EXAMEN MICROBIOLOGICO DE PLANTAS INDUSTRIALES

I. INTRODUCCION

El anlisis microbiolgico de plantas industriales se efectu con la finalidad de detectar
la presencia de microrganismos, en las plantas industriales, donde se encuentran
diversos equipos, materiales y utensilios que se utilizan para el procesamiento de
alimentos y la obtencin de diversos productos. La mayor parte de alimentos
procesados se convierten en potencialmente peligrosos para el consumidor solo despus
que ha sido olvidado los principios de higiene, limpieza y desinfeccin. Los anlisis
microbiolgicos en las plantas industriales deben ser realizados frecuentemente para
detectar la presencia de microrganismos que pueden alterar los alimentos en
condiciones no sanitarios.
Todos los alimentos ya sean frescos como procesados estn sujetos a diferentes
factores de alteracin, Como consecuencia, se conservaran de acuerdo a como son a
fueron tratados, manipulados, Almacenados, etc. Y de acuerdo o la eficiencia del
procesamiento, aplicado a los alimentas. De tal manera que existen grupos de
microrganismos que nos indicaran, por ejemplo mal Procesamiento, deficiencia del
almacenaje, condiciones higinicas inadecuadas, contaminacin fecal, tratamiento
trmico insuficiente, etc.
Lo presencia de estos microorganismos en cierto nmero se considera como ndice de
que el alimento fue tratado, y manipulado en condiciones inadecuadas, que permitieron
la llegada. O resistencia y proliferacin de microrganismo patgenos. A estos se
denomina MICROORGANISMOS INDICADORES.

Los principales grupos de microrganismos indicadores son:

Microrganismos Indicadores de higiene inadecuado.
Microrganismos indicadores de la contaminacin fecal.
Microorganismos indicadores de procesamiento insuficiente.

II. OBJETIVOS

2.1. OBJETIVO GENERAL.

Introducir al alumno las operaciones de anlisis microbiolgico en las plantos industriales
donde se encuentran equipas, materiales y utensilios que se utilizan para en procesamiento
de alimentos.

2.2. Objetivos especificos

Conocer el proceso de evaluacin microbiolgica de plantas industriales.
Conocer las operaciones a seguir en lo ejecucin de las pruebas microbiolgicas utilizados
en el anlisis microbiolgico de las plantas industriales.
Realizar el recuento de colonias presentes en los diferentes anlisis.


III. MARCO TEORICO

3.1. medio de cultivo

El medio de cultivo se emplea para tres fines principales:

desarrollar y conservar los cultivos
estudiar la accin de los microrganismos sobre alguna sustancia del medio
facilitar la produccin por los microorganismos en algn producto determinado o
combinacin de productos.
La composicin de los medios relacionados se expresa en todos los casos en gramos por
litro de agua. La composicin de los medios de cultivo puede variar ligeramente de una
compaa a otra, mantenindose los componentes clave para el estudio que se pretende
hacer con el medio en cuestin.

El medio de cultivo debe de estar exento de sustancia que pueda inhibir el desarrollo de los
microorganismos que han de cultivarse.

3.2. Agar
Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de cultivo. El componente
predominante en el agar bacteriolgico es un polisacrido al que acompaan algunas
impurezas y que se obtiene de ciertas algas marinas. Un gel de agar al 1-2 % en agua licua
hacia los 100C y se gelifica alrededor de los 40C, dependiendo de su grado de pureza.
Con la excepcin de algunos microorganismos marinos, el agar no es empleado como
nutriente por las bacterias.

3.3. Dilucin
Una dilucin se define como el acto de aadir un solvente a un soluto para reducir la
concentracin del soluto. Qu es el soluto? El soluto puede ser un compuesto qumico
como la glucosa o un microorganismo como Escherichia coli. El principio en ambos casos
es el mismo, reducir la concentracin (el nmero de molculas de glucosa o Escherichia
coli por unidad de volumen).

3.4. Factor de dilucin
El factor de dilucin puede ser definido como una proporcin que indica el nmero de
veces que hay que diluir el material original. Esta proporcin nos indicar cuntas partes de
la muestra original hay que colocar en el total de partes de la mezcla. Matemticamente
podemos calcular el factor de dilucin utilizando volmenes o concentraciones:

()

3.5. Siembra
Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porcin de muestra (inculo) en un
medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano, para su desarrollo y
multiplicacin. Una vez sembrado, el medio de cultivo se incuba a una temperatura
adecuada para el crecimiento. Las reglas fundamentales para efectuar la siembra exigen:

Que se efecten aspticamente
Que los medios de cultivo y el instrumental a utilizar estn esterilizados
Que se realicen solo los manipuleos indispensables
Que se trabaje fuera de toda corriente de aire. De ser posible utilizando un mechero o
bien Flujo laminar.

3.6. Agar Baird Parker

Primero se vierten en placa de Petri estril de 10 a 12 ml del medio de cultivo fundido. Una
vez que el medio este slido y firme, se inocula el mismo con 0.1 ml de la dilucin a
analizar, esparciendo el inculo con ayuda de una esptula hasta su absorcin total por
parte del medio. Se cierra la placa, se invierte y se incuba durante 48 h a 35C.


IV. MATERIALES Y SUSTANCIAS

4.1. Materiales

Mechero bunsen
Estufa
Autoclave
Matraz de erlenmeyer
Placas petri
Pipetas
Tubos de ensayo
Algodn
Papel craf

4.2. Sustancias

Agar (medio de cultivo) nutritivo
Agua destilada
Muestras tomadas de equipos, piso, aire y personal.

V. METODOLOGIA

5.1. Bacterias de pisos, maquinas o equipos

Preparacin del medio de cultivo.
Esterilizar el medio de cultivo y los materiales a utilizar
Pasar el hisopo embebido en buffer por un rea determinada del equipo
Transferir con la pipeta 10ml de muestra a la placa Petri
El proceso de aadir a la placa Petri realizar en presencia de calor para evitar el
ingreso de microorganismos
A continuacin se vierten de 15 a 20 ml de medio de cultivo estril, a temperaturas
de 45 a 47C
Mezclar cuidadosamente el contenido de cada placa con movimientos circulares a
derecha e izquierda, solidificar en superficie plana, a fin de obtener colonias
regularmente dispersas
Incubar en forma invertida la placa de agar nutritivo a 37Cpor 24 a 48 horas

5.2. preparacin del agar
60 g 940 ml
X g 110 ml


()

X=2400g/940ml
X=23.53g
Despus de pesar de disolvi el agar con agua destilada en un vaso precipitado
despus la solucin se pas a un matraz y se la sello con papel aluminio.
La solucin se llev a la cocinilla elctrica para la disolucin
Se disolvi durante 20 minutos a 250C.

5.3. Esterilizacin

Lavar perfectamente las placas Petri con escobilln y detergente y enjuagar
con abundante agua.
Una vez seco las placas Petri, se procede a envolver con papel craf y pabilo
para evitar que el papel se abra y para el matraz se sella con papel aluminio.
Colocar agua en el autoclave, el nivel del agua debe mantenerse hasta un nivel
adecuado.
Colocar las placas Petri y la muestra.
Cerrar hermticamente el autoclave, hasta que llegue a una presin de 2.5Mpa
durante 6 minutos a una temperatura de 107C.









VI. RESULTADOS

muestras Promedio de las
muestras
rea de la placa Numero de
colonias (ufc)
Muestra madre 224 63.62 cm
2
14250.88 ufc/c
2

Muestra 2 40 63.62 cm
2
2544.8 ufc/c
2

Muestra 3 3 63.62 cm
2
190.86 ufc/c
2

Muestra 4 0
Muestra 5 0


Al finalizar las practica de laboratorio se pudo observar en la primera nuestra que es la
muestra madre obtuvimos una mayor cantidad de microorganismos ya que tena una mayor
concentracin de muestra del equipo (estufa), para la segunda dilucin se fue observo menor
cantidad de microrganismos as sucesivamente, se puede observar que para las ultimas
diluciones como para la muestra 5 no hubo crecimiento de microorganismo ya la muestra no
era muy concentrada.
6.1. Tincin Gram
En la tincin Gram pudimos observar que las clulas que encontramos fueron gran positivas
de coloracin azul.

VII. CONCLUCIONES

Se puede concluir que un tiempo mayor de incubacin hay un mayor crecimiento de
microorganismos tambin se debe considerar la cantidad de concentracin de dilucin ya que
hay mayor crecimiento de microorganismos, es muy importante la temperatura por el cual se
va analizar.
Para el anlisis microbiolgico de plantas industriales los anlisis fueron tincin Gram y la
preparacin del agar ya que para un mayor crecimiento de microorganismos es importante el
cultivo de agar.
Se pudo culminar la prctica exitosamente observando una mayor cantidad de
microorganismos en las 2 primeras diluciones o muestras como es la muestra madre y la
segunda muestra, teniendo en cuenta que ambas muestras tena mayor concentracin de
microorganismos.
VIII. CUESTIONARIO

1. Microorganismos indicadores de higiene inadecuada

Ponen de manifiesto deficiencias en la calidad microbiolgica de un determinado
alimento en trminos ms generales. Por ejemplo, presencia de bacterias del grupo
coliformes en la leche pasteurizada, en nmero que exceda a un valor de referencia
experimentalmente establecido, puede advertir diversas deficiencias de un
producto:
un tratamiento trmico insuficiente,
una contaminacin posterior al tratamiento,
un almacenamiento del producto final a una temperatura demasiado
elevada.
2. Microorganismos indicadores de la contaminacin fecal

Los Streptococcus fecales (o estreptococos del grupo D de Lancefield)
son bacterias integrantes de la flora normal de los animales
homeotrmicos. Actualmente se considera que los estreptococos fecales
pertenecen a dos gneros: Enterococcus y Streptococcus. Todos los
Enterococcus presentan alta tolerancia a condiciones ambientales adversas
(altas o bajas temperaturas, Deshidratacin, salinidad, luz solar, etc.).
Los coliformes fecales y a E. coli, presentan tasas se supervivencia
semejantes a la de los patgenos entricos. Los Estreptococos fecales no se
multiplican en el medio ambiente, o si esto ocurre es solamente en raras
ocasiones.
Clostridium perfringens es de origen fecal y no es patgeno en el intestino
de animales homeotrmicos. No es exclusivamente fecal se encuentra en
suelos y aguas contaminadas. Por ser una bacteria esporulada tolera
elevadas temperaturas y desecacin, pH extremos y falta de nutrientes,
entre otras condiciones adversas. Esta resistencia elevada la convierte en
un indicador apropiado de contaminacin fecal antigua, intermitente,
tambin cuando las descargas domsticas se mezclan con las industriales
que tienen un pH extremo que mata a las bacterias no esporuladas, o
cuando hay altas temperaturas que tambin eliminan las formas
vegetativas de las bacterias.

3. Qu son las bacterias aerobias mesfilas viables y donde se encuentran?

Las bacterias aerobias mesfilas son todas las bacterias capaces de desarrollarse en
un medio nutritivo incubado en condiciones de aerobiosis, en este grupo se
incluyen todas las bacterias, mohos y levaduras capaces de desarrollar a 30C en
kas condiciones establecidas, por lo tanto eso nos indica presencia de que si
existieron ciertos microorganismos patgenos alterando nuestro alimento


4. Defina que es un microorganismo indicador
Ponen de manifiesto deficiencias en la calidad microbiolgica de un determinado
alimento en trminos ms generales.



IX. BIBLIOGRAFIA

Snchez, E. C. (2012). OPERACIONES BASICAS LABORATORIO GM12 CF.
ESPAA
SANCHEZ, Q. C. (2003). MANUAL DE MEDIO DE CULTIVO EN MICROBIOLOGIA.
Mara A. R. Control microbiolgico Lima Per.


X. ANEXOS









Ilustracin 2: toma de muestra




Ilustracin 1: Preparacin del agar
Ilustracin 2: esterilizacin
Ilustracin3: preparacin de diluciones




Ilustracin 4: Incubacin de la muestra
Ilustracin 5: Evaluacin de la muestra