Primeira aula

Apresentao da Disciplina

Caractersticas do sangue

Coleta de sangue

Extenso sangunea e colorao

Hemograma
Profa Elvira Shinohara
Caractersticas do sangue
Tecido lquido e renovvel
Plasma

Clulas sanguneas
Eritrcitos
Leuccitos
Plaquetas

Tipos de leuccitos
Neutrfilos
Eosinfilos
Basfilos
Linfcitos
Moncitos


Funo do sangue
Transporte (O
2
, CO
2
, nutrientes, metablitos, etc)
Defesa (fagocitose)
Homeostase (temperatura, controle eletroltico, etc)

D
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c
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p
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2
0
1
2

Clulas sanguneas
Eritrcitos ou Hemcias ou Glbulos vermelhos

Leuccitos
Neutrfilos
Eosinofilos
Basfilos
Linfocitos
Moncitos

Plaquetas
Granulcitos
Agranulcitos
Como visualizamos estas clulas?
Extenso sangunea
Colorao da extenso sangunea
Clulas sanguneas
Clulas sanguneas
Eosinfilo Neutrfilo Segmentado Linfcito
Plaquetas
Hemcias
Clulas sanguneas
Moncito Linfcito
Plaquetas
Hemcias
Clulas sanguneas
Basfilos
Fonte: Hoffbrand & Pettit, 1991
Clulas sanguneas
Clulas sanguneas
Volume sanguneo nas mulheres
Volume de sangue nas mulheres 61,9 mL/kg

Exemplo:
Mulher de 55 kg (peso corpreo)

Logo:
Volume de sangue 3.404 mL
O volume total de eritrcitos corresponde a 24,8 ml/kg de peso, ou
1.362 mL
(usou o Ht=40% para este clculo)
Volume sanguneo nos homens
Volume de sangue nos homens = 62,4 mL/kg

Exemplo:
Homem de 75 kg (peso corpreo)

Logo:
Volume de sangue 4.680 mL
O volume total de eritrcitos corresponde a 28,1 ml/kg de peso,
ou 2.106 mL
(usou o Ht=45% para este clculo)
Coleta do sangue
Locais de coleta de sangue
Puno venosa
Tubos vacuo para coleta
A cor da tampa indica qual anticoagulante est sendo utilizado
Cor roxa = EDTA
Cor cinza = fluoreto de sdio
Cor azul = citrato de sdio
Cor verde = heparina
Cor vermelha/marrom = sem anticoagulante
Anticoagulantes utilizados em hematologia
EDTA
K
3
EDTA e K
2
EDTA so os anticoagulantes mais adequados para a
rotina hematolgica (hemograma)
EDTA quela o clcio do sangue

utilizado na seguinte proporo: 10 L de anticoagulante/1mL de
sangue.

Vantagens:
no altera a morfologia das clulas (desde que a proporo
anticoagulante/sangue seja mantida)

no dilui o sangue e impede a agregao plaquetria
Anticoagulantes utilizados em hematologia
CITRATO DE SDIO
o anticoagulante de escolha para os testes de coagulao e prova
de agregao plaquetria.
O citrato de sdio reage com o clcio formando um composto
insolvel.

utilizado na seguinte proporo:
1 mL de anticoagulante/ 9 mL de sangue.
ou
0,5 mL de anticoagulante/ 4,5 mL de sangue

Desvantagem: altera a morfologia das clulas e dilui o sangue (uma
parte de anticoagulante para 9 partes de sangue).
Anticoagulantes utilizados em hematologia
HEPARINA
A heparina age pela formao de um complexo com a
antitrombina III plasmtica, que inibe a trombina e outros
estgios dos fatores de coagulao


Vantagens
no altera a morfologia das clulas e no dilui o sangue

Desvantagem: o preo do anticoagulante maior do que o EDTA
EXTENSO SANGUNEA
anlise da morfologia essencial para o diagnstico
Plasma

Clulas sanguneas
Clulas sanguneas
Extenso Sangunea
COLORAO SANGUNEA

Corantes do Tipo Romanovsky
So misturas que contem eosina e azul de metileno
dissolvidos em metanol

Na soluo envelhecida (aps dias do preparo do
corante), o azul de metileno se oxida em gradaes
diferentes, originando os azures de metileno



Colorao do tipo Romanowsky
O corante de Romanowsky (neutros) uma soluo
alcolica de um complexo de eosinato de azul e azures
de metileno

A diferena entre os vrios corantes derivados do corante
primitivo de Romanowsky acha-se na proporo que se
emprega de azul-de-metileno e de eosina, ou no mtodo
de tratamento do azul-de-metileno, antes de sua
combinao com a eosina



Princpio da colorao
Os componentes Azures em sua forma de dmeros ligam-
se a molculas aninicas, exemplo os grupos fosfato do
DNA

Os grupamentos cidos dos cidos nucleicos e protenas
do ncleo celular e do citoplasma tem afinidade pelo
corante bsico Azul- de -Metileno


Princpio da colorao
A eosina na forma de monmero se liga aos stios
catinicos das protenas

A presena de grupamentos bsicos na molcula de Hb
resulta na afinidade por corantes cidos, corando-se
pela eosina
Principio da colorao
CORANTE CLULA

Azul de Metileno cora Ncleo (DNA)
(bsico) (cido)

Eosina cora Hb
(cido) (bsico)
Nomenclatura usual
Colorao Ortocromtica: a clula cora-se com a mesma
cor do corante

Colorao Metacromtica: a clula toma uma cor
diferente daquela do corante
Nomenclatura usual

Estruturas celulares que se coram em pelo Azul de
Metileno so chamadas de basfilas (corando-se de azul)


Estruturas celulares que se coram pela Eosina so
chamadas de acidfilas (corando-se em rosa)



Tipos de corantes de Romanovsky
May-Grunwald ou Jenner,
Giemsa
Leishman
Wright
(Podem ser encontrados, no comrcio, na forma de reagentes
ou em solues j preparadas pelo fornecedor)
Clulas sanguneas
Contagem relativa dos leuccitos
realizada atravs da anlise morfolgica dos leuccitos, contando no
mnimo 100 leuccitos, diferenciando clula a clula.
Campo muito grosso
Campo adequado
Campo muito fino
Contagem relativa dos leuccitos
realizada atravs da anlise morfolgica dos leuccitos, contando no
mnimo 100 leuccitos, diferenciando clula a clula.
Campo muito
grosso
Campo adequado
Campo muito fino
Campos de leitura na extenso sangunea
Corpo da extenso sangunea
Regio grossa da extenso (cabea)
No deve ser feito contagem das clulas
nesta regio da extenso sangunea
Regio da cauda (muito fina)
No deve ser feito contagem das clulas nesta regio da extenso sangunea
Campos que NO devem ser analisados na
extenso sangunea
Regio muito fina
Cauda da extenso
Regio muito grossa
Cabea da extenso sangunea
Contagem relativa dos leuccitos
realizada atravs da anlise morfolgica dos leuccitos, contando no
mnimo 100 leuccitos, diferenciando clula a clula.
A
A
B
A Cerca de 25 clulas
B- Cerca de 50 clulas
Contagem relativa dos leuccitos
As clulas no tem distribuio uniforme na extenso sangunea
Cabea Corpo Cauda
Os linfcitos predominam no meio da extenso
Neutrfilos e moncitos predominam nas margens e na cauda

Problemas na colorao


Presena de precipitados do corante na extenso sangunea
corada
Uso de lminas sujas com gordura
Secagem durante o perodo de colorao
Lavagem inadequada ao trmino da colorao
Filtrao inadequada dos corantes (vai aparecer os
precipitados de corante)


Precipitados de corante
Colorao inapropriada
HEMOGRAMA
Plasma
clulas
HEMOGRAMA
Exame hematolgico mais solicitado

Consiste na anlise qualitativa e quantitativa das
clulas sanguneas

Fornece parmetros para controle e auxlio no
diagnstico das anemias, de vrios processos
infecciosos e de alteraes no nmero das plaquetas

Hemograma
Eritrograma (avalia srie vermelha)
Leucograma (avalia srie branca)
Contagem de plaquetas

Exemplo de um laudo de hemograma
eritrograma
leucograma
Contagem de
plaquetas
Bibliografia recomendada
. Dacie & Lewis. Practical Haematology. 8a Edition. Churchill
Livingstone.

Stiene-Martin EA, Lotspeich-Steininger, Koepke JA Clinical
Hematology- Principles, Procedures, Correlations. Editora
Lippincott, 2edio, 1998.

Lorenzi TF, DAmico E, Daniel MM, Silveira PAA, Buccheri V
Manual de Hematologia Propedutica e Clnica. Editora Medsi 3
edio, 2003.