Controle biolgico da antracnose no mamo, utilizando-se leveduras antagonistas ao Colletrotrichum gloeosporioides
Elizete Cristina Dada de Arajo
Belo Horizonte Minas Gerais 2007
Controle biolgico da antracnose no mamo, utilizando-se leveduras antagonistas ao Colletrotrichum gloeosporioides
Elizete Cristina Dada de Arajo
2007 Elizete Cristina Dada de Arajo
Controle biolgico da antracnose no mamo, utilizando-se leveduras antagonistas ao Colletrotrichum gloeosporioides
Monografia apresentada ao Departamento de Microbiologia do Instituto de Cincias Biolgicas da UFMG, como requisito para obteno de ttulo de especialista em Microbiologia Ambiental e Industrial.
Orientador: Dr. Ary Corra
Co-orientador: Leonardo Rodrigues (Mestre)
Universidade Federal de Minas Gerais Instituto de Cincias Biolgicas Belo Horizonte Minas Gerais 2007
Agradecimentos
A Deus, por ter me inspirado na escolha do tema, que tanto vem me instigando a dar novos passos na conquista de meu espao profissional, e pelo suprimento de tudo quanto necessitei para trilhar o caminho desta especializao.
Ao Prof. Ary Corra, pela ateno e confiana em mim depositadas, na execuo deste trabalho.
Ao Leonardo Rodrigues, pelo apoio fundamental neste percurso.
minha me, Mrcia Elizabete, pela fora e carinho em momentos to importantes em minha vida.
Ao meu noivo Gbor, pela demonstrao de companheirismo, com quem pude compartilhar alegrias, tristezas e esperanas no percurso desta especializao.
A todos os meus colegas e professores com quem convivi e compartilhei os meus anseios.
S til o conhecimento que nos torna melhores. (Scrates)
SUMRIO
I. RESUMO 06 II. INTRODUO A. Escolha do tema 06 B. Sobre o mamo 08 1.Origem do mamo 08 2.Cultivares 08 3.Caractersticas do mamo 09 4.Usos do Mamoeiro 10 5.Cultura e Condies de Clima e Solo 11 6.Potencial Mercadolgico do Mamo 11 7.Doenas do mamo 12 C. Consideraes sobre antagonismo 15 III. OBJETIVO GERAL 16 IV. REVISO DE LITERATURA A. Antracnose 16 B. Controle fsico 18 C. Controle qumico 18 D. Controle biolgico 20 1.Controle biolgico em pr-colheita 23 2.Controle biolgico em ps-colheita 24 3.Integrao do controle com mtodos alternativos 26 4.Utilizao de misturas de leveduras 26 5.Integrao do controle fsico com o biolgico 27 6.Integrao do controle qumico com o biolgico 27 V. JUSTIFICATIVA A. O porqu do mamo? 29 B. O porqu do controle biolgico? 29 C. O porqu das leveduras como antagonistas? 29 D. O porqu da antracnose? 30
VI. DISCUSSO 30
VII. CONCLUSO 31
VIII. REFERNCIA BIBLIOGRFICA 31
6 I. RESUMO
A antracnose, causada pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides, uma das mais importantes doenas ps-colheita do mamo. O controle desta enfermidade tem sido realizado por meio de tratamentos ps-colheita com fungicidas protetores. Entretanto, dado crescente preocupao com resduos de agrotxicos sobre os produtos, bem como o desenvolvimento de resistncia pelos patgenos, novas estratgias de controle, incluindo o controle biolgico, tm sido testadas como alternativas ao uso de fungicidas. O presente trabalho tem como objetivo o estudo do controle biolgico da antracnose no mamo, utilizando-se leveduras antagonistas no controle do fungo C. gloeosporioides. Vrias metodologias foram utilizadas com sucesso nos trabalhos citados para obteno de controles biolgicos a fim de controlar alm do fungo C. gloeosporioides outros fungos tambm causadores de grandes perdas econmicas na agricultura.
II. INTRODUO A. Escolha do tema: A qualidade ps-colheita dos frutos relaciona-se a um conjunto de atributos ou propriedades que os tornam apreciados como alimento. Esses atributos, por sua vez, dependem do mercado de destino, forma de armazenamento, tipo de consumo (in natura) ou processamento. De modo abrangente, a qualidade pode ser definida como o conjunto de inmeras caractersticas que diferenciam componentes individuais de um mesmo produto e que tm significncia na determinao do grau de aceitao pelo comprador. Assim devem ser considerados os atributos fsicos, sensoriais e a composio qumica. Assim sendo a determinao da qualidade do produto depende de fatores objetivos e subjetivos que devem ser levados em conta em associao e que afetam ou no a qualidade do produto (TEIXEIRA, 2005). As grandes perdas decorrentes da fase ps-colheita de frutas por causa do aparecimento de podrides, geralmente oriundas do campo, so um dos principais problemas enfrentados pelos produtores de frutas e hortalias (SILVA et al, 2001). 7 No Brasil, as perdas ps-colheitas de frutos tropicais como o mamo, so bem elevadas, o que gera prejuzo na sua comercializao. Em geral, os agentes causadores de podrides em ps-colheita apresentam uma caracterstica comum, que a capacidade de se estabelecerem no fruto imaturo e permanecerem em estado latente, sem o aparecimento de sintomas, at que haja condies para que o processo de infeco tenha lugar (FARIAS et al, 1998). Por se tratar de uma doena em que os sintomas nem sempre so percebidos at a fase de amadurecimento dos frutos, recomenda-se que o controle, nesse caso, seja efetuado antes que os frutos amaduream (FARIAS et al, 1998). De maneira geral, o controle de doenas em ps-colheita do mamoeiro, segue algumas recomendaes que se iniciam no prprio campo de produo, indo at a comercializao (SILVA et al, 2001). Basicamente os controles se classificam em trs tipos: fsico, qumico e biolgico. Como variao destes surgem as associaes. O tratamento trmico, composto por imerso de frutos de mamo em gua a 48 C por 20 min, foi uma das principais referncias ao uso de tratamento com gua quente para frutos. O procedimento no elimina completamente a doena, mas tem efeito economicamente significativo (SILVA et al, 2001). Concomitantemente ao tratamento com gua quente para mames ps-colhidos, tm sido utilizadas a associao desse tratamento com ceras e com fungicidas como thiabendazol que apresentou uma significante reduo nas perdas ps-colheitas devidas antracnose (FAGUNDES et al, 2005). No que tange aos tratamentos qumicos no se pode deixar de considerar os seus efeitos secundrios. Outro fator a ser considerado a diminuio da eficcia dos produtos utilizados comercialmente, fato associado ao aparecimento de organismos que apresentam nveis elevados de resistncia principalmente queles pertencentes ao grupo dos benzimidazos. Alm da quantidade, a busca por qualidade, aliadas reduo de custos influencia um novo padro tecnolgico na agricultura, favorecendo a integrao do controle biolgico de doenas no sistema de manejo (CAPDEVILLE et al, 2005). Diante disso, deve-se considerar o desenvolvimento de mtodos alternativos, para contrapor os prejuzos decorrentes dos controles qumicos, tais como a utilizao de leveduras antagonistas ao C. gloeosporioides no combate antracnose. 8 B. Sobre o mamo: 1. Origem do mamo Segundo, o mamoeiro uma planta tipicamente tropical, cujo centro de origem , provavelmente, o Noroeste da Amrica do Sul, onde a diversidade gentica mxima. Sendo o Brasil, o principal produtor mundial de mamo, com a participao no ano de 1990 de 4.432.000t de frutos, correspondente 37,23% do total produzido no mundo (FARIAS et al, 1998).
2. Cultivares
Algumas das principais variedades de interesse comercial so: a) Sunrise Solo: procedente do Hava planta precoce, frutos periformes ou arredondados, com peso de 400-600 g, polpa laranja-avermelhada de excelente sabor,indicada para consumo in natura podendo produzir 45 t/ha/ano, mais conhecida no Brasil como mamo-hava, mamo-papaia ou mamo-amaznia. O fruto proveniente de flor feminina, ovalado e o de flor hermafrodita (com rgos reprodutores dos dois sexos), possui casca lisa e firme. O florescimento tem incio entre 3 e 4 meses de idade, oitenta cm de altura do solo, e a produo entre e dez meses aps o plantio. b) Formosa: hbrida de origem chinesa, frutos com peso de 0,8 a 2,5 kg, polpa amarela ou avermelhada, com produo acima de 70 t/ha/ano. c) Tainung n 1: Hbrido altamente produtivo resultante de um tipo de mamo de polpa vermelha, (da Costa Rica X Sunrise Solo), frutos redondos ou alongados, e p de flor hermafrodita comprido, com peso mdio de 900g, apresentando casca de cor verde clara e polpa laranja-avermelhada, de timo sabor, com cheiro forte, boa durabilidade de transporte e pouca resistncia ao frio com produtividade mdia de 60 t/ha/ano. d) Improved Sunrise Solo CV. 72/12: Precoce (8 meses ps plantio), produtivo, insero das primeiras flores a 60 cm de altura, fruto periforme a 9 ovalado com 450 g de peso, polpa vemelho-alaranjada, produo abaixo da Sunrise Solo, com produtividade mdia de 40 ton/ha/ano. (FARIAS et al, 1998).
3. Caractersticas do mamo O mamoeiro uma planta herbcea, altura entre 2 e 10m, podendo viver at os 20 anos. Possui sistema radicular superficial com razes brancas e pouco abundantes, caule geralmente nico, fibro-esponjoso, verde a cinza-claro, fcil de quebrar e encimado por coroa de folhas terminal (em capitel). Folhas grandes, alternas, lombadas com pecolo longo (25-100 cm.), oco e frgil; flores masculinas ou femininas ou hermafroditas (em indivduos distintos), cor branco- amarelada a amarela com ovrio com formato arredondado ou alongado (cilndrico) (FARIAS et al, 1998). O fruto uma baga, nasce do caule ou de pednculo longo (macho) arredondado, cilndrico ou periforme e amarelo ou alaranjado quando maduro; polpa de consistncia suave e sucosa, cor salmo, vermelha e at amarela com at 1.000 sementes negras que se inserem na cavidade interna do fruto (FARIAS et al, 1998) . A casca geralmente fina, bastante resistente, aderida polpa, lisa, de cor verde escura, que vai se tornando amarelada ou alaranjada medida que o fruto vai amadurecendo. O formato do mamo tambm varia dependendo da espcie (FARIAS et al, 1998) . O sexo da flor do mamoeiro determina a existncia de mamoeiros masculinos (mamo-macho) mamoeiro femininos e mamoeiros hermafroditas. As flores podem ser unissexuais - masculinas ou femininas - e bissexuais (hermafroditas) (FARIAS et al, 1998). Plantas masculinas: Com flores distribudas por inflorescncias de pednculos longos e pendentes (pendulas); rgo reprodutor masculino existente, ativo e rgo reprodutor feminino rudimentar, mas que pode tornar-se funcional produzindo mames deformados - mamo-macho, mamo-de-calo ou mamo-de-corda - sem valor comercial. Plantas femininas: Apresentam flores femininas, amarelas, isoladas ou em grupo de 2 a 3 que se inserem diretamente no caule. Os frutos decorrentes so arredondados a ligeiramente ovais. Um pomar com plantas femininas 10 necessita de mamoeiros masculinos - em 10-12 % dos indivduos - uniformemente distribudos no pomar para assegurar a produo. Plantas hermafroditas: Apresentam flores com rgos masculinos e femininos na mesma flor e no dependem de outras para a fecundao. Tem forma alongada (elongata) ou arredondada (pentandrica) e seus frutos podem ser cilndricos (preferidos comercialmente) ou arredondados (FARIAS et al, 1998). Vrios fatores induzem variabilidade nas flores ao longo do ciclo da planta; os frutos em decorrncia podem apresentar-se em formas diversas. Assim flores hermafroditas podem tornar-se femininas, e masculinas tornarem-se hermafroditas (produzindo o mamo-macho); as flores femininas so mais estveis. O sexo da planta identificado aps a emisso das flores (FARIAS et al, 1998). A variedade comercial caracterizada por haste vigorosa com pequena distancia entre ns, entra em florao 3 a 6 meses aps semeio, precoce, porte baixo e maturao do fruto em 5-6 meses ps florao, ausncia de ramificao lateral (FARIAS et al, 1998). A composio por 100 g de polpa : calorias 32, gua 90 g, carboidratos totais 8,3 g, fibra 0,6 g, protenas 0,5 g Gorduras 0,1 g, clcio 20 mg, ferro 0,4 mg., fsforo 13 mg, caroteno 110 mg, Vit. B 1 0,03 mg, Vit. B 2 0,04 g, Vit C 46 mg (FARIAS et al, 1998).
4. Usos do Mamoeiro: a) Planta: Produz ltex que contm papana (enzima proteoltico) com propriedades digestivas; o ltex extrado, principalmente, do fruto verde e contm 0,15 a 3,75 % de papana empregada em culinria (digesto, amaciamento de carnes), em indstria (de cerveja, queijo, chicletes, couro) e em farmacutica (produtos para dispepsias). Da semente, folha e fruto extrai-se um alcalide - a carpaina - empregado em medicina como ativador do msculo cardaco. b) Fruto: a polpa suave, saborosa e aromtica consumida, ao natural, s ou em mistura com polpas de outros frutos, sob forma de purs, cremes 11 gelados, cubos cristalizados, sucos. Processada a polpa compe doces, gelias, compotas, polpa congelada, aguardente. A polpa do fruto desenvolvido e ainda verde utilizada como legume em culinria domstica. A semente usada na propagao comercial do mamoeiro (formao de mudas). (SECRETARIA DA AGRICULTURA, 1996)
5. Cultura e Condies de Clima e Solo O mamoeiro tem crescimento regular e produz frutos de boa qualidade em regies com temperaturas de 22 C a 26 C, pluviosidade entre 1800 mm e 2000 mm anuais, e altitude de at 200m acima do nvel do mar. Tambm pode se adaptar em regies com altitudes mais elevadas e temperaturas mais baixas, embora a qualidade dos frutos seja inferior aos produzidos em regies mais quentes. O melhor solo para o plantio do mamo o de textura areno-argilosa, pH variando de 5,5 a 6,7 (FARIAS et al, 1998) .
6. Potencial Mercadolgico do Mamo A cada ano a cultura do mamoeiro se destaca entre as frutas de maior consumo no mundo, principalmente pelo grande aproveitamento dos frutos, consumidos in natura (quando maduros), em doces industrializados (quando verdes), ou para extrao da papana e pectina, sendo que h muito o mamo brasileiro apontado como uma das frutas de maior potencial nos mercados mundiais, especialmente Europa e Amrica do Norte. A Europa importa cerca de 39 mil toneladas (AGRIANUAL, 2003). No Brasil, os cultivos comerciais comearam na dcada de 60, inicialmente em Monte Alto, estado de So Paulo. Entretanto, devido doena do mosaico do mamoeiro, a cultura migrou para os estados do Esprito Santo e Bahia, tornando-se essas as principais regies produtoras, responsveis por mais de 80 % da produo no pas (AGRIANUAL, 2003). O volume comercializado de mamo em parte destinado ao mercado interno e uma pequena porcentagem ao mercado externo. A comercializao no 12 mercado interno tem se realizado na quase totalidade em Centrais de Abastecimento de grandes centros consumidores como So Paulo, Rio de Janeiro, Curitiba e Belo Horizonte, sendo administrada por cooperativas, intermedirios ou pelo prprio produtor (SABBAG, 2002). A evoluo do crescimento da produo do mamo, de 1.650.000t/ano para 3.300.000t/ano (AGRIANUAL, 2003) de 2000 a 2003 indica a importncia desta fruta no mercado de frutas no Brasil, principalmente considerando-se o mercado externo que ainda muito tmido em relao ao consumo interno no ultrapassando a faixa dos 3 %, sugerindo um trabalho de marketing (SABBAG, 2002).
7. Doenas do mamo As doenas causadas por fungos constituem um fator limitante na produo, mercabilidade e exportao do mamo in natura, exigindo, portanto medidas adequadas de controle (ALVAREZ, 1988, citado por SOUZA et al, 2003). Essas doenas tm contribudo para a reduo da qualidade das frutas, destacando-se os tipos de infeces quiescentes, as infeces externas por patgenos oportunistas e as deterioraes internas. (SOUZA et al, 2003). Todos os estgios da cultura so suscetveis a uma ou mais doenas, e o xito ou fracasso da produo depender exclusivamente da maior ou menor incidncia das mesmas, o que por sua vez resulta na adoo de medidas preventivas adequadas (SOUZA et al, 2003). As doenas fngicas incidentes na cultura do mamoeiro no Brasil, podem ser classificadas em funo do perodo (pr-colheita ou ps-colheita) ou em funo da localidade na planta (raiz, caule, folha, pecolo, polpa) (SOUZA et al, 2003). As de maior importncia econmica so as doenas ps-colheita pois perdas provocadas por elas atingem propores enormes na economia regional brasileira, e so responsveis pelo principal afunilamento retardador do desenvolvimento da indstria do mamo. No entanto o principal problema no o prejuzo monetrio inicial, mas a perda de confiana na qualidade do produto, o que pode, no futuro, afetar a demanda (SOUZA et al, 2003). 13 Uma das principais motivaes para o desenvolvimento de doenas na ps-colheita provocada por injrias mecnicas, levando a prejuzos que variam de 10 a 40 % em embarques terrestres e de 5 a 30 % em areos comuns (SOUZA et al, 2003). As principais doenas que afetam o mamoeiro so as que seguem listadas: a) Vrus-do-mosaico-do-mamoeiro: uma virose que reduz sensivelmente a produo do fruto e prejudica a qualidade do fruto. Seus principais sintomas so amarelecimento e enrugamento das folhas mais novas, clareamento das nervuras, mosaico nas folhas e paralisao do crescimento das plantas. Os afdeos (pulges) so os principais responsveis pela transmisso do vrus de uma planta para outra, sendo suas principais hospedeiras as plantas da famlia das cucurbitcea; b) Vrus-da-mancha-anelar-do-mamoeiro: a mais prejudicial doena do mamoeiro e a principal responsvel pelo carter itinerante da cultura. Plantas afetadas apresentam baixa produtividade e os frutos atingidos pela virose podem tornar-se imprestveis para a comercializao no mercado interno. Os sintomas da doena comeam com o amarelecimento das folhas mais novas, clareamento das nervuras, enrugamento e mosaico nas folhas, reduo da lmina foliar (sintoma conhecido como fio-de-sapato), aparecimento de estrias oleosas nos pecolos e na parte superior do caule, formao de anis nos frutos e como conseqncia, alteraes em seu sabor e aroma; c) Meleira: doena provavelmente causada por um vrus. O principal sintoma a perda por gotejamento do ltex (leite) nos frutos. Ao ficar escuro, esse lates d aos frutos um aspecto de borrado ou melado , comprometendo sua qualidade comercial. A perda por gotejamento ou exsudao pode ocorrer tambm nos pecolos e na extremidade de folhas novas, independentemente da idade das plantas. O ltex dos frutos com meleira escorre com maior facilidade do que o dos frutos normais, por causa de sua menor viscosidade e dificuldade de coagulao. Frutos doentes apresentam sabor e consistncia da polpa alterados, ficando imprestveis para a comercializao; d) Tombamento ou Damping-off: um problema comum em sementeira, embora possa ocorrer tambm em campo. causado por um complexo de fungos de solo, tais como Rhizoctonia, Phytophthora, Pythyum e 14 Fusarium, que podem atuar juntos ou separadamente. Altas densidades de semeadura, temperatura e umidade elevadas e baixa insolao so condies ideais para o desenvolvimento da doena. Os sintomas so encharcamento dos tecidos na regio do colo, encolhimento da rea afetada, apodrecimento de razes, tombamento e morte das plantas; e) Podrides-de-Phytophthora: duas espcies so citadas como causadoras de podrides em mamo: P. palmivora e P. parstica. O problema mais grave em solos argilosos e mal drenados e em condies de umidade e temperatura altas. Os principais sintomas so: manchas aquosas no colo seguidas de apodrecimento, apodrecimento de razes, amarelecimento de folhas, queda de frutos, murchamento e curvatura do pice (ponteiro) ; f) Varola ou pinta-preta: causada pelo fungo Asperisporium caricae e ocorre tanto em folhas como em frutos. Na parte inferior da folha, surgem pequenas leses circulares, levemente angulosas, com esporos escuros do fungo. Na parte superior da folha, as leses so arredondadas, pardo-claras, cercadas por halo amarelo. Nos frutos, as leses so circulares, salientes, apresentando centro esbranquiado no estgio final. A ocorrncia dessa doena provoca o amarelecimento e a queda prematura das folhas, o retardamento no crescimento e o conseqente definhamento da planta; g) Odio: uma doena de ocorrncia generalizada, especialmente em viveiros muito sombreados e durante os meses mais frios do ano. causada por Oidium caricae que, em ataques intensos, provoca danos planta com reflexos na produo. Os sintomas caracterizam-se pelo aparecimento de manchas verde- amarelas de contornos irregulares. Nessas reas descoloridas surge uma massa pulverulenta branca formada pelos esporos do fungo; h) Antracnose: dentre todas as doenas do mamoeiro, a antracnose, causada pelo fungo C. gloeosporioides uma doena que aparece nos frutos em qualquer estgio do desenvolvimento, mas ela s se anuncia na fase madura, portanto ficando o fungo nesses casos em estado latente, at que as condies sejam propcias para o seu desenvolvimento. As leses comeam com formao de pontos negros, que aumentam de tamanho, originando leses profundas com at 5cm de dimetro. formada uma estrutura aquosa ao redor das leses, leses estas que se unem e se aprofundam at a polpa (FARIAS et al, 1998). Pela importncia desta doena vale maiores consideraes adiante; 15 C. Consideraes sobre antagonismo
O termo antagonista empregado para designar agentes biolgicos com potencial para interferir nos processos vitais dos patgenos, estando estas espcies adaptadas ecologicamente ao mesmo tecido das plantas que os ocupados pelos patgenos, mas sendo apatognicas s mesmas, enquanto que o termo "formas de antagonismo" designa os mecanismos pelos quais os antagonistas agem sobre os patgenos. O conhecimento dos mecanismos de antagonismo essencial no desenvolvimento de modelos racionais para a introduo de biocontroladores em agroecossistemas. So mecanismos bsicos de antagonismo: a) Antibiose: interao entre organismos, na qual um ou mais metablitos produzidos pelo antagonista tm efeito negativo sobre o patgeno, resultando na inibio do crescimento e/ou germinao; b) Parasitismo: fenmeno em que determinado microrganismo se nutre das estruturas vegetativas e/ou reprodutivas do outro durante o seu ciclo de vida; c) Hipovirulncia: introduo de linhagem do patgeno menos agressiva ou no patognica, que pode transmitir esta caracterstica para as linhagens patognicas; d) Predao: quando um organismo, atravs de injria obtm alimento de seu hospedeiro; e) Induo de resistncia: estmulo dos mecanismos de defesa do hospedeiro pela introduo de organismos no patognicos e/ou seus metablitos e/ou linhagens fracas ou avirulentas do patgeno; f) Competio: interao entre dois ou mais organismos empenhados na mesma ao, e ocorre principalmente por alimentos (carboidratos, nitrognio e fatores de crescimento), por espao e por oxignio. As hifas dos patgenos tm sido sugeridas como um importante fator na competio por nutrientes entre os antagonistas Enterobacter cloacae e Rhizopus stolonifer em pssego, e entre as leveduras antagonistas Pichia guilhiermondii e P. italicum em frutas ctricas (JANISIEWICZ et al, 2002).
16 III. OBJETIVO GERAL Compreenso dos processos de desenvolvimento da antracnose, provocado pelo fungo C. gloeosporioides e a utilizao de leveduras antagonistas no controle biolgico do mamo.
IV. REVISO DE LITERATURA A. A antracnose: No Brasil, perdas ps-colheita de frutos tropicais como banana, manga e mamo situam-se na ordem de 50% ou mais dos produtos comercializados segundo PANTASTICO, 1981 citado por CAPDEVILLE et al, 2005. Dentre os fatores que influenciam a qualidade dos frutos na fase de comercializao esto as perdas provocadas por injrias mecnicas e por patgenos. A falta de um manuseio adequado considerada o principal causador de danos nos frutos. Estes danos tambm facilitam o ataque de microrganismos patognicos que afetam sua qualidade e reduzem sua vida til (JANISIEWICZ et al, 2002). A antracnose considerada a doena mais importante na ps-colheita do mamo e ocorre em todos os pases produtores. Embora ocorra em frutos em qualquer estgio de desenvolvimento, apresenta-se com maior freqncia nos maduros. Sua nocividade para a economia muito grande, pois os frutos atacados tornam-se imprprios para o consumo e inaceitveis para a comercializao. Ainda que frutos colhidos no apresentem sintomas da doena, ela se manifesta na fase de ps-colheita, causando grandes perdas (CAPDEVILLE et al, 2005). A antracnose do mamoeiro atribuda ao fungo C. gloeosporioides, que tem como fase teleomrfica, Glomerella cingulata, filo Ascomycota, classe Ascomycetes, ordem Phyllacorales, famlia Glomerellaceae e gnero Glomerella (JANISIEWICZ et al, 2002). Esta enfermidade se caracteriza, inicialmente, por pequenas manchas arredondadas, aquosas e pardacentas, sobre a superfcie do fruto. No decorrer da maturao, essas manchas vo aumentando rapidamente de tamanho, formando leses circulares ligeiramente deprimidas. O ataque do fungo favorecido por condies de alta temperatura e umidade, e os condios s germinam na presena de gua e durante o perodo da germinao h a formao de apressrios e penetrao direta no hospedeiro 17 (AGRIOS,1988). Segundo Tatagiba et al, 2002, a incidncia da antracnose no Esprito Santo tem sido muito elevada em meses quentes e midos de outubro a maro e respingos de chuva, gua de irrigao, correntes de ar e/ou insetos visitantes so os responsveis pela disperso dos patgenos causadores da doena. A penetrao do fungo ocorre por ferimentos causados na superfcie dos frutos por insetos ou injrias mecnicas. O seu controle somente alcanado por meio de um contnuo programa de pulverizao (JANISIEWICZ et al, 2002). Os fungos do gnero Colletotrichum causadores da antracnose costumam provocar infeces latentes em frutos de vrias espcies vegetais. Estes fungos penetram nos frutos ainda verdes, onde permanecem inativos at seu amadurecimento. Assim frutos aparentando completa sanidade quando verdes podem vir a apresentar grande quantidade de leses por ocasio de amadurecimento. A colonizao ocorre nos frutos maduros, embora a infeco tenha ocorrido muito antes (FARIAS et al, 1998). Segundo Prusky et al. (2000), existem vrias hipteses para explicar o mecanismo de resistncia dos frutos prematuros: 1. os nutrientes disponveis para o patgeno podem ser limitados no hospedeiro prematuro, 2. os componentes antifngicos preformados presentes em frutos prematuros diminuem durante o amadurecimento, 3. os compostos antifngicos induzidos em frutos prematuros declinam durante o amadurecimento, 4. os fatores de patogenicidade fngicos podem ser ativados principalmente com o amadurecimento das frutas.
Por isso a colheita deve ocorrer quando o fruto ainda est imaturo (com 50 % de colorao amarela nas estrias), devendo ainda passar por um processo de tratamento, uma vez que, sendo a casca muito fina e sofrendo facilmente leses por manuseio inadequado, fica sujeita a ao de microrganismos (DICKMAN,1993). Alm de tratamentos destinados aos frutos, se doentes devem ser retirados e enterrados, os galpes e vasilhames de transporte devem ser desinfectados (FARIAS et al, 1998).
18 B. Controle fsico: Os tratamentos dos frutos podem ser feitos por mtodos fsicos, como hidrotrmicos, ou seja, em gua a 48 C por 20 min para evitar a antracnose, embora no elimine completamente, o mesmo tem efeito economicamente significativo (DICKMAN, 1993). Segundo Sponholz et al, (2004), cachos de bananas foram atomizados com Colletotrichum musae e imersos 24 h depois, em gua a 45, 50 e 53 C durante 0, 10, 15, e 20 min. Nos frutos de banana tratados a 45 C por 20 min a incidncia da doena foi de um fruto infectado por buqu. A exposio dos frutos a 50 C por 20 min reduziu a rea lesionada em 85 % e a 53 C por 15 e 20 min, os frutos apresentaram uma rea lesionada de aproximadamente 3% e 0%, respectivamente. Frutos no tratados apresentavam 53% da rea lesionada aos 12 dias de armazenamento. Pesquisas realizadas por Fialho, (2004), mostraram que o tratamento fsico utilizando luz ultravioleta de baixo comprimento de onda em mas, foi capaz de eliminar as estruturas dos fungos que poderiam causar a infeco em mas atravs de ferimentos ou machucaduras, controlando assim a podrido das mas causadas pelo fungo Penicillium expansum. A luz UV-C apresenta vantagens importantes para o seu uso em frutas e outros vegetais como: no contamina o produto por atuar somente na superfcie, no radiao ionizante, possui uma potente ao germicida e tem o potencial de induzir os mecanismos de resistncia natural da fruta (FIALHO, 2004). Outros tratamentos fsicos tambm podem ser utilizados, como a reduo da temperatura, utilizao de atmosfera modificada, recobrimento com pelculas protetoras, ou tratamento com altas presses (FAGUNDES et al, 2005). Apesar dos tratamentos fsicos obterem um efeito economicamente significativo, o tratamento se torna mais eficiente quando controles qumicos como fungicidas so utilizados (FARIAS et al, 1998).
C. Controle qumico: Os tratamentos qumicos como a utilizao de fungicidas, tornam o controle mais eficiente contra a antracnose, embora os fungicidas existentes no pas e usados em pomares do mamoeiro, no consigam controlar satisfatoriamente a doena (TATAGIBA 19 et al, 2002). Os fungicidas thiabendazol, Benomil, tiofanato metlico (FARIAS et al, 1998), procloraz, imazalil e chlorothalonil em mistura com tiofanato metlico ou oxicloreto de cobre, foram bastante utilizados no Brasil, sendo que este ltimo em mistura reduziu a antracnose (SILVA, et al, 2001; SPONHOLZ, et al, 2004; TATAGIBBA et al, 2002). Pulverizaes ou banhos ps-colheita de fungicidas especialmente benzimidazis, tambm reduziram a antracnose (SPONHOLZ et al, 2004). Segundo Silva et al, (2001), a podrido peduncular do mamo uma doena causada por um complexo de fungos, sendo C. gloeosporioides, Phoma caricae- papayae, F. solani e Botryodiplodia theobromae os principais agentes. Alguns fungicidas como thiabendazol, procloraz e imazalil foram avaliados com relao a sua eficincia no controle da referida doena tendo como agente etiolgico o C. gloeosporioides. O thiabendazol apresentou baixa eficincia de controle, o imazalil mostrou um desempenho intermedirio, enquanto que o procloraz teve maior eficincia entre todos eles (SILVA, et al, 2001). Outros fungicidas como o iprodione, digluconato de clorohexidina, dicloro-s- triazinatriona sdica, dicloroisocianurato de sdio e hipoclorito de sdio, reduziram a podrido causada por P. expansum em mas (BLUM et al, 2004). Sponholz et al, 2004, relataram que os fungicidas procloraz em doses de 100,125 e 250 mg.l -1 , e propiconazol a 250 mg.l -1 foram muito eficientes no controle da antracnose de bananas. Em armazenamento de at 12 dias, o fungicida tebuconazole a 250 mg.l -1 , procloraz a 62,5 mg.l -1 e propiconazol a 62,5, 100 e 125 mg.l -1 reduziram a rea lesionada dos frutos de banana para 1 a 3 %, enquanto o fungicida difeconazol foi ineficiente no controle da doena.
Segundo Sponholz et al, 2004, fungicidas inibidores da biossntese de esteris, tm sido eficientes no controle de antracnoses em diversos frutos tropicais como manga (Mangifera indica L.), abacate (Persea americana Mill), mamo (C. papaya L.), e em lichias (Litchi chinensis Sonn). Alguns frutos tratados com propiconazol, procloraz e difenoconazol apresentavam sintomas de toxidez na casca. Esta toxidez foi caracterizada por um escurecimento na casca principalmente em locais onde haviam injrias mecnicas, causadas por falta de cuidados na colheita. O controle de doenas de ps-colheita do mamo tem sido feito quase que exclusivamente por meio de fungicidas protetores, entretanto, tais produtos esto se 20 tornando menos efetivos porque os patgenos esto desenvolvendo resistncia. Tambm, a recente preocupao com a contaminao de alimentos por resduos de pesticidas tem precipitado a completa retirada de um nmero expressivo de fungicidas do mercado. Esses desenvolvimentos tm diminudo a efetividade de se controlar doenas de ps-colheita e tm estimulado a busca por novas tecnologias alternativas de controle (CAPDEVILLE et al, 2005). As restries quanto ao uso de fungicidas esto relacionados ao custo, (apesar dos avanos de nossas pesquisas, o Brasil paga caro pelo uso de agroqumicos importados), possibilidade de aquisio de resistncia pelo patgeno e s possveis conseqncias negativas para a sade e ao ecossistema. Alm da quantidade, a busca por qualidade, aliadas reduo de custos influencia um novo padro tecnolgico na agricultura, favorecendo a integrao do controle biolgico de doenas no sistema de manejo (CAPDEVILLE et al, 2005).
D. Controle biolgico: O controle biolgico consiste na utilizao de organismos, sejam eles, predadores, parasitas ou patgenos, que ataquem outros que estejam causando danos econmicos s lavouras (JANISIEWICZ et al, 2002). Estes so originados e isolados de superfcies da prpria fruta. O isolamento dos controles pode ser aperfeioado pela utilizao de frutas de pomares onde as populaes naturais no tm sido administradas com o uso de produtos qumicos, onde o reservatrio dos controles potenciais maior que os dos pomares que so administrados quimicamente. Uma variedade de mtodos tem sido usada eficientemente para favorecer o isolamento de microrganismos crescidos em substratos, como o local da ferida das frutas. Esses incluem o isolamento natural de rachaduras da superfcie das frutas; placas de gar contendo o suco da fruta em questo semeada com lavagens de outras frutas; ferimentos das frutas tratados com lavagens das mesmas e incubadas por vrios dias; feridas novamente feitas nas frutas dos pomares que foram expostos colonizao por associao da microbiota das frutas de uma quatro semanas antes da colheita; e cultura do suco da fruta resultando na diluio da semeadura do suco com a colonizao das feridas dos pomares. (JANISIEWICZ et al, 2002). O frutoplanctom tem se mostrado a mais abundante e desejvel origem do isolamento de controles contra os patgenos das frutas ps-colheita. Contudo, os 21 antagonistas podem tambm ter outras origens. O filoplanctom, por exemplo, uma delas, assim como parte da microflora residente nas frutas e outros microrganismos desalojados das mesmas (JANISIEWICZ et al, 2002). Alm das leveduras usadas em indstrias de alimento como efetivos controles, o solo tambm a origem abundante de diversos microrganismos utilizados como controle biolgico (JANISIEWICZ et al, 2002). A escolha da espcie ou isolado do controle biolgico depende de vrios fatores, sendo um dos mais importantes a natureza do patgeno a ser controlado, o que pode auxiliar na seleo do mecanismo apropriado. A distino entre atividade antagnica e capacidade de biocontrole necessita ser efetuada claramente, pois um microrganismo pode ser um excelente controle atravs de todos os testes realizados em condies controladoras e no demonstrar atividade na natureza, simplesmente porque no coloniza o hospedeiro (MICHEREFF, 1998). Uma das grandes dificuldades na utilizao de antagonistas para o controle de doenas a impossibilidade do controle das condies ambientais. So inmeros os exemplos de antagonistas bem sucedidos em laboratrio e condies controladoras que fracassam quando submetidos ao ambiente natural, com baixa umidade e presena de raios ultravioleta. E, como os produtos armazenados normalmente esto sob condies controladas de temperatura e umidade relativa, trs fatores indicam ser o controle biolgico em ps-colheita vivel e passvel de explorao: controle das condies ambientais; limitao da superfcie de aplicao dos antagonistas; economicamente praticvel sob condies de armazenamento (MICHEREFF, 1998). Por isso, um protocolo de seleo de um controle biolgico progride atravs de vrios estgios, sendo em teoria de in vivo (testes em placas de Petri e/ou lminas) para in vivo sob condies controladoras testes em plantas desenvolvidas em cmara de crescimento e, finalmente, para in vivo sob condies no controladas ( testes em campo) . Entretanto, a experincia tem demonstrado que testes de antagonismo in vitro devem ser utilizados apenas para o entendimento dos mecanismos envolvidos no biocontrole (MICHEREFF, 1998). As principais caractersticas desejveis em um agente biocontrolador de doenas incluem: (1) ser geneticamente estvel; (2) ser efetivo a baixas concentraes; (3) no ser exigente em requerimentos nutricionais; (4) ter habilidade para sobreviver sob condies adversas; (5) ser eficiente contra uma vasta gama de patgenos em vrios hospedeiros, (6) ser hbil para desenvolver em um meio de cultura barato em 22 fermentadores; (7) ser preparado de forma que possa ser armazenado; (8) ser tolerante a pesticidas; (9) ser compatvel com outros tratamentos fsicos e qumicos; (10) e no ser patognico ao homem. Alm disso, o biocontrole deve ser estrategista, como exemplo Pseudomonas spp. e muitas outras leveduras que so tipicamente estrategistas, com rpido crescimento, predominncia e colonizao (MICHEREFF, 1998). Uma vez reconhecidos os inimigos naturais da cultura e identificada a espcie em questo e seu comportamento, torna-se necessria a reproduo desse inimigo natural em quantidades elevadas com um custo reduzido (ALMEIDA, 2001). Alm disso, deve-se tambm ter conhecimento da doena do fruto, prticas de controle de doenas, produo e sistemas de armazenamento e ecossistemas de microrganismos (JANISIEWICZ et al, 2002). Apesar de muitos controles biolgicos trazerem respostas positivas na diminuio ou abandono de agrotxicos e na melhoria de renda das agriculturas, verifica-se que os resultados ainda esto concentrados em apenas alguns cultivos e principalmente, no controle de insetos, ou seja, ainda existe muito que se desenvolver nas reas de controle de pragas e doenas (ALMEIDA, 2001). O controle surgiu como uma alternativa efetiva para combater as causas de apodrecimento de frutas ps-colheita. O que estimulou o interesse do controle biolgico em doenas de frutas em geral, foram prticas concebidas com sucesso na utilizao do mesmo no controle da putrefao de pssegos. As invases das feridas das frutas por patgenos necrotrficos so vulnerveis para o controle biolgico e com isso, os antagonistas tambm podem ser aplicados diretamente na rea lesada podendo reduzir o apodrecimento das frutas significativamente (LUZ, 2002). Janisiewicz et al, (2002), relataram que o controle biolgico de frutas ps- colheita o nico em que os antagonistas so aplicados diretamente nas feridas das mesmas, isto , o ponto de entrada para os patgenos que um lugar frequentemente rico em nutrientes. A maioria dos patgenos de frutas ps-colheita so necrotrficos e requerem nutrientes para germinao e inibio dos processos patognicos. Assim, a competio por nutrientes e espao pode ser um mecanismo efetivo de controle biolgico. Vrios possveis mecanismos de biocontrole tm sido sugeridos para funcionar na fruta, incluindo antibiose, parasitismo, induo da resistncia, e competio por nutrientes e espao (JANISIEWICZ et al, 2000). A competio por nutrientes e espao tem sido frequentemente inferida, mas a 23 prova direta da importncia deste mecanismo no sistema da fruta est em falta ainda. Tem sido desafiador a identificao da competio por nutrientes da competio por espao. Nos isolados das frutas encontraram-se muitas leveduras e poucas bactrias que efetivamente controlaram o mofo azul em frutas de pomares. A maioria no produziu nenhuma substncia inibitria durante testes in vitro e foram muito eficientes na utilizao de fontes de carbono e nitrognio em ferimentos de mas e pras. A competio por nutrientes e espao so os mecanismos de controle biolgico que requerem investigaes futuras (JANISIEWICZ et al, 2000). Alguns relatos indicaram que a competio por nutrientes e espao exerce grande importncia na maioria dos casos de controle biolgico (JANISIEWICZ et al, 2002). Na prtica, provavelmente poucos organismos exercem um nico mecanismo antagnico. Um antagonista pode atuar atravs de um ou mais mecanismos, o que constitui uma caracterstica muito desejvel, pois as chances de sucesso do controle biolgico sero aumentadas. Alm disso, os mecanismos no so mutuamente exclusivos ou excludentes, pois sua importncia relativa pode variar com as condies ambientais e estado de desenvolvimento do agente biocontrolador e do patgeno (MICHEREFF, 1998). Segundo Janisiewicz et al, (2002), patgenos que toleram estresses ambientais frequentemente tm menos competidores.
1. Controle biolgico em pr-colheita: Com relao a aplicaes pr-colheitas, h duas abordagens distintas na aplicao dos agentes biocontroladores no campo para controlar a deteriorao de frutas ps-colheitas. A primeira que os antagonistas desenvolvidos em aplicaes de ps- colheitas so aplicados antes da colheita para pr-colonizar a superfcie da fruta e impedir a infeco pelo patgeno posteriormente. A outra abordagem, que os antagonistas selecionados para a aplicao em campo, so aplicados diretamente nas frutas em desenvolvimento para reduzir as infeces latentes que podem causar deteriorao de frutas depois da colheita quando os mecanismos de resistncia natural tem sido destrudos (JANISIEWICZ et al, 2002) . Vrios estudos tm demonstrado o potencial para biocontrole em doenas ps- colheita quando aplicado depois da colheita, pois poucos tm a prtica de aplicao de agentes biocontroladores em frutas em campo com o propsito de controlar deterioraes ps-colheita (BENBOW et al, 1999). 24 Uma importante considerao em aplicao em pr-colheita de agentes biocontroladores a habilidade de microrganismos para sobreviver em populaes suficientes na superfcie da fruta depois da sua aplicao. As leveduras podem ser tambm afetadas por sprays de pesticidas ou lavadas na superfcie da fruta durante a irrigao ou borrifo. Algumas leveduras podem colonizar superfcies de plantas ou feridas por longos perodos acima das condies de seca e produzirem polissacardeos extracelulares que aumentam a sua sobrevivncia e restringem os lugares de colonizao do patgeno (BENBOW et al, 1999) . As leveduras na superfcie das frutas podem ser capazes de reduzir a incidncia de infeces latentes por patgenos que no requerem feridas para causar infeco (BENBOW et al, 1999). Janisiewicz et al, (2002), relataram que Bacillus spp. pode controlar infeces latentes causadas por Colletotrichum spp. em manga e abacate. No biocontrole da antracnose do abacate, o Bacillus subtilis, aplicado como molho ou cera, remove os nutrientes circundantes do apressrio de imediato de C. gloeosporioides. As leveduras Cryptococcus infirmo-miniatus, Cryptococcus laurentii e Rhodotorula glutis aplicadas em pra no campo antes de trs semanas da colheita, mantiveram altos nveis de populao at o fim da colheita, enquanto que as populaes de Candida oleophila declinaram depois de uma a duas semanas, e perto da colheita no foi significativamente diferente do total das populaes de leveduras em frutas no tratadas (BENBOW et al, 1999). A levedura C. infirmo-miniatus mostrou a maior consistncia no controle da deteriorao da fruta tratada trs semanas antes da colheita. (BENBOW et al, 1999).
2. Controle biolgico em ps-colheita: O controle aps a colheita tem dois objetivos: evitar que os patgenos latentes nos tecidos causem podrides e impedir novas infeces (MICHEREFF, 1998). Blum et al, (2004), relataram que as podrides ps-colheita podem ocasionar perdas substnciais em mas. O mofo azul (P. expansum), a podrido amarga (G. cingulata) e a podrido olho-de-boi (Pezicula malicorticis) esto entre as mais comuns. Uma grande ateno tem sido dada ao uso de alternativas de controle s doenas ps- colheita. A aplicao ps-colheita de leveduras, como C. laurentii, uma das opes. A aplicao de C. laurentii reduziu as podrides (G. cingulata, P. expansum e P. 25 malicorticis) da ma tanto quanto os fungicidas testados (thiabendazol e iprodione). A aplicao de C. laurentii no alterou a firmeza da polpa nem o teor de slidos solveis totais dos frutos. ROBERT, 1990 citado por KURTZMAN et al, 1998, relatou o controle do mofo cinza (Botrytis cinerea) doenas de mas seguidas tambm de tratamento com culturas vivas de C. laurentii. Os ferimentos feitos durante a colheita das frutas foram protegidos de patgenos com uma simples aplicao de antagonistas diretamente nestas feridas, usando sistemas como (encharque, mergulho e borrifo) da fruta (JANISIEWICZ et al, 2002). Saligkarias et al, (2002), relataram que B. cinerea, um patgeno do tomate capaz de causar podrides e crescer no interior do mesmo, pode ser controlado atravs da colonizao de feridas da fruta pelas leveduras epfitas Candida sake, Galactomyces geotrichum, Tricosporon pullulans, Candida pulcherrina, e Aurobasidium pullulans. E tambm mostrou que a levedura Candida guilliermondii reduziu significativamente a incidncia da doena, quando foi aplicada simultaneamente com o patgeno, enquanto que C. oleophila e isolados de leveduras epfitas no controlaram B. cinerea. In vivo a aplicao de ambas as leveduras C. guilliermondii linhagem 101 e US 7 e C. oleophila linhagem I-182 obtiveram um controle significante do B. cinerea. Estes resultados sugeriram que as leveduras selecionadas para biocontrole de doenas de ps-colheita tiveram um potencial para biocontrole das doenas como um todo nas plantas (SALIGKARIAS et al, 2002). Pesquisas realizadas por Dan He et al, (2003), mostraram que outras duas espcies de leveduras tambm podem controlar doenas em mas causadas por P. expansum, a levedura Cryptococcus sp. e Candida sp.. Os resultados indicaram que estas leveduras tiveram uma eficcia como antagonistas, sendo que a levedura Cryptococcus sp.foi mais efetiva. Bleve et al, (2005) e Droby et al, (1999), relataram que as leveduras possuem muitas caractersticas que as fazem aceitveis como agentes biocontroladores. Elas tm uma exigncia nutricional simples, capacidade para crescer em meios baratos, habilidade para colonizar rapidamente e sobreviver em uma variedade de condies ambientais, no produzem componentes antropotxicos, produzem polissacardeos extracelulares que aumentam sua sobrevivncia e so afetadas minimamente por pesticidas. A vantagem da utilizao de microrganismos antagonistas como leveduras em 26 ps-colheita como j citado, incluem a reduo das poluies ambientais, o controle efetivo das doenas e produo de uma qualidade e segurana alimentar. Mas, a integrao desses antagonistas, seja atravs de misturas de leveduras, integrao do controle qumico com o biolgico ou integrao do controle fsico com o biolgico podem melhorar ainda mais a eficcia do controle.
3. Integrao do controle com mtodos alternativos: O controle biolgico ao contrrio do qumico, no apresenta efeito imediato e espetacular. As limitaes do controle biolgico podem ser direcionadas aumentando o mesmo, embora a manipulao do ambiente, usando misturas de organismos benficos, fisiolgicos e genticos aumentam a manipulao dos mecanismos de controle biolgico de formulaes, e a integrao do controle com outros mtodos alternativos que no somente providenciam adequada proteo, mas em combinao com o controle se torna um elemento com efeito eficaz (LUZ, 2002).
4. Utilizao de misturas de leveduras: Os benefcios da utilizao de misturas de antagonistas so claros, mas a implementao desta abordagem requer aprovao dos agentes biocontroladores produzidos nas indstrias, por causa do dobro do custo para comercializar a mistura de antagonista quando comparada com um nico biocontrole (JANISIEWICZ et al , 2002). A aplicao de misturas de antagonistas em pomares pode ser til para controlar deteriorao em ps-colheitas, especialmente se for aplicado precocemente no perodo de crescimento. Os ferimentos pr-colonizados pelos antagonistas no campo so muito mais difceis de serem infectados pelo patgeno (JANISIEWICZ et al , 2002) . Em mas, um amplo espectro de patgenos foi controlado, e menos do total da biomassa do antagonista foi necessrio para controlar a deteriorao quando os antagonistas foram aplicados em misturas em vez de individualmente. (JANISIEWICZ et al, 2002) . Pesquisas realizadas por Calvo et al, (2003), mostraram que o uso de misturas de antagonistas tem um amplo espectro de atividade. JANISIEWICZ, 1996 citado por CALVO et al, 2003, tem relatado tambm um 27 aumento no controle do mofo azul por misturas de leveduras com diferentes perfis nutricionais. Os resultados indicaram que a mistura de antagonistas pode ser uma ferramenta til para o aumento da eficcia e plasticidade do controle biolgico. Janisiewicz et al, (1995), tambm relataram que o biocontrole de doenas ps- colheitas de pomares de frutas desde doenas maiores, tais como mofo azul causado por P. expansum e mofo cinza causado por B. cinerea, tambm pode ser efetivamente controlado por misturas de leveduras.
5. Integrao do controle fsico com o biolgico: Tambm sabido que os mtodos no fungicidas para controlar a deteriorao ps-colheita incluem modificaes ambientais tais como armazenagem de mercadoria em temperaturas suprimidas para evitar o desenvolvimento do patgeno, modificao da umidade relativa e a atmosfera, e tratamento com ar e gua quente, induo da resistncia por aplicao de irradiao ultravioleta, aplicao de substncias geralmente consideradas inofensivas e esterilizao de frutas sob radiao ultra- violeta ou oznio (JANISIEWICZ et al, 2002). Contudo, nenhum desses mtodos quando usados sozinho, estabelecem um nvel satisfatrio de controle da deteriorao, embora alguns paream ser mais teis quando aplicados em combinao com o controle biolgico, resultando no aumento ou mesmo nvel sinrgico de controle de deteriorao (JANISIEWICZ et al, 2002).
6. Integrao do controle qumico com o biolgico: O nvel de perdas aceitveis de frutas ps-colheita est abaixo de 5 % , um padro que alcanado com uma nica aplicao do controle biolgico. A aplicao de altas concentraes dos antagonistas nas superfcies de frutas economicamente vivel, embora em condies de campo no tenha efeito significativo (LUZ, 2002). Uma alternativa para o efeito eficaz do controle em campo a integrao do controle biolgico com o qumico com doses reduzidas metade. Essa combinao de mtodos de proteo poder diminuir o uso de pesticidas. A vantagem dessa integrao o controle inicial de patgenos pelo fungicida e a habilidade do antagonista de desenvolver e persistir, reduzindo a infeco dos patgenos e tambm atrasar o desenvolvimento de resistncia dos mesmos ao fungicida (LUZ, 2002). 28 Janisiewicz et al, (2002), relataram na sua pesquisa que o resultado da combinao de leveduras P. guilliermondii e C. oleophila com uma taxa diluda de thiabendazol teve efeito significativo no controle do mofo verde e azul e podrides causadas por Geotrichum candidum em uvas e laranjas. Pesquisas realizadas por Droby et al, (1998), mostraram que o potencial da levedura P. guilliermondii Wicherham (isolado US-7) para controlar doenas ps- colheita em citrus em combinao com uma determinada quantidade de thiabendazol foi efetiva na reduo da incidncia da deteriorao das frutas. Mais recentemente, a pesquisa e o desenvolvimento tem focado na levedura antagonista C. oleophila (linhagem 182), que tambm mostrou-se eficaz por controlar um amplo espectro de patgenos ps-colheita de frutas como citrus, ma, e pra . Os resultados testados com vrios cultivares de citrus tm indicado que um tratamento sozinho no suficiente para reduzir a deteriorao dos nveis comerciais aceitveis. Segundo Tian et al, (2002), para aumentar a atividade biocontroladora de antagonistas contra fungos patognicos, certas estratgias, tais como adio de sais de clcio, carboidratos, aminocidos, e outros compostos nitrogenados so propostas. Muitas pesquisas tm mostrado que o clcio desempenha uma importante funo na inibio de deteriorao ps-colheita em frutas e aumenta a eficcia de agentes biocontroladores ps-colheita. O tratamento com clcio ps-colheita em mas mostrou um amplo espectro de proteo contra os patgenos ps-colheita em P. expansum e B. cinerea. A adio de cloreto de clcio na formulao da levedura biocontroladora, C. oleophila, aumentou a habilidade desta levedura na proteo de mas contra deteriorao em ps-colheita. A eficcia para controlar podrides causadas pelo mofo cinza e azul em mas foi aumentada quando Trichosporon sp., foi aplicado na presena de cloreto de clcio em suspenses aquosas. O clcio tem sido considerado por aumentar a eficcia do biocontrole de leveduras antagonistas. E pode tambm substituir o requerimento da adio de baixas concentraes de fungicidas para garantir a consistente execuo de leveduras biocontroladoras em larga escala comercial. Por essa razo, o clcio pode ter importantes implicaes para a utilizao futura de leveduras em escala comercial para o controle de doenas ps-colheita em frutas (TIAN et al, 2002 ). Contudo, os bioprotetores isoladamente ou em combinao com mtodos de proteo podero vencer o desafio da agricultura neste sculo e atender a grande demanda mundial de controle de doenas de plantas e frutas mediante manejo 29 biointensivo para se atingir uma agricultura limpa (LUZ, 2002).
V. JUSTIFICATIVA Sendo o ttulo deste trabalho Controle Biolgico da Antracnose No Mamo, Utilizando-Se Leveduras Antagonistas ao C. gloeosporioides melhor ser a sua compreenso termo a termo. 1. O porqu do mamo? Sendo o mamo uma fruta que traz tantas variveis a serem consideradas, tais como caractersticas fsicas, nutricionais, mercadolgicas, econmicas, variedades de cultivares, condies favorveis pesquisa como abundncia, freqncia, influncia patogenicidade, d a esta fruta uma importncia nica dentro do contexto das frutas consumidas no apenas no Brasil, mas em todo o mundo.
2. O porqu do controle biolgico? Considerando-se as questes ambientais, mais diretamente o que tange as agresses promovidas pelo uso indiscriminado de agrotxicos com graves conseqncias sade humana e ao equilbrio do ecossistema, conforme divulga-se constantemente em todos os meios de comunicao, somos obrigados a tomar uma posio diante de tal quadro. O controle biolgico se apresenta como uma boa alternativa para minimizar os efeitos colaterais da agricultura to mencionados e conhecidos como poluio ambiental. Quando se fala em produo de larga escala, no se pode esquecer tambm do fator custo, o que tem sido favorecido pela aplicao dos mtodos de controle biolgico.
3. O porqu das leveduras como antagonistas? Sendo a utilizao de leveduras como antagonistas de doenas de frutas ainda pouco estudado, torna-se um campo com amplas possibilidades de investigaes e descobertas. Associado aos aspectos j mencionados nesta monografia, tais como pouca exigncia nutricional, capacidade para crescimento em meios baratos, habilidade para uma rpida colonizao, sobrevivncia em uma variedade de condies ambientais, a no produo de componentes antropotxicos, resistncia a pesticidas, poder de 30 sobrevivncia devido produo de polissacardeos extracelulares, faz destes microorganismos um importante objeto de estudo.
4. O porqu da antracnose? Os controles biolgicos geralmente esto concentrados nos controles de pragas e insetos tendo muito que se fazer tambm sobre as doenas. Dentre estas, a antracnose, provocada pelo C. gloeosporioides a que mais afeta a qualidade dos frutos com grandes prejuzos economia. No mamo, especificamente, uma doena que atinge todas as etapas de desenvolvimento do fruto, o que justifica a escolha do controle da antracnose.
VI. DISCUSSO
A antracnose causada pelo agente etiolgico C. gloeosporioides combatida a priori com mtodos fsicos e qumicos. O controle fsico tem efeito economicamente significativo, mas no elimina completamente a doena. J o controle qumico bastante eficaz, mas tem como agravante o desenvolvimento de resistncia dos patgenos, exigindo permanente inovao desses tratamentos, podendo tambm gerar danos sade e ao ambiente. O controle biolgico de fungos como o C. gloeosporioides empregando leveduras antagonistas um mtodo alternativo promissor para o controle da deteriorao pr-colheita e ps-colheita, medida que os prprios consumidores vm se conscientizando e rejeitando os frutos tratados com defensivos agrcolas como o thiabendazol, procloraz, imazalil e outros (JANISIEWICZ et al, 2002). Segundo relatos da literatura, diversas leveduras foram isoladas utilizando-se vrias metodologias, por sua capacidade antagnica para controlar outros fungos incluindo o C. gloeosporioides e obtiveram resultados satisfatrios. A integrao do controle biolgico com o controle fsico e qumico, alm da utilizao de misturas de leveduras, aumentou ainda mais a eficcia do biocontrole, segundo a literatura citada. O biocontrole pode vencer os desafios da agricultura e evitar danos sade do consumidor e ao ambiente promovendo uma agricultura limpa de resduos txicos.
31 VII. CONCLUSO
A literatura citada mostra que as possibilidades de aplicao de controle biolgico na agricultura em geral so vastssimas mas ainda pouco exploradas. O sucesso de tal mtodo depender sempre diretamente de investimentos macios, uma vez que os resultados so quase que particularizados. As possibilidades de combinao das diversas variveis (fsicas, qumicas e biolgicas) e as associaes de mtodos que podem compor os experimentos so enormes, o que abre as portas de um mundo ainda inexplorado. Sabemos que nem todo caminho inicialmente adotado implicar na soluo de um problema e, ainda que um resultado seja positivo, no poderemos ter plena certeza de que o mesmo a melhor soluo para determinado caso. H sempre que se investigar mais. Tudo depender da relao custo X benefcio, o que no deixa de ser, por sua vez, mais uma importante varivel a ser considerada.
VIII. REFERNCIA BIBLIOGRFICA
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