Anticuerpos recombinantes para la diagnstico e inmunoterapia.
Roso L, Mnera J, Muoz L. INTRODUCCIN Los anticuerpos monoclonales son glucoprotenas especializadas que hacen parte del sistema inmune, producidas por las clulas B, con la capacidad de reconocer molculas especficas (antgenos). han probado ser tiles en el diagnstico y tratamiento de enfermedades infecciosas, inmunolgicas y neoplsicas en el mercado se encuentran cerca de 29 anticuerpos monoclonales aprobados por la Food and Drug Administracin (FDA) de los Estados Unidos para uso en humanos 2 Escala de tiempo 4 Repaso: estructura general de los anticuerpos.
DIFERENCIA ENTRE ANTICUERPO MONOCLONAL Y POLICLONAL
Anticuerpo policlonal: quiere decir que el sistema fabrica anticuerpos contra un rango amplio de estructuras presentes en el antgeno que involucran tanto a la regin de unin al antgeno como a las zonas efectoras.
Anticuerpo monoclonal: MacFarland Burnet (premio Nobel 1960) postul la teora clonal de la generacin de anticuerpos es decir la generacin de molculas idnticas en su estructura y en su capacidad de reconocer a un antgeno. Cada clula plasmtica B (clon B) fabrica un solo tipo de anticuerpo.
5 CARACTERISTICAS DE ANTICUERPOS MONOCLONALES 1. Mayor homogeneidad.
2. Reproductibilidad de sus efectos
3. Mayor capacidad potencial de seleccionar los mejores anticuerpos en afinidad, tipo de reconocimiento. Antgeno Diferentes eptopes del Ag El mAb reconoce solo un eptope Fuentes de antgenos 6
PRODUCCION DE ANTICUERPOS MONOCLONALES 7 8 1. Detectar y cuantificar niveles de expresin de genes. 2. Determinar la localizacin de la expresin de genes a nivel celular, subcelular y en los tejidos. 3. Identificar las interacciones moleculares con los productos de genes, por ejemplo, la inmuno- precipitacin. 4. Identificacin de marcadores fenotpicos nicos de un tipo celular particular; sta es la base de la moderna clasificacin de linfocitos y fagocitos monucleares. 5. Inmunodiagnstico: en el diagnstico de muchas enfermedades infecciosas y sistmicas al permitir la diagnostico de antgenos y anticuerpos especficos en la circulacin o tejidos usando anticuerpos monoclonales en inmunoensayos, y como marcadores especficos para el diagnstico porimgenes. 6. Diagnstico y tratamiento de tumores especficos: los anticuerpos monoclonales se usan en la diagnostico de tumores mediante tcnicas inmunolgicas de diagnstico y para la inmunoterapia de tumores in vivo. 7. Anlisis funcionales de molculas de la superficie celular o de protenas secretorias. 8. En la investigacin inmunolgica, los anticuerpos monoclonales que se unen a las molculas de la superficie celular que puedan estimular o inhibir funciones celulares particulares, son una herramienta invaluable para definir la funcin de molculas, incluidos los receptores para antgenos. 9. En el estudio de los procesos de interaccin hospedero- agente infeccioso, las aplicaciones de los anticuerpos monoclonales son prcticamente ilimitadas no slo en los estudios funcionales sino, tambin, en la seleccin de posibles blancos teraputicos y de candidatos para vacunas o el desarrollo de anticuerpos anti-anticuerpos (antiidiotipos) como vacunas.
ANTICUERPOS QUMERICOS con la tecnologa del ADN recombinante, en la cual los genes que codifican la regin variable de las Ig de ratn se unen con genes que codifican la regin constante humana para, luego, ser insertados en clulas de mieloma.
9 http://www.faba.org.ar/fabainforma/363/acta01.html 10 http://www.faba.org.ar/fabainforma/363/acta01.html Se generan bibliotecas de los genes de las regiones variables de las cadenas pesadas y ligeras a partir de un repertorio de clulas B que no han sido reclutadas por el sistema inmune por medio de tcnicas de biologa molecular, como el PRC, utilizando cebadores inespecficos. B: se cortan estas secuencias por medio de enzimas de restriccin y se unen por medio de PRC dando como resultado un repertorio de secuencias de genes que codifican fracciones variables de cadena simple (ScFv). C: estos genes de ScFv se pegan a la secuencia gentica de un bacterifago para ser expresados junto con una protena de superficie para, luego, hacer la seleccin de los bacterifagos que presenten mayor afinidad por el antgeno a estudio y, luego, transfectarlos a bacterias para amplificarlos y producir las ScFv. 11 las Ig nativas procedentes de ratones transgnicos, a los cuales se les han reemplazado los genes de las regiones variables por humanas, en las que los ratones llevan a cabo la recombinacin de los genes VDJ que son los responsables de la codificacin y ensamblaje de las Ig; estos anticuerpos producidos tienen una alta afinidad con secuencias terminales humanas.
12 Los anticuerpos aviares (IgY) presentan algunas ventajas con relacin a los anticuerpos IgG de mamferos, debido a su fcil obtencin y purificacin y su bajo costo de produccin. op21 tipo de Inmunoglobulin a Lnea de Reproductoras 1 Lnea de Reproductoras 2 IgY 31.7 3.79 26.2 3.15 IgA 0.66 0.13 0.90 0.11 IgM 0.74 0.06 0.96 0.09 IgY Anti-NDV 31.3 4.52 36.0 4.73 IgY Anti-IBV 40.7 3.98 35.5 3.93 13 14 Gracias 15 Bibliografa
Dopico Jos Ral, lvarez Mario, Juvier Ana Isabel, Trujillo Janette, Reyes Giselle, Pico Mara Cristina et al . Anticuerpos IgY en ensayos de ltex-aglutinacin. Vaccimonitor [revista en la Internet]. 2012 Ago [citado 2014 Mayo 20] ; 21(2): 10- 15. Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025- 028X2012000200003&lng=es. Revista QumicaViva. Curso de Introduccin al conocimiento cientfico experimental. Revista del Depto. de Qumica Biolgica, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad de Buenos Aires, Argentina. [Revista en la Internet]. 2009 diciembre [citado 2014 Mayo 20] Disponible en: http://www.quimicaviva.qb.fcen.uba.ar/contratapa/aprendiendo/capitulo10.htm