1 Podem ser classificados quanto ao modo de conduo, forma de desenvolvimento do agente e suprimento de oxignio. 2 Classificao dos Processos Fermentativos Quanto forma de conduo Quanto forma de desenvolvimento do agente Quanto ao suprimento de oxignio Quanto forma de apresentao do meio Batelada ou Descontnuo Batelada Alimentada ou Semi-contnuo Contnuo Convencional Por cortes Com recuperao do inculo Convencional Cclica Com uma dorna Com mais de uma dorna Fermentao em meio lquido Com reciclo de clulas Fermentao em meio slido ou Semi-slido Em superfcie Em profundidade Sem aerao Aerado 3 So processos pelo qual o mosto (esterilizado previamente ou no) colocado na dorna de fermentao, o agente inoculado e, aps a fermentao, o mosto descarregado para separao/purificao do produto. Para uma nova fermentao, repete-se todas as etapas, desde o preparo do inculo. Um processo em regime de bateladas pode ser conduzido de trs formas: 4 Convencional (com um inculo para cada dorna) Cada dorna recebe um inculo novo, preparado especialmente para ela, que no reutilizado. a forma mais antiga e que apresenta menor risco de contaminao, porm um processo caro, o que faz com que seja usado somente para produtos nobres como vitaminas, esterides, antibiticos e enzimas. 5 Por cortes Prepara-se o inculo para a primeira dorna. Aps determinado tempo, transfere-se parte do mosto (j fermentado) para uma segunda dorna, completando-se o volume de ambas com mosto estril, e assim sucessivamente. Ou seja, utiliza-se apenas um inculo para uma srie de dornas, reduzindo o custo do processo. O nmero de cortes determinado pelo rendimento que pode comear a cair, devido a contaminao, ou a mutao do agente. o processo mais empregado no Brasil, sendo utilizado na fermentao do melao de cana. 6 Com recuperao de inculo Aps a fermentao, o mosto levado para a seo de separao e de recuperao do produto (centrifugao, filtrao, etc.), onde as clulas so separadas, tratadas e reativadas, sendo utilizadas como inculo para outra fermentao. No processo "Melle-Boinot" (5 a 9 recuperaes), largamente utilizado na indstria alcooleira, as leveduras, aps serem separadas do mosto, so tratadas com cido sulfrico (pH 2,5) para eliminao de bactrias e outros contaminantes, novamente centrifugadas e reutilizadas. H uma economia de cerca de 30% da matria-prima, para fazer o mesmo lcool que o processo em batelada convencional. 7 Muito usados em processos biossintticos onde o interesse a produo de biomassa. A alimentao durante a fermentao serve para manter a concentrao tima de substrato na dorna, evitando- se o "efeito Crabtree", pela necessidade de altas concentraes de substrato no incio. 8 Convencional Durante o tempo de fermentao, um ou mais nutrientes (normalmente, o substrato principal) so alimentados de forma contnua ou intermitente e, findo o tempo, todo o mosto descarregado. Ex: fabricao do fermento Fleischmann 9 Cclica A alimentao de substrato contnua ou intermitente, mas tambm h retirada parcial de mosto fermentado em tempos pr-estabelecidos. Pode-se conduzir um processo desta forma durante meses e o rendimento do mesmo determinar seu trmino. Ex: fabricao de vinagre pelo processo orleanense 10 Um processo contnuo sempre comea com uma batelada. Normalmente, a 2/3 da fase exponencial de crescimento tem incio o processo contnuo. O tipo de reator mais comum o CSTF ("continuous stirred tank fermenter"), ou de mistura completa. Quando se utiliza um fermentador de mistura completa com uma s dorna, enche-se o reator com mosto estril e inocula- se o meio. Aps determinado tempo, comea-se a alimentar continuamente o fermentador com mosto estril e a retirar mosto fermentado na mesma vazo. 11 Nestes processos o substrato no totalmente esgotado, saindo um pouco no produto. Por isso, o clculo e o controle da vazo devem ser precisos a fim de minimizar esta perda. Altas vazes provocam baixos tempos de residncia na dorna, o que provoca um empobrecimento em nmero de clulas ("wash out") alm de altas concentraes de substrato na sada. Por outro lado, vazes baixas reduzem a concentrao de substrato no reator, podendo provocar autlise das clulas e/ou diauxia. 12 Com uma nica dorna Usado quando se consegue dimensionar o fermentador de forma a conseguir baixas perdas de substrato na sada do fermentador. Com mais de uma dorna Empregado quando a matria-prima usada no processo cara e, necessrio que o mosto deixe a dorna com o mnimo de substrato no fermentado. Se a reduo da vazo, por exemplo, no for suficiente, pode-se conseguir a utilizao de forma mais completa usando-se mais de uma dorna em srie. Neste caso, o fermentado (vinho) passa a ser a alimentao de uma nova dorna. Os processos de fermentao em regime contnuo, podem ainda ser conduzidos com ou sem a recuperao do inculo. 13 Processo em superfcie Aplica-se para microrganismos aerbios estritos como bolores e algumas bactrias. O agente se desenvolve na superfcie do meio de cultura. um processo obsoleto, s utilizado em casos especiais, pois o tempo de fermentao elevado devido necessidade de difuso dos nutrientes do meio para a superfcie do mesmo. Ex: produo de cido ctrico por Aspergillus niger, de enzimas por Bacillus subtilis e de vinagre por espcies de Acetobacter. 14 Processo em profundidade Tambm chamado de submerso, aquele em que o agente desenvolve-se no seio do mosto, agitado. Devido ao maior contato mosto-microrganismo, so maiores as taxas de transferncia de massa, de nutrientes e de O 2 (quando necessrio), acarretando menores tempos de fermentao. Uma outra vantagem com relao ao fato de poderem ser conduzidos continuamente a depender da cintica da fermentao. Os processos cujos agentes so anaerbios estritos, facultativos ou microaerfilos, so, necessariamente, conduzidos em profundidade. Ex: fermentao acetonobutlica (anaerbia estrita), alcolica (facultativa) e ltica (microaerfila). 15 Processos aerados Usado para agentes aerbios estritos, ou seja, aqueles que tm o oxignio atmosfrico ser o aceptor de prtons (H + ). Ex: produo de cido ctrico, penicilina e vitamina B 12 . Tipos de aerao: A) Natural - o mosto exposto ao ar ambiente, como no caso da fermentao ctrica em bandejas. B) Forada - o ar introduzido na dorna, sob presso, borbulhando na massa lquida, onde o O 2 dissolvido, para ser posteriormente utilizado pelo agente da fermentao. Ex: processos submersos para produo de penicilina, cido ctrico e levedo prensado. 16 1.3.2 - Processos no aerados Aplica-se para agentes que desenvolvem metabolismo anaerbio, onde o aceptor de H + no o O 2 do ar atmosfrico e sim outras substncias como os nitratos e aldedos. Ex: produo de solventes orgnicos por Clostridium (anaerbio estrito) e de etanol por Saccharomyces (anaerbio facultativo). 17 Fermentaes em meio lquido Fermentaes em meio slido ou semi-slido 18 Vantagens mais produtivo, devido diminuio dos tempos mortos (enchimento, limpeza, esterilizao, esvaziamento), permitindo maior produo num mesmo tempo para o mesmo volume de reator; maior uniformidade do produto (microrganismos atuam em condies ambientais mais uniformes), o processo conduzido em regime estacionrio ("steady state"); menores custos com mo-de obra; maior facilidade de controle automtico; permite ser facilmente associado a outras operaes contnuas na linha de produo, como, por exemplo, a esterilizao contnua do mosto e a extrao contnua do produto obtido. 19 Desvantagens no esgotamento total do substrato (maior custo de matria-prima); maior possibilidade de contaminao devido a dificuldade de se manter as condies de esterilidade do processo por longos perodos de tempo; possibilidade de mutao do microrganismo agente do processo. 20