QUMICA LABORATORIO

Luis Andrs Salas Pinillos

Mario Vicua Soto


1 DE JUNIO DE 2014
UNIVERSIDAD SAN MARTN DE PORRES
Av. Del Corregidor La Molina
AMINOCIDOS Y PROTENAS

1. RECONOCIMIENTO DE ALFA AMINOCIDOS
Objetivo: Deteccin de alfa-aminocidos.
Colocar en un tubo de ensayo 1 ml de las muestras en solucin, luego adicionarles
3 gotas de reactivo Ninhidrina (cuidado cancergeno!), llevar los tubos al bao
mara por 3-5 minutos, retirar y observar.
Resultados
glicina cistena Triptfano Casena
Ninhidrina +
bao mara
Inmediatamente
se torna a color
morado.
A bao mara
se identifica el
color a morado
intenso.
El color
cambia a un
amarillo bajo.
A bao mara
se mantiene
con el mismo
color.
No reacciona
a temperatura
ambiente.
A bao mara
tienen un color
morado
intenso.
Tiene un bajo
color lila.

2. RECONOCIMIENTO DE RESTO AROMTICO
Objetivo: deteccin de aminocidos con resto aromtico.
En tubos de pruebas, colocar las muestras indicadas, luego adicionar 0,5 ml de
HNO
3
concentrado, llevar a bao mara por 7 minutos, enfriar y luego adicionar
cuidadosamente 0,5 ml de NaOH al 20%. Anote sus resultados
Resultados
Casena cabello Glicina
HNO
3
Reaccin rpida
color amarillo
Se consume el
cabello, color
naranja
No hay color
+ NaOH Se acenta al color
inicial, naranja
intenso
Se acenta con
respecto al color
inicial, naranja


3. RECONOCIMIENTO DE RESTO AZUFRADO
Objetivo: deteccin de restos azufrados en aminocidos.
En tubos de prueba colocar las muestras indicadas, luego adicionar 0,5 ml de
NaOH al 40% + 2 gotas de solucin de acetato de Plomo al 10%, llevar al bao
mara por 7 minutos, enfriar, observar.
Resultados
cistena casena glicina
NaOH + b.m. 10
+ Acetato de Pb
A temperatura
ambiente se
mantiene
transparente.
A bao mara se
pone color
negro.
A temperatura
ambiente hay
una reaccin
rpida, turbio
intenso.
A bao mara
cambia a color
marrn y en la
superficie hay
un poco de
negro.
A temperatura
ambiente hubo
una reaccin
rpida,
comenzando por
turbio y luego
cambiando a
transparente.
A bao mara,
se mantuvo
transparente.

4. REACCIN DE BIURET
Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3 cc. de casena, glicina y triptfano en
cada uno.
Aadir 2 cc. de solucin de NaOH al 20%
A continuacin 4 o 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida al 1%.
Debe aparecer una coloracin violeta- roscea caracterstica.
casena glicina triptofano
violeta azul azul


5. NATURALEZA ANFTERA DE LAS PROTEINAS
Objetivo: verificar el comportamiento anftero de la casena frente a cidos y
bases.
Preparar cuatro tubos de prueba con lo siguiente:
1tubo: 1 gota de HCL 0,1 M +1 gota de anaranjado de metilo + 2 ml de H
2
O
2tubo: 1 gota de HCL 0,1 M +1 gota de anaranjado de metilo + 2 ml de H
2
O
3tubo: 1 gota de NaOH 0,1 M +1 gota de fenolftalena + 2ml de H
2
O
4tubo: 1 gota de NaOH 0,1 M +1 gota de fenolftalena + 2ml de H
2
O
Aadir al 1 y 3 tubo 3ml de casena, agitar y observar; al 2 y 4 tubos 3ml de
H
2
O agitar y observar, explicar sus resultados.
1 2 3 4
rojo rojo Rojo grosella Rojo grosella
casena Amarillo- Rojo grosella
naranja claro claro- incoloro,
turbio

CUESTIONARIO

1. Escriba el nombre y la estructura de 6 de los aminocidos esenciales.
Leucina (CH
3
)
2
CH





Lisina H
2
N(CH
2
)
4




Metionina CH
3
SCH
2
CH
2




Valina (CH
3
)
2
CH






Fenilalanina PhCH2




Treonina CH
3
CH(OH)



2. Escriba la reaccin entre la fenilalanina y la ninhidrina


3. Qu aminocidos se puede encontrar en la albmina de huevo?
Leucina
Isoleucina
Lisina
Fenilalanina
Treonina
Triptfano
Valina

4. Cmo se investiga la estructura primaria de una protena?
Si la estructura primaria es la secuencia de aminocidos de la protena,
nos indicar qu aminocidos componen su cadena polipeptdica y el
orden en que dichos aminocidos se encuentran. La funcin de una
protena depende de su secuencia y de la forma que esta adopte.

5. Qu aplicacin tiene el concepto del punto isoelctrico?
Determinar el pH de un aminocido que se presenta casi
exclusivamente en forma de Zwitterion, es decir con las formas inicas
positivas y negativas en iguales proporciones. En el punto isoelctrico
las protenas precipitan, se separan de sus mezclas y se pueden
purificar.


6. Qu fuerzas intermoleculares son responsables de las estructuras 2,
3 y 4 de las protenas?
2 el responsable son los puentes de hidrgeno
3 el responsable es el enlace salino, puentes de hidrgeno,
interaccin hidrofbica, enlace disulfuro, interaccin de Van Der
Waals.
4 el responsable son las fuerzas electrostticas dbiles no
covalentes.

7. Cules son las aplicaciones de las electroforesis?
La electroforesis es una tcnica para la separacin de molculas
(protenas o cidos nucleicos) sobre la base de su tamao molecular y
carga elctrica. Para la separacin se usa un gel de agarosa o
poliacrilamida (fibras cruzadas, como una malla). Al poner la mezcla de
molculas y aplicar un campo elctrico, stas se movern y debern ir
pasando por la malla, por la que las pequeas se movern mejor, ms
rpidamente. As, las ms pequeas avanzarn ms y las ms grandes
que darn cerca del lugar de partida.

8. Describa algunas de las propiedades biolgicas de las protenas
Especificidad: La especificidad se refiere a su funcin; cada una lleva a
cabo una determinada funcin y lo realiza porque posee una
determinada estructura primaria y una conformacin espacial propia.
Adems, no todos los individuos poseen protenas especficas suyas;
esto se pone de manifiesto en los procesos de rechazo de rganos
trasplantados.

Desnaturalizacin: Consiste en la prdida de la estructura terciaria, por
romperse los puentes que forman dicha estructura. Todas las protenas
desnaturalizadas tienen la misma conformacin, muy abierta y con una
interaccin mxima con el disolvente, por lo que una protena soluble en
agua cuando se desnaturaliza se hace insoluble en agua y precipita. La
desnaturalizacin se puede producir por cambios de temperatura,
variaciones del pH, etc.

Funciones biolgica
Estructural: Forman tejidos de sostn y relleno que confieren
elasticidad y resistencia a rganos y tejidos. Ejemplo de ello es el
colgeno del tejido conjuntivo fibroso, la queratina de la epidermis y la
reticulada y elastina del tejido conjuntivo elstico. Algunas protenas
forman estructuras celulares como las histonas, que forman parte de los
cromosomas. Las glicoprotenas actan como receptores formando
parte de las membranas celulares o facilitan el transporte de sustancias.

Enzimtica: Actan como biocatalizadores acelerando las reacciones
qumicas del metabolismo. En su funcin como enzimas, las protenas
hacen uso de su propiedad de poder interaccionar, en forma especfica,
con muy diversas molculas. Esto facilita la reaccin e incrementa su
velocidad varios rdenes de magnitud.

Hormonal: Algunas hormonas son de naturaleza proteica, como la
insulina y el glucagn que regulan los niveles de glucosa en sangre.
Tambin hormonas segregadas por la hipfisis como la hormona del
crecimiento directamente involucrada en el crecimiento de los tejidos y
msculos y en el mantenimiento y reparacin del sistema inmunolgico,
o la calcitonina que regula el metabolismo del calcio.

Defensiva: Las protenas crean anticuerpos y regulan factores contra
agentes extraos o infecciones. Toxinas bacterianas, como venenos de
serpientes o la del botulismo son protenas generadas con funciones
defensivas. Las mucinas protegen las mucosas y tienen efecto
germicida. El fibringeno y la trombina contribuyen a la formacin
cogulos de sangre para evitar las hemorragias. Las inmunoglobulinas
actan como anticuerpos ante posibles antgenos.

Transporte: La hemoglobina y la mioglobina son las protenas
transportadoras del oxgeno en la sangre en los organismos vertebrados
y en los msculos respectivamente. En los invertebrados, la funcin de
protenas como la hemoglobina que transporta el oxgeno la realizas la
hemocianina. Otros ejemplos de protenas cuya funcin es el transporte
son citocromos que transportan electrones e lipoprotenas que
transportan lpidos por la sangre.

Reserva: Si fuera necesario, las protenas cumplen tambin una funcin
energtica para el organismo pudiendo aportar hasta 4 Kcal. por gramo.
Ejemplos de la funcin de reserva de las protenas son la lactoalbmina
o la ovoalbmina. La hordeina de la cebada y la gliadina del grano de
trigo constituyen la reserva de aminocidos para el desarrollo del
embrin.

Contraccin muscular: La contraccin de los msculos travs de la
miosina y actina es una funcin de las protenas contrctiles que facilitan
el movimiento de las clulas constituyendo las miofibrillas.

Funcin homeosttica: Las protenas funcionan como amortiguadores,
manteniendo en diversos medios tanto el pH interno como el equilibrio
osmtico.

9. Qu aminocidos rendir la hidrlisis cida del siguiente pptido:

Valina, Fenilalanina, Leucina