Ao de la Inversin para el Desarrollo Rural y la Seguridad

Alimentaria
UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN



Alumno : Henry Bartolom Snchez Bueno.
Materia : Biologa Celular.
Docente : Blga. Rosa Mara Lin Abanto.
Escuela : Escuela de Medicina Veterinaria y
sssssssssssssssssssssss Zootecnia.
Facultad : Facultad de Ciencias Agrcolas.

TACNA PER
2013
PRACTICA N 01 MICROSCOPIA
I. INTRODUCCION :

La microscopia es la tcnica de producir imgenes visibles de estructuras o detalles
demasiados pequeos para ser percibidos a simple vista utilizando como fuente de
energa de luz o un haz de electrones. En la microscopa se evidencia los grandes aportes
que la fsica ha hecho a la biologa.
En biologa celular, el microscopio es una herramienta indispensable. Desde las primeras
observaciones hechas por Anthony van Leeuwenhoek (1632 1723) a la actualidad se
han realizado una serie de investigaciones gracias al avance de la microscopia ptica.
Los microscopios pueden ser: pticos y electrnicos .Con respecto a los primeros, existen
varios tipos y uno de ellos es el microscopio de campo claro.
El microscopio compuesto de campo claro presenta el sistema de iluminacin en la base.
El sistema de iluminacin puede consistir en un foco de luz de alta intensidad (o un espejo
con dos caras, una cncava y una plana), un sistema de lentes y un diafragma de campo
ajustable. La luz pasa de la ventana del iluminador (en caso de tener un foco de luz) o del
espejo que refleja la luz de una fuente independiente, hacia el condensador que se
encuentra debajo de la platina, el cual enfoca la luz sobre el objeto. Los lentes
involucrados en la formacin de la imagen son el lente objetivo, el cual est cerca al
objeto, y el lente ocular, el cual est cerca al ojo. El lente objetivo produce una proyeccin
amplificada e invertida del objeto hacia el otro. Esta primera imagen es utilizada como
objeto para el lente ocular que produce la imagen ocular, ms amplificada e invertida y es
percibida por el ojo.
La mayora de microscopios tienen lentes objetivos con amplificaciones de 10X, 40X y
100X (inmersin) La mayora de lente oculares tiene amplificaciones que oscilan entre 8X
y 12.5X.
La amplificacin total es el producto de las amplificaciones del lente objetivo por el del
lente ocular. Por lo tanto la amplificacin total obtenida con el objetivo de 100X y el ocular
de 10X es 1000X.
Adema de amplificar imgenes, el microscopio resuelve detalles, por ejemplo revela las
subunidades de las cuales est compuesta un objetivo. El poder de resolucin de un
microscopio est especializado por el lmite de resolucin (l.r) definido como la distancia
mnima por la cual dos puntos vecinos pueden estar separados y ser discriminados como
entidades separadas. El l.r del ojo humano es alrededor de 0,1 mm. a 0,2 mm. Mientras
que el de un microscopio de luz de alta calidad es de 0,2 um.
El lmite de resolucin de un microscopio se calcula por la ecuacin Abb

Donde, es la longitud de onda de luz utilizada para visualizar el objeto y A.N es la
apertura numrica que depende de la medida del ngulo del cono de luz que entra al lente
objetivo (A.N = n sen )
El l.r disminuye a medida que aumenta la A.N. , por lo tanto, a mayor apertura numrica,
mayor es el poder de resolucin del microscopio. El ngulo del cono de luz se controla
con el diafragma localizado junto al condensador. Abriendo el diafragma se incrementa ek
ngulo del cono de luz.
Otra caracterstica del lente objetivo es la distancia de trabajo, definida como el espacio
entre la superficie del cubreobjetos y la parte ms baja del objetivo cuando el espcimen
est en foco. A medida que la apertura numrica aumenta, la distancia de trabajo
disminuye para acomodar el mayor ngulo del cono de luz.
La profundidad del campo, es el grosor del espcimen que se encuentra en foco, tambin
disminuye cuando se incrementa proporcionalmente a la amplificacin total. Al duplicarse
la amplificacin, el dimetro de campo ser la mitad.

Objetivos: Al finalizar la prctica el alumno estar en condiciones de:
Valorar la importancia del microscopio compuesto como instrumento bsico para el
estudio de investigacin en biologa celular.
Identificar las diferentes partes que constituyen el microscopio compuesto y
reconocer las funciones de cada una de ellas.
Adquirir habilidad en el uso y manejo correcto del microscopio, siguiendo las
indicaciones de las guas de laboratorio.
Aplicar correctamente la ecuacin de Abb.


II) MATERIALES:

Microscopio compuesto
Papel milimetrado
Tijeras
Lapiceros

III) POCEDIEMIENTO:

3.1) RECONOCIMIENTO DE LAS PARTES DE UNA MICROSCOPIO

PARTE MECNICA.
Est compuesta por:
El Pie: Es la pieza que sostiene al microscopio para asegurar la estabilidad del
aparato, y servir de soporte a sus dems partes
La Columna o Brazo: Es la parte articulada por medio de una bisagra llamada
charnela (en algunos casos), sostiene una platina, al tubo ptico, llevan los
tornillos micromtricos y es por donde se toman para su traslado.
La Platina: Es una pieza metlica redonda o cuadrada donde se colocan las
preparaciones.
El Cabezal: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular,
binocular del tubo ptico.
El Tubo ptico: Es metlico y de forma cilndrica ennegrecido anteriormente para
evitar la reflexin de la luz. En el extremo superior lleva al ocular y el extremo
inferior al objetivo, ya sea directamente o por intermedio del revlver.
El Revlver: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar
los objetivos.
Tornillos de Enfoque: Micromtrico que aproximan el enfoque y micromtrico que
consigue el enfoque correcto.

PARTE OPTICA:
Objetivos: Denominado as, porque van cerca del objetivo por observar. Est
constituido por un tubo metlico cilndrico cnico, que lleva en su interior un
sistema de lentes destinados a dar una imagen real e invertida del objetivo. La
lente de la parte inferior se le denomina lente frontal y de ella depende la mayor o
menor amplificador.
Objetivos a seco: Son aquellos en los que la lente frontal y el preparado a
observar, no existe sustancia alguna, excepto el aire. Se utiliza generalmente para
observaciones de preparados en fresco. Pueden ser de pequeo aumento,
mediano aumento y gran aumento.
Objetivos de inmersin: Aquellos en los que entre la lente frontal y el preparado
a observar, se interpone una sustancia , comnmente el aceite de cedro,cuyo
indice de refraccion es de 1.5,se utilizan generalmente para observaciones de
preparados en seco.Los objetivos deben poseer tres cualidades, a saber: poder
definidor, poder penetrante y poder resolverte . El primero consiste en la propiedad
de presentar con limpieza y correccion los contornos de la imagen. El poder
penetrante es la propiedad de presentar,sin variar el enfoque, perfectamente
detallados varios planos del espesor de una preparacin.El poder resolverte
permite apreciar delicados detalles de estructura.
Oculares: Son los que van cerca del ojo del observador y nos dan la imagen
virtual y derecha . Consta de un sistema de dos lentes planos
convexos.Dispuestos en un tubo metalico cilindrico , con un diafragma intermedio;
ambos lentes presentan las caras planas dirigidas al ojo del observador y las
caras convexas hacia el objeto.En la parte lateral o superior del tubo cilindrico lleva
una numeracin (5X,10x,15x), que indica el numero de aumentos propios del
ocular.
Sistema de iluminacin : Se encuentra situado bajo la platina y tiene la mision de
iluminar los objetivos por medio de la luz transmitida, y comprende :
o La lmpara :Dirige los rayos luminosos hacia el condensador .
o El diafragma : Es un dispositivo que esta constituido por un sistema de
laminillas metalicas dispuestas concentricamente, en tal forma que permite
regular la entrada de luz
o El condensador : Es un dispositivo que esta constituido , por un sistema de
dos o mas lentes montadas dentro de un cilindro conico truncado de metal ,
esta situado por debajo de la platina . Sirve para concentrar o condensar los
rayos luminosos .
o Porta filtros : Permite colocar filtros de diferentes colores , que facilitan la
observacin.

3.2. ENFOQUE AL MICROSCOPIO : Antes de realizar el enfoque se debe tener en
cuenta lo siguiente .
ILUMINACION Y ENFOQUE : Se consigue utilizando fuentes luminosas
adecuadas, que puede se natural o artificial .Los rayos luminosos son
reflejados por el espejo o por las lamparas de iluminacin hacia el objeto o
preparado. Cuando se observa con grandes aumentos , la luz debe ser
intensa, en cambio cuando se hace con aumentos menores , la luz debe ser
menos intensa, lo que se consigue desplazando en forma vertical al
condensador y graduando la abertura del diafragma.
El enfoque : Se utiliza primero el macrometrico hastaencontrar imagen
(enfoque aproximado) y por ultimo se acciona el tornillo micromtrico que
permite el enfoque perfecto.
Baje completamente la platina del microscopio.
Haciendo uso del mecanismo del revolver, coloque frente a la
preparacin el objeto de menor aumento.
Coloque la preparacin microscpica sobre la platina sujetndola con las
pinzas del carro y centre el preparado haciendo uso de los tornillos del
carro.
Haciendo uso del tornillo macrometrico suba al mximo la preparacin
hasta que encuentre tope sin observar por los oculares.
Observando a travs del ocular, accione el tornillo macrometrico hasta
que visualice la imagen en el campo microscpico.
Una vez enfocada la imagen, afine el enfoque microscpico,haciendo
uso del tornillo micromtrico.
Si desea mayor detalle, cambien de aumento rotando el mecanismo del
revolver a un objetivo que lo proporcione el aumento deseado, corriendo
el enfoque de imagen moviendo el tornillo micromtrico , y graduando la
intensida de la luz con el diafragma.
Despues de haber relizado la observacin , se limpia los lentes con
papel limpia lentes, se coloca el objetivo de menor aumento en posicin
de enfoque, se baja la platima, se desconecta y se tapa. El microscopio
queda listo para la prxima observacin.
Una vez leidas las recomendaciones proceder de la siguiente
manera:

-Recortar una tira de papel milimetrado del tamao de una porta objetos
y dibuja en el centro de la cara posterior(en blanco) una flechitalo mas
pequea posible







-Coloca el papel con la flecha en vertical en el centro microscpico.
















-En foca segn la gua y una vez enfocada, mueve con la mano la tira
del papel hacia arriba.















- Mueve la tira de papel hacia tu derecha




3.3.DETERMINACION DE LOS AUMENTOS:
- Colocar el papel milimetrado con cada uno de los objetivos, a excepcin del
objetivo a inmersin y contar los milmetros que se ven en cada paso . Asi mismo,
calcular los aumentos totales. Rellenar tabla siguiente .