PRÁCTICO Nº 5 BIOQUÍMICA:
EXAMEN FISICO-QUIMICO Y
MICROSCÓPICO DE ORINA
OBJETIVOS
Muestra de orina n° 4.
Muestra de orina de Felipe Navarro.
Tiras reactivas que reaccionan con de orina.
Vaso precipitado 50 ml.
Un frasco con el reactivo Glucosa GOD-PAD.
Dos micropipetas: 10-100 µl - 100-1000 µl
Puntas para micropipetas: Amarillas -Azules.
Probeta de 25 ml.
7 microtubos con tapa.
1 microtubo con estándar de glucosa 100 mg/ml (concentración 5,55 mmol/l)
1 microtubo con MP6.
Una Gradilla para microtubos.
Un Vórtex.
Guantes.
Toalla desechable.
7 cubetas para espectrofotómetro.
Gradilla para las cubetas.
Espectrofotómetro.
Microscopio de Contraste de Fase.
Reactivos
METODO
EXAMEN QUIMICO
Determinación de propiedades semi-cuantitativas o cualitativas a través de tiras
reactivas.
Tira reactiva
Glucosa en muestra n° 4
Determinación cuantitativa de glucosa
M Extraer 10 10 l MP6
P más 1ml
6 reactivo
Vórtex
Microtubo (x1
Se Incuba 15 minutos a
Temperatura ambiente
(25°C) por las
10 µl condiciones del
Microtubo
Estándar + laboratorio, ya que lo
(x2)
1ml reactivo ideal es 37° durante 10
minutos.
B Se Verte cada muestra en una
(x1)
Espectrofotómetro cubeta para su análisis en el
espectrofotómetro
nm
S
(x2)
M
P
4
Solo una gota
de sedimento se
coloca sobre el
Procedimiento realizado por el porta objeto y
docente, en el que sedimento se lo restante se
extrae (se debe utilizar guantes) Durante 5 minutos a
desecha.
con una pipeta Pasteur. 2000 rpm
En un microscopio
Contraste de Fase se
Analiza el Sedimento
Urinario.
RESULTADOS
Examen físico
Examen químico
Despejando:
Entonces el Paciente 4 de acuerdo a la absorbancia medida posee una
concentración de 557,36 mg/mL de glucosa en la orina. La misma clase de operación
se realiza con las demás absorbancias para obtener las concentraciones de glucosa
de las muestras correspondientes.
CONCLUSIÓN Y DISCUSION
Discusión
En el examen físico al analizar la muestra del grupo este resulto ser normal, y
la muestra problema N4, se vio de aspecto amarillento concentrado. En el examen
químico con tiras reactivas se detecto en la muestra de nuestro grupo todo en el rango
de lo normal, aunque un leve aumento en los leucocito quizás producto de una
infección, y en la muestra problema, de detectaron altos contenidos de glucosa lo que
nos indica que la persona sufría de diabetes. El método de GOD-PAD, es un buen
método para la detección de glucosa en la orina a partir de reacciones enzimáticas, es
por esto mismo que en este examen, se incurra en posibles errores como un mal
manejo en los instrumentos de laboratorio, como la elección de micropipetas, elección
de cubetas, calibración de instrumentos y de cantidades a extraer, posibles
contaminaciones de las muestras, mal trabajo con el espectrofotómetro, problemas
con su lectura, vaciamiento de el contenido de un tubo otro, la no agitación de las
muestras en el Vortex, una incubación insuficiente o a una temperatura inadecuada lo
cual causará efectos directos en la enzima, etc.
Como resumen, debemos destacar, que para este práctico se debió mantener
un método objetivo para no caer en la subjetividad, y con esto, disminuir la tasa de
error en los resultados, de no ser así, se repetían los experimentos de manera de
obtener un resultado óptimo. También se necesitó de un buen trabajo en cuanto al
manejo en los equipos de laboratorio, lo único que pudo causar error, por su grado de
subjetividad fue el manejo con tiras reactivas, en las que nos complico llegar a un
consenso en alguno de sus valores, pero se enfatizo la idea era e descarte de
variables la cual nos servirá en la aplicación de el examen de orina en nuestro futuro
medico.
Conclusión
Conservación
Las muestras de orina deben ser analizadas frescas, siempre que sea posible y
mantenidas en las mejores condiciones de conservación. Debe guardarse siempre,
parte de la muestra de orina analizada por si fuera necesario efectuar algún otro
análisis de comprobación, o por si, durante el análisis se deteriora sin haber obtenido
resultados fiables.
BIBLIOGRAFÍA