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LES MEMBRANES BIOLOGIQUES

LES MEMBRANES BIOLOGIQUES
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La composition
La composition
Les lipides
Les lipides
Les acides gras
Les glycrophospholipides
Les ther phospholipides
Les sphingolipides
Les glycolipides
Le cholestrol (strode)
Caractre amphiphile
Auto-assemblage des lipides dans leau
La membrane plasmique : diffusion et asymtrie
La membrane plasmique : diffusion et asymtrie
Les protines membranaires
Les protines membranaires
La membrane plasmique
La membrane plasmique
Les protines membranaires intrinsques
Les protines membranaires modifications lipidiques
Historique
Thorie des Rafts
Le glycocalyx
La diffusion latrale des protines
La diffusion latrale des lipides
Exemples
Les limitations
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Les parts des diffrents constituants (glucides, protines et lipides) varient d'un
type cellulaire l'autre. On peut nanmoins donner en exemples les valeurs
trouves pour le globule rouge :
Lipides : 49% (55% de phospholipides, 25% de cholestrol et 20% de glycolipides)
Glucides : 8% (glycocalyx)
Protines : 43%
La composition
La composition
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Les lipides
Les lipides
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Les lipides : les acides gras
Les lipides : les acides gras
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Les lipides : les glycrophospholipides
Les lipides : les glycrophospholipides
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Les lipides : les glycrophospholipides
Les lipides : les glycrophospholipides
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Les lipides : les glycrophospholipides
Les lipides : les glycrophospholipides
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Les lipides : les thers phospholipides
Les lipides : les thers phospholipides
Les plasmalognes :
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Les lipides : les sphingolipides
Les lipides : les sphingolipides
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Les lipides : les glycolipides
Les lipides : les glycolipides
DAG
Ceramide
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Les lipides : le cholestrol (strode)
Les lipides : le cholestrol (strode)
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Une tte hydrophile et une (ou plusieurs) queue(s) hydrophobe(s)
D aprs Delattre et al., Les liposomes, aspects technologiques, biologiques
et pharmacologiques, Les ditions INSERM, 1993
Caractre amphiphile
Caractre amphiphile
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Auto-assemblage des lipides dans leau
Auto-assemblage des lipides dans leau
Le concept de forme
Effet hydrophobe (force de Van der
Waals) = force principale
dassemblage des molcules
lipidiques
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Les protines associes la membrane par des modifications
lipidiques :
-S-Palmitoylation
-N-Myristoylation
-Isoprnylation
-Glypiation
Les protines intrinsques :
en interaction avec les cur hydrophobe de la membrane
Les protines extrinsques :
faiblement associes la membrane par des interactions lectrostatiques
Les protines membranaires
Les protines membranaires
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La bactriorhodopsine
Les protines membranaires intrinsques
Les protines membranaires intrinsques
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Indice dhydrophobicit
Possibilit de prdire les zones de la protine localises
dans la bicouche lipidique
Les protines membranaires intrinsques
Les protines membranaires intrinsques
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La Porine Omp F ( Outer Membrane Protein ) de Escherichia coli
Structure en barrel, 16 feuillets anti-parallles
Transport ions et soluts
hydrophiles < 600 kDa
Association en trimres
Les protines membranaires intrinsques
Les protines membranaires intrinsques
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Myristoylation
COO-
Gly
NH
O =
Palmitoylation
C
COO-
O =
S
NH
2
COO-
C
S
NH
2
Isoprnylation
P
O-CH
2
-CH
2
-C
=

O
H
2
N
Glypiation
Extracellulaire
Intracellulaire
Co-traductionnelle
Post-traductionnelle
Les protines membranaires modifications lipidiques
Les protines membranaires modifications lipidiques
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1813: Eugne Chevreul dcrit le concept d'acide gras.
1847: Thodore Nicolas Gobley isole la lcithine du jaune d'oeuf. Il est de
fait le dcouvreur des phospholipides.
1855: Von Ngeli et Carl Eduard Cramer crent le concept de membrane
en tant que barrire pour expliquer les phnomnes osmotiques.
1890: Lord Raleigh ralise une srie d'expriences sur l'interface eau-huile
et calcule l'paisseur d'un film d'huile la surface d'une tendue d'eau.
1895-1899: Charles Ernest Overto dcouvre que la capacit d'une
substance traverser la membrane dpend de son caractre hydrophobe. Il
formule l'hypothse d'une membrane compose de lipides.
1917: Irving Langmuir tudie la structure des films d'huile la surface de
l'eau. Il formule l'hypothse d'une monocouche d'acide gras s'orientant
verticalement, le groupe carboxyl orient vers l'eau et la chane alkyle
oriente vers l'air.
La membrane plasmique : historique
La membrane plasmique : historique
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1925: Gorter et Grendel dmontrent la capacit de certains lipides former
des simples et des doubles couches. Ils montrent galement que la surface
des lipides extraits des globules rouges est gale deux fois la surface de
ces cellules. Ils sont ainsi les premiers formuler l'hypothse d'une
membrane cellulaire forme d'une double couche de lipides.
1935: James Frederic Danielli et Hugh Davson formulent l'hypothse d'une
membrane cellulaire compose d'une bicouche de lipides en sandwich entre
deux couches de protines.
1965 Bangham, Standish et Watkins synthtisent les premiers liposomes
partir de lcithine d'uf dshydrate.
La membrane plasmique : historique
La membrane plasmique : historique
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1972: Jonathan S. Singer et Garth L. Nicholson repensent l'hypothse de
Danielli et Davson et dcrivent le modle de la mosaque fluide. La
membrane est toujours organise en bicouche mais les ttes polaires des
phospholipides sont directement en contact avec l'eau. Les protines
membranaires flottent dans ou en surface des lipides.
paisseur de la
membrane plasmique
entre 5 et 7 nm
Modle montr laide
de la microscopie
lectronique
La membrane plasmique : historique
La membrane plasmique : historique
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Depuis les annes 70, des extractions avec des dtergents ont permis de
mettre en vidence des clusters de lipides organiss de manire semi-
cristalline et appels microdomaines (Sackmann, Israelachvili and
Karnovsky).
Ces clusters sont enrichis en sphingolipides, cholestrol et glycolipides et
ils sont rsistants au traitement par un dtergent non-ionique froid.
La membrane plasmique : thorie des rafts
La membrane plasmique : thorie des rafts
Ces microdomaines ont galement t montrs dans des cellules (Simons,
van Meer, Brown, Rose and Ikonen). Ils sont enrichis en certains lipides
mais galement en certaines protines particulires et sont appels rafts .
Les rafts sont petits (10-200 nm), htrognes et trs dynamiques. Ils
semblent impliqus dans la signalisation cellulaire mais leur rle exact reste
encore dfinir.
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Schma de lorganisation des rafts
(daprs N.M. Hooper, 1998)
Protine pied dancrage GPI
Protine transmembranaire
Sphingomyline
Cholestrol
Phospholipide
acides gras spcifiques
Protine de la
famille des Src-kinases
Matrice extracellulaire
Cytoplasme
Membrane
plasmique
Phospholipide
Glyco-
sphingo-
lipides
La membrane plasmique : thorie des rafts
La membrane plasmique : thorie des rafts
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La membrane plasmique : le glycocalyx
La membrane plasmique : le glycocalyx
Le glycocalyx (ou feutrage micro fibrillaire ou cell coat ou encore
glycolemme) est un lment existant chez tous les types cellulaires
eucaryote qui est compos est compos de glycoprotines et de glycolipides.
Sa fonction principale est d'aider la
reconnaissance intercellulaire (de
nombreux sucres exposs la
surface cellulaire appartiennent au
systme complexe majeur
d'histocompatibilit).
De plus, c'est une barrire
dynamique l'adhsion cellulaires.
Il joue galement un rle contre les
agressions mcaniques, chimiques et
enzymatiques.
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La membrane plasmique : diffusion et asymtrie
La membrane plasmique : diffusion et asymtrie
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La diffusion latrale des protines
La diffusion latrale des protines
Le coefficient de diffusion est reli la fluidit (la viscosit) de la
membrane.
Le coefficient de diffusion latrale dune protine sphrique est :
D
L
= k.T/(8...a)
Avec
k : constante de Bolzmann
: viscosit de la membrane
a : rayon de la particule sphrique.
Sa dimension est le m.s
-1
, titre dexemple une molcule qui a un
coefficient de diffusion de 10
-12
m.s
-1
balaye une surface de 4 m
par seconde.
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La diffusion latrale des lipides
La diffusion latrale des lipides
Le milieu lipidique nest pas considr comme continu vis--vis de sa
propre diffusion, on applique donc la thorie de lespace libre o
lon considre quun lipide se dplace par sauts dans un espace
contigu libr par les fluctuations des autres lipides.
Le coefficient de diffusion latrale dun lipide est :
D
L
= (1/4)..
Avec
: frquence du saut
: longueur du saut.
La longueur du saut peut-tre estime 0,7 nm (distance sparant
deux lipides), la frquence du saut est comprise entre 10
7
et 10
8
s
-1
donc les coefficients de diffusion sont denviron 10
-11
-10
-15
m.s
-1
.
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La diffusion latrale : exemple pour les lipides
La diffusion latrale : exemple pour les lipides
DMPC
DMPC + cholestrol
10
-15
10
-13
10
-11
D
L
(m
2
.s
-1
)
Temprature (C)
10 20 30
30
La diffusion latrale : exemple pour les protines
La diffusion latrale : exemple pour les protines
Modification de la diffusion latrale des
protines :
-la fluidit lipidique
-le rapport lipide/protine
D
L
peu modifi par la masse molaire.
3.10
-13
30
10
-11
5000
D
L
(m.s
-1
)
lipide/
protine(mole/mole)
5.10
-12
Chanes
dsordonnes
10
-14
Chanes ordonnes
D
L
(m.s
-1
)
Transporteur
danions dans
3.10
-12
250 kDa
Rcepteur de
lActhylcholine
5.10
-12
100 kDa
Ca
++
ATPase
10
-11
30 kDa
Bactriorhodopsine
D
L
(m.s
-1
) MM protine
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La diffusion latrale des lipides : limitations
La diffusion latrale des lipides : limitations
-Prsence de protines (cristaux 2D)
aquaeporin-1
-Interactions avec le cytosquelette
-Interactions avec la matrice extracellulaire
-Prsence de certains lipides (cholestrol)
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Rappels sur la matrice extracellulaire
Rappels sur la matrice extracellulaire
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LES MEMBRANES BIOLOGIQUES
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