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INSTITUTO TECNOLOGICO SUPERIOR DE ATLIXCO

Practica no. 2
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS

MANJU SHARMA
Bioqumica


Alumnos:
Talia Tonacatl Ocotl
Anglica Torres Prez
Ma. Fernada Rocha Ambrocio
Lizzete Martnez Ramrez


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Objetivo

Observar las propiedades qumicas que se utilizan para la identificacin de diferentes
tipos de carbohidratos.
Introduccin

Los carbohidratos, glcidos o azcares constituyen una de ms importantes clases de
molculas constituyentes de los organismos.

Los carbohidratos son derivados aldehidicos o cetnicos de alcoholes polioxidrilados
y por lo tanto tienen las propiedades caractersticas de esos grupos como son la
formacin de oxinas e hidrazonas. Existen diferentes tipos de reaccines qumicas que
sirven para determinar cualitativamente la presencia de carbohidratos
(monosacridos, disacridosy polisacridos ).

Los glcidosmonosacridos y disacridos son biomoleculas de sabor dulce, solubles
en agua, slidos, blancos y cristalinos (excepto almidn). Son compuestos ternarios
por contener: Carbono (C), Hidrogeno (H) y Oxigeno (O). Los compuestos orgnicos
pertenecientes al grupo de los glcidos o carbohidratos, conocidos como
monosacridos y disacridos, presentan propiedades qumicas altamente
reductoras(excepto sacarosa), que se atribuyen a uno de los grupos funcionales de la
molcula o sea al radical aldehdo, el cual reduce algunos xidos metlicos, como el
cobre, bismuto y mercurio en solucin alcalina.

De acuerdo con el numero de carbonos en su molcula, se les llama diosas (2 tomos),
triosas (3 tomos), tetrosas (4 tomos), pentosas (5 tomos), hexosas (6 tomos), etc.
los monosacridos ms importantes desde el punto de vista biolgico son las pentosas
y las hexosas, ya que las pentosas como la Ribosa y Desoxirribosa forman parte
fundamental de los cidos nucleicos; y la hexosas como la glucosa, es importante en el
metabolismo de las clulas animales, ya que de ella se obtiene una gran parte de la
energa metablica necesaria para que funcionen las clulas y por ende los seres vivos.

Se encarga de proporcionar la energa a la clula para la realizacin de sus funciones
se le puede encontrar en las tortillas, miel, pan, papas, pltanos, mermeladas, pastas,
etc.

Los glcidos que el cuerpo no utiliza, son transformados en grasas y se almacenan
como producto de reserva.


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Prueba de Benedict

Algunos azcares tienen la propiedad de oxidarse en presencia de agentes oxidantes
suaves como el ion Fe
3+
o Cu
2+
. Esta caracterstica radica en la presencia de un grupo
carbonilo libre, el cual es oxidado y genera un grupo carboxilo. Por lo tanto, aquellos
azcares con un grupo carbonilo libre son llamados azcares reductores y aquellos en
los que el grupo carbonilo se encuentra combinado en unin glicosdica se conocen
como azcares no reductores. Existen varias reacciones qumicas que permiten
determinar si se est en presencia de un azcar reductor o no. La prueba de Benedict
es una de ellas y se basa precisamente en la reaccin o no de un azcar con el ion Cu
2+
.

El reactivo de Benedict contiene soluciones de carbonato de sodio, sulfato de cobre, y
citrato de sodio. El Na2CO3 confiere a la solucin un pH alcalino necesario para que la
reaccin pueda llevarse a cabo. El citrato de sodio mantiene al ion Cu
2+
en solucin ya
que tiene la propiedad de formar complejos coloreados poco ionizados con algunos de
los metales pesados. Con el cobre produce un complejo de color azul. Si se le agrega al
reactivo una solucin de azcar reductor y se calienta hasta llevar la mezcla a
ebullicin, el azcar en solucin alcalina a elevadas temperaturas se convertir en D-
gluconato y su ene-diol, rompindose luego en dos fragmentos altamente reductores,
los cuales con sus electrones expuestos, reaccionarn con el Cu
++
. Se obtiene entonces
un azcar oxidado y dos iones Cu
+
. Posteriormente el Cu
+
producido reacciona con los
iones OH- presentes en la solucin para formar el hidrxido de cobre:

Cu
+ +
OH
-
Cu(OH) (precipitado amarillo)
El hidrxido pierde agua

2Cu(OH) Cu2O (precipitado rojo ladrillo) + H2O

La aparicin de un precipitado amarillo, anaranjado, o rojo ladrillo evidencia la
presencia de un azcar reductor.

Reactivo de Fehling

Se prepara en el momento de su utilizacin mezclando Fehling A (solucin cprico)
con Fehling B (solucin alcalina de tartrato sdico-potsico) en partes iguales. Se
forma un complejo con el in cprico que es reducido por los mismos compuestos que
reducan al reactivo de Tollens. Si la reaccin es positiva se forma un precipitado rojo
de Cu
2+


RCHO + 2Cu
++
+ OH
-
RCOOH + Cu
+2
+ H2O



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Prueba de yodo para Almidn
El polisacrido almidn est constituido de dos polmeros, amilosa y amilopeptina. La
amilosa est constituida de largas cadenas lineales de glucosa unidas en enlace
glicosdico alfa 1,4 (Figura 1). Estas cadenas no poseen un tamao determinado sino
que pueden variar desde unos miles de unidades de glucosa hasta un milln. Por otro
lado, la amilopeptina posee, al igual que la 27 amilosa, cadenas lineales de glucosa
unidas en enlace alfa 1,4 pero adems posee una gran cantidad de ramificaciones, las
cuales se presentan cada 24 a 30 residuos de glucosa y en enlace glicosdico alfa 1,6.


Figura 1 Estructura de Almidn

El almidn es la molcula de reserva energtica en las plantas por excelencia. Debido a
que muchos organismos superiores poseen las enzimas necesarias para su
degradacin, este polmero puede ser convertido durante el proceso de digestin en
diferentes intermediarios metablicos que generan energa. El glucgeno a su vez es la
contraparte del almidn en el reino animal, con la diferencia de que esta molcula
posee una mayor cantidad de ramificaciones que el almidn y es ms compacta. La
conformacin de los enlaces alfa 1,4 presentes en estas molculas causa que estos
polmeros asuman una estructura helicoidal muy estrecha. La prueba del almidn es
una prueba muy sencilla pero que todava se utiliza para determinar la presencia de
almidn en algunos alimentos. La prueba se basa en una reaccin fsica y no qumica,

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en la cual el almidn reacciona con el yodo para formar un complejo de color azul
intenso. Bajo las mismas condiciones, el glucgeno da una coloracin caf.
Materiales

Equipo Reactivos

12 Tubos de ensayo
Bao mara
Mechero de bunsen
3 Pipetas de 10 ml.
3 Propipetas
2 vasos de precipitado

Reactivo de Benedict
Reactivo de Fehling A y B del. 2:1
Lugol
Acido HCl al 10%
Bicarbonato de sodio
Solucin de glucosa o dextrosa a 0.1%
Sacarosa
Almidn


Desarrollo

A) 1. Se tomaron 4 tubos de ensayo, numerados del 1 al 4
2. Se coloc en cada uno de los tubos, 2 ml del reactivo de Benedict.
3. Se adiciono en el tubo no. 2, una gota de la solucin de glucosa; en el tubo no. 3
agrega 3 gotas y en el tubo no. 4, adiciona 5 gotas.
4. Procedindose a calentar los 4 tubos en bao Mara durante 5 minutos.

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Figura 2 Prueba positiva para Benedict lo cual implica que la glucosa es un azcar reductor

B) 1. Toma 4 tubos de ensayo, numralos del 1 al 4
2. Coloca en cada uno de los tubos, 1 ml del reactivo de Fehling
3. Adiciona en el tubo no. 2, una gota de la solucin de glucosa; en el tubo no.. 3agrega
3 gotas y en el tubo no. 4, adiciona 5 gotas.
4. Procede a calentar los 4 tubos en bao Mara durante 5 minutos y observa lo que
sucede en cada tubo.


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Figura 3 Prueba negativa a Fehling con glucosa
C) 1.En un tubo de ensayo tomar 3 ml. de solucin de sacarosa y en otro tubo tomar 3
ml. de solucin de lactosa. Aadir 1 ml. de solucin de Fehling A y 1 ml. de solucin de
Fehling B en cada uno de los tubos.. Calentar los tubos al bao Maria o directamente
en un mechero de Laboratorio. Observa lo que sucede en los tubos. La reaccin ser
positiva si la muestra se cambia de color.

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Figura 4 Prueba positiva a lactosa con reactivo de Fehling

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Figura 5 Prueba negativa a Fehling con sacarosa
2. Tomar una muestra de sacarosa y aadir 10 gotas de Acido HCI al 10%. Calentar a la
llama de mechero durante un par de minutos (se recomienda antes de aplicar la
reaccin de Fehling, neutralizar con bicarbonato de sodio, Fehling sale mejor en un
medio que no sea cido).Deja enfriar y realizar la Prueba de Fehling. Observa el
resultado.

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Figura 6 Prueba negativa a Fehling con HCl
D)En un tubo de ensayo tomar 3 ml. de solucin de almidon.Aadir 5 gotas de Lugol.
Observa el resultado.Si la muestra se cambia de color la reaccin es positiva.


Figura 7 Prueba positiva lugol con almidn presento coloracin azul con muy poco lugol



Preguntas:

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1. Porque la glucosa da prueba de Fehling positivo y la sacarosa y almidnNO?
El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo
de un aldehdo. ste se oxida a cido y reduce la sal de cobre en medio alcalino, que
forma un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta reaccin es que la
forma aldehdo puede detectarse fcilmente aunque exista en muy pequea cantidad.


2. Porque la sacarosa da prueba de Fehling positivo despus de reaccionar con
cido hidroclrico diluido?
En nuestro caso esta prueba fue negativa pues requera un medio menos acido y la
prueba se realizaba despus del calentamiento, adems de que la temperatura
tambin influyo mucho.

3. Que es un azcar reductor y uno no reductor?. Cual es el reactivo que
tradicionalmente (mas comn) se emplea para saber si es reductor o no
reductor?.

Pues un azcar reductor es el que tiene la capacidad de reducir metales pesados y el
reactivo mas empleado es el de Feheling y Benedict

Observaciones
La prctica fue muy interesante y gracias a esta podemos conocer bien el concepto de
azcar reductor y no reductor.
Conclusiones
Estas pruebas pueden ser muy tiles para determinacin de azucares en la orina, y en
alimentos y en el caso de la prueba de almidn resulta til para ver que alimentos
tiene almidn de manera rpida.

Bibliografa:

1.Wilson, K., and Walker, J. 2000. Principles and Techniques of practical
Biochemistry. Fifth edition. Cambridge University Press.

2.Robert, JF., and White B.J. 1990. Biochemical techniques theory and practice.1st edition. Waveland Press, Inc.
USA.

3.Voet, D., and J.G. Voet. 1995. Biochemistry. Second Edition. John Wiley &Sons, Inc. U.S.A

4.Mathews, C.K., van Holde K.E. and Ahern K.G. 2000. Biochemistry. Third edition. Addison Wesley Longman Inc.
USA.

5.Stryer, L. 1995. Bioqumica. Cuarta edicin. Editorial Reverte. Barcelona
Espaa


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