La inactivacin del cromosoma X es un proceso biolgico notable, y es as como en un
estado temprano del desarrollo embrionario de las hembras mamferos. Uno de los cromosomas X de cada clula es desactivado. El cromosoma X desactivado, est fuertemente condensado, hacindose visible como un cuerpo que se tie intensamente y que es conocido como cuerpo de Barr. El estado inactivo es observable de manera consistente a lo largo de todas las divisiones mitticas subsecuentes que generan el estado adulto del mamfero. Los cuerpos de Barr son estructuras que son observables dentro de la clula, despus de unos tratamientos para la coloracin y observacin directa que permite el anlisis de cromosoma inactivo en la clula humana. En la presente prctica, los estudiantes podrn observar uno de los tantos materiales que conforman la materia viva, que en Biologa son transparentes, sin coloracin y por ello es difcil percibir su estructura, tal como sucede con la cromatina. Para tal efecto, en esta experiencia seguiremos los diferentes pasos del frotis, la fijacin y la coloracin del tejido que permitir la observacin de la cromatina inactiva y entender su significado. OBJETIVOS 1. Adiestrar al estudiante en la observacin de la estructura de los cuerpos de Barr y la identificacin de los cromosomas inactivo.
2. Entrenar al estudiante en la preparacin de muestras de frotis bucal para la observacin directa de las clulas desprendidas.
3. Ensear al estudiante los mecanismos bsicos de la cromatina y su funcin.
4. Ensear al estudiante los mecanismos bsicos que permiten que el material gentico pueda ser coloreado.
Materiales Frotis bucal Porta objetos limpios y secos. Cubre objetos. Baja lenguas Guantes Jeringa 3 ml. Muestra de sangre Etanol 96% Fijador alcohol metlico absoluto- acido actico 2:1 Azul de metileno Entellan Microscopio
PROCEDIMIENTO 4.1 Recoleccin de las clulas epiteliales y sanguneas Estas pueden obtenerse rascando el interior de la mejilla (frotis bucal) con un baja lenguas nuevo. Para esto, hay que aplicar muy poca presin ya que se desprenden muy fcilmente. Posteriormente se extienden las clulas sobre el porta-objeto en rea de uno o dos centmetros cuadrados. Tomar muestra de sangre. 4.2 Fijacin: Para lograrla, se debe sumergir el portaobjetos inmediatamente en un frasco que contenga una mezcla a partes iguales de alcohol metlico absoluto y acido actico. La fijacin de realiza por 5 minutos. Despus, se saca el portaobjetos del fijador. 4.3 Secado. 4.4 Coloracin: Posteriormente, se deposita sobre un soporte especial, compuesto de por dos varillas separadas cinco centmetros entre si, y colocado sobre un lavabo. Se vierte sobre el portaobjetos azul de metileno al 1% y se deja por 10 a 15 minutos. Luego se enjuaga el colorante y se aclara el portaobjetos en agua corriente para eliminar el exceso de colorante. Se apoya oblicuamente el portaobjetos sobre uno de sus extremos y se deja secar. Una vez seco est listo para el examen a 40X.
INTEGRANTES
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Asignatura: Gentica
Practica: inactivacin del cromosoma x y corpsculo de barr