UNIVERSIDAD MAYOR

FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA DE: OBSTETRICIA NUTRICION - ENFERMERIA
COORDINACION QUIMICA Y BIOQUIMICA
PROFESORES: ROBERTO BRAVO- MARIBEL ARNES

ENZIMAS
I.

INTRODUCCIN:

Las enzimas son protenas que funcionan como catalizadores especficos en la regulacin de la qumica
de las clulas de los organismos vivos.
Un catalizador es una sustancia que aumenta la rapidez o velocidad de una reaccin qumica, sin verse
alterada ella misma en el proceso global.
La velocidad y eficiencia con las cuales se realizan las transformaciones bioqumicas son notables. Si
stas se tratasen de hacer en el laboratorio, se comprobara que slo ocurriran si se suministrase una alta cuota
de energa ( por ejemplo calor), o pH extremos, o presiones elevadas, recursos todos ellos incompatibles con la
vida celular.. En las condiciones ambientales de una clula ( presin constante, pH fisiolgico y temperatura de
acuerdo a la especie, pero generalmente baja), la mayor parte de las reacciones bioqumicas ocurriran muy
lentamente o no se produciran en absoluto.
Luego las reacciones qumicas se realizan en los seres vivos a gran velocidad, en condiciones muy
moderadas de temperatura, pH y presin constante, gracias a los catalizadores.
II. CARACTERISTICAS GENERALES DE LAS ENZIMAS
Protenas altamente especializadas como catalizadores
Macromolculas
Son muy especficas respecto a sus sustratos
Funcionan en solucin acuosa en condiciones limitadas de temperatura y pH
Su actividad depende de la integridad de su conformacin
Existen algunas enzimas que requieren de un grupo qumico adicional de naturaleza no
proteica llamado grupo prosttico, el cual puede ser un cofactor ( iones metlicos Fe+2 , Mg+2,
Mn +2, Zn+2 ) o bien puede se una coenzima ( vitaminas)

cofactor
PROTENA

coenzima

apoenzima o
apoprotena

grupo prosttico

HOLOENZIMA
O
PROTEINA
CONJUGADA

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III.- CLASIFICACIN DE LAS ENZIMAS

Las enzimas suelen designarse agregando el sufijo asa
ejemplo, amilasa, ureasa, etc.

al nombre del sustrato sobre el cual actan. Por

Tambin se denominan las enzimas de acuerdo al tipo de reaccin que catalizan, por ejemplo deshidrogenasas,
descarboxilasas, etc.
Por otra parte, ciertas enzimas son conocidas con nombres comunes o tradicionales como Quimosina, pepsina,
etc.
La confusin creada por el uso de nombres segn distintos criterios, llev a la Unin Internacional de
Bioqumica ( IUB) a proponer un sistema de clasificacin, con normas para asignar a cada enzima un nombre
descriptivo y un numero que permite clasificarlas inequvocamente.
Los seis grandes grupos de la clasificacin internacional, segn el tipo de reaccin catalizada, son:

CLASIFICACION INTERNACIONAL DE LAS ENZIMAS

OXIDORREDUCTASAS
TRANSFERASAS
HIDROLASAS
LIASAS
ISOMERASAS
LIGASAS o
SINTETASAS

TRANSFERENCIA DE ELECTRONES
( iones hidruro o tomos de hidrogeno
TRANSFERENCIA DE GRUPOS DESDE UN SUSTRATO A OTRO (
GRUPOS TRANSFERIBLE: Amina,Carboxlo,Carbonilo,Metilo,Acilo,etc)
REACCIONES DE HIDRLISIS ( Catalizan la ruptura de enlaces C-O// CN// C-S// O-P , por adicin de agua)
ADICION DE GRUPOS A DOBLES ENLACES
FORMACION DE DOBLES ENLACES POR ELIMINACION DE GRUPOS
TRANSFERENCIA DE GRUPOS DENTRO DE UNA MOLECULA DANDO
FORMAS ISOMRICAS
FORMACION DE ENLACES ( C-C // C-S // C-O// C-N) MEDIANTE
REACCIONES ACOPLADAS DE ATP

Como ya se mencion algunas enzimas no requieren para su actividad ms grupos qumicos que
residuos aminocidos. Otras requieren un componente qumico adicional llamado cofactor. Este cofactor puede
ser uno o varios iones inorgnicos tales como Fe+2, Mg +2, Mn +2 o Zn+2 o un complejo orgnico o
metaloorganico denominado coenzima.
Una coenzima o ion metlico unido covalentemente a la protena enzimtica se denomina grupo
prosttico y acta como transportadora transitoria de grupos funcionales especficos.
Muchas vitaminas, que son nutrientes orgnicos requeridos en pequeas cantidades en la dieta, son
precursores de coenzimas, en la siguiente tabla se muestran algunos ejemplos

Algunas coenzimas que actan como portadores transitorios de

tomos o grupos funcionales especficos
COENZIMA
TIMINA PIROFOSFATO
FLAVINA ADENINA
DINUCLETIDO ( FADH2)
NICOTINAMIDA ADENINA
DINUCLETIDO ( NAD+)
COENZIMA A (CoA)
PIRIDOXAL FOSFATO
5-DESOXIADENOSILCOBALAMINA

BIOCITINA
TETRAHIDROFOLATO

PRECURSOR EN LA
DIETA

GRUPOS TRANSFERIDOS

VIT-B1 ( Tiamina)

Aldehdos

VIT-B2 ( Riboflavina)

Electrones

Acido Nicotnico ( niacina)

Ion hidruro ( :H-)

Acido Pantotnico
VIT- B6 ( Piridoxina)
VIT-B12
BIOTINA
FOLATO

Grupos Acilo
Gupos Amino
Atomos de hidrogeno y grupos alquilo
CO2
Grupos monocarbonados

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ALGUNAS COENZIMAS IMPORTANTES

O

OH O P O

Coenzima A

O
N
N

OH

N O

OH

OH

NH

O P O P O
O

NH

SH

NH2
Transferencia de Acilo
Vitamina : Acido Pantotnico ( B5)

Funcin Principal
O

B io tin a
NH

HN

lisina
S
Carboxilacin

Funcin Principal

Vitamina: Biotina

CHO

HO

H3C

OH

OH

Piridoxal Fosfato
Transaminacin
Vitamina: Piridoxal

Funcin Principal

H3C
N

Tiamina Pirofosfato

O
S

NH N

H2N

O
O

H3C

P
O

Transferencia de grupos
Vitamina: Tiamina ( B1)

Funcin Principal
O
-

O
N

H2N

O
N

O
CH2

P
O

HO
OH

O
CH2

HO
OH

H2N

Dinucletido de Nicotinamida adenina ( NAD+)

Funcin Principal

Oxido-Reduccin
Vitamina: Nicotinamida ( niacina)

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H2N

O
N

HO
OH

P
O

OH
OH OH

N
N

Dinucletido de Flavina y Adenina ( FAD)

O
N
H

O
Oxido-Reduccin
Vitamina: Riboflavina ( B12)

Funcin Principal

A MODO DE EJEMPLO SE REVISARA A CONTINUACIN LA

ESTRUCTURA Y FUNCIONAMIENTO DE LOS NUCLEOTIDOS NAD+ Y
FAD
a) Estructura del NAD+
Unidad de Adenina

Unidad de Nicotinamida

NH2
NH2

OH OH

N
O

O P O P O
OH

O
OH

OH

OR

NAD+ : R= H
NADP+:R=(P04)-2
A modo de ejemplo del funcionamiento del NAD+ se muestra en la siguiente figura la reaccin de oxidacin de
un alcohol

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NAD

H
comienza la
oxidacin de un
alcohol

NADH

R
H

R
Transferencia de
un hidrogeno

Perdida de un protn

O
H

H H

H
NH2

NH2

C
R

Resto de
la NAD+

Resto de
la NAD+

b) ESTRUCTURA y FUNCIONAMIENTO DEL FAD

unidad de riboflavina

CH3

unidad de adenosina

H3C

OH OH
OH

O
N

HO

OH

HN

CH3
CH3

H
N

RESTO DE LA COENZIMA

HN

N
N

NH

N
O

RESTO DE LA COENZIMA

NH2

HO

O P O P O

OH

CH 3

FADH2

H
CH 3
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IV SITIO ACTIVO
La mayora de las reacciones comunes en bioqumica suponen situaciones qumicas que son
desfavorables o poco probables en el ambiente celular, las que no se dan a una velocidad til sin catlisis. Una
enzima soluciona estos problemas al proporcionar un ambiente dentro del cual una reaccin determinada es,
energticamente, ms favorable.

La reaccin catalizada enzimticamente tiene lugar en una

zona de la enzima denominada sitio activo y la molcula que
es fijada en el sitio

activo y sobre la cual acta la

enzima se denomina sustrato.

Un sustrato unido al sitio activo de una enzima

Una enzima une de manera especfica una molcula de sustrato o varios sustratos en el sitio activo, este
sitio activo es con frecuencia un bolsillo o una hendidura rodeada por cadenas laterales de aminocidos que
facilitan la unin del sustrato. Existen dos modelos de la interaccin enzima-sustrato, el modelo de cerradurallave y el modelo de ajuste o encaje inducido.

Sitio activo

Sitio activo
Sustrato

Sustrato

Complejo Enzima Sustrato

MODELO DE
LLAVE CERRADURA

Sitio activo

+
Productos

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PRINCIPIOS GENERALES DE ACCION

MODELO DE ENCAJE INDUCIDO
( Koshland 1958)
El sitio activo es frecuentemente un bolsillo o hendidura rodeado por cadenas laterales que se
unen al sustrato y realizan la catlisis
El bolsillo es extremadamente estereoespecfico
En este modelo la enzima induce al sustrato a adoptar la configuracin que se aproxima al
estado de transicin, por lo tanto lo distorsiona.
La distorsin de la enzima puede ser local o puede provocar un cambio sustantivo en la
conformacin de la enzima
Las interacciones dbiles [ES] tienen lugar en el estado de transicin
La energa liberada cuando se producen estas interacciones se utiliza para cambiar la
conformacin del sustrato
La energa libre ( energa de fijacin) liberada por estas interacciones, equilibra parcialmente la
energa requerida para llegar a la cima de la colina energtica:
G**: Energa desfavorable ( +)
Gb: Energa de Fijacin ( -)
La ponderacin de la contribucin de ambas energas da como resultado una menor energa de
activacin.

Sustrato

Sitio
Activo

Sustrato

MODELO

ENCAJE INDUCIDO
Sitio
Activo

Producto

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V. COMPORTAMIENTO CINTICO DE LAS ENZIMAS

Cmo

La enzima proporciona un ambiente

adecuado dentro del cual una reaccin es
ENERGETICAMENTE

funciona una enzima?

FAVORABLE

Que hace un catalizador?

ESTO IMPLICA QUE LAS

ENZIMAS ALTERAN LA
VELOCIDAD DE UNA
REACCION, PERO NO EL
EQUILIBRIO

TOMEMOS POR EJEMPLO LA REACCION

SP

Cualquier reaccin SP, se puede describir mediante un

diagrama de coordenada de reaccin, el cual representa la energa
libre del sistema (G) frente al progreso de la reaccin.

Es una especie qumica

inestable y efmera
Estado de transicin **

G*
G t

P
Coordenada de la reaccin

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El catalizador reduce la barrera de energa para una reaccin, con lo que aumenta la fraccin de
molculas que tienen la energa suficiente para alcanzar el estado de transicin y hacer que la reaccin vaya
ms rpida en ambas direcciones.
Sin embargo, la presencia de un catalizador no tiene efecto alguno sobre la posicin de equilibrio,
puesto que la diferencia en las magnitudes de la barrera en las dos direcciones es exactamente la misma en
presencia o no del catalizador. As pues, G no se modifica por un
catalizador.

S+E ES EPE +P

Energa libre

Estado de transicin **

G* sin

G* catalizador

ES

EP
G

P
coordenada de reaccin

G= RT lnKc
( R= 8.315 J/mol

T=298K)

G valor negativo reaccin espontanea

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PRINCIPIOS DEL PODER CATALITICO Y ESPECIFICIDAD DE LAS

ENZIMAS

LOS GRUPOS
CATLITICOS DE UNA
ENZIMA

Pueden interactuar de manera transitoria con un sustrato

activndolo
Disminuyen la energa de activacin de una reaccin al
proporcionar una ruta alternativa de menor energa

( CADENAS LATERALES DE LOS

AMINOACIDOS, IONES, COENZIMAS)

La energa requerida para disminuir la energa de activacin

proviene generalmente de las interacciones dbiles no
covalentes entre sustrato y enzima
la formacin del[ES] viene acompaada de una pequea
liberacin de energa libre

ENERGA DE FIJACIN
Es la principal fuente de energa libre para disminuir la energa de
activacin de las reacciones

PRINCIPIOS
FUNDAMENTALES
1. - El poder cataltico de una enzima proviene de la energa liberada al
formarse el complejo enzima-sustrato
2. -La energa de fijacin proporciona tanto especificidad como catlisis
3. - Las interacciones dbiles son optimas en el estado de transicin de las
reacciones
4. -Los sitios activos de las enzimas son complementarios a los estados de
transicin

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VI ACTIVIDAD ENZIMATICA:
La actividad de una enzima puede determinarse midiendo la cantidad de producto formando ( o de
sustrato consumido ) por unidad de tiempo.
Para definir la actividad de una preparacin enzimtica se utiliza en la practica distintas expresiones. La
cantidad de enzima se indica habitualmente en Unidades Internacionales ( UI).
Una Unidad Internacional es: La cantidad de enzima que cataliza la transformacin de un micromol
de sustrato por minuto, bajo condiciones definidas de temperatura y pH.

1mol = 1 x 10-6 mol

La concentracin de enzima se mide habitualmente en Unidades Internacionales por mililitro de
preparacin.
De esta manera existen distintos factores que pueden modificar la actividad enzimtica( recordando que
la actividad enzimtica es : cantidad de producto formando ( o de sustrato consumido ) por unidad de tiempo.)
Los factores que modifican la actividad enzimtica , entre otros ,son:
a)
b)
c)
d)
e)

CONCENTRACIN DE ENZIMA
CONCENTRACION DE SUSTRATO
TEMPERATURA
pH
INHIBIDORES

A) CONCENTRACION DE ENZIMA
Cuando se determina la velocidad inicial de una reaccin catalizada por una enzima a distintas
concentraciones de sta, en presencia de concentraciones saturantes de sustrato y manteniendo
constante los otros factores ambientales ( temperatura y pH) se puede establecer la relacin entre
cantidad de enzima y actividad.
Si los resultados se representan en una grfica ( Concentracin de enzima vrs actividad) se obtiene la
siguiente grfica:

EFECTO DE LA CONCENTRACION DE ENZIMA SOBRE LA

Actividad Enzimtica

VELOCIDAD DE REACCION

Concentracin de Enzima

ESTA GRAFICA INDICA QUE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA ES

DIRECTAMENTE A LA CONCENTRACION DE ENZIMA

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b) CONCENTRACION DE SUSTRATO
La teora fundamental de la catlisis enzimtica se basa en los estudios clsicos de Michaelis y de
Menten. El anlisis cuantitativo de la accin de las enzimas que ha sido desarrollado depende en gran medida de
la determinacin de las velocidades de reaccin.
Uno de los factores clave que afectan a la
velocidad de una reaccin catalizada por una enzima
es la concentracin de sustrato presente, [S]. Como se
observa en la grfica adjunta:

Velocidad de reaccin en funcin

de la concentracin del sustrato

La forma hiperblica de esta curva se puede expresar

algebraicamente mediante la ecuacin de MichaelisMenten:

CINETICA MICHAELIS - MENTEN

V
* [S]
V = max
o Km + [S]

Vo ( uM/min)

donde Vmax = Velocidad mxima

Vo = Velocidad inicial
[S] = Concentracin del sustrato
Km = Constante de Michaelis-Menten

Vmax

Vmax

Km
Concentracin de Sustrato

Esta ecuacin se puede transformar a una

forma ms til de representar los datos experimentales,
la ecuacin denominada ecuacin de Lineweaver-Burk

Doble recproca ( Lineweaber-Burk)

1
Km
1
1
=
*
+
[S] Vmax
V
V
o
max
Para las enzimas que obedecen la relacin de
Michaelis-Menten la grfica de 1/Vo frente a 1/[S] da
una lnea recta.
Km/Vmax

Es muy importante sealar

que: Km = [S] , cuando
Vo= 1/2Vmax.
El significado y la magnitud de Vmax y
Km son variados

1/Vmax

-1/Km

1/S

Para poder comparar una enzima con otra en cuanto a su poder cataltico debe
estandarizarse al estado estacionario

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Estado estacionario:
La velocidad de formacin y desaparicin del complejo Enzima -Sustrato se
igualan. Segn la ecuacin general:
k2

S + E [ES]E+P
k1

k-1

KM = k-1 + k2 / k1

KM:

ES LA CONCENTRACION
DE SUSTRATO A LA CUAL SE
ALCANZA LA MITAD DE LA
VELOCIDAD MAXIMA

Ejemplo:
Si k2 <<<k-1 entonces

Km= k-1/k1

Luego si k-1>>k1 Km es grande por lo tanto la enzima se une al

sustrato dbilmente
La forma mas til de interpretar Km es:
Km = numricamente a la concentracin de sustrato a la que la
velocidad de reaccin ha alcanzado la mitad de su valor mximo.
Luego una enzima con Km alta requiere de una concentracin de
sustrato mayor para alcanzar una velocidad de reaccin dada, que una con
una Km baja
Constante Cataltica
Sea k cat la velocidad limitante de cualquier enzima a saturacin.
Kcat equivale a la constante de velocidad del paso limitante.
Generalmente Kcat = K2
kcat= Vmax / [E total]
Kcat se denomina tambin numero de recambio.
Equivale al numero de molculas de sustrato convertidas en producto por
unidad de tiempo, por cada molcula de enzima cuando esta saturada]

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c) TEMPERATURA:
Optima
Actividad enzimtica

Como consecuencia del aumento de la energa cintica, la

velocidad de una reaccin qumica aumenta a medida que la
temperatura aumenta. Dentro de limites especficos, las
reacciones catalizadas por enzimas mantienen este
comportamiento.
Si se mantienen constantes las concentracin de enzima,
sustrato y otros factores del medio ambiente de la reaccin y
se determina la
actividad enzimtica a temperaturas
crecientes, los resultados observados se representan en la
grfica adjunta.

De esta manera se puede observar que si bien la actividad

Temperatura
enzimtica aumenta con el aumento de la temperatura, se llega a un valor
mximo, que corresponde a la temperatura ptima de funcionamiento. Por enzima de este
ptimo, la actividad cae rpidamente. El efecto desactivante de la temperatura ( por lo general superior a 40C
para la especie humana) se explica por la accin del calor sobre la estructura molecular de la enzima ( las
enzimas , como protenas, son desnaturalizadas a altas temperaturas).
d) EFECTO DEL pH:
Si se mide la actividad enzimtica a diferentes pH, manteniendo constante los otros factores, se pueden lograr
resultados como los que muestra la siguiente figura:
Para la mayora de las enzimas, la actividad ptima se encuentra
entre pH 6 y 8 ( lgicamente existen excepciones). Por debajo o por
sobre de estos valores, la actividad enzimtica cae rpidamente
puesto que los cambios de pH del medio afectan el estado de
ionizacin de los grupos funcionales en las molculas de enzima y
tambin en las del sustrato. Recordemos que para la formacin del
complejo enzima-sustrato es necesaria una complementariedad de
cargas en ambas molculas. Finalmente, pH extremos provocan
desnaturalizacin de las molculas enzimticas, con la consiguiente
inactivacin.

Actividad enzimtica

Optimo

pH

E) INHIBIDORES DE ENZIMAS
Muchos tipos diferentes de molculas inhiben las enzimas, y actan de diversas formas. Estos
inhibidores pueden provocar una inhibicin reversible o una inhibicin irreversible.
Inhibidores Irreversibles:
Producen cambios permanentes en la molcula de enzima, con deterioro definitivo de su capacidad
cataltica. ( Ejemplos, son los compuestos organofosforados utilizados como insecticidas, el alopurinol un
inhibidor utilizado en el tratamiento de la Gota, etc) .La caracterstica de una inhibicin irreversible, esta dada
porque la enzima se une a la molcula inhibidora COVALENTEMENTE, lo que implica que no puedan separarse.
Inhibidores Reversibles:
Los diversos modos de inhibicin reversible implican todos ellos la unin no covalente de un inhibidor
a la enzima, pero difieren en los mecanismos por medio de los cuales reducen la actividad enzimtica y en la
forma en que afectan la cintica de la reaccin. De esta manera existen tres tipos de Inhibicin reversible:
COMPETITIVA , NO COMPETITIVA y ANTICOMPETITIVA

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INHIBICIN REVERSIBLE
Unin no covalente entre un
compuesto y la enzima
El compuesto inhibidor puede
unirse al sitio activo de la
enzima o en otro sitio dejando
libre el sitio activo
1. - Inhibicin Competitiva
2. - Inhibicin NO Competitiva

INHIBICIN IRREVERSIBLE
Unin covalente entre un
compuesto y la enzima
Se unen al sitio activo de la
enzima en forma irreversible
Casi todos estos inhibidores son
sustancias txicas naturales o
sintticas
Cianuro
Diisopropil fluorofosfato
Sarin
Penicilina
Paration
Fisostgmina

Inhibidor competitivo.:
Un tipo de inhibicin reversible comn es la que se denomina competitiva. Este inhibidor (I) compite con
el sustrato por el sitio activo de la enzima, provocando que la reaccin normalmente no tenga lugar cuando se
ha fijado el inhibidor, ya que mientras este ocupa el sitio activo impide la fijacin del sustrato.
Los inhibidores competitivos son, frecuentemente, compuestos que se parecen al sustrato y que se combinan
con la enzima formando el complejo EI.

Debido a que el inhibidor se une de manera reversible a la enzima, se puede cambiar el sentido de la
competicin en favor del sustrato aumentando la cantidad de este. Este fenmeno se puede determinar
fcilmente mediante una grfica de 1/Vo frente a 1/[S] para la reaccin con y sin inhibidor.

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Inhibidor no competitivo.
Este tipo de inhibidor reversible se fija a un sitio distinto del que se fija el sustrato no bloqueando la
fijacin de este y viceversa.

El inhibidor rebaja de manera efectiva la concentracin de enzima activa, por ende si se grfica 1/Vo
frente a 1/[S] para la reaccin con y sin inhibidor se observar que disminuye la V max

Inhibidor incompetitivo
Tambin es un tipo de inhibidor reversible el cual se fija a un sitio distinto al del sustrato, con la
diferencia que solamente se fija al complejo ES.

Considerando que los dos tipos de inhibicin ms frecuentes son la competitiva y la no competitiva,
veamos algunas diferencias y semejanzas.

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INHIBICION REVERSIBLE
No competitiva

Competitiva

El inhibidor compite con el sustrato por

el sitio activo de la enzima
Impide la formacin del complejo
enzima- sustrato

E + S ES
+
I

E+P

EI

El inhibidor se fija a un sitio distinto al

sitio activo
No se bloquea la formacin del
complejo enzima-sustrato

E + S ES
+
+
I
I

E+P

EI+S EIS

s
s
I

I
s

INHIBICION REVERSIBLE
No competitiva

Competitiva

El inhibidor se parece al sustrato y

puede formar el complejo enzimainhibidor
Impide la formacin del complejo enzimasustrato
La enzima no puede unirse al sustrato
Puede anularse el efecto del inhibidor
aumentando la concentracin de enzima.
Si aumenta la concentracin de sustrato,
se minimiza la probabilidad que se forme
el complejo enzima-inhibidor.
La velocidad mxima de la reaccin es
normal.
Aumenta Km
1/V

El inhibidor no se parece al sustrato

No se bloquea la formacin del
complejo enzima-sustrato
La enzima se inactiva al unirse al inhibidor
estando o no unido el sustrato.
No se puede anular el efecto con el
aumento del sustrato
El inhibidor disminuye la concentracin
de enzima
Por lo tanto disminuye la velocidad
mxima
No tiene efecto sobre Km
1/V

inhibidor

inhibidor

Sin inhibidor

1/ Vmax

Sin inhibidor

1/ Vmax

-1/ Km

1/S

-1/ Km

1/S

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VII ENZIMAS REGULADORAS.

Existe una cantidad de enzimas que no siguen el comportamiento cintico de Michaelis-Menten, pero
fijan la velocidad de la secuencia global, ya que catalizan la reaccin ms lenta, es decir, la limitante de
velocidad. Estas enzimas reguladoras muestran una actividad cataltica mayor o menor en respuesta a ciertas
seales, ajustando constantemente la velocidad de cada secuencia metablica para adaptarse a los cambios en
las necesidades de la clula con respecto a la energa y a las biomolculas requeridas durante el crecimiento
celular y en la reparacin de lesiones
Se tienen dos clases de enzimas reguladoras, las enzimas Alostricas que funcionan a travs de la unin
reversible, no covalente, de un modulador y la otra clase incluye enzimas reguladas por modificacin covalente
reversible. Ambas clases de enzimas reguladoras tienden a tener varias subunidades y, en algunos casos, el sitio
o sitios reguladores y el sitio activo se encuentran en subunidades separadas
Enzimas Alostricas:

En algunos sistemas multienzimticos la enzima reguladora es inhibida de manera

especfica por el producto final de la ruta siempre que el producto final se acumule en exceso
a las necesidades de la clula. Cuando la accin de la enzima reguladora se hace ms lenta,
todas las enzimas posteriores operan a velocidad reducida ya que sus sustratos desaparecen
debido a la accin de masas. De este modo se equilibra la velocidad de la formacin del
producto final con las necesidades de la clula. Este tipo de regulacin se denomina
retroinhibicin. La acumulacin del producto final de la ruta hace que toda esta funcione ms
lentamente.
Adems de sitios activos, las enzimas alostricas tienen generalmente uno o ms sitios reguladores o
alostricos para la fijacin del modulador. Del mismo modo que el sitio activo de una enzima es especfico para
su sustrato, el sitio alostrico es especfico para su modulador. La fijacin es del tipo no covalente por lo tanto
es reversible, es decir si disminuye la concentracin del producto final, aumentara la actividad de la enzima
reguladora.

GENERALIDADES DE LA REGULACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA

ENZIMAS ALOSTRICAS
Son protenas con mltiples subunidades y mltiples sitios activos
Presentan cooperatividad de unin del sustrato: HOMOALOSTERISMO
Su
actividad
esta
regulada
por
otras
molculas
efectoras:
HETEROALOSTERISMO
Todas las enzimas estn dispuestas en lneas de ensamblaje para llevar a
cabo los pasos secuenciales necesarios en una ruta metablica
Las enzimas reguladoras son inhibidas de forma especifica por los productos
finales de la ruta metablica cuando hay una alta concentracin de ellos o bien
por otro tipo de compuestos denominados MODULADORES ALOSTRICOS
Cuando una enzima alostrica disminuye de velocidad, todas las otras enzimas
de una ruta tambin trabajan a menor velocidad.
Las enzimas alostricas por lo general tienen:
Uno o ms sitios activos y uno o ms sitios alostricos o moduladores ( enzimas
HETEROTRPICAS)
En algunas el sitio
activo y el alostrico son el mismo ( enzimas
HOMOTRPICAS)
Su comportamiento cintico es diferente al Michaeliano.
Dan una curva sigmide al graficar V vrs [S] en vez de la hiprbola Michaeliana.
Se utiliza K0,5 que equivale a la Km
Este comportamiento cintico sigmoideo es el reflejo de interacciones
cooperativas ente sus mltiples subunidades.

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Es decir los cambios de estructura de una subunidad se traducen en cambios

estructurales en las subunidades adyacentes., efecto que es facilitado por
interacciones no covalentes en las interfase entre unidades.

Curva de actividad enzimtica alostrica n

funcin de la concentracin de sustrato ( lnea
negra)
Enzima con modulador positivo ( lnea roja)
Enzima con modulador negativo ( lnea gris)

MODELO DE REGULACION ALOSTERICA

Sitio
modulador

SITIO CATALITICO

La unin del modulador provoca

que se active el sitio cataltico
por medio de un cambio
conformacional

SITIO
ACTIVO

sustrato

Modulador

Sitio
modulador

Al sacar el modulador la
enzima se inactiva

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OTROS MECANISMOS DE REGULACION

Modificacin Covalente:
Otra

clase de enzimas reguladoras , se modula su actividad por modificacin

covalente de la molcula enzimtica. Las enzimas que estn totalmente inactivas son
alteradas por una modificacin covalente y empiezan entonces a funcionar. En algunos
casos, la modificacin acta en la direccin contraria, inactivando las enzimas. Se

utilizan grupos modificadores que se unen a la enzima para activarlas

Fosfato, AMP ,UMP ,ADP ,Metilos ,Acetilos , etc. Estos grupos de se
eliminan de la enzima por otras enzimas

HO

OH

Fosfato

Fosfato

Fosfatasa

Quinasa

Inactiva

Activa

Regulacin Irreversible:
Principalmente en las enzimas digestivas, existe el mecanismo de regulacin por Escisin
Proteoltica. Estas enzimas se producen como Zimgenos ( formas inactivas ), a las cuales se les
produce un corte de una parte de su estructura para lograr que se activen. Para inactivar las
enzimas activas se debe unir a su sitio activo una protena inhibidora
QUIMOTRIPSINOGENO

QUIMOTRPSINA
TRIPSINA

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16

VIII . EJERCICIOS ELEMENTALES

1. - Cual de las siguientes no es una propiedad de las enzimas. Explique
a) Las enzimas son casi exclusivamente protenas
b) Enzimas son catalizadores
c) Enzimas unen a su sustrato de manera especfica
d) La propiedad cataltica de las enzimas puede ser regulada
2.- En la catlisis enzimtica ocurre:
a) disminucin del G, de manera que la reaccin se haga espontnea
b) aumento de la energa del estado de transicin
c) no cambia el G, pero cambia la proporcin de productos y reactantes
d) aumenta la velocidad de la reaccin

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3.- Cual de los siguientes son mecanismos por los cuales la actividad de una enzima puede ser regulada
a) por unin de protenas reguladoras
b) por modificacin covalente de residuos de triptofano
c) por rompimiento proteoltico de precursores de enzimas inactivas
d) por unin de pptidos regulatorios por puentes dislfuro
e) por unin de molculas efectoras a un sitio distinto del sitio activo
4.- Cual de las siguientes afirmaciones sobre el complejo enzima-sustrato no son verdaderas. Explique
a) Se forma por unin covalente del sustrato
b) El complejo enzima-sustrato no puede ser aislado debido a que es muy inestable
c) El sustrato se une en cualquier lugar de la protena
d) Se estabiliza por interacciones dbiles
5.- Explique porqu hay un alto grado de estereoespecificidad en la interaccin de la enzima con su sustrato
6.- Cual de la siguientes afirmaciones sobre la cintica enzimtica de Michaelis -Menten son correctas:
a) La Km es expresada en trminos de una velocidad de reaccin ( mol/seg)
b) Km es la constante de disociacin del complejo enzima-sustrato
c) Km es la concentracin de sustrato requerida para alcanzar la mitad de la velocidad mxima
d) Km es la concentracin de sustrato requerida para convertir la mitad de la enzima total en el complejo enzimasustrato
7.- Cual de la siguientes afirmaciones sobre los diferentes tipos de inhibicin son correctas:
a) el inhibidor competitivo se une al sitio activo de la enzima
b) La inhibicin no competitiva de una enzima no puede ser revertida por la adicin de un exceso de sustrato
c) El inhibidor competitivo tiene una estructura qumica similar al sustrato de la enzima
d) El inhibidor no competitivo se une a la enzima en forma irreversible
8.- Cual es la proporcin de [S] a Km cuando la velocidad de una reaccin alcanza el 80% de la velocidad mxima
9.- Los siguientes datos corresponden a los de una reaccin catalizada por una enzima.
a) Determine si la enzima sigue una cintica michaeliana
b) Si es as calcule Km y velocidad mxima
[S] (mM)
0,1
0,2
0,5
0,8
1,0
2,0

v (mmol ml-1 min-1)

3,33
5,0
7,14
8,0
8,33
9,09

10.- Los siguientes datos corresponden a reacciones catalizadas por enzimas michaelianas, en presencia y ausencia de un
inhibidor, para ambos casos
a) Determine el tipo de inhibicin
b) Explique si el inhibidor se une a la enzima, al complejo enzima sustrato o a ambos
v (mmol ml-1 min-1)

[S] (mM)
0,2
0,4
0,8
1,0
2,0
4,0

Sin inhibidor
5,0
7,5
10,0
10,7
12,5
13,6
v (mmol ml-1 min-1)

[S] (mM)
0,2
0,4
0,8
1,0
2,0
4,0

Con inhibidor X
3,0
5,0
7,5
8,3
10,7
12,5

Sin inhibidor
5,0
7,5
10,0
10,7
12,5
13,6

Con inhibidor Y
2,0
3,0
4,0
4,3
5,0
5,5

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11.- Qu tipo de reacciones cataliza cada una de las siguientes enzimas

a) una oxidasa
b) una transmetilasa
c) una hidrolasa
d) una oxidoreductasa
12.- Para una reaccin catalizada por una enzima michaeliana, grafique:
a) Concentracin de sustrato versus tiempo
b) Concentracin de producto versus tiempo
c) Concentracin del complejo enzima sustrato versus tiempo
d) Velocidad de reaccin versus tiempo
e) Velocidad de reaccin versus concentracin de sustrato en presencia de un inhibidor no-competitivo
f) Velocidad de reaccin versus concentracin de sustrato en presencia de un inhibidor competitivo

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