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Este documento descreve o processamento e controle de qualidade higiênico-sanitário de leite humano em bancos de leite. Ele detalha os procedimentos utilizados para seleção, pasteurização e armazenamento do leite, incluindo testes de qualidade como verificação de embalagens, detecção de contaminantes, análise de cor, odor e acidez. O documento também descreve os métodos laboratoriais para controle microbiológico pós-pasteurização, buscando garantir que o leite fornecido esteja liv
Deskripsi Asli:
Judul Asli
Processamento e Controle de Qualidade Higienico Sanitario
Este documento descreve o processamento e controle de qualidade higiênico-sanitário de leite humano em bancos de leite. Ele detalha os procedimentos utilizados para seleção, pasteurização e armazenamento do leite, incluindo testes de qualidade como verificação de embalagens, detecção de contaminantes, análise de cor, odor e acidez. O documento também descreve os métodos laboratoriais para controle microbiológico pós-pasteurização, buscando garantir que o leite fornecido esteja liv
Este documento descreve o processamento e controle de qualidade higiênico-sanitário de leite humano em bancos de leite. Ele detalha os procedimentos utilizados para seleção, pasteurização e armazenamento do leite, incluindo testes de qualidade como verificação de embalagens, detecção de contaminantes, análise de cor, odor e acidez. O documento também descreve os métodos laboratoriais para controle microbiológico pós-pasteurização, buscando garantir que o leite fornecido esteja liv
PROCESSAMENTO E CONTROLE DE QUALIDADE HIGINICO- SANITRIO DE LEITE HUMANO EM BANCO DE LEITE
RECIFE 2009
REGINA CERES CAROLINO CORRA DE SOUZA
PROCESSAMENTO E CONTROLE DE QUALIDADE HIGINICO- SANITRIO DE LEITE HUMANO EM BANCO DE LEITE
Monografia apresentada ao Departamento de Cincias Biolgicas da Faculdade Frassinetti do Recife FAFIRE, como parte dos requisitos para obteno do grau de Bacharel em Cincias Biolgicas.
Orientadora: Prof. Msc. Stella Maris Castro Jimnez
RECIFE 2009
REGINA CERES CAROLINO CORRA DE SOUZA
PROCESSAMENTO E CONTROLE DE QUALIDADE HIGINICO- SANITRIO DE LEITE HUMANO EM BANCO DE LEITE
Banca Examinadora
______________________________________________________________ Prof. Msc. Stella Maris Castro Jimnez Faculdade Frassinetti do Recife FAFIRE
______________________________________________________________ Prof. Msc. Lenira Lima Guimares Universidade de Pernambuco UPE
_______________________________________________________________ Prof. Msc. Giane Soares de Souza Faculdade Boa Viagem FBV
Data: 25 de junho de 2009.
RECIFE 2009
A Deus e a Santo Antnio, por iluminar meus caminhos e confortar-me nas horas difceis.
OFEREO.
A meu pai, Jos Antnio, e minha av materna, Jaci Carolino, que j no se encontram entre ns. Mas tenho certeza que podem me ver neste momento to especial da minha vida.
DEDICO.
AGRADECIMENTOS
Meus sinceros agradecimentos: A Deus e a Santo Antnio, por ter iluminado meus passos e concedido foras para que eu superasse as dificuldades. A pessoa que mais amo na vida, minha me Edilene, por sempre estar ao meu lado, vibrando com minhas vitrias e confortando-me nas horas difceis. A toda minha famlia, especialmente a minha tia Edna, por tamanha generosidade. Muito obrigada por tudo o que fez por mim durante todo esse tempo. A Joo Pedro, pessoa iluminada que Deus colocou na minha vida, meu companheiro de todas as horas, por todas s vezes que me incentivou e me deu conforto. A Faculdade Frassinetti do Recife - FAFIRE. A Coordenao do curso de Cincias Biolgicas: Prof. Maria do Socorro Duarte e Prof. Ana Maria de Atades Romaguera. Ao Departamento de Cincias Biolgicas pelo suporte didtico ao longo do curso. A Prof. Stella Maris Castro Jimnez, por haver me aceito como sua orientanda e ajudado para que essa pesquisa acontecesse. Obrigada tambm, pela amizade e carinho comigo. A Biloga Elma Freitas do Nascimento e as tcnicas em enfermagem Carmem e Ktia, por todo conhecimento que me transmitiram sobre leite humano e os processos de controle de qualidade. Grandiosa colaborao. A banca examinadora composta pelas professoras e mestras: Lenira Lima Guimares e Giane Soares de Souza. Aos meus amigos, pelos momentos inesquecveis de convivncia e alegria, pela pacincia e incentivo, que sempre guardarei em um cantinho especial do meu corao.
RESUMO
O Banco de Leite Humano um centro especializado, vinculado a um hospital de ateno materna e/ou infantil, sendo responsvel por promover e apoiar o aleitamento materno e executar atividades de coleta do excedente da produo lctica de nutrizes, seleo, processamento e controle de qualidade do leite para posterior distribuio. Atende lactantes em condies desfavorveis, preferencialmente prematuros, que se forem alimentados exclusivamente com leite humano, tm chances elevadas de se recuperar. Para tanto, so necessrios procedimentos rigorosos para assegurar que o leite est livre de contaminantes. O objetivo deste trabalho foi apontar os procedimentos empregados para o controle de qualidade higinico-sanitrio do leite humano, enfatizando os procedimentos aplicados no banco de leite. O estudo foi do tipo descritivo e observacional de abordagem qualitativa, atravs de visitas tcnicas a um banco de leite humano e um laboratrio de microbiologia. O leite que apresentou no-conformidades como: embalagens danificadas e/ou sem rtulo; presena de corpos estranhos; colorao alterada; odores semelhantes a sabo de coco, peixe, remdio, cloro, plstico ou borracha; valores de acidez superiores a 8D; presena de coliformes aps o processamento ou estocado de forma inadequada, foi desprezado. Portanto, ficou claro que o processamento e um rigoroso controle de qualidade higinico-sanitrio, so essenciais para se obter um produto com qualidade.
Palavras-chave: banco de leite humano; leite humano; pasteurizao; controle de qualidade de leite humano; estocagem de leite humano ordenhado.
SUMRIO
1 INTRODUO .................................................................................................................. 11 2 FUNDAMENTAO TERICA .................................................................................... 13 2.1 Bancos de leite humano ...................................................................................................... 13 2.2 Leite humano ...................................................................................................................... 14 2.2.1 Colostro ............................................................................................................................ 15 2.2.2 Leite de transio ............................................................................................................. 15 2.2.3 Leite maduro .................................................................................................................... 15 2.3 Microbiota do leite humano e contaminantes ..................................................................... 16 2.4 Pasteurizao ...................................................................................................................... 17 2.5 Controle de qualidade do leite humano ordenhado............................................................. 17 2.5.1 Seleo primria ou pr-estocagem ................................................................................. 17 2.5.2 Controle microbiolgico ou ps-pasteurizao ............................................................... 18 2.5.2.1 Coliformes .................................................................................................................... 18 2.5.2.2 Coliformes totais ........................................................................................................... 18 2.5.2.3 Coliformes termotolerantes ........................................................................................... 19 2.6 Estocagem de leite humano ordenhado............................................................................... 19 3 METODOLOGIA ................................................................................................................ 20 4 RESULTADOS E DISCUSSO ......................................................................................... 21 4.1 Verificao dos parmetros utilizados na seleo primria ou pr-estocagem................... 21 4.1.1 Condies da embalagem ................................................................................................ 21 4.1.2 Sujidades .......................................................................................................................... 22 4.1.3 Cor ................................................................................................................................... 23 4.1.4 Off-flavor Mtodo sensorial .......................................................................................... 24 4.1.5 Acidez Dornic .................................................................................................................. 26 4.2 Procedimentos utilizados na pasteurizao do leite humano .............................................. 29 4.3 Tcnicas laboratoriais empregadas no controle microbiolgico ......................................... 31 4.3.1 Execuo da anlise microbiolgica ................................................................................ 31 4.4 Normas para estocagem de leite humano ordenhado em bancos de leite ........................... 35 4.4.1 Normais para estocagem do leite humano ordenhado cru ............................................... 35 4.4.2 Normas para estocagem do leite Humano pasteurizado .................................................. 37 5 CONSIDERAES FINAIS ............................................................................................. 39 REFERNCIAS ...................................................................................................................... 40
Figura 01: Embalagem para acondicionamento de leite humano ordenhado ......................... 22 Figura 02: Frasco cedido s doadoras pelo BLH. ................................................................... 22 Figura 03: Reenvase do leite .................................................................................................. 23 Figura 04: Colostro e leite maduro ......................................................................................... 24 Figura 05: Leite com colorao alterada. ............................................................................... 24 Figura 06: Transferncia das alquotas de leite ordenhado a ser titulado. .............................. 28 Figura 07: Soluo indicadora fenolftalena hidroalcolica ................................................... 28 Figura 08: Titulao com a soluo-padro NaOH 0,1 N. ..................................................... 28 Figura 09: Viragem do indicador. ........................................................................................... 29 Figura 10: Descongelamento do leite humano cru ................................................................. 30 Figura 11: Banho-maria (Pasteurizador). ............................................................................... 30 Figura 12: Resfriador. ............................................................................................................. 30 Figura 13: Caldo Verde Bile Brilhante Lactose ..................................................................... 32 Figura 14: Meio de cultura estril ........................................................................................... 32 Figura 15: Coleta das alquotas do leite humano ordenhado a ser analisado. ........................ 33 Figura 16: Tubos com meio de cultura BGBL recebendo amostra de leite a ser analisado ... 33 Figura 17: Meio de cultura inoculado com leite humano pasteurizado. ................................. 33 Figura 18: Estufa com amostras de leite inoculadas. .............................................................. 34 Figura 19: Leitura dos resultados. .......................................................................................... 34 Figura 20: Exame confirmatrio ............................................................................................. 35 Figura 21: Estocagem de leite humano ordenhado cru ........................................................... 36 Figura 22: Freezer com termmetro de mxima e mnima .................................................... 37 Figura 23: Estocagem de leite humano pasteurizado. ............................................................ 38 Figura 24: Geladeiras com termmetro de mxima e mnima ............................................... 38
LISTA DE QUADROS
Quadro 01: Padres de referncia para off-flavor .................................................................. 25 Quadro 02: Off-flavor e significados ...................................................................................... 26
SIGLRIO
ANVISA: Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. BLH: Banco de leite humano. BGBL: Caldo Verde Bile Brilhante Lactose. FIOCRUZ: Fundao Oswaldo Cruz. HIV: Vrus da Imunodeficincia Humana. IFF: Instituto Fernandes Figueira. LH: Leite humano. LHO: Leite humano ordenhado. LHOC: Leite humano ordenhado cru. LHOP: Leite humano ordenhado pasteurizado. MS: Ministrio da Sade. NBR/ABNT: Norma/Associao Brasileira de Normas Tcnicas. OMS: Organizao Mundial da Sade. PNIAM: Programa Nacional de Incentivo ao Aleitamento Materno. RDC/Anvisa: Resoluo de Diretoria Colegiada/Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria. REDEBLH: Rede Nacional de Bancos de Leite Humano. Rede BLH-BR: Rede Brasileira de Bancos de Leite Humano. UTI: Unidade de Terapia Intensiva.
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1 INTRODUO
O Banco de Leite Humano (BLH) um centro especializado, vinculado a um hospital de ateno materna e/ou infantil, sendo responsvel pelo incentivo ao aleitamento materno, execuo das atividades de coleta do excedente da produo lctica da nutriz, processamento e controle de qualidade para posterior distribuio (NASCIMENTO, 2006; BRASIL, 2005; ALMEIDA, 2008). A distribuio do leite realizada de acordo com os critrios da Portaria MS n322/88 (FEBRASGO, 2006), sob prescrio do mdico ou nutricionista. O leite ordenhado e doado aos BLH tem como receptores, preferencialmente, os lactantes prematuros e de baixo peso que no sugam (FEBRASGO, 2006; VINAGRE et al., 2001). De acordo com Felipe e Almeida (2005) os bebs prematuros tm maior necessidade do leite proveniente dos BLH em virtude de sua imaturidade dos reflexos de suco e deglutio. E os bebs de baixo peso, mesmo na presena dos reflexos de suco e deglutio coordenados, a amamentao desaconselhada, pois este ato demanda energia, ocasionando perda de calorias significativas. As crianas nessas condies tm chances elevadas de se recuperar e viver com qualidade se a alimentao exclusiva com leite humano for oferecida durante o perodo de privao das mamadas no peito de sua me (KUZUHARA, 2006). Para tanto, medidas rigorosas de monitoramento da qualidade do leite humano ordenhado (LHO) distribudo pelos bancos de leite so imprescindveis (SERAFINI et al, 2003). Todo leite recebido pelo BLH dever ser submetido aos procedimentos de controle de qualidade higinico-sanitrio. O primeiro passo verificar as condies da embalagem, presena de sujidades, cor, off-flavor e acidez Dornic que consiste na seleo primria ou pr- estocagem do leite. Uma vez concludas essas etapas, o banco de leite poder optar por estocar o produto ainda cru, para futuro processamento ou iniciar imediatamente o processamento (pasteurizao) e o controle de qualidade microbiolgico (BRASIL, 2008). S depois de aprovado nessa ltima etapa, o leite liberado para consumo (BRASIL, [S.d.]). No Brasil, os procedimentos executados nos bancos de leite humano so supervisionados pela Vigilncia Sanitria dos estados e municpios, e pela ANVISA (Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria), de forma a garantir o funcionamento seguro e eficaz (BRASIL, 2007). Diante da relevncia do tema, o trabalho possui como objetivo geral: apontar os procedimentos adotados no processamento e controle de qualidade higinico-sanitrio do leite humano em banco de leite. A partir desse objetivo geral, foram estabelecidos os seguintes 12
objetivos especficos: verificar os parmetros utilizados na seleo primria ou pr-estocagem do leite materno ordenhado cru; identificar os procedimentos utilizados na pasteurizao do leite humano; descrever as tcnicas laboratoriais empregadas no controle microbiolgico e especificar as normas para estocagem do leite humano ordenhado cru e pasteurizado no banco de leite. O trabalho est organizado em quatro captulos. O primeiro dedicado fundamentao terica necessria ao entendimento do tema estudado. O segundo captulo apresenta a metodologia utilizada durante o projeto de pesquisa. No terceiro captulo so apresentados os resultados e as discusses sobre os resultados obtidos, ficando o quarto captulo para as consideraes finais.
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2 FUNDAMENTAO TERICA
2.1 Bancos de leite humano
Em outubro de 1943, foi implementado no Brasil o primeiro Banco de Leite Humano, no Instituto de Puericultura, atual Instituto Fernandes Figueira (IFF) da Fundao Oswaldo Cruz FIOCRUZ (ASSIS et al., 1993). Os BLH funcionavam com nico propsito de coletar e distribuir leite humano com vistas a atender casos especiais considerando as propriedades farmacolgicas do leite e no as nutricionais (BRASIL, 2007). Para tanto, adotavam estratgias muitas vezes questionveis. A doao no resultava de um processo voluntrio e consciente, como nos dias atuais, que depende exclusivamente da solidariedade humana. Alguns BLH chegaram a profissionalizar a doao enumerando a nutriz de acordo com o volume produzido. Outros se valiam de atrativos, tais como assistncia mdica diferenciada e distribuio de cesta de alimentos (ALMEIDA 1 , 1992 apud BRASIL, 2008). O leite era distribudo preferencialmente na forma de produto cru, sem receber qualquer tipo de tratamento (BRASIL, 2008). Na viso de Assis et al. (1993) os BLH surgiram tambm como uma resposta para as falhas do paradigma do desmame comerciognico. Na dcada de quarenta, o modelo de alimentao praticado pela puericultura brasileira se pautava fundamentalmente pela introduo de frmulas lcticas em idades cada vez mais precoces, e o desmame em favor dos produtos industrializados, passou a ser a regra, e a amamentao a exceo. A gravidade do cenrio epidemiolgico era evidenciada atravs de estudos, dentre os quais se destaca o fato de que 85% dos bitos por desnutrio entre lactantes desmamados estavam associados ao uso de alimentao artificial. Assim, a necessidade de se dispor de leite humano em quantidades que permitissem o atendimento nas situaes emergenciais, se transformou em um fato concreto, capaz de justificar a necessidade de implantao de um banco de leite (ALMEIDA, 1999). Contudo, foi a partir de 1985, com o desenvolvimento do Programa Nacional de Incentivo ao Aleitamento Materno PNIAM, criado em 1981, que o Brasil experimentou
1 ALMEIDA, J.A.G. A EVOLUO dos bancos de leite no Brasil. Rio de Janeiro: Ncleo de Vdeo do Centro de Informao Cientfica e Tecnolgica (CICT) da Fundao Oswaldo Cruz, 1992. 1 videocassete (57 min), VHS, son., color. 14
uma expanso dessas unidades, at ento nunca registrada na histria (MAIA et al., 2006; BRASIL, 2007). Aps esse perodo, deu-se uma ruptura no modelo tradicional e a construo de um novo modelo, que se encontra vigente nos dias atuais (ASSIS et al., 1993). Os BLH passaram a ser centros especializados, responsveis pela promoo, proteo e apoio ao aleitamento materno e execuo das atividades de coleta do excedente da produo lctica de nutrizes, seleo, classificao, processamento e controle de qualidade do leite para posterior distribuio (JORNAL LIVRE, 2007; NASCIMENTO, 2006; BRASIL, 2005; ALMEIDA, 2008). Conforme Giugliani (2002) atualmente o Brasil possui a melhor e mais complexa Rede Nacional de Bancos de Leite Humano (REDEBLH), com aproximadamente duzentas unidades em funcionamento. Com mais de 22 anos de polticas pblicas em Bancos de Leite Humano, o Brasil tornou-se referncia para outros pases. Sendo reconhecido como tal pela Organizao Mundial de Sade (OMS), por meio do prmio Sasakawa, conferido no ano de 2001 (ECO & AO, 2007).
2.2 Leite humano
Devido a suas caractersticas biolgicas, o LH considerado uma substncia viva ativamente protetora e imunomodeladora, que estimula o desenvolvimento adequado do sistema digestivo e neurolgico (BRASIL, 1993; VIEIRA, 2002). A sua composio (protenas, carboidratos, lipdios, vitaminas, minerais e oligoelementos) determinada no sentido de oferecer energia e nutrientes necessrios desde o nascimento at os seis meses de vida (LAWUNIER 2 et al. apud FELIPE; ALMEIDA, 2005). Alm disso, uma importante fonte de hidratao (87% de gua) e proteo, pois contm fatores que conferem proteo contra infeces virais e bacterianas. As reaes alrgicas raramente ocorrem com seu uso, porque o leite materno contm tambm fatores de crescimento que preparam o intestino imaturo da criana para digerir e absorve-lo, evitando assim que protenas no digeridas sejam absorvidas, lesando o intestino e causando alergias.
2 LAWOUNIER, Joel Alves et al. Composio do leite materno. In: REGO, Jos Dias (Org.). Aleitamento materno. So Paulo: Atheneu, 2002. p. 47-58. 15
2.2.1 Colostro
A secreo do colostro ocorre nos primeiros dias aps o parto. De cor amarela e mais grosso que o leite maduro, secretado apenas em pequenas quantidades. Mas suficiente para uma criana e exatamente aquilo de que precisa para os primeiros dias (BRASIL, 1994; ALMEIDA et al., 2004). Em sua composio, o colostro, rico em protenas, apresenta menor teor de gordura e carboidratos. E contm mais anticorpos e clulas brancas que o leite maduro para proteger a criana contra a maior parte das bactrias e vrus (BRASIL, 1994). Brasil (1994) ressalta ainda que o colostro tambm rico em fatores de crescimento que estimulam o intestino imaturo da criana a se desenvolver. Se a criana receber leite de vaca ou outro alimento antes de receber o colostro, estes alimentos podem lesar o intestino e causar alergias (BRASIL, 1994, p.27).
2.2.2 Leite de transio
Durante as duas semanas que se seguem, o leite aumenta a quantidade e muda de aparncia e composio. As imunoglobulinas e os ndices de protenas diminuem visto que os ndices de gordura e acar aumentam. Este o leite de transio, produto intermedirio da secreo lctica da nutriz, entre o colostro e o leite maduro (BRASIL, 1994).
2.2.3 Leite maduro
Obtido a partir do dcimo quinto dia aps o parto. De cor branca e com aspecto mais aquoso do que o leite de vaca, o leite maduro contm todos os nutrientes de que a criana precisa para crescer. Nesse perodo o leite maduro muda a composio durante a mamada para servir as necessidades do beb. O leite do comeo surge no incio da mamada. Parece acinzentado e aguado. rico em protenas, lactose, vitaminas e gua (BRASIL, 1994). 16
O leite do fim surge no fim da mamada. mais branco do que o leite do comeo porque contm mais gordura. A gordura torna o leite do fim mais rico em energia. Fornece mais da metade da energia do leite materno (BRASIL, 1994). A criana precisa tanto do leite do comeo quanto do leite do fim para crescer e se desenvolver.
2.3 Microbiota do leite humano e contaminantes
Em termos gerais, os microrganismos que compem a microbiota do leite humano cru podem ser classificados quanto origem ou patogenicidade. So considerados contaminantes primrios aqueles que passam diretamente da corrente sangunea para o leite, como no caso do vrus HIV, e secundrios os que habitam as regies mais externas dos canais mamilares e o meio externo. Independente da sua microbiota primria ou secundria podem ainda ser classificados como saprfitos ou patognicos (ALMEIDA, 1999; NETO et al., 2001). De acordo com Santos e Fonseca ([S.d]) os microrganismos saprfitos ou deteriorantes so aqueles que causam alteraes nos principais componentes do leite, o que leva a reduo da qualidade e alteraes organolpticas, mas no esto associadas ocorrncia de doenas. A exemplo do Lactobacilos bifidus. J os microrganismos patognicos (com significado em sade pblica) so aqueles que podem causar doenas, infeces ou intoxicaes a partir do consumo do leite cru, mas que no esto associados com deteriorao do leite. Como exemplo, pode-se citar: E. coli, Salmonella, Mycobacterium tuberculosis. A presena de contaminantes em nveis elevados acarreta a reduo do valor biolgico pela utilizao de nutrientes do leite pela microbiota contaminante e a diminuio dos fatores de defesa (ALMEIDA, 1986). Estas situaes determinam, na maioria das vezes, classificao do produto como imprprio para o consumo, tendo em vista a vulnerabilidade da clientela receptora.
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2.4 Pasteurizao
Em 1995, a Secretaria de Assistncia Sade, do Ministrio da Sade, atravs da Portaria n097, III, de 28 de agosto, instituiu que Os Bancos de Leite Humano somente utilizaro leite ou colostro aps pasteurizao. (FEBRASGO, 2006). Trata-se de um tratamento trmico aplicvel ao leite humano, que visa inativao trmica de 100% dos microrganismos patognicos possveis de estar presentes quer por contaminao primria ou secundria, alm de 99,99% da microbiota saprfita ou normal (ALMEIDA et al., 2004) atravs do binmio temperatura/tempo de 62,5 C por 30 minutos aps o tempo de pr-aquecimento. Calculado de modo equivalente a um tratamento para inativao trmica da Coxiella burnetti (FEBRASGO, 2006). Uma vez capaz de inativar esse microrganismo, pode-se assegurar que os demais patgenos tambm estaro termicamente inativados.
2.5 Controle de qualidade do leite humano ordenhado
2.5.1 Seleo primria ou pr-estocagem
Todo leite recebido pelo BLH dever ser submetido aos procedimentos de seleo que compreende: condies da embalagem, presena de sujidades, cor, off-flavor e acidez Dornic (FIOCRUZ, 2003). Uma vez concludas essas etapas, o banco de leite poder optar por estocar o produto, ainda cru, para futuro processamento ou iniciar imediatamente o processamento e controle de qualidade microbiolgico (BRASIL, 2006). Conforme Brasil (2006) os produtos que no preencherem as especificaes determinadas devero ser descartados conforme disposto no RDC/ANVISA, n306/2004, para resduos do grupo D, ou seja, podem ser descartados diretamente na rede de esgoto (guas servidas), sem tratamento prvio.
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2.5.2 Controle microbiolgico ou ps-pasteurizao
O controle de qualidade microbiolgico do leite humano ordenhado realizado pelos bancos de leite humano segue a lgica preconizada para alimentos, utilizando microrganismos indicadores de qualidade sanitria. Nesse contexto, o grupo coliforme destaca-se, por ser de cultivo simples, economicamente vivel e seguro, minimizando a possibilidade de resultados falso-negativos (NOVAK; ALMEIDA, 2002).
2.5.2.1 Coliformes
Os principais microrganismos do grupo coliformes compreendem aqueles classificados nos gneros Escherichia, Enterobacter, Klebsiella, Aeromonas sp. e Serratia sp. A principal fonte desses microrganismos o trato intestinal dos animais. Embora sejam considerados como indicadores de contaminao fecal, h alguns que existem no ambiente. Nmeros elevados de coliformes no leite cru indicam falta de higiene na hora da ordenha, limpeza inadequada de equipamentos de ordenha ou utenslios que entram em contato com o leite contaminado (FRANCO et al., 2005).
2.5.2.2 Coliformes totais
So bacilos gram-negativos e no formadores de esporos. Fazem parte deste grupo predominantemente bactrias pertencentes aos gneros Escherichia, Enterobacter, Citrobacter e Klebsiella. Capazes de crescer na presena de sais biliares ou outros compostos ativos, com propriedades similares de inibio de crescimento, e que fermentam a lactose com produo de gs, quando incubados a 35-37C, por 48 horas. So bacilos gram-negativos e no formadores de esporos. Fazem parte deste grupo predominantemente bactrias pertencentes aos gneros Escherichia, Enterobacter, Citrobacter e Klebsiella (UNICAMP, [S.d]).
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2.5.2.3 Coliformes termotolerantes
As bactrias pertencentes a este grupo correspondem aos coliformes totais que apresentam a capacidade de continuar fermentando lactose com produo de gs, quando incubadas temperatura de 44-45,5C. Nessas condies, em torno de 90% das culturas de E. coli so positivas, enquanto entre os demais gneros apenas algumas cepas de Enterobacter e Klebsiella mantm essa caracterstica (NOVAK; ALMEIDA, 2002).
2.6 Estocagem de leite humano ordenhado
O crescimento de microrganismos em um meio depende de uma srie de fatores, dentre os quais merecem destaque a presena de barreiras fsicas e qumicas, a concentrao de nutrientes, a temperatura e a atividade de gua (SILVA, 2004). Ainda de acordo com o autor supracitado, os microrganismos dependem da velocidade das reaes enzimticas que ocorrem em seu citoplasma para crescer. Uma das maneiras de reduzir o crescimento bacteriano a diminuio da temperatura, pois uma reao enzimtica sempre ocorre em uma temperatura ideal (SILVA, 2004). De uma forma geral, o congelamento uma das tcnicas mais aplicadas na conservao de alimentos com a finalidade de prolongar a vida til, sendo um excelente mtodo de preservao dos nutrientes. Baixas temperaturas so usadas para retardar a ocorrncia de reaes enzimticas e qumicas indesejveis, a exemplo da oxidao dos lipdeos, alm de inibir a multiplicao e a atividade dos microrganismos que se encontram no alimento (BRASIL, 2008). A estocagem considerada um conjunto de atividades e requisitos para se obter uma correta conservao do alimento, a uma condio de temperatura e tempo sob o qual o produto mantido antes do seu processamento at o momento do consumo (BRASIL, 2006).
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3 METODOLOGIA
O trabalho foi desenvolvido a partir de um estudo descritivo e observacional, realizado em um banco de leite humano e um laboratrio de microbiologia de uma Maternidade Pblica localizada na Cidade do Recife- PE. O perodo da pesquisa deu-se de fevereiro a maio de 2009. A coleta dos dados foi realizada atravs de visitas tcnicas a Instituio, onde podemos acompanhar e registrar em fotografias, realizada com o auxlio de uma cmera digital Samsung modelo ES73, todos os procedimentos de seleo, pasteurizao, anlise microbiolgica e armazenamento do leite. Os dados foram analisados de acordo com a amostragem obtida no campo de estudo.
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4 RESULTADOS E DISCUSSO
A partir das visitas tcnicas a um Banco de Leite e Laboratrio de Microbiologia, foi observado o seguinte:
4.1 Verificao dos parmetros utilizados na seleo primria ou pr-estocagem
4.1.1 Condies da embalagem
A verificao da embalagem para acondicionamento do leite humano ordenhado foi realizada no momento da recepo, pelo banco de leite. Os recipientes eram ser de vidro, com boca larga, volume de 50 a 500 ml, tampa rosquevel e vedamento perfeito, no permitindo trocas indesejveis com o produto acondicionado e mantendo seu valor biolgico (Fig.01). Todos os frascos com leite humano tinham que ser obrigatoriamente rotulados, contendo informaes que permitam a obteno da histria pregressa do leite, viabilizando assim a rastreabilidade, caso necessrio. Os frascos cedidos s doadoras pelo BLH eram embalados individualmente para e esterilizados (Fig.02). Com a data de validade da esterilizao registrada no invlucro das embalagens estreis. De acordo com o recomendado pela Anvisa (2008) os recipientes que continham algum dano na sua superfcie, do tipo rachaduras e trincas, assim como, sujidades e vedao de forma inadequada, possibilitando o contato com o meio externo, foram desprezadas, pois caracterizavam no-conformidades. As embalagens que no apresentavam correta rotulagem no foram consideradas satisfatrias.
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Figura 01: Embalagem para acondicionamento de leite humano ordenhado.
Figura 02: Frasco cedido s doadoras pelo BLH.
4.1.2 Sujidades
A avaliao da presena de sujidades foi realizada, sob campo de chama ou cabine de segurana biolgica, no momento do reenvase do leite (transporte do leite de um recipiente para o outro com o objetivo de uniformizar os valores e embalagens), previamente pasteurizao (Fig. 03). A presena de qualquer corpo estranho no leite humano como: plos, cabelos, fragmentos de pele, fragmentos de unha, insetos, pedaos de papel, vidro, entre outros, desqualificou o produto para consumo. Conforme previsto por Anvisa (2008) foram considerados produtos aceitveis os leites que no apresentavam sujidades durante o controle de qualidade e todo contedo do frasco em que se encontrou a sujidade foi descartado.
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Figura 03: Reenvase do leite (Fonte: BASTOS, Kedimam Clis Barros et al. Manual de Qualidade em Bancos de Leite Humano. MEAC UFC, 2005).
4.1.3 Cor
A avaliao da cor do leite humano ordenhado foi realizada, tambm sob campo de chama ou cabine de segurana biolgica, no momento do reenvase do leite, previamente pasteurizao, junto com a avaliao de sujidades e do flavor do produto. Para FIOCRUZ (2003) a cor do leite humano ordenhado pode variar conforme os seus constituintes e reflete a predominncia de uma determinada frao. O colostro geralmente varia da cor semelhante gua de coco ao amarelo-alaranjado, que provm do caroteno, que lipossolvel. A colorao do leite de transio muda geralmente, em aproximadamente duas semanas, para um branco azulado/opaco resultante da disperso da luz refletida pelos glbulos de casena e de fosfato de clcio, at se tornar leite maduro (Fig.04). No perodo em que os dados para a pesquisa foram coletados foi observado a presena de uma amostra de leite com colorao alterada, vermelho-escuro (Fig.05). Com base nos estudos de Silva (2004) cores que oscilem entre o vermelho-tijolo e o marrom-escuro podem indicar contaminao do leite por sangue, que ocorre por descarga papilar sanguinolenta, comum nas duas semanas de puerprio, por leso do mamilo ou ainda pode ser associada presena da bactria Serratia marcescens. E ressalta que pesquisas tambm devem ser realizadas caso se perceba a colorao verde-escuro, possivelmente associada presena da bactria do gnero Pseudomonas. Em ambos os casos, o leite descartado, por ser imprprio para consumo.
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Em pesquisas realizadas por Almeida et al. (2005) a cor do leite maduro pode ser alterada ainda por diversos fatores, entre eles a dieta materna e o uso de medicaes. Alguns corantes utilizados em refrigerantes, sucos e gelatinas tm sido associados a uma colorao rsea ou rseo-alaranjada do leite. Um leite de colorao esverdeada tem sido associado ao uso de grandes quantidades de vegetais pela me (colorao dada pela riboflavina), ao consumo de bebidas com corantes verdes e a ingesto de algas marinhas. Essas modificaes na colorao do leite so normais e no configuram situaes de no-conformidades. Porm, conforme Anvisa (2008), para que os produtos nesses casos sejam considerados vlidos para consumo, preciso que se tenha conhecimento a respeito da dieta da doadora, o que muitas vezes no possvel desqualificando o leite para consumo.
Figura 04: Colostro ( esquerda) e leite maduro ( direita).
Figura 05: Leite com colorao alterada.
4.1.4 Off-flavor Mtodo sensorial
O procedimento empregado para a determinao do flavor do leite foi o seguinte: 25
Segurar no fundo do frasco com leite humano ordenhado fluido e agitar vigorosamente; Em campo de chama, trabalhando com rigor microbiolgico, remover a tampa e aspirar (devido ao risco biolgico, no aspirar diretamente sobre o frasco. Deve ser respeitada a distncia do campo de chama e os volteis devem ser puxados em movimentos rpidos com a mo no sentido do frasco para o nariz). Relatar as impresses de off-flavor dos frascos de leite humano.
Em situaes de conflito, utiliza-se os padres de referncia (Quadro 01) para solucionar dvidas (ALMEIDA et al., 2005).
gua isenta de odor gua destilada, deionizada e tratada em filtro de carvo ativado. Soluo-padro cloro
Diluir hipoclorito de sdio em gua isenta de odor, de modo a obter solues com concentrao de cloro ativo na faixa de 0,5 mg/l a 1,5 mg/l Determinar a concentrao de cloro livre de acordo com a NBR/ABNT 11833.
Soluo-padro peixe
De acordo com a NBR/ABNT 14341, diluir 1g de tempero base de extrato de peixe seco em frasco Erlenmeyer com tampa e adicionar 200 ml de gua isenta de odor. Preparar no momento do uso.
Soluo-estoque remdio
Diluir 0,5g de fenol em balo volumtrico de 1000 ml com gua isenta de odor. Essa soluo pode ser utilizada no preparo dos padres requeridos por tempo indeterminado, se armazenada sob refrigerao. Preparar solues para teste na faixa de 0,05 mg/l a 0,50 mg/l, utilizando na diluio gua isenta de cloro.
Soluo-estoque plstico
Diluir 1g de metil meta acrilato em balo volumtrico de 1000 ml com gua isenta de odor. Essa soluo pode ser utilizada na pre- parao dos padres requeridos por tempo indeterminado, se armazenada sob refrigerao. Preparar solues para teste na faixa de 0,25 mg/l a 1,5 mg/l (NBR/ABNT 14341).
Soluo-padro borracha Ferver mangueira de borracha em 200 ml de gua isenta de odor. Deixar em repouso uma noite. Remover a mangueira. Transferir para frasco Erlenmeyer de 500 ml com tampa. Diluir se necessrio (NBR/ABNT 14341).
Soluo-padro sabo de coco
Adicionar 20g de sabo de coco em Erlenmeyer com tampa e acrescentar 200 ml de gua isenta de odor. Agitar. Diluir se necessrio (NBR/ABNT 14241).
Quadro 01: Padres de Referncia para off-flavor ( Fonte: BRASIL, 2008). 26
A determinao do off-flavor se configura como importante instrumento na deteco de no-conformidades no leite humano ordenhado, sobretudo as que decorrem de crescimento de microrganismos pertencentes microbiota secundria do leite. A presena desses agentes torna o produto inapropriado para o consumo, principalmente por ocasionar alteraes fsico- qumicas em sua composio (BRASIL, 2008). Independente da intensidade, quando reconhecidos os odores de sabo de coco, peixe, remdio, cloro, plstico ou borracha, o leite humano foi considerado imprprio para consumo devido presena de off-flavor e imediatamente descartado.
Off-Flavor Significados
Rancificao - cheiro de sabo de coco
Os microrganismos lipolticos promovem o desenvolvimento de rano hidroltico e oxidativo, facilmente perceptvel em sua fase inicial.
Peixe e/ou ovo em fase de desenvolvimento
Decorrente da presena de microrganismos proteolticos.
Cloro, plstico, borracha e remdio
Decorrente da capacidade de soro da lactose e tambm impedem o consumo do leite humano.
Quadro 02: Off-flavor e significados (Fonte: BRASIL, 2008).
Segundo Almeida (1999) a lactose apresenta grande capacidade de soro, ou seja, de absorver e adsorver substncias volteis. Por essa razo, o leite humano nunca deve ser manipulado em ambientes que apresentam odores ativos de qualquer espcie. Observando esse mesmo princpio, deve-se recomendar a no utilizao de perfumes e cosmticos pelos funcionrios no momento da manipulao do leite ou da conduo de ordenhas. A mesma orientao deve ser dada s doadoras.
4.1.5 Acidez Dornic
Para o teste de acidez titulvel foi empregada a seguinte metodologia:
Aps homogeneizao manual, coletar 3 ml de leite a ser analisado e transferir quantitativamente trs alquotas de 1 ml para o interior de trs tubos de ensaio com 27
capacidade para 5 ml (Fig.06). Proceder da mesma forma para cada novo frasco de leite descongelado. Manter as amostras, at a realizao dos exames, em caixa isotrmica contendo gelo reciclvel; Adicionar alquota de 1 ml de leite humano a ser titulada uma gota da soluo indicadora fenolftalena hidroalcolica 1% em lcool 95GL (noventa e cinco graus Gay-Lussac) neutralizada (Fig.07); Proceder a titulao gotejando a soluo-padro NaOH 0,1 N (hidrxido de sdio concentrao de 0,1 N). Durante toda a titulao, o tubo de ensaio contendo o leite deve ser agitado para evitar a incorporao de ar ao produto (Fig.08); Interromper o procedimento quando houver a viragem do indicador, o qual passa a assumir colorao rseo-clara (Fig.09). Proceder leitura.
Para a determinao da acidez titulvel do leite humano cada 0,01 ml de NaOH 0,1 N gasto para neutralizar 1 ml de leite corresponde a 1D (um grau Dornic). O valor final da acidez Dornic correspondeu mdia aritmtica dos trs valores obtidos no teste individual de cada amostra. Quando a soluo titulante no apresentar concentrao extra de 0,1 N, multiplica-se a mdia aritmtica das trs alquotas pelo valor do fator de correo, que se encontra no rtulo do frasco da soluo Dornic (FIOCRUZ, 2003). Para Almeida et al. (1998) a acidez do leite humano pode ser classificada como original e desenvolvida. A original, com valores oscilando entre 1 e 4D, resulta da presena de seus constituintes (micelas de casena e sais minerais, entre os quais se destacam os fosfatos e citratos), e a desenvolvida, acidez maior que 8D, consequente ao crescimento bacteriano, da microbiota primria e secundria, com produo de cido lctico. A acidez desenvolvida do leite humano leva a um crescimento da osmolaridade e diminuio da biodisponibilidade de clcio e do fsforo presentes. As bactrias fermentam a lactose do leite humano, produzindo cido lctico (SILVA, 2004). De acordo com o recomendado por Anvisa (2008), considerou-se normal para acidez do leite humano qualquer valor situado na faixa de 1 a 8D. Valores de acidez acima do referido desqualificou o leite para o consumo.
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Figura 06: Transferncia das alquotas de leite ordenhado a ser titulado.
Figura 07: Soluo indicadora fenolftalena hidroalcolica.
Figura 08: Titulao com a soluo-padro NaOH 0,1 N.
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Figura 09: Viragem do indicador. direita leite com adio do reagente.
4.2 Procedimentos utilizados na pasteurizao do leite humano
Regular o banho-maria temperatura de pasteurizao (65C); Certificar-se que o banho-maria estabilizou a temperatura de pasteurizao; Colocar os frascos com leite humano, previamente descongelado (Fig.10), no interior do banho-maria (Fig.11), obedecendo aos critrios pr-estabelecidos (volume de leite, formato e quantidade de frascos). Em funo do desprendimento de ar dissolvido no leite durante o processo de aquecimento, recomenda-se que o rosqueamento das tampas esteja com folga de de volta (embalagem semi-fechada). Iniciar a marcao do tempo de letalidade trmica (30 minutos) a partir do momento em que a temperatura do leite humano atingir a marca de 62,5C (aps tempo de pr-aquecimento). Agitar manualmente cada frasco de cinco em cinco minutos, sem tir-los do banho-maria. Transcorrido os 30 minutos relativos letalidade trmica, promover o resfriamento dos frascos, em resfriador (Fig.12), at que o leite humano atinja uma temperatura igual ou inferior a 5C.
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Figura 10: Descongelamento do leite humano cru.
Figura 11: Banho-maria (Pasteurizador).
Figura 12: Resfriador.
Quigley (2001) afirma que pasteurizao no esterilizao. O leite pasteurizado ainda contm microrganismos, os quais so tipicamente reduzidos a baixos nveis nveis aceitveis) aps o aquecimento. O fator chave a eliminao de microrganismos causadores de doenas. Segundo Costa e Alves (2000) a eficincia da pasteurizao foi comprovada em 100% das amostras analisadas no seu estudo. 31
4.3 Tcnicas laboratoriais empregadas no controle microbiolgico
4.3.1 Execuo da anlise microbiolgica
a) Preparo do meio de cultura Caldo Verde Bile Brilhante Lactose (BGBL) 2%
Pesar 50g do meio de cultura e adicionar a um 1l de gua destilada ou deionizada; Agitar at a dissoluo completa (Fig.13); A seguir, distribuir 10 ml do meio de cultura em tubos indicados para cultura microbiolgica, com capacidade de 15 ou 20 ml, e adicionar os tubos de Durham invertidos; Esterilizar os tubos contendo meio de cultura a 121C durante 15 minutos, em autoclave; Aps resfriamento, identificar os lotes de tubos com nome do meio, concentrao e prazo de validade.
Depois de esterilizados, os tubos contendo meio de cultura foram submetidos a testes de validao. Para tanto, 10% de cada lote esterilizado foi incubado temperatura de 36 1 C por 24 horas. A formao de gs ou turvao do meio em um nico tubo desqualifica o lote produzido. Imediatamente antes de cada utilizao, certificou-se de que os tubos de Durham estavam completamente imersos no meio de cultura e livres de bolhas de ar em seu interior, para que as mesmas no fossem confundidas posteriormente com o gs produzido por contaminantes do leite (Fig.14). Segundo Bastos et al. (2005) os meios de cultura preparados podem ser estocados por 7 dias em temperatura ambiente, ou por 15 dias em refrigerador.
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Figura 13: Caldo Verde Bile Brilhante Lactose (Fonte: BASTOS, Kedimam Clis Barros et al. Manual de Qualidade em Bancos de Leite Humano. MEAC UFC, 2005).
Figura 14: Meio de cultura estril. Em destaque o tubo de Durham invertido.
b) Coleta de leite pasteurizado para anlise
Aps tratamento trmico, os frascos de leite humano ordenhado pasteurizado foram mantidos sob cadeia de frio. Retirando um frasco por vez para coleta das alquotas e retornando-o imediatamente cadeia de frio. Sob campo de chama ou cabine de segurana biolgica, coletou-se trs alquotas de 1 ml da amostra a ser analisada (Fig.15). Todas as alquotas de uma mesma amostra foram dispostas em um nico tubo de cultura contendo caldo verde bile brilhante na concentrao de 5% (Fig.16). Cada tubo que recebeu a amostra continha o nmero do frasco do qual o leite foi extrado (Fig.17). 33
Os tubos contendo meio de cultura com o leite foram incubados a 36 1C durante 24 a 48 horas, em estufa (Fig.18).
Figura 15: Coleta das alquotas do leite humano ordenhado a ser analisado.
Figura 16: Tubos com meio de cultura BGBL recebendo amostra de leite a ser analisado.
Figura 17: Meio de cultura inoculado com leite humano pasteurizado.
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Figura 18: Estufa com amostras de leite inoculadas.
c) Determinao de coliformes totais
A determinao da presena ou ausncia dos coliformes totais se deu pela observao da formao de gs no interior dos tubos de Durham. Foram considerados com presena de coliformes aqueles tubos que continham em seu interior tubos de Durham com formao de gs, no perodo de 24 a 48 horas de incubao (Fig.19). A presena de gs indica um resultado presumvel, que deve ser submetido prova confirmatria (BRASIL, 2008).
Figura 19: Leitura dos resultados. Em destaque amostra de leite com formao de gs.
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d) Exame confirmatrio
Dos exames microbiolgicos com formao de gs na prova presumvel, foram realizados exames confirmatrios para presena de coliformes totais onde, foi coletada (sob campo de chama ou cabine de segurana biolgica, tendo o auxlio da ala bacteriolgica e observando a formao de uma membrana a partir do meio de cultura) amostra daquele tubo com formao de gs em meio de cultura caldo verde bile brilhante na concentrao de 5%, e inoculado em um novo meio de cultura BGBL, porm com concentrao de 4% (Fig.20) em estufa a 36 1C, por 48 horas. Os frascos que havia formao de gs no teste confirmatrio foram considerados com presena no resultado final e desprezados. Uma vez que o objetivo da pasteurizao eliminar 100% das bactrias patognicas, a presena de coliformes em amostras de leite pasteurizado caracteriza o produto como imprprio para consumo (BRASIL, 2008).
Figura 20: Exame confirmatrio (Fonte: BASTOS, Kedimam Clis Barros et al. Manual de Qualidade em Bancos de Leite Humano. MEAC UFC, 2005).
4.4 Normas para estocagem de leite humano ordenhado em bancos de leite
4.4.1 Normais para estocagem do leite humano ordenhado cru
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O banco de leite humano deve ter registro de estoque que identifique os diferentes tipos de produtos sob sua responsabilidade, e o registro dirio da temperatura mxima e mnima dos equipamentos utilizados para estocagem; O LHOC deve ser armazenado em freezer exclusivo ou com compartimentos distintos e identificados, em boas condies de conservao e higiene (Fig.21); Manter os frascos bem vedados para evitar que o leite absorva odores e outros volteis indesejveis; O BLH deve dispor de termmetros de mxima e mnima em todos os equipamentos destinados estocagem do LHOC (Fig.22); Registrar a localizao dos frascos por equipamento e/ou compartimento de manuteno da cadeia de frio, garantindo a sua rastreabilidade.
O leite ordenhado cru congelado pode ser estocado por um perodo mximo de 15 dias a partir da data da primeira coleta, a uma temperatura de -3 C. Uma vez descongelado, o leite ordenhado para uso do prprio filho deve ser mantido sob refrigerao temperatura mxima de 5C, com validade de 12 horas corroborando com o descrito por Brasil (2008). SENAC (2004) destaca que em caso de acidente com o sistema central de energia e/ou freezeres e geladeiras que resulte no descongelamento do leite, o produto deve ser avaliado quanto possibilidade de pasteurizao imediata. Caso no exista registro de temperatura nas ltimas 24 horas ou esse registro indique uma temperatura superior a 5C, o leite deve ser desprezado.
Figura 21: Estocagem de leite humano ordenhado cru.
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Figura 22: Freezer com termmetro de mxima e mnima destacado em preto.
4.4.2 Normas para estocagem do leite humano pasteurizado
Estocar o leite humano pasteurizado aprovado no exame microbiolgico, em freezer ou geladeira , separando-os em gavetas de acordo com o valor calrico (Fig.23); Efetuar controle de temperatura mxima e mnima em 24 horas, diariamente (Fig.24); Evitar estocagem do leite pasteurizado com outros produtos hospitalares, nem mesmo em conjunto com leite humano cru ou qualquer outro tipo de alimento; Manter os frascos bem vedados para evitar que o leite absorva odores e outros volteis nocivos; Registrar a localizao dos frascos por equipamento e/ou compartimento de manuteno da cadeia de frio, garantindo a sua rastreabilidade.
O leite humano pasteurizado deve ser estocado sob congelamento a uma temperatura de -10C ou abaixo desse valor, no perodo mximo de 6 meses. Uma vez descongelado, o LHOP dever ser consumido o mais rpido possvel, perodo mximo de 24 horas, no se permitindo um novo resfriamento ou congelamento (ALMEIDA et al., 2005). Porm, h muitas controvrsias quanto ao tempo de armazenamento do leite humano, diversas pesquisas j foram realizadas com variaes em suas concluses. Dados coletados por Costa e Alves (2000) sugerem que o tempo de armazenamento pode ser superior aos descritos (o LHOC armazenado com segurana por at 12 horas na geladeira e por at 15 dias em freezer e o LHOP por at 24 horas na geladeira e por at 6 meses em freezer) relatando o descrito em alguns protocolos onde o leite humano ordenhado cru pode ser estocado por 5 38
dias na geladeira e por at 3 meses no freezer. Entretanto, deve-se saber que tais tabelas consideram uma faixa estreita de temperatura controlada.
Figura 23: Estocagem de leite humano pasteurizado.
Figura 24: Geladeiras com termmetro de mxima e mnima destacado em preto.
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5 CONSIDERAES FINAIS
Diante dos resultados obtidos, fica claro que o processamento do leite humano e um rigoroso controle higinico-sanitrio, so essenciais para assegurar um produto com qualidade, mantendo seu valor nutricional e possibilitando aos neonatais, sobretudo os prematuros que internados em Unidades de Terapia Intensiva (UTIs), uma melhor qualidade de vida, um bom crescimento e desenvolvimento. Nesse contexto, sugerimos que seja realizado um levantamento estatstico no banco de leite, com relao ao descarte de leite no decorrer dos procedimentos para o controle de qualidade, possibilitando desta forma que tenhamos um diagnstico das condies higinico- sanitria em que o leite materno ordenhado, manipulado e armazenado.
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