1

PROPOSTA APRESENTADA AO MAPA PELO GRUPO DE TRABALHO

SOBRE MICOTOXINAS EM PRODUTOS DESTINADOS ALIMENTAO
ANIMAL.


O Ministro de Estado da Agricultura, Pecuria e Abastecimento, instituiu o Grupo de
Trabalho sobre Micotoxinas em produtos destinados alimentao animal (DOU de 25
de maio de 2006 Seo 2, pg.5) com as seguintes atribuies:
I. Avaliar a situao brasileira quanto aos nveis de micotoxinas nos produtos
destinados alimentao animal com foco na segurana de alimentos;
II. Definir critrios para o controle de micotoxinas de interesse em produtos destinados
alimentao animal; e
III, Reavaliar o uso de adsorventes de micotoxinas como aditivo autorizado na
alimentao animal.


Consideraes iniciais:

1. O impacto das diferentes micotoxinas sobre a sade animal varia
consideravelmente podendo causar at mesmo intoxicao aguda fatal. As
enfermidades causadas pelas micotoxinas (micotoxicoses) so caracterizadas
por sndromes difusas, porm, com predomnio de leses em determinados
rgos, como fgado, rins, tecido epitelial e sistema nervoso central,
dependendo do tipo de toxina. Existe, tambm, a possibilidade de ocorrncia
simultnea de duas ou mais micotoxinas nos alimentos, o que pode conduzir
potencializao de seus efeitos txicos sobre o organismo susceptvel.

2. No Brasil, diversas micotoxinas tm sido identificadas em alimentos destinados
ao consumo humano e animal. Contudo, deve-se destacar a importncia das
aflatoxinas, fumonisinas, ocratoxina A, zearalenona e tricotecenos, no apenas
pela ocorrncia freqente, mas tambm pelo elevado potencial toxignico
demonstrado por elas em animais de interesse zootcnico e animais de
companhia.

3. Devido aos problemas que as micotoxinas acarretam, muitos pases tm
estabelecido medidas para o controle da contaminao por micotoxinas nos
alimentos para o consumo humano e animal. Um resumo de limites de
micotoxinas em produtos destinados a alimentao animal, estabelecidos por
autoridades de vrios paises, est apresentado no Anexo I.

4. O estabelecimento de limites legais para micotoxinas nos alimentos dos
animais, no objetiva apenas a proteo da sade dos animais. H duas
razes adicionais e importantes que justificam o estabelecimento dos limites e
regulamentos que controlam micotoxinas em rao animal: (a) proteger a
sade do consumidor de alguns produtos de origem animal, que podem ser
contaminados com resduos de micotoxinas ou metablitos de micotoxinas
como, por exemplo, aflatoxina M1 no leite; (b) perdas econmicas ocasionadas
pelos efeitos adversos exercidos por algumas micotoxinas sobre a
produtividade como, por exemplo, na produo de carne, leite e ovos. Um
exemplo de prejuzo econmico causado por micotoxinas o efeito adverso do
desoxinivalenol (tambm conhecido como DON ou vomitoxina) em sunos. A
ocorrncia desta toxina pode levar a recusa do alimento pelos animais, diarria
e, portanto, reduo no ganho de peso.

2
5. Especialistas estimam uma perda anual de 140 milhes de dlares devido
reduo de ganho de peso das aves nos EUA devido contaminao da rao
por micotoxinas Na Austrlia, a perda na avicultura de 4 a 20 milhes de
dlares.

6. Dados mais recentes estimam que as perdas anuais devido ingesto das
raes contaminadas por micotoxinas nos Estados Unidos e Canad, so da
ordem de US$ 5 bilhes.

Com base nos documentos e evidencias cientificas disponveis, incluindo estudos
sobre a avaliao toxicolgica (efeitos txicos das micotoxinas, relao dose-efeito
valores de NOEL, LOEL e FEL e taxa de converso de aflatoxina B1 para M1) das
micotoxinas em animais e levantamentos de ocorrncia no Brasil, Os critrios
utilizados para o estabelecimento dos LMT foram: baseados em dados toxicolgicos e
de ocorrncia:
Proponho: O Grupo de Trabalho avaliou documentos e evidencias cientificas
disponveis, incluindo estudos sobre a avaliao toxicolgica (efeitos txicos das
micotoxinas, relao dose-efeito valores de NOEL, LOEL e FEL e taxa de converso
de aflatoxina B1 para M1) das micotoxinas em animais e levantamentos de ocorrncia
no Brasil:

(a) efeitos txicos das micotoxinas (aguda, crnica, sub-crnica e reprodutiva)
Anexo II;

(b) relao dose-efeito (valores de NOEL, LOEL,FEL) Anexo III;

(c) taxa de converso de aflatoxina B1 para M1 Anexo III ;

(d) dados de ocorrncias em produtos destinados a alimentao animal (Dados
LAMIC/UFSM) Anexo IV.



O grupo de trabalho prope:

1. PROPOSTA DE REGULAMENTAO: ESTABELECIMENTO DE LMTs

1 Estabelecer limites mximos de tolerncia (LMT) para milho e trigo, incluindo seus
sub-produtos, conforme a Tabela 1:

Tabela 1: Limites Mximos de Tolerncia (LMT) para ingredientes destinados a
alimentao animal

Micotoxinas Descrio do produto Limite mximo
de tolerncia
(g/kg)
Aflatoxinas B1, B2, G1, G2 Milho gro e sub-produtos 20

Fumonisinas B1 e B2 Milho gro e seus sub-produtos 10.000
Trigo gro e seus sub-produtos 10.000

Deoxinevalenol Trigo gro e seus sub-produtos 4.000

3
O limite mximo de tolerncia (LMT) para aflatoxinas totais em milho gro e
sub-produtos ser o mesmo valor j estabelecido no Brasil para consumo
humano (20 g/kg) e para Fumonisinas: 10 mg/kg
Estabelecer para o trigo e seus sub-produtos LMT para DON: 4 mg/kg e
Fumonisinas: 10 mg/kg.

2 Estabelecer LMT para as micotoxinas: Aflatoxina B1, Fumonisinas B1 e B2,
Zearalenona, DON e Ocratoxina A nas raes e concentrados, conforme a Tabela 2.

Tabela 2: Limites Mximos de Tolerncia (LMT) para raes destinadas a
alimentao animal

Micotoxinas Descrio do produto Limite mximo
de tolerncia
(g/kg)
Aflatoxinas B1 Raes e concentrados para
ruminantes adultos, exceto
bovinos em lactao
50
Raes e concentrados para
demais espcies, inclusive bovinos
em lactao
20
Raes, concentrados e outros
alimentos completos para animais
de todas as espcies nas fases
pr-inicial e inicial
10

Fumonisinas B1 e B2 Raes e concentrados para
monogstricos, exceto aves
domesticas
5.000
Raes e concentrados para aves
domesticas
10.000

Zearalenona Raes e concentrados para
ruminantes em lactao
500
Raes e concentrados para
sunos adultos
100
Raes e concentrados para
sunos nas fases pr-inicial, inicial
e marrs
50

Desoxinevalenol Raes e concentrados para
sunos
1.000
Raes e concentrados para aves
e animais de companhia
4.000
Ocratoxina A* Raes e concentrados para
sunos e alimentos para ces
50
Raes e concentrados para
frangos de corte
100

*Nota: os nveis para OTA so baseados principalmente em segurana alimentar com
relao a exportao de carne suna e avcola


3 Considerando que os dados relativos presena das toxinas T2, HT2 e DAS em
produtos destinados alimentao animal so limitados, e que os levantamentos
disponveis no Brasil indicam uma baixa prevalncia, o GT recomenda que no sejam
estabelecidos LMT neste momento para estas micotoxinas. Entretanto, visto que estas
4
micotoxinas podem afetar algumas espcies animais, o grupo ressalta a necessidade
de novos levantamentos que avaliem a presena desta classe de contaminantes.


2. METODOLOGIA ANALTICA

O preparo de amostras e a metodologia analtica para determinao dos teores de
micotoxinas nos ingredientes, raes e concentrados para animais, devero respeitar
os critrios descritos abaixo:


2.1 Preparo de Amostras
2.1.1 Cuidados
Considerando que a distribuio das micotoxinas nos produtos no homognea,
as amostras devem ser preparadas e, sobretudo, homogeneizadas em sua
totalidade, com o mximo cuidado.
Durante os procedimentos para anlises de aflatoxinas, a luz solar deve ser
evitada na medida do possvel, uma vez que as aflatoxinas decompem-se
progressivamente sob a incidncia de luz ultravioleta.

2.2 Tratamento da amostra recebida pelo laboratrio
Cada amostra deve ser finamente moda e misturada utilizando procedimento que
comprovadamente garanta uma homogeneizao completa.

2.3 Mtodos de anlises utilizados pelos laboratrios e requisitos para o controle
laboratorial
2.3.1 Definies
r = Repetitividade: grau de concordncia entre resultados de medies sucessivas
de um mesmo mensurando efetuadas sob as mesmas condies de medio
(condies de repetitividade: mesmo procedimento de medio, mesmo
observador, mesmo instrumento de medio utilizado nas mesmas condies,
mesmo local, repetio em curto perodo de tempo). A repetitividade pode ser
expressa, quantitativamente, em funo das caractersticas da disperso dos
resultados. Pode ser calculado como r = 2,8 x s
r

s
r
= desvio padro, calculado a partir dos resultados gerados em condies de
repetitividade, em nmero mnimo de 8 repeties.
DPR
r
= desvio padro relativo, calculado a partir dos resultados gerados em
condies de repetitividade [(s
r
/ x) x 100].
R = Reprodutibilidade: grau de concordncia entre resultados de medies de um
mesmo mensurando efetuadas sob condies variadas de medio (condies
variadas podem incluir: princpio de medio, mtodo de medio, observador,
instrumento de medio, padro de referncia, local, condies de utilizao,
tempo). A reprodutibilidade pode ser expressa, quantitativamente, em funo das
caractersticas da disperso dos resultados. Pode ser calculado como R = 2,8 x s
R

S
R
= desvio padro, calculado a partir dos resultados gerados em condies de
reprodutibilidade, em nmero mnimo de 8 repeties.
5
DPR
R
= desvio padro relativo, calculado a partir dos resultados gerados em
condies de reprodutibilidade [(s
R
/ x) x 100].
R
I
= Reprodutibilidade intermediria: grau de concordncia entre resultados de
medies de um mesmo mensurando efetuadas sob condies variadas de
medio em um mesmo laboratrio (condies variadas podem incluir: princpio de
medio, mtodo de medio, observador, instrumento de medio, padro de
referncia, condies de utilizao, tempo). A reprodutibilidade intermediria pode
ser expressa, quantitativamente, em funo das caractersticas da disperso dos
resultados. Pode ser calculado como R = 2,8 x s
RI

S
RI
= desvio padro, calculado a partir dos resultados gerados em condies de
reprodutibilidade intermediria, em nmero mnimo de 8 repeties.
DPR
RI
= desvio padro relativo, calculado a partir dos resultados gerados em
condies de reprodutibilidade intermadiria [(s
RI
/ x) x 100].

2.3.2 Requisitos gerais
Os mtodos de anlise utilizados para o controle oficial devem ter os seguintes
critrios estabelecidos: a) exatido; b) aplicabilidade (matriz e faixa de
concentrao); c) limite de deteco; d) limite de quantificao; e) preciso
(repetitividade e reprodutibilidade); f) recuperao; g) seletividade; h) linearidade e
i) incerteza de medio.

2.3.3 Requisitos especficos
2.3.3.1 Critrios de desempenho
Os laboratrios podem selecionar mtodos desde que estes atendam aos
critrios descritos no Quadro I.
e tenham sido submetidos ao processo de credenciamento junto ao MAPA,
constando do escopo do laboratrio, definido em termos de mtodo, matriz e
micotoxina.

Notas referentes aos critrios de desempenho
Os valores de preciso so calculados a partir da equao de Horwitz,
ou seja:
DPR
R
= 2
(1-0,5 log C)

em que:
DPR
R
o desvio padro relativo, calculado a partir dos resultados
gerados em condies de reprodutibilidade [(s
R
/ x) x 100].
C a faixa de concentrao (ou seja, 1 = 100g/100g, 0,001 =
1000mg/kg).
Trata-se de uma equao geral referente preciso, independente da micotoxina
e da matriz, dependente apenas da concentrao para a maior parte dos mtodos
de anlise.



6



Tabela 3 Critrios de desempenho dos mtodos analticos para determinao
dos nveis de micotoxinas em produtos destinados alimentao animal

Micotoxina
Nvel
( g/kg)
DPR
r
DPR
R

Recuperao
%
Aflatoxinas
B
1
, B
2
, G
1
, G
2
*
<1
0,66 x
DPR
R

Recomendado: valor
derivado da equao de
Horwitz
Mximo: 2 x o valor
derivado da equao de
Horwitz
50 a 120
1 - 10 70 a 110
>10 80 a 110
Ocratoxina A
<1 < 40 < 60 50 a 120
1 - 10 < 20 < 30 70 a 110
Desoxinivalenol
>100 - <500 < 20 < 40 60 a 110
>500 < 20 < 40 70 a 120
Zearalenona
<50 < 40 < 50 60 a 120
>50 < 25 < 40 70 a 120
Fumonisinas B
1
e
B
2

<500 < 30 < 60 60 a 120
>500 < 20 < 30 70 a 110
* estes critrios aplicam-se para B
1
e para a soma de B
1
, B
2
, G
1
e G
2.


2.3.3.2 Abordagem adequao finalidade
A abordagem de adequao finalidade pode ser utilizada como alternativa,
definindo um nico parmetro, uma funo de adequao, para avaliar a
aceitabilidade dos mtodos de anlise. Uma funo de adequao uma funo
de incerteza que especifica nveis mximos de incerteza considerados como
adequados finalidade.
O laboratrio pode utilizar um mtodo que produza resultados at uma incerteza
padro mxima. A incerteza padro mxima pode ser calculada pela frmula:
Uf = raiz de (LOD/2)
2
+ ( x C)
2
em que:
Uf representa a incerteza padro mxima (g/kg),
LOD representa o limite de deteco do mtodo (g/kg),
um fator numrico constante, dependente do valor de C (conforme
Tabela 4),
C corresponde concentrao de interesse (g/kg).
Se um mtodo analtico produzir resultados cuja incerteza de medio seja inferior
incerteza padro mxima, esse mtodo ser considerado to adequado quanto
um mtodo que atenda aos critrios de desempenho indicados no item 3.3.1.
7


Tabela 4 Valores de em funo de C

C (g/kg)
< 50 0,2
51 - 500 0,18
501 - 1000 0,15
1001 - 10000 0,12
> 10000 0,1

2.3.4 Estimativa da incerteza de medio, clculo da taxa de recuperao e
registro dos resultados
O resultado analtico deve ser registrado, corrigido ou no pela recuperao. O
modo de registro e o nvel de recuperao devem ser indicados. O resultado
analtico corrigido pela recuperao deve ser utilizado para efeitos de controle da
conformidade.
O resultado analtico deve ser reportado como x U, sendo que x o resultado
analtico e U a incerteza de medio expandida.
U corresponde incerteza de medio expandida, utilizando um fator de
abrangncia de 2, que permite obter um nvel de confiana de cerca de 95%.
A estimativa da incerteza de medio poder ser realizada pelo mtodo
considerado mais adequado pelo laboratrio [5].

2.3.5 Normas de qualidade aplicveis aos laboratrios
Os laboratrios devem cumprir o disposto nas normativas de credenciamento da
Coordenao Geral de Apoio Laboratorial CGAL e devem implementar sistema
da qualidade baseado na Norma NBR ISO/IEC 17025 Requisitos Gerais para a
Competncia de Laboratrios de Ensaio e Calibrao.
Sugiro:
Os laboratrios devem implementar sistema da qualidade baseado na Norma NBR
ISO/IEC 17025 Requisitos Gerais para a Competncia de Laboratrios de Ensaio
e Calibrao.
Os laboratrios que pretendam prestar servio para o MAPA na anlise de
amostras fiscais devero cumprir o disposto nas normativas de credenciamento da
Coordenao Geral de Apoio Laboratorial CGAL/SDA.

Texto elaborado com base nos documentos:
[1] Regulamento (CE) n
o
401/2006 de 23 de fevereiro de 2006, que estabelece os
mtodos de amostragem e de anlise para o controle oficial dos teores de
micotoxinas nos gneros alimentcios (publicado no Jornal Oficial da Unio
Europia, em 09.03.2006).
8
[2] Regulamento (CE) n
o
882/2004 de 29 de abril de 2004, relativo aos controles
oficiais realizados para assegurar a verificao do cumprimento da legislao
relativa aos alimentos para animais e aos gneros alimentcios e das normas
relativas sade e ao bem estar dos animais (publicado no Jornal Oficial da Unio
Europia, em 28.05.2004).
[3] Orientaes sobre Validao de Mtodos de Ensaios Qumicos DOC-CGCRE-
008, reviso 01, maro de 2003, Instituto Nacional de Metrologia, Normalizao e
Qualidade Industrial INMETRO.
[4] Vocabulrio Internacional de Termos Fundamentais e Gerais de Metrologia
VIM, Portaria INMETRO 029 de 1995, 2
a
edio, Braslia, 2000.
[5] Report on the Relationship between analytical results, measurement
uncertainty, recovery factors and the provisions of EU Food and Feed Legislation,
with particular reference to community legislation concerning contaminants in food
and undesirable substances in feed.


3. PLANOS DE AMOSTRAGEM: Proposta para procedimentos de coleta e
preparo de amostra de raes visando deteco de micotoxinas


1. Definies

1.1. Partida ou Lote: quantidade de produto identificvel e entregue de uma
vez, que apresenta, conforme estabelecido pelo agente responsvel, com
caractersticas comuns, tais como a origem, a variedade, o tipo de embalagem, o
embalador, o expedidor ou a marcao.
1.2. Sub-lote: parte ou frao definida de um grande lote para fins de
amostragem. Cada sub-lote deve ser fisicamente separado e identificvel.
1.3. Produto embalado: produto que se apresenta contido ou envolto em uma
embalagem individual ou coletiva.
1.4. Pilha: forma de apresentao de um lote na qual as unidades ou volumes
encontram-se sobrepostos.
1.5. Laboratrio oficial: Laboratrio Nacional Agropecurio do Ministrio da
Agricultura, Pecuria e Abastecimento (Decreto 5741/2006 Art. 42 1
0
)
1.6. Amostra composta ou global: quantidade de produto resultante da
amostragem formada pela reunio de todos os incrementos (amostras simples),
tomadas ou coletadas do lote ou sub-lote com a finalidade de realizar os controles
correspondentes, devendo ser representativa e apresentar as mesmas caractersticas
do lote do qual se originou.
1.7. Incremento de amostra ou amostra simples: quantidade definida de
produto retirada num s ponto do lote ou sub-lote para formar a amostra composta ou
global.
1.8. Amostra de trabalho ou sub-amostra: amostra resultante da subdiviso
da amostra composta ou global, aps moagem (no caso de material peletizado),
homogeneizao e sub-amostragem.
1.9. Amostra analtica: alquota extrada da amostra de trabalho (sub-
amostra), destinada anlise laboratorial.
1.10. Contra-prova: alquota extrada da amostra de trabalho (sub-amostra),
destinada ser mantida em poder da fiscalizao e do fiscalizado.
1.11. Plano de amostragem: conjunto de procedimentos planejados que
permite fazer tomada de amostras representativas de um determinado lote ou sub-lote.
9
1.12. Amostragem: procedimento de tomada, retirada ou extrao de amostra
de um lote ou sub-lote determinado, mediante critrios normativos preestabelecidos no
plano de amostragem adotado.


2. Disposies Especficas (procedimentos e critrios):

2.1. Condies de Apresentao dos Lotes:
2.1.1. Lote em movimento (situao ideal): a amostragem deve ser realizada
preferencialmente antes do empacotamento ou a formao de lotes ou partidas de
rao. A amostragem nesta situao deve ser realizada preferencialmente de forma
automtica, entretanto a amostragem manual utilizando instrumentos apropriados
poder ser empregada.
A utilizao de equipamentos automticos para coleta de amostras deve ser
feita respeitando os critrios de tamanho de amostra global em funo do tamanho do
lote ou partida de rao, descritos no Quadro 1 e 2. Os equipamentos automticos
devem permitir a amostragem de todo o fluxo de rao de forma eqitativa Figura 1.
Equipamentos automticos do tipo desviadores de fluxo que amostram apenas uma
parte do fluxo do material no devem ser utilizados.
A utilizao de equipamentos manuais (caneca e amostrador tipo pelicano)
para coleta de amostras deve ser feita respeitando os critrios de nmero de
incremento amostrais e tamanho da amostra global, descritos no Quadro 1 e 2. Os
equipamentos manuais devem ser empregados de forma a coletar durante seu uso
pontos representativos de todo o fluxo de material.



Figura 1. Esquema de um amostrador automtico de produtos em movimento.


10
2.1.2. Lote esttico (ensacado ou a granel): quando o lote ou partida de
rao estiver esttico (ensacado ou a granel) equipamentos e procedimentos
especficos devem ser considerados.
Para lotes ou partidas de produtos a granel acondicionados em reservatrios
tipo carrocerias de veculos a amostragem poder ser realizada atravs de sondas
pneumticas ou amostradores manuais tipo caladores duplo respeitando o nmero de
incrementos amostrais e tamanho da amostra global, em funo do tamanho do lote
ou partida, como descritos nas Tabelas 5 e 6.
As sondas e caladores utilizados devem proporcionar o alcance de toda a
profundidade das cargas de forma a ser evitado camadas de onde no ser retirado
material para compor as amostras incrementais.
Para produtos ensacados os lotes devero ser organizados de modo a permitir
que o amostrador circunde toda a pilha ou monte ou possa acessar todas as faces do
mesmo (dever ter igual oportunidade de amostrar cada saco ou pilha existente ou o
maior nmero possvel de sacos ou unidades, no podendo haver miolo ou faces
sem acesso). As pilhas devem estar sobre estrados ou paletes de madeira e devero
ter no mximo 2m de largura (dupla fiada), 2m de altura e 4m de comprimento, com
afastamento entre pilhas, laterais e paredes, de 0,80 a 1,00m, com a boca dos sacos
ou parte da costura voltada, preferencialmente, para a parte externa do lote, de modo
a facilitar sua abertura e a coleta dos incrementos ou amostras elementares.

Os equipamentos de amostragem neste caso consistir de caladores do tipo
simples ou duplo que devem ser utilizados de forma que na operao de amostragem
a maior parte da extenso do material contido nas embalagens seja alcanado (Figura
2).


Figura 2. Esquema mostrando uso correto de caladores durante amostragem de
embalagens



Tabela 5. Nmero de amostras incrementais em funo do tamanho do lote

Massa do Lote em Nmero de amostras Massa da amostra global
11
toneladas (T) incrementais (kg)
0,05 3 1
> 0,05 a 0,5 5 1
>0,5 a 1 10 1
>1 a 3 20 2
>3 a 10 40 4
>10 a 20 60 6
>20 a 50 100 10




Tabela 6. Subdiviso de lotes em sub-lotes em funo da massa do lote

Massa do Lote em
toneladas (T)
Massa do lote ou
nmero de sub-
lotes
Nmero de
amostras
incrementais
Massa da amostra
global (kg)
1.500 500 toneladas 100 10
>300 e <1.500 3 sub-lotes 100 10
50 e 300 100 toneladas 100 10


Observaes

a) A massa do incremento amostral ser de no mnimo 100g podendo ser maior em
funo do nmero de incrementos e a massa da amostra global, entretanto seja qual
for a massa da incremento amostral ela deve ser constante durante a coleta de
amostras.

b) Se os sub-lotes puderem ser fisicamente separados, cada lote deve ser subdividido
em sub-lotes de acordo com o Quadro 2. Dado que o peso do lote nem sempre um
mltiplo exato dos sub-lotes, o peso dos sub-lotes pode exceder o peso indicado at
um mximo de 20%. Se o lote no estiver ou no puder ser fisicamente separado em
sub-lotes, deve colher-se do lote um mnimo de 100 amostras incrementais.


3. Subamostragem da amostra global

Para amostras de raes na forma de peletes recomendado proceder uma
moagem ou triturao do material da amostra global antes de iniciar-se a operao de
homogeneizao e subamostragem.
Para amostras de rao no peletizadas o material poder ser diretamente
homogeneizado e subamostrado.
A homogeneizao do material modo ou de rao no peletizada poder ser
realizada mecnica ou manualmente.
A subamostragem dever ser efetuada em quarteadores do tipo canaletas
invertidas e a subamostra de trabalho dever ter uma massa mnima que permita a
diviso em trs pores de no mnimo 500g que iro constituir-se em contra-amostra
do fiscalizado, contra-amostra da fiscalizao e amostra de laboratrio.
Pode ser tambm utilizado para subamostragem o equipamento
homogeneizador e subamotrador tipo Boener.
12
A amostra de laboratrio e as contra-provas devem ser armazenadas e
transportadas rapidamente para o laboratrio oficial com os devidos cuidados para
evitar alteraes.
Deve-se, ao proceder moagem e subamostragem das amostras, atentar para
a limpeza dos equipamentos utilizados a fim de evitar a possibilidade de contaminao
cruzada entre amostras.


Recomendaes baseadas no Regulamento CE 401/2006 de 23 de fevereiro de
2006 da Comisso Europia (Jornal Oficial da Comunidade Europia, L 70/12, 2006).









4. PROPOSTA PARA REGISTRO DE ADITIVOS ANTI-MICOTOXINAS

4.1 Linhas gerais :


Prope-se a alterao da denominao Aditivo Adsorvente para Aditivo
Anti-Micotoxinas (AAM) que inclui os produtos que, adicionados em
alimentos para animais, so capazes de adsorver, inativar, neutralizar ou
biotransformar as micotoxinas;

Que a empresa garanta a inocuidade dos produtos seguindo critrios definidos
no pargrafo 4.2.5;

Que a empresa demonstre eficincia do produto mediante teste in vitro, que
o controle de qualidade na elaborao dos AAM, pela medio da capacidade
de adsoro das micotoxinas, sempre especificando a tcnica que se utilizou
para a quantificao;

Que a empresa demonstre eficincia do produto mediante teste in vivo, que
a nica opo que demonstra a eficincia do adsorvente.

Portanto, para conceder o registro de um produto, dever ser apresentada toda
a documentao tcnica que garante que o produto incuo para o animal e
tenha sido avaliado para cada micotoxina em cada espcie animal que se quer
obter registro. O estudo in vivo dever ser integralmente conduzido no Brasil
seguindo os protocolos definidos no pargrafo 4.2.4.


4.2 Documentao exigida no primeiro registro ou na renovao de registro:

4.2.1 Descrio detalhada do produto, incluindo, nome, origem, composio quali-
quantitativa e outras informaes que o MAPA considerar pertinentes

13
4.2.2 Relatrio de ensaio in vitro, demonstrando a capacidade anti micotoxina, com
critrio de controle de qualidade do produto, para cada micotoxina, em pH 3 e 6 (ver
item 5), seguindo o protocolo a seguir (Tabela 7)


Tabela 7. Avaliao de aditivos anti-Micotoxinas: Exigncias mnimas para os
ensaios analticos in vitro, por cada pH:

Tubo* AAM
1
Concentrao de micotoxinas
AFLA, ZEA, OTA FB, DON
1 0 1,0 ppm 2,5 ppm
2 25 1,0 ppm 2,5 ppm
3 50 1,0 ppm 2,5 ppm
4 75 1,0 ppm 2,5 ppm
5 100 1,0 ppm 2,5 ppm


1
% da dose mxima recomendada pelo fabricante
* Mnimo de 3 repeties/tubo


4.2.3 (Comprovar a ao anti-Micotoxinas em funo da dose de incluso do
produto na dieta)

4.2.4 Relatrio de ensaio in vivo, demonstrando eficincia para cada micotoxina em
cada espcie animal pleiteada para o uso do produto, seguindo o protocolo mnimo
anexo (item 6);

Tabela 8. Avaliao de aditivos anti-Micotoxinas: Exigncias mnimas para os
ensaios in vivo: Modelo de dietas experimentais para avaliar a eficcia de um
adsorvente in vivo.

Dietas AAM Micotoxina

1* 0 0
2 100%
1
0
3 0 (X) mg/kg
4 100% (X) mg/kg
_______________________________________________________________


1
% da dose mxima recomendada pelo fabricante
* mnimo de X repeties/dieta por espcie , toxina e tempo


Tabela 9. Avaliao de aditivos anti-Micotoxinas: Efeitos txicos de micotoxinas
selecionados para avaliao in vivo:

Micotoxina Nvel na dieta
(mg/kg)
Efeitos

Aflatoxinas 1-3 Alteraes do desempenho (ganho de
peso, consumo de alimento e converso
alimentar). Alteraes de protenas
sricas e/ ou alteraes em enzimas
hepticas Alteraes peso relativo do
14
fgado e/ou rins
Aflatoxina B1 5* Alteraes de AFM1 no leite
Zearalenona 0,25* 2 Alteraes na vulvometria. Alteraes
do comprimento e peso do trato
reprodutivo de fmeas.
Ocratoxina A 2 4 Alteraes do desempenho Alteraes
de protenas sricas e/ou alteraes do
cido rico Alteraes do peso do
fgado e rins
Desoxinivalenol 5-15 Alteraes do desempenho Alteraes
de protenas sricas
Fumonisina B1 50-200 Alteraes do desempenho. Alteraes
de protenas sricas. Alteraes da
esfinganina/ esfingosina. Alteraes no
peso relativo do fgado e dos pulmes
(sunos)

* Nvel empregado no concentrado


Numero de unidades experimentais

- Aves: mnimo 6 unidades experimentais de 10 aves
- Sunos, bovinos, sunos, cavalos e ces e gatos: mnimo 6 animais por
tratamento


Tabela 10. Avaliao de aditivos anti-Micotoxinas: Modelo para apresentao
dos resultados de eficcia de um aditivo anti-Micotoxinas in vivo;


Dietas Parmetro avaliado
1 X,x + dp *

2 Y,y + dp *

3 Z,z + dp *

4 W,w + dp *

_______________________________________________________________
* Indicar a inferncia e o mtodo estatstico utilizado no estudo
Dp: Desvio padro


4.2.5 Laudo analtico evidenciando a inocuidade do produto quanto presena de
contaminantes qumicos e microbiolgicos estabelecidos seguindo os limites a seguir:


Para aditivos contendo aluminosilicatos

Contaminantes Limite
Dioxinas e furanos 0,75 ng OMS-PCDD/F-TEQ/kg
1

Pb 15 ppm
2

15
Cd 5 ppm
3

Hg 0,1 ppm
3

As 12 ppm
2

Salmonella sp Ausncia em 25 g

1
Diretiva 100/2003/ CE de 31/10/2003
2
Diretiva 57/2003/CE de 17/06/2003
3
Diretiva 32/2002/CE de 07/05/2002


Para aditivos sem componentes a base de aluminosilicatos

Salmonella sp Ausncia em 25 g


4.3 Critrios para controle de qualidade do fabricante de AAM:

Anlise in vitro por lote de produto, realizada de acordo com os critrios do
item 4.2.2

Anlise do produto para verificao da presena de contaminantes
qumicos e microbiolgicos, de acordo com o seu sistema de garantia da
qualidade.


4.4 Critrios para fiscalizao:

Avaliar o controle de qualidade do fabricante
Inspeo e monitoramento nas fbricas nacionais e internacionais
Coleta de amostra para analise fiscal, quando pertinente.



5. SUGESTES FINAIS:

O Grupo de Trabalho sugere que o MAPA:

1. Estabelea Programas de Monitoramento, sobre a presena de
micotoxinas em alimentos para animais e para tanto, adeque a
capacidade analtica da rede oficial e credenciada;

2. Incentive o desenvolvimento de pesquisas sobre Avaliao toxicolgica
de micotoxinas, em vrias espcies animais bem como, pesquisas
relacionadas a aditivos Anti-Micotoxinas, no somente in vitro mas
principalmente in vivo considerando que o ensaio in vivo a nica opo
para demonstrar a eficincia destes aditivos;

3. Incentive pesquisas relacionadas com biomarcadores, identificando
parmetros que podero facilitar o diagnstico sobre a exposio dos animais
s micotoxinas.

4. Incentive a implementao de Boas Praticas Agrcola e Armazenagem no
intuito de minimizar a produo de micotoxinas nas cadeias produtivas do
agronegcio.
16

5. Estabelea os LMT aqui apresentadas na forma de recomendaes, pelo
perodo de 18 meses, tornando-os obrigatrias apos este prazo.

6. Adote os critrios para o registro novo destes aditivos, a partir da data de
publicao da norma e que os registros antigos tenham prazo de 12
meses para se adequar nova norma.


O Grupo de Trabalho sugere que a ANVISA estabelea LMT para as
micotoxinas em alimentos e ingredientes destinados ao consumo humano,
em especial aqueles a base de milho e trigo e para as micotoxinas: OTA,
AFLA, DON, FUMONISINA, ZEARALENONA.



Assinatura de todos os membros