Tema: Identificacin microscpica de clulas epiteliales (eucariotes) a partir de muestras tomadas de la cavidad interna de la boca (mucosa bucal), utilizando tincin simple con azul de metileno. FECHA DE ENTREGA: 11/01/14
1. OBJETIVOS:
Identificar y diferenciar mediante observacin microscpica forma y estructuras (membrana celular, ncleo, citoplasma) de las clulas epiteliales. Manipular material de laboratorio para toma de muestras de epitelio bucal respetando normas de bioseguridad y el medio ambiente. Manipular correctamente el microscopio ptico de campo claro para la observacin de clulas epiteliales, siguiendo normas universales.
2. INTRODUCCIN: El tejido epitelial o epitelio limita tanto las cavidades internas como las superficies libres del cuerpo. La funcin principal del epitelio es la proteccin de lesiones e infecciones de las partes anatmicas u rganos que recubren, razn por la cual est constituido por clulas estrechamente unidas entre s denominadas clulas epiteliales.
Las clulas epiteliales ayudan a la proteccin de los rganos de bacterias o virus que puedan entrar; dependiendo del lugar en el que se encuentren cumplen diversas funciones como: produccin de moco, eliminacin de sustancias, recepcin de seales, transporte y absorcin de sustancias, fabricacin y secrecin de enzimas.
Las clulas epiteliales tienen distintas formas dependiendo de su ubicacin, de esta manera se los puede clasificar en: escamosa, cubicas, columnares y columnares ciliadas.
3. HIPTESIS: La mucosa bucal presenta clulas epiteliales planas, de escaso espesor y forma irregular Las clulas epiteliales de la mucosa bucal al ser teidas con azul de metileno toman un color azul oscuro en los ncleos y un color azul plido en el citoplasma.
4. PROCEDIMIENTO Este procedimiento se llev a cabo siguiendo el protocolo propuesto por la Ing. Karina Ponce, docente del laboratorio de Biologa Celular. Reactivos: Agua destilada, azul de metileno, alcohol96% para mecheros, alcohol antisptico. Materiales e insumos: Placas portaobjetos, pipetas desechables, goteros, mecheros de alcohol, palillos de madera estriles, vasos de precipitacin500ml.y 100ml., picetas, bandeja para depositar colorantes, papel especial para limpieza de microscopios, torundas de algodn, papel toalla. Procedimiento: 1. Se limpi una placa porta objetos con papel toalla y alcohol antisptico. 2. Con un palillo estril o hisopo se frot suavemente la parte interna de su mejilla. 3. Se extendi la muestra, frotando con el palillo o hisopo de madera sobre la placa portaobjetos. 4. Se fij la muestra con el calor del mechero de alcohol, pasando la placa varias veces en la llama y procurando no sobrecalentar la placa. 5. Se ti la muestra, cubrindola con 1 o 2 gotas de azul de metileno, durante 2 minutos (mantener la placa sobre la bandeja para depsito de colorantes). 6. Se enjuag con agua (piceta), y se deposit el exceso de colorante dentro de la bandeja para este fin. 7. Se sec la placa al aire libre o pasndola en la llama del mechero para eliminar el agua. 8. Se observ en el microscopio ptico de campo claro con los objetivos: 4, 10 y40x y se identific las clulas epiteliales.
5. RESULTADOS:
Fig 1. Epitelio glandular, mucosa bucal vista 4x
Fig 2.pitelio glandular, mucosa bucal vista 10x
Fig 3.pitelio glandular, mucosa bucal vista 10x -
Fig 4.pitelio glandular, mucosa bucal vista 40x -
6. DISCUSIN: Las clulas epiteliales de la cavidad bucal observadas en el laboratorio eran de forma plana y de escaso grosor como lo afirma Ramrez (2000), la cavidad bucal est cubierta por un epitelio plano estratificado no queratinizado caracterstico de las superficies hmedas sujetas a desgaste. Las muestras recogidas del interior de la mejilla contenan gran cantidad de clulas epiteliales unidas estrechamente entre s, formando el epitelio este resultado confirma lo que expreso Misiones (2004), los epitelios recubren todas las superficies libres de organismo tanto internas como externas.
7. CONCLUSIONES: Las clulas epiteliales de la mucosa bucal fueron teidas exitosamente La mucosa bucal presenta clulas epiteliales planas, de escaso espesor y forma irregular Las clulas epiteliales de la mucosa bucal al ser teidas con azul de metileno toman un color azul oscuro en los ncleos y un color azul plido en el citoplasma. Las hiptesis planteadas son verdaderas, afirmadas y comprobadas.
8. REFERENCIAS:
Ruiz, M. V. (2008). Una Mirada al Mundo Microscpico. Mxico D.F: Pearson Education. Misiones, U. N. (2004). Tejido Epitelial. Argentina: Universidad Nacional de Misiones. Ramrez, V. G. (2000). Citologa Exfoliativa y Biopsia en Cavidad Bucal. Espaa: Facultad de Estudis Superiores Zaragoza.