+ H
2
CO
3
Ca (HCO
3
)
2
. Esta dureza por
12%
50%
10%
8%
14%
6%
1
2
3
4
5
6
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
145
carbonato tambin se conoce como dureza temporal debido a que se puede hacer que
precipite por ebullicin prolongada (ver ecuacin) (Sawyer C, 2000).
Figura 4.3 Fuente de dixido de carbono y la solucin de sustancias que causan
Dureza (Sawyer C, 2000).
4.1.3 Valores de pH en las muestras estudiadas: El pH medido en las 52
muestras tomadas, arrojaron valores comprendidos en el intervalo de 6.5 a 7,
estos fueron comparados con los valores establecidos por la Normativa Nacional.
La cual establece que el valor deseable para el pH debe estar comprendido de 6,5
CAPA SUPERIOR DEL SUELO
Zona de intensa accin bacteriana-CO
2
en grandes cantidades
Alguna accin sobre compuestos bsicos CaCO
3
+ H
2
CO
3
Ca(HCO
3
)
2
SUBSUELO
Zona de menor accin bacteriana-CO
2
en pequeas cantidades
Accin continua sobre compuestos bsicos CaCO
3
+ H
2
CO
3
Ca(HCO
3
)
2
PIEDRA CALIZA
Zona de intensa accin qumica
CaCO
3
+ H
2
CO
3
Ca(HCO
3
)
2
MgCO
3
+ H
2
CO
3
Mg(HCO
3
)
2
G
r
i
e
t
a
Cueva
Lluvia
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
146
8,5 de acuerdo con esto, se evidencia que las muestra tomadas cumplen con la
Norma.
Objetivos correspondientes a la fase de factibilidad funcional
2. Disear el mtodo de Screening de muestras para la determinacin del
contenido de benceno, tolueno y etilbenceno en agua potable.
4.2 Sistema de Screening de Muestras
Este sistema fue diseado para la determinacin de compuestos aromticos
totales (benceno tolueno y etilbenceno). La metodologa se baso en identificar y
seleccionar aquellas muestras que contenan el grupo de compuestos aromticos
mencionados dentro del total del grupo muestreado. El sistema estudiado responde
los objetivos de este tipo de metodologa tales como simplificacin y rapidez
(Valcrsel, 2000).
4.2.1 Optimizacin de variables de operacin del Sistema de Screening de Muestras.
Velocidad de Flujo: para optimizar este parmetro se probaron varios tubos de bomba
peristltica de diferentes dimetro internos (0.015, 0.030, 0.045) mm. El tubo de
bomba seleccionado fue de dimetro interno de 0.045 mm el cual da como resultado
una velocidad de flujo de 5.8 mL/min. Este valor permite un tiempo de deteccin de
los compuestos en la muestra muy rpido, para un tiempo de anlisis total de 3
minutos por muestra lo cual se permite analizar 20 muestras/hora.
Volumen de inyeccin: para el estudio de esta variable se ensayaron con tres bucles
de inyeccin de diferentes volmenes (10, 20, 175) l. El bucle de inyeccin de
muestra seleccionado fue de 20 l. Este volumen resulto adecuado para el tamao de
muestra que puede colocarse dentro del espacio de la ultramicro celda (lugar donde
se lleva a cabo el proceso de absorcin de la luz). Este volumen dio lugar a valores de
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
147
respuesta reproducibles. Utilizando un bucle de inyeccin de 10 l se observo una
respuesta de deteccin poco reproducible y cuando se utilizaron bucles con
volmenes superiores como es el caso de 175 l se observaron valores de respuesta
negativos. En ambos casos un bucle de inyeccin muy pequeo y/o un bucle muy
grande con respecto a la capacidad de la ultramicro celda (60 l) dan lugar a valores
de absorbancia poco reproducibles y/o negativos.
Solucin Portadora: esta disolucin tuvo como funcin llevar la muestra a travs del
sistema. Por tanto se debe asegurar que tenga la polaridad adecuada para transportar
los compuestos de inters, en este caso las especies de benceno tolueno y etilbenceno.
Se prepararon diferentes composiciones de la solucin portadora (50/50 acetonitrilo/
agua y 90/10 acetonitrilo/ agua) a fin de seleccionar la mas adecuada. La solucin
portadora utilizada fue de 90/10 acetonitrilo/ agua, ya que cumpla con la condicin
establecida de polaridad. Adems, al aumentar la composicin del acetonitrilo se
garantizo mayor afinidad del medio de las muestras con la solucin portadora.
Rango de longitud de onda: el rango de longitud de onda, se selecciono de acuerdo a
la banda donde se presenta el pico de absorcin en la cual se observan las especies
(benceno tolueno y etilbenceno). Se realizaron ensayos a diferentes rangos de
longitud de onda segn datos bibliogrficos reportados por (Skoog, H. 2002) para
estudio de compuestos aromticos tales como: 190 a 500 nm, 200 a 350 nm, 230 a
260 nm, 240 a 254 nm. Seleccionando el intervalo de longitud de onda de 240 a 254
nm, en la Figura 4.4 se muestra el espectro de absorcin obtenido para el intervalo
antes mencionado. De esta manera se permiti captar la seal de los tres compuestos
aromticos estudiados. Considerando que cada especie reporta un pico de absorcin
mximo a una longitud de onda especfica comprendida dentro del intervalo
seleccionado. A continuacin en la Tabla 4.1 se observan las condiciones
experimentales optimizadas para el Sistema de Screening de compuestos aromticos.
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
148
Figura 4.4 Espectro de absorcin obtenido para la mezcla de compuestos aromticos
estudiados (benceno. tolueno y etilbenceno).
TABLA 4.1
Condiciones experimentales optimizadas para el Sistema de Screening de
Muestras de compuestos aromticos
PARAMETROS OPTIMIZADOS
VALORES
Velocidad de Flujo (ml/min)
5,8
Volumen de inyeccin (l)
20
Solucin portadora (v/v)
90/10, Acetonitrilo/ agua
Rango de longitud de onda (nm)
240 - 254.
4.2.2 Calibracin sistema de Screening de Muestras
Es importante recalcar que los sistemas de screening de muestras incluyen todas
aquellas metodologas analticas rpidas que presentan un mayor nfasis cualitativo
que cuantitativo (Valcrcel, 2000). El mtodo de screening diseado tiene como
objetivo identificar y seleccionar un grupo de muestras de agua en un conjunto de las
220
230
230 240 250
260 270
Wavelength (nm)
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
149
mismas que contengan compuestos aromticos por encima de los valores mximos
permisibles que establece la Normativa Nacional. La Tabla 4.2 muestra las Figuras de
merito del mtodo de Screening desarrollado. El criterio para la seleccin del rango
de determinacin fue acorde con los valores mximos aceptables establecidos por la
Gaceta Oficial Venezolana. El coeficiente de correlacin fue de 0,9929 lo cual indica
que la respuesta del detector guarda proporcionalidad con las diferentes
concentraciones de la mezcla de los compuestos estudiados. El lmite de deteccin
reportado fue 50 L, es importante resaltar que este valor se encuentra por encima del
valor mximo permisible para la especie benceno (10 L). Para compensar esta
limitacin instrumental la muestra es previamente preconcentrada en un factor de 500
veces. Lo cual garantiza que el valor mximo permisible para el compuesto de
benceno va hacer detectado por el mtodo de Screening de muestra propuesto.
La precisin del mtodo tambin fue estudiada. Un valor de desviacin estndar
relativa (RSD) por debajo del 10% indica una precisin aceptable para sistemas de
screening de muestras. Otra caracterstica importante es el nmero de muestras que
pueden procesarse por hora. La velocidad del mtodo queda expresada por este
parmetro (Skoog, H, 2002). El mtodo desarrollado permite procesar 20
muestras/hora, lo cual es equivalente a tres minutos por muestra, este resultado es una
herramienta a tomar en cuenta para la implementacin de un mtodo analtico
confiable, seguro y rpido ya que en un laboratorio de anlisis debe evaluarse la
calidad del agua para el consumo humano, donde la respuesta inmediata es conocer si
el agua evaluada es apta o no apta.
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
150
TABLA 4.2
Figuras de mrito para el sistema de Screening de Muestras en la
determinacin de compuestos aromticos en aguas
destinadas al consumo humano.
CARACTERSTICAS
RESULTADOS
Especies determinadas Compuestos aromticos totales
Ecuacin (*) S = 0,000393C 0,0045
Coeficiente de correlacin 0,9929
R
2
(del test de ANOVA) (%) 98,6
RSD (%) 8,3
Rango de determinacin (g/L) 100 - 500
Desviacin estndar de residual , S
y/x
0,01098
N de muestras / hora 20
Lmite de deteccin (**) (g/L) 50
(*)Variable dependiente: S seal
Variable independiente: C, (g/L) benceno., tolueno y etilbenceno.
(**) Se define como la seal ms tres veces su desviacin estndar
RSD: Desviacin estndar relativa.
3. Disear el mtodo de Cromatografa Lquida con deteccin UV para la
determinacin de benceno, tolueno y etilbenceno en aguas destinadas al
consumo humano.
4.3 Sistema de Cromatografa lquida con deteccin UV
Este sistema consisti en la separacin y cuantificacin de las especies
aromticas estudiadas (benceno. tolueno y etilbenceno). En este proceso los
componentes separados emergen en orden creciente de interaccin con la fase
estacionaria. El componente menos afn a esta fase es el benceno y por lo tanto es la
especie que aparece primero luego el tolueno y por ltimo el retenido ms
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
151
fuertemente etilbenceno. La Figura 4.5 muestra el cromatograma de de las tres
especies estudiadas.
Figura 4.5 Condiciones cromatogrficas: columna Sunfire C
18.
5m de dimetro
de partcula, dimensiones150 mm de longitud por 3 mm de dimetro
interno. Elucin isocrtica usando (50/40/10 acetonitrilo/agua/tetrahidrofurano
v/v). Flujo de 0,4 ml/min. Volumen de inyeccin 15 l Especies
separadas (110 g/L de patrn de mezcla):1.solvente; 2.Benceno; 3.
Tolueno; 4. Etilbenceno.
Tiempo (min)
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a
(
A
U
)
1
2
3
4
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a
Tiempo (min)
1
2
3
4
a b
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
152
4.3.1 Variables de operacin del Sistema de Cromatografa Lquida
Fase mvil, rgimen de separacin y flujo: La fase mvil seleccionada fue (50/40/10
acetonitrilo/agua/tetrahidrofurano v/v). El rgimen de separacin fue del modo
elucin isocrtica con un flujo de 0,4 mL/min. Estas condiciones de cromatograficas
fueron previamente optimizadas por Manganiello y Mendoza, 2006.
Columna cromatografa: se utiliz la columna cromatografica previamente estudiada
en los trabajos de Manganiello y Mendoza, 2006, caracterizada por un relleno de
carbono C
18
con un tamao de partcula de 5 m, la cual arrojaba resultados ptimos
para lograr la separacin de los componentes benceno, tolueno y etilbenceno.
Detector de UV: en el detector se procedi a fijar los parmetros de operacin a
medida que se desarrollaba el proceso de separacin, donde qued establecido para el
anlisis de compuestos aromticos una longitud de onda de 254 nm para observar una
buena definicin de los picos, se utilizo una atenuacin instrumental de de 0,01
AUFS. Para lograr este valor de atenuacin se modifico en varias oportunidades
variando entre (0,01; 0,05; 0,025; 0,050; 0,01; 0,100) AUFS, notando que a menor
atenuacin existe mayor sensibilidad para la deteccin de las tres especies de estudio.
Registrador: Con la finalidad de obtener un pico bien definido en el papel a lo largo
de las inyecciones y tomando como base a la investigacin de Manganiello y
Mendoza, 2006, se procedi a fijar las unidades en el registrador en 40 cm/h.
Volumen de Inyeccin: Se estudiaron diferentes volmenes de inyeccin de la mezcla
de los compuestos aromticos. Estos volmenes oscilaron entre (5, 10, 15 y 20) l.
Siendo el volumen de 15l el ms ventajoso, ya que cuando se inyectaron cantidades
de 5 l.y 10 l se observo poca definicin en la separacin de las tres especies y
cuando se utilizaron volmenes de inyeccin 20 l los picos de las diferentes especies
de estudio se solapaban entre si. Por tanto el valor de 15 l seleccionado permite una
ptima separacin de los picos correspondientes a los compuestos de benceno,
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
153
tolueno y etilbenceno. A continuacin se presentan en la Tabla 4.3 las variables de
operacin del sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV.
TABLA 4.3
Condiciones experimentales optimizadas para el equipo de Cromatografa
Lquida para la determinacin de compuestos aromticos
Atenuacin (AUFS) 0,100
Velocidad del papel (cm/h) 40
Volumen de inyeccin (l) 15
Velocidad de flujo (ml/min)
0,4
Longitud de onda (nm) 254
4.3.2 Calibracin sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV
Las Figuras de merito para el sistema de Cromatografa lquida con deteccin
UV se muestran en la Tabla 4.4. Se prepararon curvas de calibracin para cada
una de las especies de estudio (benceno. tolueno. etilbenceno). El criterio para la
seleccin del rango de determinacin fue acorde con los valores mximos
aceptables establecidos por la Gaceta Oficial Venezolana. Los coeficientes de
correlacin para cada uno de los compuestos estudiados. Benceno, tolueno y
etilbenceno fueron: 0,9987; 0,9912; 0,9991 respectivamente. Estos valores
indican que la respuesta del detector guarda proporcionalidad con las diferentes
concentraciones de la mezcla de los compuestos estudiados. Los lmites de
deteccin reportados para las especies fueron para el benceno 50 L; tolueno
20 L; y etilbenceno 40 L. Es importante resaltar que el valor para el compuesto
de benceno se encuentra por encima del valor mximo permisible (10 L). Para
compensar esta limitacin instrumental la muestra es previamente preconcentrada
en un factor de 500 veces, tal como se comento para el sistema de Screening de
muestras. La precisin del mtodo tambin fue estudiada. Los valores de
desviacin estndar relativa (RSD) para cada especie se encontraron en el
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
154
intervalo de 0.20 a 1.61 por ciento. Estos valores muestran la alta precisin del
mtodo diseado y constituye un parmetro de calidad importante (Skoog, H,
2002). El nmero de muestras que pueden procesarse por hora fueron cinco
muestras, es importante destacar que aunque hay una inversin mayor de tiempo
por muestra esto se traduce a una mayor informacin por muestra evaluada. La
metodologa diseada permite determinar la concentracin de benceno, tolueno y
etilbenceno que estn presentes en cada una de las muestras estudiadas, esto
constituye una ventaja desde el punto de vista ambiental. Porque la especie de
benceno establece el grado de toxicidad de una fuente de agua para consumo
humano, dado que el limite mximo permisible de este compuesto es el mas bajo
(10 g/L).
TABLA 4.4
Figuras de mrito del equipo de Cromatografa Liquida para la determinacin
de benceno, tolueno y etilbenceno.
Especie Benceno Tolueno Etilbenceno
Ecuacin (*) S=0,0485C-1.87 S=0,065C-0,.7 S=0,0495C-1,46
Coeficiente de
correlacin
0,.9987 0,9912 0,9991
RSD (%) 1,61 0,23 0,20
R
2
(del test de ANOVA)
(%)
99,.75 98,.25 99,.83
Rango de determinacin
(g/L)
80-120 80-120 80-120
Desviacin estndar de
residual , S
y/x
0,.0379 0,1369 0,.0325
Lmite de deteccin
(g/L)(**)
50 20 40
(*)Variable dependiente: S: seal
Variable independiente: C, (g/L)
(**) Se define como la seal ms tres veces su desviacin estndar
RSD: Desviacin estndar relativa.
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
155
4. Determinar las concentraciones de benceno, tolueno y etilbenceno en
muestras sintticas y muestras reales.
4.4 Determinacin de muestras sintticas mediante el sistema de Screening de
Muestras.
La aplicabilidad del mtodo de Screening fue inicialmente chequeada utilizando
muestras sintticas que contenan las tres especies de aromticos. Estos resultados se
muestran en la Tabla 4.5.
TABLA 4.5
Concentraciones de las muestras sintticas obtenidas en el sistema de
Screening de Muestras
Muestra
Especies Concentracin
aadida
(benceno, tolueno,
etilbenceno)
(g/L)
Concentracin
encontrada
(benceno, tolueno,
etilbenceno)
(g/L)
Error
(%)
1 Mezcla de
aromticos
100
90,3
-9.7
2 Mezcla de
aromticos
300
319,3 6.4
3 Mezcla de
aromticos
300
312,9 4,3
4 Mezcla de
aromticos
300 308,.7 2,9
5 Mezcla de
aromticos
500
518,1 3.6
6 Mezcla de
aromticos
500
472,3 -5.5
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
156
Los resultados obtenidos en la Tabla 4.5 muestran las diferencias entre las
concentraciones encontradas y aadidas presentando un error promedio de 5,4%. Se
aplic el T Test por Parejas, programa estadstico Statgraphics plus versin 3.1,
observndose que no hay diferencias significativas entre la concentracin aadida y la
concentracin encontrada. El valor del t estadstico calculado fue 0,4193 para la
mezcla de aromticos. Este valor result menor que el valor tabulado (2,015 para 5
grados de libertad y un lmite de confianza de 95%). (Farrant T, 1997). De acuerdo
con el resultado obtenido del anlisis estadstico, el mtodo de Screening de muestra
desarrollado en el presente trabajo puede ser aplicado a las muestras reales de aguas
destinadas al consumo humano. De acuerdo a (Skoog W, 1997) el porcentaje de
error negativo est referido al error relativo, una forma de ser expresado en la qumica
analtica p. 13. (anexo D)
4.4.1 Determinacin de muestras sintticas mediante el sistema de Cromatografa
Liquida con deteccin UV
La aplicabilidad del mtodo de Cromatografa Lquida fue inicialmente
chequeada utilizando muestras sintticas que contenan las tres especies de
aromticos. Estos resultados se muestran en la Tabla 4.6. Los resultados obtenidos
muestran las diferencias entre las concentraciones encontradas y aadidas
presentando un error promedio para el benceno de 0,4%, para el tolueno 1,5% y para
el etilbenceno 0,4%. Se aplic el T Test por Parejas, programa estadstico
Statgraphics plus versin 3.1, observndose que no hay diferencias significativas
entre la concentracin aadida y la concentracin encontrada. Los valores del t
estadstico calculados fueron de 1,218; -0,031 y 1,33 para el benceno, tolueno y
etilbenceno respectivamente. Estos valores son menores que el valor tabulado (1,833
para 9 grados de libertad y un lmite de confianza de 95%). (Farrant T, 1997).De
acuerdo con los resultados obtenidos del anlisis estadstico, el mtodo de
Cromatografa Liquida con deteccin UV propuesto en el presente trabajo para la
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
157
identificacin y determinacin de benceno, tolueno y etilbenceno puede ser aplicado
muestras reales de aguas destinadas al consumo humano.
TABLA 4.6
Concentracin de las muestras sintticas en el equipo de Cromatografa
Liquida con deteccin UV
Muestra
Especies Concentracin
aadida
(g/L)
Concentracin
encontrada
(g/L)
Error (%)
1 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
80
80
80
79,7
80,0
80,0
-0,4%
0%
0%
2 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
80
80
80
79,7
80,0
80,0
-0,4%
0%
0%
3 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
90
90
90
90,1
87,7
90,1
0,1%
-2,6%
0,1%
4 Benceno
Tolueno
etilbenceno
90
90
90
90,1
87,7
90,1
0,1%
-2,6%
0,1%
5 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
100
100
100
90,1
103,1
100,2
0,1%
3,1%
0,2%
6 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
100
100
100
90,1
103,1
100,2
0,1%
3,1%
0,2%
7 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
110
110
110
110,7
110,8
108,3
0,6%
0,7%
-1,5%
8 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
110
110
110
110,7
110,8
110,3
0,6%
0,7%
-1,5%
9 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
120
120
120
121,0
118,5
120,4
0,8%
-1,3%
0,3%
10 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
120
120
120
121,0
118,5
120,4
0,8%
-1,3%
0,3%
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
158
4.4.2 Determinacin de muestras reales aplicando el mtodo de Screening de
Muestras y el mtodo de Cromatografa Lquida con deteccin UV.
En la Tabla 4.7 se muestran los resultados obtenidos para la determinacin de
los compuestos aromticos estudiados (benceno, tolueno y etilbenceno). Los
resultados alcanzados de las 52 muestras analizadas mediante el mtodo de Screening
de Muestras, provenientes del conjunto residencial Bayona Country I, no evidencian
la presencia de hidrocarburos aromticos (mezcla de benceno, tolueno y etilbenceno).
Solo cinco muestran requirieron ampliar el nivel de informacin mediante el mtodo
de Cromatografa Lquida con deteccin UV. Es importante agregar que las posibles
interferencias por parte de otros compuestos que pudieran estar presentes en las aguas
destinadas a consumo humano, fueron estudiadas previamente en los trabajos de
Manganiello y Mendoza, 2006. El uso de las minicolumnas C
18
adems de extraer
estos insumos permiten separar los compuestos de inters de posibles compuestos
obstaculizadores presentes en las aguas analizadas (Waters.2005)
TABLA 4.7
Valores de benceno, tolueno y etilbenceno obtenidos en la determinacin de
compuestos aromticos en muestras de agua destinadas al consumo humano
Mtodos desarrollados
Mtodo de Screening
de muestra.
Mtodo de cromatografa lquida con deteccin UV Muestra
Concentracin de
compuestos
aromticos (benceno,
tolueno y etilbenceno)
(g/L)
Concentracin
Benceno
(g/L)
Concentracin
Tolueno
(g/L)
Concentracin
Etilbenceno
(g/L)
1 ND -------------- ------------- -------------
2 ND ------------- ------------- -------------
3 ND -------------- ------------- -------------
4 ND ------------- ------------- -------------
5 ND ------------- ------------- -------------
6 ND ------------- ------------- -------------
7 ND ------------- ------------- -------------
8 ND ------------- ------------- -------------
9 ND ------------- ------------- -------------
10 ND ------------- ------------- -------------
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
159
Continuacin TABLA 4.7
11 ND ------------- ------------- -------------
12 ND ------------- ------------- -------------
13 ND ------------- ------------- -------------
14 ND ------------- ------------- -------------
15 ND ------------- ------------- -------------
16 Valor a comprobar ------------- 0,05 -------------
17 Valor a comprobar ------------- ------------- 0,15
18 ND ------------- ------------- -------------
19 ND ------------- ------------- -------------
20 ND ------------- ------------- -------------
21 ND ------------- ------------- -------------
22 ND ------------- ------------- -------------
23 ND ------------- ------------- -------------
24 Valor a comprobar ------------- ------------- 0,13
25 ND ------------- ------------- -------------
26 ND ------------- ------------- -------------
27 ND ------------- ------------- -------------
28 ND ------------- ------------- -------------
29 ND ------------- ------------- -------------
30 ND ------------- ------------- -------------
31 ND ------------- ------------- -------------
32 ND ------------- ------------- -------------
33 ND ------------- ------------- -------------
34 Valor a comprobar ------------- ------------- 0,15
35 ND ------------- ------------- -------------
36 ND ------------- ------------- -------------
37 ND ------------- ------------- -------------
38 ND ------------- ------------- -------------
39 Valor a comprobar ------------- ------------- 0,16
40 ND ------------- ------------- -------------
41 ND ------------- ------------- -------------
42 ND ------------- ------------- -------------
43 ND ------------- ------------- -------------
44 ND ------------- ------------- -------------
45 ND ------------- ------------- -------------
46 ND ------------- ------------- -------------
47 ND ------------- ------------- -------------
48 ND ------------- ------------- -------------
49 ND ------------- ------------- -------------
50 ND ------------- ------------- -------------
51 ND ------------- ------------- -------------
52 ND ------------- ------------- -------------
ND: no detectado.
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
160
5. Comparar los resultados obtenidos de la muestra estudiada con los lmites
que establece la Gaceta Oficial de la Republica Bolivariana de Venezuela,
Nmero 36.395.
4.5 Valores de las muestras obtenidos del equipo de Cromatografa Lquida con
deteccin UV.
Una vez evaluadas las muestras en el sistema de Screening. Aquellas muestras
que arrojaron una respuesta positiva se pasaron a una segunda evaluacin mediante el
sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV, de manera de verificar que los
compuestos benceno, tolueno y etilbenceno se encuentran dentro de los lmites
permisibles segn la Gaceta Oficial Venezolana. A continuacin en la Tabla 4.8 se
establecen los resultados de las cinco muestras reales analizadas.
TABLA 4.8
Valores de las muestras obtenidos del equipo de Cromatografa
Lquida con deteccin UV.
Componentes
Orgnicos
Muestra Valores obtenidos por la tcnica
de Cromatografa Liquida.
(g/L)
Valor Mximo
Aceptable.
(g/L)
Benceno
__ ________ 10
Tolueno
1 0,05 700
Etilbenceno
2
3
4
5
0,15
0,13
0,15
0,16
300
Fuente: Normas Sanitarias de Calidad del Agua Potable. Nmero 36.395
Los resultados producidos mediante este mtodo confirman que las
concentraciones de tolueno y etilbenceno presentes en estas muestras se encuentra por
debajo del valor mximo permisible que establece la Gaceta Oficial Venezolana. La
presencia de estos compuestos fue apenas del 9,6% de la muestras. Este hecho puede
ser explicado por mantenimiento individual de las tuberas de cada apartamento
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
161
donde se hayan empleado materiales que puedan contener este tipo de compuestos
(pegamento, disolvente en pinturas, lacas, colas, como agente de limpieza, entre
otros) (ATSDR, 1999).
Los aportes de este trabajo demuestran el importante rol que representan los dos
sistemas de deteccin desarrollados. El sistema de Screening es simple y rpido para
la determinacin de compuestos aromticos (benceno. tolueno y etilbenceno) en
muestras de aguas de consumo humano. Este sistema presenta buena sensibilidad y
precisin y constituye una herramienta muy til cuando se considera un nmero
importante de muestras. El sistema de Screening nos da informacin de la presencia
o no presencia de las especies aromticas antes mencionadas. Si la respuesta es
afirmativa es decir que hay presencia de aromticos, entonces se pasa al otro sistema
de deteccin, Cromatografa Liquida con deteccin UV. el cual nos permite ampliar
el nivel de informacin, discriminando que especies aromticas se encuentran
presentes y sus respectivas concentraciones. Adicionalmente podemos determinar con
esta informacin el grado de toxicidad del sistema, conociendo la especie aromtica y
su concentracin. Tal es el caso del benceno, especie altamente peligrosa por su
probada accin cancerigena sobre seres vivos (Moreno, 2003).
7. Estimar los costos asociados al desarrollo del sistema de Screening y la
tcnica de Cromatografa Liquida con deteccin UV.
A Continuacin se expresan los costos de los materiales y suministros requeridos
para la aplicacin del sistema de Screening de muestra y la tcnica de Cromatografa
Liquida con deteccin UV.
4.6 Costos asociados a la preparacin de patrones y materiales: en este apartado se
contemplan los gastos de soluciones patrones de los compuestos estudiados (benceno,
tolueno y etilbenceno) y solventes. As como tambin micropipetas (accesorios para
la toma de volmenes) y dems insumos necesarios para su preparacin. Estos costos
son propios a los dos sistemas de deteccin desarrollados en el presente trabajo.
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
162
TABLA 4.9
Costo de los solventes utilizados en el sistema de screening y de
Cromatografa Liquida con deteccin UV
TABLA 4.10
Costos establecidos para los materiales requeridos para la preparacin de
patrones para el sistema de Screening y de Cromatografa Liquida con
deteccin UV
Cantidad Caractersticas costo
(Bs.F)
costo
($)
1 micropipeta digital de volumen variable 100 - 1000 l.
autoclavable. socorex (suiza) 825-1000
1.357,00
532,15
1 micropipeta digital de volumen variable 10 - 100 l.
autoclavable socorex (suiza) 822-0100
1.168,00
458,03
1 puntas amarillas 1 - 200 l para micropipetas gilson, 58,00 22,74
1 puntas azules 101 - 1000 l para micropipetas gilson,
socorex.
111,00 43,53
1 Sistema de filtracin y des gasificacin de gases.
(Bomba de vaco + embudo y matraz recolector)
6597,00 2587,06
TOTAL 9.291 3.645,51
Se consider una conversin de 1$ ~2,55Bs.F
Solventes y/o
patrones
Descripcin Distribuidor y N
0
de
referencia
costo
(Bs.F)
costo
($)
Benceno 99.9 % pureza.1 lt Aldrich (71-43-2)C
6
H
6
94,35 37,00
Tolueno 99,9 % pureza.1 lt Aldrich
(108-88-3)C
6
H
5
CH
3
49,22 19,30
Etilbenceno 99.9 % pureza. 1 lt Aldrich
(100-41-4) C
6
H
5
C
2
H
5
67,58 26,50
Metanol 99,9 % pureza, grado
HPLC. 2,5 lt
Sigma -Aldrich
91,00 35,69
Acetonitrilo 99, 9 % pureza,
grado HPLC.2,5 lt
Burdick & Jackon
(CAS 75-05-8)
248,00 97,25
tetrahidrofurano. 99.9 % pureza, grado
HPLC. 4 lt
Mallinckrodt ChromAR
HPLC
482,00
189,02
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
163
4.6.1 Sistema de extraccin y preconcentracin: en este apartado se consideran los
costos asociados a la extraccin de los tres compuestos aromticos de estudio, de las
muestras de agua destinadas al consumo humano. Estos costos al igual que los
calculados para la seccin anterior son propios de los dos mtodos desarrollados
TABLA 4.11
Costos de los materiales necesarios para la realizacin de la extraccin
preconcentracin de las muestras de benceno, tolueno y etilbenceno.
Suministro Caractersticas costo
(Bs.F)
costo
($)
Bomba peristltica modelo: Hp 89052A Hewlett
Packard
4757.03 1865.5
Tubos de bomba silicn de dimetro interno 0.110 mm
132.60 63.77
Mini columnas
(Cartucho SepPaK)
relleno C
18.
cuerpo
de
polietileno
(10 unidades por paquete)
1,074.58 421,40
4.6.2 Sistema de screening: en esta seccin se describen los costos inherentes al
diseo del Sistema de Screening propiamente dicho.
TABLA 4.12
Costos de los equipos utilizados para la aplicacin del sistema
de screening de Muestras.
Equipo Caractersticas costo
(Bs.F)
costo
($)
Ultra micro celda de
flujo,Detector UV
Sistema de registro de
datos
volumen 60 l, Hewlett-packard (5061-
3395)
modelo Hewlett-packard 8452A
9580,35 3.757,00
Bomba peristltica modelo HP 89052A, Hewlett-packard 4757.03 1865.5
Tubos de bomba material resistente a los solventes orgnicos
y dimetro interno es 0,045 mm.
132.60 63.77
Vlvula de inyeccin
Rheodyne modelo 5041, 0,8 mm de paso),
con un lazo de inyeccin de 20 L.
476,72 186,95
TOTAL 14.946,70 5873.22
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
164
4.6.3 Sistema de cromatografa liquida con deteccin UV: en este apartado se
describen los costos asociados al sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV
exclusivamente.
TABLA 4.13
Costo de los equipos utilizados para la aplicacin del sistema de
Cromatografa Liquida con deteccin UV
Equipo Caractersticas costo
(Bs.F)
costo
($)
Sistema de bombeo modelo 510 HPLC, Waters. 42717,60 16.752,00
Sistema de
inyeccin de
muestras
modelo U6K, Waters
4029,.00 1.580,00
Jeringa de
inyeccin
capacidad 25 l, modelo
Hamilton, Waters
79.05 31,00
Registrador
Modelo Perkin Elmer, R50.
3825.00 1500,00
Columna
cromatografica
Modelo Sunfire C
18
, 5m
3825.00 1500.00
Detector UV modelo 2485, Waters. 5069,41 12.927,00
TOTAL
59.545,06 34.290,00
4.6.4 Comparacin de Costos para ambos sistemas de deteccin: Las tablas
4.12 y 4.13 muestran los costos asociados al sistema de Screening de Muestras y al
sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV respectivamente. Donde se
revela que los costos del sistema de Screening con respecto al sistema
Cromatogrfico es aproximadamente 75 % ms econmico. Este resultado confirma
la utilidad de un sistema de Screening previo a un sistema de separacin y
determinacin. El presente trabajo no sugiere la eliminacin del sistema de
Cromatografa sino la implementacin del sistema de screening con la finalidad de
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
165
ahorrar tiempo de anlisis, costos de reactivos y aumentar la vida til de los equipos
utilizados para estos sistemas.
7. Proponer la aplicacin del sistema de Screening y la tcnica de Cromatografa
Liquida con deteccin UV ante los organismos que se encargan del control
de calidad de aguas de consumo humano.
4.7 Propuesta de aplicacin del sistema de Screening y la tcnica de
Cromatografa Liquida con deteccin UV
Una vez evaluadas las caractersticas, el diseo y las condiciones de operacin
del sistema de Screening, es conveniente recalcar las cualidades que lo identifican
tales como: permite anlisis rpidos y sencillos mediante un tiempo de respuesta
breve, lo que implica que puede ser utilizado para la determinacin de un nmero
elevado de muestras, con un considerable ahorro de costos de operacin y capacidad
de respuesta. No obstante, este sistema combinado con el sistema de Cromatografa
Lquida con deteccin UV, constituye un equipo de trabajo a considerar para lograr
ahorro en los suministros utilizados en la aplicacin de la tcnica cromatogrfica, ya
que utilizando previamente la tcnica de Screening se permite medir la presencia o
no de compuestos aromticos totales, para luego ampliar la informacin,
determinando cada especie aromtica con su respectiva concentracin con la tcnica
de Cromatografa Liquida. Adems, en su forma clsica aplicar, slo el anlisis por
Cromatografa Lquida con deteccin UV implica un mayor tiempo durante el
proceso de anlisis y un mayor gasto de insumos que repercuten en la eficacia de los
anlisis, llegando hacer en algunos casos una aplicacin innecesaria de llegarse a
observar ausencia de la captacin de una determinada especie con lo cual se podra
haber evitado su operacin si se hubiese pasado previamente por un Screening de
Muestras. Por tanto, esta metodologa permite ser aplicada en cualquier laboratorio de
calidad de aguas a un costo moderado.
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
166
En este sentido, una revisin llevada cabo de manera local permiti indagar
acerca de cuales son los laboratorios que determinan aromticos y bajo que tcnica lo
realizan en el Estado Carabobo, para lo cual se contacto al: Laboratorio
Anmiproquim, donde se informo que no miden aromticos sino que trasladan las
muestras a la Universidad simn Bolvar. Adems se informo que Hidrocentro, en su
sede de la Planta de tratamiento Alejo Zuloaga no mide aromticos. Segn afirmacin
de L. Medina (entrevista personal, marzo, 2008).
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia
CAPTULO V
CONCLUSIONES
El diseo estadstico determin el nmero de muestras analizadas (52
apartamentos) para determinar la posible contaminacin por compuestos
aromticos.
El sistema de Screening de muestras fue diseado para reportar presencia
y/o ausencia de compuestos aromticos totales. Permiti evaluar 20
muestras /h con un gasto mnimo de solvente y reactivos.
Del total de muestras evaluadas por el Sistema de Screening slo 5 resultaron
positivas, stas fueron analizadas por el sistema de Cromatografa Lquida,
cuyas concentraciones se hallaron por debajo de los valores mximos
permisibles que establece la Gaceta Oficial para las especies detectadas de
tolueno y etilbenceno.
El agua proveniente del pozo de abastecimiento de la zona de estudio, no
presenta contaminacin por compuestos aromticos del tipo benceno, tolueno
y etilbenceno.
Los sistemas diseados, aplicados en forma secuencial aportan a los
laboratorios de rutina donde se procesan gran cantidad de muestras de agua,
rapidez, ahorro del gasto de reactivo, disminucin de mano de obra,
simplificacin del anlisis. Adems da respuesta si una determinada zona
presenta contaminacin o no permitiendo establecer el grado de
contaminacin al conocer las especies que se encuentran presentes.
.Capitulo V. Conclusiones y recomendaciones Aleyda L. Montanez Palencia
115
Los costos del sistema de Screening con respecto al sistema Cromatogrfico
es aproximadamente 75% ms econmico, constituyendo un factor indicativo
de justificacin para su implementacin en los laboratorios de alto
desempeo.
En base a lo expuesto anteriormente, es factible la implementacin de los
sistemas propuestos en la presente investigacin, por parte de los organismos
que se encargan de la vigilancia de la calidad del agua de consumo.
Es importante recalcar que los resultados obtenidos durante la investigacin
tienen un comportamiento temporoespacial, es decir, la ausencia de
compuestos aromticos particularmente benceno, tolueno y etilbenceno en el
agua potable que consumen los habitantes del conjunto residencial, constituye
un hecho en la actualidad, pero no garantiza que sean perdurables en el
tiempo, sobretodo si el pozo de abastecimiento no recibe el tratamiento
adecuado.
.Capitulo V. Conclusiones y recomendaciones Aleyda L. Montanez Palencia
116
RECOMENDACIONES
Para prever la contaminacin de agua subterrnea y superficial se debe
concientizar a la poblacin en lo concerniente a la prohibicin de descargas en
alcantarillados sanitarios y pluviales cercanos a pozos de abastecimientos.
Se sugiere el acoplamiento del sistema de Screening de muestras al sistema de
Cromatografa Lquida con deteccin UV, como una excelente alternativa que
permita reducir el tiempo de anlisis al momento de procesar un nmero
significativo de muestras.
El anlisis de las aguas para consumo humano es vital para el desarrollo de la
poblacin, por tanto se requiere agotar recursos tcnicos, econmicos y
humanos, con el objeto de ofrecer agua de ptima calidad.
En referencia al conjunto residencial Bayona country I y como bien lo
establece la Gaceta Oficial Nmero 36.395 deben realizarse anlisis
peridicos a esta agua con el propsito de brindar bienestar a esta comunidad.
Bibliografa Aleyda L. Montaez Palencia
118 118
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125
ANEXO A
Sistema de tuberas pertenecientes al conjunto residencial
Bayona country I
Bibliografa Aleyda L. Montaez Palencia
126
Anexo B fotos de la Avenida valencia
En las fotos se muestran diferentes vistas de la Avenida Valencia donde se puede
observar la presencia de talleres mecnicos a lo largo de la va.
Bibliografa Aleyda L. Montaez Palencia
127
Bibliografa Aleyda L. Montaez Palencia
128
Anexo D
Error relativo expresado en las Tablas del captulo IV.
El error relativo E
r
, viene dado por la expresin:
100 *
Xv
Xv Xi
Er
=
Donde:
Xi: representa el valor menor.
Xv: representa el valor mayor.
El error relativo tambin se puede expresar en tantos por mil (%). As el error relativo
de la medida de los datos Tabla 4.5 y Tabla 4.6 se puede expresar como 9,7.
(Skoog W,1997
Bibliografa Aleyda L. Montaez Palencia
129
Bibliografa Aleyda L. Montaez Palencia
130
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131