USO CORRETO DE PIPETAS

Os instrumentos de medio so essenciais para qualquer laboratrio ou

indstria que necessita de medies corretas de volumes. A qualidade dos
resultados das anlises dependente da exatido com que so medidos os
volumes das amostras ensaiadas ou dos reagentes adicionados.
Estes instrumentos de medio devem ser escolhidos levando-se em
considerao sua aplicao. Mesmo os mais sofisticados instrumentos
automticos de anlise oferecem resultados confiveis somente quando o
material volumtrico empregado na preparao de reagentes e amostras for
suficientemente preciso e direcionado ao uso pretendido.
A calibrao e o uso adequado dos instrumentos de medio tm grande
influncia no resultado final de um ensaio. importante avaliar e reduzir, onde
for possvel, os erros sistemticos e aleatrios que possam influenciar o bom
desempenho do laboratrio.
Pipetas so usadas para transferncia de volumes pr-estabelecidos de
um recipiente para outro. Para os diversos usos em laboratrios clnicos ou
laboratrios de anlise em geral, existem diversos tipos de pipetas, como as
pipetas de vidro e pipetas automticas (mecnicas e eletrnicas).
Pipeta Volumtrica ou Transferidora: planejada para medir um volume fxo de
lquido, constituindo-se de um bulbo cilndrico contendo um tubo estreito em cada
extremidade (Figura 1 A). A marca de calibrao do volume fca gravada na parte superior
do tubo. A parte inferior do tubo se afna gradualmente, de modo que o calibre interno
na extremidade da pipeta seja sufcientemente fno para que o fuxo do lquido e a
drenagem incompleta no causem erros de medio alm da tolerncia especifcada.
Estas pipetas so calibradas para utilizao em medida de amostras no viscosas.
A exatido da calibrao desta pipeta diretamente proporcional sua capacidade.
MATERIAL VOLUMTRICO
PIPETAS
CUIDADOS NECESSRIOS PARA USO CORRETO DAS PIPETAS
No pipetar com a boca. Utilizar sempre um dispositivo para a pipetagem (Figura 2);
Utilizar pipetas ntegras, descartar as pipetas que apresentem pontas quebradas;
Utilizar pipetas limpas e secas;
Utilizar pipetas com volume total o mais prximo possvel do volume a ser medido;
Para medidas de solues viscosas, evitar que o lquido ultrapasse muito a marca
de medida, limpar a parte externa da pipeta e lavar a mesma vrias vezes na
soluo que ir receber o material pipetado;
Nas solues incolores coloca-se o menisco inferior na marca de calibrao enquanto
que nas solues coradas o acerto se faz na parte superior do menisco (Figura3);
Os olhos devem estar posicionados na altura da leitura do menisco (Figura 4);
Utilizar a pipeta sempre na posio vertical (tanto para aspirar como para
desprezar o lquido);
O fuxo do lquido deve ser contnuo.
Evitando a paralaxe.
A superfcie de um lquido
confnado num tubo
estreito exibe uma curvatura
marcante, ou menisco, que
consiste na interface entre o
ar e o lquido a ser medido.
Para acerto do menisco, seu
olho deve estar no nvel
da superfcie do lquido
para assim evitar um erro
devido paralaxe (Figura 4).
Paralaxe um fenmeno que
ocorre atravs da observao
errada do valor na escala
analgica do instrumento,
devido ao ngulo de viso.
INFO
T
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2
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/
1
0
20C
mL
A
A
A B C
A
Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
0
0
Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
B
B C
20C
mL
0
.1
.2
.9
1
0
1
3
4
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
1
0
0
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
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A
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A B C
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Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
0
0
Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
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B C
20C
mL
0
.1
.2
.9
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Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
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> 1001
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Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
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2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
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Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
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A B C
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Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
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Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
B
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20C
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0
.1
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Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
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Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
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2 - 3
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Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
1
0
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Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
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A
A
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A
Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
0
0
Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
B
B C
20C
mL
0
.1
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Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
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3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
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Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
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A
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A
Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
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Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
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.1
.2
.9
1
0
1
3
4
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
1
0
0
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
T
D



3

m
L

2
0

C
TD
1

i
n

1
/
1
0
0
5

i
n

1
/
1
0
20C
mL
A
A
A B C
A
Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
0
0
Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
B
B C
20C
mL
0
.1
.2
.9
1
0
1
3
4
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
1
0
0
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
T
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0

C
TD
1

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n

1
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5

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20C
mL
A
A
A B C
A
Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
0
0
Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
B
B C
20C
mL
0
.1
.2
.9
1
0
1
3
4
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
1
0
0
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
Figura 1: A: Pipeta Volumtrica; B: Pipeta Mohr (escoamento parcial);
C: Pipeta sorolgica (escoamento total)
Figura 2: Dispositivos auxiliares para pipetar.
Figura 3: Acerto do menisco. A: solues incolores; B: solues coradas.
Figura 4: A: posio correta para acertar o menisco. B e C posies erradas
para acertar o menisco.
Pipeta Graduada ou Medidora: Consiste em um tubo de vidro graduado
uniformemente em seu comprimento (Figura 1 B e 1C). Existem 2 tipos:
Pipeta graduada de escoamento parcial: calibrada entre duas marcas, apresenta
no topo duas linhas coloridas;
Pipeta graduada de escoamento total (sorolgica), graduada at a extremidade
inferior, apresenta no topo uma linha colorida.
Estas pipetas so planejadas para medidas de volumes pr-determinados e no
so consideradas exatas para medir amostras e padres.
PIPETAS AUTOMTICAS
PIPETAS DE DESLOCAMENTO DE AR
CUIDADOS NECESSRIOS PARA USO CORRETO DAS PA
Figura 5: A - Pipeta de Deslocamento Positivo; B - Pipeta Deslocamento
de Ar (monocanal) e C - Pipeta Deslocamento de Ar (multicanal).
Figura 6: Sistema da Pipeta de Deslocamento de Ar
As micropipetas so instrumentos de laboratrio utilizados para transferncia
com preciso, de pequenos volumes de lquido.
Podem ser simples, que s empregam uma ponteira (Figura 5B) ou multicanal
(Figura 5C), que permitem uso de vrias ponteiras simultaneamente, pipetando o
mesmo volume em todas elas.
De modo geral so utilizadas para pipetar volumes de 1 a 1000 microlitros.
Existem dois tipos de pipetas: Pipetas de deslocamento de ar (Figura 5B e 5C) para
uso geral e Pipetas de deslocamento positivo (Figura 5A), para manuseio de lquidos
especfcos (densos, viscosos ou volteis). Os dois tipos de pipetas so disponibilizados
em volumes variveis ou fxos.
Quando o embolo pressionado em uma pipeta de deslocamento de ar, o pisto
dentro do instrumento se move para baixo expulsando o ar, que deslocado pelo pisto.
O volume de ar deslocado pelo pisto equivalente ao volume de lquido aspirado.
O esquema abaixo demonstra como o pisto determina o volume de ar deslocado
e subsequentemente o volume de amostra aspirado.
As tcnicas de pipetagem mais frequentemente utilizadas so a pipetagem direta
e a pipetagem reversa. A seleo da tcnica de pipetagem deve ser determinada de
acordo com o mtodo requerido.
O modo de operao pode alterar signifcativamente os resultados de uma anlise,
portanto ao utilizar uma pipeta, fundamental determinar o melhor modo de operao
para a aplicao.
Modos de Pipetagem
Para o uso adequado das pipetas automticas, visando obter preciso e exatido,
necessrio primeiramente que as pipetas e ponteiras sejam de qualidade, que
se tenha sufciente experincia prtica em seu uso correto e que a manuteno e
calibrao estejam em conformidade com as orientaes do fabricante.
Ponteiras de m qualidade podem ter rebarbas ou ondulaes no plstico que
retm lquidos, de modo que o volume pipetado no o volume dispensado. Outro
problema no uso de ponteiras de m qualidade a abertura no concntrica da
ponta da ponteira, afetando a distribuio do lquido na ponteira.
Nunca mover a pipeta da posio vertical quando estiver com lquido na ponteira.
Manter a pipeta na posio vertical e efetuar a aspirao do lquido lentamente,
dando uma pausa de uma frao de segundos aps a aspirao.
recomendado que se faa um ambiente na ponteira com o lquido a ser pipetado.
Com isto se obtm melhor exatido e preciso da pipetagem. Sugerimos consultar
o manual da pipeta.
Para pipetagem de amostras viscosas e sangue total, sugerimos limpar com cuidado
a parte externa da ponteira e lavar a ponteira no lquido que vai receber a amostra.
Para prevenir corroso do pisto, evitar aspiraes acidentais do lquido para
dentro da pipeta. Se o lquido acidentalmente aspirado para dentro da pipeta, o
pisto deve ser imediatamente limpo com lcool isoproplico a 70% ou de acordo
com orientaes do fabricante.
Aps o uso as pipetas devem ser mantidas na posio vertical em estantes apropriadas.
Para o uso em amostras
aquosas de modo geral
utilizada a Pipeta de
Deslocamento de Ar, em
conjunto com a ponteira
descartvel (Figura 6).
indicado o uso de
ponteiras que se adaptem
perfeitamente s pipetas.
As ponteiras no devem ser
reaproveitadas, pois este
procedimento pode levar
a erros de pipetagem e a
contaminaes de amostras
e reagentes.
T
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1

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5

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20C
mL
A
A
A B C
A
Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
0
0
Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
B
B C
20C
mL
0
.1
.2
.9
1
0
1
3
4
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
1
0
0
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
T
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0

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1

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n

1
/
1
0
0
5

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n

1
/
1
0
20C
mL
A
A
A B C
A
Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
0
0
Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
B
B C
20C
mL
0
.1
.2
.9
1
0
1
3
4
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
1
0
0
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
T
D



3

m
L

2
0

C
TD
1

i
n

1
/
1
0
0
5

i
n

1
/
1
0
20C
mL
A
A
A B C
A
Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
0
0
Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
B
B C
20C
mL
0
.1
.2
.9
1
0
1
3
4
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
1
0
0
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
T
D



3

m
L

2
0

C
TD
1

i
n

1
/
1
0
0
5

i
n

1
/
1
0
20C
mL
A
A
A B C
A
Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
0
0
Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
B
B C
20C
mL
0
.1
.2
.9
1
0
1
3
4
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
1
0
0
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
T
D



3

m
L

2
0

C
TD
1

i
n

1
/
1
0
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1
/
1
0
20C
mL
A
A
A B C
A
Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
0
0
Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
B
B C
20C
mL
0
.1
.2
.9
1
0
1
3
4
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
1
0
0
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
FUNCIONAMENTO DAS PIPETAS DE DESLOCAMENTO DE AR
PIPETAGEM DIRETA (ESGOTAMENTO TOTAL)
Figura 7: Sistema da Pipeta de Deslocamento Positivo
Esquema de funcionamento da pipeta de deslocamento positivo:
Para pipetagem
de amostras viscosas
Para uso em amostras que tem sua pipetagem dificultada (viscosa, densa,
voltil, radioativa, corrosiva) indicado o uso de pipetas de deslocamento positivo.
Neste tipo de pipeta a amostra tem contato direto com o embolo que faz parte do
pisto descartvel (Figura 7).
Micropipetas so instrumentos de alta preciso constitudos por
diversos componentes mecnicos sujeitos ao desgaste aps uso prolongado
ou disfuno resultante de uso inadequado.
Como a medio de volume um passo crtico em qualquer laboratrio
analtico, onde um pequeno erro de pipetagem pode causar um erro
significativo no resultado, essencial a verificao da calibrao dos
instrumentos volumtricos nas mesmas condies em que so utilizados
no laboratrio.
A verificao da calibrao consiste em estabelecer a relao entre
o valor indicado pelo instrumento e o valor efetivamente medido.
essencialmente um conjunto de medies e, como tal, no altera o
desempenho do instrumento.
A verificao da calibrao deve ser realizada nas seguintes situaes:
Aps uma manuteno e troca de peas;
Quando a pipeta sofre uma queda ou outro dano;
Mudana no controle da qualidade do sistema analtico;
De acordo com orientaes do fabricante.
A freqncia da verificao da calibrao depende do quanto a pipeta
utilizada e da qualidade e condio deste uso. A freqncia pode ser
definida tambm com base em resultados anteriores e na criticidade da
medida.
importante que na verificao da calibrao cada laboratrio
estabelea os limites aceitveis de acordo com suas aplicaes. Estes
limites geralmente so informados pelo fabricante da pipeta.
Os trs mtodos mais comuns de calibrao de pipetas
automticas so: gravimtrico, titrimtrico e fotomtrico.
O mtodo gravimtrico consiste na determinao da massa de
lquido escoado ou contido no instrumento a calibrar, tendo em conta a
temperatura, umidade, presso atmosfrica e coeficiente de expanso e
que posteriormente convertida em volume atravs de frmulas adequadas
descritas na literatura. Esta tcnica deve ser realizada por laboratrio de
calibrao especializado.
O mtodo titrimtrico consiste na medio de uma quantidade
conhecida de NaOH em relao ao volume dispensado pela pipeta. O volume
dispensado pela pipeta determinado sem interferncia da temperatura,
umidade ou presso atmosfrica. necessria uma rigorosa padronizao
das solues envolvidas.
O mtodo fotomtrico consiste em medies de diferentes diluies
de amostras e conseqente leitura fotomtrica destas medies. um
procedimento que pode ser facilmente implantado no laboratrio.
Anlise dos resultados da calibrao
Aps a calibrao, deve ser feita a anlise para verificar se o
instrumento cumpre os critrios de aceitao estabelecidos para cada um
dos pontos calibrados, com base em especificaes do prprio laboratrio
ou especificaes do fabricante, tendo em vista que os erros detectados na
calibrao no devem invalidar ou afetar significativamente seu uso nos
ensaios.
Para fazer a aceitao deve ter-se sempre em conta a incerteza da
calibrao, usando para tal a equao:
|erro| + |incerteza| |EMA|
EMA Erro mximo aceitvel.
O laboratrio deve definir a freqncia da calibrao e os limites
aceitveis, deve registrar todas as calibraes realizadas e devidas aes.
Observao
A calibrao das pipetas, por si s, no garante a qualidade de seu
uso. As pipetas tm que ser mantidas em bom funcionamento atravs de
um programa de manuteno adequado, incluindo limpeza, lubrificao,
substituio de vedantes e ajuste. Aps a calibrao, necessrio
verificar se o instrumento cumpre os limites estabelecidos, em funo das
necessidades especficas do laboratrio e do uso a que o instrumento se
destina, tendo em conta a incerteza da calibrao. Para manter a confiana
at a prxima manuteno e calibrao deve instituir-se um programa de
verificaes intermdias.
As pipetas de deslocamento positivo funcionam como uma seringa. No existe
colcho de ar entre o pisto descartvel e a amostra. Devido a ausncia do colcho
de ar para expandir ou contrair, a fora de aspirao permanece constante durante
toda a operao, no sendo afetada pelas propriedades fsicas da amostra.
Este tipo de pipeta permite medir amostras com alta viscosidade e alta
densidade como mercrio e pasta de dente.
T
D



3

m
L

2
0

C
TD
1

i
n

1
/
1
0
0
5

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n

1
/
1
0
20C
mL
A
A
A B C
A
Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
0
0
Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
B
B C
20C
mL
0
.1
.2
.9
1
0
1
3
4
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
1
0
0
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
T
D



3

m
L

2
0

C
TD
1

i
n

1
/
1
0
0
5

i
n

1
/
1
0
20C
mL
A
A
A B C
A
Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
0
0
Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
B
B C
20C
mL
0
.1
.2
.9
1
0
1
3
4
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
1
0
0
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
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T
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mL
A
A
A B C
A
Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
0
0
Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
B
B C
20C
mL
0
.1
.2
.9
1
0
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4
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
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Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
1
0
0
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
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20C
mL
A
A
A B C
A
Pisto
Haste da pipeta
O volume desejado
ajustado. O pisto se
move para a posico
apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e expele
um volume de ar
equivalente ao volume de
amostra a ser aspirado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, criado um
vcuo dentro da ponteira.
A presso atmosfrica
ambiente fora a
penetrao do volume
desejado atravs do
orifcio da ponteira.
1
0
0
Colcho Ar
Amostra
Ponteira
B C
Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
outra vez. A Presso de
ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
B
B C
20C
mL
0
.1
.2
.9
1
0
1
3
4
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 1 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Liberar o embolo suavemente
at a posio Repouso.
Repouso 5
Deslocar a ponta da ponteira
para outra regio da parede
interna do recipiente.
Pressionar o embalo at o 2
estgio, deslizando a ponteira
na parede para remover o
restante da amostra.
Esgotamento 4
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Segurar a pipeta prximo
posio vertical. Pressionar
suavimente o embolo at a
posio do 2 estgio.
Preparao
Imergir a ponteira no lquido*.
Liberar o embolo lentamente
at a posio de Repouso.
Esperar um segundo para
permitir que o lquido se
acomode dentro da ponteira.
Aspirao
Um dos fatores que infuenciam
a preciso da pipetagem o
adequado esvaziamento da
ponteira pela presso de ar.
*A poro da ponteira imersa na
amostra tem efeito signifcativo
na impreciso das medies.
Se a ponteira imersa
profundamente, gotculas da
amostra fcaro na parede
externa da ponteira e se
somaro ao volume transferido.
Se a ponteira no imersa a
uma profundidade sufciente, o
volume transferido ser menor
que o volume selecionado.
Repouso
1 Estgio
2 Estgio
1 2
Colocar a ponta da ponteira a
um angulo (10 a 45) contra
a parede interna do recipiente.
Pressionar o embolo
suavemente at o 1 estgio.
Esperar um segundo.
Transferncia 3
Se a ponteira for utilizada
para a mesma amostra,
manter o embolo na posio
do 1 estgio para a imerso
subsequente e retomar a
operao na fase 2.
Re-aspirao 4
Volume
(microlitro)
0,1 - 1
1 - 100
101 - 1000
> 1001
1
2 - 3
2 - 4
3 - 6
Poro imersa
(milmetros)
Se a ponteira no for mais
utilizada na mesma amostra,
pressionar o embolo at o 2
estgio desprezando o resduo
em um recipiente de descarte.
Descartar a ponteira.
Finalizao 5
RESDUO
Haste da pipeta
Capilar descartvel
Pisto descartvel
Amostra
Ajustar o volume
desejado.
O pisto semove para a
posico apropriada.
O embolo pressionado
antes da aspirao da
amostra. O pisto se
move para baixo e
expele um volume de ar
equivalente ao volume
de amostra selecionado.
Com a ponteira
introduzida na amostra,
assim que o embolo
liberado, um vcuo
parcial criado dentro
da ponteira.A presso
atmosfrica ambiente
fora a penetrao do
volume desejado
atravs do orifcio da
ponteira.
1
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Ajuste do Volume Preparo para Aspirao Aspirao da amostra
O embolo pressionado
novamente. A Presso
de ar se eleva dentro da
ponteira.
O ar comprimido fora o
lquido para fora da
ponteira.
Transferncia
1 2 3 4
PIPETAGEM REVERSA (ESGOTAMENTO PARCIAL)
PIPETAS DE DESLOCAMENTO POSITIVO
CALIBRAO
Av. Paulo Ferreira da Costa, 600
Lagoa Santa MG Brasil CEP 33400-000
SAC - Servio de Apoio ao Cliente
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Fax: +55 (31) 3689-6901
e-mail: sac@labtest.com.br
www. l abtest. com. br
Infotec - Informartivo Tcnico da Labtest
Tiragem: 1.000 exemplares - Distribuio gratuita
Equipe Labtest:
Presidente: Dra. Eliane Lustosa Cabral Gomez
Diretor de Inovao e Tecnologia: Dr. Mrcio de Almeida Basques
Diretor Executivo: Tarcisio B. Vilhena Filho
Edio: Frida Wilke - Setembro/2010
Diagramao e Editorao: Agncia FALA! Minas
LABTEST DIAGNSTICA S/A
Av. Paulo Ferreira da Costa, 600 - Lagoa Santa - Minas Gerais - Brasil. CEP 33400-000
Fone +55 (31) 3689-6900. SAC (DDG) 0800 031 34 11 - E-mail: sac@labtest.com.br - www.labtest.com.br
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Bibliograa
1. Fabiana Barino, Mrcio Biasoli; Curso Calibrao de Instrumentos, Controlab;
2. Manual de Pipetas Eppendorf;
3. Manual de Pipetas Pipetman;
4. EN-ISO 8655-6:2002;
5. NP EN ISO/IEC 17025;
6. Info Qualidade A Manuteno das pipetas fundamental; Isabel Farias, dez 2009;
7. RDC 302:2005 - Regulamento Tcnico para Funcionamento de Laboratrios Clnicos;
8. Norma PALC.
R
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S
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