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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA


10 de
septiembre
de 2012



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BACTERIAS COLORACION GRAM.

I. OBJETIVOS:

Recepcionar muestras de alimentos segn DIGESA.
Preparacin de los cultivos para anlisis.


II. MARCO TERICO

CLASIFICACIN BACTERIANA
Dentro de las Eubacterias existen tres grupos de bacterias que pueden ser
diferenciados en relacin a la Estructura de la Pared Celular. La forma ms
sencilla de iniciar una identificacin del microorganismo que se desea estudiar es
realizar una coloracin o Tincin de Gram. La tincin de Gram es una Tincin
Diferencial porque no todas las clulas se tien de la misma manera y permite
discriminar entre dos grandes grupos de Eubacterias, las Eubacterias Gram
Positivas y Gram Negativas.








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BACTERIA GRAM NEGATIVA

Tiene una capa delgada de Peptidoglicano (mureina) unida a una membrana
exterior por lipoprotenas. La membrana exterior est hecha de protena,
fosfolpido y lipopolisacrido. En el lipopolisacrido, la porcin de lpido est
embebida en el fosfolpido y el antgeno O polisacrido est en la superficie. El
lpido se llama Lpido A y es txico, pero el lipopolisacrido entero se llama
Endotoxina. La pared de la clula tiene poros llamado Porines para el transporte de
substancias de peso molecular bajo.
Entre la membrana citoplsmica y la pared celular hay un espacio periplsmico
con enzimas hidrolticas, enzimas inactivadoras de antibiticos y protenas de
transporte.



BACTERIA GRAM POSITIVA

Tiene una capa gruesa de Peptidoglicano (mureina) y dos clases de cidos
teicoicos: cido Lipoteicoico que est en la superficie, empotrado en la capa de
peptidoglicano y unido a la membrana citoplsmica. Y cido teicoico de la Pared
que est en la superficie y se une slo a la capa de peptidoglicano.





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DIFERENCIAS ENTRE BACTERIA GRAN POSITIVA Y GRAN NEGATIVA.


BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS
Poseen una pared celular interna y una
pared de peptidoglucano.
*Peptidoglucano: es un exoesqueleto
que da consistencia y forma esencial
para replicacin y supervivencia de la
bacteria.
Poseen una pared celular ms compleja:
-pared celular interna
-pared de peptidoglucano
- bicapa lipdica externa
No tiene membrana externa
Membrana externa: forma un saco rgido
alrededor de la bacteria, mantiene
estructura y es barrera impermeable a
macromolculas, ofrece proteccin en
condiciones adversas

No tiene espacio periplasmtico Espacio periplasmtico: espacio entre la
superficie externa de la membrana
citoplasmtica y la interna de la
membrana externa.
La red de murena est muy
desarrollada y llega a tener hasta 40
capas
La red de murena presenta una sola capa
La penicilina mata a las gram
positivas, ya que bloquea la formacin
de enlaces peptdicos entre las
diferentes cadenas del peptidoglucano
La penicilina no mata a las Gram
negativas, a causa de la capa de
lipopolisacridos situada en la parte
externa de la pared celular.
En la tincin de Gram, retienen la
tincin azul
Quedan decoloradas.

Conservan el complejo yodocolorante


Pierden el complejo yodocolorante

Son esporulantes y no esporulantes,
como Streptococcus, Cisteria, Frankia.

Pueden ser anaerobios o aerobios
Poseen otros componentes: cidos
teicoicos y lipoteicoicos, y
polisacridos complejos.
Poseen protenas con concentraciones
elevadas.





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PROCEDIMIENTO PARA LA RECEPCIN DE MUESTRAS DE ALIMENTOS
SEGN R.M. N 156-2010/MINSA


ANLISIS MICROBIOLGICOS PARA LA JAMONADA
(Salmonella)


ANEXO 01. Cantidad de muestra necesaria y condiciones de conservacin y
tiempo de transporte.

TIPO DE ENSAYO: Microbiolgico.

TIPO DE MUESTRA: Alimento envasado.
TIPO DE ENVASE: Envase original.
CANTIDAD DE MUESTRA: 200 g.

CONSERVACIN: 4 C

TIEMPO DE TRANSPORTE: 62 minutos

ANEXO 02. Formato de etiqueta.

IDENTIFICACION: Jamonada en envase original
LUGAR DE MUESTREO: Metro-Rimac
FECHA: 02/09/12
HORA: 11: 25 a.m.
TEMPERATURA: 4C
LOTE: ---
MUESTREADO POR: Amparo Condori Lopez
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INFORME DE ENSAYO

ANALISIS : MICROBIOLOGICO
LUGAR : LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA FIQ - UNAC
FECHA DE MUESTREO : 03/09/12
FECHA DE EJECUCION : 03/09/12



PREPARACIN DE LA MUESTRA

Fecha de Inicio de la siembra: lunes 03 de setiembre, 10:15 am. T = 24C

Primero se prepar una solucin salina al 0.8% de sal de mesa.












Luego se pes 10 gramos de jamonada en una bolsa de primer uso de cierre
hermtico (ZIPLOC)
Seguidamente se agreg 90 ml. de la solucin salina.
Se calent el Agar selectivo para Salmonella en un vaso de precipitado con agua,
hasta fundir el gel
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Trasvasar 10 ml. en una placa Petri y lo dejamos enfriar.





Agregar 1ml de solucin salina sobre el gel frio de color rojizo, tratando de
dispersar por toda la superficie del agar gelificado y luego tapndolo para luego
rotular y enviado a la incubadora programada a una temperatura de 35C y
dejndolo 48 horas.




ANLISIS MICROBIOLGICOS PARA LA NECTAR
(E.AUREUS)

ANEXO 01. Cantidad de muestra necesaria y condiciones de conservacin y
tiempo de transporte.

TIPO DE ENSAYO: Microbiolgico.

TIPO DE MUESTRA: Liquida.
TIPO DE ENVASE: botella de vidrio.
CANTIDAD DE MUESTRA: 250ml.

CONSERVACIN: 15 C

TIEMPO DE TRANSPORTE: 1 hr 10 min


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ANEXO 02. Formato de etiqueta.


IDENTIFICACION: Frugos
LUGAR DE MUESTREO: Metro - Rimac
FECHA: 02/09/12
HORA: 11: 25 a.m.
TEMPERATURA: 14 C
LOTE: ---
MUESTREADO POR: Reyes Cardoza, Harold
Jos


INFORME DE ENSAYO

ANALISIS : MICROBIOLOGICO
LUGAR : LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA FIQ - UNAC
FECHA DE MUESTREO : 03/09/12
FECHA DE EJECUCION : 03/09/12