Gneros de bacterias que no toman la coloracin de Gram:

Mycobacterium, Chlamydia, Mycoplasma,Treponema

Departamento de Microbiologa, Parasitologa e Inmunologa
Microbiologa I PRIMERA CATEDRA
Gnero
Mycobacterium
Mycobacterium tuberculosis
Mycobacterium bovis
Otras 3 especies
Tuberculosis
Lepra
Mycobacterium leprae
Micobacteriosis
Especies de crecimiento rpido
(avium-intracellulare, marinum, etc)
Especies de crecimiento lento
(fortuitum, chelonae)
Gnero
Mycoplasma
Mycoplasma pneumoniae
Neumona
ITS
Mycoplasma hominis
Otras especies de Mycoplasma
Ureaplasma urealyticulm
Gneros
Chlamydia y
Chlamydophila
Tracoma
Chlamydia trachomatis
ITS
Linfogranuloma
Chlamydophila pneumoniae Neumona
Chlamydophila psittaci
Psitacosis
Gneros
Treponema y
Leptospira
Sfilis Treponema pallidum
Leptospirosis Leptospira interrogans
Departamento de Microbiologa, Parasitologa e Inmunologa, Facultad de Medicina, UBA
Objetivos de la clase
Describir las principales especies de los gneros
Mycobacterium, Mycoplasma, Chlamydia,
Chlamydophila, Treponema y Leptospira.

Reconocer las principales estrategias que utilizan las
bacterias de los gneros Mycobacterium, Mycoplasma,
Chlamydia , Chlamydophila, Treponema y Leptospira
para causar enfermedad .

Proveer el contexto dentro del cual se inscribe el
conocimiento de los mecanismos de patogenia para el
hombre de estas bacterias.
Mycobacterium: morfologa y tincin
Ms de 130 especies
M. tuberculosis descubierto por Robert Koch en 1882
Bacilos inmviles, delgados, rectos o ligeramente curvos
No presentan cpsula ni esporas
Envolturas contienen alta proporcin de lpidos (60% en peso)
Bacilo cido-alcohol resistentes (tincin de Ziehl-Neelsen) (BAAR)

Mycobacterium: cultivo e inactivacin
Aerobias estrictas
Requerimientos nutricionales diversos
Crecen lentamente en medios selectivos slidos (tiempo medio de
generacin de 12 a 24 horas)
Las especies patgenas crecen mejor a 37
o
C
Mycobacterium leprae no es cultivable in vitro
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Resisten cidos, lcalis y a la mayora de los
desinfectantes.
Inactivados por formaldehdo, glutaraldehdo,
fenol, etanol al 70% y parcialmente por
hipocloritos
Resisten la desecacin
Son sensibles a la luz solar
Mycobacterium: resistencia a agentes fsicos
Mycobacterium: envolturas
Estructura de la pared semejante a las Gram (+)
Pared celular con alto contenido lipdico (60% de su peso seco)
Contenido proteico de la pared aprox. 15% (dan origen al PPD de
M. tuberculosis)
9
9
1) Lpidos exteriores
2) Acido miclico
3) Arbinogalactano
4) Peptidoglicano
5) Membrana citoplsmica
6) Lipoarabinomanano (LAM)
7) Fosfatidilinositol-mansido
8) Esqueleto de la pared celular
9) Protenas de la pared
Mycobacterium
Comparar con Staphylococcus
Endocticos: RM
(receptor de manosa)
Secretados: MBL (lectina
de unin a manosa)
M. tuberculosis
RRPs
Lipoarbidomanano (LAM)
ManLAM (anti-inflamatorio)
Presente en micobacterias patgenas
PILAM (inflamatorio; en no patgenas)
CheLAM (inflamatorio)
Ncleo
Macrfago
De sealizacin:
TLRs
Seales
(NF-B)
TLR2 (LAM)
Citocinas
Quimiocinas
Otros (TGF)
LAM
(manosa)
(PAMP)
Activacin sistema del C
Endocitosis
MASP-1
MASP-2
Sulftidos
Lisosomas
( EEA1: Ag
endosomal
especfico)


M. tuberculosis
Amonaco (NH
3
)
producido por accin
de ureasa, arginasa,
glutaminasa y
asparaginasa
Mycobacterium:
eventos intracelulares
Ncleo
Macrfago
Fagosoma
X
X
M. tuberculosis: otros factores de virulencia y patognesis
Factor cuerda (dimicolato de 6,6'-trehalosa)
Presente en micobacterias patgenas
Inductor de la produccin de citoquinas
Intensa actividad proinflamatoria
Potente inductor de granuloma
Inhibe la fusin de vesculas intracelulares
Las micobacterias no producen exotoxinas
Estado III tardo
Evasin
El husped se daa a si mismo
Respuesta inmune adaptativa contra antgenos micobacterianos
Hipersensiblidad del tipo IV (retardada)
M. tuberculosis: enfermedad de larga evolucin
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Th1 Th2
Equilibrio inmune
en la tuberculosis
IFN-
Inmunidad defensiva
IL4
IL-10
Hipersensibilidad
Factor es que alteran el equilibrio:
Cantidad de antgeno
Virulencia de la cepa bacteriana
Estado inmunitario del husped
(enfermedades de base)
Otros

Micobacterias tuberculosas y tuberculosis (TB)
Enfermedad crnica, ampliamente diseminada
Incidencia anual mundial: 8-12 millones
Prevalencia mundial: 20 millones
Muertes por TB: 3 millones al ao
De 1.500 a 2.300 millones de infectados
Argentina: 12 a 14.000 nuevos casos al ao
50% de los casos en rea metropolitana Bs. As.
Co-infeccin con VIH. Hacinamiento
M. bovis: <1% de los casos de TB pulmonar
Mycobacterium tuberculosis
Mycobacterium bovis
Mycobacterium africanum
Mycobacterium canetti
Mycobacterium microti
Transmisin aergena (la ms frecuente)
Muy baja dosis infectante (aprox. 10 bacterias)
No existen portadores sanos de M. tuberculosis
M. tuberculosis: reservorio humano
M. bovis: reservorio bovino
Micobacterias tuberculosas y tuberculosis (TB)
Micobacterias no tuberculosas
Causan micobacteriosis (muy frecuentemente pulmonares)
Estructura similar a la de M. tuberculosis
Diferenciables por velocidad de crecimiento y pigmentacin
(antigua clasificacin de Runyon)
Crecimiento lento:
oAcromgenas (no pigmentadas): avium-intracellulare, terrae, etc.
oPigmentadas: Fotocromgenas (por exposicin a la luz)
(marinum, simiae, etc.)
Escotocromgenas (en ausencia de luz)
(scrofulaceum, xenopi, etc.)
Crecimiento rpido (fortuitum, chelonae, etc) (siempre mucho
ms lento que la mayora de las bacterias)

Menos virulentas que M. tuberculosis
Oportunistas
Coinfeccin con HIV
Mycobacterium leprae y lepra (Enfermedad de Hansen)

Bacilo alcohol-cido resistente
M. leprae no crece en medios de cultivo
Infeccin crnica de la piel, membranas mucosas, nervios perifricos,
sistema respiratorio superior.
Perodo de incubacin prolongado (hasta 30 aos, promedio 5-7 aos)
Area endmica: Chaco, Santa Fe, Formosa, Buenos Aires, Corrientes,
Entre Ros, Misiones.
Incidencia: de 400 a 500 nuevos casos por ao
Prevalencia: entre 1,5 a 2 por cada 1.000 habitantes en el rea endmica
Tuberculoide (LT) Lepromatosa (LL)
Tipos de lepra: Clasificacin de Ridley y Jopling (1966)
INMUNIDAD
CELULAR
ANTICUERPOS
MAGNITUD DE LAS
LESIONES CUTANEAS
BACILOS EN
LAS LESIONES
Manifestaciones clnicas: varan ampliamente entre dos formas polares
Espectro clnico refleja el grado de IMC a M. leprae
Borderline (BB)
Borderline tuberculoide (BT) Borderline lepromatosa (BL)
1 m
Leptospira
Treponema Borrelia
1 m
Bacterias con morfologa espiralada
Gneros con importancia mdica:
Treponema, Borrelia, Leptospira

Otras con importancia mdica (fuera de Argentina):
Treponema pallidum subesp. epidemicum (bejel)
Treponema pallidum subesp. pertenue (pian)
Treponema carateum (pinta)
Borrelia recurrentis y otras spp. (fiebre recurrente)
Borrelia burgdorferi (enfermedad de Lyme) (?)
Especies con importancia mdica en Argentina:
Treponema pallidum subesp. pallidum (sfilis)
Leptospira interrogans (leptospirosis)
1 m
Treponema pallidum: caractersticas
Morfologa helicoidal caracterstica
Muy finas, no toman la tincin de gram
Mviles
Contraste de fase
Impregnacin
argntica
Inmunofluorescencia
Metabolismo aerobio
No pueden cultivarse en medios bacteriolgicos
Propagacin en testculo de conejo
Muy sensibles a antispticos
T. pallidum: esquema de sus envolturas
Me Cit
Par Cel
Pe Muc
Me Lip
Ca Anf Ext
Los endoflagelos proporcionan
un endoesqueleto
Virulencia de Treponema pallidum
Alta motilidad
Lipopolisacrido con muy baja
actividad endotxica
No produce exotoxinas
Produce hialuronidasa
Adhesina apical: unin a fibronectina
(expresin de ICAM-1 y adherencia
de monocitos por CD43)
Adherencia ntima de membranas
celulares y envolturas del treponema
Evasion de los mecanismos de
defensa innata y adaptativa por
enmascaramiento con:
- fosfolpidos de husped
- protenas del husped
Anticuerpos contra lpidos del husped
Endoarteritis obliterativa

Sfilis: formacin del chancro de inoculacin
Diseminacin
Penetracin
Multiplicacin
T
i
e
m
p
o

0 das
3-90 das
Media 30 das
Dao (chancro)
(sfilis primaria)
Generacin de anticuerpos:
Contra antgenos proteicos (Ac treponmicos)
Contra antgenos lipdicos (Ac no treponmicos)
Chancro de inoculacin (sfilis primaria)
Posteriormente sfilis secundaria y sfilis terciaria
Leptospira interrogans y leptospirosis
Enfermedad zoontica ms ampliamente distribuida
en el mundo y quizs la ms prevalente.
Enfermedad infecciosa emergente, segn la OMS:
recientes brotes en Nicaragua, Brasil, India, Malasia
y EEUU.
Amrica Central y Sudamrica: brotes durante
inundaciones por lluvias asociadas al fenmeno de
la corriente de El Nio.
Argentina: 50/100 casos espordicos/ao.
Aerobias estrictas
Crecen en medios enriquecidos (Fletcher)
Crecimiento lento (hasta 12 semanas)
Temperatura ptima de desarrollo: 28-30
o
C
Sobrevive varios das en agua a pH > 7
Pierden viabilidad en medios cidos
Sensibles a la desecacin
Sensibles a muchos desinfectantes

Doce 12 especies y 7 genomoespecies
Leptospira interrogans: especie prevalente en el hombre
Especies y genomoespecies subclasificadas en
serogrupos y serovariedades (>260)
Leptospira interrogans y leptospirosis
Puertas de entrada ms comunes:
abrasiones cutneas
conjuntiva
Reservorio: aguas contaminadas con
orina de animales enfermos
huspedes permanentes: roedores
huspedes accidentales: hombre, perro,
animales de granja.
No se transmite por contacto interhumano
Leptospira interrogans y leptospirosis
Fase I: aguda o septicmica.
1
a
semana: fiebre alta ondulante, cefalea, mialgias,
inyeccin conjuntival.
Existe leptospiremia.
Fase II: fase secundaria o inmunitaria.
2
a
semana: complicaciones asociadas a la localizacin
primaria de las leptospiras: vasculitis, infiltrados
inflamatorios y dao endotelial (depsito de
inmunocomplejos/accin de LPS?). Nefropata severa
con insuficiencia renal.
Existe leptospiruria.
Leptospira interrogans y leptospirosis
Especies bacterianas ms pequeas con capacidad de replicacin

Genoma bacteriano pequeo (economa de genes)(58kb el ms pequeo)
Parentesco lejano con los Clostridium.

Requerimientos nutricionales complejos (nucletidos, aminocidos,
fosfolpidos, colesterol)
Crecen lentamente en medios semislidos (tiempo medio de generacin
de 1 a 6 hs)
Anaerobios facultativos

Gneros Mycoplasma y Ureaplasma
Atraviesan los filtros de esterilizacin
Son pleomrficas: cocos (0,1-0,2 ) o bacilos (hasta 2 de largo)
Sus envolturas contienen colesterol
Carecen de pared bacteriana (no sintetizan peptidoglicano)
Resistentes a antibiticos que interfieren con la formacin de pared
bacteriana
Gneros Mycoplasma y Ureaplasma
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Mycoplasma pneumoniae: importancia mdica
Mycoplasma pneumoniae:
Reservorio humano exclusivo
Diseminacin por aerosoles
Dosis infectante muy baja
Factor de riesgo: hacinamiento
Neumona (atpica) en huspedes de la comunidad
Grupo etario ms afectado: 5-19 aos
Dao epitelial respiratorio
Bacteria cultivable, lento desarrollo
Formada por una red de protenas que interaccionan entre si:
Adhesinas (P1 y P30) y proteinas accesorias (HMW1, HMW2, A, B, C)
que mantienen la distribucin adecuada y disposicin de las adhesinas
Mycoplasma pneumoniae: organela de adherencia
Organela de
adherencia
Cuerpo Cola
Citoesqueleto
cilia
Membrana celular
del micoplasma
Ribosomas
Nucleoide
Micro-
vellosidad
Membrana de la
clula epitelial
Protena P1 de la
organela de adhesin
Epitelio Traqueal
Mycoplasma pneumoniae: adherencia
ntima al epitelio respiratorio
Infeccin respiratoria baja
Adhesina en posicin apical
Unin intima entre envoltura del
micoplasma y las membranas celulares
Intercambio de proteinas entre
envolturas y membranas
Dao oxidativo
Homologa entre protenas del
citoesqueleto y proteinas del husped
(miosina, fibringeno, queratina)
Seroconversin contra protenas del
husped
Variacin antignica de lipoprotenas
de membrana del micoplasma
Desrdenes autoinmunes
Manifestaciones extrapulmonares:
exantemas y anomalas cardacas
Inmunosupresin transitoria
Gneros Mycoplasma y Ureaplasma: importancia mdica
Mycoplasma hominis: presente como comensal en el tracto genital de
aprox. 15% de hombres y mujeres sexualmente activos
Ureaplasma urealyticum: coloniza el tracto genital de aprox. 60% de
mujeres sexualmente activas asintomticas y la uretra del 5 al 20% de
los hombres asintomticos sexualmente activos.
Mycoplasma genitalium: no forma parte de la flora normal
Patologa U. urealyticum M. hominis M. genitalium
Uretritis no gonocccica
+ - +
Prostatitis
+/- - +/-
Epididimitis
+/- - -
Vaginosis (G. vaginalis)
+/- +/- -
Cervicitis
- - +
Enf. Inflam. Plvica
- + +
Infertilidad
+/- - +/-
Transmisin vertical de U. urealyticum y M. hominis
Ascendente: infeccin intrauterina y fetal (pulmn)
Hematgena: corioamnionitis y neumona del feto
Perinatal: pueden causar neumona y meningitis
Trastornos de la inmunidad y otras complicaciones (artritis destructiva)
Chlamydia y Chlamydophila: taxonoma
Departamento de Microbiologa, Parasitologa e Inmunologa, Facultad de Medicina, UBA
Metablicamente dependientes
Carecen de citocromos, no pueden sintetizar ATP
Parasitismo energtico
Bacterias intracelulares obligadas
Gneros Chlamydia y Chlamydophila
Gneros Chlamydia y Chlamydophila
Ciclo de replicacin complejo con dos estadios:
Cuerpo elemental (infeccioso): metabolicamente inactivo, pequeo,
extracelular, no se replica, contenido ARN/ADN 1:1.
Cuerpo reticulado (replicativo): metabolicamente activo, mayor
tamao, intracelular, replica por fisin binaria, contenido ARN/ADN 3:1.
Cuerpo
elemental (CE)
Clula
epitelial
Ncleo
Inclusin
Cuerpo
reticulado (CR)
Horas
Cuerpo reticulado
(CR) en replicacin
LPS
OmcB
OmcA
M
O
M
P

Protenas ricas en cistena
Membrana
citoplsmica
Membrana
externa
Espacio
periplsmico
Envolturas de Chlamydia y Chlamydophila
Envolturas semejantes a gram (-), pero carecen de peptidoglicano
LPS de muy baja toxicidad, comn a todos los gneros
MOMP (protena principal de la membrana externa)
Funcionalmente activa: actividad de porina
Se unen a receptores de manosa y a heparina en la clula husped
Importante componente estructural de la membrana externa
Definen las variantes serolgicas (19 serovars) en C. trachomatis
Interlazada con protenas ricas en cistena por puentes disulfuro para
formar el complejo supermolecular
OmcA y OmcB: protenas de expresin tarda, interlazan MOMPs
M
O
M
P

Gneros Chlamydia y Chlamydophila
Cuerpo
elemental (CE)
Clula
epitelial
Ncleo
Inclusin
Cuerpo
reticulado (CR)
Horas
OmcB con alto entrecruzamiento.
Con las MOMPs forma el complejo
supermolecular a travs de puentes
disulfuro entre MOMP y OmcA
Confiere estabilidad al CE en el medio
extracelular (alta rigidez estructural)
La MOMP es menos funcional
Sntesis
de MOMP
Sntesis tarda
de OmcA
Escasa OmcA, mayor
funcionalidad de MOPM
Modificacin del entorno
intracelular (diversas protenas)
Inhibicin de
la fusin de
los lisosomas
y endosomas,
alteracin de
seales
Tres biovariedades (se diferencian por el tropismo a tejidos):
(biovar pneumonitis en ratn)
biovar linfogranuloma venereo (LGV)
biovar tracoma
MOMPs definen 19 serovariedades
Biovar LGV: 4 serovars (L1, L2, L2a y L3)
Biovar tracoma: 15 serovars (A, B, Ba, C, D-K, Da, Ia y Ja)
Biovar LGV:
C. trachomatis L1-L3: linfogranuloma venreo (ITS) (1)
Biovar tracoma:
C. trachomatis D- K: infecciones genitales: uretritis (2) y cervicitis (3),
conjuntivitis e infecciones respiratorias en neonatos
C. trachomatis A-C: Tracoma (endmico) (4)
Chlamydia trachomatis: biovars y serovars
1 2 3 4
C. trachomatis D- K: infecciones genitales
y transmisin vertical (perinatal)
En el hombre:
Sindromes clnicos: uretritis (30-50% de todas las uretritis no
gonocccicas), epididimitis, proctitis, conjuntivitis
Complicaciones: infertilidad, Sndrome de Reiter (uretritis,
conjuntivitis, poliartritis, lesiones mucocutneas)
En la mujer:
Sindromes clnicos: uretritis, cervicitis, bartolinitis, conjuntivitis
Complicaciones: embarazo ectpico, infertilidad (10% despus de
un episodio, 30% despus de 2, >50% despus de 3), enfermedad
inflamatoria plvica (salpingitis, endometritis), diseminacin sistmica:
perihepatitis, artritis, dermatitis.
En el recin nacido:
Sindromes clnicos: conjuntivitis
Complicaciones: neumonitis intersticial
Chlamydophila pneumoniae: importancia mdica
Chlamydophila psittaci
Una nica serovar
Reservorio humano exclusivamente (5% portadores sanos)
Transmisin persona a persona por aerosoles
Perodo de incubacin de varias semanas
Causa 8% de todas las neumonas atpicas en la comunidad,
generalmente autolimitadas
Asociada a enfermedades crnicas: asma intrnseca, sarcoidosis,
arterioesclerosis y enfermedad de Alzheimer.
Ocho serovars (A: aves y humanos; CyD: hombre)
Enfermedad infecciosa zoontica: psitacosis.
Enfermedad ocupacional
Transmisin aergena
Perodo de incubacin de varias semanas
Neumona atpica, luego diseminacin sangunea
Muchas gracias!
Bibliografa de respaldo: no reemplaza los contenidos de la clase.
Murray PR y col. Microbiologa Mdica, Ed. Elsevier-Mosby, 6 ed., 2009.
Basualdo JA y col. Microbiologa Biomdica. Ed. Atlante, 2006.
Sordelli DO y col. Bacteriologa Mdica. Ed. La Librera de las Ciencias, 2006.