FOTOSNTESIS Y CROMATOGRAFIA

INTRODUCCIN
La fotosntesis es un proceso que convierte energa solar en energa qumica. Se lleva a cabo en los
cloroplastos, organelos de membrana doble que contienen pigmentos fotosintticos que absorben
la luz solar. La membrana interior del cloroplasto rodea el estroma, donde los tilacoides se
agrupan formando granas. La fotosntesis produce glucosa y oxgeno a partir de dixido de
carbono, agua y luz solar.
Para utilizar la energa solar se requiere que la luz sea absorbida por pigmentos fotosintticos que
se encuentran en las membranas de los tilacoides en los cloroplastos. El pigmento principal para la
fotosntesis es la clorofila a. Tambin hay pigmentos accesorios, como la clorofila b, el caroteno y
la xantofila, que absorben la luz y la transfieren a la clorofila a.
Es importantes conocer a cerca de la fotosntesis y los pigmentos fotosintticos ,debido a que
dependemos de este proceso, indispensable para la mayora de seres vivos, sin este proceso sera
casi imposible el sostenimiento de la vida terrestre.
El principal objetivo de este informe es reconocer los distintos pigmentos fotosintticos que se
encuentran en los tejidos de las plantas mediante la cromatografa.
En el siguiente se realizar un experimento para separar los pigmentos presentes en la hojas de la
plantas, utilizando el mtodo de la cromatografa.







MARCO TEORICO:
CROMATOGRAFIA : Este mtodo se basa en una propiedad fsica llamada adsorcin, que
consiste en que las partculas de un solido, liquido o un gas se adhieren (o se pegan) a la
superficie de una fase estacionaria (generalemente un slido). Las diferentes sustancias se
adhieren con mayor o menor fuerza a esta fase, y si se hcae pasar o un gas recorriendo la
superficie de la fase estacionaria, las sustancias que estn pegadas se van moviendo sobre su
superficie a diferente velocidad. As , las que estn ms fuertemente adheridas van ms
despacio que las dems.
A) Cromatografia en papel: En la cromatografa en papel, la celulosa se ha impregnadocn una
fase inmvil, generalemnete agua. Cuando la fase organica pasa sobre esta fase acuosa
estacionaria , el compuesto problema se reparte entre ambas fases. Un componente de la
mezcla que tenga una significativa afinidad por el solvente, permanecer ms tiempo en la
capa acuosa inmvil y no emigrara tan rpidamente como un componente con poca
afinidad por el agua. Este mtodo es muy til para sustancias muy polares.
El principal de la cromatografa en papel, con frecuencia son lentos. Algunos requieren de
16 a 24horas. Esta tcnica es muy eficaz para separar pequeas cantidades de materiales
solubles en agua.


Determinacin de sustancia organicas. Daniel J. Pasto, Carl R. Johnson. Ed ReVERTE 2003.
BARCELONA ESPAA.

FOTOSINTESIS : Es el proceso en el cual, la energa lumnica es capturada por los
organismos fotosintticos quienes la usan para formar carbohidratos y oxgeno libre a partir del
dixido de carbono y del agua, en una serie compleja de reacciones. En la fotosntesis, la energa
lumnica se convierte en energa qumica y el carbono se fija en compuestos orgnicos. La
ecuacin generalizada para este proceso es:
CO
2
+ 2H
2
A + energa lumnica => (CH
2
O) + H
2
O + 2A
en la cual H
2
A significa agua o alguna otra sustancia cuyos electrones puedan ser desprendidos.
La fotosntesis en los eucariotas ocurre dentro de organelas llamadas cloroplastos, que estn
rodeados por dos membranas. Dentro de las membranas del cloroplasto est contenida una
solucin de compuestos orgnicos e iones, conocida como estroma, y un sistema complejo de
membranas internas fusionadas que forman sacos llamados tilacoides. Los tilacoides se apilan
formando los grana. Los pigmentos y otras molculas responsables de la captura de la luz estn
situados en las membranas tilacoides, una serie de membranas internas que se encuentran en los
cloroplastos. En los procariotas fotosintticos, que no contienen organelas internas, los tilacoides
pueden formar parte de la membrana celular, pueden aparecer aislados en el citoplasma o
constituir, como en el caso de las cianobacterias, una compleja estructura de la membrana interna.
La clorofila y otros pigmentos
Los pigmentos que intervienen en la fotosntesis de los eucariotas incluyen las clorofilas y
los carotenoides. Diferentes grupos de plantas y algas usan varios pigmentos en la fotosntesis.
Hay varios tipos diferentes de clorofila que varan ligeramente en su estructura molecular. En las
plantas, la clorofila a es el pigmento involucrado directamente en la transformacin de la energa
lumnica en energa qumica. La mayora de las clulas fotosintticas tambin contienen un
segundo tipo de clorofila -en las plantas es la clorofila b. Con respecto a los carotenoides, uno de
los que se encuentran en las plantas es el beta-caroteno. Los carotenoides son pigmentos rojos,
anaranjados o amarillos. En las hojas verdes su color est enmascarado por las clorofilas, que son
ms abundantes. En algunos tejidos, sin embargo, como los del tomate maduro, predominan los
colores reflejados por los carotenoides.Todos estos pigmentos presentan un grado diferente de
solubilidad, lo cual permite su separacin cuando se realiza la cromatografa.











MATERIALES
*Embudo*Alcohol 96

* Tijera
*Mortero * Pinzas
*Papel filtro * Guantes quirurgicos
*Beacker * Papel toalla
*Portaobjetos * Cmara digital- opcional
*Mondadientes
Procedimiento :
PROCEDIMIENTO
1. Se coloc en el mortero las hojas de diferentes colores, aadiendo un poco de
alcohol para luego triturarlas hasta que el alcohol adquiri un tinte verde
intenso.
2. Se filtr el lquido utilizando un embudo.
3. Se recort unas tiras de papel filtro para introducirlas en el vaso hasta que
tocaron su fondo, procurando que se mantengan verticales ayudndonos con
una pinza.
4. Se esper 30 minutos y hasta que aparecieron en la parte superior de la tira de
papel unas bandas de colores que sealaban a los distintos pigmentos



Resultados :
Cuando retiramos el papel del tubo de ensayo observamos una franja coloreada
en la parte superior de la tira que presenta diferentes tonos de color, diferenciando
as los siguientes pigmentos: clorofila (verde limn), clorofila ( verde azulado) y
xantofila (amarillo).




Discusion de los resultados :

Segn el autor Pasto, D y Johnson, C, los pigmentos de la planta fueron
ascendiendo a distintas velocidades debido a que los primeros pigmentos que que
fueron apareciendo que fueron los que mas afines eran con el solvente que en
este caso fue el alcohol qumicamente puro . Los pigmentos se fueron mostrando
ordenados, sehun su afnidad. La clorofila a se apreci rpidamente. Segn Curtis,
la clorofila a es el pigmento involucrado directamente en la transformacin de la energa lumnica
en energa qumica, se deduce de esto que este pigmento era el mas afin al alcohol. Los
pigmentos se presentaron ordenados debido a la velocidad de difusin de cada
pigmento formando una franja en la cual podemos distinguir los distintos colores
de los pigmentos al encontrarse separados.



















CONCLUSIONES

- A travs de la tcnica de cromatografa es posible distinguir los diferentes pigmentos
presentes en los tejidos vegetales, como la clorofila, los carotenoides y las xantofilas.
- En la fotosntesis es de vital importancia la presencia de estos pigmentos debido a
que participan directamente de este proceso, especialmente la clorofila.

Bibliografa



















PCA NRO 3 BIOLOGIA:
INTRODUCCION
La materia viva se encuentra rodeada de materia no viva con la que constantemente intercambia
materiales. Ambas se diferencian por los tipos de compuestos qumicos que contienen y por sus
concentraciones. En todos los sistemas vivos, desde los procariotas a los eucariotas multicelulares
ms complejos, la regulacin del intercambio de sustancias con el mundo inanimado ocurre a nivel
de la clula individual y es realizado por la membrana celular.
Existen diferentes mecanismos de transporte: Transporte activo y transporte pasivo, este ltimo se
realiza sin gasto energtico y entre estos tenemos a la smosis , que es el paso de agua a travs
de la membrana. Este paso de agua depender de la solucin extracelular en la que la clula se
encuentre.
Es importante observar el comportamiento de la clula en los diferentes tipos de soluciones, tanto
en las clulas animales como vegetales al igual que los mecanismos de difusin. clula
Los objetivos principales de este informe es conocer e interpretar los diferentes
mecanismos de transporte que ocurren en la celula sin gasto de enrga, como la difusin y
la omosis
En el siguiente informe se detallar la experimentacin realizada con la clula vegetal y
animal frente a diferentes medios de solucin : hipotnica, hipertnica e isotnica;
describiendo los proceso que ocurren estas.
MARCO TEORICO

Mecanismos de transporte_
Transporte pasivo :
Es la formsa mas sencilla de intercambio orque ocurre sin necesiada de consumo
energtico (ATP) por parte de la celula. Se basa en el fenmeno llamdo difusin.
La difusin es el movimiento de molculas a favor de una gradiente, se entiende como
gradiente a la diferencia cuantitativa de mayor a menor , respecto de un parmetro como
la concentracin , o la carga elctrica. Asi, en la difusin , las molculas se mueven de
mayor a menor concentracin.
En el transporte pasivo se diferencian dos formas : difusin simple y difusin facilitada.
A. Difusion simple : Se denomina as, cuando no se requiere de molculas
especializadas para el transporte. La intensidad de la difusin depender
directamente de la cantidad de sustancias disponibles, la velocidad del movimiento
cntico y el numero de aberturas(poros) de la membrana celular. La disfusin
puede realizarse por la bicapa lipdica y por conductos proteicos.
1. Por la bicapa lipdica. Se transporta principalmete sustancias liposolubles:
acidos grasos, vitaminas, hormonas esteroideas, medicamentos y sustancias
apolares como el oxigeno(O2), nitrgen atmosfrico(N2); algunas molesculas
apolares como el agua(H2O), el dixido de carbono (CO2), el etano y la
glicerina(glicerol). Aunque el agua es muy insoluble en lpidos de la membrana,
penetra a travs de bicapa lipdica por los espacios temporales dejados debido
al movimiento lateral de fosfolpidos. La rapidez con que las molculas de agua
pueden entrar es asombrosa. As la cantidad total de de agua que se difunde
a travs de la membrana del eritrocito durante cada segundo es casi 100 veces
el volumen de esta celula.
La velocidad de difusin de las molculas a travs de la bicapa lipdica esta en
funcin de su tamao. Por ejemplo, la rea de mayor dimetro que el agua
tiene una velocidad de prenetacion de 1000 veces menor que el agua.
2. Por conductos proticos (canales proteicos). Aunque el agua y otras molculas
no cargadas muy pequeas se difunden con facilidad a travs de la bicapa
lipdica, los iones, inluso los muy pequeos (H+, Na+, Ca+, K+ y otros),
penetran por la membrana con una rapidez de c erca de un milln de veces
menor que el agua; por lo tanto cualquier transporte importante de estos iones
a travs de la membrana celular debe producirsea gtravs de conductos
proticos(protena de canal). Asi tenemos los conductos del Na+ y conductos
del K+. Las protenas de canal o protenas conductoras poseen un orificio o
canal interno, cuya apertura o cierre es regulado por sustancias como
neurotransmisoresy hormonas, que se unen a una regin receptorapara
generar una tranformacin estructural.
a) Osmosis: Es el desplazamiento neto de moleculs de solventes a travs de
una membrana con permeabilidad selectiva desde una zona de alta
concentracin de molculas de solvente (y baja concetracion de molculas
de soluto) hacia una zona de baja concentracin de molculas (y alta
concentracin de molculas de soluto). En los sistemas de los seres vivos
el solvente principal es el agua. La presin del flujo de agua o movimiento
potencial que se genere por los solutos reciben el nombre de presin
osmtica. Las soluciones de baja concentracin presentan una presin
osmtica pequea que se incrementa conforme aumenta la concentracin
de los solutos. Se ha establecido una categorizacin de la soluciones
extracelulares sobre la composicin existente en cada celula.
- Solucion isotnica : es aquella en la que la concetracion global de
solutos es igual a la prsente en el interior de la celula(iso significa
igual). En este caso el agua entra y sale de la celula a la misma
velocidad(no se produce modificacin neta); el contenido de la celula
esta en equilibrio con la solucin que se encuentra afuera de la celula.
Por ejemplo, el suero fisiolgico , que contiene 0,9 g de solutos por
cada 100 ml de solucin.
- Solucion hipotnica extracelular es una medio cuya concentracin de
solutos es menor que la cincentracion intracelular(hipo significa debajo
o menor). Experimentalemenre, en las clulas animales causa lisis
celular y en la celula vegetal aumenta la presin de turgencia.
- Solucin hipertnica: Contiene una mayor concentracin de de solutos
que el interior de la celula y provoca la salida de agua de esta.
Experimentalmente en las celulas vegetales clulas se da reduccin de
volumen citoplasmtico que causa plasmlisis . En clulas animales,
como los eritrocitos ocurre la crenacin.

MATERIAL Y EQUIPOS

Microscopio * Pincel pequeo
Gradilla * Lanceta descartable
6 tubos de ensayo * Cebolla
Pizeta con agua destilada * Alga de acuario - Elodea
Agua destilada * Gotero
Lugol * Tijera
Pinzas * Algodn
Viales * Alcohol
Laminas y laminillas * Plumn marcador


Laboratorio * Material que las alumnas deben traer


PROCEDIMIENTO

EXPERIMENTO 1
a. Prepare soluciones tnicas: Isotnica, Hipotnica e Hipertnica.
b. Coloque 2 ml de cada solucin tnica en tres diferentes viales debidamente
etiquetados.
c. Con ayuda de una lanceta descartable pnchese el dedo anular de la mano izquierda.
d. Adicione una gota de eritrocitos (Sangre), a cada uno de los viales con la respectiva
solucin tnica.
e. Mezcle con movimientos suaves y deje reposar 1 minuto.
f. Con la ayuda de un gotero coloque una gota de la suspensin solucin tnica y
eritrocitos en una lmina porta objetos y cubra con un cubreobjeto.
g. Observe al microscopio.
h. Esquematice y explique el comportamiento de la membrana celular frente a la
tonicidad de las soluciones.

RESULTADOS:
En solucin hipotnica se puede observar como los eritrocitos se iban hinchando, algunas
se observan muy inflamadas y otras rotas.
En solucin hipertnica la clulas empezaron a perder agua y se arrugaron. Se ven
hundidas y encogidas.
En solucin isotnica no se observo cmbio alguno en su estructura, mantienen su forma
bicncava redondeada.
DISCUSION DE RESULTADOS:

RESULTADOS:
En solucin hipotnica se puede observar como los eritrocitos se iban hinchando, algunas
se observan muy inflamadas y otras rotas.
En solucin hipertnica la clulas empezaron a perder agua y se arrugaron. Se ven
hundidas y encogidas.
En solucin isotnica no se observo cmbio alguno en su estructura, mantienen su forma
bicncava redondeada.
DISCUSION DE RESULTADOS:
Segn Funk refiere que las clulas animales, en este caso los eritrocitos en solucin
hipotnica afectiavamente, debido a que la concentracin de soluto es mayor dentro de la
clula que fuera de ella, esto hace que la celula aumente su presin intracelular y se vean
hinchadas o rotas, ocurriendo lisis. En cambio en la solucin hipertnica nos dice que la
clula pierden agua y se arrugan porque la concentracin de soluto es mayor fuera que
dentro de la clula y esto se corrobora en el experimento, ocurriendo finalmente la
crenacin. Por ltimo en la solucin isotnica nos dice que no se ocurrir cambio alguno
debido al equilibrio entre soluto fuera y dentro de la clula.


EXPERIMENTO 2
a. Prepare soluciones tnicas: Isotnica, Hipotnica e Hipertnica.
b. Coloque 2 ml de cada solucin tnica en tres diferentes viales debidamente
etiquetados.
c. Realice tres cortes de aproximadamente 1 cm. (trocitos) del catafilo de Allium cepa.
d. Adicione un trocito de catafilo, a cada uno de los viales con la respectiva solucin
tnica.
e. Embeba suavemente el trocito de catafilo con la solucin tnica.
f. Deje reposar 1 minutos.
g. Con la ayuda de un pincel coloque el trocito bien extendido en una lmina porta
objetos y cubra con un cubreobjeto.
h. Observe al microscopio
i. Esquematice y explique el comportamiento de la membrana celular vegetal frente a
la tonicidad de las soluciones.


RESULTADOS :
Solucin ISOTONICA salina al 0.9%
La solucin salina o suero fisiolgico al 0.9% no causa cambios importantes en la
clula, lo que lleva a pensar que la solucin al 0.9% mantiene el equilibrio de las
clulas del catafilo de cebolla en equilibrio con su medio externo.

Solucin HIPERTONICA salina 5%
Con la solucin salina al 5% se ve que las clulas del catafilo de cebolla se
arrugan y se deforman ya que esta solucin se considera hipertnica y por lo tanto
por gradiente de concentracin la solucin jala agua hacia el medio extracelular,
provocando que la clula se arrugue o se encoja.


Solucion HIPOTONOCA (Agua destilada)
Con la solucin de agua destilada se puede observar como las clulas mueren
debido a que la concentracin del medio es isotnica y esto hace que el paso de
agua del exterior al interior de la clula sea incontrolado, por tanto la clula recibe
un flujo de agua mayor a la capacidad que puede resistir y en consecuencia se hincha y
se estalla.


DISCUSION:
En la solucin isotnica se observa que no hay variacin alguna en su estructura, ya
que segn Funk, en una solucin isotnica como lo es la solucin salina al 9 %, ya que
el medio intracelular y extracelular se mantiene en equilibrio. En la solucin
hipertnica observamos que las clulas de catafilo se arrugan, y esto es porque la
gradiente de concentracin de la solucin es mayor en el medio extracelular y jala
agua hacia el medio extracelular provocando en la clula una plasmlisis, por el
encogimiento del citoplasma inducido por la osmosis. A diferencia de la solucin
hipotnica en la que la clula de catafilo empieza a hincharse, difundiendo la solucin
hacia el interior, existiendo una mayor presin de turgencia sobre sus paredes
haciendo que se expanda la vacuola y que la clula crezca. En el caso de las clulas
vegetales no se rompen debido la pared celular tiene una gran resistencia.




EXPERIMENTO 3
a. Prepare soluciones tnicas: Isotnica, Hipotnica e Hipertnica.
b. Coloque 2 ml de cada solucin tnica en tres diferentes viales debidamente
etiquetados.
c. Realice tres cortes de aproximadamente 1 cm. (trocitos) del alga ( Elodea) .
d. Adicione un trocito del alga, a cada uno de los viales con la respectiva solucin tnica.
e. Embeba suavemente el trocito del alga con la solucin tnica.
f. Deje reposar 1 minutos.
g. Con la ayuda de un pincel coloque el trocito bien extendido en una lmina porta
objetos y cubra con un cubreobjeto.
h. Observe al microscopio
i. Esquematice y explique el comportamiento de la membrana celular vegetal frente a
la tonicidad de las soluciones.



RESULTADOS :
ISOTONICO:
HIPOTONICO: Se observa que la clula de la elodea empieza hincharse incrementando el volumen
celular. La vacuola empieza a se hincha y desplazando al nucleo y cloroplastos.
HIPERTONICO: Se observa que la celular de la elodea empieza a perder forma, se empieza a
encoger y arrugar , la vacuola pierde agua.

DISCUSION DE LOS RESULTADOS :
En el caso de la elodea clarmanete se puede observar en la solucin hipotonica de que manerala
vacuola que tiene funcion de alamcen , empieza a intentar equilibrar el ingreso de lquidos, como
ya se mencion antes, el ingreso de solucin hipotonico a la celula vegetal ocasiona que se
aumente la presin de turgencia, ocasionando que la vacuola incremente su tamao, desplazando
al ncleo y cloroplastos hacia la superficie. En solucin hipertnica la celula de la elodea , se
observa que el citosol empieza a deshidratarse y la vacuola pierde agua, esto ocurre como
consecuencia de la plasmolisis celular .




CONCLUSION :
- En solucin hipertnica en las clulas animales ocurrir la crenacin y en solucin hiptonica, lisis.
-En la solucin hipertonica en clula vegetales ocurrir plasmolisis y en solucin hipotonica, la
presin de turgencia aumentar.
-La osmosis es un mecanismo de transporte importante para el metabolismo celular de los seres
vivos.








BIBLIOGRAFA :


PRACTICA N4