Anda di halaman 1dari 3

PENYELIDIKAN DAN ANTIOKSIDAN SENYAWA FENOL DARI DAUN

GLEDITSIA TRIACANTHOS L.

Senyawa fenolik merupakan senyawa alami yang dapat menetralisir radikal
bebas , yang merupakan molekul tidak stabil yang terkait dengan pengembangan
sejumlah penyakit degeneratif. Saat ini ada peningkatan minat untuk mengekstrak dan
mengisolasi senyawa alami antioksidan terutama fenolik kerena fungsinya tersebut
yang memainkan peran penting sebagai faktor kesehatan. Telah dilaporkan bahwa
kemampuan senyawa ini untuk menyerap radikal bebas , memainkan peran penting
dalam banyak penyakit seperti penyakit jantung , penuaan , kanker dan gangguan
inflamasi.
1,1- difenil pikrilhidrazil ( DPPH ) radikal bebas merupakan model yang
paling ideal untuk mendeteksi kemampuan ekstrak tumbuh-tumbuhan dan senyawa
untuk aktivitas menyerap radikal bebas dalam waktu yang relatif singkat dan lebih
sederhana dari model uji lainnya . Laporan sebelumnya telah mengungkapkan bahwa
spesies mengandung banyak senyawa fenolik. Jadi, pada penelitian ini berupaya untuk
menentukan total fenolik dan total flavonoid, di samping mendeteksi kemampuan
ekstrak metanol 85 % dari daun G.triacanthos L. untuk menyerap radikal bebas DPPH
serta mengisolasi dan elusidasi antioksidan darisenyawa lain pada ekstrak tanaman ini.
Prosedur ekstraksi dan isolasi daun Gleditsia triacanthos L. dimulai dengan cara
bubuk daun triacanthos Gleditsia (2,5 Kg) diekstraksi dengan 85% metanol. Ekstrak ini
dihilangkan seluruh lemaknya dengan petroleum eter. Residu lemaknya dilarutkan dalam air
suling dan filtrat berturut-turut diekstraksi dengan kloroform, etil asetat dan n-BuOH.
Skrining fitokimia awal dan dua kromatografi kertas dimensi (TDPC) dari masing-masing
kloroform dan etil asetat ekstrak menggunakan dua sistem pelarut BAW (n-BuOH: AcOH:
H2O; 04:01:05) dan 15% AcOH (AcOH: H2O; 15:85) untuk mengungkapkan banyak
senyawa komponen fenolik dan flavonoid.
Total kapasitas antioksidan dari ekstrak masing-masing ditentukan menurut metode
phosphomolybdenum seperti dilansir Prieto et al, 1999. Ekstrak dan asam askorbat dalam
metanol dicampurkan dengan larutan reagen (0,6 M asam sulfat, 28 mM natrium fosfat dan 4
mM amonium molibdat) yang selanjutnya diinkubasi dalam bak air mendidih pada suhu 95
o
C
. Setelah pendinginan sampel pada suhu kamar, absorbansi diukur pada 695 nm terhadap
blanko. Blanko terdiri dari semua reagen dan pelarut tanpa sampel dan diinkubasi pada
kondisi yang sama. Aktivitas antioksidan dari ekstrak dinyatakan sebagai jumlah setara asam
askorbat (AAE).
Kegiatan radikal bebas masing-masing ekstrak atau senyawa terisolasi murni
ditentukan dengan menggunakan stabil ( DPPH ). Aktivitas antioksidan dari masing-masing
ekstrak dinyatakan sebagai SC50 yang didefinisikan sebagai konsentrasi ekstrak yang
dibutuhkan untuk 50 % aktivitas radikal DPPH dibandingkan dengan asam askorbat yang
digunakan sebagai standar . Semakin rendah nilai SC50 sesuai dengan aktivitas antioksidan
yang lebih tinggi dari ekstrak tumbuhan.
Penentuan kadar total fenolik dilakukan dengan menggunakan spektrofotometer.
Total kandungan fenolik dari setiap ekstrak dinyatakan sebagai mg setara asam galat (GAE)
per g ekstrak. Jumlah kandungan flavonoid (TFC) ditentukan secara spektrofotometri.
Absorbansi campuran dibaca pada 415 nm menggunakan spektrofotometer setelah (balnko
terdiri dari semua reagen dan pelarut tanpa ekstrak). Pemisahan dilakukan dengan
kromatografi kolom (3 x 90 Cm) dikemas dengan silika gel (70-230 mesh). Elusi ini dengan
petroleum eter, campuran gradien kloroform / metanol sampai metanol murni.
Hasil yang diperoleh dari spektrofotometri phosphomolybdenum kapasitas
antioksidan totalnya adalah 288,51 2.19 , 174,51 2,92 dan 418,53 3,78 ( mg setara
dengan asam askorbat / g ekstrak ) masing-masing. Hasil menunjukkan bahwa , ekstrak etil
asetat adalah yang paling aktif sedangkan ekstrak kloroform adalah yang terendah .
Pengukuran scavenging radikal DPPH menghasilkan aktivitas antioksidan dari
metanol , kloroform dan etil asetat ekstrak mungkin disebabkan efek antioksidan fenolik.
Bedardasarkan nilai-nilai SC50 dan kapasitas antioksidan total diperoleh radikal DPPH (100
mg / ml) sebesar 50%.
Kandungan total fenolik dari ekstrak metanol lemaknya G. triacanthos dan kloroform
dan fraksi etil asetat yang berasal dari itu ditentukan dengan menggunakan Folin - Ciocalteau
assay . Kandungan total fenolik dalam metode ini dinyatakan dalam ekuivalen asam galat dan
nilai yang diperoleh untuk konsentrasi total fenol dinyatakan sebagai mg asam galat ( GAE ) /
g ekstrak . Hasil menunjukkan bahwa total isi fenolik dalam tiga ekstrak diteliti adalah
240,32 1,56 , 160 masing-masing 1,65 dan 275,42 1,53 GAE / g .
Total kandungan flavonoid yang dihasilkan menunjukkan bahwa etil asetat memiliki
kandungan flavonoid tinggi ( 39,21 0,22 ) diikuti oleh ekstrak metanol ( 23,53 0,18 ) dan
kloroform adalah salah satu terendah ( 15,34 0,52; mg rutin setara / g ekstrak ).
Adapun struktur senyawa-senyawa yang dihasilkan dari ekstraksi dan isolasi daun
Gleditsia triacanthos L. yang menggunakan analisis spektroskopi tertentu adalah sebagai
berikut:
Gambar. 1: Struktur kimia senyawa 1-5 diisolasi dari daun G. triacanthos.

Jadi dapat disimpulkan, penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak metanol G. triacanthos
memiliki jumlah fenolik dan flavonoid yang tinggi. Aktivitas antioksidan dari tanaman
berkorelasi dengan total fenolik dan flavonoid. Ekstrak metanol tanaman dapat
direkomendasikan sebagai sumber alami antioksidan.