Factores que modifican la actividad enzimtica

Inhibicin reversible
Competitiva
Inhibicin irreversible
Tema 9
Parmetros que influyen en la velocidad de reaccin enzimtica
Efecto del pH y la T
No competitiva
Inhibidores
Factores que modifican la actividad enzimtica
La presencia de inhibidores
La velocidad de una reaccin catalizada por una enzima depende de:
La concentracin de molculas de sustrato
(Ecuacin de Michaelis-Menten)
La temperatura
El pH
Cantidad de enzima
La V
0
es proporcional a la concentracin de enzima, al menos en un
determinado rango de concentraciones.
Efecto de la temperatura
Temperatura (C)
A
c
t
i
v
i
d
a
d

e
n
z
i
m

t
i
c
a
Existe un intervalo en el cual son estables.
Las enzimas poseen una temperatura ptima a la cual la enzima presenta
mxima eficiencia cataltica.
Efecto del pH
pH ptimo de actuacin, a valores superiores o inferiores la velocidad disminuye.
El pH del medio afecta:
Conformacin (estructura espacial) de la enzima
Catlisis
Unin al sustrato
pH
A
c
t
i
v
i
d
a
d

e
n
z
i
m

t
i
c
a
Pepsina
Quimotripsina
Inhibicin enzimtica
Inhibidores: pequea molculas qumicas o iones que interfieren con las
reacciones ralentizndolas o detenindolas
Importantes para el estudio de:
Mecanismo de accin enzimtica
Especificidad de sustrato
Naturaleza del centro activo
Identificacin residuos fundamentales para la catlisis
Utilidad
Determinacin rutas metablicas
Medicina. Antibiticos
Inhibicin enzimtica
Hay dos tipos de inhibidores enzimticos:
Reversibles: Unin no covalente de un inhibidor a la enzima
Irreversibles: Unin covalente del inhibidor al enzima
Competitiva
No competitiva
Acompetitiva
Elementos naturales, txinas especficas, venenos, iones, frmacos
Inhibicin reversible competitiva
Unin del inhibidor al centro activo del enzima, compite con el sustrato
Sustrato
Inhibidor
competitivo
Enzima Enzima
Sin inhibidor
[sustrato]
V
e
l
o
c
i
d
a
d




K
i
=
[ E ] [ I ]
[ EI ]
K
m
ap
= a K
m
Inhibicin reversible competitiva
K
m
ap
= a K
m
a = 1 +
[ I ]
K
i
K
m
ap
= K
m
1 +
[ I ]
K
i
( )
Sustrato
Enzima Enzima
Inhibidor
competitivo
Aumento
[ I ]
(sin inhibidor)
Pendiente =
Aumenta K
m
= V
mx
Inhibicin reversible competitiva
Etilenglicol Ac. Oxlico
Metanol Formaldehdo
Etanol
Acetaldehdo
Alcohol DH
La intoxicacin con etilenglicol o metanol se trata con etanol
Sustrato
Enzima Enzima
Inhibidor
competitivo
Inhibicin reversible competitiva
Metotrexato
Tetrahidrofolato
Inhibe sntesis de DNA
Compite por la dihidrofolato reductasa
Compiten con el p-amino-benzoico,
necesario para la sntesis de DNA
de bacterias.
Agentes antibacterianos: Sulfamidas
Quimioteraputicos: metrotrexato
Estatinas
Inhiben HMG-CoA reductasa,
enzima limitante sntesis de
colesterol.
Inhibicin reversible no competitiva
Unin del inhibidor a un sitio distinto del centro activo, no compite con el sustrato
Enzima
Inhibidor no
competitivo
Sustrato
Sustrato
Enzima
Sin inhibidor
[sustrato]
V
e
l
o
c
i
d
a
d




Inhibicin reversible no competitiva
Sustrato
Enzima
Inhibidor no
competitivo
Enzima
Sustrato
Disminuye V
mx
= K
m
K
m
ap
= K
m
a = 1 +
[ I ]
K
i
V
mx
ap
=
1 +
[ I ]
K
i
( )
V
mx
Inhibicin reversible no competitiva
Tipranavir
(inhibidor de la Proteasa)
PETT2
(Inhibidor de la Trascriptasa Inversa)
Inhibicin irreversible
Reaccionan con un grupo qumico de la enzima, modificndola
covalentemente.
Sus efectos dependen del tiempo de actuacin del inhibidor.
Hg
2+
, Pb
2+
, CN
-
, As
Bloquean unin al sustrato
Inhiben actividad
Por lo general son altamente txicos. Casi todos los inhibidores
enzimticos irreversibles son sustancias txicas (naturales o sintticas).
Penicilina inhibe la sntesis de la pared bacteriana
Aspirina inhibe la sntesis de PG
Gases nerviosos: diisopropil fluorofosfato (DIFP), inhiben neurotransmisores
Inhibicin irreversible
Frmacos antitumorales que actan como anlogos de la citidina
Inhibidores irreversibles del metabolismo del DNA