La biorremediacin es el uso de seres vivos para restaurar ambientes contaminados. Es un concepto que no se debe de confundir con depuracin. La depuracin es la eliminacin, ya sea por mtodos fsico/qumicos o biolgicos, de un contaminante antes de que ste alcance el medio ambiente. Cuando la contaminacin ya se ha producido, se precisa restaurar el ecosistema contaminado, para lo que se pueden utilizar diversas estrategias. Una de ellas es la biorremediacin. Las primeras observaciones de biorremediacinfueron con el petrleo, despus de algunos organoclorados y organofosforados; se advirtique los microorganismos no slo eran patgenos, sino que adems eran capaces de absorber compuestos orgnicos, algunos naturales, otros sintticos, y degradarlos, lo que constituye el objetivo de la biorremediacin. ORIGENES Uno de los muchos reporteros enviados a Alaska meditaba sobre el dao provocado por el vertido del Exxon Valdez . Pensaba que el petrleo, sustancia natural, no provocara un dao ambiental irreparable y tal como se ha ido observando durante dcadas, el crudo despus de un largo tiempo es diluido y asimilado por el medio ambiente. De esta intrnseca capacidad de la naturaleza para superar algunos desequilibrios en el ecosistema, surge la biorremediacin, como una tecnologa que usa un elemento biolgico, en la mayora de los casos microorganismos, para eliminar Contaminantes de un lugar, sea este suelo, sedimento, fango o mar. Esta tecnologa se ha transformado en la colaboradora directa de la naturaleza, que no siempre es capaz de superar por s sola grandes desequilibrios. La biorremediacin le da una ayuda al medio ambiente en la mejora de los ecosistemas daados, acelerando dichos procesos naturales. Lo que hacen los microorganismos es degradar los desechos en productos menos txicos, adems de concentrar e inmovilizar sustancias txicas, metales pesados; minimizar desechos industriales y rehabilitar reas afectadas con diversos contaminantes. La biorremediacin surge como una rama de la biotecnologa que busca resolver los problemas de contaminacin mediante el diseo de microorganismos capaces de degradar compuestos que provocan desequilibrios en el medio ambiente. Es similar a la biotecnologa, en general sus tcnicas son especficas para casos particulares, porque dependen directamente de las condiciones del ecosistema a recuperar. A veces, biorremediarun ambiente contaminado puede requerir la elaboracin de un Microorganismo genticamente modificado que sea eficiente slo para ese caso. Un evento ms sencillo de biorremediacin puede ser el del petrleo. Los derrames de crudo provocan un desequilibrio al aumentar la cantidad de carbono, lo que descompensa los niveles de nitrgeno y fosfato, en esas condiciones metablicamente no se puede consumir el carbono. La Biorremediacin de petrleo consiste en verter los mismos nutrientes que estn descompensados, fosfato, nitrgeno y dejar que los microorganismos que ya estn presentes hagan su trabajo.
Muchos tratamientos biotecnolgicos de contaminantes son considerados biorremediacin, sin embargo algunos autores diferencian entre ambos procesos. La biotecnologa es tecnologa que usa elementos biolgicos, sea un organismo o una enzima. En estricto rigor un sistema de tratamiento de efluentes o un sistema de compostaje no son biorremediacin, son tratamientos biolgicos o mixtos para evitar la contaminacin, en cambio la biorremediacin se utiliza para revertir un dao. Tanto el tratamiento de residuos como la biorremediacin usan microorganismos, pero lo distintivo de la biorremediacin es la aplicacin de una tecnologa a posteriori, una vez que se ha producido el dao ecolgico. Las primeras observaciones de biorremediacin fueron con el petrleo, despus de algunos organoclorados y organofosforados; se advirti que los microorganismos no slo eran patgenos, sino que adems eran capaces de absorber compuestos orgnicos, algunos naturales, otros sintticos, y degradarlos, lo que constituye el objetivo de la biorremediacin. Todos los contaminantes poseen caractersticas que los hacen capaces de perturbar el medio ambiente y provocar dao a la salud humana y del planeta. Crear estrategias de biorremediacin para eliminarlos todos es un camino que se est iniciando para esta rama de la biotecnologa. Existen grupos de compuestos especialmente peligrosos para el hombre en los que la biorremediacin ha logrado importantes avances. Uno de estos grupos son los organoclorados, compuestos orgnicos no naturales que tienen cloro en su molcula y son capaces de intervenir en los procesos celulares normales, entre otros la reproduccin. Son relativamente estables y omnipresentes en el ambiente. Surgen como subproductos de procesos industriales y eventos naturales como incendios forestales, erupciones volcnicas, incineradores de desperdicios slidos, chimeneas, motores, control de plagas, etc. Tambin pueden detectarse en la mayora de los alimentos, como pollos, carnes rojas, pescados, productos lcteos, aceites vegetales y verduras.
Qu organismos participan? Se pueden emplear diversos organismos en los procesos de biorremediacin. Los ms usados son los microorganismos (tanto bacterias, como algas y hongos) y las plantas (en procesos llamados fitorremediacin), pero tambin se pueden utilizar otros seres vivos tales como los nemtodos (vermiremediacin). Entre los microorganismos destacan especialmente las bacterias, los seres vivos con mayor capacidad metablica del planeta. Las bacterias pueden degradar prcticamente cualquier sustancia orgnica. Si la sustancia se degrada completamente se habla de mineralizacin; este es el proceso ideal, pero no siempre ocurre. Algunas sustancias no son degradadas sino transformadas en otras (biotransformacin). La biotransformacin puede ser peligrosa, ya que la nueva sustancia formada puede ser tan nociva o ms que la de partida. Finalmente hay sustancias que no son degradadas y se las denomina recalcitrantes. stas se acumulan durante mucho en el medio ambiente, especialmente si adems son resistentes a procesos fsico/qumicos como la radiacin ultravioleta o la oxidacin. Las bacterias adems pueden eliminar los contaminantes en ambientes donde hay oxgeno (llamados aerbicos), pero tambin en ambientes sin oxgeno (llamados anaerbicos), ya que pueden respirar otras sustancias diferentes al oxgeno (aceptores de electrones), como por ejemplo el nitrato, el sulfato, el hierro (III), el manganeso, el selenio y un largo etctera. Qu tipos de contaminantes se pueden eliminar por biorremediacin? Todos aquellos contaminantes que puedan ser degradados o transformados por los seres vivos son susceptibles de ser eliminados mediante procesos de biorremediacin. Los compuestos orgnicos suelen ser degradados total o parcialmente y eliminados por completo del ecosistema. Por ejemplo, compuestos contaminantes tales como el tolueno, el fenol o los polibifenilos clorados (PCBs) pueden ser utilizados como fuente de carbono por bacterias, tanto en condiciones aerbicas como anaerbicas. Bacterias de los gneros Pseudomonas, Ralstonia, Burkholderia o Mycobacterium pueden eliminar hidrocarburos aromticos como el tolueno o el naftaleno, pesticidas como las atrazinas, aditivos de la gasolina como el tricloruro de etilo o sustancias venenosas como el cianuro potsico, tanto de ambientes slidos (suelos) como lquidos (rios y mares). Pero, adems muchas bacterias son capaces de modificar sustancias qumicas peligrosas, transformndolas en otras menos txicas. As, algunas bacterias pueden reducir la biodisponibilidad (hacerla menos accesible y por tanto menos txica) de metales pesados tales como el mercurio, el arsnico, el cromo, el cadmio, el zinc o el cobre. Los mecanismos por los cuales las bacterias son capaces de degradar o transformar estas sustancias sern captulo de un prximo artculo.
Figura: Ejemplo del empleo de bacterias para la eliminacin de un contaminantes en capas profundas del suelo. En este ejemplo las sustancias contaminantes estn haciendo peligrar un acufero. Para su eliminacin se inyecta en el suelo nutrientes y aceptores de electrones que favorecen el crecimiento de microoganismos que acabarn eliminando la sustancia txica. Qu utilidad tienen los microorganismos usados en biorremediacin? El estudio de los procesos de biorremediacin tiene un gran inters, y no slo por las ventajas que posee la restauracin de un ecosistema. Las bacterias responsables de la biorremediacin, los procesos bioqumicos que llevan a las reacciones de degradacin, as como los genes que codifican las enzimas responsables de estos procesos se estn analizando tanto para un conocimiento desde un punto de vista bsico como aplicado. Conocer las protenas responsables de estos procesos, as como los genes que codifican stas, como han evolucionado y se han dispersado en los diferentes ecosistemas, permite conocer mejor la evolucin ligada a procesos geoqumicos de nuestro planeta. Adems ese conocimiento ha servido y est sirviendo para desarrollar herramientas de inters biotecnolgico como por ejemplo, el uso de las bacterias, o parte de ellas en procesos de biominera (extraccin de metales de inters usando bacterias), de bioproduccin de sustancias de inters tales como bioplsticos o biopolmeros, energa (electricidad), sustancias de inters farmacolgico, o enzimas que realizan procesos qumicos de una forma ms eficiente y ms respetuosa con el medio ambiente que la industria qumica. Estas bacterias, o parte de ellas tambin pueden ser usadas para desarrollar biosensores, sistemas de deteccin de sustancias ms eficientes y rpidos que los tpicos anlisis qumicos. Todas estas aplicaciones slo se han podido obtener despus de un profundo conocimiento de la biologa molecular que subyace en los procesos de biorremediacin. Pero eso ser otro tema. BIORREMEDIACIN DE PCBS Seeger, investigador chileno que trabaja con PCB, en cooperacin con un grupo de investigadores en Alemania, han generado bacterias recombinantes capaces de mineralizar los PCB, han obtenido enzimas generadas por ingeniera gentica que son ms eficientes con algunos PCB, para lo que estn trabajando con la bacteria. Estos estudios se han realizado a nivel de laboratorio y no han sido aplicados en problemas ambientales concretos, pero todo el conocimiento generado se ha enviado a Alemania, donde ha sido utilizado experimentalmente con gran xito para biorremediar sitios contaminados. Biorremediacin de Aceites usados bajo condiciones de laboratorio En la actualidad la biorremediacin es una de las tcnicas que ms se estn usando para tratar de solucionar los graves problemas de deterioro ambiental que presentan un gran nmero de compuestos en el agua. El problema empieza en las grandes descargas que se depositan en los numerosos drenajes que componen una ciudad, pues su destino final siempre son los diferentes Ros, Lagunas o Mares que se encuentren cerca del centro poblacional. Uno de estos contaminantes txicos que se vierten al drenaje son los aceites usados (los que usan los coches), desconocindose realmente los enormes volmenes que se tiran. Existen muchas investigaciones dedicadas a demostrar la degradacin de aceites por medio de bacterias, por lo que se inicio un experimento; en el Laboratorio de Acuacultura y Manejo Ambiental de Bioshabitat.com, con el fin de valorar el efecto que ejercen las bacterias para degradar los aceites gastados a partir de la cuantificacin de biomasa. Los resultados obtenidos indican que en un lapso de tiempo corto, s existe produccin de biomasa (crecimiento del microorganismo) en presencia de aceite en el agua. El floculante se hizo presente; en pequeas cantidades, al octavo da de la investigacin y ya para el quinceavo da se observaba mucha materia orgnica en suspensin. Como dato importante se pudo observar que a partir del octavo da de la investigacin, el olor de aceite gastado; que se haca presente en todo el laboratorio, fue disminuyendo y al final desapareciendo. BIORREMEDIACIN DE HIDROCARBUROS PETROLEO Y SUS DERIVADOS UN PROYECTO DE BIORREMEDIACIN para eliminar DIESEL, POR CIAPR (2000) Empresa dedicada a la eliminacin de contaminantes en suelos y acuferos, a travs de la biorremediacin. El objetivo principal fue la eliminacin de contaminantes utilizando tcnicas innovadoras que resultaran ambientalmente seguras. La Obra Sobresaliente del ao 2000 del Colegio de Ingenieros y Agrimensores de PR (CIAPR). En el proyecto se efectu una biorremediacin del subsuelo y del acufero afectados con combustible diesel. Se realizaron la evaluacin del lugar contaminado y las actividades de remediacin en la Planta Generadora de la A.E.E. Estudios posteriores indicaron que el producto txico se filtr bajo los muros de contencin del dique y se expandi al subsuelo, incluyendo el agua subterrnea. Las acciones remediativas que se llevaron a cabo fueron las siguientes: Recuperacin de producto libre o diesel del agua subterrnea A travs de este proceso se separa el agua del contaminante que se encuentra flotando en la superficie del agua subterrnea.Este sistema no requiere el uso de maquinaria especial o electricidad y recupera hasta 50 galones de agua diarios. Este sistema de recuperacin fue instalado en todos los pozos donde haba presencia de diesel flotando en el agua subterrnea. Una vez el producto es almacenado en el tanque, la A.E.E., coordina su retirada y almacenamiento. Biorremediacin In-Situ en suelos contaminados Los mecanismos que rigen la evolucin de los plaguicidas en el suelo son diversos.Descomposicin qumica, que tiene lugar por procesos de oxidacin, reduccin, hidroxilacin, dealquilacin, rotura de anillos, hidrlisis e hidratacin.Descomposicin fotoqumica, que se produce por efecto del espectro de luz ultravioleta de la luz solar. Las fuentes de luz y su intensidad regulan el grado de descomposicin de un compuesto. Descomposicin microbiana, la accin de los microorganismos del suelo sobre los plaguicidas es probablemente el mecanismo de descomposicin ms importante. Los microorganismos del suelo, bacterias, algas y hongos, obtienen alimento y energa para su crecimiento por descomposicin de estos compuestos orgnicos sobre todo cuando carecen de otras fuentes. Descomposicin por las plantas y organismos, como consecuencia de los procesos metablicos que tienen lugar en las plantas. PROYECTO PILOTO CIAPR El proyecto consisti en la construccin de cuatro pozos de inyeccin en un lugar contaminado.Se prepararon e inyectaron 50 galones de una solucin de nutrientes al pozo.Las muestras de agua se recolectaron a diversos niv eles de profundidad para observar la dilucin de nutrientes en el agua subterrnea antes y despus de la inyeccin. Se analizaron las muestras del agua subterrnea en busca de la presencia de estos nutrientes. Basados en los resultados de la prueba piloto, se realiz una inyeccin de nutrientes a gran escala. Se utilizaron nueve pozos como centros de monitoreo durante todo el proyecto. El monitoreo consisti en recolectar muestras del agua subterrnea de los pozos sealados. Las muestras fueron recolectadas a diversos niveles de profundidad (10, 15 y 20 pies). Las mismas fueron analizadas para determinar las concentraciones de pH, conductividad, nitratos, nitritos, amonio, fosfato, hierro y microorganismos heterotrficos.
Biorremediacin In-Situ del agua subterrnea contaminada 2.- Sistema de Bioventilacin La bioventilacin es una biorremediacin in-situ que utiliza microorganismos endgenos para degradar contaminantes tanto del subsuelo como de las aguas subterrneas contaminadas. Mediante esta tcnica, la actividad biolgica de la bacteria endgena se estimula por medio de la inyeccin de aire a travs de los p ozos de ventilacin. Estos se instalan en varios puntos del rea contaminada, y a travs de ellos se inyectan nutrientes y soluciones especficas preparadas en l aboratorio. Se cumplieron dos condiciones para aplicar el siste ma de bioventilacin como tecnologa remediativa en este lugar (AEE). En prim er lugar se determin que era posible la produccin y provisin de oxgeno a trav s de la zona vadosa del subsuelo. Luego se demostr que los microorganismos endgenos del lugar tenan la capacidad de utilizar el oxgeno para bio degradar la contaminacin de hidrocarburos en una proporcin aceptable. Adems, fue necesario determinar la conductividad hidrulica y la permeabilidad intrns eca para saber cun efectivo sera el sistema de bioventilacin en el lugar afect ado. UN PROYECTO DE BIORREMEDIACIN DE PETROLEO en suelos BiorremediacinPara poder acelerar el proceso biorremediativo, se desarroll un consorcio de microorganismos degradadores de diesel bajo condiciones anaerbicas. Se cultivaron bacterias endgenas desnitrificadoras del lugar contaminado. Estas bacterias fueron enrique cidas con nutrientes en una solucin bioactiva, la cual f ue inyectada a una profundidad de 14 y 18 pies en los pozos monitoreados. BIOALIMENTACIN Los derrames de crudo provocan un desequilibrio al aumentar la cantidad de carbono, lo que descompensa los niveles de nitrgeno y fosfato, en esas condiciones metablicamente no se p uede consumir el carbono. La biorremediacin de petrleo consiste en verter los mismos nutrientes que estn descompensados, fosfato , nitrgeno, en algunos casos biodesinfectantes, y dejar que los mi croorganismos que ya estn presentes hagan su trabajo, para rec upera el equilibrio y regenerar el ambiente. BiorremediacinLa complejidad tcnica del proyecto se present cuando se encontr contaminacin en suelos saturados . La biorremediacin de hidrocarburos en suelos saturados usualmente est limitada por la disponibilidad de oxgeno. En este caso se pueden utilizar otros receptores alternativos de electrones en sustitucin del oxgeno para la degradacin de l os hidrocarburos, implementndose el uso de sistemas anaerobios. Se examin la efectividad de otros nutrientes para estimular la respiracin anaerobia y lograr la remediacin de su elos contaminados con hidrocarburos. BIORREMEDIACIN de SUELOS SATURADOS DE DIESEL BiorremediacinEl monitoreo fue efectuado cada dos semanas para realizar los anlisis qumicos de las muestras de agua. Esta estrategia de bioestimular la degradacin bajo condiciones favorables a la respiracin anaerobia fue muy til. Los resultados de reduccin de diesel unidos a la evidencia de bioestimulacin anaerobia fueron consistentes con el estudio piloto. Esta alternativa, que requiere de una implementacin cuidadosa, es muy prometedora para la restauracin. Se realiz adems una bioaumentacin, que consisti en la integracin de varios microorganismos para aumentar o incrementar la actividad biodegradativa en ese medio.
EJEMPLO DE CASOS : Como causa del gran deterioro ambiental ocasionado por el desarrollo de algunos procesos industriales, tales como la minera y la extraccin, refinamiento y transporte del petrleo, es imprescindible la aplicacin de tcnicas que disminuyan la concentracin o toxicidad de los contaminantes producidos y/o derramados en los procesos antes mencionados y que al mismo tiempo sean econmicamente aplicables. La contaminacin de los suelos por hidrocarburos del petrleo es un problema comn en la industria minera mexicana; para el caso de las minas que tengan ms de 15 aos de operacin se estima que, por lo menos, existen alrededor de 500 m2 de suelo contaminado por cada una. Para resolver esta problemtica se dise un proceso de biorremediacin econmico, que utiliza los microorganismos nativos a travs del uso de consorcios bacterianos y fngicos, que permita la eliminacin de hidrocarburos del suelo de una manera eficiente. Los suelos contaminados con hidrocarburos del petrleo de una mina localizada en la Sierra del Estado de Durango, se han utilizado como modelo para el desarrollo del proceso de biorremediacin. Impacto Socioeconmico A travs de la utilizacin de un sistema microbiano nativo se logr eliminar o biodegradar en un periodo de tratamiento de 15 das hasta el 98.5% del contenido de hidrocarburos del petrleo de un suelo contaminado de una mina localizada en la sierra del estado de Durango (utilizada como modelo). Este logro permite que esos suelos cumplan ya con la NORMA OFICIAL MEXICANA NOM- 138-SEMARNAT/SS-2003, LMITES MXIMOS PERMISIBLES DE HIDROCARBUROS EN SUELOS Y LAS ESPECIFICACIONES PARA SU CARACTERIZACIN Y REMEDIACIN. Adems del xito en la recuperacin del suelo, el estudio de factibilidad tcnico-econmico indica un costo relativamente bajo de 35 dlares/tonelada tratada, lo que da como resultado un efectivo proceso de biorremediacin, replicable en otras zonas mineras del pas. Las cepas aisladas y caracterizadas representan una herramienta biolgica considerable dada su capacidad de utilizar diesel como nica fuente de carbono. Las cepas aisladas e identificadas como Flavobacterium sp. y Aspergillus sp forman parte de la coleccin microbiana institucional y tienen una potencial ventaja competitiva, en comparacin a otros microorganismos, debido a que puede tolerar altos niveles de toxicidad de los principales contaminantes. El impacto socioeconmico del proyecto est sustentado en la biorremediacin de suelos y en la sustentabilidad de la actividad minera en Mxico, que representa una considerable cantidad de empleos e importancia econmica en el pas.
Figura 3. Degradacin de hidrocarburos totales del petrleo (HTP, mg/Kg) en suelos, en la pila de bioremediacin, a un flujo de 250 mL/h de la suspensin microbiana, en un periodo de 15 das.
Figura 2. Suspensin microbiana (consorcio microbiano) (izq) y pileta de bioremediacin escala piloto de suelos contaminados (der.).