1

Metodologa para la estimacin del coeficiente de particin de

bacterias coliformes en cuerpos de agua superficiales



scar Roberto Daz Duque




Proyecto de grado en Ingeniera Ambiental




Director
Luis Alejandro Camacho





Universidad de los Andes
Facultad de Ingeniera
Departamento de ingeniera civil y ambiental






Bogot D.C
2013
2

Contenido

Captulo 1: Introduccin .......................................................................................... 3
Aspectos Generales ............................................................................................ 3
Pregunta de investigacin .................................................................................... 5
Justificacin ......................................................................................................... 6
Metodologa ......................................................................................................... 7
Resultados Principales ........................................................................................ 8
Resumen de contenido ...................................................................................... 10
Captulo 2: Revisin del estado del arte ................................................................ 11
Organismos indicadores .................................................................................... 11
Decaimiento de bacterias coliformes en aguas superficiales............................. 12
Descripcin detallada decaimiento por sedimentacin .................................. 14
Proyecto de grado Mara Gamboa ..................................................................... 16
Factores que influyen en las tasas de decaimiento de bacterias coliformes .. 16
Modelos para la aplicacin de Kd .................................................................. 17
Captulo 3. Procedimiento experimental propuesto para la estimacin del
coeficiente de particin .......................................................................................... 20
Toma de muestras ............................................................................................. 21
Procedimiento de laboratorio ............................................................................. 23
Captulo 4. Aplicacin de la metodologa en el ro Bogot .................................... 25
Sitios de medicin .............................................................................................. 25
Detalles de medicin ......................................................................................... 31
Captulo 5. Resultados .......................................................................................... 34
Captulo 6. Conclusiones y Recomendaciones ..................................................... 39
Conclusiones ..................................................................................................... 39
Recomendaciones ............................................................................................. 40
Bibliografa ............................................................................................................ 41






3

Captulo 1: Introduccin
Aspectos Generales

En la actualidad, el agua es uno de los recursos ms preciados por el ser humano.
Existen 1386 millones de km
3
sobre toda la tierra pero la gran mayora se
encuentra en los ocanos. El 97.5% del total es salada, mientras que slo el 2.5%
restante es agua dulce, y de este ltimo, est disponible para su uso slo cerca
del 30%, pues el resto se encuentra en glaciares en forma de hielo o nieve.
(Comisin Nacional del Agua, 2011). La cantidad de agua necesitada para el uso
humano proyectada a 50 aos, ser mayor a la cantidad existente. Ya en el da de
hoy existe un dficit, pues una de las principales causas de muerte en la sociedad
est relacionada con la falta de acceso a agua potable. Actualmente, ms de 1100
millones de personas no tienen acceso a agua consumible, lo que hace que se
presenten ms de 250 millones de casos de enfermedades relacionadas con el
agua y cerca de 5-10 x 10
6
muertes cada ao (Ecological Society of America).

Adems de la limitacin de este recurso en el planeta, es conocido que la
poblacin mundial est en ascenso, y por lo tanto la demanda de agua requerida
para satisfacer a toda la humanidad tambin lo est. El problema yace en que el
abastecimiento de agua es limitado, y el requerimiento de la misma es cada vez
mayor. Gracias a este recurso, es posible tanto nuestra existencia como nuestra
subsistencia y, aunque dependemos de ella, continuamos contaminando sin
medida sus cauces alrededor de todo el planeta. Asimismo, aunque tenemos el
conocimiento de la escasez, an no se han tomado las medidas regulatorias
necesarias para poder emplear este recurso de forma sostenible.

Colombia tiene la fortuna de tener una hidrografa abundante y pese a que las
normas para la calidad del agua en aguas superficiales ya estn rigiendo, una
gran cantidad de estos cuerpos de agua contina siendo deteriorado sin el
cumplimiento de los estndares. Fuentes antropognicas, a travs de vertimientos,
afectan no slo la calidad del agua, sino tambin la cantidad de agua disponible
para la utilizacin, adems del incremento de los costos asociados a la
potabilizacin de la misma.

El objetivo de la potabilizacin es restaurar y rehabilitar el agua de los cauces con
el fin de que la porcin de ella que es llevada a travs de las redes de acueducto a
4

los consumidores, sea apta para su consumo. Pero el agua tiene diferentes usos,
por ejemplo, puede ser consumida, o puede ser utilizada para riego en
plantaciones. En las dos opciones anteriores, el requerimiento del nivel de calidad
del agua es distinto. Evidentemente, el agua para consumo humano debe tener un
mayor grado de control y debe cumplir con niveles ms estrictos de regulacin,
pues su contacto es directo con el ser humano. De esta manera, las plantas de
tratamiento de agua potable y de aguas residuales, deben llevar a cabo procesos
que aseguren que la calidad del agua aguas abajo, est por debajo de los lmites
establecidos dependiendo de la actividad a la que ser destinada.

En la modelacin de la calidad del agua, a partir de mtodos numricos, y del
conocimiento de la qumica y fsica del lquido desarrollado a travs de la historia,
es posible hacer simulaciones que representan las condiciones reales de los
cuerpos de agua. La comprensin de la calidad del agua en aguas superficiales es
una herramienta muy til, ya que permite de cierta manera conocer con buena
exactitud las caractersticas del fluido en cualquier segmento de su extensin. Al
modelar la calidad del agua de un ro, se puede obtener un conocimiento del
estado actual, las afectaciones por vertimientos, y las acciones que deben ser
tomadas con el fin de recuperar el recurso. Todos los proyectos que requieran de
la utilizacin del recurso hdrico natural, ya sea para extraer o para verter,
necesitan de una caracterizacin de los cuerpos de agua que se utilizarn y la
medida en que estos se vern modificados o afectados.

Con el fin de realizar simulaciones, se deben tener modelos hidrolgicos e
hidrulicos y de calidad del agua que representen el comportamiento real de un
cauce en una zona dada; se deben tener en cuenta los cambios dinmicos en las
diferentes variables y as, establecer una aproximacin a la forma de proceder del
cauce. En estos, es necesario determinar algunos parmetros que permiten al
modelador llevar a cabo los respectivos clculos. Estos parmetros son
principalmente coeficientes que representan cuantitativamente un proceso fsico o
qumico de algn atributo del agua. Una gran cantidad de los coeficientes
simbolizan el decaimiento natural que sufren determinantes del agua a medida
que avanzan tanto en el espacio como en el tiempo. En la medida en que mejor
sean establecidos estos parmetros, mejor ser la estimacin realizada por la
simulacin.

5

Un determinante muy importante con respecto a la calidad del agua son los
microorganismos existentes en los ros. Comnmente las bacterias coliformes
totales y fecales son utilizadas como organismo indicador con el fin de determinar
los niveles permisibles de contaminacin y su cumplimiento. Estas bacterias estn
presentes en el agua y en los slidos suspendidos en ella, es decir en los
sedimentos. Por otro lado, los ros tienen la capacidad de autodepuracin. Esto
quiere decir que pueden mejorar la calidad del agua en la medida en que el agua
avanza, pues gracias a procesos naturales como la mortalidad, la radiacin solar y
la sedimentacin, las bacterias tienden a decrecer en su nmero a medida que
aumenta el tiempo de viaje.

Este trabajo centrar su atencin en el proceso asociado al decaimiento del
nmero de bacterias en los ros a partir de la sedimentacin, a la adsorcin o
capacidad que tienen los slidos suspendidos de atrapar bacterias libres en el
agua, realizando de esta manera una purificacin natural del sistema. Este es uno
de los parmetros que los modelos de calidad del agua requieren para poder
realizar estimaciones acerca del destino y transformacin de bacterias coliformes
en los ros. El coeficiente de particin (Kd) representa aquella tendencia de las
bacterias a unirse a partculas slidas, lo cual est asociado al decaimiento de las
mismas en el agua y depende nicamente de la relacin entre la cantidad de
bacterias que se encuentran impregnadas en los sedimentos con respecto a
aquellas libres en el agua, y la respectiva concentracin de slidos suspendidos.

Pregunta de investigacin

El coeficiente de particin es un parmetro muy importante en un modelo de
calidad del agua porque influye en gran medida en el comportamiento que tienen
las bacterias en el tiempo. Realizar una buena estimacin de este parmetro
significa representar la cantidad de bacterias existentes en los ros y su
decaimiento correctamente. Por esto, es necesaria una metodologa que permita
la estimacin experimental de Kd en aguas superficiales, en donde ser posible
realizar una cuantificacin del mismo, aprovechando que su evaluacin depende
nicamente de atributos que son medibles en el laboratorio.

El objetivo del presente trabajo es proponer una metodologa que permita
determinar el Kd en aguas superficiales. Esta metodologa fue desarrollada a partir
6

de la investigacin de la teora involucrada en los procesos de sedimentacin y
con la informacin existente acerca de la estimacin experimental de este
coeficiente en diferentes tipos de cuerpos de agua. A partir de ensayos en ros, el
procedimiento ser puesto a prueba a fin de comprobar la efectividad del mismo,
ya que existe una gran incertidumbre en las variables que se utilizan. De esta
manera, se espera poder realizar una estandarizacin del procedimiento que sea
reconocido cientficamente y pueda ser utilizado posteriormente en estudios de
modelacin de la calidad del agua en cuerpos de agua superficiales.

Justificacin

En el ao 2008 Mara Gamboa realiz su proyecto de grado en la Universidad
Nacional de Colombia asesorada por el profesor Luis Alejandro Camacho. En su
trabajo se propone una metodologa para la estimacin experimental del
coeficiente de particin de bacterias coliformes en agua y sedimentos de ros. Sin
embargo, los resultados obtenidos no fueron satisfactorios ya que en los ensayos
realizados no se obtuvo una estimacin correcta de Kd. A pesar de lo anterior, el
proyecto de grado aborda la teora necesaria para establecer en cierta medida el
estado del arte en este tema. As, en este proyecto, se pretende continuar con la
indagacin de la metodologa correcta para estimar la realidad del decaimiento de
bacterias coliformes en lo concerniente a la sedimentacin.

De esta manera, basndose principalmente en el trabajo de Mara Gamboa, se
encuentra que no existe actualmente, un procedimiento que permita la
identificacin de este parmetro en aguas superficiales. Los estudios son
insuficientes para entender el efecto de la adsorcin de microorganismos a los
sedimentos. En la literatura, slo se puede encontrar como se realizan pruebas en
aguas subterrneas o en dispersin de contaminantes que no son directamente
aplicables para bacterias coliformes en cuerpos de agua superficiales. Adems,
por falta de conocimiento del proceso de autopurificacin, es posible encontrar
que, en el pasado, en estudios de modelacin de agua, el Kd se mantiene como
una variable a calibrar. Es decir que no se ha profundizado en este tema, lo cual
puede llegar a significar una falencia en la modelacin, pues al mantenerlo como
un valor que se debe graduar dependiendo de mediciones de bacterias coliformes
totales en distintos puntos discretos, puede que no se establezca de manera
correcta el decaimiento de bacterias coliformes y se llegue a resultados que se
7

alejan de las condiciones reales existentes. Obtener el coeficiente de particin, a
partir de ensayos experimentales, permite un anlisis ms exacto de los procesos
que ocurren en la realidad y hace que se tenga un mejor entendimiento de las
interacciones que ocurren entre las bacterias coliformes, el agua, los sedimentos y
el ambiente que los rodea (Gamboa Medina, 2008).

Al desarrollar una metodologa que estime el coeficiente de particin en aguas
superficiales, se contribuye a que cada vez se emplee la modelacin
computacional de mejor forma, pues las estimaciones se realizarn no slo con
mayor exactitud, sino que contarn tambin con una mayor base terica. Esta
teora se refiere a que la determinacin del fenmeno de decaimiento se llev a
cabo por medio de procesos fsicos y qumicos. As, en estudios futuros la
evaluacin de la cantidad de bacterias coliformes ser mejor representada, lo cual
denota un aporte significativo a la modelacin ambiental y a la salud pblica en s,
puesto que caracterizar acertadamente estos procesos, ayuda a la sociedad a
tomar mejores medidas de utilizacin y potabilizacin del agua que beneficien a la
poblacin, por medio de la reduccin de la incertidumbre en los modelos.

Metodologa

La metodologa para estandarizar el procedimiento para la estimacin del
coeficiente de particin de bacterias coliformes en aguas superficiales se divide en
dos componentes. El primero, es la metodologa desarrollada en s para la
estimacin de Kd y el segundo, su aplicacin en cuerpos de agua que permita
comprobar su efectividad.

En cuanto a la metodologa propuesta, la identificacin del coeficiente de particin
depende principalmente de tres atributos: la concentracin de slidos suspendidos
totales, la cantidad de bacterias que se encuentran libres en el agua y la cantidad
de bacterias contenidas en los slidos suspendidos. De esta manera se requiere
tomar dos muestras de agua distintas en el cauce, una para los slidos
suspendidos y una para los coliformes totales. Luego de trasladar al laboratorio las
muestras, la metodologa para la determinacin de los slidos suspendidos fue la
estndar y es aplicada a la muestra original de agua, sin ninguna modificacin,
con el fin de cuantificar los slidos suspendidos totales. Por otro lado, el
procedimiento escogido para la determinacin de las bacterias coliformes totales
8

fue el de filtracin por membrana. Pero esta prueba, adems de hacerse
directamente a la muestra de agua obtenida en el cauce, tambin se realizar
independientemente a los dos componentes del agua.

Para lo anterior, primero es necesario a travs de una mquina centrifuga, separar
los slidos suspendidos del agua. Luego, con los componentes separados en
recipientes distintos, a aquel que contiene los sedimentos, se agrega una solucin
acuosa que tenga la capacidad de atrapar las bacterias existentes en los mismos.
Posteriormente, por medio de la metodologa de filtracin por membrana, se
realizan pruebas de coliformes totales, tanto al agua centrifugada sin slidos
suspendidos, como a la solucin acuosa agregada a los sedimentos y de esta
manera encontrar la cantidad de bacterias coliformes libres en el agua y la
cantidad de bacterias atrapadas en los sedimentos. Ya con los tres atributos
mencionados previamente, cuantificados, es posible determinar el coeficiente de
particin de bacterias coliformes en cuerpos de agua superficiales por medio de
una operacin matemtica simple.

Teniendo la metodologa definida se procedi a verificar su validez. Se realizaron
dos campaas a la cuenca alta del ro Bogot, y en cada una dos sitios de
medicin: en Puente Vargas y en el Puente del Comn. En ambos lugares se llev
el equipo necesario para tomar los determinantes principales del agua:
temperatura, Ph, conductividad, y oxgeno disuelto. Tambin se llevaron
recipientes para la toma de muestras de coliformes totales y slidos suspendidos
totales. Para la toma de las muestras de agua, se utiliz un muestreador especial
que logra alcanzar la mxima profundidad del ro y de esta forma, tomar muestras
representativas de toda la seccin transversal. A continuacin, se trasladaron las
muestras al laboratorio de la Universidad de los Andes en donde se procedi a
aplicar la metodologa propuesta, descrita previamente.

Resultados Principales

En este trabajo la calidad de los resultados obtenidos se puede analizar en dos
elementos distintos. El primero es evaluar si los coliformes totales encontrados en
el agua, son efectivamente bien separados en la centrifugacin, y la suma de los
coliformes encontrados en el agua sin slidos suspendidos con los encontrados en
los sedimentos representa la totalidad de estos. Por otro lado, el segundo
9

elemento es la estimacin de Kd en s, y la respectiva comparacin entre los
valores encontrados en las dos campaas realizadas, adems de su similitud con
valores reportados en la literatura, de este coeficiente, en dispersin de
contaminantes.

Al aplicar la metodologa propuesta, se logr estimar el coeficiente de particin en
ambos sitios de medicin en ambas campaas. Es importante mencionar que los
resultados obtenidos en cuanto a los coliformes totales en las dos diferentes
campaas, es decir en diferentes das de medicin, varan significativamente. En
la primera campaa se encontraron valores entre 550000 y 650000 UFC/100ml en
ambos sitios y en la segunda un rango de valores entre 150000 y 250000
UFC/100ml, tambin en ambos lugares. Se podra establecer que la causa de esto
es que en los determinantes del agua medidos (temperatura, conductividad,
oxgeno disuelto, Ph) en las distintas campaas, se encontraron diferencias
marcadas. Es decir, las condiciones de medicin fueron distintas. Lo
recomendable habra sido que las caractersticas fueran similares con el fin de
poderlas comparar con un mayor grado de profundidad. Tambin puede que estas
discrepancias se dieran debido al tiempo transcurrido desde la toma de muestra
hasta la realizacin de las pruebas de coliformes totales.

Al realizar la comparacin de las pruebas de coliformes totales realizadas al agua
del ro con aquellas realizadas al agua centrifugada y a sus respectivos
sedimentos, se pudo encontrar que, en general, la divisin de bacterias coliformes
ocurre adecuadamente. De las cuatro muestras de agua recogidas, en dos se
encontr una diferencia dentro del 10% del valor de coliformes totales en el agua
original, una dentro del 20% y otra, muy alejada, con el 45%. Aunque estos
porcentajes de error luzcan aparentemente de gran magnitud, se recuerda que la
incertidumbre que tienen las pruebas asociadas a bacterias coliformes es muy alta
y depende de la probabilidad de que los 100ml de muestra a los que se le realizan
las pruebas de filtracin por membrana, representen en buena medida la totalidad
de la muestra. De hecho, los diferentes porcentajes de error obtenidos, muestran
la dificultad e incertidumbre que est asociada a este tipo de ensayos y muestra la
necesidad de realizar procedimientos evitando al mximo la contaminacin
externa de las muestras de agua.

Por otro lado, en cuanto a la estimacin del coeficiente de particin, se
encontraron valores entre 0.15-0.2 m
3
/g los cuales representan una adsorcin
10

mayor con respecto a diferentes tipos de qumicos como metales pesados.
Diferenciando entre los dos sitios de medicin, se encontr que para el sitio 1
(Puente Vargas) se tienen valores de 0.158 m
3
/g en la primera campaa y 0.161
m
3
/g en la segunda campaa lo cual representa una variacin del 1.41% y para el
sitio 2 (Puente del Comn) valores de 0.182 m
3
/g y 0.197 m
3
/g lo cual tiene una
diferencia del 8.19%. Esto indica que, aunque la estimacin del coeficiente se
realiz en diferentes das y en condiciones cambiantes, se encontraron valores
que fueron relativamente similares entre s, lo que comprueba que la metodologa
propuesta tiene en trminos generales buena efectividad y justifica su aplicacin
para realizar la estimacin experimental del coeficiente de particin en aguas
superficiales.

Resumen de contenido

El presente trabajo est divido en 6 captulos que permiten obtener una
comprensin total del proyecto realizado. Se abarca toda la informacin necesaria
para poder entender completamente el propsito de este y su entendimiento.

En el captulo 1 se puede encontrar una introduccin del trabajo. Los aspectos
generales a tener en cuenta, los objetivos de la investigacin y su respectiva
justificacin. Adems se presenta brevemente la metodologa para realizar la
estimacin de Kd y su aplicacin en el ro Bogot. Se muestran los principales
resultados obtenidos y algunas conclusiones pertinentes.

En el captulo 2 se busca realizar una revisin del estado del arte del coeficiente
de particin de bacterias coliformes. Se realiza una descripcin detallada de los
procesos que afectan el decaimiento de bacterias y se muestran las ecuaciones
relacionadas a su cuantificacin. Tambin se presenta la informacin pertinente en
el trabajo de Mara Gamboa, como aquellos modelos utilizados para realizar
estimaciones de la dinmica de las bacterias y su adsorcin a los sedimentos.

La metodologa propuesta para la estimacin del coeficiente de particin en
cuerpos de agua superficial se presenta en el captulo 3. Se realiza una
descripcin detallada desde el momento de la escogencia del sitio de medicin y
la toma de muestras, hasta los procedimientos desarrollados en el laboratorio.

11

El captulo 4 muestra la aplicacin de la metodologa propuesta al caso de estudio
del ro Bogot. Se realiza una descripcin del tramo comprendido entre Puente
Vargas y el Puente del Comn, y una caracterizacin de los sitios de medicin.

Los resultados obtenidos en la aplicacin de la metodologa se presentan en el
captulo 5. Se muestra la efectividad de la metodologa por medio de la obtencin
del coeficiente de particin y la adecuada separacin de la cantidad de bacterias
presentes en los sedimentos de aquellas en el agua sin slidos.

Por ltimo en el captulo 6 se realiza una terminacin del trabajo identificando las
principales conclusiones y recomendaciones obtenidas.
Captulo 2: Revisin del estado del arte

Antes de mencionar y aplicar la metodologa propuesta para la estimacin de Kd,
es importante efectuar una revisin a la teora en la que se basa este
procedimiento. Se realizar la definicin y descripcin del coeficiente de
distribucin de bacterias coliformes a partir de los procesos que influyen en el
decaimiento total de los organismos indicadores utilizados. Tambin, como este
trabajo constituye una continuacin de la investigacin hecha por Mara Gamboa
acerca de la estimacin de Kd, se mostrar la informacin presentada en ese
proyecto que resulta pertinente para el desarrollo del presente trabajo. A partir de
lo anterior se efecta una revisin de las siguientes temticas: factores que
influyen en el decaimiento y modelos que permiten la utilizacin del coeficiente de
particin para realizar estimaciones de la cantidad de bacterias coliformes.
Organismos indicadores

Durante las ltimas dcadas con el fin de poder realizar una cuantificacin del
nivel de contaminacin existente y permisible en cuerpos de agua, se han utilizado
lo que se denomina organismos indicadores. Estos organismos permiten
evidenciar la presencia de patgenos en el agua, ya que al determinar la cantidad
de organismos indicadores, se infiere la presencia en menor cantidad, de
microorganismos perjudcales para la salud humana. Los organismos indicadores
deben cumplir con ciertas caractersticas que aseguren la anterior condicin. Estas
son principalmente: mayor presencia que organismos patgenos, existencia
12

elevada en residuos fecales, facilidad de deteccin en mtodos de laboratorio,
mayor supervivencia y resistencia que organismos patgenos, y renuencia a la
inhibicin del crecimiento por otras especies (Gamboa Medina, 2008).

Los principales organismos indicadores utilizados son las bacterias coliformes
totales (CT) y las bacterias coliformes fecales (CF). Los coliformes totales ests
compuestos por aquellos que tienen un efecto perjudicial en el ser humano
(patgenas) y por aquellas que no representan un peligro para la salud, inclusive
en los coliformes fecales, existen bacterias que no tienen efectos nocivos. Por esto
es posible establecer que si la cantidad de CT que se encuentran en un cuerpo de
agua se encuentra dentro de los niveles permitidos por las agencias reguladoras,
tambin lo har la cantidad de bacterias patgenas. Es importante mencionar que
existen excepciones, y hay una reducida probabilidad de que la ausencia de CT
represente la inexistencia total de organismos patgenos. En cuanto a los CF, el
indicador ms utilizado es la Escherichia coli (E. coli) pues esta representa con
gran certeza la presencia de organismos provenientes de origen fecal.

Decaimiento de bacterias coliformes en aguas superficiales

El descenso de organismos coliformes en cuerpos de agua puede ser
representada por una tasa de decaimiento total (Kb) que est compuesta por tres
elementos: el decrecimiento asociado a la mortalidad natural y a la salinidad (Kb
1
),
el decaimiento asociado al efecto de la luz y la radicacin (Kb
i
) y la tasa asociada
al detrimento de coliformes debidos a la sedimentacin (kb
s
). As la tasa total de
decaimiento se puede representar por medio de la siguiente frmula (Chapra,
1997):

(1)

donde Kb = tasa total de decaimiento (d
-1
)
Kb
1
= tasa decaimiento por mortalidad y salinidad (d
-1
)
Kbi = tasa de decaimiento por radiacin solar (d
-1
)
Kbs = tasa de decaimiento por sedimentacin (d
-1
)

A continuacin se realizar la descripcin individual de cada uno de los
componentes de la ecuacin 1 y su forma de cuantificacin.

13

La tasa de decaimiento por mortalidad y salinidad est se puede calcular a partir
de la siguiente ecuacin suponiendo que la salinidad del agua de mar es
aproximadamente 30-35 ppt (Thomann & Mueller, 1987) (Mancini, 1978):

( )

(2)

donde S = salinidad (ppt o g/L)
T = temperatura (C)

En cuanto a la radiacin solar, la tasa decremento de bacterias puede ser
cuantificada a partir de la siguiente expresin (Thomann & Mueller, 1987) (Chapra,
1997):

) (3)

donde = constante de proporcionalidad (generalmente =1)

= energa de luz en la superficie por unidad de tiempo (ly/hr)

Ke = coeficiente de extincin de luz (m
-1
)
H = profundidad cuerpo agua superficial (m)

En la anterior expresin el coeficiente de extincin de luz se puede estimar a partir
de una de las dos siguientes maneras (Di Toro, OConnor, Thomann, & St. John,
1981):

() ()

donde SD = disco secchi (m)
m = concentracin slidos suspendidos (mg/L)

Antes de presentar la ecuacin que representa el decaimiento asociado a la
sedimentacin, se realizar un anlisis detallado del mismo, pues este parmetro
es el que se pretende estimar a partir de este trabajo.

14

Descripcin detallada decaimiento por sedimentacin

Primero se debe establecer que la cantidad total de bacterias presentes en el agua
se pueden dividir en dos componentes: la cantidad total de bacterias libres en el
agua y la porcin de ellas unidas a las partculas slidas (Chapra, 1997).

(6)

Donde N = cantidad total de bacterias (nmero/100ml)
N
w
= cantidad de bacterias libres en el agua (nmero/100ml)
N
p
= cantidad de bacterias atrapadas en los slidos suspendidos (nmero/100ml)

Continuando con la descripcin de los elementos, Np puede ser representado de
la siguiente manera (Chapra, 1997):

(7)

Donde r = concentracin especfica de bacterias por unidad de masa (nmero/g)
La constante 10
-4
se incluye para cancelar las unidades de masa y dejar las unidades de
Np sobre 100 ml.

La siguiente variable a representar es el coeficiente de particin (Kd) que es
aquella tendencia que tienen las bacterias a estar unidas a las partculas slidas.
Es una tasa que depende principalmente de la relacin de la cantidad de bacterias
presentes en los sedimentos con respecto a aquellas libres en el agua. (Chapra,
1997)

(8)

Donde Kd = coeficiente de particin de bacterias (m
3
/g)

A partir de las ecuaciones 7 y 8, se puede encontrar una expresin para el Kd que
depende de atributos medibles en el laboratorio a partir de procedimientos
estandarizados. La frmula indicada es la siguiente:

15

(9)

Est ltima ecuacin mostrada ser la utilizada para estimar el coeficiente de
particin a partir de la metodologa propuesta.

Anlogamente se presenta la ecuacin de Kd, que tambin puede ser entendido
como: la relacin existente entre la concentracin de bacterias coliformes
atrapadas en los sedimentos, y la concentracin de dichas bacterias que quedan
libres en el agua, en la siguiente expresin (Gamboa Medina, 2008):



(

(10)
Por ltimo es importante mostrar que a partir de Kd, se pueden establecer tanto la
fraccin de bacterias unidas a los sedimentos como la fraccin de ellas libres en el
agua. Esto se demuestra en las dos siguientes ecuaciones (Chapra, 1997):

(11)


(12)

Donde Fw = fraccin de bacterias libres en el agua
Fp = fraccin de bacterias en los slidos suspendidos

Estas fracciones pueden ser mejor entendidas a partir de las siguientes
expresiones que las relacionan con la cantidad total de las bacterias presentes en
el agua (Chapra, 1997):

(13)

(14)

Teniendo el decaimiento de bacterias por sedimentacin caracterizado, y
retomando la descripcin del decaimiento total de bacterias en las pginas 12 y
13, se presenta la cuantificacin del trmino de la tasa de decrecimiento de
bacterias asociadas a la sedimentacin (Chapra, 1997):
16

(15)

Donde Vs = velocidad de sedimentacin de las partculas (m/da)

As, teniendo descrito cada uno de los componentes que estn asociados al
decaimiento total de bacterias, se desarrolla con mayor profundidad la ecuacin 1
obteniendo la siguiente ecuacin final (Chapra, 1997):

( )

(16)

Proyecto de grado Mara Gamboa

Factores que influyen en las tasas de decaimiento de bacterias
coliformes

Previamente fue enunciado que la tasa de decaimiento de bacterias depende
nicamente de tres factores: la mortalidad natural de las bacterias, la influencia de
la luz solar por medio de la radiacin y los efectos causados por la sedimentacin.
Pero esto no representa en su totalidad la complejidad que est asociada a este
tema. Una gran cantidad de determinantes y reacciones tambin modificarn tanto
la magnitud total de la cantidad de bacterias coliformes presentes en un cuerpo de
agua, como su respectivo decrecimiento o crecimiento. Estos factores se pueden
clasificar en tres categoras distintas: fsicos, fisicoqumicos y bioqumicos-
biolgicos.

En la categora de factores fsicos las caractersticas que se asocian a la dinmica
de las bacterias presentes en cuerpos de agua natural son: temperatura,
adsorcin, sedimentacin, resuspensin, floculacin, coagulacin, y la foto-
oxidacin. En general para este proyecto, estos factores son los que tienen mayor
importancia e influyen en mayor medida en el funcionamiento de los
microorganismos en el tiempo y en el espacio. Esto sin olvidar que tambin
existen las otras dos categoras que incrementan la incertidumbre que se tiene en
17

esta temtica y los resultados que se obtengan representan solamente una
estimacin de la realidad y no lo que ocurre perfectamente en ella.

La segunda categora es aquella con los factores fisicoqumicos. En esta se
encuentran los determinantes: Ph, efectos osmticos, toxicidad qumica, y
potencial redox. En el presente trabajo se realiz la medicin del Ph y se tendr en
cuenta como un determinante que modifica la cantidad de bacterias aunque este
no sea un factor fsico. Por ltimo en la tercera categora se encuentran los
agentes bioqumicos-biolgicos que son transigentes en la modelacin de las
bacterias coliformes. Estos son: los niveles de nutrientes, y la presencia de
sustancias orgnicas, organismos predadores, bacterifagos, virus, algas, y
materia fecal. Aunque en esta ltima categora haya determinantes importantes,
su medicin es de elevada dificultad y se sale del alcance de este proyecto. Sin
embargo se tendr una cuantificacin de la materia fecal a partir de la bacteria
E.coli (Bowie et al, 1985).

Es importante mencionar ninguno de los determinantes del agua mencionados en
las tres categoras, es independiente. Todos los factores que influencian la
cantidad de organismos dependen en cierta medida de los otros y se ven
influenciados por su comportamiento. Esto implica dos cosas, la primera es que la
complejidad y variabilidad es muy alta, lo cual representa una incertidumbre
significativa cuando se trabaja con microorganismos y lo anterior justifica la
segunda, que realizar una simplificacin de la modelacin del decaimiento sea
apropiada a falta de un conocimiento ms detallado de cada una de las variables
que influyen en su cuantificacin.

Modelos para la aplicacin de Kd

En la literatura, adems del modelo de cintica de primer orden, no existen
modelos que sean aplicados directamente a bacterias coliformes. Sin embargo, se
pueden encontrar diferentes modelos que son aplicados a la adsorcin a las
partculas slidas de diferentes tipos de elementos que son normalmente
considerados contaminantes en el agua. Entre ellos se pueden encontrar modelos
isotermos, paramtricos, y mecanicistas. Para este trabajo se realizar una breve
descripcin de dos tipos de modelos que requieren del coeficiente de particin
cuantificado para poder establecer el comportamiento de las bacterias en el
18

tiempo. Los dos tipos se diferencian principalmente en la complejidad de los
mismos y de las variables que tienen en cuenta para realizar la modelacin
(Gamboa Medina, 2008). De esta manera, se detallar el modelo simple de
cintica de primer orden y tres diferentes modelos isotermos de mayor
complejidad. Esto debido a que son los de mayor aplicabilidad a bacterias
coliformes y son los ms utilizados en la actualidad. Estos modelos requieren de
una tasa de decaimiento de bacterias la cual es la misma mostrada en la ecuacin
1, que representa el decaimiento total de las bacterias coliformes (Kb). Es
importante mencionar que como se especific anteriormente, Kb est
directamente relacionada con el Kd, y por esto se precisa de una metodologa
para su obtencin.

Por otro lado se menciona que existen diferentes formas de estimar la
concentracin de bacterias en puntos discretos a partir de la caracterizacin de
todas las variables que interactan en el agua y los sedimentos. Una de estas
posibilidades es a partir de balances de masa tanto en los sedimentos como en el
agua y su resolucin en estado estable.

Modelo de primer orden

Al aplicar el modelo de primer orden a las bacterias coliformes, se hace una
simplificacin significativa, y su aplicacin slo depende de la concentracin inicial
de bacterias en un punto dado y de la tasa de decaimiento de las mismas de la
siguiente manera (Gamboa Medina, 2008):

(17)

(18)


Donde C = concentracin de bacterias coliformes (nmero/100ml)
C
t
= concentracin de bacterias coliformes en el tiempo t (nmero/100ml)
C
o
= concentracin inicial de bacterias coliformes (nmero/100ml)
k = tasa de decaimiento (d
-1
)
kb = tasa total de decaimiento de bacterias coliformes (ecuacin 1)
t = tiempo transcurrido (das)




19

Modelos isotermos

Este tipo de modelos cuentan con un mejor entendimiento de lo que ocurre en las
interacciones entre las bacterias y los sedimentos e incluyen diferentes
parmetros que intervienen en el decaimiento. En general tienen en cuenta
variables como el nivel de saturacin de bacterias en los sedimentos, la
concentracin de slidos suspendidos y la concentracin mnima a la que el
sedimento empieza a adsorber. Es importante mencionar que al ser isotermos,
tienen la limitacin de considerar la temperatura con un valor constante
(Enviromental Protection Agency , 1999).

Modelo de Langmuir

El modelo de adsorcin de Langmuir fue desarrollado inicialmente para describir el
proceso de adsorcin de molculas de gas en superficies slidas homogneas. El
modelo se presenta a continuacin (Enviromental Protection Agency , 1999):

(19)


Donde Ai = cantidad de sustancia adsorbida por unidad de masa slida
K
L
= constante de adsorcin de Langmuir
Am = mxima capacidad de adsorcin del slido
Ci = concentracin en equilibrio de las sustancia que se adsorbe


Modelo de Freundlich

(20)


Donde Kf = constante de adsorcin de Freundlich
N = constante




20

Modelo de Dubinin-Radushkevich

(21)

Donde K
DR
= constante de adsorcin de Dubinin-Radushkevich
= R*T* ln(1+1/Ci)
R = constante de los gases
T = temperatura (K)

A partir de modificaciones en los anteriores modelos es posible adaptarlos a
bacterias coliformes. Aquellas constantes de adsorcin de cada modelo estn
asociadas al coeficiente de particin pues representan la velocidad o tasa a la que
las sustancias se adsorben y desadsorben de las partculas slidas. Tambin, a
partir de los slidos suspendidos y un volumen de muestra, el trmino Ai se puede
modificar para representar la cantidad de las bacterias que son adsorbidas por los
sedimentos. Por otro lado el trmino Am, es la variable ms difcil de obtener y se
sale del alcance de este proyecto, ya que para cuantificarlo es requerido un
anlisis ms detallado de los sedimentos para poder encontrar la mxima
capacidad de adsorcin.

Teniendo en cuenta lo anterior, estos modelos no sern aplicados en este trabajo
por la falta de una identificacin ms detallada del agua muestreada y sus
sedimentos. Adems, se pretende que la metodologa propuesta para la
estimacin de Kd sea simple, y pueda ser aplicada sin dificultad. Al utilizar estos
modelos, la metodologa empieza a tener mayor complejidad al tener que realizar
una caracterizacin cada vez ms exhaustiva. A pesar de lo anterior es importante
tener en cuenta la existencia de estos diferentes modelos que permiten realizar
estimaciones con mayor grado de exactitud en el tema de la adsorcin de
bacterias coliformes a los slidos suspendidos.
Captulo 3. Procedimiento experimental propuesto para la
estimacin del coeficiente de particin

La tcnica propuesta para la identificacin experimental del coeficiente de particin
se basa en los procesos de sedimentacin descritos por Steven Chapra en su libro
Surface Water-Quality Modeling. En este, se indica que la presencia total de
21

microorganismos en un cuerpo de agua superficial, se divide en dos componentes:
aquellos unidos a los slidos suspendidos y aquellos que flotan libres en el agua
como se muestra en la ecuacin 6. Chapra menciona que la sedimentacin
depender principalmente en la proporcin en la que coexisten los
microorganismos en los dos elementos mencionados. De esta manera, el
coeficiente de particin se presenta como la tendencia que tienen las bacterias a
estar atrapadas por las partculas slidas dependiendo de la relacin, sedimento-
agua, de la cantidad de bacterias coliformes. Sin embargo, esta probabilidad
tambin se ve influenciada por la cantidad de slidos suspendidos en el agua, ya
que la concentracin de bacterias se da, en los sedimentos por unidad de masa, y
en el agua por unidad de volumen como se observa en la ecuacin 10. As, la
magnitud total de slidos suspendidos afectar la relacin de la cantidad de
bacterias y la posibilidad de que las mismas estn adsorbidas en los sedimentos.

Teniendo en cuenta lo anterior, se desarroll una metodologa de laboratorio que
permite a travs de la cuantificacin de los tres atributos esenciales, la cantidad de
bacterias coliformes en los slidos suspendidos, la cantidad de bacterias
coliformes libres en el agua y la concentracin total de slidos suspendidos,
estimar el coeficiente de particin a partir de la ecuacin 9.

De esta manera, la metodologa propuesta se basa principalmente en la capacidad
de separar de manera adecuada los slidos del agua, y que al mismo tiempo las
bacterias permanezcan en su contenedor original. Es decir que cuando se realiza
la disociacin, la relacin entre la cantidad de bacterias atrapadas a los
sedimentos y la cantidad de bacterias libres en el agua, no se vea modificada con
respecto a la relacin de las mismas en el agua inicial, antes de la divisin.

A continuacin se presentar el procedimiento propuesto desde la toma de las
muestras de agua y la seleccin del sitio de medicin hasta el desarrollo de
procedimientos en el laboratorio y la obtencin del coeficiente de particin para
bacterias coliformes.

Toma de muestras

El objetivo de este proyecto es la estimacin de Kd en cuerpos de agua
superficiales, principalmente en ros y cauces de menor tamao, como quebradas.
22

De esta manera, los sitios de medicin deben estar ubicados a lo largo del
recorrido del cauce y deben cumplir con algunos requerimientos. El ms
importante es que en el punto escogido para la medicin, se tenga la seguridad de
la existencia de bacterias coliformes en el agua, pues si se escoge un lugar en
donde el agua es potable, es posible que cuando se realicen las pruebas de
coliformes totales, estos no se puedan cuantificar, no slo por la baja presencia de
microorganismos, sino porque en la medida en que la calidad del agua sea mejor,
mayor volumen de muestra es requerido. Comnmente, este volumen de muestra
es limitado por la dificultad que existe en el transporte de la misma y por la
capacidad de los recipientes normalmente utilizados. El hecho de recoger un
volumen relativamente alto representa complicaciones a la hora de realizar las
campaas de toma de muestras y puede resultar imprctico. Otro factor
importante para la escogencia del lugar de medicin, es la facilidad con la que se
pueden realizar los muestreos. Lo ms indicado es que exista algn tipo de puente
que cruce de un lado a otro el cauce en donde se tomarn las muestras, pues
siempre se debe evitar al mximo el contacto directo con el agua, y lo anterior, en
mayor medida, si se espera que haya bacterias coliformes perjudiciales para la
salud. Sin embargo, si la profundidad del cauce es baja, es factible la realizacin
de muestreos entrando al ro y tomando todas las precauciones de seguridad
necesarias.

En cuanto a la toma de muestras, para la metodologa propuesta, se requiere que
en los sitios de medicin se tomen dos muestras distintas de agua, una para los
slidos suspendidos y una para los coliformes totales. Pero las muestras de agua
deben ser representativas de toda la seccin transversal del cauce. Para lograr
esto se debe realizar el siguiente procedimiento a continuacin.


Imagen 1. Tcnica para toma de muestras
23


Primero para la toma de la muestra de slidos suspendidos totales se deber
recoger agua en tres verticales, A, B y C como se muestra en la imagen 1
encontradas a las longitudes mostradas, donde L representa el ancho total del
cauce. En un mismo recipiente se debe combinar el agua obtenida en cuanto al
volumen de la siguiente manera: del volumen del agua se obtiene en la vertical
A, en la vertical B, y en la vertical C. De esta manera se asegura que la
muestra obtenida representa en buena medida la totalidad del agua que fluye por
el cauce. A esta cantidad de agua (combinada) se le debe hallar la temperatura, el
Ph, y la conductividad, adems de recoger la muestra de agua para la prueba de
slidos suspendidos.

La muestra de agua que se llevar al laboratorio para la prueba de coliformes
totales se obtiene a partir de la vertical B. Se realiza un muestreo a lo largo de
toda la vertical, no debe ser slo superficialmente ya que a mayor profundidad,
mayor es la cantidad de bacterias coliformes. Se debe recolectar al menos un litro
de agua del cauce y trasvasarlo a un recipiente esterilizado con la menor
exposicin posible con el fin de evitar una contaminacin externa. A esta muestra
obtenida en la mitad de la seccin, se le debe caracterizar el oxgeno disuelto.

Teniendo las muestras de agua en los recipientes esterilizados, se deben trasladar
al laboratorio en el menor tiempo posible. Las muestras deben ir refrigeradas por
medio de neveras porttiles a las que se les adiciona hielo con el fin de mantener
al mximo las condiciones exactas en la toma de muestra. Al mantener las
muestras a bajas temperaturas, se detienen los procesos de decaimiento de
bacterias y se mantienen las caractersticas similares al cauce.

Procedimiento de laboratorio

Al llegar al laboratorio, las muestras deben ser ubicadas inmediatamente en
refrigeracin estable, no se deben conservar demasiado tiempo en las neveras
temporales. A partir del momento de toma de muestra, la prueba de slidos
suspendidos se puede realizar en un lmite de tiempo mximo de 7 das, mientras
que el ensayo de coliformes totales slo dentro de un periodo de 24 horas. Por lo
anterior se recomienda que todos los implementos para realizar la ltima prueba
mencionada estn listos el mismo da de la toma de muestras.
24


En cuanto a la prueba de slidos suspendidos, se debe aplicar la metodologa
estndar para su obtencin. Se realizar sobre la muestra de agua destinada para
ese fin y no difiere en esta metodologa propuesta, en ninguna manera con
respecto a otros ensayos de slidos suspendidos totales.

A diferencia de los SST, para la prueba de coliformes totales se debe realizar un
procedimiento previo antes de realizar las pruebas de filtracin por membrana.
Primero, se debe traspasar una cantidad significativa de agua a otro recipiente al
de la toma de muestra, al menos 200 ml. El agua restante debe ser transportada
hacia una maquina centrifuga con una capacidad de volumen suficiente.
Normalmente, este tipo de mquinas tienen sus respectivos envases para realizar
una centrifugacin, es decir que el agua debe ser trasvasada a estos. Es
importante mencionar que todos los recipientes que se utilicen para contener las
muestras de agua de coliformes totales deben estar esterilizados, en la medida en
que las muestras no sean contaminadas, mejor sern los resultados obtenidos. La
efectividad de la metodologa propuesta reside esencialmente en el manejo de las
muestras y de la no alteracin de la cantidad de bacterias presentes en las
mismas.

Se debe centrifugar como mnimo 100ml del agua de la muestra de bacterias
coliformes. En la centrifugacin se debe tener especial cuidado, pues en la misma,
adems de separar los slidos del lquido, se debe garantizar que no exista
desprendimiento de bacterias. Esto se logra por medio de una centrifugacin que
tenga una magnitud suficiente de revoluciones por minuto para separar los
componentes, pero no demasiado elevada que cause que la proporcin,
sedimento-agua, de cantidad de bacterias se vea modificada. Por medio del
conocimiento de los trabajadores del laboratorio y su experiencia en la utilizacin
de la mquina, se estableci que la centrifugacin se realizara a 8000 RPM
durante un periodo de tiempo de 10 minutos. Con estas caractersticas, es posible
disociar los sedimentos sin alterar las condiciones iniciales de las bacterias.

Luego de efectuar la centrifugacin, en las paredes de los recipientes utilizados,
se puede observar como los sedimentos fueron efectivamente apartados del agua.
En la imagen x se muestra el resultado final de la centrifugacin. Luego
cuidadosamente, sin movimientos violentos, el agua libre de sedimentos se
transfiere a otro recipiente (tambin estril).
25


Posteriormente en aquel recipiente que tiene los sedimentos, se agrega un
volumen de una solucin acuosa buffer igual al del agua extrada del recipiente
utilizado, en este trabajo se utiliz peptona al 0.1% (Gamboa Medina, 2008).
Luego se debe mezclar al menos 10 minutos con el fin de que los slidos se
diluyan en la solucin y las bacterias coliformes presentes en los mismos se
adhieran a ella.

En resumen, luego de realizar el procedimiento explicado previamente, se deben
tener tres recipientes con diferentes componentes. El primero contiene una
muestra del agua original tomada del cauce, el segundo agua centrifugada sin
slidos suspendidos, y el tercero los sedimentos diluidos en una solucin acuosa.
En este momento se realizan las pruebas de coliformes totales. Se ejecutan
ensayos de cuantificacin de bacterias a los tres diferentes lquidos que se tienen
La metodologa utilizada en este proyecto fue la de filtracin por membrana y se
utiliz ColiBlue como el medio de cultivo.

De esta manera a partir de las pruebas de coliformes totales realizadas, se
obtienen resultados de las bacterias totales en el agua de la muestra (N), aquellas
libres en el agua (Nw), y la cantidad de bacterias coliformes atrapadas en los
sedimentos (Np). Teniendo estas variables cuantificadas es posible por medio de
la ecuacin 1, corroborar que la disgregacin de las bacterias fue realizada
efectivamente, y por medio de la ecuacin 9, estimar el coeficiente de particin
para bacterias coliformes en cuerpos de agua superficial.

El xito de esta metodologa propuesta radica en una buena manipulacin de las
muestras. No se debe permitir que en ningn recipiente utilizado exista la
posibilidad de que el agua se infecte de microorganismos diferentes a aquellos
presentes en la muestra de agua. Entre mayor sea el grado de cuidado que se
tenga con respecto a este tema, mejores sern los resultados.
Captulo 4. Aplicacin de la metodologa en el ro Bogot
Sitios de medicin
A fin de comprobar la efectividad de la metodologa descrita en el captulo 3, se
realizaron dos campaas al ro Bogot. En ambas se utilizaron dos sitios de
26

medicin, los cuales cumplen con las caractersticas necesarias para poder aplicar
la metodologa. En ambos lugares existe una presencia de bacterias coliformes
elevada, y tienen un puente que permite fcilmente la obtencin de las muestras
de agua. Los dos lugares de medicin son Puente Vargas, y el Puente del Comn,
ambos ubicados en la cuenca alta del ro Bogot. Entre ambos puntos hay una
distancia aproximada de 13 km y no existe ningn vertimiento directo de fuentes
naturales, pero si pueden existir fuentes difusas. Ambos puntos se localizan a las
afueras del norte de Bogot. Este tramo presenta las siguientes caractersticas:

Tabla 1. Caractersticas generales tramo del ro Bogot Puente Vargas-Puente del Comn (Cantor
Monroy, 2010)


En la siguiente imagen se muestra el tramo entre estos dos puntos de medicin:
Son 13075 metros de longitud, no existe ningn afluente intermedio y conserva
una sinuosidad moderada (Cantor Monroy, 2010)


Imagen 2. Tramo del ro Bogot comprendido entre Puente Vargas y el Puente del Comn (Cantor Monroy, 2010)
27

Puente Vargas

En este sitio de medicin hay una estacin limnigrfica. Est ubicado
aproximadamente en el k113+223 desde el inicio del ro Bogot en su punto ms
al norte de la cuenca alta y tiene las coordenadas 1035984 norte y 1007790 este
(EAAB-Unversidad Nacional de Colombia, 2010).

Se presentan algunas mediciones de determinantes de la calidad del agua en un
estudio realizado por la empresa de acueducto y alcantarillado en conjunto con la
Universidad Nacional de Colombia en el ao 2010.




Tabla 2. Determinantes de la calidad del agua en Puente Vargas (EAAB-Unversidad Nacional de
Colombia, 2010)
Fecha
Hora
Slidos
Suspendidos
Totales (mg/L)
E. Coli (UFC/100 ml)
Coliformes Totales
(UFC/100 ml)
Temp Cond pH O.D. TC
Campaa C mS/cm - mg/L Amb
08/06/2009
08:20 15.00 20000.00 80000.00 19.50 282.00 7.76 2.08 16.60
16:50 21.00 20000.00 70000.00 18.00 547.00 7.62 1.83 16.70
17:40 20.00 20000.00 80000.00 18.80 519.00 7.45 1.64 12.50
24/08/2009
17:50 62.00 87000.00 390000.00 19.75 551.00 7.51 1.23 15.70
18:20 32.00 63000.00 380000.00 19.65 525.00 7.50 1.22 15.40
18:40 49.00 78000.00 330000.00 19.60 497.00 7.47 1.56 14.60
(-)
13:30 46.00 44000.00 73000.00 21.60 346.00 7.60 1.39 19.10
14:30 30.00 41000.00 79000.00 21.00 302.00 7.56 1.40 12.70
15:50 28.00 45000.00 110000.00 21.50 380.00 7.52 1.23 15.60
28

En las siguientes imgenes se muestra su ubicacin y detalle:

Imagen 4. Sitio de medicin Puente Vargas
Imagen 3. Ubicacin especial estacin Puente Vargas en Google Earth
29

Puente del Comn

Est ubicado aproximadamente en el K126+298 desde el inicio del ro Bogot en
su punto de inicio de la cuenca alta y tiene las coordenadas 1029557 norte y
1005432 este (EAAB-Unversidad Nacional de Colombia, 2010).

A continuacin se presentan algunas mediciones de determinantes de la calidad
del agua en un estudio realizado por la empresa de acueducto y alcantarillado en
conjunto con la Universidad Nacional de Colombia en el ao 2010.



Tabla 3. Determinantes de la calidad del agua en Puente Vargas (EAAB-Unversidad Nacional de
Colombia, 2010)
Fecha
Hora
Slidos
Suspendidos
Totales (mg/L)
E. Coli ((UFC/100
ml)
Coliformes Totales
(UFC/100 ml)
Temp Cond pH O.D. TC
Campaa 1 C mS/cm - mg/L Amb
09/06/2009
07:40 34.00 100000.00 600000.00 18.70 335.00 7.12 1.60 21.10
11:00 16.00 50000.00 200000.00 19.70 477.00 7.25 1.86 25.80
12:00 15.00 70000.00 300000.00 20.00 450.00 7.25 1.67 22.80
13:00 16.00 100000.00 800000.00 19.70 404.00 7.25 1.70 24.70
25/08/2009
08:00 45.00 210000.00 480000.00 18.90 452.00 7.36 1.73 18.20
08:40 26.00 240000.00 470000.00 18.50 461.00 7.38 1.50 18.40
09:40 21.00 160000.00 360000.00 18.70 454.00 7.31 0.31 21.00
(-)
07:30 32.00 92000.00 330000.00 19.44 392.00 7.40 2.55 15.70
10:20 19.00 11000.00 39000.00 21.07 356.00 7.72 1.72 26.30
12:50 24.00 5200.00 35000.00 21.17 367.00 7.73 1.79 26.50
30

A continuacin se presentan imgenes relacionadas con el sitio de medicin y su
ubicacin espacial:
Imagen 6. Ubicacin especial Puente del Comn obtenida en Google Earth
Imagen 5. Sitio de medicin Puente del Comn
31

Detalles de medicin
A partir de la metodologa mencionada en el capitulo tres, y teniendo los sitios de
medicin definidos, se procedi a realizar las campaas de medicin. En ambas
ocasiones se realiz durante las horas de la maana, y haba tiempo despejado.
Es pertinente mencionar que conociendo la naturaleza y calidad del agua en
ambos lugares de medicin, se tomaron todas las medidas de seguridad
necesarias. Se utiliz equipo de proteccin personal procurando evitar al mximo
el contacto directo con el agua de las muestras, pues como se demostrar
posteriormente, existe una gran cantidad de bacterias coliformes en este tramo del
ro Bogot.

Para poder tomar todas las pruebas necesarias se llev el siguiente equipo:

Phmetro Oakton modelo pH300
Conductmetro Orion-Thermo modelo Orion Star
Multiparametrico Hach modelo HQ40D
Sonda de oxgeno Hach modelo HQ40D
2 recipientes de 1L de vidrio esterilizados para bacterias coliformes
2 recipientes de 1L de plstico esterilizados para los slidos suspendidos
totales
1 balde
2 muestreadores de acero galvanizado especializados
2 cuerdas de 12 metros de longitud
Flexmetro

Para llevar a cabo la toma de muestras se utilizaron unos muestreadores
especializados de acero galvanizado. Estos tienen la capacidad de alcanzar la
totalidad de la profundidad del ro en ambos sitios de medicin gracias a su
elevado peso. Estn diseados para que no se llenen inmediatamente en el
instante en que entran en contacto con el agua, sino que a partir de un pequeo
orificio en la parte superior, el agua entre de manera lenta y permita realizar un
barrido de toda la vertical llegando hasta el fondo del ro. En las siguientes
imgenes se muestra el muestreador de acero galvanizado:
32

















Como se observa en la imagen 7, el muestreador en su interior tiene un tubo de
PVC del cual se sacarn las muestras de agua, para evitar el contacto del agua
directamente con el metal, puesto que esto podra afectar la calidad del agua.

A partir de la metodologa de toma de muestras descrita en la pgina 23, y
siguiendo la imagen 1, se procedi a medir el ancho del ri de forma aproximada
desde la superficie del puente y as establecer el lugar de cada una de las
verticales a las distancias indicadas. Luego se realiz en primera instancia la
obtencin de la muestra de agua para los slidos suspendidos. sta se consigue a
partir de la combinacin de diferentes cantidades de agua en tres verticales
distintas. Se utiliz el muestreador previamente descrito para recolectar las
muestras de agua y un balde para la mezcla. En las imgenes a continuacin se
evidencia este proceso:



Imagen 8. Muestreador de acero galvanizado armado
Imagen 7. Componentes del muestrador
33





Imagen 10. Combinacin Agua para la muestra de slidos suspendidos
Imagen 9. Metodologa para la toma de muestras
34

Al agua combinada a partir de diferentes muestras de agua en las verticales se le
midi la temperatura, el Ph, la conductividad, y se extrajo la muestra para los
slidos suspendidos totales.

Luego, siguiendo la misma metodologa, se prosigui a tomar la muestra de agua
de bacterias coformes. En sta se tuvo mayor precaucin evitando lo mejor
posible que la muestra de agua entrara en contacto con cualquier superficie y se
vieran modificadas sus caractersticas iniciales. A partir del muestreo en una sola
vertical central, se obtuvo la cantidad de agua necesaria para llenar el recipiente
para la prueba de coliformes totales. Este recipiente fue expuesto al ambiente slo
durante el llenado del mismo. Pero antes de realizar el llenado, se hizo una
medicin de oxgeno disuelto a la muestra cuando todava se encontraba en el
muestreador.

El procedimiento anterior se repiti durante las dos campaas en los dos sitios de
medicin y, con las muestras tomadas, fue posible la estimacin del coeficiente de
particin. En ninguna de las campaas hizo falta la caracterizacin de ningn
componente previamente planificado. Por otro lado la estacin limnigrfica Puente
Vargas permite la estimacin del caudal por medio de una simple visin de la mira
que se encuentra ubicada en el ro. Este parmetro habra complementado el
entendimiento de la dinmica de las bacterias coliformes, ya que no se realiz su
estimacin.
Captulo 5. Resultados

A continuacin se presentarn los resultados de las pruebas realizadas
diferenciadas por campaa y por sitio de medicin. Es importante mencionar que
Puente Vargas se denomin el sitio 1, mientras que el Puente del Comn el sitio 2.
Esto ser indispensable para el entendimiento de las tablas de resultados.

Tabla 4. Caractersticas del agua medidas en campo
Campaa Sitio Temperatura (C) Ph
Conductividad
(S/cm)
Oxgeno Disuelto (mg/L)
1
1 18.9 6.98 364 1.98
2 17.7 6.96 311 2.48
2
1 17 7.14 314 2.16
2 15.4 7.11 289.9 2.39
35


En la anterior tabla se puede observar que, como se mencionaba previamente en
el documento, las condiciones en las que se hizo la medicin variaron de una
campaa a otra. Realizando una comparacin entre las dos campaas, en
trminos generales la temperatura del agua fue menor en la segunda campaa, el
Ph mayor, la conductividad aument y el oxgeno disuelto tuvo un comportamiento
distinto entre los sitios de medicin, en el sitio 1 (Puente Vargas) se present un
incremento, mientras que en el sitio 2 (Puente del Comn) disminuy.

Por otra parte, al comparar los sitios de medicin, en la estacin de Puente Vargas
se obtiene una mayor temperatura y conductividad que en el puente del comn y
un menor Ph y oxgeno disuelto. Estos determinantes influenciarn en gran
medida las bacterias que fueron obtenidas.


Tabla 5. Resultados de las pruebas de coliformes totales en la campaa 1



Campaa Sitio Prueba Dilucin UFC rojas UFC Azules Total UFC/100ml
1
- Blanco Agua estril - 0 0 0 0
- Blanco Agua Ionizada - 0 0 0 0
- Blanco Solucin Acuosa - 0 0 0 0
1
Agua Original
1/1000 incontable incontable >200 >200000
1/10000 54 7 61 610000
Agua Centrifugada
1/1000 86 13 99 99000
1/10000 11 2 13 130000
Replica Agua Centrifugada
1/1000 83 10 93 93000
1/10000 10 4 14 140000
Sedimento
1/1000 incontable incontable >200 >200000
1/10000 41 13 54 540000
2
Agua Original
1/1000 incontable incontable >200 >200000
1/10000 51 15 66 660000
Agua Centrifugada
1/1000 76 22 98 98000
1/10000 6 3 9 90000
Replica Agua Centrifugada
1/1000 81 17 98 98000
1/10000 6 5 11 110000
Sedimento
1/1000 incontable incontable >200 >200000
1/10000 38 7 45 450000
36

Tabla 6. Resultados de las pruebas coliformes totales en la campaa 2
Campaa Sitio Prueba Dilucin Colonias rojas Colonias Azules Total UFC/100ml
2
- Blanco Agua Ionizada - 0 0 0 0
- Blanco Solucin Acuosa - 0 0 0 0
1
Agua Original
1/1000 149 37 186 186000
1/5000 26 4 30 150000
1/10000 14 1 15 150000
Agua Centrifugada
1/1000 10 11 21 21000
1/10000 1 3 4 40000
Sedimento
1/5000 33 3 36 180000
1/10000 7 0 7 70000
2
Agua Original
1/1000 213 63 276 276000
1/5000 45 7 52 260000
1/10000 21 7 28 280000
Agua Centrifugada
1/1000 13 10 23 23000
1/10000 2 1 3 30000
Sedimento
1/5000 21 4 25 125000
1/10000 9 3 12 120000

Como se realizaron pruebas a partir de diferentes diluciones sobre la misma
muestra de agua, se utiliz el promedio de los resultados obtenidos en aquellas
realizadas sobre el mismo componente para obtener un valor nico de la siguiente
manera:

Tabla 7. Comparacin de las bacterias obtenidas directamente en el agua y a travs de la separacin
de sus componentes en la campaa 1
Campaa Sitio
Promedio Agua
Centrifugada
(UFC/100ml)
Promedio
Sedimento
(UFC/100ml)
Suma
(UFC/100ml)
Promedio Agua Original
(UFC/100ml)
%
diferencia
1
1 115500 540000 655500 610000 7.46%
2 99000 450000 549000 660000 16.82%

Tabla 8. Comparacin de las bacterias obtenidas directamente en el agua y a travs de la separacin
de sus componentes en la campaa 2
Campaa Sitio
Promedio Agua
Centrifugada
(UFC/100ml)
Promedio
Sedimento
(UFC/100ml)
Suma
(UFC/100ml)
Promedio Agua Original
(UFC/100ml)
%
diferencia
2
1 30500 125000 155500 162000 4.01%
2 26500 122500 149000 272000 45.22%

Como se puede observar en las tablas 7 y 8, la separacin de las bacterias en el
agua sin slidos y en los sedimentos ocurri en general de manera adecuada. Se
obtienen dos valores dentro del 10% del total, una cerca del 15%, y una alejada
37

del 45%. Es importante mencionar que estas pruebas tienen una gran variabilidad,
y los resultados obtenidos fueron muy acertados. La metodologa a travs de la
centrifuga con una velocidad baja de revoluciones por minuto, funcion de manera
correcta. Slo en una de las cuatro pruebas se encontr un resultado incoherente
y se establece una efectividad del 75%.

En cuanto a la cantidad de bacterias encontradas se encuentra que en la campaa
1 se obtienen valores aproximadamente en un rango de 550000-650000
UFC/100ml y en la campaa 2 un rango de 150000-250000 UFC/100ml. Esto pudo
ser causado por diferentes factores, pero principalmente se cree que las
condiciones cambiantes del agua influyeron en gran magnitud. El hecho de que
en ambos sitios de medicin se dieran concentraciones de bacterias similares, es
un buen indicio de la medicin, pues como se estableci en el captulo 4, en los 13
km de separacin entre estos puntos, no existen vertimientos naturales ni
antropognicos, slo aquellas fuentes difusas. Otro indicativo de que se realiz
una buena estimacin de las bacterias coliformes, es que al compararlo con los
datos medidos en el 2010 en la estacin Puente Vargas y en el Puente del Comn
observados en la tabla 3 se encuentra que los valores obtenidos se encuentran
dentro de los rangos establecidos. Sin embargo al comparar determinantes como
la temperatura o la conductividad con respecto a los coliformes totales, se
encuentran algunas discrepancias, puesto que cuando se observa, por ejemplo,
que la temperatura tiende a disminuir, la cantidad de bacterias tiene a incrementar.
Lo cual ocurri de forma completamente contraria en las dos campaas
realizadas. En aquella que se obtuvo las menores temperaturas, tambin se
encontraron la menor cantidad de bacterias coliformes. Sin embargo lo anterior
puede estar influenciado por una cantidad innumerable de factores, y en general
se consiguieron valores que concuerdan con el estudio mencionado (EAAB-
Unversidad Nacional de Colombia, 2010).

Por otro lado, en cuanto a la estimacin Kd, se obtuvieron los siguientes
resultados a partir de la divisin de las bacterias y su medicin independiente. El
Kd se encontr a partir de la ecuacin 9 y la Fp con la ecuacin 12.


38

Tabla 9. Estimacin de Kd para la campaa 1
Campaa Sitio Nw (UFC/100ml)
Np
(UFC/100ml)
m
Slidos
suspendidos
totales (mg/L)
Kd (L/mg) Kd(m
3
/g) Fp
1
1 115500 540000 29.5 0.158 0.158 0.824
2 99000 450000 25 0.182 0.182 0.820


Tabla 10. Estimacin de Kd para la campaa 2
Campaa Sitio Nw (UFC/100ml)
Np
(UFC/100ml)
m
Slidos
suspendidos
totales (mg/L)
Kd (L/mg) Kd(m
3
/g) Fp
2
1 30500 125000 25.5 0.161 0.161 0.804
2 26500 122500 23.5 0.197 0.197 0.822

En las tablas 9 y 10 se puede evidenciar que an cuando la suma de las bacterias
atrapadas en las partculas con aquellas libres en el agua discrepan de las
contabilizadas en el agua original, aparentemente la estimacin de Kd contina
siendo realizado de manera correcta. Los valores de Kd fueron muy similares, en
ambos sitios de medicin durante ambas campaas. Lo anterior se muestra en la
siguiente tabla:

Tabla 11. Comparacin valores de Kd obtenidos en las diferentes campaas
Sitio
Kd Campaa 1
(M
3
/g)
Kd Campaa 2
(M
3
/g)
% diferencia
1 0.158 0.161 1.41%
2 0.182 0.197 8.19%

Con ambos valores dentro de un 10%, se encuentra que la metodologa tuvo
buena efectividad. Incluso este parmetro no debera permanecer constante, pues
est modificado por la cantidad de slidos suspendidos. Al haber encontrado
valores de SST menores durante la segunda campaa, hizo que los coeficientes
de particin se incrementaran. Por otro lado el valor de Fp que se mantuvo
constante en ambos sitios con cerca del 80%.

Cuando se realiza una comparacin con valores en la literatura, se encuentra que
en el mismo coeficiente de particin en sustancias como metales pesados (Cd,
39

Cu, Pb, Zn), se tiene un rango de valores entre 0.01-0.1 m
3
/g (Thomann & Mueller,
1987). Esto indica que, en cuanto al orden de magnitud se es acertado y muestra
que las bacterias tienen mayor tendencia a adherirse a los slidos que otros
contaminantes. En las referencias utilizadas no existen valores asociados
coeficiente de particin en bacterias coliformes, lo cual evita realizar una
comparacin con mayor profundidad.
Captulo 6. Conclusiones y Recomendaciones
Conclusiones

El principal objetivo del presente trabajo era la formulacin de una metodologa
que tuviera la capacidad de estimar experimentalmente el coeficiente de particin
de bacterias coliformes en cuerpos de agua superficiales. La efectividad del
ensayo resida en que se pudieran separar los sedimentos del agua sin
desprendimiento de bacterias y, al cuantificarlas, se obtuvieran valores similares a
la totalidad de ellas. La eficacia tambin dependa de que tan acertado fuera el
valor de Kd, y que tan cercano se encontraba de valores del mismo coeficiente en
diferentes tipos de qumicos.

Ambas caractersticas fueron efectivamente corroboradas con los resultados
obtenidos. La metodologa tuvo un buen desempeo pues al realizar la divisin de
las bacterias entre las partculas slidas y el agua sin sedimentos, se comprob
que efectivamente se separaban adecuadamente en sus componentes. De las
cuatro pruebas, dos tuvieron una diferencia menor al 10%, una menor al 20% y
slo una de las cuatro pruebas realizadas, represent un valor que se considera
fuera del nivel de tolerancia. Esto implica una efectividad del 75% para la
metodologa propuesta.

De la misma forma, ya que la experimentacin fue adecuada, era de esperarse
que los valores obtenidos para el coeficiente de particin tambin lo fueran. Se
encontraron valores en un rango de 0.15-0.2 m
3
/g. stos se encuentran dentro del
orden de magnitud del coeficiente al compararlo con contaminantes, lo cual es un
indicio de que la estimacin fue correcta. Adems, los Kd obtenidos fueron
consistentes en las dos campaas realizadas en cada sitio de medicin. Por otro
lado, al calcular la fraccin adsorbida de bacterias en los sedimentos (Fp), se
40

encontr que este atributo fue muy constante. Aunque en las pruebas realizadas
existieran condiciones variables, se encontraron valores cercanos entre s en un
rango de 0.8-0.83. Lo anterior demuestra que la metodologa propuesta y los Kd
obtenidos son coherentes y se tuvo una buena efectividad.

Es importante mencionar que las pruebas de coliformes presentan una gran
variabilidad. Existen una gran cantidad de factores que pueden afectar la
medicin: la contaminacin externa de las muestras, la incertidumbre en s
asociada a la prueba de filtracin por membrana y a la probabilidad que la porcin
de agua utilizada para las pruebas, efectivamente sea una buena representacin
de su totalidad. Al realizar diluciones tambin es posible que se realicen errores.

Se menciona que se realiz el intento de aplicar los modelos de decaimiento de
bacterias coliformes con los resultados de Kd obtenidos. Se intent conservar las
muestras de agua y alejarlas de las condiciones que influyen en el nmero de
bacterias coliformes existentes en el agua (radiacin solar, mortalidad). Fue
planteado un procedimiento en el que slo influyera la sedimentacin, con el fin de
observar el debido decaimiento de bacterias, y el incremento de las mismas en los
slidos suspendidos despus de un tiempo determinado. Pero los resultados no
fueron favorables, siempre se observ un incremento de las bacterias en el
tiempo. Esto se atribuye a la falta del conocimiento de conservacin de muestras
en laboratorio y se sale del alcance de este proyecto pues aparentemente se
dieron condiciones para que ocurriera el crecimiento en vez de alejar a las
bacterias de posibles variaciones.

En cuanto a la metodologa aplicada para la toma de muestras, se comprob su
efectividad pues las muestras de agua presentaron resultados coherentes con
respecto a los determinantes medidos. La toma de una muestra representativa de
toda la seccin mostr buen comportamiento al igual que el muestreador utilizado
para este fin.

Recomendaciones

Los resultados obtenidos muestran que la metodologa propuesta tiene la
capacidad de medir correctamente el coeficiente de particin. Esto se logr a partir
del buen manejo y manipulacin de las muestras, procediendo con gran cautela y
41

precisin para evitar posibles fallas en la cuantificacin. Es necesario que las
muestras de agua ni sus contenedores, estn expuestos a la intemperie ms que
el tiempo obligatorio.

La eficacia del procedimiento propuesto reside en la capacidad de mantener las
muestras en condiciones lo ms parecidas a las encontradas en el sitio de
medicin. Esto se alcanza por medio de la utilizacin de equipo y recipientes
estriles en todo momento, la buena aplicacin de la toma de muestras y su
conservacin hasta el sitio de experimentacin con buena refrigeracin.
Tambin es importante llevar a cabo procedimientos de cuantificacin de SST y
Coliformes totales estandarizados. Si no se tiene el conocimiento suficiente para
realizar este tipo de metodologas de manera independiente, mandar a realizar las
pruebas en laboratorios especializados es lo ms conveniente, pues en estos los
resultados que sean entregados estarn certificados.

Bibliografa

Bowie, G. e. (1985). Rates, constants anf kinetics formulations in surfacce water
quality modeling (EPA 600/3-85/040).

Cantor Monroy, M. M. (2010). Modelacin del transporte de solutos en condiciones
de flujo no permanente con alta dispersin y zonas muertas en canales de baja
pendiente - Aplicacin al caso del ro Bogot en el tramo de Puente Vargas-
Puente la Vrigen. Universidad Nacional de Colombia, Departamento de ingeniera
civil y agrcola, Bogot.

Chapra, S. C. (1997). Surface Water-Quality Modeling. McGraw-Hill .

Comisin Nacional del Agua. (2011). Estadsticas del agua en Mxico. Col.
Copilco el Bajo, Coyoacn: Secretaria de Medio Ambiente y Recursos Naturales.

Di Toro, D. M., OConnor, D. J., Thomann, R. V., & St. John, J. P. (1981). Analysis
of Fate of Chemicals in Receiving Waters. Phase 1. Chemical Manufact. Assoc.
Washington: HydroQual Inc.

42

EAAB-Unversidad Nacional de Colombia. (2010). Modelacin dinmica del agua
del ro Bogot Producto No. 3 Resultados y anlisis de las campaas de monitoreo
de la calidad del agua del ro Bogot. Bogot.

Ecological Society of America. (2001). Water in a changing world. Ecological
Applications , 1027-1045.

Enviromental Protection Agency . (1999). Understanding Variation in Partition
Coefficient, Kd, Values (Vols. V1: The Kd Model, Methods of Measurement and
Application of Chemical Reaction Codes). Washington.

Gamboa Medina, M. M. (2008). Estimacin experimental del coeficiente de
particn de bacterias coliformes en agua y sedimentos de ros. Universidad
Nacional de Colombia, Departamento de ingeniera civil y agrcola, Bogot.

Mancini, J. L. (1978). Numerical Estimates of Coliform Mortality Rates Under
Various Conditions. Water Pollution Control Federation .

Thomann, R. V., & Mueller, J. A. (1987). Principles of Surface Water Quality
Modeling and Control. New York: Harper & Roy.