OBTENCIN DE FLUORESCENA

LINA PAOLA OREJARENA AVILA

COD 63453291














FERNANDO AGUDELO
PROFESOR












UNIVERSIDAD DEL QUINDIO
FACULTAD DE CIENCIAS BASICAS Y TECNOLOGIAS
PROGRAMA DE QUIMICA
ARMENIA
2013

OBTENCIN DE FLUORESCENA



Objetivos

Realizar la sntesis de la Fluorescena.

Reaccionar el Resorcinol con Anhdrido Ftlico para sintetizar la Fluorescena.

Identificar el producto final con el punto de fusin y el espectro infrarrojo, obtener
el porcentaje de rendimiento.

Con los reactivos usados parla sntesis, hallar el reactivo limite.

Comprender la diferencia entre emisin y absorcin de luz en la regin del
ultravioleta-visible.



RESUMEN

En esta prctica se sintetizara la fluorescena a partir del Resorcinol y Anhdrido Ftlico
usando cido sulfrico como catalizador que al obtenerla fue cristalizada. En esta prctica
se tuvo en cuenta las observaciones en cada etapa y se le determin su masa, punto de
fusin y se analiz su IR despus de ser filtrada.



INTRODUCCIN

La fluorescena es una sustancia colorante orgnica hidrosoluble utilizada en el examen
de los vasos sanguneos del ojo y en ciertas tcnicas odontolgicas. Fue descubierta por
el qumico profesor y premio Nobel de Qumica (1905) Johann Friedrich Wilhelm Adolf von
Baeyer (1835-1917). La fluorescena es una sustancia colorante orgnica hidrosoluble de
color amarillo perteneciente al grupo de las xantinas que produce un
color fluorescente verde intenso en soluciones alcalinas (con pH mayor a 7). Es un
compuesto orgnico cuyo esqueleto principal se conforma de 3 anillos aromticos
consecutivos, sin embargo a diferencia de otros compuestos orgnicos tienen una muy
importante propiedad, la fluorescencia.

Cuando se expone a la luz, la fluorescencia absorbe ciertas longitudes de onda y emite
luz fluorescente de longitud de onda larga. Es, as mismo, un colorante
indicador ftlico que aparece de color amarillo-verde de la pelcula lagrimal normal, y de
color verde brillante en un medio ms alcalino, tal como el humor acuoso, y se usa
teraputicamente como una ayuda para el diagnstico de las lesiones corneales y trauma
corneal. La reaccin es la siguiente:


El mecanismo de la reaccion es el siguiente







Materiales

Vasos de precipitados
Varilla de vidrio
Pipetas
Matraz Erlenmeyer
Probeta
Estufa
Termmetro
Tubos de ensayo

Reactivos

Resorcinol
Anhdrido Ftlico
cido Sulfrico
Agua Destilada.
HCl
NaOH

Procedimiento


0,15g Anhdrido Ftlico 0,22g Resorcinol


1 gota H
2
SO
4


Calentar

2mL H
2
O
0,1mL HCl

Calentar


Filtrar



Filtrado Residuo


Secar

Luz UV




10min
180C (30min a 90min)
1 muestra + 10mL HCl 1.0 M
Fluorescena
1 muestra + 10mL NaOH 1.0 M
Fluorescena
1 muestra + 10mL H
2
O 1.0 M
Fluorescena

UV


Pesar

Punto de Fusin
IR
UV
Resultados

Masa de la muestra = 0,182g
Punto de Fusin =
Pureza Anhdrido Ftlico = 98,0%
Pureza Resorcinol = 98,0%

- Reactivo lmite









Reactivo lmite

- Masa de la Fluorescena

2 moles Resorcinol 1 mol Fluorescena






0,2197 g Resorcinol x


= 0,3315 g Fluorescena






IR

1 muestra + 10 mL HCl 1.0 M
Fluorescena
1 muestra + 10 mL HCl 1.0 M
Fluorescena
1 muestra + 10 mL HCl 1.0 M
Fluorescena
1 muestra + 10 mL HCl 1.0 M
Fluorescena


Anlisis IR

3300 - 3100 Tensin de enlace en alquenos
1725 Cetonas
1600 Compuestos Aromticos
1325 - 1100 Presencia de Alcoholes y teres

Espectro UV



Espectros UV-Visible de Fluorescena en solucin bsica, neutra y cida

Observaciones

El resorcinol es un slido granulado de color beige y al adicionarle el anhdrido ftlico que
esta como lminas slidas de color blanco en un mortero, al triturar estos dos compuestos
se traspasa a un tubo de ensayo y se agrega una gota de cido sulfrico se forma una
mezcla que tom un color rojizo al calentarlo en un bao de H
2
SO
4
en una campana de
extraccin. Debido a la presencia en la mezcla de formas slidas se procedi al
calentamiento para lograr fundir y formar una solucin durante 30min. Se filtra el slido a
vaco sobre un papel previamente pesado y se lava con un poco de agua. El precipitado
se seca y pesa para calcular el rendimiento de la reaccin y el lquido del filtrado que
queda se pone a la luz UV donde este lquido queda fluorescente, cuando se filtr el
precipitado qued de color rojo.

Cuando estbamos lavando el material, se observan una coloracin amarillo-verde
fluorescente, y para comprobar que el material usado ya no haba restos de fluorescena
adicionamos NaOH en algunas ocasiones observamos la misma coloracin. En la mesa
de trabajo si se pasaba la lmpara de luz UV tambin se observa el mismo color en las
zonas donde se haba derramado lo que estbamos filtrando.

Se sacaron tres porciones de 10mL del lquido de filtrado que este acta como indicador
en 3 beaker y se le agrega HCl, NaOH y H
2
O a cada beaker y da lo siguiente:

Muestra Fluorescena + NaOH Disminuye la fluorescencia
Muestra Fluorescena + HCl Aumenta fuertemente la fluorescencia
Muestra Fluorescena + H
2
O Aumenta la fluorescencia un poco

Conclusiones

Se conoci y se puso a prueba un sencillo mtodo para la obtencin del colorante, se
realiz satisfactoriamente.

Adems, la fluorescena tambin puede emplearse como indicador cido base, ya que
como se mencion, el color depende del pH. Tal diferencia es ms evidente si se
analizaron espectros de absorcin respectivos en la regin del ultravioleta visible.

Cuestionario

1. Consulte la estructura de al menos otros dos pigmentos fluorescentes.

Quinina: la quinina tiene fluorescencia por produccin quntum, lo que genera un efecto
luminoso cuando es vista bajo la luz ultravioleta. La "produccin quntum" mide qu tan
eficientemente la luz absorbida crea un efecto ptico. Una sustancia como la quinina se
vuelve fluorescente cuando los fotones de la luz absorbida liberan fotones en otra longitud
de onda. Cuando los fotones estn bajo la luz en el rango ultravioleta y las emisiones
activadas en el rango visible, la sustancia brillar bajo la luz negra. Incluso en cantidades
pequeas, la quinina tiene estas propiedades pticas. Las mezclas que contienen quinina,
incluyendo el agua tnica, emiten fotones visibles cuando se colocan bajo la luz
ultravioleta, creando un efecto de luz azul verdosa.



Fluoreno: es un hidrocarburo aromtico policclico. Forma cristales blancos que
presentan una caracterstica, olor aromtico similar al de la naftalina. Tiene un color
violeta de fluorescencia, de ah su nombre.


2. Por qu es diferente el color de la disolucin de fluorescena en medio cido, bsico y
neutro? Qu cambios estructurales se producen en la molcula a consecuencia del
medio cido o bsico?

El cambio de color de la fluorescena cambia en medio acido, bsico y neutro debido a
que uno de los factores que afecta la fluorescencia en una sustancia es el cambio de pH.
La presencia de grupos donadores de electrones, como -NH2 y -OH favorece la
fluorescencia, puesto que aumentan la probabilidad de transicin entre el estado singulete
de menor energa vibracional y el estado fundamental.

La introduccin de un tomo de nmero atmico elevado en un sistema de electrones
suele aumentar la fosforescencia, en detrimento de la fluorescencia. Los grupos aceptores
de electrones, como -COOH, -NO
2
, -N=N- y X disminuyen y, en ocasiones inhiben la
fluorescencia.

- Como cambia la estructura

Influencia del pH: el espectro de fluorescencia de muchos compuestos aromticos
conteniendo grupos funcionales cidos o bsicos es sensible al pH. Los cambios en la
emisin de los compuestos de este tipo provienen del nmero de especies resonantes
diferentes que estn asociadas con las formas cidas o bsicas de las molculas. As, por
ejemplo, la anilina, en medio neutro y alcalino presenta fluorescencia en la regin visible,
pero dicha fluorescencia desaparece en medio cido.

Otro cambio se da al reaccionar la fluorescena con NaOH produce un nuevo compuesto
llamado uranina intensificando la fluorescencia de color amarillo verdoso.


3. Investigue qu es un espectro de absorcin y uno de emisin

Espectro de absorcin: se presenta cuando un slido incandescente se encuentra
rodeado por un gas ms frio, el espectro resultante muestra un fondo interrumpido por
espacios oscuros denominados lneas de absorcin, porque el gas ha absorbido de la luz
aquellos colores que ste irradia por s mismo. Suele ocurrir que unos cuerpo absorben
slo la radiacin de unas determinadas longitudes de onda y no aceptan absorber otras
de otras longitudes, por lo que cada cuerpo, cada elemento qumico en la prctica, tiene
su propio espectro de absorcin, el cual se corresponde con su espectro de emisin, al
igual como si fuera el negativo con el positivo de una pelcula. En la naturaleza se da
tambin que otros cuerpos absorben radiacin de otros cuerpos dejando rayas negras.

Espectro de emisin: mediante suministro de energa calorfica, se estimula un
determinado elemento en su fase gaseosa, sus tomos emiten radiacin en ciertas
frecuencias del visible, que constituyen su espectro de emisin. Ninguno de estos se
repite. Por ejemplo, algunos de ellos lo hacen en el infrarrojo y otros cuerpos no. Ello
depende de la constitucin especfica de cada cuerpo, ya que cada uno de los elementos
qumicos tiene su propio espectro de emisin.

4. En qu difiere el color de las disoluciones observadas a simple vista de aquellas
observadas bajo luz ultravioleta? Cmo se nombra tal propiedad de las sustancias?

La fluorescena en medio acido es de color amarillo con fluorescencia baja, en medio
bsico posee un color verde con fluorescencia muy intensa y finalmente en medio neutro
es amarillo verdoso con fluorescencia media. La propiedad en donde cambia el color es la
fluorescencia que es un tipo particular de luminiscencia, que caracteriza a las sustancias
que son capaces de absorber energa en forma de radiaciones electromagnticas y luego
emitir parte de esa energa en forma de radiacin electromagntica de longitud de onda
diferente.

5. Observando los espectros UV-Vis obtenidos, en qu difieren? Tal diferencia es
observable a simple vista?

Estos difieren en la irradiacin con la radiacin electromagntica del intervalo que va de
300nm a 800nm. Los espectros obtenidos son una grfica de las longitudes de onda que
la molcula absorbe, pero el color que observamos es en realidad la combinacin de
aquellas longitudes de onda que la molcula nos devuelve. La radiacin absorbida por la
molcula le provoca una transicin electrnica, que es un cambio en forma por la
molcula y tamao de su nube de electrones. Posteriormente la molcula regresa a su
estado inicial, o basal, disipando la energa recibida, vibrando, rotando deformndose o
emitiendo luz, este ltimo fenmeno permite obtener los espectros de emisin de la
molcula.

Los espectros UV-Vis obtenidos son:


La diferencia en estos espectros ultravioletas visibles son las ondas generadas por las
longitudes de onda causadas por la excitacin electrnica por los rayos UV con respecto a
las emisiones de calor del compuesto.



Bibliografa

Morrison R. T; Boyd R. N. (1998). Qumica Orgnica. 5 Ed. Pearson Addison Wesley.
Mxico. pp 686/688, 709.

http://es.scribd.com/doc/3386346/Sintesis-de-fluoresceina

Vollhardt K; Schore N. (2005). Qumica Orgnica, estructura y funcin. 3 ed. Omega.
Espaa. pp 511-513.

Wade L. (1993). Qumica Orgnica. 2 ed. Prentice Hall. Mxico. Pag 818, 819.