-
13. Largent, 1977. How to identify mushrooms to temala, II. 1990. Especies depositadas en el
genus. III. Microscopic features. Mad. River herbario de la Universidad de San Carlos de
Press. 77p. Guatemala. Revista Mexicana de Micologia 6:
179-197.

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1 2

Figuras 1-3. 1. Calostoma cinnabarinum. Se identifica por el basidioma de color anaranjado hasta rojo carmín. Presenta un
pseudoestípite perforado, con una cabeza globosa. Ejemplares recolectados en Macalajau, Uspantán, Quiche. 2. Calvatia
cyathiformis. Basidiomas jóvenes y adultos con el característico exoperidio beige purpuráceo, con pseudoestípite. Ejemplares
recolectados en el departamento de Huehuetenango. 3. Lycoperdon perlatum. Basidiomas subglobosos a piriformes con
exoperidio ornamentado con espinas cónicas. Ejemplares recolectados en el departamento de Huehuetenango.

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Asociación entre la presencia de Helicobacter pylori y patología gástricas detectadas por


endoscopia

Alonzo L, Arroyo G, Benito M, Duarte A, Matta V, Nave F, Pernilla L, Polanco S, Rodas G, Ruiz R.
Escuela de Química Biológica, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia,
Universidad de San Carlos de Guatemala

RESUMEN
Con el objetivo de determinar la relación que existe entre la presencia de Helicobacter pylori en biopsia con las
patologías gástricas detectadas por endoscopias, se realizó la presente investigación. Para ello se recopilaron datos de 1468
pacientes que se sometieron a este procedimiento y a quienes se le realizó biopsia gástrica en busca de la bacteria.
La recolección de datos se efectuó por consulta de los registros médicos de los pacientes evaluados por los
gastroenterólogos que colaboraron con el presente estudio y se obtuvo información acerca de: edad, género, diagnóstico y
presencia o ausencia de Helicobacter pylori en la biopsia realizada.
Del total de 1468 pacientes, se encontró que 536 (36.5%) fueron hombres y 932 (63.5%) mujeres. Los resultados
para Helicobacter pylori fueron positivos en 778 pacientes (53%) y negativos en 690 (47%). La patología gástrica que se
observó con mayor frecuenica fue la gastritis crónica no atrófica en 415 pacientes (28.2%) seguida de la gastritis no especificada
por el médico en 294 pacientes. El rango de edad en la que se presentó una mayor proporción de infección con Helicobacter
pylori, fue de 41 a 50 años, no encontrando diferencia entre la presencia de Helicobacter pylori y el género.
Se considera importante y necesario que en Guatemala se emplee una clasificación estándar para futuros estudios,
como la clasificación de Sydney para determinar la presencia de Helicobacter pylori y su consiguiente implicación en el
desarrollo de una patología gástrica, especialmente cáncer.
En conclución, el 53% de los pacientes que se sometieron a una endoscopía presentaron un resultado positivo para la
presencia de Helicobacter pylori (778/1468), porcentaje bastante alto y que correlaciona con el porcentaje de positividad encontrado
en la población.

Palabras claves: Helicobacter pylori, endoscopia, biopsia, gastritis.

INTRODUCCIÓN
La infección ocurre a nivel mundial pero
Helicobacter pylori es una bacteria con muestra grandes variaciones geográficas. En los
forma de espiral, Gram negativo, móvil, curva, países en vías de desarrollo puede llegar a ser tan
presente en la mucosa gástrica. Coloniza las muco- alta como el 90%, mientras que en los países
sas no secretoras de ácido del estómago y de la parte desarrollados esta es menor y oscila entre el 25 y
alta del tracto intestinal, incluyendo el duodeno [1]. el 50 %[2]. Se estima que la infección es adquirida
antes de los diez años y que la prevalencia aumenta
Es una bacteria microaerofílica que se con la edad, sin embargo en países en desarrollo y
cultiva en medios con baja tensión de oxígeno (3- con condiciones socioeconómicas bajas, la tasa
15%) y alta concentración de CO2 (3 – 10%). Al de infección en niños es muy elevada, llegando
microscopio se observa con colorantes hasta un 80% [3-4].
cromogénicos, por ejemplo bromuro de etidio,
mostrando imágenes muy definidas sobre su El modo de transmisión no ha sido del todo
morfología. definido, pero existen evidencias que sugieren una

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transmisión de persona a persona y por ingesta de poblaciones de 11 países europeos, Japón y los
comida o agua contaminada. Aunque no se conoce Estados Unidos se encontró una estrecha relación
un reservorio animal para Helicobacter pylori ha entre las prevalencias entre estas dos patologías,
sido aislado a partir de gatos. estimándose que el 10% de incremento en la
prevalencia de la infección se asociaba con el 27%
Su prevalencia depende en gran medida de de aumento del cáncer gástrico [9]. Además, el
factores ambientales y del hospedero, por lo que linfoma (MALT) de células B puede experimentar
afecta en mayor medida a países en desarrollo, y se una regresión después de la erradicación del H. py-
considera una enfermedad socioeconómica. lori, lo que ha sugerido que esta bacteria puede jugar
un papel etiológico en este tipo de linfoma [10].
Helicobacter pylori es moderadamente
invasivo y coloniza la superficie de la mucosa gástrica. En Guatemala existe poca información que
El microorganismo se protege de los ácidos relacione las patologías de tipo gástrico detectadas
estomacales gracias a la propia capa de mucus gástrico, por endoscopía con la presencia de Helicobacter
después de la colonización y una combinación entre pylori, por lo que se consideró importante realizar
la producción de sustancias patógenas y la propia este estudio con el fin de establecer esta
respuesta del hospedero produce inflamación, asociación.
destrucción de tejido y ulceración [1].
MATERIALES Y MÉTODOS
Las patologías con las que se asocia con más
frecuencia son la gastritis en sus variedades crónica Para el estudio se contó con la colaboración
activa, folicular, erosiva y atrófica. Se considera que de médicos gastroenterólogos de clínicas privadas
más que comprometer el funcionamiento de la mu- de la ciudad de Guatemala. Se solicitó la información
cosa gástrica, el daño provocado más bien induce sobre los resultados de obtenidos en la endoscopía y
cambios malignos en ella [5]. de la investigación de H. pylori por biopsia.

Estudios epidemiológicos indican que las Durante el período de enero a agosto del
gastritis crónicas debidas a infecciones por 2008 se obtuvo una muestra constituida por 1,468
Helicobacter pylori que no han sido tratadas, pueden pacientes. La recopilación de datos fue en Excel,
determinar la aparición de cánceres gástricos por el incluyéndose información sobre edad, género,
daño causado a la mucosa gástrica, lo que ha llevado diagnóstico de patología gástrica y presencia o
a que en junio del 1994 la Agencia Internacional de ausencia de Helicobacter pylori en la biopsia.
Investigaciones del Cáncer-OMS reconociera al H.
pylori como carcinógeno del grupo I, el rango de El diseño del estudio fue de tipo
peligrosidad más alto otorgado [6-8]. descriptivo, retrospectivo y para el análisis de
datos se relacionaron los parámetros anteriores.
Por otro lado se ha encontrado mucha
similitud entre la epidemiología de la infección por RESULTADOS
H. pylori y la del cáncer gástrico. En un estudio
realizado por el grupo EUROGAST en 17 Los resultados de los 1468 pacientes

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fueron tabulados y los diferentes diagnósticos Del total de 1468 pacientes, 536 (36.5%)
agrupados según la clasificación Sidney para gas- fueron hombres y 932 (63.5%) mujeres (Tabla 1).
tritis crónicas [11]. Para aquellas patologías que no En relación a los resultados para Helicobacter
entraban dentro de esta clasificación se agregaron pylori 778 (53%) fueron positivos y 690 (47%)
otras categorías. negativos.

Tabla No. 1. Resultado para Helicobacter pylori de acuerdo al género y patología gástrica encontrada

Masculino Femenino Total

Patologías gástricas (+) % (-) % Total (+) % (-) % Total


GC* No atrófica 129 8.7 26 1.8 155 227 15.5 33 2.2 260 415 28.3
GC no especificadas por el
médico 74 5.0 30 2.0 104 124 8.4 66 4.1 190 294 20.0
GC De tipo química 1 0.07 76 5.2 77 8 0.5 143 9.7 151 228 15.5
Gastritis inactiva e
inespecífica 4 0.2 79 5.4 83 3 0.2 123 8.4 126 209 14.2
Otras gastritis crónicas
mixtas 63 4.3 19 1.3 82 73 5.0 44 3.0 117 199 13.6
Gastritis erosiva 12 0.8 6 0.4 18 35 2.4 14 0.9 49 67 4.6
GC atrófica 7 0.5 6 0.4 13 14 0.9 21 1.4 35 48 3.3
Adenocarcinoma 1 0.07 1 0.07 2 0 0.0 3 0.02 3 5 0.3
Gastritis aguda 1 0.07 0 0 1 1 0.7 0 0 1 2 0.07
Endoscopia normal 1 0.07 0 0 1 0 0.0 0 0 0 1 0.07
Total 293 20 243 16.6 536 485 33 447 30.4 932 1468 100

GC*: Gastritis Crónica. Fuente: Datos Experimentales ya que en conjunto representan el 47% de los casos
positivos (Tabla 2).
El rango de edad en el cual se observó
mayor positividad para H. pylori fue de 41-50 años
con 188 casos, correspondiente al 12.8%. Le sigue
el rango de 31 a 40 años con un total de 173 casos
lo que corresponde al 11.7 % (grafica 1).

La patología gástrica que se observó en


mayor proporción fue la gastritis crónica no
atrófica con 415 pacientes, siguiéndole la gastri-
tis crónica no especificada por el médico con 294.
En lo que se refiere a la asociación entre patología
gástrica y la positividad al H. pylori, se encontró
que la gastritis crónica en sus modalidades no
atrófica, no especificada por el médico y la mixtas
fueron las que presentaron una mayor positividad,

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Tabla 2. Asociación entre H. pylori y patología gástrica detectada por endoscopía

Positivo Negativo
Patología gástrica Total
No. % No. %
GC no atrófica 356 85.8 59 14.2 415
GC atrófica 21 43.8 27 56.2 48
GC de tipo química 9 3.9 219 96.1 228
GC erosiva 47 70.1 20 29.9 67
Gastritis inactiva e inespecífica 7 3.4 202 96.9 209
Otras gastritis crónicas mixtas 136 68.4 63 31.6 199
GC no especificada por el médico 198 67.4 96 32.6 294
Gastritis aguda 2 100 0 0 2
Adenocarcinoma 1 20 4 80 5
Endoscopía normal 1 100 0 0 1
Total 778 51.2 690 48.8 1468
Fuente: Datos experimentales
GC: gastritis crónica

En los casos estudiados, únicamente se complicaciones para las personas [12].


encontraron cinco casos de adenocarcinoma, de
los cuales un caso presentó positividad para el H. La gastritis desarrollada puede evolucionar
pylori, lo que representa un 0.07%. hacia una úlcera pilórica o duodenal, o bien derivar
en una gastritis atrófica multifocal, la cual a su
Interesantemente, en el grupo estudiado vez evoluciona en una úlcera gástrica o en un
únicamente se encontró un caso de gastritis aguda proceso crónico que resulta en metaplasia [13].
el cual presentó resultado positivo para la
presencia de H. pylori. Debido a la fuerte asociación que la
literatura reportada entre la infección por H. pylori
DISCUSIÓN y la presencia de cáncer, este estudio se realizó
con el fin de encontrar la asociación entre la
La infección por H. pylori ha sido asociada presencia de Helicobacter pylori y patologías
al desarrollo de gastritis, úlcera péptica, adenocar- gástricas que fueron diagnosticadas por
cinoma gástrico y linfoma gástrico de células B, endoscopia [9, 14,15].
aunque la mayoría de las personas infectadas no
desarrollan sintomatología. En los casos en los que Los datos revelaron que la gastritis crónica
el sistema inmune no logra eliminar la infección, no atrófica presentó un mayor porcentaje de
se produce una acumulación gradual de células resultados positivos para Helicobacter pylori con
inflamatorias lo que da lugar a la producción de la un 24.3% (356/1468). Estos datos concuerdan con
gastritis crónica superficial, la cual puede durar años los reportados en la literatura donde se reporta que
o por toda la vida sin implicar mayores ambos procesos presentan un perfil

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epidemiológico similar, estando asociados a los La gastritis erosiva no ofrece un ambiente


aspectos socioeconómicos de la población [16]. propicio para el crecimiento de Helicobacter pylori
Esta es la primera alteración histopatológica puesto que esta es secundaria a productos irritantes
crónica asociada a la infección por H. pylori y en como fármacos o infecciones bacterianas que pueden
algunos estudios se ha encontrado que el 100% desarrollar hemorragias o úlceras. En este estudio se
de los pacientes con este proceso son positivos a reportaron 67 casos, de los cuales 47 (32%)
la infección, dato muy superior al reportado en presentaron positividad para Helicobacter pylori.
este estudio donde se encontró un 24.3%.
Las gastritis inactivas e inespecíficas,
Este tipo de gastritis fue la más frecuente presentan resultados predominantemente
en este estudio, lo cual debe de tomarse en cuenta negativos con un 13.8 % (202/1468), debido a que
ya que los estudios han demostrado que este tipo no tiene causa determinada ni se puede relacionar
de gastritis representa por si misma, un mayor con la presencia de Helicobacter pylori.
riesgo de carcinoma. La infección induce cambios
de características pre-metaplásicas, con En la categoría de otras gastritis crónicas
microerosiones, alteración y pérdida del microvilli mixtas, se agruparon las patologías diagnosticadas
y abultamientos en la superficie luminar del por el médico con base a dos o más alteraciones
glicocálix [17]. gástricas en conjunto. Se observó un elevado
porcentaje de casos positivos para Helicobacter
Se presentaron 228 casos de gastritis pylori con un 68.3% (136/199). De igual forma,
crónica de tipo química, de los cuales únicamente se agruparon las patologías no especificadas por
9 casos fueron positivos para H. pylori. Esta gas- el médico con una positividad del 67.3%, (198/
tritis se produce como resultado de un reflujo 294) incluyéndose aquellas que no cumplen con
biliar, siendo el pH favorable para el desarrollo las características establecidas en los parámetros
de Helicobacter pylori sin embargo, como se pro- del estudio.
duce atrofia gástrica lo que resulta en una pérdida
parcial o total de la mucosa, el alojamiento del H. De los resultados obtenidos en las
pylori no es favorecido. clasificaciones de gastritis aguda y adenocarci-
noma, se puede considerar que no son
Se ha demostrado que la gastritis crónica no representativos, debido a que el porcentaje de
atrófica puede evolucionar a gastritis atrófica, en casos encontrados es muy bajo en comparación a
la cual son frecuentes las áreas de metaplasia la población que se estudio,
enteroide. Esto representa un riesgo para el
desarrollo de cáncer gástrico, especialmente in- Con respecto a los casos de gastritis aguda,
testinal con predominio de varones. En este estudio se reportan dos casos y ambos son positivos para
se encontraron 48 casos de los cuales 21 tuvieron Helicobacter pylori. Las causas pueden ser diversas
un resultado positivo para la presencia de H. py- por lo que un desequilibrio de cualquier tipo en la
lori. No se encontró un predominio en el sexo homeostasis corporal puede provocar que una
masculino ya que de los 48 casos únicamente 15 simple inflamación favoresca la infección por
pertenecieron a este género. Helicobacter pylori. Con respecto al adenocarci-

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noma, este podría ser consecuencia de una gastritis REFERENCIAS


previa por Helicobacter pylori y de evolución lenta.
1. Schwizer W, et al. Helicobacter pylori and
Cabe mencionar que de la población de symptomatic relapse of gastro-oesophageal
1468 pacientes, solo uno de ellos presentó una reflux disease: a randomised controlled trial.
endoscopia normal con resultado positivo para Lancet 2001; Págs. 1738-1742pp.
Helicobacter pylori.
2. Dunn B, Cohen H, Blaser M. Helicobacter
Con respecto a la edad, los rangos donde pylori. Clin. Microbiol Rev. 1997.10 (4):720-
se ubica el mayor porcentaje de casos positivos a 741.
Helicobacter pylori es en el rango de 41 a 50
años con un total de 188 pacientes, siguiéndole el 3. Hernández M. Helicobacter pylori. La bac-
rango de 31 a 40 con un total de 173 pacientes. teria que más infecta al ser humano. Rev
Al observar la curva puede evidenciarse que la Cubana Aliment Nutr . 2001. 15 (1): 42-54.
positividad va aumentando con la edad hasta llegar
a un pico y posteriormente desciende, datos que 4. Salgueiro J et al. Review article: is there a
ya han sido reportados por la literatura. link between micronutrient malnutrition and
Helicobacter pylori infection?. Aliment
Con respecto al género, se logró Pharmacol Ther 2004; 20:1029-1034.
determinar que hay ciertas patologías asociadas
directamente a género en este estudio, pero se 5. Khorrami S, et al. Helicobacter pylori eradi-
considera que esto no es epidemiológicamente cation and prevention of recurrent hemor-
relevante debido a que en este estudio el número rhage from peptic ulcer. A meta- analysis.
de personas del género femenino fue mayor. NEJM .Gut 2001; 49; (Suppl2), A61.

En conclusión, el 53% de los pacientes que 6. International Agency for Research on can-
fueron sometidos a una endoscopía presentaron cer. Schistosomes, liver flukes and
un resultado positivo para la presencia de Helicobacter pylori. Lyon: JARG.
Helicobacter pylori (778/1468) dato bastante alto 1994;61:177-241.
y que correlaciona con el porcentaje de
seropositividad encontrado en otros estudios para 7. NIH Consensus Conference. Helicobacter
la población en general. pylori in peptic ulcer disease. NHI Consen-
sus Development Panel on Helicobacter py-
AGRADECIMIENTOS lori in peptic ulcer disease. JAMA.1994;
272:65-69.
Por su colaboración y apoyo para el
desarrollo de la presente investigación a los 8. Hernández M. Helicobacter pylori. La bac-
doctores: Nery Mencos, Helio Lee, Luis Jerez, teria que más infecta al ser humano. Rev
Rolando Hernández, Luis Castillo, Carlos Oliva, Cubana Aliment Nutr 2001:15 (1): 42-54.
Erick Hernández Mogollón y Carlos Salvatierra. 9. Eurogast Study Group. An international as-

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sociation between Helicobacter pylori infec- 13. Asaka M et al. Gastric cáncer. En. Mobley
tion and gastric cancer. Lancet. LT, Menz GL and Hazelli SL. Helicobacter
1994.341:1359-62. pylori: physiology and genetics. American
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10. Graham DY. Evolution of concepts regard- DC. 2001. Pp 481-498.
ing Helicobacter pylori: from a cause gastri- 14. Tachiro J et al. Gastric cancer detected after
tis to a public health problem. Am. J. Helicobacter pylori erradication. Digestive
Gastroenterol.1994;89(4):469-72. Endoscopy. 2007; 19:167-173.
15. Huang JQ, et al. Metanalysis of the relation-
11. Gisbert J y Pajares García J. Tratamiento ship between CagA seropositivity and gastric
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Doc. Tec. AEG. 2004 octubre. 30 pp. 16. Sipponen P, Kekki M, Siurala M. The Sydney
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Interacción de linfocitos T CD4 con el segmento V3 de la glicoproteína 120 presente en el Virus


de Inmunodeficiencia Humana tipo 1

Carrascoza F, Paz A,
Departamento de Citohistología

RESUMEN
La entrada del virus de inumunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1) a un linfocito Th CD4+ se inicia por la interacción del
trímero viral gp160, el cual contiene en su extremo la glicoproteína gp120. Ésta interactúa directamente con el receptor CD4
del linfocito y posteriormente el complejo CD4-gp120 reacciona con un correceptor presente en los linfocitos ThCD4+.
Esta investigación propone un mecanismo de reacción entre la glicoproteína gp120 en su segmento V3 al interactuar con el
segundo segmento extracelular en el correceptor CCR5, para ello se han utilizando programas computacionales de enlace
proteína-ligando para obtener detalles de las reacciones bioquímicas existentes entre estas regiones, con estos análisis se ha
podido explicar la orientación CCR5-gp120 que forma este complejo. Además se ha diseñado un modelo molecular
computacional que explica y es coherente con los resultados obtenidos entre esta investigación y las investigaciones previas.
Los resultados encontrados muestran que existen regiones en el segmento V3 de gp120 que interactúan con el segundo
segmento extracelular en CCR5, además de confirmar las regiones que interactúan en gp120 con los primeros 15 aminoácidos
del correceptor CCR5. Esta propuesta explica mejor lo que ocurre en las cepas X5, X5/R4 y R4 de VIH que seleccionan
entre diferentes correceptores (CXCR4 y CCR5 respectivamente) y sugiere que existen aminoácidos en V3 de gp120 cuya
función es la orientación específica a un enlace estabilizado por todas las regiones de reacción entre gp120 de VIH-1 y el
correceptor CCR5.

Introducción contacto con el linfocito ThCD4+ mediante gp160 que


En Guatemala, según los datos arrojados por el es un trímero proteico que conforma el extremo de
Ministerio de Salud Pública en 20071,2 desde enero los receptores del virus, en éste trímero se encuentra
de 1984 hasta octubre de 2007 hay un total de 10,667 en la sección más externa gp120 que es la primera
casos de infección por Virus de Inmunodeficiencia glicoproteína en entrar en contacto con CD4 que es el
Humana (VIH) reportados, de los cuales 519 casos receptor principal del linfocito ThCD4+3,4,5.
son transmisiones de madre a hijo. Este informe no Después de que gp120 se ha unido a CD4, el
reporta por falta de información, el porcentaje de complejo gp120-CD4 debe unirse a otro correceptor,
personas que están vivas con VIH y por tanto comúnmente CCR5 ó CXCR4, éste último lo utiliza
tampoco reporta el número de defunciones a causa el virus generalmente en la etapa tardía de la
del Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida enfermedad, por lo que este estudio se enfoca en el
(SIDA), en ninguna fecha. contacto entre el correceptor CCR5 y gp120, donde
Para poder encontrar la cura de una enfermedad, gp120 utiliza una serie de segmentos que conforman
es necesario conocer su naturaleza. En cuanto a el epítopo que ha de recibir al correceptor6.
las investigaciones realizadas sobre VIH, que En cuanto a las regiones específicas de CCR5 y
genera el SIDA, estas son muy abundantes, sin gp120 que entran en contacto, se ha logrado mediante
embargo no existen aun más que soluciones técnicas de cristalografía de rayos Xττ, obtener
paliativas y propuestas de vacunas que apenas modelos computacionales moleculares y
empiezan a ser desarrolladas y probadas. tridimensionales, los cuales han sido compilados en
Se conoce actualmente que el VIH-1 tiene un primer archivos de extensión .pdb, y posteriormente se
1 4
Ministerio de Salud Pública y Asistencia Social (2007). Kwong P. et al (1998)
2 5
Judith García Epidemióloga, FETP-GAP. (2007). Madani N, Perdigoto A, (2004)
3 6
Navid Madani et al (2004) Sophia Rits-Volloch, et al (2006)
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analizan con programas computacionales de enlace Materiales:


proteína-ligando, para determinar las regiones Investigaciones previas
específicas de interacción 7,8. En esta investigación, Reportes, tesis, artículos científicos y bases de datos.
se ha buscado esclarecer dentro de estas regiones de
Hardware:
interacción, los aminoácidos específicos que
A- Procesador AMD Sempron 2800+ / 1000 Mb
intervienen, para poder describir posteriormente un
Ram / 256 Mb Nvida GeForce FX 5500.
mecanismo de reacción que explique el
B- Procesador AMD Semprom 3400+ / 512 Mb
comportamiento de dichas proteínas y
Ram / 256 Mb Nvidia GeForce FX 5200 .
consecuentemente el comportamiento inicial del vi-
Software:
rus al contactar con el linfocito receptor.
A-Linux Ubuntu 8.04 / Autodock 4.0 /Autodock
Para esclarecer estos mecanismos de reacción y
Tools 4.01/Hex 5.0/UCFS Chimera 1.2540
reacción se han creado una serie de experimentos
B- Linux Slackware 12.01 /Autodock 4.0 /
computacionales utilizando el programa Autodock
Autodock Tools 4.01/Hex 5.0/UCFS Chimera
4.0, como método de enlace computacional
1.2540
automatizado, en donde además se han corroborado
otros experimentos reproducidos con el mismo
Métodos.
programa y con programas semejantes 8,9.
Criterios de inclusión y exclusión de artículos
revisados:
Materiales y Métodos
Fueron seleccionados los artículos y la bibliografía
Universo de trabajo
según su importancia por:
Puesto que se trata de un estudio tipo meta –
Concepto: Caracterización estructural de
análisis, el universo de trabajo se conformó por
aminoácidos relevantes (tanto de gp120 como de
toda aquella información acerca de la naturaleza
CD4 y los correceptores CXCR4 y CCR5).
inmunológica, bioquímica y química del VIH y
Cronológico: Se priorizaron los estudios más
su interacción con los linfocitos T CD4+. Por lo
recientes, puesto que el fin de esta investigación no
cual, los reportes, tesis, artículos científicos y bases
es estadístico, se incluyeron artículos de 1981 a 1997
de datos fueron discriminados con los criterios que
con un carácter histórico, en algunos casos algunos
se presentan en esta sección.
conceptos anteriores a 2000 continúan vigentes (ver
Los materiales y métodos utilizados en el estudio
descripción de CD4 y gp120 y la sección Conceptos
fueron los siguientes:
básicos de inmunología).
Tabla No. 1
Cepa (Posición Inicial) Secuencia (Posición Final)

JR-FL (296)CTRPNNNTRKSIHI- -GPGRAFYTTGEIIGDIRQAHC (331)

HXBc2 (296)CTRPNNNTRKRIRIQRGPGRAFVTIGK-IGNMRQAHC (331)

Comparación entre las Cepas JRFL y HXBC2 en su región V3


ττ 7
Los experimentos mediante cristalografías de rayos X consisten en Shuqun Liu ·et al (2003)
8
analizar un cristal del complejo CCR5-gp120-CD4 el cual es interpretado Chih-chin Huang et al (2007)
9
en un modelo virtual. Morris, G. M., et al (1998)

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Según el tipo de información: Primaria (artículos bank), recopilados de la información brindada


que generan resultados con base en experimentos por los autores de artículos que generan estos
realizados por la misma institución (o grupo archivos virtuales tridimensionales en base a
científico) que las analiza y reporta, en el caso de estudios cristalográficos de rayos X, y que se
las secciones “Estudios previos sobre la estructura encuentran recopiladas en bases de datos como
de gp120 y de CD4” se utilizaron bases de datos la Research Collaboratory for Structural
de reconocimiento internacional. Bioinformatics (RCSB) que es un grupo
Fueron excluidas por tanto las investigaciones de respaldado por Rutgers el cual es el
tipo secundarias y terciarias: que son estudios departamento RCSB de la Universidad de New
realizados por aquellas instituciones o grupos que Jersy, el grupo RCSB-SDSC que está localizado
recopilan los análisis realizados por otras en el Centro de Supercomputadoras de San Di-
instituciones para presentarlos en compendios, ego (SDSC), la Skaggs School de Farmacia y
resúmenes paráfrasis u otro tipo de interpretación Ciencias Farmacéuticas (SSPPS) de la
que no sólo pueda alterar la información primaria, Universidad de California, San Diego (UCSD),
sino también que sesguen los resultados de y el grupo RCSB-BMRB que está localizado en
laboratorio originalmente obtenidos. el Departamento de Bioquímica de la
No fue el objetivo de este estudio obtener Universidad de Wisconsin-Madison. También
información con fines de comparación estadística, ha sido tomado en cuenta The World Wide Pro-
a excepción del planteamiento de la estructura tein Data Bank que es el centro de depósito
básica de gp120 donde se utilizaron bancos de datos mundial de proceso y distribución de datos pdb,
como fundamento para encontrar factores comunes cuyo respaldo descansa en los grupos RCSB de
de expresión en los aminoácidos del segmento V3. Europa, Estados Unidos y Japón.
También en el caso de los correceptores, para lo Los programas de estudio de estructuras biológicas
cual se utilizaron estudios que demostraron obtener macromoleculares utilizados para este estudio como
las estructuras por sus propios procedimientos de Hex 5.0, Autodock y Chimera, fueron seleccionados
laboratorio, por lo cual estas fuentes de datos fueron por su reconocimiento en la exactitud de la
consultados en artículos científicos mundialmente descripción molecular en tres dimensiones de las
reconocidos por la misma comunidad científica. nubes electrónicas que conforman cada uno de los
Se observaron según el caso, aquellas estructuras átomos presentes en estas macromoléculas, esta
proporcionadas por artículos científicos que reportaron descripción atómica está basada en la interpretación
mutaciones, supresiones o pérdida de aminoácidos de algoritmos matemáticos que describen los
según la importancia que tengan dichas alteraciones orbitales moleculares mediante una malla
para los segmentos estudiados en este trabajo. electrónica virtual tridimensional, permitiendo
predecir los cambios conformacionales del ligando
Método de Análisis Estructural Químico y correceptor.
La elucidación de los mecanismos de reacción
planteados se hizo por medio de programas Procedimiento
computacionales de tres dimensiones que 1- Se seleccionaron los mejores archivos del complejo
permitieron un análisis exacto con archivos de CD4-gp120 y de CCR5 en formato .pdb discriminados
tipo banco de dato proteico pdb (protein data según los criterios previamente descritos.

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Archivo 1OPW átomos con la consecuencia de cargar excesivamente


La secuencia de HIV-1 utilizada fue la glicoproteína los cálculos computacionales que un ordenador
de cubierta gp120 cepa HXBc2 expresada en el AMD 3400+ Mhz puede realizar. Este fue el motivo
archivo 1OPW.pdb extraído del sitio de internet de por lo cual se utilizó el archivo 2RLL.pdb que es
Proteín Data Bank. Este archivo muestra a gp120 una secuencia corta de CCR5 Nt (7-15) (los
en complejo con CD4 Humano y con CCR5 en el aminoácidos 7-15 de la región N terminal que
último estado del enlace CD4-gp120-CCR5. En eventualmente también se expresa como CCR57-15 o
este archivo no se ha publicado el segmento V3 de simplemente CCR5 7-15). Además, la secuencia
gp120 y CCR5 está unido a gp120 en una propuesta CCR5 7-15 es la que previamente se ha descrito
molecular teórica, cuyas coordenadas atómicas como la región de interacción más importante en el
provienen de una evaluación por cristalografía de correceptor CCR5 junto a su región extra celular
rayos X. En 1OPW.pdb las cadenas gp120 y CD4 ECL2, región que se detalla a continuación.
fueron obtenidas del archivo 1G9M.pdb que
presenta un complejo CD4-gp120-17B donde 17B Archivo ECL2
es un anticuerpo monoclonal, y las coordenadas Para evaluar las interacciones energéticas entre el
atómicas de este archivo han sido verificadas por segundo segmento extracelular de CCR5 que es
medio de cristalografía de rayos X. Sin embargo llamado ECL2, fueron extraídos los aminoácidos
1OPW.pdb ha sido tratado según el mismo artículo 169 al 180 de la cadena CCR5 presente en el archivo
de Liu S.Q. et. al.(2003) por simulación de 1OPW.pdb descrito previamente. Para eliminar los
movimiento molecular y enlace automatizado para posibles errores de evaluación energética, se le asignó
representar este modelo teórico de enlace. movimiento torsional aleatorio tanto a la cadena
El tratamiento que se realizó en 1OPW.pdb consistió peptídica como a las cadenas laterales de ECL2 en
en eliminar la cadena de secuencia de CCR5 por un proceso que será detallado más adelante.
medio del programa computacional Chimera, y se
verificó posteriormente que no existieran partículas Archivo 2B4C
de agua o aminoácidos incoherentes en el complejo 2B4C.pdb es otra representación de anticuerpo mono-
CD4-gp120 restante. Esto se hizo previo a la clonal unido al complejo gp120-CD4. La secuencia
utilización de este complejo para correrlo en las utilizada de gp120 de VIH-1 en este archivo pertenece
secuencias de enlace computacional automatizado a la cepa JR-FL que es una de las más comunes junto
con el programa Autodock4.01. a la cepa HXBc2, se seleccionó este archivo por ser el
único que incluía por completo el segmento V3 y
Archivo CCR5 además, se encuentran en estado no enlazado. El
Para realizar las secuencias de enlace computacional propio archivo 2BC4 es una representación teórica
automatizado se utilizó un segmento de CCR5, no del enlace a un anticuerpo monoclonal. Las regiones
CCR5 completo puesto que el programa Autodock de interés no han sido alteradas significativamente
4.01 solamente permite el enlace un receptor-ligando como lo describe este mismo archivo. Para el segmento
donde el receptor puede ser cualquier macromolécula V3 a continuación se detalla la diferencia entre cada
que no supere los 50,000 átomos, pero el ligando cepa (Ver Tabla No.1)
debe ser pequeño, con un máximo de 128 átomos; Este archivo fue seleccionado puesto que sus
este máximo es extensible a cantidades mayores de coordenadas fueron obtenidas directamente por

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medio de difracción de rayos X en base a un cristal Dicha determinación se realizó adquiriendo y


de complejo. construyendo archivos pdb pequeños de CCR5 que
El tratamiento ejecutado a este archivo consistió reaccionaron como ligandos contra regiones
en la eliminación de las cadenas H y L, siglas que específicas del enlace gp120-CD4, las cuales fueron
representan las secuencias de las moléculas anti – preestablecidas por los datos que reporta la literatura.
VIH gp120 inmunoglobulinas X5 de cadena ligera
y cadena pesada respectivamente, además fue Determinación de las Regiones de Reacción
eliminada la secuencia Het que comprende de CD4-gp120 y CCR5
residuos proteicos presentes en el cristal analizado.
Se realizó un total de ocho corridas por medio del
El nuevo archivo producto de este tratamiento fue programa computacional Autodock versión 4.01 para
nombrado gp120-CD4.pdb. determinar por medio de varias comparaciones en
las energías de enlace determinadas por el programa,
Archivo V3 los aminoácidos que producían los complejos recep-
El archivo gp120-CD4.pdb antes mencionado fue tor-ligando más estables en función de las mayores
tomado y se sustrajo la sección V3, explícitamente energías de enlace liberadas.
los aminoácidos desde PRO299 hasta ARG327 de
gp120 utilizando para ello el programa computacional Parámetros Utilizados en Cada Corrida:
Chimera, y fue guardado como V3.pdb. [Número de corridas en Algoritmo Genético: 100]
2- Se establecieron los puntos críticos de reacción Tamaño de la población: 150 individuosMáximo
según los archivos .pdb seleccionados. [Rango de mutaciones genéticas10: 0.02]
3- Se determinaron por métodos de enlace [Rango de traslapes: 0.8]
computacional proteína-ligando las regiones que Modo de algoritmo genético de traslape: twopt
intervienen entre gp120 y CCR5 con el fin de describir Número de generaciones de las cuales se escoge
la estructura del complejo CCR5-gp120-CD4. el peor individuo: 10
Tabla No. 2: Comparación entre las Corridas 1 y 2

– Algunas imágenes de gráfica molecular fueron producidas utilizando el programa UCSF Chimera package de el Resource for Biocomputing, Visualiza-
tion, and Informatics de la University of California, San Francisco (soportado por NIH P41 RR-01081).
10
Rango de mutación: Es un punto flotante desde 0 a 1, representando la probabilidad de que un gen particular sea mutado. Este parámetro generalmente es pequeño.
Rango de Traslape: Este es un numero variable desde 0 hasta 1 denotando el rango de traslape. El rango de traslape es el número esperado de pares en
la población que intercambiarán material genético. Corregir este valor a 0 torna el Algoritmo Genético en un método de programación evolucionaria (EP),
pero EP puede requerir probablemente un incremento concomitante en el rango de mutaciones del algoritmo genético con el objeto de ser eficiente.
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Gráfica No. 1 4- Para conocer la orientación exacta de CCR5


respecto de gp120, los datos antes generados fueron
comparados mediante las energías de enlace
liberadas, que son calculadas por el mismo programa
Autodock 4.01, es de esperar que las regiones más
exitosas en el enlace posean las mayores liberaciones
de energía y que por tanto se comportan más estables
al poseer menor energía de enlace.

5- El nuevo complejo CCR5-gp120-CD4 adquirido


por este método es sometido a un análisis estructural
mediante los programas computacionales que
permitieron medir la interacción de los aminoácidos
del segmento V3 con CCR5 en los siguientes
parámetros: distancia de enlace, campos energéticos,
formación de puentes de hidrógeno, interacción de
regiones polares, interacciones de Van der Waals.
Número máximo de individuos que sobreviven por
cada corrida: 1 [Número de Evaluaciones: 2.5
6- Finalmente con esta información se obtuvieron
millones] Número Máximo de Generaciones: 27,000
conclusiones acerca del mecanismo de reacción
Los parámetros electos referentes a la probabilidad
sugerido para obtener este complejo CCR5-gp120-CD4.
de mutación genética son bajos, puesto que
Autodock los utiliza en caso de trabajar con
secuencias de ADN o ARN, en este caso se RESULTADOS
disminuye tal probabilidad para poderlo aplicar sin
problemas a secuencias proteicas. Se realizó un total de 8 corridas en donde cada
una brinda 100 posibles soluciones, de estas 100
Para realizar el enlace automatizado, los segmentos
soluciones se extrajeron las mejores en base a:
pdb construidos o adquiridos fueron sometidos a una
- Mayor liberación de energía de enlace: que
malla electrónica tridimencional donde se se ubicó
determina la estabilidad del complejo formado,
el receptor gp120-CD4. Para este caso en particular
además se analizó este parámetro en conjunto con
se creó un segmento de CCR5 que es la región N-
otras energías que complementan este resultado.
terminal que comprende los primeros aminoácidos
7-15 de CCR5 que se hicieron reaccionar contra las
- Lógica conformacional: en base a un análsis sobre
regiones V3 y contra las regiones V1/V2 presentes
en el complejo gp120-CD4. la posibilidad que presenta determinada conformación
Otro segmento importante que fue creado es el de de un aminoácido, de existir en la realidad.
- Lógica Posicional: Si la posición ligando-proteína
la segunda región extracelular conocida como
ECL2 la cual ha sido descrita como importante es coherente con lo reportado por la literatura y en
base a la situación mecánica celular.
por su interacción con gp120. Este segmento
ECL2 también es sometido al proceso de enlace
automatizado en las regiones V3, V1/V2.

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Gráfica No.2

Izquierda: Detalle de la conformación de la CORRIDA 1, Rango 1/100, se puede apreciar en detalle la conformación de CCR5 respecto a gp120, claramente
se encuentra posicionado entre V3, la hoja de enlace y la sección V1/V2. Esta es conformación elegida por el programa como Rango 1/100 lo que se
interpreta como la primera posición elegida por el programa en base a la energía de enlace más baja (-3.77 Kcal/mol), y ha sido descartada por encontrarse
posicionada en medio de las tres regiones más reactivas de gp120. El análisis que condujo a tomar la conformación de rango 2/100 como conformación
óptima para esta corrida se detalla en la sección Discusión de Resultados. Los puentes de hidrógeno son representados como puntos verdes, los aminoácidos
que intervienen por parte de gp120 son de color verde, CCR5 está esquematizado como estructuras de líneas, gp120 fue esquematizado como estructura
Ribbon, todas las interacciones atómicas intermoleculares han sido marcadas en esferas de colores, rojo-oxígeno, amarillo-azufre, azul-nitrógeno, gris-
carbono.

Derecha: Detalle del enlace CCR5- 7-15 a gp120, Corrida 1, Rango 2/100. En el rango 2/100 ya no existe una interacción directa con el segmento V3,
únicamente con ARG440 que pertenece a la hoja de enlace y la sección V1/V2 en los aminoácidos PRO206-SER209.

Gráfica No. 3

Izquierda: Interacción en Corrida 2 Rango 1/100. Es posible apreciar el contacto del GLN422 mediante puente de hidrógeno con ASN13, así como también
el puente de hidrógeno existente entre TYR15 y ILE423 de la región de la hoja de enlace en gp120, estas interacciones son ayudadas por ILE9 en CCR5 y por
LYS432 en gp120.
Derecha. Contexto de la Corrida 2 Rango 14/100. CD4 se observa en color rojo y esquema Ribbons, gp120 de VIH se representa en color azul y en esquema
de Ribbons, y CCR5 1-15 está representado en estructura de líneas.
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Tabla No. 3 Comparación entre las corridas 3, 4 y 5


CxCy: corrida x, Rango y/100
todas las energías han sido medidas en Kcal/mol
RMS: Root Mean Square (Raiz Cuadrada Media)

Propiedad C3R1 C4R1 C4R2 C4R3 C4R4 C4R8 C4R9 C5R1 C5R2

Energía Enlace -1.47 -4.58 -4.22 -3.68 -3.57 -2.86 -2.83 -0.81 0.4
Energía Intermolecular -6.74 -6.14 -7.96 -6.9 -5.48 -3.85 -3.65 -7.76 -6.81
Energía Interna -7.86 -11.57 -9.39 -9.91 -11.22 -12.14 -12.3 -6.17 -6.27
Energía Torsional 13.13 13.13 13.13 13.13 13.13 13.13 13.13 13.13 13.13
Energía Extendida de No Enlace 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
Cluster RMS 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
Ref RMS 7.24 6.62 15.54 12.1 9.67 5.82 9.6 7.2 7.2
bl 3 C ó l C d 3
Gráfica No. 4

Detalle de Corrida 3 Rango 1/100: se observa que las interacciones


más claras son de PRO437-SER179 (los aminoácidos en rojo
pertenecen a gp120, el resto a CCR5); ALA436-LEU174, GLY173-
GLN203.

Gráfica No. 5

Interacción en Corrida 4, Rango 1/100: gp120 se presenta en color


azul y en esquema Ribbons, ECL2 se aprecia en estructura de líneas.
Las interacciones principales de este confórmero se observan en
ARG440 que enlaza puentes de hidrógeno a TYR176, y a su vez
con GLU172 en interacción electrostática de los grupos amino y
carbonilo. Se forman dos puentes de hidrógeno entre las CYS178,
TYR176 y CYS205. Esta conformación es la más estable en su
relación de energía de enlace y es la propuesta por Autodock como
la mejor solución. Se puede apreciar también una ruptura típica
de la conformación de ECL2.

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Gráfica No. 6

Izquierda: Interacción en Corrida 4, Rango 3/100: En esta conformación ECL2 también se encuentra distribuido a lo largo de sí y
confirma la alta reactividad de las regiones de la hoja de enlace y la región V1/V2 lo que puede sugerir que esta región es de suma
importancia para la orientación de ambas proteínas durante el mecanismo de enlace gp120-CCR5.

Derecha: Interacción en Corrida 4, Rango 4/100: Esta es una de las interacciones energéticas más baja que también muestra una concordancia
con las propiedades físicas y mecánicas de ECL2 en cuanto a la conformación que se espera guarde este segmento. Se puede observar que
CCR5 7-15 interacciona con la región media de V3 y con ARG440 de gp120 que es uno de los aminoácidos que ha destacado en la
interacción con CCR5. Si embargo ECL2 se encuentra al revés respecto a su orientación con CCR5 en la interacción global gp120-CCR5.
Gp120 ha sido representado en color gris y en estructuras Ribbons.

Gráfica No. 7

Gráfica No.7: Interacción en Corrida 5, Rango 2/100: En la


imagen superior se observa la única interacción importante
encontrada para la relación ECL2-V1/V2, en la imagen se puede
observar que el contacto directo es pobre entre ambas secciones
y la energía de enlace reportada para esta interacción (0.4 Kcal/
mol) es positiva, por tanto endotérmica. gp120 ha sido descrito
como estructura Ribbons gris y ECL2 como estructura de líneas.

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Tabla No.4: Comparación entre las Corridas 6 y 7


CxRy: Corrida X, Rango y/100
RMS: Root Mean Square (Raiz Cuadrada Media)

Propiedad C6R1 C6R13 C6R14 C7R1 C7R13


Energía de enlace 11500000.0 11500000.0 11500000.0 22.12 22.43
Energía Intermolecular -4.06 -3.04 -2.12 -7.16 -7.3
Energía Interna : 11500000.0 11500000.0 11500000.0 -0.4 -0.39
Energía Torsional : 30.13 30.13 30.13 30.13 30.13
E. Ext. de No Enlace 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
Cluster RMS: 0.0 0.0 0.0 0.0 0.88
Ref RMS: 28.64 28.64 25.88 16.46 16.38

Gráfica No. 8

Izquierda: Interacción en Corrida 6, Rango 1/100: Puede observarse la interacción electa por el programa Autodock como la óptima tomando
como referencia la energía intermolecular reportada para este enlace que es -4.06 Kcal/mol. El segmento V3 de gp120 se observa de color
celeste y en esquema Ribbons, al igual que CCR5 que se presenta de color rojo. Los aminoácidos de ambas proteínas que entran en contacto
han sido representadas en estructura de líneas. Es posible distinguir un puente de hidrógeno representado por puntos verdes entre GLY314
y TYR184, es importante hacer notar que la posición física en este modelo, no encaja con la descripción propuesta por Liu et. al. (2003) en
el archivo 1OPW.pdb.

Derecha: Interacción en Corrida 6, Rango 13/100: Esta es la primera interacción encontrada que posee un orden coherente con el esquema
general propuesto. Se observa que está estabilizada por un puente de hidrógeno formado entre GLY321-HIS175, e interacciones entre
TYR318-LYS171 e GLY314-ARG168. El segmento V3 se encuentra representado en color Azul, gp120 en celeste y CCR5 en fucsia. Los
aminoácidos que interactúan están representados en esquemas de líneas y tanto V3 como CCR5 en esquema Ribbons.

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Gráfica No. 9

Izquierda: Interacción en Corrida 6, Rango 14/100: Otra interacción no muy diferente en el estado energético intermolecular, pero presenta
una mejor posición en contexto de V3 en relación con CCR5 y gp120. Aquí las interacciones importantes están descritas por ASN302,ARG304-
HIS175, THR320-LYS171, ASN308-GLN170 y por ARG315-SER189. El segmento V3 de gp120 se presenta de color Azul, CCR5 de color
morado, gp120 de color celeste y al fondo puede apreciarse CD4 en color rojo. Todas las proteínas se encuentran en esquemas Ribbons y
los aminoácidos que interactúan en esquemas de líneas.

Derecha: Detalle en la Interacción de la Corrida 7, Rango 3/100: un acercamiento de esta interacción revela los aminoácidos importantes en
la estabilización de este complejo, entre los aminoácidos que interactúan se puede distinguir: ILE309,LYS305-TYR3; GLY314-LYS276,
PRO313-ASN273, GLN312-SER272,ASN266.

Gráfica No. 10
Detalle de la Interacción en Corrida 8, Rango 1/100: se aprecia un
acercamiento de la mejor interacción en esta corrida. Los enlaces
destacados son descritos a continuación: GLU172-ASN300, GLY173-
THR303, LEU174 mediante puente de hidrógeno a ARG304, TYR176-
SER306, ILE307. El segmento V3 de gp120 ha sido ilustrado en color
azul y en esquema Ribbons, el segmento ECL2 de CCR5 ha sido
descrito en color gris y también en esquema Ribbons. Las interacciones
han sido señaladas con esferas y los puentes de hidrógeno con lineas
punteadas verdes.
La gráfica representa la situación teórica de la mejor conformación de
enlace entre el segmento ECL2 del correceptor CCR5 y el segmento
V3 de gp120, la mayoría de las mejores conformaciones de las 200
evaluaciones hechas a este segmento apoyan esta conformación que a
pesar de poseer una energía de enlace positiva (5.97 Kcal/mol) se
encuentra en un contexto bastante lógico respecto a las propuestas de
la conformación post enlace hasta ahora desarrolladas como en el caso
de Liu et al. (2003). V3 Se representa en color azul y en esquema
Ribbons mientras que ECL2 se presenta en color lila y en esquema
Ribbons también. Los choques intermoleculares se señalan con esferas,
y los puentes de hidrógeno con lineas punteadas verdes.

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Tabla No. 5
Comparación entre las corridas relacionadas con la interacción entre ECL2 de CCR5 y V3 de gp120
RMS: Root Mean Square (Raíz Cuadrada Media)
Todas las energías han sido estimadas en Kcal/mol.
E. Ext de No Enlace: energía extendida de no enlace.

Propiedad C8R1 C7R3 C6R13 C6R14 C4R4/100 C4R9/100


Energía de enlace 5.97 22.43 11500000.0 11500000.0 -3.57 -2.83
Energía Intermolecular -7.15 -7.3 -3.04 -2.12 -5.48 -3.65
Energía Interna : 0.0 -0.39 11500000.0 11500000.0 -11.22 -12.3
Energía Torsional : 13.13 30.13 30.13 30.13 13.13 13.13
E. Ext de No Enlace 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0
Cluster RMS: 0.0 0.88 0.0 0.0 0.0 0.0
Ref RMS: 20.2 16.38 28.64 25.88 9.67 9.6

Gráfica No. 11
Vistas laterales del la unión propuesta entre gp120 de VIH-1 al correceptor CCR5. Es posible observar que la conformación del segmento
V3 ha cambiado, que el segmento N-terminal de CCR5 está enlazado a la región V1/V1 cercana a la hoja de enlace en gp120, y que en el
caso del segundo segmento extracelular el enlace ha ocurrido a través de los aminoácidos 304-320 de la región V3 en gp120.

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Para recrear el contexto en el que se encuentra el veces su valor de energía de enlace como se
complejo gp120-CD4 previo al enlace del observa en las corridas posteriores.
correceptor CCR5 se realizaron una serie de La Corrida 2 ha desplegado una serie de
mediciones llamadas “Corridas” cuyos resultados interacciones donde la mayoría de las mejores
se interpretan a continuación. soluciones se basan en un contacto de CCR5 7-15
con las posiciones aminoacídicas 322-432 en
Corrida 1 y Corrida 2 gp120, y todas estas interacciones son finalmente
menos favorecidas energéticamente (en lo que a
En estas corrida se evaluó la interacción de CCR5 energía de enlace se refiere) que las interacciones
(aminoácidos del 7-15) con las áreas de gp120- desplegadas en la Corrida 1.
CD4 descritas como reactivas, las gráficas 2 y 3 C1R2 es una solución notable en la que se
muestran las mejores conformaciones encontradas establecen interacciones entre TYR15-LYS205,
para esta corrida. En la gráfica 2 se observa que TYS14-PRO306 y ASN13 que permanece
CCR5 7-15 se ha enlazado en medio de las tres estabilizando a la relación TYS14-PRO206,
regiones más activas de gp120, donde sobresale resultado que es coherente por lo reportado Liu
TYS14 que forma un puente de hidrógeno con S.Q. et.al. (2003).
LYS305 que está en la región V3, lo cual provoca Este resultado de C1R1, donde se establece la
la expansión del ligando desde V1/V2 hasta V3. interacción de CCR5 7-15 cercana a V3, también
Se observa en la tabla No.2 que C1R1 es quien puede ser comparado con los resultados reportados
libera más energía de enlace ( -3.77Kcal/mol) y por Chin-Chin Huang, quien apoya el hecho de
quien posee también mejor liberación de energía que CCR5 7-14 interactúa plenamente con V3 y
intermolecular (-9.25 Kcal/mol), seguido por su base, siendo fuertemente atraído CCR5 7-15
C2R1 con -8.2 Kcal/mol de energía intermolecuar, por la región de la hoja de enlace y sin tener una
ambas corridas No. 1 necesitan menos energía interacción significativa con el sistema V1/V2.
para realizar una torsión (10.43 Kcal/mol). En cambio, el estudio de Liu S. Q. et.al. (2003)
Si la posición de enlace de los aminoácidos 7-15 en su experimento de modelaje molecular teórico
en la región N-terminal de CCR5 es la que indica establece que el segmento CCR5 7-15 interactúa
la Corrida 1, Rango 1, entonces sería necesario en pleno con el sistema V1/V2 y es fuertemente
plantearse la situación en la que debería de entrar atraído por la hoja de enlace, pero permanece
el segundo segmento extracelular de CCR5 para CCR5 completo en un contexto que explica
contactar con el segmento V3 de gp120, ya que también la interacción que CCR5 tiene con gp120,
como se observa en la Corrida No.8 las mejores en este archivo 1OPW.pdb la interacción del
posiciones reactivas de ECL2 en CCR5 contra V3 segmento ECL2 de CCR5 con V3 no es propuesta
en gp120 se encuentran en la misma región que pero sí sugiere su orientación.
en la Corrida 1 Rango 1, en otras palabras, CCR5 Basándose en los reportes anteriores y tomando
7-15 desplazaría por impedimento estérico a ECL2 en cuenta los resultados obtenidos en la presente
en CCR5, lo cual sería posible si la energía global evaluación, se puede inferir lo siguiente:
de enlace fuera menor, pero los enlaces de ECL2 1- que definitivamente la región de la hoja de en-
de CCR5 a otras regiones de V3 en gp120 como lace ejerce una atracción muy fuerte sobre CCR5
la cresta de V3 por ejemplo, aumentan hasta 3 y 4 7-15.

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2- que la sección V1/V2 atrae a CCR5 7-15 y es En la Corrida 4 si se permitió las torsiones de la
capaz de orientar y muy probablemente es capaz cadena peptídica para analizar a fondo la función
de formar un complejo estable V1/V2 y hoja de de los aminoácidos del segundo segmento
enlace con CCR5 7-15, siempre y cuando guarde extracelular de CCR5 que son descritos junto a
una lógica conformacional y energética con todo los aminoácidos de la región N-terminal como los
el correceptor CCR5. más importantes en CCR5 para su interacción con
3- En cuanto al segmento V3, se sugiere que podría gp120. En la Corrida 5 la cadena peptídica de
actuar como un orientador, puesto que LYS305 ECL2 permaneció fija mientras que a las cadenas
forma un importante puente de hidrógeno con R laterales se les otorgó torsiones flexibles y
TYS14 de CCR5, pero para afirmar dicha además se observó su interacción específica con
interacción es necesario observar primero el la hoja de enlace y con el segmento V1/V2 de
comportamiento de la segunda región extracelular gp120. Los resultados obtenidos son analizados a
de CCR5. continuación:
4- El papel de ARG440 en la hoja puente es La tabla No.3 es una comparación de datos donde
sumamente importante para la atracción del C3R1 pertenece a una interacción de gp120 con
correceptor y probablemente para su enlace un ECL2 rígido mientras que los demás datos C4
también, el problema en el análisis al rededor de pertenecen a un ECL2 flexible en su cadena
ARG440 es que es una arginina tan activa que peptídica y los datos C5 a una interacción de ECL2
atrae por igual a ECL2 como se verá mas adelante, flexibles en su cadena lateral R.
lo que hace necesario utilizar más datos para C4R1 se ha distribuido entre las tres regiones más
concluir certeramente cual es su interacción for- reactivas de gp120 (hoja de enlace, V3 y V1/V2)
mal. mostrando dos puentes disulfuro entre CYS178
Es importante hacer notar que aunque el segmento de ECL2 y CYS205 de gp120, además de un
N-terminal 7-15 de CCR5 no interactúa puente de hidrógeno importante entre ARG440 y
directamente con V3 e incluso con la hoja puente, TYR176, teniendo invadida la región V3 por
el simple acercamiento de CCR5 7-15 a esta región impedimento estérico, lo importante de esta
puede tener la energía potencial necesaria para corrida es observar la estabilidad del enlace
activar las conformaciones necesarias en el adquirido por la formación de los enlaces antes
segmento V3 y en la hoja de enlace, lo cual mencionados, siendo de importancia para ECL2
prepararía a estas regiones para interactuar con CYS178 y TYR176.
cualquier otra región en CCR5. En el caso de C4R3 es interesante observar el
posicionamiento que alcanza nuevamente
Corridas 3, 4 y 5 CYS178 con CYS205, en donde a pesar de que
según la gráfica No.6 Izquierda, no se reporta una
En estas corridas se evaluó la interacción de ECL2 interacción directa entre estos aminoácidos, estos
con todas las regiones activas gp120 concernientes quedan bien orientados. Además solamente se han
a CCR5, la diferencia entre estas corridas fue el aplicado movimientos torsionales a las cadenas
nivel de torsiones y grados de libertad en la peptídicas de ECL2 y no a sus cadenas R laterales,
rotación de los enlaces en ECL2. En la Corrida 3 lo cual implica que en una interacción real es prob-
no se permitió torsiones aleatorias significativas. able el contacto directo entre estas cisteínas.
ττ
Dato no presentado en tablas, fue calculado por el programa Autodock 4.0

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En cuanto a C4R4 es posible observar respecto a una interacción real, aunque en tal caso,
nuevamente el papel que desarrolla CYS178 la Corrida 4 demostró ampliamente que de igual
sobre ARG440, aminoácidos que presentan un manera el área de V1/V2 era de bajo interés para
contacto distante que contribuye a la estabilidad la sección ECL2 de CCR5.
del confórmero, luego es posible distinguir En un resumen de las corridas 3,4 y 5 se puede
interacciones importantes en la región de decir que las conformaciones C4R4 y C4R9
aminoácidos GLN170, LYS171, GLU172, sobresalen demostrando que a pesar de la absoluta
GLY173 con la región de V3 TYR318, THR319, movilidad de la cadena peptídica concebida a
GLY321, GLU322, donde además se guarda en ECL2, las más bajas energías conformacionales
ECL2 una conformación arqueada semejante a de este ligando calzan con la conformación del
la presente en ECL2 en estado nativo, lo cual estado nativo de ECL2 y en interacción con V3,
realza su importancia como posible solución a hecho que es de suma importancia. Otras energías
la interacción real entre ECL2 y V3. de enlace más bajas han sido obtenidas en las
C4R8 fue escogida por su conformación arqueada regiones V1/V2 y la hoja de enlace, pero sin una
que es muy similar a la presente en ECL2 en su conformación estructural lógica en ECL2, y en
estado nativo, es aún más semejante que su las corridas C3R1 donde la conformación de ECL2
homologa C4R4 discutida previamente, de hecho no varía, se han reportado energías de enlace
la posición en la que se presenta respecto a gp120 menores a -1.41 Kcal/mol.
es como la que se esperaría que tuviera en una Por otro lado la Corrida 5 sirvió para constatar la
interacción real, e interactúa directamente con la baja competitividad que presenta el segmento
región V1/V2 de gp120, sin embargo su energía ECL2 en una interacción directa con V1/V2
de enlace es la menor de todas las presentadas en tomando en cuenta que se trata de un modelo de
esta serie de la Corrida 4, y su energía interna (- enlace teórico.
6.13 Kcal/molττ) es una de las más estables de
todas las conformaciones presentadas lo cual es Corridas 6 y 7
interpretable como una confirmación de la Las Corridas 6 y 7 estuvieron orientadas a
estabilidad de la conformación nativa. encontrar interacciones específicas entre las
C5R1 posee una de las energías de enlace más regiones activas de CCR5 y el segmento V3, para
bajas dentro de este grupo de comparaciones, los lo cual se tomó únicamente este segmento de
datos aportados por C5R1 y C5R2 apuntan al gp120 y se hizo enlazar a las dos regiones
hecho de que definitivamente el segundo segmento extracelulares más importantes de CCR5, la región
extracelular ECL2 de CCR5 no tiene una N-terminal y ECL2, con lo cual se busca en primer
interacción real con el segmento V1/V2 de gp120 lugar confirmar las soluciones obtenidas en las
lo cual crea una concordancia con el trabajo corridas anteriores, y en segundo lugar poder
presentado por Liu S. Q. Y sus colaboradores en realizar una interacción directa de V3 en un
2003 6. modelo ideal libre de cualquier impedimento
Únicamente es necesario recalcar en esta corrida estérico que pueda provocar la conformación
que C5R1 y C5R2 tienen ligandos ECL2 con nativa o no nativa de gp120. En la Corrida 6 la
cadenas peptídicas rígidas lo cual presenta cierta energía de enlace y la energía interna de todas las
desventaja en este modelo de enlace teórico soluciones fue 11500000.0, dato que es

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incoherente por lo cual se descarta, el motivo que En cuanto a la corrida 7, las soluciones tomadas
pudo ocasionar este error es una mala posición de C7R1 y C7R3 ayudaron a entender los resultados
la malla electrónica, lo cual obligaría a que du- encontrados por Chin-Chin Huan et.al. (2005), en
rante las interacciones el ligando topara con la los que se establece una interacción entre CCR5
malla, circunstancia en la cual, estos datos pueden 7-15 y el segmento V3.
encontrar una explicación. Sin embargo es posible C7R1 es en efecto la conformación mejor
evaluar las comparaciones mediante la energía in- favorecida en cuanto a energía de enlace, pero al
termolecular desplegada, en tal caso, la Corrida 6 analizar la posición de V3 en contexto con CCR5
rango 1 es la solución energética más favorable, se observa que V3 se interna en la región de mem-
pero su posición física está fuera de contexto brana de CCR5 lo cual no debe suceder, y además
respecto a la interacción propuesta previamente la región N-terminal de CCR5 se incrustaría en el
por Liu S. Q. et. al. 2003. (Observar la Gráfica núcleo de gp120 lo cual no ha sido reportado.
No.8 Izquierda). C7R3 establece una solución interesante en la que
En C6R13 se puede observar que la interacción V3 no solamente interacciona con el segmento N-
se encuentra localizada hacia la parte media de terminal de CCR5 sino también con el primer
V3 principalmente por los aminoácidos GLY 321, segmento extracelular , en una región que esta muy
TYR 318 y GLY314 que reaccionan con los cerca de la propia región intracelular de CCR5
aminoácidos de CCR5 HIS175, LIS171, ARG168. pero no en ella. Esta solución despliega una
Esta es la primera interacción coherente en el energía de enlace de 22.43 Kcal/mol lo cual es un
contexto del complejo CCR5-gp120-CD4 nivel de energía considerable en comparación a
encontrada en la Corrida 6 y es necesario recalcar las corridas anteriormente evaluadas, e implica que
que se encuentra en la posición 13 en relación a la el ligando y el correceptor deben absorber esta
energía interna, lo que hace necesario realizar más energía para formar los enlaces y puentes de
análisis para corroborar este dato. Los datos de la hidrógeno referentes a su interacción, lo cual es
Corrida 6 por tanto deben ser analizados en posible dentro del medio celular, pero no es fa-
conjunto con la corrida 8 en la cual se tomó vorable energéticamente, este punto es de ser
únicamente a los segmentos V3 de gp120 y ECL2 tomado en cuenta durante la evaluación de la
de CCR5 en una interacción ideal que utilizó a Corrida 8 antes de albergar una conclusión. Las
V3 como ligando y a ECL2 como receptor (ver el interacciones que se observan en la Gráfica No.9
análisis de la corrida 8). Derecha son THR303,LYS305, ILE309 – TYR3;
En C6R14 la interacción es sumamente semejante GLY314- LEU277; ARG315-SER272, ASN278;
a la desplegada en C6R13, donde resalta el hecho PRO313-ASN273.
de que a pesar de que hay una mayor interacción
entre V3 y ECL2, disminuye la cantidad de energía Corrida 8
intermolecular liberada siendo de -2.12 Kcal/mol
en comparación a -3.04 Kcal/mol desplegadas por En la corrida número 8 fue evaluado el papel de
C6R13. Las interacciones en C6R14 son: ARG304 ECL2 al interaccionar con V3 en un modelo
- HIS175; ILE323-HIS175, GLU322-HIS175, teórico ideal, lo cual significa que no se han
THR320-LYS171, ASN308-GLN170 (Observar la tomado en cuenta ninguna de las otras secciones
Gráfica No.9 Izquierda). de ambas proteínas, únicamente se trata de

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esclarecer el papel específico de V3 en ECL2 de en función de la formación de un complejo


CCR5, para lo cual se diseñaron dos mallas energéticamente estable.
electrónicas que cubrieron por completo a V3 que En una comparación entre las Corridas 6 y 8 se
fue el receptor de la interacción, mientras que puede obtener datos para aclarar los puntos exactos
ECL2 permaneció como ligando. en los que reaccionan la región V3 de gp120 con
El resultado de ambas mallas fue el mismo, por lo ECL2 en el correceptor CCR5, apoyándose
que 200 interacciones se pueden resumir a una también en los datos que aporta la Corrida 4 que
representativa, lo cual fortalece dicha respuesta, deben de describir los detalles mínimos de las
y es presentada en la gráfica No.10. conformaciones que se deben de alcanzar en
La tabla de energías relacionadas a C8R1 muestra ambas regiones. C6 y C8 deben ser coherentes en
una energía de enlace de 5.97 Kcal/mol, que es la interpretación de esta conformación. La
considerablemente más baja que las 22.43 Kcal/ conformación más favorecida energéticamente de
mol requeridas en C7R13 o C7R1, sin embargo, estas interacciones es C8R1 cuyas interacciones
las circunstancias de interacción no son las en las posiciones 300-307 de la región V3 se dan
mismas puesto que en las otras corridas si se con los aminoácidos 172-176 de ECL2, lo cual es
encuentran por completo al menos una de las muy semejante a la interacción que muestra
proteínas que intervienen, por lo que conviene C6R14 con enlaces entre las posiciones 302, 304
hacer un resumen comparativo de las y 308 en V3 que entra en contacto con las
interacciones de otras corridas semejantes a la posiciones 169, 170, 171 y 175 de ECL2, lo cual
Corrida 8: indica que la región media de V3 dominada por
Diferencias entre las corridas que se presentan en los aminoácidos 300-308 es la encargada de
la Tabla No.5: realizar una interacción específica y muy
C4: ECL2 es flexible en cadena peptídica y se probablemente los aminoácidos 314 y 315 que se
presenta contra gp120 completo encuentran en la cresta del segmento V3 sean los
C6: V3 rígido contra ECL2 en CCR5 completo y encargados de la orientación primaria durante el
rígido también enlace del segmento V3 a al segmento ECL2
C7: V3 rígido contra N-terminal en CCR5 asumiendo que exista un enlace posterior formal.
completo y rígido también. Lo cierto es que la regla 11/25 establece un
C8: V3 rígido contra ECL2 en un modelo teórico reconocimiento entre cepas X4 y R5 y sus
ideal. respectivos correceptores.
En la Tabla No.5, la Corrida 7 demuestra 11/25 se refiere a las posiciones 306 y 322 en V3
fácilmente que posee una desventaja energética de gp120 en el archivo CD4-gp120 (las
respecto a las demás corridas en la tabla. Incluso posiciones variarán según la cepa de VIH
la comparación entre la Corrida 7 rango 3 contra utilizada) y establece que si estas posiciones están
las dos Corridas 6 Rangos 13 y 14 aventajan a la cargadas positivamente, el virus usará el
Corrida 7 en cuanto a la Energía Intermolecular correceptor CXCR4; en cualquier otra
desplegada (por una diferencia de 4 y 5 Kcal/mol) combinación utilizará el correceptor CCR5 (Chin-
lo que deja en claro que el segmento N-terminal Chin Huang). Ambas posiciones (306 y 322) se
en CCR5 es desplazado en la competencia de en- encuentran en la región media de V3 que ha sido
lace de las dos regiones de CCR5 por V3 de gp120 determinada como epítopo de reacción por C6R14,

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en los rangos de la Corrida 6 no se detalla tal un tipo de enlace en V3 dada la alta reactividad
interacción exactamente, pero es necesario que presenta esta región esencialmente en las
recordar que ambas cadenas laterales R en la posiciones ya mencionadas 300-308, pero además
Corrida 6 permanecieron rígidas. Un análisis en las regiones 317-324 la cual es una región
gráfico de las interacciones de Van der Walls de altamente flexible.
ambas cadenas demuestra que en efecto, en la Por otra parte lo anterior implica que la región N-
corrida 6, rangos 13 y 14 no existe una interacción terminal debe ser la encargada de reaccionar
en los aminoácidos de posición exacta 306 y 322, directamente con las regiones de hoja de enlace y
pero sí hay interacciones para C6R1 en309/318; V1/V2 presentes en gp120 de VIH-1, encontrando
para C6R13 en 314, 321 y para R6C14 304, 308, como principales regiones reactivas ARG440 y
320 y 323. Una razón probable de esta inexactitud los aminoácidos en posición 208-200 quienes
es la rigidez conformacional a la que están entran en contacto con los aminoácidos de CCR5
limitadas las interacciones en el programa 7-15.
Autodock 4. Un análisis minucioso entre las gráficas de las
En C8R1 si existe una interacción directa de interacciones en C8R1 y C4R4, ambas referentes
SER306 con ECL2, C8R1 tiene una interacción al encuentro entre ECL2 de CCR5 y V3 de gp120
con V3 muy completa, lo cual debe ayudar a la en complejo con CD4, muestran dos sitios
gran estabilidad en la que resulta su energía de esenciales de reacción, uno, el ya discutido en
enlace. C8R1 donde los aminoácidos participantes de V3
Tampoco se descarta la posibilidad de que las son la región 300-305, en el otro caso C4R4
posiciones 306 y 322 en el segmento V3 orienten muestra una región opuesta de interacción en V3,
al segmento ECL2 de CCR5 durante el proceso la región 318-322 y 305. En C4R4 se ha permitido
de enlace sin la obligatoriedad de que exista una la flexibilidad absoluta de la cadena peptídica de
interacción específica en el complejo final, pues ECL2, y eso explica también las bajas energías
al parecer otros aminoácidos como los presentes de enlace obtenidas referente a esta corrida,
en la cresta del segmento ECL2 tienen una función aunque la energía intermolecular no ha sido mejor
de orientación también antes que de enlace, y hay que en C8R1, la energía interna (-11 Kcal/mol
que recordar que precisamente los aminoácidos contra 0.0 Kcal/mol desplegadas en C8R1) se
que se encuentran en la cresta del segmento V3 explica también por la misma flexibilidad
(la secuencia PGRAFY) son los más invariables concedida en la libertad de torsiones a esta cadena
de esta región variable. peptídica ECL2 en C4R4, pero esto también la
En resumen para la Corrida 8, se puede describir aleja un tanto de la realidad conformacional
a la secuencia de aminoácidos 300-308 en la posible para ECL2. La corrida 4 se diseñó con el
región V3 de gp120 como los responsables de la objetivo de observar las preferencias de enlace
interacción directa con la región ECL2 presente particular de cada aminoácido en ECL2, y esta
en CCR5, lo cual permite interpretar también que información indica que las mejores interacciones
deben existir en la región V3 otros aminoácidos en ECL2 las tienen las posiciones aminoacídicas
cuya función es orientar al segmento ECL2 du- 169-173 que han sido una región de alto contacto,
rante el proceso de enlace. Además es necesario por lo que es de esperarse que en una interacción
observar que es posible la formación de más de real de ECL2 contra V3, esta sea la región que

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busque interactuar con V3 de gp120, de hecho, al planteados por Liu S.Q. Y sus colaboradores, el
observar C8R1 los aminoácidos que interactuaron segmento N-terminal es el primero en encontrar
por parte de ECL2 fueron las posiciones 172-174 al segmento V1/V2 y la hoja puente de gp120
y 179, lo que confirma que el par 172-173 de ECL2 comenzando la interacción entre el complejo CD4
es sumamente importante en su reacción para y gp120, lo siguiente es el acoplamiento de esta
estabilizar el producto complejo ECL-V3. Por cadena de aminoácidos, este momento exacto sería
otro lado, en V3 de gp120 el aminoácido LYS305 un intermediario previo al entrar en contacto con
ha sido el único común entre C4R4 y C8R1. Luego el segmento ECL2 y según la regla 11/25 y los
se observa que las dos áreas opuestas a lo largo de argumentos previamente explicados, podría
V3 son muy reactivas para ECL2 alcanzando encontrarse CD4-gp120 en un movimiento
menor energía intermolecular C8R1 con el relativo a CCR5 al que se encuentra semi unido
contacto en la región 300-305 en comparación a por un pivote de giro que sería el segmento CCR5
C4R4 que presenta una interacción en la región N-terminal unido a V1/V2, pero este movimiento
318-322 de V3 pero con una diferencia poco de incertidumbre caracterizará la próxima
significativa, el impedimento en realidad es de tipo interacción según el lado en que arribe V3 al
conformacional para C4R4. segmento ECL2 de CCR5, el cual también podría
Observando nuevamente la regla 11/25 puede estar regido por el campo energético de los
sugerir este dato que cuando las posiciones 11 aminoácidos de la región V3.
y 25 de V3 están cargadas positivamente Al realizar una comparación con los resultados
entonces la cepa se comporta como X4 porque obtenidos por Paul R. Gorry (2007) 9 los
ECL2 puede arribar al choque con V3 por aminoácidos importantes en V3 de gp120 son
cualquiera de los dos lados y encuentra la misma TYR308, ASP321/ILE317 (aparte de LYS442,
respuesta. Esta explicación sería consistente con GLU444 y TYR330 que están en otras regiones
el hecho de que, para cepas X4/R5, lo que de gp120). Estas posiciones 308, 321 y 317 son
sucede es que uno de ambos aminoácidos en semejantes a las reportadas en R6C1, R6C13 y
posición 11 ó 25 se encuentra cargado C6R14. Estos resultados señalan que no hay una
positivamente, de manera que si ECL2 se acerca interacción específica entre ECL2 y V3, pero si
por el lado positivo, la cepa se comportará como se puede decir que V3 no solo es altamente afín a
X4, mientras que si arriba por el lado negativo ECL2 sino que parece estar diseñado de tal manera
se comportará como R5, y si ambos lados, el 11 que ofrece un epítopo de contacto diferente según
y el 25 se encuentran cargados negativamente la situación en que se encuentra al enlazar a ECL2,
o neutro, la cepa que reaccionaría sería distinguiendo tres áreas importantes en V3: a- las
únicamente R5. En conclusión en V3 existe más posiciones 300-305; b- las posiciones 307-308;
de un sitio en donde puede interactuar con c- las posiciones 314-322.
ECL2, por lo que existe la formación de El mismo trabajo de Paul R. Gory (2007)9 enseña
diferentes epítopos inducidos en V3 para los que las posiciones en V3 por él estudiadas: 308,
correceptores CXCR4 y CCR5. 317 y 321 no son ni suficientes, ni indispensables,
Esta conclusión permite proponer una mecánica por lo que se propone que trabajan en conjunto para
de interacción de V3 con ECL2. Siendo enlazar efectivamente a ECL2. En acuerdo con este
consistente con los tres modelos teóricos trabajo C6R14 es la única respuesta donde

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interactúan en pleno las regiones mencionadas y el campo electrostático generado en gran medida
que a pesar de que la posición física de V3 no sea por la ARG315 que se encuentra precisamente en
probablemente la mejor respecto a ECL2, esta la cresta de V3 que junto con PRO313 que son
interacción es la más cercana a una interacción real aminoácidos potencialmente atractivos a algunos
donde participarían todas las partes aquí en CCR5 como LEU174. Una vez que el
mencionadas, y que además posee una energía in- acercamiento entre estos grupos cargados se da,
termolecular muy aceptable (-3.04 Kcal/mol). ECL2 se debe reorientar en busca de un enlace
estable por medio de semi reacciones reversibles
Mecanismos de interacción y de reacción del entre los aminoácidos de ambas regiones hasta
segmento variable V3 de gp120 con el correceptor alcanzar un punto de equilibrio cambiando la
CCR5 conformación de los ángulos dihedrales en los
Los resultados obtenidos concuerdan con los aminoácidos de la región 169-173 de ECL2 con la
desarrollados por el grupo de Liu S.Q. En 2003, en finalidad de estabilizar el sistema.
este trabajo se describe cómo el acercamiento del
complejo CD4-gp120 a CCR5 se da por el extremo Mecanismos de Reacción
N-terminal de CCR5 el cual se encuentra extendido Para las mejores soluciones encontradas que son:
hacia el espacio exterior de la membrana celular, C8R1, C6R14 y las interacciones descritas en
por lo cual la serie de aminoácidos que entran en C4R4, se presenta a continuación un detalle de
contacto en primera instancia serían SER6 y SER7 los mecanismos de reacción para determinar la
– VAL120 LYS121 LEU122 de gp120 (190). estabilidad de los productos formados, puesto que
como se ha mencionado Autodock posee
Esta interacción debe permitir el acercamiento de limitantes en la libertad de rotación de enlace.
la ARG440 de gp120 en la hoja de enalce, hacia
TYS14 de la región N-terminal de CCR5 en una Análisis de C4R4
desprotonación del oxígeno del grupo sulfato que
resulta en una resonancia sumamente estable para C4R4 provee información importante para
el grupo sulfotirosilo, de la misma manera que para observar cuáles interacciones entre V3 y ECL2
la arginina, estableciendo un enlace salino. El efecto de CCR5 son las responsables del aumento de la
de esta interacción TYS-ARG debe desencadenar estabilidad por liberación de energía de enlace en-
un efecto domino que reorienta a un plegamiento tre estas secciones protéicas, por lo cual, se
de toda la sección N-terminal en CCR5, obligándola detallan a continuación los mecanismos de
a unirse cuando menos en las regiones 1-15 del reacción entre los enlaces sugeridos por el
correceptor CCR5 a la región V1/V2 de gp120 programa Autodock.
liberando energía de enlace por las interacciones La Gráfica No.6 Derecha muestra que existen
de Van der Walls generadas y por la formación de interacciones entre TYR318 y LYS171 las
puentes de hidrógeno. Este debe ser el momento cuales son producto de las fuerzas Van der
crucial para el enlace en V3, puesto que mientras Walls generadas por inducción dipolo-dipolo
que la región N-terminal se encuentra en inducido entre la amina de cadena lateral
plegamiento, V3 de gp120 se está acercando hacia presente en LYS171 y el carbono de cadena
el segundo segmento extracelular orientándose por lateral de TYR318, según lo propone el mismo

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programa Autodock, que además sugiere


interacciones entre el grupo hidroxilo de esta
tirosina y y la cadena carbonada de la lisina,
sin embargo sería más favorable para la
estabilidad del enlace si las interacciones se
dieran entre las cadenas carbonadas y entre los
grupos polares de ambos aminoácidos como
se sugiere a continuación:

Por otra parte se debe señalar la doble interacción


que posee la GLY173, tanto con el carbono
electropositivo presente en THR319 como con la
interacción con la amina de cadena lateral de
LYS305.
esta incoherencia sugerida por el programa es
producto de la rigidez de las cadenas, que es la
condición asignada durante la Corrida 4.
Además en C4R4 se puede observar que GLY321
interactúa con GLU172 formando un puente de
hidrógeno señalado en la Gráfica No.6 Derecha Análisis de C6R14
como puntos verdes. Estos aminoácidos también
interactúan en el oxígeno carboxílico de GLY321 En esta interacción se observa que los grupos
y el carbono alfa y el hidrógeno ácido del mismo amino de ARG304 tienen una fuerte atracción con
GLU172 interacción que se considera los nitrógenos presentes en HIS175 puesto que los
protones de ambos generan las cargas parciales
positivas que atraen a los pares electrónicos libres
de los nitrógenos, en la Gráfica No. 7 se observa
cómo los orbitales moleculares de estos grupos se
acercan, lo que hace probable un intermediario
de resonancia entre estos aminoácidos. Además
la flecha punteada recta que se observa entre
ARG304 e HIS175 representa las fuerzas de Lon-

sumamente estable. También se observan


choques de orbitales moleculares entre GLU322
y la secuencia SER169-GLN170 los cuales son
descritos como una atracción dipolo-dipolo en-
tre los grupos R laterales de GLU322 y SER169,
además de probables fuerzas de atracción de
London presentes entre GLU322 y GLN170.

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don existentes entre la cadena R de ARG304 y el que favorecen la estabilidad de esta unión,
además SER171 participa por medio de un
hidrógeno hidroxílico presente en su grupo R, el
R
R HN O
NH2 O
O NH
R
NH O O
NH2
R
HO

anillo aromático de HIS175. ASN308 GLN170-SER171


Además también ocurren atracciones por fuerzas
de London entre ILE323 e HIS175
cual se acerca al grupo carbonilo.
Se propone también que dada la cercanía
espacial presente entre GLU322 e HIS175 se Análisis de C8R1
puedan formar intermediarios estabilizados
En la Gráfica No.10 se aprecian las interacciones
en C8R1. TYR176 posee un anillo aromático que
atrae el grupo apolar de ILE307, mientras que el
hidroxilo de TYR176 se ve fuertemente atraído
por el grupo amino de la misma ILE307.
H3 C R R
H3C

H3C O H3C O
R R
NH
ILE307 ILE307
NH
O R O R

por resonancia entre estos aminoácidos. R


NH
OH
R
NH
O
H

TYR176 TYR176

También debe observarse la existencia de un


puente de hidrógeno entre THR320 y LYS171 que La serina que se encuentra en posición 179
se puede observar en la Gráfica No.7. también contribuye con la estabilidad de LYS305
por medio de un acercamiento de los orbitales
ASN308 posee además una clara interacción con electrónicos del oxígeno carboxílico en LYS305,
hacia el hidrógeno hidroxílico en la serina 179
CH3
NH2

O O O
H NH2 R
R
NH2 NH2
O
O OH
THR320 LYS171 HN
NH
R R

GLN170 puesto que ambos grupos amida deben SER179 LYS305

interactuar formando intermediarios cargados

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Gly173 forma un puente de hidrógeno con mediante fuerzas de London.


THR303 y aumentan la estabilidad de la unión,
R
R
R
HN
R
O O
HN NH CH3 H3C O
R R
R
R R
R O
NH HO NH H O THR303
THR303 O CH3
O CH3

GLY173 GLY173 NH CH3 OH R


R

y ASN300 posee una amina terminal altamente LEU174 THR303


positiva que atrae el carboxilo peptídico presente En general se puede observar que los mecanismos
en GLY173 que también contribuye a la de reacción propuestos justifican la estabilidad de
estabilidad de la unión proteica. las reacciones de V3 en gp120 con el segmento ECL2
de CCR5. Es razonable proponer entonces que si es
posible conseguir una estabilidad en la interacción
O
del segmento ECL2 con las tres diferentes regiones
R GLY173
de V3 mencionadas anteriormente, lo cual implica
R
HN que V3 es muy versátil en su enlace al segmento
NH
O R ECL2, lo cual facilita grandemente la infección de
R
NH2 O los linfocitos ThCD4+.

ASN300 Referencias

1. Ministerio de Salud Pública y Asistencia So-


También es posible observar las interacciones que cial Centro Nacional de Epidemiología
ocurren entre GLU1702 y ARG304 las cuales son Programa Nacional de Prevención y Control
de suma importancia debido a la posibilidad que de ITS, VIH y SIDA. Informe de
presentan de formar un puente salino que provee notificación casos SIDA Enero1984 –
de resonancia a ambos aminoácidos: Octubre 2007. Guatemala 2007

2. Judith García Epidemióloga, FETP-GAP.


Situación de la epidemia de VIH-SIDA,
Guatemala Enero 1984 - Octubre 2007
Centro Nacional de Epidemiología Guate-
mala, octubre 2007.

3. Navid Madani, Ana Luisa Perdigoto,


Kumar Srinivasan, Jason M. Cox, Jason J.
Otra atracción importante es la generada entre Chruma, Judith LaLonde, Martha Head,
LEU174 y THR303 que dada la gran cercanía que Amos B. Smith III,3 and Joseph G.
presentan estos aminoácidos, deben interactuar Sodroski Localized Changes in the gp120

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Envelope Glycoprotein Confer Resis- 8. Chih-chin Huang, Son N. Lam, Priyamvada


tance to Human Immunodeficiency Vi- Acharya, Min Tang, Shi-Hua Xiang, Syed
rus Entry. Inhibitors BMS-806 and #155 Shahzad-ul Hussan, Robyn L. Stanfield,
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Estudio de la Vegetación del Volcán San Pedro,


Reserva de usos múltiples de la cuenca del lago de Atitlán, Sololá

Pardo P.1, Véliz M. 2, Méndez C.3


1
Profesor interino, Departamento de Zoología, Genética y Vida silvestre, Escuela de Biología, Facultad de Ciencias
Químicas y Farmacia, Universidad de San Carlos de Guatemala.
2
Curador del Herbario BIGU, Escuela de Biología, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad de San Carlos
de Guatemala.
3
Jefe del Departamento de Ecología, Escuela de Biología, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad de San
Carlos de Guatemala.

“Ay a la parte del poniente deste pueblo (Santiago Atitlán) un bolcán grande (Volcán San Pedro) que la propia halda del
llega a la laguna y bate el agua della en la misma halda y cerca la dicha laguna la dicha halda del bolcán tres leguas,
antes mas que menos. Es alto y derecho y agusado a modo de pan de açucar. Tiene muchas quebradas que baxan de arriba
abaxo cabsadas de las lluvias e aguas que decienden de la punta del quando llueve. Del medio del para abaxo no tiene
ninguna arboleda. Todo lo demás del para arriba es poblado de árboles grandes de pinales y encinales y alisos y
madroñales. Puedese subir a él por muchas partes. En lo alto haze una manera de plaçuela que serán de alto de quinientos
pasos. En la cumbre del haze frío aunque nunca jamás se ha visto nieve en ninguno de estos bolcanes. Algunos religiosos
han subido en la cumbre deste bolcán y lo han visto y puesto una cruz en lo alto del”.

Relación del pueblo y cabecera de Atitlán,


por el corregidor Alonzo Páez Betancourt y Fray Pedro de Arboleda, 1585
(Anales de la Sociedad de Geografía e Historia de Guatemala, 1964)

Resumen

El presente estudio analizó la distribución de la vegetación en el volcán San Pedro en términos de su riqueza, composición,
estructura y abundancia, con base en la posible relación que esta guarde con los cambios de exposición y altitud observados en
el volcán. Para el efecto, el área con cobertura vegetal se dividió en tres pisos de altitud a partir de los 2,400 msnm hasta la
cumbre a 3,020 msnm, y en cuatro secciones verticales en relación a los cuatro puntos cardinales, dando como resultado el
arreglo del área en 12 sub-áreas o estratos relativamente más homogéneos (en cuanto a altitud y exposición). En total se
obtuvo una muestra de 36 unidades experimentales (parcelas de Whittaker de 0.1 Ha), correspondiendo 3 parcelas por cada
estrato.

Se logró la colecta de 1,038 números de herbario, que incluyen 415 especies agrupadas en 102 familias. Las familias más
abundantes fueron: Asteraceae con 72 especies (17.5%), Orchidaceae 27 (6.6%), Poaceae 19 (4.6%), Solanaceae 15 (3.6%) y
Fabaceae 13 (3.2%). Además, por los hábitos de crecimiento observados fueron agrupadas en Hierbas (149 especies - 36%),
Arbustos (91 sp. - 22%), Epifitas (56 sp. -14%), Árboles (52 sp. -13%), Lianas (45 sp. -11%), y otros hábitos (18 sp. – 18%).

El análisis de agrupamiento empleando como medida de similitud al Índice de Sørensen, el análisis de clasificación con
Twinspan y el de ordenación con DCA (PC-ORD Versión 3.12 y Past Versión 1.14), sustentan la posible existencia de dos
ensambles vegetales, producto de los cambios de exposición y altura: la asociación Quercus pilicaulis / Arbutus xalapensis /
Ceanothus azureus - Galium mexicanum – Salvia lasiantha; y la asociación Saurauia subalpina / Meliosma dives / Synardisia
venosa – Solanum appendiculatum – Maianthemun flexuosum.

La elevada riqueza vegetal promedio (41 spp / 0.1 Ha) registrada en el bosque del volcán San Pedro presenta serias amenazas
relacionadas al cambio en el uso del suelo, como los son el efecto de borde y la perdida de conexión con otros fragmentos, por
lo que se recomienda implementar estrategias de conservación y manejo que eviten un mayor deterioro del área.

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Introducción región posee y la creciente destrucción o deterioro


de los bosques que aún conserva. Entre ellos el
MacVean y Schuster (1981), y posteriormente bosque localizado en la cima del volcán San Pedro,
Monzón, Bayley y Schuster (2000), describen la en la cuenca del lago de Atitlán, cuya composición,
posibilidad de la existencia de un corredor estructura y abundancia se buscó conocer. Esto
continuo durante períodos glaciales del con el propósito que, al contar con la suficiente
pleistoceno entre los volcanes que forman la cor- información sobre la cobertura vegetal del volcán,
dillera volcánica que corre paralela a la costa del sea posible la implementación de planes de manejo
pacífico de Guatemala, razón por la cual la establecidos sobre una adecuada zonificación del
identifican como la zona biogeográfica más área natural. Dicha zonificación será la más
diversa y con mayor endemismo del país. Este apropiada si lográ advertir la heterogeneidad
endemismo es apoyado por estudios de flora y espacial del área, la cual se reflejada en la variedad
fauna llevados a cabo en distintas cumbres de ensambles vegetales encontrados a lo largo de
volcánicas (Véliz, 1989; Viñals, 1993; Islebe, los gradientes ambientales del volcán. Derivado
Velásquez y Cleef, 1995; Marroquín, 1995; Véliz de esto, en términos generales, se pretende mejorar
y Páiz, 2000; Bermúdez y Sánchez, 2000; Valdéz el entendimiento acerca de los factores
et al., 2000; Véliz et al, 2001; Suchini et al., 2001; ambientales que condicionan en cierta medida la
Dix et al, 2003; MacVean, 2006). No obstante, el distribución de la vegetación en regiones en las
conocimiento biológico del área aun es limitado, que existen gradientes ambientales pronunciados,
en contraste con la importancia ecológica que esta como sucede en los volcanes.

Figura 1. Cadena volcánica y Zonas


con cobertura bosque Latifoliado en la
región sur de la Reserva de Usos
Múltiples de la Cuenca del Lago de
Atitlán. Escala 1: 131,000, con base en
el Mapa de Cobertura Forestal MAGA-
1,999.

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Materiales y Métodos 1998), por lo que valida la comparación entre


estratos con distintas intensidades de muestreo.
El análisis de la abundancia observada de las
El volcán San Pedro es uno de tres volcanes
especies por parcela se realizó siguiendo la
originados durante el período terciario,
metodología de las técnicas de clasificación
encontrados en la región sur de la cuenca del lago
numérica, las que acomodan sitios, especies o vari-
de Atitlán, en el departamento de Sololá (región
ables, según sus similitudes (Krebs, 1999). De estos
occidental de Guatemala) (figura 1 y 2a). Este
métodos se escogió el análisis de agrupamiento
volcán se encuentra cubierto por bosque desde los
(CA) tomando como medida de similitud el índice
2,400 msnm hasta la cima a 3,020 msnm,
de Sørensen, y el análisis de especies indicadoras
abarcando un área aproximada de 3.78 kilómetros
de dos vías Twispan (two way Indicator species
cuadrados (378.23 Ha). (figura 2)
Analysis - Hill, 1979 en Islebe, Velásquez y Cleef,
Con el propósito de probar la hipótesis que supone
1995). Los resultados derivados de estas técnicas
que la riqueza, composición, abundancia, y aspectos
sentaron la base sobre la cual fue posible deducir
estructurales de la vegetación varían en relación a
los patrones presentes en la vegetación del volcán.
los cambios de exposición y altura, se establecieron
Estos resultados fueron: las agrupaciones de sitios
12 estratos que representan combinaciones de estos
(parcelas) afines, y las especies preferenciales
dos factores (figura 2b), en cada uno de los cuales
positivas a estas agrupaciones.
se distribuyó 3 parcelas de Whittaker (0.1 Ha),
Para identificar posibles gradientes ambientales
consistiendo la muestra de 36 parcelas.
responsables de la distribución de la vegetación, se
En el campo las parcelas se levantaron siguiendo
empleó el análisis de correspondencia rectificada
la metodología de Whittaker para el muestreo de
(Detrended Correspondence Analysis), técnica de
árboles, arbustos y hierbas. En dicha parcela se
ordenación indirecta eficiente para la reducción e
colectó muestras vegetales para la determinación
interpretación de conjuntos de datos ecológicos
taxonómica (las cuales fueron depositaron en el
multivariados, con uno o varios gradientes ambientales
herbario BIGU de la Escuela de Biología -
(McCune y Mefford, 1997; Hammer y Harper, 2003).
Universidad de San Carlos de Guatemala), se
Estos análisis se efectuaron empleando los programas:
estableció la abundancia, el diámetro a la altura del
PC-ORD Versión 3.12 (McCune y Mefford, 1997) y
pecho (DAP) y la altura en árboles y arbustos.
Past Versión 1.14 (Hammer y Harper, 2003).
Debido a la gran heterogeneidad observada en el
bosque, además de las colectas dentro de las
parcelas se colectó especimenes a lo largo de
brechas y senderos, de esta forma complementar la
información sobre riqueza y composición vegetal.

Análisis de resultados

El esfuerzo de colecta realizado en los estratos


establecidos se estandarizó mediante análisis de
rarefacción, procedimiento estadístico que busca
Figura 2a, Ubicación geográfica del volcán San Pedro, entre los
corregir los sesgos atribuidos a los efectos del límites municipales de San Pedro la Laguna y Santiago Atitlán,
muestreo en las curvas de diversidad (Alroy, departamento de Sololá.

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2
Área total con bosque natural 3.78 Km (378 Ha)

Estrato Altitudinal Área (Km2) %


A. Estrato 2,800 a 3,020 msnm 0.68 18
B. Estrato 2,600 a 2,800 msnm 1.18 31
C. Estrato 2,400 a 2,600 msnm 1.93 51
2
Exposición Área (Km ) %
I. Noreste 1.11 28
II. Sureste 0.96 24
III. Suroeste 1.02 25
IV. Noroeste 0.93 23

Figura 2b. Estratificación del volcán San Pedro para el estudio


de la vegetación.
Recuadro: Área en kilómetros cuadrados y porcentaje de cada
uno de los estratos.

Resultados y Discusión colectados dentro de las parcelas de Whittaker, y


257 especies a especimenes colectados a lo largo
Muestreo de la vegetación de brechas y senderos en el área natural. En el
El levantamiento de información en el campo muestreo dentro de las parcelas se logró el conteo
permitió la colecta de 1,038 números de herbario de 8,889 individuos, entre árboles (1674), arbustos
y la determinación de un total de 415 especies (1994), y hierbas (5221).
vegetales para el volcán (anexo 1), de las cuales
158 especies corresponden a especimenes

Gráfica 1. Curva de Acumulación de


Especies por unidad de esfuerzo (parcela
de Whittaker de 0.1Ha). Modelos con
mejor bondad de ajuste: 1. Modelo
Logarítmico (línea amarilla), 2. Modelo
Clench (línea azul), 3. Modelo
Exponencial (línea verde), Datos
observados (puntos rojos). Con base en el
programa “SpAcc2”, desarrollado por el
Centro de Investigación en Matemáticas
(CIMAT), México. E. Díaz-Francés, J.
Soberón, y L.G. Gorostiza.

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Los resultados del muestreo sistemático en y senderos la que, al abarcar una mayor cantidad
parcelas sirvieron para establecer el número de hábitats, demuestra ser capaz de percibir un
acumulado de especies por unidad de esfuerzo, mayor número de especies, condición que se ve
y estimar el número total de especies esperadas apoyada por el hecho que muchas especies
para el área. El índice jackknife (PC-ORD, dentro del volcán, ya sea por factores naturales
1997) fue uno de estos estimadores, dicho índice (hábitats reducidos, gradientes ambientales
en su primer orden estima un número de 207 pronunciados, y fuerte competencia
especies, mientras que en segundo orden un to- interespecífica) o antropogénicos (reducción,
tal de 244 especies. De la misma forma, la curva fragmentación y degradación del hábitat),
de acumulación de especies calculada con base presentan una distribución muy restringida, por
en el supuesto de procesos de nacimientos lo que no son lo suficientemente perceptibles.
puros1 de Díaz-Francés, Soberón y Gorostiza Lo que es confirmado por la cantidad de
(2003) con el programa SpAcc2, indica que los especies que se reportan con una o dos
resultados se acoplan con mejor ajuste al ocurrencias (50 y 11 respectivamente) (gráfica
modelo logarítmico. La curva construida 2). Todo lo anterior no solamente pone en
presenta de 1 a 25 parcelas un crecimiento evidencia la efectividad de la técnica de
constante en la cantidad de especies, luego del muestreo, sino también la variabilidad que los
cual se encuentra la asintota (gráfica 1). Sí se estimadores pueden llegar a tener en función a
contrasta el número de especies observadas en la forma en la que se realizó la colecta de datos.
las parcelas (158) y esperadas con base en el No obstante, es importante señalar el posible
estimador jackknife en los dos órdenes (207 y efecto que pueda estar teniendo en la
244), es posible observar que este llega a distar subestimación, la gran variabilidad en el número
en 49 y 86 especies respectivamente. En el peor acumulado de especies que se observa tanto
de los casos (jackknife de segundo orden), la dentro como entre estratos. Ya que los datos con
eficiencia del muestreo en parcelas sería del los que se construye una curva de acumulación
65% (el 35% de las especies no fueron de especies, deben ser el resultado de un
percibidas por el muestreo dentro de las esfuerzo de colecta constante, condición que
parcelas). Si bien el número de especies difícilmente se puede garantizar entre áreas
encontradas en la colecta en parcelas es menor heterogéneas. Por esta misma razón, y para
a la cantidad de especies esperadas, llama la poder realizar una adecuada comparación entre
atención el hecho que esta estimación sea mucho los resultados registrados para los distintos
menor al número total de especies encontradas estratos del volcán, fue necesario validar esta
en el área (415). Lo cual se debe a que tanto la comparación por medio de la curva de
curva de acumulación de especies como los rarefacción, curva que estableció en 360
estimadores fueron generados con base en el individuos el tamaño de muestra o cantidad de
número acumulado de especies registrado esfuerzo en el que las variaciones en la riqueza
dentro de las parcelas de 0.1 Ha, mientras que observada en los distintos estratos se atribuye
el número total de especies es producto de la completamente a las variaciones propias de los
colecta tanto en parcelas, como en brechas y sitios, y no a variaciones atribuidas al esfuerzo
senderos. Por lo tanto, es la colecta en brechas de colecta (cuadro 1).
1
Esta curva se basa en procesos estocásticos de nacimientos puros, como modelos teóricos para construir curvas de acumulación de especies. (Soberón y Llorente, 1993 en Díaz-Francés
y Soberón, 2005)

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Gráfica 2
A B

Rangos de distribución observados en las especies vegetales del área natural del volcán San Pedro; (A) Especies observadas por rangos de
exposición, y (B) Especies observadas por rangos de altitud.

Cuadro 1
IA IIA IIIA IVA IB IIB IIIB IVB IC IIC IIIC IVC
Riqueza total por estrato 62 44 42 46 50 25 34 41 49 50 55 51
Riqueza estandarizada con
53.6 35.7 37.7 43.4 43.8 21.3 29.9 36.6 44.0 46.9 50.1 51.0
rarefacción
Abundancia total por estrato 860 1710 860 540 810 870 590 710 540 470 510 360
Abundancia estandarizada con
360 360 360 360 360 360 360 360 360 360 360 360
rarefacción

Estandarización con la técnica de rarefacción del esfuerzo de muestreo por estrato, en el bosque natural
del volcán San Pedro. Exposición: I. Noreste, II. Sureste, III. Suroeste, y IV. Noroeste. Piso altitudinal: A.
2,900 msnm, B. 2,700 msnm, y C. 2,500 msnm.

Riqueza y Abundancia hecho que Asteraceae, Poaceae, Fabaceae y


Lamiaceae, se encuentren entre las familias con
El bosque del volcán San Pedro presenta en to- mayor porcentaje es evidencia de la abundancia
tal 415 especies vegetales, agrupadas en 102 de sitios con exposición solar pronunciada
familias botánicas y 3 divisiones taxonómicas: (ladera noreste y sureste). En la mayor parte de
Pteridophyta con 38 especies, Pinophyta con 3 las familias (91%), fue posible observar un
especies, y Magnoliphyta con 374 especies aporte individual de menos de 9 especies,
(Liliopsida - 77 sp, y Magnoliopsida - 297 sp) condición que en muchos de los casos se ve
(cuadro 2). La riqueza promedio de especies, asociada a una distribución limitada, y que
en relación al área se establece en 41.2 especies puede dar cierto indicio sobre la existencia de
por 0.1 Ha (412 spp / Ha). Con respecto a la microhabitats que son propicios para ciertas
riqueza de especies por familia, es posible especies. Este fenómeno es confirmado en el
deducir que la proporción que se observa es un caso de las familias Arecaceae, Lophosoriaceae,
claro reflejo de los hábitats y los hábitos de y Ericaceae, las que se encontraron restringidas
crecimiento predominantes en el volcán. El a pocas localidades en el área.

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Cuadro 2 Gráfica 3

Familia Sp. %

1 Asteraceae 72 17.52
2 Orchidaceae 27 6.57
3 Poaceae 19 4.62
4 Solanaceae 15 3.65
5 Fabaceae 13 3.16
6 Lamiaceae 11 2.68
7 Polypodiaceae 11 2.68
8 Rubiaceae 11 2.68
9 Bromeliaceae 10 2.43
10 Otras (93) 222 54.01

Aporte de especies por familia botánica a la riqueza vegetal del


volcán San Pedro

Otras familias mantienen una presencia continua, Dinámica de la riqueza de especies por familia botánica* a lo largo
de los dos gradientes ambientales en el volcán San Pedro. Estratos,
no obstante con diferentes especies, como es el Exposición: I. Noreste, II. Sureste, III. Suroeste, y IV. Noroeste.
caso de la familia Fagaceae (Encinos). En este Piso altitudinal: A. 2,900 msnm, B. 2,700 msnm, y C. 2,500 msnm.
grupo fue posible observar un intercambio de En los recuadros se resalta los sitios con mayor humedad (celeste)
y con mayor exposición al sol (anaranjado).
especies a lo largo de los gradientes ambientales
de tal modo que ningún hábitat dentro del volcán
La dinámica que se pudo observar en otras
deja de presentar más de algún tipo de encino.
familias en el bosque del volcán, difiere al
Mientras la especie de encino Quercus pilicaulis
caso de los encinos, ya que su distribución se
es la que claramente domina en el bosque de la
ve interrumpida por variaciones ambientales,
ladera noreste del volcán, en la ladera noroeste es
y el nicho vacante es ocupado gradualmente
la especie Quercus crispifolia la que logra ocupar
por familias con características funcionales
el nicho vacante, en donde llega a convertirse en
similares, pero con adaptaciones ambientales
una de las especies que dominan el bosque. Este
diferentes. Condición que puede apreciarse en
hecho es confirmado por el estudio sobre la
las familias: Solanaceae y Saurauiaceae por
diversidad taxonómica y funcional de los encinos
un lado, y Asteraceae, Lamiaceae y Poaceae,
de Cavender-Bares (2004), el cual aporta fuerte
por el otro. En donde se observa una
evidencia que prueba que ciertas especies de
disminución de la riqueza de especies, en
encinos se especializan en nichos particulares por
Solanaceae y Saurauiaceae, a medida que
medio de acuerdos en rasgos funcionales, y esta
aumenta la riqueza de Asteraceae, Lamiaceae
partición de nichos contribuye a la alta diversidad
y Poaceae. Las primeras son familias que
de encinos a nivel de paisaje.
presentan especies arbustivas tolerantes a la
sombra, mientras que las segundas son de
hábito principalmente herbáceo, que crecen
en áreas con claros o en laderas con mayor
exposición solar, áreas donde el dosel del
bosque no es denso (gráfica 3).

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En cuanto a la riqueza de especies por estrato y Abundancia


por unidad experimental, llama la atención el
rango de variación observado entre sitios, que La abundancia por parcela presentó un rango de
va de 21 a 54 especies (cuadro 1, gráfica 4). variación de 89 a 508 individuos (incluyendo
Asociando los cambios en la riqueza con los árboles, arbustos y hierbas), siendo el piso altitu-
cambios de exposición, se verificó una tendencia dinal 2,800 a 3,020 msnm el que mantiene la
a la disminución del número de especies a medida mayor abundancia en todas las exposiciones,
que la incidencia de la radiación solar aumenta seguido por el piso 2,600 a 2,800 msnm, y con la
(ladera sureste). Puesto que éste factor se menor abundancia, el piso 2,400 a 2,600 msnm
encuentra inversamente relacionado a la (cuadro 1, gráfica 5). Este patrón coincide con el
humedad ambiental, la ladera noroeste con piso del volcán que tiene mayor disponibilidad de
relativamente mayor humedad, es la que presentó hábitat y que conserva la mayor cantidad de
una de las riquezas más altas del volcán. Esta humedad durante todo el año.
tendencia se mantiene en los tres pisos de altitud.
Gráfica 4
Empero, la preferencia de las especies en el
volcán se inclina hacia la vertiente con mayor
humedad, los valores de riqueza más elevados
corresponden a dos parcelas en la ladera noreste,
lo que puede ser atribuido a que en dicha ladera
se encuentra una zona de transición de dos ma-
trices vegetales, por lo que muchas especies
tienden a coincidir en estos sitios.
Con respecto al cambio en altitud, la riqueza
presentó cambios menos abruptos que los
observados en los cambios de exposición, se
observa un aumento gradual en la riqueza de
especies por estrato a mayor elevación (gráfica
5), hecho que no concuerda con las evidencias Riqueza de especies por parcela de Whittaker, por rango altitudi-
nal y exposición (los ejes de la gráfica han sido modificados para
propuestas por varios estudios que más bien
que coincidan con la orientación de las parcelas de muestreo en el
plantean una disminución en la riqueza volcán).
(Terborgh, 1997; McCoy, 1990; citado por
Cardelús et al., 2006). Este fenómeno se puede En relación al gradiente de exposición, la
deber a que ciertas condiciones ambientales en orientación sureste es la que presentó mayor
la cumbre del volcán (menor pendiente, suelos abundancia en los tres pisos altitudinales,
con mayor cantidad de materia orgánica, y mayor siendo esta ladera la que mayor radiación so-
humedad), puedan estar facilitando el lar recibe, condición que favorece el
establecimiento de una mayor riqueza, ya que desarrollo de sotobosque y la propagación de
muchas veces la presencia de un gran número de herbáceas.
especies con rangos reducidos de distribución se En cuanto a la abundancia por especie, en el total
encuentra reflejando factores ligados al ambiente de parcelas levantadas en el bosque del volcán fue
(Cardelús et al., 2006). posible identificar entre las especies arbóreas más

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abundantes a Quercus pilicaulis con 273 Estructura de la vegetación


individuos (76 ind/Ha), Synardisia venosa con 185 Con base en los hábitos de crecimiento observados
individuos (51 ind/Ha), y Meliosma dives con 141 fue posible identificar siete estratos vegetales:
individuos (39 ind/Ha). Entre las especies de Hierbas que agrupan 149 especies (36%), Arbustos
habito herbáceo más abundantes se encontró: 91 especies (22%), Epifitas 56 especies (14%),
Festuca amplissima con 678 individuos (1.9 Árboles 52 especies (13%), Lianas 45 especies
individuos por metro cuadrado), Salvia lasiantha (11%), Epipétricas 14 especies (3%), y Parásitas 4
con 602 individuos (1.7 ind/m 2), Arracacia especies (1%) (gráfica 6).
donnell – smithii con 583 individuos (1.6 ind/m2)
Gráfica 6
y Neonelsonia acuminata con 528 individuos (1.5
ind/m2). Las dos primeras especies abundantes en
el bosque de la ladera sureste y las dos últimas en
la ladera noroeste.
De los tres estratos cuantificados en el estudio, el
estrato arbustivo fue el que presentó las menores
abundancias en el área, y se encontró mejor
representado por tres especies: Roldana gilgii con
189 individuos (0.26 ind/m2), Schistocarpha sp.
con 184 individuos (0.25 ind/m2), y Senecio
heterogamus con 148 individuos (0.20 ind/m2).
Relación que puede dar ciertos indicios sobre la
densidad del sotobosque en particular y la Hábitos de crecimiento de la vegetación del volcán San Pedro.
estructura que presenta el bosque en general.
Resalta la elevada proporción de hierbas, arbustos
Gráfica 5 y epifitas, que agrupan el 72% de las especies, a
partir de lo que es posible deducir el grado de
complejidad y la productividad que los
ecosistemas pueden llegar a alcanzar en el área.
En cuanto a la distribución de la riqueza por hábito
de crecimiento, llama la atención que en los sitios
en los que el estrato arbóreo presenta una elevada
riqueza de especies (ladera suroeste y noroeste),
la riqueza de arbustos y hierbas es relativamente
baja. Lo contrario sucede cuando la cantidad de
especies arbóreas es baja (ladera noreste y sureste).
Este mismo patrón se puede observar en el caso
de la abundancia, el diámetro y la altura promedio
en árboles y arbustos. Relación que permite
deducir la existencia de cierto grado de exclusión
Abundancia observada por parcela (0.1 Ha), ordenada por rango competitiva principalmente por luz, entre árboles,
altitudinal y exposición. arbustos y hierbas. Ya que la densidad y el grado

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de desarrollo que alcanza el estrato arbóreo, se Figura 3


encuentra inversamente relacionada a la cantidad
de luz solar que llega al suelo, y directamente a la
humedad ambiental (Passarge et al., 2006). No
obstante, la posibilidad de competencia por
recursos pueda explicar las fluctuaciones en la
riqueza, abundancia y el desarrollo que alcanzan
los estratos vegetales, no se debe descartar el hecho
que procesos naturales de regeneración y
microsucesión estén operando en algunas áreas
del volcán, en especial aquellas que con cierta
regularidad son perturbadas.
Si se analiza el comportamiento del estrato arbóreo
independientemente de los otros dos estratos,
destaca que a 2,500 msnm el bosque en la ladera
suroeste presenta un gran número de especies
arbóreas en pequeñas poblaciones. En contraste,
la ladera noroeste mantiene la misma riqueza en
poblaciones de mayor tamaño. Condición que
puede estar indicando una región con óptimos
ambientales los que favorecen no solamente una
alta densidad de especies, sino también el
Dendrograma del análisis de agrupamiento de parcelas de
establecimiento de poblaciones numerosas. En la vegetación en el volcán San Pedro. Medida de similitud: Índice de
ladera sureste el bosque se encuentra dominado Sørensen. Exposición: I. Noreste, II. Sureste, III. Suroeste, y IV.
por sólo una especie de encino (Quercus Noroeste. Piso altitudinal: A. 2,900 msnm, B. 2,700 msnm, y C.
2,500 msnm. A. Ensamble Saurauia subalpina / Meliosma dives /
pilicaulis). Condición que pone en evidencia un Synardisia venosa – Solanum appendiculatum - Maianthemun
bajo grado de equidad, que puede estar reflejando flexuosum; B. Ensamble Quercus pilicaulis / Arbutus xalapensis /
condiciones ambientales menos favorables en esta Ceanothus azureus - Galium mexicanum – Salvia lasiantha; C.
Zonas de Regeneración.
región del volcán, por lo que existe mayor
competencia y exclusión entre especies que La ordenación indirecta de las especies arbóreas
ocupan nichos similares. del volcán, producto del análisis de
correspondencia rectificado (DCA), guarda fuerte
Patrones espaciales en la vegetación del volcán relación con los dos grupos o ensambles vegetales
El análisis de la composición y abundancia de generados por los análisis de clasificación y
especies vegetales empleando técnicas de agrupamiento, los que ponen de manifiesto la
clasificación (Twinspan) y agrupamiento2, aporta existencia de un gradiente ambiental resultado de
elementos para considerar heterogénea a la la heterogeneidad espacial del volcán. El análisis
vegetación del volcán, presentando dos grupos o de correspondencia rectificado revela una elevada
ensambles vegetales3 (gráfico 3). correlación entre los sitios y las especies en el
volcán, el elevado valor de la raíz característica
2
Ya que Twinspan no realiza análisis de agrupamiento, por lo que no discierne patrones espaciales en la vegetación ni investiga la continuidad relativa de la misma (Groenewoud, 1992), fue necesario realizar análisis de agrupamiento empleando como medida de distancia el índice de Sørensen.
3 El término ensamble puede corresponder a la definición de comunidad vegetal, en el sentido que la proporción de ciertas especies tiende a ser más o menos estable en comparación con la proporción de otras especies. Esto debido a que cada especie puede reaccionar de forma particular ante
el ambiente de acuerdo a su desempeño fisiológico relativo, además de las interacciones con otras especies e interacciones a nivel de comunidad. De la misma forma diferentes ensambles tienden a prevalecer en diferentes segmentos de un gradiente ambiental. (Scott, 1995)

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(eigenvalue de 0.82) del primer eje de ordenación traslape de especies del 25 al 40%, mientras que
producto de DCA, sugiere un cambio en la en el gradiente de exposición del 18 al 51%. Razón
composición de especies entre sitios definido por por la que sería arbitrario definirlos de forma
un gradiente ambiental. Los bajos valores de la discreta. Además de los dos grupos principales fue
raíz característica para los ejes 2 y 3 (0.32 y 0.22 posible identificar ciertos sitios que corresponden
respectivamente), corroboran la importancia del a zonas perturbadas con especies propias, y que
primer eje para explicar la variación observada. se identifican como ensamble de especies de zo-
Con base en el gráfico de ordenación de los sitios nas de regeneración.
de muestreo y especies, se pudo inferir que el
primer eje corresponde al gradiente de exposición
(humedad), y el segundo al gradiente de altitud
(temperatura) (figura 4). En este gráfico, en el
extremo izquierdo del primer eje se observan tanto
las especies vegetales afines a ambientes con
mayor humedad como los sitios localizados en la
ladera con menor incidencia de radiación solar.
En la sección intermedia se presentan los sitios
que corresponden a zonas de transición o de
regeneración, mientras que en el extremo derecho
se concentran las especies y los sitios que se
localizan en las laderas con mayor incidencia de
radiación solar. En cuanto al segundo eje de
ordenación, resalta el hecho que este logra explicar
una mayor variación entre sitios a medida que
aumenta la humedad ambiental (base del
triángulo). Esto permite inferir que el aumento de
la humedad ambiental propicia una mayor
diferenciación entre sitios con diferente altitud,
mientras que en la ladera menos húmeda la
diferencia de altitud no genera variación entre las
distintas localidades.

Ensambles de especies en el bosque del volcán


Los dos ensambles o agrupaciones principales en
la vegetación del volcán guardan entre sí 20% de
similitud (gráfico 3), manteniendo cierta
continuidad que queda evidenciada al considerar
la cantidad de especies que se comparten o
“traslapan” a lo largo de los gradientes ambientales
en los que ocurren estos dos grupos (figura 4 y 5).
En el caso del gradiente de altitud se observó un

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Figura 4

Mayor Elevación
VerbeApl

CestrPac

Urera sp C
III.A.2 Buddleja
Oreopana

III.A.1
I.B.1

Phoebe s
Clethram
B
III.A.3 Chiranth
IV.B.1 Alnus ac II.B.2
2 CestrGua
I.A.2 I.A.3 Arbutus
I.A.1 II.B.3 II.A.3 II.B.1
III.B.1 II.A.1
I.C.1 I.B.3
s
Phoebe S IV.A.3 IV.C.1
QuerPili
I.C.2 II.A.2 II.C.1
i S y n a r d i s I.B.2 Fuchsia I.C.3 II.C.2
IV.A.1
x Meliosma

A
IV.A.2
III.B.3 IV.B.2 A
Pinus ps QuercAac
III.B.2 SaurauSu
III.C.3
Prunus s II.C.3
SaurauOr
IV.B.3 III.C.1 C l e t h r a
Ocotea s
Cestrum IV.C.3
IV.C.2 III.C.2
Menor Elevación (msnm)

Parathes

Urera ca Oreopaxa
QuerCris
Tournefo
Billia h Ostrya v
Verbesin Ardisia
Montanoa

Garrya l
Viburnum

Rhamnus

Axis 1
Menor exposición solar (mayor humedad) Mayor exposición
solar Humedad

Gráfico del Análisis de Correspondencia Rectificado (DCA). Ordenación indirecta de Parcelas (Triángulos) y Especies (X) a lo largo de
los gradientes representados por los dos ejes principales, eje 1 (0.82 Eigenvalue) asociado al gradiente de humedad, y eje 2 (0.32)
asociado al gradiente de altura. Agrupaciones: A. Parcelas asociadas a la región del volcán con mayor humedad; B. Parcelas asociadas
a la región del volcán con menor humedad; y C. Parcelas que no presentan un patrón claro asociado al gradiente de humedad o altura
(zonas de regeneración).
Figura 5

Ubicación de los
principales
ensambles vegetales
en el bosque del
Volcán San Pedro.

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A. Ensamble Saurauia subalpina / Meliosma Commelina sp., Phenax mexicanus, Salvia


dives / Synardisia venosa – Solanum curtiflora, Schistocarpha seleri, Senecio
appendiculatum – Maianthemun flexuosum cobanensis, y Uncinia hamata, Didymaea sp.
En este ensamble vegetal también es posible observar
Ensamble localizado de los 2,400 a los 3,020 una gran cantidad de bejucos (Clematis grossa, Smi-
msnm entre la ladera suroeste, noroeste y parte de lax jalapensis, Smilax sp., Solanum appendiculatum,
la noreste (figura 5). Entre las especies arbóreas Serjania sp., Zanthoxylum aguilarii y Zanthoxylum
que componen este ensamble se encuentran: harmsianum), trepadoras (Passiflora pterocarpa,
Saurauia subalpina, Synardisia venosa, Meliosma Passiflora membranaceae, Philadelphus myrtoides,
dives, Oreopanax echinops, Oreopanax Solanum wendlandii, Valeriana scandens var.
xalapensis, Cinnamomum salvinii, Prunus salasii, candolleana) y epifitas (Pleopeltis sp., Polypodium
Clethra pachecoana, Ocotea sp., Quercus allansmithii, Peperomia galioides, P. quadrifolia, P.
crispifolia, Rhamnus discolor, Fuchsia paniculata, humilis, Monstera siltepecana).
Ardisia sp., Billia hippocastanum, Cestrum En términos generales el ensamble guarda dentro
guatemalense, Cestrum pacayense, Tournefortia de sí 35% de similitud, y presenta rasgos que lo
petiolaris y Viburnum jucundum. La mayoría de permiten asociar al bioma selva de montaña, el
las cuales forman parte de la dieta del pavo de cual se caracteriza por presentar una combinación
cacho (Oreophasis derbianus), ave estrechamente de especies vegetales procedentes de
relacionada con esta asociación vegetal. El estrato Norteamérica y Sudamérica.
arbustivo se encuentra poco representado y en
muchos de los sitios no se observa del todo. Entre B. Ensamble Quercus pilicaulis / Arbutus
las especies arbustivas que se pueden encontrar xalapensis / Ceanothus azureus - Galium
muy localizadas en ciertas áreas, están: mexicanum – Salvia lasiantha
Chamaedorea keeleriorum, Chamaedorea
rojasiana, Lycianthes quichensis, Malvaviscus Este ensamble se encuentra localizado entre la
arboreus, Rojasianthe superba, Eupatorium ladera noreste y sureste del volcán, de los 2,400
nubigenum, Ostrya virginiana, Piper msnm a los 3,020 msnm (figura 5). Entre los
martensianum, Piper sp., y Euonymus árboles que componen esta asociación se
enantiophyllus. encuentra la especie Quercus pilicaulis, encino que
En general el estrato herbáceo se encuentra llega a presentar poblaciones importantes con
compuesto por: Begonia oaxacana, Centropogon diámetros de hasta 0.70 metros y alturas de 25
grandidentatus, Maianthemun flexuosum, metros, a pesar de ello se observa baja densidad
Phanerophlebia macrosora, Asplenium monanthes, de copas en el dosel.
Goodyera striata, Hydrocotyle mexicana, En ciertas regiones se encuentra acompañado por
Sibthorpia repens, Blechnum sp., Bomarea otros árboles como Arbutus xalapensis, Alnus
acutifolia, Botrychium sp., Pteris sp., Polystichum acuminata, Chiranthodendron pentadactylon,
ordinatum. Otras especies observadas son: Aca- Garrya laurifolia, Pinus pseudostrobus, y Quercus
lypha sp., Acalypha guatemalensis, Eupatorium acatenangensis, todas en poblaciones reducidas.
aschenbornianum, Eupatorium pycnocephalum, El estrato arbustivo es escaso, con especies como:
Iresine Calea, Ageratina sp., Arracacia donnell – Acacia pennatula, Buddleja nitida, Litsea
smithii, Bidens squarrosa, Carex donnell-smithii, guatemalensis, Lasianthaea fructicosa, Viburnum

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hartwegii, Ceanothus azureus, Monnina Conclusiones


xalapensis, y Cirsium subcoriaceum.
El estrato herbáceo domina el bosque, tanto en Se observa heterogeneidad en la distribución de la
riqueza como en abundancia. Entre las especies vegetación del volcán, la cual se atribuye
que sobresalen se encuentra: Salvia lasiantha, principalmente a los gradientes ambientales que se
Brachypodium mexicanum, Galium mexicanum, observan en el volcán, lo que fue corroborado con el
y Festuca amplissima, todas llegan a cubrir buena análisis de ordenación indirecta (DCA). Este
parte del piso del bosque. determinó que la alta correspondencia entre sitios y
Tomando en cuenta la cantidad de tiempo que especies se debe principalmente al gradiente de
generalmente toma a los árboles de encino alcanzar exposición (humedad). No obstante, el gradiente de
el diámetro y la altura que es posible observar en altitud aporta cierto grado de variación en la
esta región del volcán, y la gran cantidad de vegetación, la suficiente como para dar un sentido
bromélias que estos presentan en las ramas, se puede de particularidad a cada uno de los estratos del volcán.
argumentar que este es un bosque relativamente
maduro (Dunn, 2000 citado por Isaza et al., 2004). Recomendaciones
En general el ensamble guarda 25% de similitud,
y presenta rasgos que lo identifican con el bioma La reducción y el creciente aislamiento del bosque
bosque de montaña, con especies vegetales en su del volcán San Pedro se encuentran afectando la
mayoría procedentes de Norteamérica. dinámica natural del mismo, amenazando a un
gran número de especies tanto de flora como de
C. Zonas de regeneración fauna. Esto se refleja en la gran cantidad de
especies vegetales que comparten hábitats
Dentro del bosque del volcán es posible encontrar reducidos. Se determinó que más del 40% de las
zonas de regeneración caracterizadas por presentar especies sólo se logran distribuir en un rango de
vegetación de tipo arbustiva dominada por altitud o de exposición, lo que pone en evidencia
especies resistentes al sol, entre las que se el grado de “particularidad” que presentan las
encuentra: Urera caracasana, Dahlia imperialis, distintas regiones del volcán. Razón por la que
Verbesina apleura, Urera sp., Salvia spp., las estrategias de conservación deberán considerar
Arracacia acuminata, Arracacia donnell-smithii. cada una de sus partes como un hábitat único.
Este ensamble se puede observar en el cráter del Si a esto se añade la posible existencia de una
volcán San Pedro formando densas masas, en deuda de extinción, por lo que especies que aún
donde existen corrientes de agua y suelos anegados se reportan estén por desaparecer del bosque
en época lluviosa, razón por la cual se dificulta el (Berglund y Jonsson, 2005; Vellend, et al., 2006),
establecimiento de un bosque maduro como el que la cantidad de especies en peligro es mucho mayor
se encuentra aledaño al cráter. de la que se pueda tener idea. No obstante, el hecho
En la ladera noreste a 2,860 msnm cerca del área que tome mucho tiempo para que una deuda de
de campamento, se encuentra un pequeño plan4 extinción sea saldada, brinda la oportunidad para
cubierto con densa vegetación arbustiva y prevenir extinciones subsiguientes al incrementar
herbácea (Salvia spp., Schistocarpha sp.), con la cobertura forestal (Vellend et al., 2006),
algunos árboles típicos de zonas de regeneración tomando en cuenta que las especies vegetales que
(Urera sp., Verbesina sp., y Montanoa hexagona). aun permanecen pueden ser la base para esfuerzos
4
Posiblemente producto del derrumbe de una de las paredes del antiguo cráter del volcán.

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de restauración futuros (Berglund y Jonsson, 2005; Pedro Chiviliú y Esteban Vásquez, quienes
Vellend, et al., 2006). Hecho que es apoyado por colaboraron durante el levantamiento de
la teoría del seguro, que sugiere que una gran información de campo. A don Javier Méndez,
diversidad de especies puede disminuir la encargado del parque regional municipal
dinámica de perturbación dentro de una “Chuanimajuyú”, de San Pedro La Laguna,
comunidad, ya que la resiliencia de las Sololá. Al curador del herbario AGUAT,
comunidades se incrementa a mayor diversidad Facultad de Agronomía de la Universidad de
(Allison, 2004). San Carlos, Ing. Juan José Castillo por la
El tamaño poblacional a largo plazo es otro aspecto colaboración en la determinación de especies
que debe ser considerada en el caso del volcán, de palmas del volcán. A la Escuela de Biología,
ya que determina la adaptabilidad de la población. Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, en
Según Widén (1993), ciertas poblaciones vegetales especial al Lic. Fernando Díaz, por la
deberán de conservar tamaños mayores a 2,000 colaboración con el préstamo de equipo de
individuos para mantener niveles de adaptabilidad campo. Y al equipo de trabajo del herbario
que permitan la subsistencia de las especies BIGU, Escuela de Biología, por el apoyo en el
(Widén, 1993; citado por Reed, 2005). Reed trabajo de identificación y manejo de las
(2005) recomienda que las poblaciones en los muestras de herbario colectadas.
hábitats naturales deben ser protegidas para que
mantengan el 95% de la adaptabilidad original. Referencias
Con base en las estimaciones poblacionales
derivadas de los resultados del presente estudio,
1 Alroy J. Methods for removing sampling bi-
se deduce que por lo menos 20 especies
ases from diversity curves. Paleobiology.
(principalmente árboles) se encuentran en
1998; 20:191-207.
densidades por debajo de lo recomendado, algunas
de importancia ecológica como: Pinus
2 Berglund H, Jonsson BG. Verifying an Extinc-
pseudostrobus, Saurauia oreophila, Billia
tion Debt among Lichens and Fungi in North-
hippocastanum, Ocotea sp., Clethra pachecoana,
ern Swedish Boreal Forest. Conservation Bi-
Quercus acatenangensis, Phoebe sp. y Arbutus
ology. April 2005; Vol.19, 2:338-348.
xalapensis. Por lo que no solamente se deberá
considerar la protección de los hábitats naturales
3 Bermúdez M, Sánchez J, Eds. Identificación
del volcán, sino también la recuperación de las
de vacíos de información Botánica en
poblaciones naturales por medio de restauración
Centroamérica. Costa Rica: Museo Nacional
ecológica.
de Costa Rica, Red de Herbarios de
Mesoamérica y el Caribe, Y WWECA, Serie
Agradecimiento
Tec. No.4, 2000. 99p.
Se agradece a la dirección regional de CONAP
4 Calderón T, Valladares B, Véliz ME, Méndez
en Sololá, y a sus guardarrecursos, en la Reserva
C. Composición y Estructura Vegetal del
de usos múltiples de la cuenca del lago de
Volcán de Pacaya. Guatemala: USAC, Escuela
Atitlán, en particular a Marcos Porón, Domingo
de Biología. Doc. Téc. Np. 2005. 19 p.
Mendoza, Vicente Quixquinab, Rubén Sumosa,

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Anexo I: Composición y distribución de la 16. Oreopanax echinops (Cham. & Schltdl.)


vegetación del volcán San Pedro Decne. & Planch. (Mux h’alj) /Ár
17. Oreopanax sanderianus Hemsl. /33230 /Ár
18. Oreopanax steyermarkii A.C. Sm. (O.
Familia – Especie / Registro BIGU / Hábito liebmanii) /34373 /Ár
19. Oreopanax xalapensis (Kunth) Decne. &
Acanthaceae Planch. /33286 /Ár
1. Justicia sp. /33321 /Arb Arecaceae
Alstroemeriaceae 20. Chamaedorea keeleriorum Hodel &
2. Bomarea acutifolia (Link & Otto) Herbert / Castillo /Arb
Her 21. Chamaedorea rojasiana Standl. &
3. Bomarea edulis (Tussac) Herbert /Her Steyerm. /Arb
Amaranthaceae Asclepiadaceae
4. Iresine Calea (Ibáñez) Standl./ 33200 /Her 22. Asclepias elata Benth. /33269 /Her
Anacardiaceae 23. Cynanchum woodsonianum L.O. Williams
5. Rhus terebinthifolia Schlecht. & Cham. / /33276 /Li
33298 /Arb 24. Gonolobus sp. /Li
Apiaceae 25. Matelea velutina (Schltdl.) Woodson /
6. Arracacia atropurpurea 34232 /Li
(Lehm.) Benth. & Hook. f. ex Hemsl. /33117 / Aspleniaceae
Her 26. Asplenium achilleifolium (M. Martens &
7. Arracacia donnell-smithii J.H. Coult. & Galeotti) Liebm. /34231 /Her
Rose /33252 /Her 27. Asplenium cuspidatum Lam. /34144 /Her
8. Coaxana purpurea J.M. Coult. & Rose / 28. Asplenium monanthes L. /34234 /Her
33233 /Her 29. Asplenium sp. /34233 /Her
9. Cyclospermum leptophyllum (Pers.) Asteraceae
Sprague ex Britton & P. Wilson / 33247 / 30. Ageratina areolaris (DC.) Gage ex B.L.
Her Turner /33076 /Arb
10. Daucus montanus Humb. & Bonpl. ex 31. Ageratina sp. (Eupatorium sp.) /33278 /
Spreng. /33231 /Her Arb
11. Hydrocotyle mexicana Schltdl. & Cham. / 32. Ageratina sp.2 (Eupatorium sp.) /Arb
33241 /Her 33. Ageratum corymbosum Zuccagni /33246 /
12. Neonelsonia acuminata (Benth) J.M. Her
Coult. & Rose ex Drade /Her 34. Archibaccharis corymbosa (Donn. Sm.)
Apocynaceae S.F.Blake /33218 /Her
13. Mandevilla scorpioidea Woodson /34193 / 35. Archibaccharis schiedeana (Benth. In
Li Oerst) J.D. Jackson /33075 /Her
Araceae 36. Baccharis serraefolia DC. /33115 /Her
14. Anthurium montanum Hemsl./ 33228 /Epf 37. Baccharis vaccinioides Kunth /Arb
15. Monstera siltepecana Matuda /Epf 38. Bidens holwayi Sherff & S.F. Blake /Li
Araliaceae 39. Bidens ostruthioides (DC.) Sch.- Bip. /Her

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40. Bidens sp. /Her 70. Pluchea salicifolia (Mill.) S.F. Blake /Her
41. Bidens squarrosa Kunth /Li 71. Polymnia maculata Cav. /Her
42. Bidens triplinervia Kunth /33287 /Her 72. Psacalium pinetorum (Standl. & Steyerm.)
43. Calea integrifolia (DC.) Hemsl. /33221 / Cuatrec. /Arb
Arb 73. Rojasianthe superba Standl. & Steyerm. -
44. Calea ternifolia Kunth /33069 /Her Baj lel /Arb
45. Cirsium subcoriaceum (Less.) Sch. Bip. / 74. Roldana acutangula (Bertol.) Funston /Arb
33215 /Arb 75. Roldana aschenborniana (S. Schauer) H.
46. Conyza bonariensis (L.) Cronquist /Her Rob. & Brettell (Senecio quezalticus L. O.
47. Dahlia australis (Sherff.) P.D. Sorensen / Williams) /Arb
33251 /Arb 76. Roldana gilgii (Greenm.) H. Rob. &
48. Dahlia coccinea Cav. /33139 /Arb Brettell /33303 /Arb
49. Dahlia imperialis Roezl ex Ortgies /Arb 77. Roldana heterogama (Benth.) H. Rob. &
50. Eupatorium aschenbornianum S. Schaver / Brettell /33143 /Arb
Arb 78. Roldana petasitis (Sims) H. Rob. &
51. Eupatorium corymbosum Aubl. /Arb Brettell (Senecio petasitis (Sims) DC.) /
52. Eupatorium luxii B. L. Rob. /33235 /Arb Arb
53. Eupatorium morifolium Mill. /Arb 79. Sabazia sarmentosa Less. /33305 /Her
54. Eupatorium nubigenum Benth. /Arb 80. Salmea scandens (L.) DC. /33060 /Her
55. Eupatorium pycnocephalum Less./Arb 81. Schistocarpha seleri Rydb. /Arb
56. Eupatorium sp. /Arb 82. Schistocarpha sp. /Arb
57. Fleishmannia sp. /Her 83. Senecio barba-johannis DC. /Arb
58. Gnaphalium liebmanii Sch. Bip. ex Klatt / 84. Senecio cobanensis J.M. Coult.
Her (Telanthophora cobanensis (J.M. Coult.)
59. Gnaphalium liebmannii var. monticola H. Rob. & Brettell) /Arb
(McVaugh) D.L. Nash /33070 /Her 85. Senecio doratophyllus Benth /33255 /Arb
60. Gnaphalium salicifolium (Bertol.) Sch. 86. Senecio phorodendroides L. O. Williams
Bip. /Her (Pentacalia parasitica (Hemsl.) H. Rob. &
61. Gnaphalium sp. /Her Cuatrec.) /Epf
62. Hieracium irasuense Benth. /33277 /Her 87. Senecio sp. /Arb
63. Lasianthaea fructicosa (L.) K. M. Becker / 88. Sigesbeckia jorullensis Kunth /33212 /Her
Arb 89. Simsia sp. /Her
64. Liabum discolor (Hook. & Arn.) Benth. & 90. Sonchus oleraceus L. /Her
Hook. F. ex Hemsl. /33237 /Arb 91. Sp. 1 (Helianthae) /Arb
65. Liabum sp. /33323 /Arb 92. Spilanthes ocymifolia (Lam.) A.H. Moore /
66. Montanoa hexagona B.L. Rob. & Greenm. 33113 /Her
/33289 /Ár 93. Stevia lucida var. oaxacana (DC.) Grashoff
67. Montanoa hibiscifolia Benth. /33284 /Arb /Arb
68. Montanoa pteropoda S.F. Blake /Arb 94. Stevia polycephala Bertol. /33272 /Arb
69. Neomirandaea araliifolia (Less.) R.M. 95. Tagetes foetidissima DC. /33227 /Her
King & H. Rob. /33123 /Epf

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96. Tithonia longiradiata (Bertol.) S.F. Blake / Buddleiaceae


33250 /Arb 123. Buddleja nitida Benth. /Ár
97. Verbesina apleura S.F. Blake /33244 /Arb Burseraceae
98. Verbesina hypoglauca Sch. Bip. Ex Klatt / 124. Bursera simaruba (L.) Sarg. /Ár
Arb Cactaceae
99. Verbesina sp. /Arb 125. Disocactus cinnabarinus (Eichlam ex
100. Vernonia sp. /Arb Weing.) Barthlott /33204 /Epf
101. Zexmenia sp. /Her 126. Epiphyllum crenatum (Lindl.) G. Don /
Begoniaceae 31945 /Epp
102. Begonia oaxacana A. DC. /34293 /Her Caesalpinaceae
103. Begonia sp. /Her 127. Cassia stenocarpha Vogel /34205 /Arb
Betulaceae Campanulaceae
104. Alnus acuminata Kunth /31934 /Ár 128. Centropogon grandidentatus (Schlecht.)
105. Alnus firmifolia Fernald /31927/Ár Zahlbr. /Her
106. Carpinus caroliniana var. 129. Lobelia aguana E. Wimm. /33292 /Her
tropicalis Donn. Smith /33051 /Arb 130. Lobelia laxiflora Kunth /33073 /Her
107. Ostrya virginiana (Mill.) K. Koch /33285 / Caprifoliaceae
Arb 131. Viburnum hartwegii Benth. /33057 /Arb
Blechnaceae 132. Viburnum jucundum C.V. Morton /Ár
108. Blechnum falciforme (Liebm.) C. Chr. / Caryophyllaceae
34132 /Her 133. Alsine cuspidata (Wild. Ex Schltdl.)
109. Blechnum occidentale L. /31914 /Her Wooton & Standl. /33270 /Li
110. Blechnum schiedeanum (Schltdl. ex C. 134. Arenaria sp.1 /34282 /Li
Presl) Hieron. /31928 /Epf 135. Arenaria sp.2 /34167 /Li
111. Woodwardia spinulosa M. Martens & 136. Drymaria sp. /34351 /Li
Galeotti /31165 /Her Celastraceae
Boraginaceae 137. Euonymus enantiophyllus (Donn. Sm.)
112. Tournefortia petiolaris DC. /34253 /Ár Lundell /31109 /Ár
Bromeliaceae Chloranthaceae
113. Tillandsia butzii Mez /Epf 138. Hedyosmum mexicanum C. Cordem. /
114. Tillandsia capitata var. guzmanioides L.B. 31816 /Ár
Sm. /Epf Clethraceae
115. Tillandsia caput-medusae E. Morren /Epf 139. Clethra mexicana DC. - Tulul ché /31877/
116. Tillandsia guatemalensis L. B. Sm. /Epf Ár
117. Tillandsia ionantha var. scaposa L. B. Sm. 140. Clethra pachecoana Standl. & Steyerm. /
/Epf 31788 /Ár
118. Tillandsia matudae L. B. Sm. /Epf Clusiaceae
119. Tillandsia ponderosa L.B. Sm. /Epf 141. Clusia salvinii Donn. Sm. /31535 /Epf- Arb
120. Tillandsia rodrigueziana Mez. /Epf 142. Hypericum sp. /34294 /Her
121. Tillandsia usneoides (L.) L. /Epf Commelinaceae
122. Tillandsia vicentina Standl. /33122 /Epf 143. Comelina sp. /Her

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144. Tinantia erecta (Jacq.) Schltdl. /33114 /Her 169. Antidaphne viscoidea Poepp. & Endl. /
145. Tripogandra sp. /Her 33304 /HemiPst
Convolvulaceae Ericaceae
146. Ipomoea signata House /33196 /Li 170. Arbutus xalapensis Kunth /31925 /Ár
Crassulaceae 171. Gaultheria odorata Bredem. ex Willd. /
147. Echeveria guatemalensis Rose /33354 /Epf 31142 /Arb
148. Echeveria steyermarki Rose /Epp 172. Pernettya ciliata (Schltdl et Cham) Small /
149. Kalanchoe sp. /Epp 31875 /Arb
150. Sedum guatemalense Hemsl. /31161/Epf Euphorbiaceae
151. Sedum sp. /Epf 173. Acalypha guatemalensis Pax & K. Hoffm. /
Cucurbitaceae 3335 /Arb
152. Cyclanthera langaei Cogn. /31114 /Li 174. Acalypha sp. /34198 /Arb
153. Cyclanthera steyermarkii Standl. /Li 175. Acalypha trachyloba Müll. Arg. /31922 /
Cupressaceae Arb
154. Cupressus lusitanica Mill. /Ár 176. Euphorbia oerstediana (Klotzsch &
Cuscutaceae Garcke) Boiss. /31935 /Her
155. Cuscuta sp. /Pst 177. Euphorbia orizabae Boiss. /33263 /Her
Cyperaceae 178. Jatropha curcas L. /33137 /Ár
156. Carex donnell-smithii L. H. Bailey /33222 / 179. Phyllanthus sp. /34369 /Her
Her Fabaceae
157. Carex polystachya Sw. ex. Wahlenb. /Her 180. Canavalia hirsuta (M. Martens & Galeotti)
158. Carex sp. /Her Standl. /31789 /Li
159. Cyperus altemifolius L. /Her 181. Crotalaria sp.
160. Rhynchospora sp.1 /Her /34346 /Her
161. Rhynchospora sp.2 /Her 182. Dalea lutea var. gigantea (Rose ex Rydb.)
162. Uncinia hamata (Sw.) Urb. /Her Barneby /33280 /Arb
Dennstaedtiaceae 183. Dalea sericea Lag. /Arb
163. Dennstaedtia sp. /33316 /Her 184. Desmodium orbiculare Schltdl. /33257 /
164. Pteridium aquilinum (L.) Kuhn /31167 / Her
Her 185. Desmodium skineri Benth. ex Hemsl. /Her
Dioscoreaceae 186. Desmodium sp. /Her
165. Dioscorea dicranandra Donn.Sm. /Her 187. Diphysa sp. /34353 /Her
Dryopteridaceae 188. Eriosema sp. /34252 /Her
166. Phanerophlebia macrosora (Baker) 189. Lupinus montanus Kunth /33198 /Her
Underw. /31967 /Her 190. Phaseolus macrolepis Piper /34350 /Li
167. Polystichum ordinatum (Kunze) Liebm. / 191. Phaseolus polyanthum Greenm /34197 /Li
34333 /Her -Epf 192. Teramnus sp. /33310 /Li
Equisetaceae Fagaceae
168. Equisetum hyemale L. /31881 /Her 193. Quercus acatenangensis Trel. /31157 /Ár
Eremolepidaceae 194. Quercus crispifolia Trel. /34275 /Ár
195. Quercus peduncularis Née /Ár

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196. Quercus pilicaulis Trel. /31156 /Ár 222. Anthericum eleutherandrum (K. Koch)
197. Quercus tristis Liebm. /31146 /Ár H.E. Moore /33052 /Epp
Garryaceae 223. Maianthemum amoenum (H.L. Wendl.) La
198. Garrya laurifolia Hartw. ex Benth. /33266 Frankie /Epf
/Ár 224. Maianthemum flexuosum (Bertol.) La
Gentianaceae Frankie /Her
199. Halenia decumbens Benth. /33258 /Her Lomariopsidaceae
Geraniaceae 225. Elaphoglossum sp. /Her
200. Geranium andicola Loes. /33236 /Her Lophosoriaceae
Hippocastanaceae 226. Lophosoria quadripinnata var.
201. Billia hippocastanum Peyr. /31929 /Ár quadripinnata (J.F. Gmel.) C.Chr. /31821 /
Hydrangeaceae Arb
202. Philadelphus myrtoides Bertol. /31137 /Li Lythraceae
Hydrophyllaceae 227. Cuphea pinetorum Benth. /34268 /Her
203. Wigandia urens (Ruíz & Pav.) Kunth / Malpighiaceae
33241 /Arb 228. Gaudichaudia albida Schltdl. & Cham. /
Iridaceae 33253 /Arb
204. Orthrosanthus monadelphus Ravenna. /Her 229. Malpighia glabra L. /33116 /Arb
205. Sisyrinchium convolutum Nocca /Her Malvaceae
Lamiaceae 230. Malvaviscus arboreus Cav. /31953 /Arb
206. Cunila polyantha Benth /33273 /Her 231. Sida cordifolia L. /34120 /Her
207. Hyptis americana (Poir.) Briq. /Her Melastomaceae
208. Hyptis urticoides Kunth /Her 232. Heterocentron subtriplinervium (Link &
209. Salvia cinnabarina M. Martens & Galeotti Otto) A. Braun & C.D. Bouché /33145 /
/33268 /Arb Her
210. Salvia curtiflora Epling. /Arb 233. Leandra subseriata (Naudin) Cogn. /Arb
211. Salvia excelsa Benth. /33264 /Arb Mimosaceae
212. Salvia lasiantha Benth. /33288 /Arb 234. Acacia pennatula (Schltdl. & Cham.)
213. Salvia polystachia Cav. /Her Benth. /33064 /Arb
214. Salvia sp.1 /Arb 235. Calliandra grandiflora (L’Hér.) Benth. /
215. Salvia sp.2 /Arb 31961, 33111 /Arb
216. Salvia urica Epling /33071 /Her 236. Mimosa albida Humb. & Bonpl. ex Willd. /
Lauraceae 33061 /Her
217. Cinnamomum salvinii Kosterm. (Phoebe Myrsinaceae
salvinii (Mez) Lundell) /31973 /Ár 237. Ardisia sp. /33320 /Ár
218. Litsea glaucescens Kunth / 31133 / Ár 238. Parathesis sp. /34375 /Ár
219. Litsea guatemalensis Mez / 31141/ Ár 239. Synardisia venosa (Mast.) Lundell /31810 /
220. Ocotea sp. /34357 /Ár Ár
221. Phoebe sp. /34272 /Ár Myrtaceae
Liliaceae 240. Ugni montana (Benth.) O. Berg /33234 /
Arb

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Onagraceae 270. Lepanthes tecpanica Luer & Behar /Epf


241. Fuchsia cordifolia Benth./Epf 271. Lepanthes williamsii Salazar & Soto
242. Fuchsia encliandra subsp. tetradactyla Arenas /Epf
(Lindl.) Breedlove /Her 272. Malaxis brachyrrhynchos (Rchb. f.) Ames /
243. Fuchsia microphylla Kunth /33220 /Arb Her
244. Fuchsia paniculata Lindl. /Ár 273. Maxillaria tenuifolia Lindl. /34371 /Epf
245. Fuchsia tetradactyla Lindl. /33054 /Her 274. Ponera pellita Rchb. f /33301 /Her
246. Lopezia hirsuta Jacq. /33441 /Her 275. Potosia schaffneri (Rchb. f.) R. González
247. Oenothera multicaulis Ruiz & Pav /33256 / & Szlach. ex Mytnik /Her
Her 276. Rhynchostele pygmaea (Lindl.) Rchb. f. /
Ophioglossaceae 34335 /Epf
248. Botrychium sp./34376 /Her 277. Stelis sp. /Epf
Orchidaceae 278. Triphora sp. /Her
249. Arpophyllum alpinum Lindl. In Benth. /Epf Oxalidaceae
250. Bletia purpurata A. Rich. & Galeotti / 279. Oxalis latifolia Kunth /33055 /Epf
33136 /Her 280. Oxalis sp. /34227 /Epp
251. Coelia sp./33315 /Epf Papaveraceae
252. Corallorhiza maculata (Raf.) Raf./33214 / 281. Bocconia vulcanica Donn. Smith /Ár
Her Passifloraceae
253. Cranichis apiculata Lindl. /33068 /Epf 282. Passiflora biflora Lam. /Li
254. Cyclopogon elatus (Sw.) Schltr./Epf 283. Passiflora membranaceae Benth. /Li
255. Epidendrum arbuscula A. Rich. & Galeotti 284. Passiflora dolichocarpa Killip /Li
/Epf 285. Passiflora sp. /Li
256. Epidendrum dixorum Hágsater /33295 /Epf Phytolaccaceae
257. Epidendrum microcharis Rchb. f. /Epf 286. Phytolacca icosandra L. /33202 /Her
258. Epidendrum varicosum Bateman ex Lindl. Pinaceae
/33195 /Epf 287. Pinus maximinoi H.E. Moore /Ár
259. Goodyera striata Rchb. f. /33209 /Her 288. Pinus pseudostrobus Lindl. /Ár
260. Govenia superba (La Llave & Lex.) Lindl. Piperaceae
ex Lodd. /Her 289. Peperomia galioides Kunth /33358 /Epf
261. Gracielanthus pyramidalis (Lindl.) R. 290. Peperomia humilis A. Dietr. /33296 /Epf
Gonzáles & Szlach. /33135 /Her 291. Peperomia obtusifolia (L.) A. Dietr. /34377
262. Habenaria sp.1 /34236 /Her /Epp
263. Habenaria sp.2 /34244 /Her 292. Peperomia quadrifolia (L.) Kunth /33299 /
264. Isochilus aurantiacus Hamer & Garay /Epf Epf
265. Lemboglossum sp. /Epf 293. Piper martensianum C. DC. /31974 /Arb
266. Lemboglossum stellatum (Lindl.) Halb. / 294. Piper sp. 1 /34348 /Arb
33261 /Epf 295. Piper sp. 2 /34347 /Arb
267. Lepanthes sp. 1 /34363 /Epf Poaceae
268. Lepanthes sp. 2 /34362 /Epf 296. Aristida sp. /Her
269. Lepanthes sp. 3 /34335 /Epf

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297. Brachypodium mexicanum (Roem. & 325. Pleopeltis macrocarpa var. interjecta
Schult.) Link /33144 /Her (Weath.)
298. Bromus exaltatus Bernh./Her A.R.Sm. /34223 /Epf
299. Bromus laciniatus Beal /Her 326. Polypodium alansmithii R.C. Morán /
300. Calamagrostis guatemalensis Hitchc. / 34142 /Epf
33293 /Her 327. Polypodium hartwegianum Hook. /Epf
301. Festuca amplissima Rupr. /33267 /Her 328. Polypodium longepinnulatum E. Fourn. /
302. Festuca megalura Nutt. /Her 31791 /Epf
303. Lasiacis divaricata (L.) Hitchc. /Arb 329. Polypodium sp. /34215 /Her
304. Lasiacis sp. /Arb Prunaceae
305. Melinis minutiflora P. Beauv. /33271 /Her 330. Prunus salasii Standl. /31815 /Ár
306. Muhlenbergia presliana Hitchc. /Arb 331. Prunus serotina sub sp. Capuli (Cav.)
307. Paspalum sp. /Her McVaough /33063 /Ár
308. Pennisetum purpureum Schumach. /33262 Pteridaceae
/Her 332. Adiantum andicola Liebm. /33067/Her
309. Poa annua L. /33242 /Her 333. Bomeria pedata (Sw.) E. Fourn. /Epp
310. Setaria parviflora (Poir.) Kerguélen /Her 334. Cheilanthes pyramidalis Feé /34354 /Epp
311. Trisetum deyeuxioides (Kunth) Kunth /Her 335. Notholaena sp. /34210 /Epp
312. Trisetum sp. /Her 336. Pellaea sagitata (Cav.) Link /33300 /Epp
313. Vulpia bromoides (L.) Gray /33232 /Her 337. Pellaea ternifolia (Cav.) Link /33240 /Epp
314. Zeugites munroanus Hemsl. /Her 338. Pteris cretica L. /31164 /Her
Polemoniaceae 339. Pteris sp. /33317 /Her
315. Cobaea lutea D.Don /34206 /Li Pyrolaceae
Polygalaceae 340. Chimaphila maculata (L.) Pursh /33226 /
316. Monnina xalapensis Kunth /33225 /Arb Her
317. Polygala costaricensis Chodat /33119 /Her Ranunculaceae
318. Polygala panniculata L. /33050 /Her 341. Clematis dioica L. /31955 /Li
Polygonaceae 342. Clematis grossa Benth. /33291 /Li
319. Muehlenbeckia tamnifolia (Kunth) Meisn. / 343. Thalicthrum guatemalense C. DC. & Rose
33219 /Arb /31958 /Her
Polypodiaceae Rhamnaceae
320. Campyloneurum amphostenon (Kunze ex 344. Ceanothus azureus Desf. ex DC. /31944 /
Klotzsch) Fée /31942 /Epf Arb
321. Campyloneurum sp. /Epf 345. Rhamnus capreifolia Schltdl. /33066 /Ár
322. Campyloneurum xalapense (Feé) H. Christ 346. Rhamnus discolor Lesq./33356 /Ár
/33254 /Epp Rosaceae
323. Pleopeltis angusta Humb. & Bonpl. ex. 347. Alchemilla procumbens Rose /34268 /Her
Willd. /31790 /Epf 348. Holodiscus argenteus (L.f.) Maxim /31520
324. Pleopeltis interjecta (Weath.) Mickel & /Arb
Beitel /31814 /Epf 349. Rubus alpinus Macfad. /Li

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350. Rubus hadrocarpus Standl. & Steyerm. / 375. Smilax lanceolata L. /Li
34359 /Li 376. Smilax mollis Humb. et Bonpl. ex Willd. /
351. Rubus sp. /Li Li
Rubiaceae 377. Smilax sp. /Li
352. Borreria Laevis (Lam.) Griseb /Her Solanaceae
353. Borreria sp. /Her 378. Cestrum guatemalense C.V. Morton /33259
354. Bouvardia leiantha Benth. /33112 /Her /Ár
355. Chiococca phaenostemon Schlcht. /Ár 379. Cestrum pacayense Francey /33203 /Ár
356. Crusea coccinea DC. /34364 /Her 380. Lycianthes quichensis (J.M. Coult. &
357. Didymaea microphylla L.O. Williams / Donn.-Sm.) Bitter /34368 /Arb
33328 /Li 381. Lycianthes sp. /34201 /Arb
358. Galium mexicanum var. platyphyllum 382. Lycianthes tricolor (Sessé & Moc. ex
Greenm /Li Dunal) Bitter /Arb
359. Galium uncinulatum DC./Li 383. Solandra grandiflora Sw. /Epf
360. Relbunium aschenbornii (Nees & S. 384. Solanum appendiculatum Dunal /34220 /Li
Schamer) Hamsl. /33294 /Li 385. Solanum fontium Standl. & Steyerm. /
361. Rondeletia cordata Benth. /33322 /Arb 31171 /Her
362. Spermacoce sp. /Her 386. Solanum hartwegii Benth. /33207 /Arb
Rutaceae 387. Solanum morelliforme Bitter & Münch /
363. Zanthoxylum aguilarii Standl. & Steyerm. / 34261 /Epf
33201 /Li 388. Solanum nigrescens M. Martens & Galeotti
364. Zanthoxylum harmsianum (Loes.) P. /31803 /Her
Wilson /Li 389. Solanum nigricans M.Martens & Galeotti /
Sabiaceae 33275, 31783 /Arb
365. Meliosma dives Standl. & Steyerm. /31131 390. Solanum nudun Dunal /Epf
/Ár 391. Solanum sp. /Epf
Sapindaceae 392. Solanum wendlandii Hook. f. /31937 /Li
366. Serjania sp. /33324 /Li Sterculiaceae
Saurauiaceae (Actinidaceae) 393. Chiranthodendron pentadactylon
367. Saurauia oreophila Hemsl. /33140 /Ár Larreategui /31116 /Ár
368. Saurauia subalpina Donn. Sm. /31160 /Ár Thelypteridaceae
Scrophulariaceae 394. Thelypteris sp. /34242 /Her
369. Castilleja integrifolia L. f. /33059 /Her Tiliaceae
370. Lamourouxia dependens Benth /33274 / 395. Heliocarpus donnellsmithii Rose /Ár
Her 396. Triumfetta dumetorum Schlecht. /34125 /
371. Lamourouxia multifida Kunth /33072 /Her Her
372. Sibthorpia repens (L.) Kuntze /Li Ulmaceae
Selaginellaceae 397. Trema micrantha (L.) Blume /31904 /Ár
373. Selaginella sp. /34259 /Epp Urticaceae
Smilacaceae 398. Phenax hirtus (Sw.) Wedd. /33146 /Her
374. Smilax jalapensis Schltdl. /Li 399. Phenax mexicanus Wedd. /33138 /Her

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400. Urera caracasana (Jacq.) Griseb. /31534 /


Arb
401. Urera sp. /34250 /Ár
Valerianaceae
402. Valeriana robertianifolia Brig. /Li
403. Valeriana scandens var. candolleana
(Gardner) C.A. Muell. /33199 /Li
Verbenaceae
404. Citharexylum donnell -smithii Greenm /
Arb
405. Citharexylum mocinnii D. Don /33297 /Ár
406. Lantana camara L. /33265 /Her
407. Lantana hispida Kunth /33265 /Her
408. Lippia substrigosa Turcz. /33074 /Arb
409. Priva mexicana (L.) Pers. /33062 /Her
Violaceae
410. Hybanthus attenuatus
(Humb. & Bonpl. ex Roem. & Schult.) Schulze-
Menz /33245 /Her
411. Viola seleriana W. Becker /Her
Viscaceae
412. Phoradendrom nervosum Oliver; Vid. /Pst
413. Phoradendrom vulcanicum Trel. /34262 /
Pst
Vittariaceae
414. Vittaria graminifolia Kaulf. /34129 /Epp

Ár: Árboles (DAP mayor a 10 cm); Arb: Arbustos (DAP mayor a 1 y menor a 10 cm); Her: Herbáceas (DAP menor a
1 cm); Li: Lianas (Escandentes, Bejucos, trepadoras, etc.); Epf: Epifitas; Epp: Epipétricas; Pst: Parásitas;
HPst: Hemi Parásitas.

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INCIDENCIA Y ETIOLOGIA DE VAGINITIS INFECCIOSA


EN MUJERES GUATEMALTECAS

Acevedo L ., Arroyo G.

Departamento de Citohistología, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia,


Universidad de San Carlos de Guatemala

RESUMEN

La vaginitis es el proceso patológico que con mayor frecuencia afecta a mujeres en edad reproductiva y puede ser
responsable, en algunos casos, de complicaciones y secuelas serias para la salud de la mujer. En Guatemala, no se tiene
conocimiento preciso de la frecuencia de estos procesos, ni tampoco de los agentes que lo causan, razón por la cual se llevó a
cabo esta investigación.

Se realizó un estudio prospectivo en 594 pacientes que asistieron a la clínica de Papanicolaou de la Asociación
Pro Bienestar de la Familia (APROFAM) en la ciudad de Guatemala, las cuales fueron evaluadas clínicamente y
mediante pruebas de laboratorio para determinar la presencia de microorganismos patógenos.

Utilizando una metodología de laboratorio sencilla y estrictas definiciones de caso, se determinó que 305
pacientes (51.3%) padecían de vaginitis. Vaginosis bacteriana fue la principal cause de vaginitis en el 33% de los
casos (196 pacientes), otros padecimientos incluyeron vaginitis inespecífica en 11.8% (70 pacientes) vaginitis por
Candida sp. En 4.2% (25 pacientes) y vaginitis por Trichomonas vaginalis en 2.4% (14 pacientes). El presente
trabajo establece una base importante para el manejo de las pacientes con vaginitis y señala la importancia de la
vaginosis bacteriana en nuestro medio.

Finalmente, se determinó también la sensibilidad , especificidad y valores predictivos de la prueba de Papa-


nicolaou para el diagnóstico de vaginitis, tomando en cuenta su amplia utilización para el diagnóstico temprano del
cáncer del cuello uterino.

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INTRODUCCION síntomas o signos que pueden asociarse a


inflamación vaginal incluyen sangrado anormal
La microbiota normal de la vagina o después del coito, dispareunia y disuria. Las
constituye un ecosistema extremadamente características físicas del flujo pueden orientar
complejo. El principal representante de estos hacia la etiología del proceso así, el flujo de la
microorganismos es el Lactobacillus acidophillus tricomoniasis es usualmente amarillo verdoso,
(bacilo de Döderlein), el cual es el organismo abundante y a veces espumoso; por el contrario
predominante en 80-90% en la vagina de las el de candidiasis es blanco grumoso y semeja
mujeres normales. Está presente en leche cortada. El flujo de la vaginosis bacteriana
concentraciones de 107 – 108/ml de secreción vagi- es blanco grisáceo, pegajoso y se adhiere a las
nal y es el responsable en mayor grado de la paredes vaginales (5).
producción del ácido láctico, de tal manera que el
pH se mantiene entre 3.5 y 4.5 (1,2). El término Vaginosis fue introducido para
indicar que esta enfermedad difiere de la vagini-
La vaginitis infecciosa es considerada la tis en que en la primera hay un incremento de la
afección vaginal más común en mujeres en edad descarga de flujo sin inflamación significativa
reproductiva y la mayoría de los casos son de la mucosa vaginal y asociado a la ausencia
causados por Trichomonas vaginalis, Candida relativa de leucocitos PMN, mientras que en la
sp. o Vaginosis bacteriana (VB). Este último segunda, además de la descarga de flujo, sí existe
proceso se caracteriza por un marcado incre- una marcada inflamación y presencia de
mento de microorganismos de la microbiota que leucocitos PMN. El término VB fue adoptado
normalmente se encuentran en una muy baja para indicar que este síndrome es causado por
proporción al compararlos con los bacilos de bacterias, pero que su identificación no es
Döderlein y pueden aislarse cocos Gram positivo, imprescindible para establecer el diagnóstico (1).
anaerobios o microaerofílicos y bacilos Gram Este proceso además de ser importante como
negativo, incluyendo Gardnerella vaginalis, causal de vaginitis se ha asociado a
Molibuncus sp, Streptococcus faecalis, Escheri- complicaciones del embarazo como parto
chia coli, Mycoplasma hominis, Staphylococcus prematuro y bajo peso al nacer y también en
epidermidis, Prevotella sp y otros (3). algunos reportes a cáncer del cuello uterino (7,8)

Los síntomas reportados más MATERIALES Y MÉTODOS


frecuentemente en casos de vaginitis son: incre-
mento en la descarga vaginal (flujo) que puede Se estudiaron de manera consecutiva 594
acompañarse de mal olor o no, así como de pacientes en edad reproductiva (15-45 años), que
irritación y prurito, sin embargo la presencia o asistieron a la clínica de Papanicolaou de la
ausencia de síntomas no correlaciona Asociación Pro Bienestar de la Familia
exactamente con un diagnóstico clínico de (APROFAM), que no hubieran tenido tratamiento
vaginitis, ya que aproximadamente la mitad de en el último mes y que no estuvieran embarazadas,
mujeres que tienen tricomoniasis, vaginitis para evaluar la incidencia de vaginitis.
inespecífica y VB, son asintomáticas (3-6). Otros A cada paciente se le realizó una entrevista

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en la que se anotaron sus datos socio secreciones vaginales, asociado a la presencia de


demográficos, síntomas y motivos de consulta, síntomas y/o signos clínicos (prurito, flujo
así como un examen físico, durante el cual se grumoso de color blanco, eritema).
evaluó la presencia de signos de vaginitis.
Luego se obtuvo una muestra cérvico vaginal Vaginosis bacteriana:
(Papanicolaou) y vaginal (microbiológico), y se Una o más de las siguientes definiciones se
analizaron de la siguiente manera: cumplen:
• Papanicolaou: Estas muestras fueron Presencia de células clave (en fresco y/o tinción
procesadas por el Laboratorio de citología de Gram) y prueba de amina positiva.
de APROFAM y luego colectadas y Uno de los criterios anteriores asociado a pH
revisadas por los investigadores. mayor de 4.5 y/o flujo gris, homogéneo, adherente.
• Evaluación Microbiológica (Método de Ausencia total de bacilos de Döderlein o
referencia para este estudio): Se realizó microbiota mixta en la tinción de Gram, asociado
tinción de Gram, examen en fresco, prueba a la presencia de flujo gris, homogéneo, adherente.
de aminas y determinación de pH. Ausencia total de bacilos de Döderlein con
• Gram: Método estándar presencia de células clave en la tinción de Gram.
• Examen en Fresco: Colocar el hisopo con flujo
vaginal en un tubo con 0.5 ml de solución Vaginitis inespecífica:
salina. Preparar un frote en fresco y observar Flujo anormal asociado a la presencia de
al microscopio en búsqueda de tricomonas, abundantes leucocitos PMN y ausencia de
micelio y levaduras, así como células clave cumplimiento de alguna definición de caso
(debe realizarse inmediatamente). descrita anteriormente.
• Prueba de aminas: Agregar una gota de KOH
al 10% al flujo vaginal y oler inmediatamente Normales:
para detectar la presencia de un fuerte olor a No se ajusta a ninguna de las definiciones
pescado (prueba positiva). de caso anteriores y los hallazgos clínicos son
• pH: Utilizar un papel indicador con escala normales.
de incrementos en 0.5 unidades.
RESULTADOS
Los resultados obtenidos en ambos métodos
INCIDENCIA Y ETIOLOGÍA DE VAGINITIS
(Papanicolaou y método de referencia) fueron
INFECCIOSA
analizados utilizando el programa EPI-INFO 6.0
Se estudió un total de 594 mujeres, de las cuales
51.3% (305) tuvieron algún tipo de vaginitis.
DEFINICIONES DE CASO:
Tricomoniasis: La causa más común de vaginitis fue Vaginosis
Observación microscópica del protozoo Bacteriana, con un 33% (196 Pacientes). Can-
móvil en secreciones vaginales preparadas en fresco dida y tricomonas fueron responsables del 4.2%
con solución salina. (25 pacientes) y 2.4% (14 pacientes) de casos
de vaginitis, respectivamente. Los tres agentes
Candidiasis: mencionados fueron identificados en 235
Observación de micelio y levaduras en la pacientes (81.3%), de los casos de vaginitis.
preparación en fresco y/o tinción de Gram de
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TABLA 1
INCIDENCIA Y ETIOLOGÍA DE VAGINITIS INFECCIOSA
Clínica de Papanicolaou, APROFAM
DIAGNOSTICO* NÚMERO PORCENTAJE SIGNOS-SÍNTOMAS**
Tricomoniasis 14 2.4 8 (57.1%)
Candidiasis 25 4.2 25 (100.0%)
Vaginosis bacteriana 196 33.0 119 (60.7%)
Vaginitis inespecífica 70 11.8 37 (52.7%)
Normal 289 48.7 NA
TOTAL 594 100.0 -

* = según definiciones de caso NA = No aplicable

** = signos y/o síntomas presentes

Una proporción considerable de las En un subgrupo de 300 pacientes se pudo


pacientes no refirió molestias al momento de la evaluar el rendimiento de las pruebas
entrevista y el examen clínico, aún en presencia diagnósticas para Vaginosis bacteriana y se
de microorganismos patógenos como tricomonas demostraron hallazgos diagnósticos en 98 de
(42.9%) o diagnósticos de VG (39.3%) o vagini- las 300 pacientes (32.7%). De ellas, 89
tis inespecífica (47.1%). La definición de caso de tuvieron prueba de aminas positiva
vaginitis por Candida incluyó la presencia de (sensibilidad 90.8%), en tanto que un pH
signos y/o síntomas en vista de que este mayor de 4.5 se observó en 87 pacientes
microorganismo puede encontrarse como (sensibilidad 88.8%), 93 presentaron células
miembro normal de la microbiota vaginal sin clave en la preparación en fresco (sensibilidad
causar patología y por lo tanto sin requerir 94.9%) y 90 presentaron un frote con tinción
tratamiento alguno. de Gram compatible con VB (sensibilidad
91.8%). Sin embargo, es de notar que con
frecuencia se encuentran hallazgos falsos
positivos al utilizar sólo un criterio (Tabla 2)

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TABLA 2
SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD DE PRUEBAS DE LABORATORIO EN EL DIAGNÓSTICO DE 98
PACIENTES CON VAGINOSIS BACTERIANA
Clínica de Papanicolaou, APROFAM

PRUEBA Positivo Negativo Sensibilidad Especificidad


Prueba de aminas 99 9 90.8% 89.6%
Células clave 93 5 94.9% 98.5%
pH 87 11 88.8% 74.8%
Gram 90 8 91.8% 91.1%
Clínica + 64 34 65.3% 58.4%

Tomando en cuenta el criterio diagnóstico COMPARACIÓN ENTRE LA TINCIÓN DE PAPA-


descrito por Amsel, las 98 pacientes con VB en el NICOLAOU Y EL MÉTODO MICROBIOLÓGICO
presente estudio cumplieron con al menos tres de PARA EL DIAGNÓSTICO DE VAGINTIS
los criterios descritos anteriormente. La utilización
de tres criterios como mínimo para el diagnóstico En un subgrupo de pacientes (300), fue
de VB, disminuye las posibilidades de un posible comparar el rendimiento de la prueba
diagnóstico falso positivo. de Papanicolaou con los resultados de las
pruebas de laboratorio usadas para la
evaluación microbiológica. Los resultados en
general indican una alta especificidad
diagnóstica para tricomoniasis (100%), can-
didiasis (95%) y VB (98%), sin embargo una
sensibilidad pobre: tricomoniasis 50%, can-
didiasis 50% y VB 65%. Los valores
predictivos positivo y negativo, fueron
particularmente buenos para casos de
tricomoniasis y VB (Tabla 3).

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Tabla 3
CARACTERÍSTICAS DIAGNOSTICAS DE LA PRUEBA DE PAPANICOLAOU COMPARADA
CON EL MÉTODO MICROBIOLÓGICO*
Clínica de Papanicolaou, APROFAM
Diagnóstico +/+** +/- -/+ -/- Sens Espe VP+ VP- Kappa
Tricomoniasis 4 4 0 292 50% 100% 100% 99% 0.66
Candidiasis 8 8 14 270 50% 95% 36% 97% 0.43
Vaginosis bacteriana 64 34 4 198 65% 98% 94% 85% 0.71
Vaginitis inespecífica 20 5 141 134 80% 49% 12% 96% 0.17
Normal 35 118 11 136 23% 93% 76% 54% 0.31
* =Tinción de Gram, examen en fresco, prueba de aminas y pH
**=Método microbiológico/Papanicolaou. Sens = sensibilidad. Espe=especificidad.
VP+=valor predictivo positivo. VP-=Valor predictivo negativo. Kappa=Índice de correlación

El coeficiente de correlación de Kappa indica Tradicionalmente en Guatemala, se considera


que existe una correlación intermedia entre el entre las causas de vaginitis únicamente a la
método de referencia y la prueba de Papanicolaou tricomoniasis y la candidiasis, sin embargo fue
para los diagnósticos de tricomoniasis, candidi- la VB el diagnóstico etiológico más
asis y VB. Con respecto a vaginitis inespecífica, frecuentemente observado en la población
la sensibilidad es pobre (23%) al igual que el índice estudiada (64.3% de los casos de vaginitis) y por
de correlación (0.31). lo tanto, es necesario divulgar estos datos entre
la comunidad médica de tal manera que pueda
DISCUSIÓN DE RESULTADOS tomarlos en cuenta para intervenir con las
medidas terapéuticas adecuadas.
INCIDENCIA Y ETIOLOGÍA DE VAGINITIS
El 39.3% de las pacientes con VB
La incidencia de vaginitis encontrada en diagnosticadas en el presente estudio estaban
mujeres que consultaron la Clínica de Papanico- asintomáticas. Esto es comparable con lo descrito
laou de APROFAM, 51.3%, debe considerarse en la literatura, donde se acepta que hasta el 50%
elevada, aunque dentro de lo esperado para de las pacientes con este problema puedan no
clínicas de planificación familiar (9). Es presentar sintomatología (5). Asimismo, el 42.9%
importante considerar que algunos de estos de pacientes con tricomoniasis se encontraban
procesos han sido asociados con complicaciones asintomáticas y tomando en cuenta que este
o secuelas, tal el caso de la VB, o al ser de microorganismo no es un comensal normalmente
transmisión sexual como la tricomoniasis, ser presente en los fluidos vaginales y que su
indicativos de actitudes que colocan a la paciente transmisión es por vía sexual, este dato adquiere
en riesgo de transmisión de otros mayor importancia. Sin embargo en este estudio,
microorganismos (10). sólo 14 pacientes tuvieron este diagnóstico, por
lo que no pueden extraerse conclusiones

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definitivas al respecto. Un estudio específico del clave en el 94.9%, para una tinción de Gram com-
tipo y grado de sintomatología observado en patible con VB en el 91.8%, para una prueba de
pacientes con vaginitis por tricomonas es deseable aminas positiva en el 90.8% y para un pH mayor
para definir mejor el espectro clínico de esta de 4.5 en el 88.8%. Desafortunadamente, una sola
entidad en las pacientes guatemaltecas. prueba no puede utilizarse para establecer el
De las 70 pacientes con vaginitis inespecífica, diagnóstico dado que frecuentemente pacientes
el 47.1% estaban asintomáticas. Este dato es con otros diagnósticos puedan tener resultados
interesante, pero dado que esta entidad positivos en una sola de ellas, es decir baja
probablemente representa diversas causas de especificidad. La especificidad puede aumentarse
vaginitis, serán necesarios más estudios al utilizando combinaciones de pruebas, así
respecto, para llegar a conclusiones válidas. Debe combinaciones de dos pruebas positivas tienen
también cuestionarse si el método estándar una sensibilidad razonable (81.4% a 86.7% en
microbiológico utilizado en este estudio, es este estudio) aunque aún se observan resultados
suficientemente sensible o si la baja especificidad falsos positivos. El criterio de Amsel (13)
está dada por una sensibilidad mayor de la prueba consistente en al menos 3 de 4 pruebas positivas
comparativa (Papanicolaou). Un estudio (presencia de células clave, prueba de aminas
específico de vaginitis inespecífica sería de interés positiva, pH mayor de 4.5 y secreción homogénea
para aclarar estos puntos y establecer criterios y adherente de color grisáceo) es el
diagnósticos específicos (11). internacionalmente aceptado, teniendo una
sensibilidad de hasta el 100% y especificidad de
En contraste, el 100% de las pacientes con 98% (6). En este estudio se corrobora esto,
candidiasis estaban sintomáticas, ya que por considerándose recomendable utilizar al menos
definición de caso, se requería de síntomas para 2 criterios en el diagnóstico de VB, que en este
establecer el diagnóstico. El requerir la presencia caso serían la prueba de aminas positiva y la
de síntomas para diagnosticas vaginitis por Can- presencia de células clave en el examen en fresco
dida se justifica porque la cuantificación de este de la secreción vaginal, ya que estas pruebas son
germen en frotes de secreción vaginal está sujeta aplicables sin requerir mayor tecnología, ni
a subjetividad, y la sola presencia de levaduras aparatos sofisticados y tomar en cuenta la
no establece el diagnóstico, dado que con presentación clínica del flujo que orienta
frecuencia se detectan éstas, en muestras de inicialmente la investigación de VB.
fluidos vaginales en mujeres normales como
parte de la microbiota (12). TINCION DE PAPANICOLAOU EN EL
DIAGNÓSTICO DE VAGINITIS
En general, los resultados del presente estudio
confirman la utilidad de los criterios de Amsel Contrario a lo reportado en diversos estudios
en el diagnóstico de VB (13). Las pruebas que (14, 15), la tinción de Papanicolaou no fue un
se realizan según este criterio son en lo indi- método eficiente de diagnóstico de vaginitis
vidual, frecuentemente positivas en pacientes que causado por las diferentes entidades en la
se demuestra tienen VB. En esta investigación población estudiada, en las condiciones de
se obtuvieron resultados positivos para células trabajo de la clínica. Si bien es cierto que la

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tinción de Papanicolaou fue muy específica AGRADECIMIENTOS


(98%, valor predictivo de la prueba positiva
94%, Tabla 4), la sensibilidad del 65% es muy Agradecemos a la Asociación Pro Bienestar
baja como para recomendar esta técnica como de la Familia, APROFAM, y especialmente a los
método diagnóstico de VB en las condiciones profesionales y personal técnico de la Clínica de
de trabajo estudiadas. Su alta especificidad sin Papanicolaou y del Laboratorio de Citología
embargo debe garantizar que sea un diagnóstico Exfoliativa, por su valiosa colaboración en la
que siempre sea informado en el reporte del Pa- realización de este estudio.
panicolaou.
BIBLIOGRAFIA
Debe reconocerse además que el volumen de
trabajo en el Laboratorio de Citología Exfoliativa 1. Larsen BL, Galask RP. Vaginal micro-
de APROFAM, es grande y las implicaciones de bial flora: composition and influences of
una prueba de tamizaje para cáncer falsamente host physiology. Ann Inter Med 1982;
negativa son muy serias, lo que hace que el per- 96:926-30.
sonal ponga extremo cuidado en dicha
interpretación, presumiblemente a expensas del 2. Priestley CJ, Kinghorn R. Bacterial
reconocimiento de otras condiciones que podrían Vaginosis. Br J Clin Pract. 1996;
diagnosticarse con la misma tinción (como 50(6):331.4.
Vaginosis bacteriana por ejemplo). Esta
interpretación es también apoyada por la baja 3. Cook RL. Et al. Clinical, microbiological,
sensibilidad en el diagnóstico de otras and biochemical factors in recurrent bac-
condiciones infecciosas causales de vaginitis, a terial Vaginosis. J Clin Microbiol 1992;
pesar de ser algunas de ellas (el caso de vaginitis 30(4):870-77.
por tricomonas) fácilmente reconocibles en la
4. Spiegel CA. Bacterial Vaginosis. Clin
tinción de Papanicolaou.
Microbiol Rev. 1991; 4(4):485.502.
Es claro que la realización rutinaria del 5. Eschenbach DA, Hillier S, Critchlow C,
tamizaje con citología exfoliativa con la tinción Stevens C, DeRouen T, Holmes KK. Di-
de Papanicolaou en la búsqueda de cáncer cer- agnosis and clinical manifestations of bac-
vical, presenta una oportunidad para el terial Vaginosis. Am J Obstet Gynecol
diagnóstico de otras entidades patológicas 1988;158:919-23.
importantes en la salud de la mujer que no debe
de perderse. Deben diseñarse otras estrategias 6. Gardner HL, Dukes CD. Haemophillus
de educación en servicio, supervisión y vaginalis vaginitis. A newly defined spe-
retroalimentación del personal técnico, con el cific infection previously classified “non-
objeto de mejorar esta situación y permitir una specific” vaginitis. Am J Obstet Gynecol
detección temprana de Vaginosis bacteriana y 1955; 69:962-76.
de otras causas de vaginitis, con mínimos costos
adicionales.

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fluid infection, chrorioamnionitis and pre- Acta Obstet Gynecol Scand 1994; 73:802-8
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