Anda di halaman 1dari 12

Translation

Biochemistry Experiment
Group 2
Isolation of Natural Produts: Trimyristin and Cholesterol
Created by:
Ni Putu Nia Repli Suandewi !!!"#"!#$% & 'I ()
Ni *etut Sepmiarni !!!"#"!#$+ & 'I ()
C,E-ISTR. E/0C(TI1N /EP(RT-ENT
2(C03T. 12 -(T,E-(TICS (N/ N(T0R(3 SCIENCES
0NI'ERSIT(S PEN/I/I*(N 4(NES,(
SIN4(R(5(
6#!%
Isolasi Bahan Alam: Trimyristin dan Kolesterol
/alam percobaan ini7 anda a8an
Mendapatkan pengalaman dalam menggunakan beberapa teknik yang digunakan
untuk mengisolasi zat zat kimia dari bahan-bahan alam.
Mengisolasi trimyristin, lemak, dari pala.
Mengisolasi steroid dari kolesterol pada kuning telor.
Pendahuluan
Makhluk hidup merupakan makhluk yang luar biasa dalam kemampuan mereka untuk secara
khusus dan efisien mensintesis senyawa organik yang rumit. Banyak dari bahan-bahan
organik yang sering kita gunakan sehari-hari adalah produk alami, termasuk zat yang
digunakan sebagai (1 penyedap rasa (peppermint, spearmint, kayu manis, (! makanan
(karbohidrat, lemak, protein, (" polimer (karet, kapas, sutra, (# bahan bangunan (kayu,
($ obat (penisilin, streptomisin, dan (% &itamin.
PR1SE/0R E*SPERI-EN
(9 Isolasi Trimyristin dari Pala
'mumnya, lemak hewani atau lemak nabati dan minyak adalah gliserida (triester
dari gliserol dan asam lemak (long-chain rantai pan(ang. )an(ang rantai dan tingkat
(enuh pada asam lemak berbeda, tetapi umumnya mengandung 1! sampai 1* atom
karbon. +liserida yang memiliki persentase asam (enuh tinggi berupa padatan pada suhu
kamar dan disebut lemak. ,emak yang tersusun atas persentase asam tak (enuh lebih
tinggi, memiliki titik leleh yang lebih rendah, berupa cairan pada suhu kamar, dan
disebut minyak.
)ala sangat unik karena (umlah kandungan lemak dan minyak pada dasarnya terdiri
dari gliserida tunggal yang disebut -rimyristin. .truktur senyawa trimyristin, gliserol dan
gliserida adalah sebagai berikut/
0ita tau bahwa asam lemak yang terkandung dalam -rimyristin pada semua kondisi
yang sama yang tidak untuk semua gliserida, seperti yang ditun(ukkan oleh rumus umum.
glycero
l
a
glyceride
trimyristin
.elain itu, asam lemak -rimyristin merupakan (enuh. Maka, trimyristin berbentuk padat
pada suhu kamar.
1antai karbon pan(ang asam lemak dari lemak dan minyak memberikan
hidrokarbon seperti sifat molekulnya. ,emak dan minyak mudah larut dalam pelarut
nonpolar seperti heksana adalah contoh dari sifat ini.
3an:8ah 8er;a
1. +unakan penimbang plastik dan sentigram atau timbangan elektronik agar secara
akurat menimbang sampel pala dengan massa sekitar 1 gram. 2atat massa sampel
dalam tabel !*.1 pada lembar data dan laporan.
!. Masukan sampel yang telah ditimbang ke dalam gelas kimia $3 m, dan tambahkan $
m, he4ane. +erakan gelas untuk mencampur isi dan tutup mulut gelas dengan kaca
arlo(i untuk mencegah penguapan.

". Biarkan campuran teraduk rata selama 13 menit dengan sesekali diputar-putar.
.ementara campuran didiamkan, lihat ,angkah $.
#. .etelah campuran didiamkan selama 13 menit, saring menggunakan kertas saring
kering dan kumpulkan filtrat (cairan di tempat yang kering, gelas kimia $3-m,. 2atat
massa gelas kosong di tabel !*.1.
$. 5nda akan menguap heksana dengan salah satu dari dua metode pada ,angkah %.
6ntah menggunakan air panas atau lemari asam dengan aliran udara yang baik akan
digunakan. )eriksa dengan instruktur 5nda tentang metode yang digunakan. 7ika air
panas diperlukan, beker(alah dan rangkai alat di lemari asam, menggunakan !$3 m,
beaker (lihat +ambar 8.19 mengabaikan tabung sedangkan campuran 5nda
didiamkan.
%. 7ika 5nda akan menggunakan air panas untuk menguapkan heksana dari filtrat,
biarkan filtrat di area ker(a 5nda saat 5nda memanaskan air di kap sampai mendidih.
0emudian matikan api dan gunakan air panas untuk menguapkan heksana dari filtrat
dalam gelas kimia $3 m,.
PERINGATAN KESELAMATAN: HEXANE MUDAH TERBAKAR. PASTKAN AP TDAK BERADA D
DEKATN!A KETKA ANDA ME"AKUKAN BA#AN N DA"AM PER$%BAAN.
PEMBUANGAN: KERTAS &"TER !AN# MEN#ANDUN# RESDU PA"A: BARKAN UDARA
KERN# KEMUDAN DMASUKKAN KE DA"AM KERAN'AN# SAMPAH.
PERINGATAN KEAMANAN: DA"AM KEADAAN SEMENTARA #E"AS !AN# BERS &"TRAT
HEKSANA HARUS DBA(A DEKAT RUAN# ASAM.
+unakan pen(epit buret untuk memegang $3 m, beaker stabil di bak air panas. 7ika
tidak ada air yang digunakan, hanya biarkan gelas tertutup dalam ruang asam selama
$ sampai 13 menit.
:. 0etika semua heksana telah menguap, bersihkan gelas kimia dari air panas atau kap
mesin dan memungkinkan untuk diisi udara dan dingin ((ika itu dipanaskan selama "
menit. 0eringkan bagian luar gelas dengan handuk (ika basah.
*. -imbang gelas kimia dingin dan -rimyristin bersama-sama pada timbangan yang
sama yang digunakan pada ,angkah 1. 2atat massa gabungan pada -abel !*.1.
8. +unakan spatula untuk mengikis -rimyristin mentah kering dari bagian bawah dan
sisi pinggiran gelas kimia dan letakkan produk pada tabung reaksi 13 cm yang kering
dan bersih.
13. -ambahkan !,$ m, ($3 tetes aseton ke tabung reaksi untuk mencuci kotoran dari
-rimyristin mentah. 5duk isi tabung, kemudian sisihkan.
11. .etelah -rimyristin diatasi, menggunakan penetes plastik untuk menghapus aseton
cair dari tabung reaksi, meninggalkan padatan di belakangnya.
-
1!. -ambahkan !3 tetes dari heksana ke dalam -rimyristin di tabung reaksi dan
merangsang untuk melarutkan padatan. .etelah padatan larut, tuang hasil larutan ke
kaca arlo(i bersih dan biarkan heksen menguap.
1". Membiarkan -rimyristin di udara kering sampai berbentuk bubuk.
1#. .edangkan padat dikeringkan, merangkai 133-m, gelas air untuk digunakan dalam
penentuan titik leleh produk (lihat gambar 1%.1. titik leleh -rimyristin murni adalah
$$
3
-$%
3
2.
1$. .etelah padat kering, letakkan sekitar " mm dari padatan dalam sebuah kapilari titik
lebur. Mengukur dan mencatat titik leleh dalam tabel !*.1
ASET%N MUDAH TERBAKAR. 'AN#AN ME"AKUKAN PR%SES MEN$U$ N 'KA N!A"A AP
DEKAT.
MEN#HAPUS ASET%N D KARAM) B"AS DEN#AN AR !AN# MEN#A"R
HEKSEN MUDAH TERBAKAR. TDAK MEMBUAT N!A"A AP TERTENTU D DEKATN!A KETKA
KAMU ME"AKUKAN "AN#KAH
D#UNAKAN KAP"AR TTK "E"EH D DA"AM (ADAH PE$AH*#E"AS. PR%DUK BER"EBH
KERAN'AN# SAMPAH

B9 Isolasi dari *olesterol *unin: Telur
2holesterol is the best known and most abudant steroid in the body. ;t is a precursor for many
of the important naturally occurring steroids, including male and female se4 hormones, bile
salts, and hormones of the adrenal glands.
0olesterol adalah steroid yang paling dikenal dan paling melimpah dalam tubuh. .teroid
adalah prekursor penting untuk banyak steroid alami, termasuk hormon seks pria dan wanita,
garam empedu, dan hormon dari kelen(ar adrenal.
O H
CH
3
CH
3
CH
C H
3
CH
2
CH
2
CH
2
CH
2
CH CH
3
CH
3
Cholesterol
0etidaklarutan yang tinggi dari kolesterol dalam air kadang-kadang menyebabkan ia keluar
dari larutan. <alam aliran darah, proses ini memberikan kontribusi untuk pengerasan arteri,
dan di kantong empedu itu mengarah pada pembentukan batu empedu. 0olesterol diisolasi
dari batu empedu mengandung se(umlah kecil steroid lain yang berhubungan dengan
kolesterol.
Langkah - Langkah
1. +unakan hidangan plastik berat dan sebuah sentigram atau keseimbangan elektronik
untuk secara akurat menimbang sampel kuning telur yang dimasak dengan massa
sekitar ! g. 2atat massa dalam tabel !*." <ata dan ,aporan ,embar.
!. Masukan sampel yang ditimbang ke dalam gelas 133 m, dan tambahkan $ ml !-
propanol.
5duk campuran dengan spatula untuk memecah kuning telur. -utup mulut gelas dengan kaca
arlo(i untuk mencegah penguapan.
+*PR%PAN%" MUDAH TERBAKAR. TDAK MEMBUAT N!A"A AP TERTENTU D DEKATN!A
KETKA KAMU ME"AKUKAN "AN#KAH N.
". Biarkan campuran selama 13 menit dengan sesekali berputar-putar sementara 5nda
menyiapkan air mandi panas di lemari asam. +unakan gelas !$3 ml untuk. 7ika
sebelumnya 5nda menyiapkan air sambil melakukan bagian 5, air sama dapat
digunakan di sini.
#. .etelah campuran didiamkan selama 13 menit, saring melalui kertas saring kering.
0umpulkan filtrat (cair di timbang dalam gelas $3-m,, berat yang telah dicatat
dalam tabel !*."
$. +unakan pen(epit untuk memegang gelas $3-m, dalam air. )anaskan air sampai
mendidih dan terus panaskan sampai seluruh !-propanol telah menguap dari gelas.
%. 0etika penguapan selesai, keluarkan gelas kimia dari air dan biarkan dingin selama $
menit. .ampngkan bagian luar yang kering dan timbang dengan kolesterol yang
terkandung pada keseimbangan yang sama yang digunakan pada ,angkah 1. 2atat
massa dalam -abel !*."
:. -ambahkan !3 tetes asam asetat glasial dengan residu dalam gelas timbang.
5duk gelas dengan hati-hati untuk melarutkan residu padat dari sisi dan bawah gelas.
-utup mulut gelas dengan kaca arlo(i dan simpan larutan untuk digunakan dalam Bagian 2
dari percobaan.
C9 0;i 3ieberman Burchard untu8 *olesterol
Langkah Langkah
1. Masukan # tetes dari 1= larutan kolesterol yang bersih, keringkan 13-cm tabung
reaksi. Masukan # tetes ekstrak kolesterol yang disimpan dalam gelas bersih pada
,angkah : dari Bagian B, keringkan 13-cm tabung tes kedua.
!. -ambahkan # tetes anhidrida asetat dan 1 tetes asam sulfat pekat ke masing-masing
tabung reaksi.
". 7ika kolesterol hadir dalam tabung pereaksi, perubahan karakteristik warna ter(adi
sebagai akibat dari penambahan reagen ini. .ebuah warna gelap awal berubah
PADATAN D KERTAS SARN#: B"AS DEN#AN AR) KEMUDAN "ETAKKAN KE DA"AM
KERAN'AN# SAMPAH
ASAM ASETAT #"A$A" AKAN MEN!ERAN# 'ARN#AN KERAS. #UNAKAN DEN#AN
PERA(ATAN. 'KA K%NTAK DBUAT) $U$ DAERAH K%NTAK DEN#AN AR DN#N.
KEDUA "ARUTAN ANHDRADA ASETAT DAN ASAM SU"&URK PEKAT ADA"AH K%R%S& DAN
HARUS D #UNAKAN PER"NDUN#AN. 'KA TERKENA "AN#SUN#) DEN#AN SEKETKA B"AS
DAERAH !AN# TERKENA DEN#NA AR DN#N.
men(adi warna biru-hi(au dalam 1 sampai ! menit. 2atatan dan lihat dalam -abel !*."
warna larutan dalam ! menit setelah menambahkan anhidrida asetat dan asam sulfat.

(9 Isolasi Trimyristin dari Pala
1. +unakan massa gelas kosong dan massa gelas ditambah minyak mentah, -rimyristin
kering dicatat dalam -abel !*.1 untuk menghitung massa -rimyristin terisolasi. 2atat
massa ini dalam -abel !*.!
!. +unakan massa -rimyristin terisolasi dihitung pada ,angkah 1 dan massa pala dicatat
dalam -abel !*.1 untuk menghitung persentase -rimyristin terisolasi. 2atat
persentase pada -abel !*.!
". ;ngat bahwa titik leleh -rimyristin murni adalah $$-$%
3
2. perhatikan titik leleh
-rimyristin terisolasi dicatat dalam -abel !*.1 dan mengklasifikasikan kemurnian
produk yang diisolasi sebagai sangat baik, baik, atau buruk. 2atat klasifikasi 5nda
dalam -abel !*.! dan men(elaskan alasan 5nda gunakan untuk sampai pada
klasifikasi.
B9 Isolasi *olesterol dari *unin: Telur
1. +unakan massa data yang dicatat dalam -abel !*." untuk menghitung massa
kolesterol terisolasi. 2atat massa ini dalam -abel !*.#
!. +unakan massa dihitung pada ,angkah 1 dan massa kuning telur dicatat dalam -abel
!*." untuk menghitung persentase kolesterol diisolasi dari kuning telur. 2atat
persentase dihitung dalam -abel !*.#
TABUN# PEREKAS TERDAPAT D (ADAH BER"ABE" ,MSA". +-) D#UNAKAN U' BAHAN
K%"ESTER%" BA#AN $. ,KE"EBHAN K%"ESTER%" "ARUTAN DSAPKAN D (ADAH
BER"ABE" ,MSA". +-) K%"ESTER%" DSAPKAN PADA BA#AN $..
28 PERCOBAAN 28
Pre- Lab Review
1. 5pakah semua bunyi peringatan khusus yang diberikan dalam percobaan> <aftar
semua yang diberikan.
!. 5pakah semua petun(uk pembuangan khusus diberikan dalam percobaan> <aftar
semua yang diberikan
". ?at kimia atau benda apa yang dengan teliti ditimbang pada bagian 5>
#. )ada bagian 5, apakah dua cara alternati&e yang dian(urkan untuk penguapan
heksana>
$. )ada bagian 5, apakah kondisi khusus yang ditun(ukan mengunakan kertas saring
untuk menyaring campuran pala-heksana>
%. Bagaimana -rimytripsin awal dicuci pada bagian 5>
:. )ada bagian B, ?at atau ob(ek apa yang ditimbang secara akurat>
*. Bagaimana padatan kuning telur dipisahkan adari !-propanol yang digunakan untuk
mengekstrak kolesterol pada bagian B>
8. 5pa yang dilakukan pada kolesterol setelah diisolasi pada bagian B>
13. )ada bagian 2, apa hasil dari u(i ,ieberman-Burchad yang mengindikasikan
keberadaan kolesterol>
Data dan Lembar Laporan
-EN4IS13(SI PR1/0* (3(-: TRI-.TRISIN /(N *13ESTER13
(9 -en:isolasi Trimyristin dari Pala
Tabel 6$9! (data)
Massa dari contoh pala
Massa dari gelas $3-m,
Massa mentah, trimyristin kering dengan
gelas
-itik leleh dari isolasi trimyristin
Tabel 6$96 (laporan)
Massa dari isolasi trimyristin
)resentase dari isolasi trimyristin
0emurnian dari isolasi trimyristin
5lasan dari penggolongna kemurnian
B9 -en:isolasi *olesterol dari *unin: Telur
Tabel 6$9" (data)
Massa dari contoh kuning telur
Massa dari gelas $3-m,
Massa yang diisolasi, kolesterol kering
dengan gelas
@arna dari larutan kolesterol 1=
@arna dari sari larutan kolesterol
Tabel 6$9% (laporan)
Massa dari kolesterol diisolasi
)resentase dari isolasi kolesterol
Pertanyaan
1. 5ndaikan kamu membuat sebuah kesalahan di bagian 5 dan mencatat $3-m,
massa glesa yang lebih besar kesalahan, bagaimana kesalahan yang akan
mempengaruhi presentase perhitungan akir dari isolasi trimyristin>
a. 0esalahan akan menaikkan itu.
b. 0esalahan akan menurunkan itu.
c. 0esalahan tidak akan menimbulkan efek terhadap itu.
7elaskan (awaban anda/
!. Aang mana mengikuti hasil dari tidak berhasil untuk mencuci dengan baik
trymyristin sebagaimana digambarkan di bagian 5, langkah 13 dan 11>
a. )ersentase dari isolasi yang akan direduksi
b. -itik leleh dari produk yang diisolasi akan men(adi rendah
c. )roduk isolasi akan men(adi tongkang pada warna
7elaskan (awaban anda/
". .eperti pada bagian 5, langkah :, anda lupa mengeringkan gelas imia, dan pada
gelas tersebut terdapat air pada bagian luar gelas ketika ditimbang pada langkah *.
5pakah hal ini akan mempengaruhi perhitungan persentase trimyristin yang
diisolasi>
a. Meningkat b. Menurun c. tidak berpengaruh
7elaskan (awaban anda/
!. .eperti pada bagian B, seorang siswa lupa menimbang gelas kimia $3-m, kosong
sebelum menggunakannya untuk mengumpulkan kolesterol. 0esalahan itu tidak
dikettahui sampai siswa membersihkan setelah semua percobaan selesai. .iswa
discard larutan kolesterol digunakan pada bagian 2, mengeringkan gelas kimia
secara hati-hati, kemudian menimbangnya dan mencatat masa dari kelas kimia $3-
m, di table !*.". Bagaimana hal seperti ini dapat mempengaruhi perhitungan dari
persentase isolasi kolesterol>
a. 0emungkinan membuat persentase isolasi kolesterol terlalu tinggi.
b. 0emungkinan membuat persentase isolasi kolesterol terlalu rendah.
c. 0emungkinan tidak mempengaruhi
7elaskan (awaban anda/
". .eperti pada u(i ,ieberman-Burchard yang telah dilakukan pada sample dari
filtrate yang diperoleh di langkah # bagian B. 5pakah hasil u(i menun(ukkan
positif sesuai harapan anda>
a. Aa b. -idak
7elaskan (awaban anda/