EL MICROSCOPIO I. INTRODUCION El conocimiento de las estructuras del ser vivo est basado casi totalmente en el estudio con el microscopio. El microscopio ptico es un instrumento que permite la observacin de objetos y detalles de estructuras tan pequeas que no podran ser observadas a simple vista. Con el microscopio nuestro grado de visibilidad se ampla en cientos o miles de veces, gracias a un conjunto de lentes, dispuestos convenientemente. Las principales dificultades en la observacin y estudio de estructuras biolgicas son su reducido tamao y su transparencia a la lu visible. !ado que el microscopio permite superar estas dos dificultades, su uso y el conocimiento de los principios y t"cnicas en microscopa, resultan fundamentales para el desarrollo de la investigacin en ciencias biolgicas. II. OBJETIVOS #. $dentificar y describir las partes del microscopio ptico %compuesto&. '. Comprender las caractersticas del microscopio. III. MATERIALES #. (icroscopio pticos '. )ractica sobre el microscopio compuesto IV. FUNDAMENTACION El microscopio es un instrumento ptico que amplifica la imagen de un objeto pequeo. (ediante un sistema de lentes y fuentes de iluminacin se puede *acer visible un objeto microscpico. Los microscopios pueden aumentar de #++ a cientos de miles de veces el tamao original. E,isten dos tipos de microscopios- el ptico y el electrnico. En el microscopio ptico el aumento del objeto se consigue usando un sistema de lentes que manipula el paso de los rayos de lu entre el objeto y los ojos. El microscopio electrnico utilia un rayo de electrones controlado por un campo magn"tico. Los diversos elementos que e,isten en la naturalea, presentan tamaos, formas y composiciones distintas, la mayora de ellas pueden verse, algunas a simple vista, y otras mediante instrumentos. )ara calcular el n.mero de aumentos totales de una muestra- N de aumentos de una muestra n aumentos de! o"u!ar # n aumentos de! o$%et&'o El microscopio ptico tiene un lmite resolucin de cerca de '++ nm %+.' /m&. Las c"lulas observadas bajo el microscopio ptico pueden estar vivas o fijadas y teidas. 0 MICROSCOPIA Blgo. RONALD H. ROSALES MEZA (.). PARTES DEL MICROSCOPIO COMPUESTO El microscopio lumnico de campo claro %microscopio compuesto, de lu transmitida, fotnico& figura ++ consta de tres partes de sistemas- mecnico, de magnificacin y de iluminacin. 1u perfeccionamiento *a permitido el avance en el estudio de las estructuras celulares. 2 continuacin se describen los sistemas indicados. (.).). SISTEMA MEC*NICO Es el arman que sostiene a los otros sistemas y consta del pie, columna o brao, tubo ptico, el mecanismo de movimiento del tubo o de la platina, pinas o carro y el revlver. Los modelos actuales de microscopios poseen variaciones en la ubicacin de las partes. PIE- 1irve como base del microscopio y tiene un peso suficiente para dar estabilidad al aparato. En los microscopios antiguos tena forma de *erradura o de trpode pero en la actualidad suele ser una plataforma rectangular. En "l se integra la fuente luminosa. BRA+O- Es una columna perpendicular al pie. )uede ser arqueado o vertical y une al pie con el tubo. 1irve para coger el microscopio y puede sostener el tubo, el mecanismo de movimiento, revolver y la platina. TUBO- Es una cmara oscura unida al brao mediante una cremallera. 3iene el revolver con los objetivos en su parte inferior y los oculares en el e,tremo superior. SISTEMA DE MOVIMIENTO DE ENFO,UE- en algunos casos produce el movimiento vertical del tubo para el enfoque y la observacin de la muestra, en otros desplaa verticalmente la platina tambi"n para el enfoque de las muestras. Consta de tornillo macrometricos y microm"tricos, que forman dos sistemas, juntos o separados seg.n el modelo. a. TORNILLOS MACROM/TRICO- 1on tornillos de enfoque, mueven la platina *acia arriba y *acia abajo. El macrom"trico lo *ace de forma rpida. Consta de un eje y dos discos grandes que giran con rapide por lo que se utilian para el enfoque de la muestra con cualquier objetivo. $. TORNILLOS MICROM/TRICO- 1on tornillos de enfoque, mueven la platina *acia arriba y *acia abajo. El microm"trico lo *ace de forma lenta. Consta de un eje y dos discos pequeos que giran con lentitud permitiendo perfeccionar el enfoque de la muestra %aclara o mejora la nitide de la imagen& durante el uso de cualquier objetivo. PLATINA- Es una plataforma *oriontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparacin, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminacin situada por debajo. !os pinas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplaamiento permite mover la preparacin de delante *acia atrs o de iquierda a derec*a y viceversa. En la parte posterior de uno de los laterales se encuentra un nonius que permite fijar las coordenadas de cualquier campo ptico. 0 MICROSCOPIA Blgo. RONALD H. ROSALES MEZA REVOLVER- Es un sistema que coge los objetivos, y que rueda para utiliar un objetivo u otro. (.).0. SISTEMA DE MA1NIFICACION Este sistema forma y magnifica la imagen de la muestra por el microscopio. Consta de lentes soportados por un arman %armadura&. Comprende el ocular y los objetivos. OCULARES- Estn colocados en la parte superior del tubo. 1e denominan as, porque estn muy cercanos al ojo. 1u funcin es la de captar y ampliar la imagen formada en en los objetivos. En los modernos microscopios *ay dos oculares 2m&"ros"o3&os $&no"u!ares. que estn unidos mediante un mecanismo que permite ajustar la distancia interpupilar. En general los ms utiliados son los de #+4 %producen un aumento de #+ veces&. OBJETIVOS- Estn colocados en la parte inferior del tubo insertados en una piea metlica, denominada revolver, que permite cambiarlos fcilmente. 5eneran una imagen real, invertida y aumentada. Los mas frecuentes son los de 0, #+, 0+, y #++ aumentos. Este .ltimo se llama de inmersin ya que para su utiliacin se necesita utiliar aceite de cedro sobre la preparacin. En la superficie de cada objetivo se indican sus caractersticas principales, aumento, apertura num"rica, y llevan dibujado un anillo coloreado que indica el n.mero de aumentos %rojo 04, amarillo #+4, aul 0+4 y blanco #++4&.
(.).4. SISTEMA DE ILUMINACION 6ajo la platina *allamos el sistema de iluminacin del microscopio y desplaando por un pion para contribuir a la regulacin de la cantidad de lu y lleva a un portafiltro. El sistema proporciona la lu necesaria para formar las imgenes y consecuentemente para la observacin de las muestras. El sistema consta de espejo, el diafragma7iris y el condensador. EL ESPEJO- se ubica debajo del condensador y sirve para iluminar el campo del microscopio, al reflejar a la muestra la lu de la fuente o al ambiente. Consta de una cara plana 0 #. 8cular '. 6rao 9 soporte del tubo :. )latina 0. 2juste macrom"trico y microm"trico ;. 2juste de altura de platina <. )ie =. >uente de lu ?. Condensador @. )inas #+. 8bjetivo ##. Aevolver #'. 3ubo MICROSCOPIA Blgo. RONALD H. ROSALES MEZA %espejo plano& para los casos de abundante lu natural y de un lado cncavo %espejo cncavo& para la lu artificial o lu escasa. El uso de las caras del espejo mes variable. )osee amplios movimientos para captar la lu del ambiente. En la actualidad los microscopios llevan un portalmparas que reemplaa al espejo. EL DIAFRA1MA 2d&a5ra6ma7&r&s.- regula la cantidad de lu que pasa por el condensador. Consta de un grupo de laminillas imbricadas movidas por una palanca, que cierra o abre el orificio para el paso de a lu. 2 veces es reemplaado por un disco con perforaciones de diferente tamao. FUENTE DE ILUMINACI8N- 1e trata de una lmpara *algena de intensidad graduable. Est situada en el pie del microscopio. 1e enciende y se apaga con un interruptor y en su superficie e,terna puede tener una especie de anillo para colocar filtros que facilitan la visualiacin. CONDENSADOR- El condensador es un sistema de lentes situadas bajo la platina su funcin es la de concentrar la lu generada por la fuente de iluminacin *acia la preparacin. El condensador consta de un tubo corto %armadura& y una lente gruesa o sistema de lentes convergentes sostenidas por una armadura. En el interior del condensador e,iste un diafragma %iris& cuya funcin es limitar el *a de rayos que atraviesa el sistema de lentes eliminando los rayos demasiado desviados %regula la cantidad de lu y ajusta la 2pertura Bum"rica.. (.0. Tra9e"tor&a de! Ra9o de Lu: a tra';s de! M&"ros"o3&o El *a luminoso procedente de la lmpara pasa directamente a trav"s del diafragma al condensador. 5racias al sistema de lentes que posee el condensador, la lu es concentrada sobre la preparacin a observar. El *a de lu penetra en el objetivo y sigue por el tubo *asta llegar el ocular, donde es captado por el ojo del observador. (.4. Pro3&edades de! M&"ros"o3&o )oder separador. 3ambi"n llamado a veces poder de resolucin, es una cualidad del microscopio, y se define como la distancia mnima entre dos puntos pr,imos que pueden verse separados. El ojo normal no puede ver separados dos puntos cuando su distancia es menor a una d"cima de milmetro. En el microscopio ptico, el poder separador m,imo conseguido es de +,' d"cimas de micra, y en el microscopio electrnico, el poder separador llega *asta #+ ngstrom. )oder de definicin. 1e refiere a la nitide de las imgenes obtenidas, sobre todo respecto a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la correccin de las aberraciones de las lentes utiliadas. 2umento del microscopio. En t"rminos generales se define como la relacin entre el dimetro aparente de la imagen y el dimetro o longitud del objeto, esto quiere decir que si el microscopio aumenta #++ dimetros un objeto, la imagen que estamos viendo es #++ veces mayor que el tamao real del objeto. )ara calcular el aumento de un microscopio, basta multiplicar el aumento del ocular por el aumento del objetivo. )or ejemplo, si estamos utiliando un ocular de #+4 y un objetivo de 0;4, el aumento a que estamos viendo la preparacin ser- #84 , 0;4 C 0;+4, lo cual quiere decir que la imagen del objeto est ampliada 0;+ veces. (.(. Cam3o de! M&"ros"o3&o 1e denomina Dcampo del microscopioD al crculo visible que se observa a trav"s del microscopio. 3ambi"n podemos definirlo como la porcin del plano visible observado a trav"s del microscopio. 1i el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es inversamente 0 MICROSCOPIA Blgo. RONALD H. ROSALES MEZA proporcional al aumento del microscopio. )ara medir el dimetro del campo del microscopio con cualquiera de los objetivos se utilia el micrmetro, al que se *ar referencia en el siguiente punto. V. CUESTIONARIO ECul es la funcin del tornillo microm"tricoF EGu" son objetivos secosF EGu" son objetivos de inmersinF Complete el siguiente cuadro. 8bjetivo 2umento 8cular 7 2umento Aesolucin 1eco d"bil 0, #+ H 0 0+ 1eco d"bil #+, #++ 1eco fuerte #+ H 0+ 0++ !e inmersin #+ H #++ E)ara qu" se utilia el aceite de cedro, cuando usamos el objetivo de inmersinF 8bserve el esquema del microscopio y seale sus partes. 0 MICROSCOPIA Blgo. RONALD H. ROSALES MEZA 0