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Hctor E.

Zaixso
UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA PATAGONIA SAN JUAN BOSCO
FACULTAD DE HUMANIDADES Y CIENCIAS SOCIALES
VERSIN 1.0
2002
MANUAL DE CAMPO
PARA EL MUESTREO
DEL BENTOS
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CONTENIDO
1. INTRODUCCION........................................................................................................... 5
2. CONSIDERACIONES GENERALES............................................................................ 7
2.1 Preparando la campaa............................................................................................... 7
2.2 Ubicacin del sitio de muestreo................................................................................. 9
2.3 Notas de campo y observaciones............................................................................ 10
3. CONTROLES DE CALIDAD EN EL MUESTREO.........................................................14
3.1 Replicacin de muestras......................................................................................... 14
3.2 Controles de contaminacin y deterioro................................................................ 15
4. EQUIPOS DE MUESTREO........................................................................................ 18
4.1. Cuadrados de muestreo...................................................................................... 19
4.2. Dragas................................................................................................................... 20
4.3. Muestreadores de tubo o perforacin (core samplers)................................ 28
4.4. Rastras.................................................................................................................. 33
4.5. Sorbonas.............................................................................................................. 36
4.6. Equipos de muestreo en ambientes lticos...................................................... 38
4.7. Buceo.................................................................................................................... 41
4.8. Gua para la eleccin de un equipo de muestreo............................................ 43
4.9. Equipos para el tamizado a bordo de muestras biolgicas............................ 45
4.10. Otros equipos para el muestreo del bentos...................................................... 47
5. PROTOCOLOS GENERALES................................................................................... 48
5.1 Muestreo en ambientes intermareales................................................................... 49
5.2 Muestreo en aguas someras................................................................................... 52
3
5.3 Muestreo en aguas profundas................................................................................ 54
5.4 Muestreo de ros y arroyos...................................................................................... 56
5.5 Muestreo de aguas receptoras de efluentes.......................................................... 58
6. AGUA ADYACENTE, MEDICIONES DE CAMPO Y MUESTREOS ESPECIFICOS.
6.1 El muestreo del agua adyacente............................................................................. 59
6.2 Mediciones de campo.............................................................................................. 70
6.2.1 Mareas
6.2.2 Nivel y Profundidad
6.2.3 Temperatura del agua
6.2.4 Temperatura del sustrato
6.2.5 Oxgeno disuelto
6.2.6 Luz (Irradiancia)
6.2.7 Conductividad/salinidad
6.2.8 pH
6.2.9 Potencial de xido-reduccin
6.2 10 Turbidez
6.2.11 Movimientos del agua
6.2.12 Inclinacin del sustrato
6.2.13 Penetrabilidad del sustrato
6.2.14 Profundidad de la tabla de agua
6.3 Muestreo de parmetros fsico-qumicos............................................................ 117
6.3.1 Qumica general del agua adyacente (nitratos, nitritos, fosfatos, amonio y silicatos)
6.3.2 Tamao de partculas (granulometra)
6.3.3 Carbonato de calcio y materia orgnica
6.3.4 Metales pesados
6.3.5 Hidrocarburos
6.3.6 Otros anlisis en sedimentos
6.3.7 Caracterizacin de los sustratos duros
4
6.4 Muestreos biolgicos generales........................................................................... 128
6.4.1 Bacterias.
6.4.2 Macroalgas y macrofitas.
6.4.3 Perifiton.
6.4.4 Meiozoobentos y microzoobentos.
6.4.5 Macrozoobentos (macroinvertebrados).
6.4.6 Peces.
6.5 Muestreos biolgicos en estudios de composicin y contaminacin.............. 155
6.5.1 Algas y macrofitas.
6.5.2 Macrozoobentos (macroinvertebrados).
6.5.3 Peces.
7. EMBALAJE................................................................................................................ 162
8. BIBLIOGRAFIA SUMARIA........................................................................................ 164
APENDICE 1: LISTADO DE CAMPO........................................................................... 170
APENDICE 2: EJEMPLOS DE PLANILLAS PARA SU USO EN CAMPO.................... 175
APENDICE 3: TIPOS DE ANALISIS, TIPOS DE RECIPIENTES, MODO DE
PRESERVACIN Y TIEMPO MAXIMO DE CONSERVACIN PARA
SEDIMENTOS Y MUESTRAS BIOLOGICAS............................................... 179
APENDICE 4: GRANULOMETRIA................................................................................. 181
APENDICE 5: FIJADORES Y CONSERVADORES ..................................................... 186
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1. INTRODUCCION
Este manual de campo cubre los requerimientos mnimos para asegurar la calidad y
consistencia en los aspectos de campo relacionados con el muestreo del bentos en
ambientes marinos y de agua dulce. Se debe tener en cuenta que la separacin de los
muestreos bentnicos de los otros tipos de muestreo que pueden llevarse a cabo en el
campo (por ejemplo el muestreo de la columna de agua) es artificial, ya que en general
todos ellos pueden llevarse a cabo en forma simultnea. En el contexto de este manual la
separacin efectuada tiene simplemente un objeto didctico.
Los principales aspectos del muestreo del bentos son: a, La toma de muestras
representativas que cumplan con los requerimientos y objetivos de la planificacin
general del muestreo. b, La prevencin del deterioro y contaminacin de las muestras
antes de su anlisis.
Los procedimientos esbozados en este manual estn orientados especficamente a los
trabajos prcticos de la materia Ecologa Acutica de la carrera de la Licenciatura en
Gestin Ambiental (Facultad de Humanidades y Ciencias Sociales de la Universidad
Nacional de la Patagonia S. J. Bosco) y siendo sta su primer versin, queda sujeta a
cambios en el futuro. El manual puede asimismo ser utilizado, con los recaudos del caso,
por empleados de oficinas ambientales estatales y municipales, debindose tomar nota
que el manual no ha sido preparado para la toma de muestras que sirvan como evidencia
legal.
El seguimiento de los protocolos de trabajo propuestos pueden ayudar a la toma de
muestras representativas y confiables en el trabajo de campo. Estos protocolos
representan en general a aquellos mtodos considerados como aceptables hoy en da, si
bien bajo circunstancias excepcionales o con el desarrollo de nuevos mtodos o equipos,
pueden quedar sujetos a modificaciones o reemplazos.
No se han intentado incluir aquellos aspectos relacionados tanto con el diseo del
muestreo ni con las tcnicas de posmuestreo (submuestreos, determinaciones
6
taxonmicas, de biomasa, etc.) las cuales sern objeto de manuales separados o son el
rea de competencia de otros profesionales.
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2. CONSIDERACIONES GENERALES.
2.1 Preparando la campaa.
A pesar de la poca importancia que los poco expertos le dan, es esencial el alistamiento
preliminar de equipos e insumos que van a ser utilizados en la campaa. En general los
descuidos slo son advertidos una vez que se llega al lugar de trabajo, cuando son
difciles o imposibles de subsanar.
La va ms efectiva de preparar un viaje es el armado de un listado diseado para cumplir
con los requerimientos del proyecto en cuestin. Este listado debera identificar como
mnimo las siguientes necesidades:
- Tipo y nmero de recipientes, bolsas o botellas (etiquetados o con etiquetas
preparadas) a utilizar durante el muestreo.
- Heladeras de telgopor con los correspondientes ice packs o equivalentes y/o
heladeras elctricas porttiles para el transporte de los recipientes anteriores, tanto
llenos como vacos.
- Equipo de muestreo tales como botellas de muestreo Van Dorn, redes de plancton y
para peces, etc.
- Fijadores y preservativos.
- Libretas y tiles de escritura.
- Planillas de muestreo (de los tipos que sean necesarios).
- Equipos personales (trajes de agua, botas, abrigos, etc.)
- Equipo de primeros auxilios y otros equipos de supervivencia (chalecos salvavidas,
equipo de comunicaciones, etc.).
- Cmara fotogrfica o de video.
Un procedimiento til y general es destinar para el almacenamiento y transporte del
equipo de trabajo, o al menos una parte de los anteriores elementos, de una o ms cajas
plsticas, las cuales deberan ser de preferencia flotantes. Para botellas y otros
8
recipientes utilizar heladeras de telgopor o equivalentes, preferiblemente revestidas, para
aumentar su durabilidad.
Ver el Apndice 1 de este manual para un ejemplo relativamente completo de un listado
genrico.
9
2.2 Ubicacin de los sitios de muestreo.
Es responsabilidad del equipo de campaa ubicar todas las estaciones de muestreo con
precisin. Slo si la misma ubicacin es muestreada consistentemente, los cambios
temporales en la calidad del agua o en la estructura de la biota pueden ser interpretados
de una manera confiable.
En general la manera ms sencilla y fiable de asegurar que cada estacin ser
muestreada en el mismo sitio, es proporcionar la latitud y longitud de la misma, tomadas
con un sistema de posicionamiento global (GPS), equipo que prcticamente se ha
transformado en un estndar para la ubicacin de los sitios de trabajo. Algunas
instrucciones bsicas para el uso del GPS en la ubicacin de estaciones de muestreo se
pueden encontrar en el Manual para el muestreo de la columna de agua (Zaixso, 2002).
En algunos proyectos de trabajo que se realizan en aguas someras, resulta conveniente
la identificacin de cada estacin con una boya (de color bien visible) sujeta con una
cuerda fina del largo adecuado a un peso muerto. Ejemplos de este tipo de trabajos son
aquellos con pocas estaciones y muestreos repetidos a lo largo de varios das o meses, o
cuando el error del GPS (unos 15 m) sea demasiado alto para los objetivos del muestreo.
Otros equipos o tcnicas para la ubicacin de los sitios de muestreo son descriptos en
Zaixso (2002).
Finalmente, una buena documentacin fotogrfica puede ser una manera conveniente
para que un sitio de muestreo cercano a la costa sea correctamente identificado en el
futuro; sugerimos al efecto el uso de cmaras con autofoco y protegidas contra el agua.
Resulta provechoso disponer, para la identificacin y acceso a los sitios de trabajo, de un
mapa gua que cuente con los accesos principales y secundarios y una copia de una
carta a escala 1:50.000, la cual puede estar incluida en la libreta de campo (plegada y
pegada).
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Es asimismo conveniente disponer de una o ms fotocopias de fotografas areas o
satelitales de la zona de estudio, de preferencia lo ms recientes posible y a una escala
adecuada. Para ms detalles acerca del uso de cartas y fotografas consultar el Manual
sobre tcnicas estndar en batimetra.
Las cartas y fotografas originales deben guardarse para el trabajo de interpretacin en
laboratorio.
2.3 Notas de campo y observaciones.
Una buena prctica de muestreo siempre implica el uso de detalladas notas de campo.
Informacin especfica acerca de hechos aparentemente poco importantes, tales como la
hora del da, las condiciones de viento o la presencia de nubes, son a menudo esenciales
a la hora de analizar e interpretar los datos recogidos.
Una libreta de campo adecuada puede asumir diferentes aspectos de acuerdo a los
usuarios. Por lo general las ms tiles son libretas anilladas o carpetas plsticas de tres
anillos. Las libretas cuentan con la ventaja de su tamao y en que es posible conseguirlas
con papel protegido de la accin del agua en muchos modelos diferentes. Las carpetas
en cambio permiten el uso de planillas de muestreo confeccionadas de antemano (una
prctica conveniente es disponer de una galera de planillas para distintos usos, las que
se fotocopian de acuerdo a las necesidades de los proyectos de trabajo); existen algunas
marcas que comercializan papel resistente al agua en resmas, el cual puede ser usado
en impresoras lser o para sacar fotocopias (de planillas preexistentes). Las libretas son
aconsejables para su uso en muestreos llevados a cabo desde botes, con potencial
exposicin a salpicaduras y lluvias, en tanto que las carpetas son apropiadas para
muestreos efectuados desde la costa o desde embarcaciones grandes (con laboratorio/s
de muestreo). En todo caso, para evitar dispersiones y prdidas, es prudente no utilizar
ms de una libreta por campaa.
La informacin a consignar en las libretas debe incluir los siguientes tems:
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1. Generales
- Nombre de la campaa.
- Fecha.
- Nmero de estacin de muestreo.
- Ubicacin de la estacin (latitud y longitud).
- Clima: nubosidad (en porcentaje), vientos (estimacin o medida de la velocidad,
direccin).
- Fotografas asociadas (nmero de rollo y nmero dentro del rollo).
2. Particulares A (vlidos para todos los tipos de muestreo).
- Profundidad de la unidad muestral (en ambientes sujetos a cambios de nivel por
mareas, referir a algn nivel medio, por ejemplo nivel de bajamares medias),
alternativamente se puede consignar la profundidad de la unidad muestral y la hora a
la que sta fue tomada.
- Oxgeno disuelto.
- Temperatura.
- pH.
- Conductividad (o salinidad)
- Turbidez.
3. Particulares B (para algunos tipos de muestreos en particular).
- Dimensiones de muestreo de la draga (tamao de la boca).
- Especies de peces colectadas incluyendo sexo, largo, peso y apariencia general.
Tamao de abertura de malla. Tiempo de arrastre u otros indicadores de esfuerzo de
captura. Profundidad de la captura (Peces).
- Fijadores y preservativos usados (para cada unidad muestral).
- En el caso de muestreo del intermareal (particularmente del rocoso) incluir en la libreta
de campo dibujos esquemticos de la zona de muestreo, preferiblemente con
diferentes grados de detalle (Figura 1).
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Figura 1: Diagrama de campo del sitio de muestreo, con indicacin de alturas de los
niveles de muestreo y otros detalles.
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Algunos ejemplos de planillas de campo pueden ser consultadas en el Apndice 2.
Toda la informacin guardada en la libreta debe ser entrada a la base de datos del
proyecto tan pronto como se vuelva del campo. La libreta de campo es un documento
muy importante y debe ser guardada como un archivo para referencias futuras.
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3. CONTROLES DE CALIDAD EN EL MUESTREO.
La confiabilidad de los datos obtenidos durante una campaa depende de mltiples
factores entre los cuales figuran un adecuado diseo de muestreo (que ser tratado con
detalle en otro texto), la correcta coleccin de la muestras y una preservacin
conveniente de las mismas (estos dos tems son el objeto principal de este manual) y un
anlisis de laboratorio apropiado.
La calidad de los datos generados por el laboratorio depende en una primera instancia de
la integridad de las muestras que arriban a ste. Consecuentemente, el investigador de
campo debe tener los conocimientos y tomar los recaudos necesarios para la toma de
muestras representativas y proteger a las mismas una vez tomadas, del deterioro y de la
contaminacin. Se incluyen dentro de estos aspectos la consistencia del muestreo, el
correcto uso del equipo y notas de campo detalladas.
Un aspecto fundamental de la toma de datos en el campo, es que exista un correcto
diseo de muestreo. Este tema no ser tratado aqu, ya que las estrategias de muestreo
dependen de los objetivos del trabajo, su variedad es muy grande y merecen un
tratamiento detallado e independiente. Existe sin embargo un aspecto del diseo de
muestreo que consideramos necesario introducir aqu y es el referido a las rplicas
muestrales.
3.1 Replicacin de muestras.
Las rplicas son muestras obtenidas en aproximadamente la misma ubicacin de
muestreo (esto es por ejemplo en la misma estacin de muestreo y a la misma
profundidad). Son muestras independientes tomadas en la misma rea, tanto en el
espacio como en el tiempo y se pretende de ellas que representen la variabilidad natural
del/los parmetro/s muestreado/s, permitan establecer los lmites de confianza del mismo
y en consecuencia acepten anlisis estadsticos que permitan verificar hiptesis acerca
de la similitud de los sitios de muestreo. En adicin la replicacin permite evaluar la
representatividad de las unidades muestreales individuales obtenidas en cuanto al valor
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de los parmetros medidos (presencia de valores marginales o outliers). En resumen,
las rplicas consisten en muestras mltiples (de sedimentos, de invertebrados en un
cuadrado muestral o peces enteros) de la misma rea general. Se debe notar que los
movimientos de deriva del bote y de circulacin del agua y los errores en la medicin del
largo de las cuerdas o cables durante la manipulacin de los equipos, hacen
prcticamente imposible que se pueda llegar a muestrear dos o ms veces el mismo
punto del fondo; esta circunstancia no constituye un problema, siempre y cuando no se
muestree en zonas cuyas caractersticas sean francamente distintas (por ejemplo deriva
de la embarcacin hacia la costa y muestreo en asociaciones macrozoobentnicas
diferentes).
El concepto de replicacin se halla hasta cierto punto oscurecido por la existencia de las
denominadas pseudorreplicaciones. Se habla de pseudorreplicacin cuando las
medidas tomadas no son independientes. Por ejemplo si se pesa el mismo pez dos
veces, no estamos en presencia de dos rplicas, sino de pseudorrplicas. El problema de
la pseudorreplicacin es ms importante en el correcto diseo de experimentos en el
campo, consultar Underwood (1997) y Krebs (1999).
Protocolo
a. Para el procedimiento de replicacin simplemente seguir y repetir el nmero de veces
que se considere necesario, los protocolos de muestreo indicados en las secciones 5
y 6.
3.2 Controles de la contaminacin y deterioro.
Existen numerosas fuentes de contaminacin potencial para las muestras, las siguientes
son algunas precauciones bsicas a tomar en los muestreos destinados al estudio de la
contaminacin.
- Los recipientes y contenedores de muestras, nuevos o usados, deben ser limpiados
escrupulosamente antes de su uso.
- Utilizar slo el recipiente recomendado para cada tipo de muestra. Usar preservativos
libres de contaminantes.
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- La parte interior de las bolsas o recipientes y sus tapas no deben ser tocadas.
- Los recipientes deben permanecer tapados hasta su uso.
- Mantener los recipientes y bolsas, con y sin muestras dentro de heladeras de telgopor.
- La limpieza del vehculo de transporte es esencial para evitar la contaminacin. Los
derivados de petrleo (nafta, aceites y gases de combustin) son fuentes primarias de
contaminacin. Los derrames de combustible, comunes en las embarcaciones, deben
ser escrupulosamente lavados.
- El humo de cigarrillos y combustin pueden contaminar las muestras con metales
pesados.
En adicin en los muestreos destinados a la descripcin general de un ambiente:
- Los equipos de muestreo (dragas o rastras por ejemplo) deben ser limpiados
escrupulosamente entre muestras; esta limpieza debe ser extendida a los equipos de
tamizado.
- Si para contener las muestras se usan recipientes usados, stos deben asimismo
estar bien limpios.
Para evitar el deterioro de las muestras se debe tener en cuenta que:
- No se debe permitir que las muestras se calienten, ellas deben almacenarse en
contenedores que permitan enfriarlas a unos 4 C; las heladeras de telgopor son
apropiadas para tal fin, acondicionadas con ice packs en cantidad suficiente.
- Algunas muestras deben ser congeladas hasta su anlisis en el laboratorio, para lo
cual deben ser trasladadas con hielo seco (o con ice packs especiales de 21C).
Por otra parte, no se debe permitir que las muestras se congelen a no ser que esto
sea parte del protocolo de conservacin.
- Las muestras deben ser enviadas al laboratorio sin demora, de manera que stas
lleguen preferiblemente dentro de las 24 horas de obtenidas. Para mayores detalles
sobre formas y tiempos de conservacin consultar el Apndice 3 de este manual.
- Las muestras biolgicas deben ser fijadas con el preservador ms adecuado a la
naturaleza de los organismos muestreados.
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Como tcnicas auxiliares en el control de la contaminacin y el deterioro de las muestras
es conveniente recurrir al uso de muestras divididas.
Las muestras divididas son alcuotas tomadas de la misma unidad muestral y analizadas
independientemente por uno o ms laboratorios. Las muestras divididas son utilizadas
para evaluar la magnitud de los errores debidos a contaminacin, errores sistemticos o
cualquier otra variabilidad introducida entre el muestreo y el anlisis de laboratorio. Las
muestras divididas se utilizan tambin para comparar resultados de dos o ms
laboratorios. Se debe tener cuidado de que las muestras divididas sean homogneas.
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4. EQUIPOS DE MUESTREO.
En esta seccin se describen los equipos de uso ms frecuente para la toma de muestras
bentnicas. Por otra parte se detallan los procedimientos generales que hacen al uso de
dicho equipamiento, como as tambin los protocolos para la utilizacin de equipos
auxiliares.
En la zona intermareal marina o en aguas someras, los muestreos de bentos se llevan
a cabo por lo general utilizando diferentes tipos de cuadrados de muestreo o sus
derivados. En estos muestreos a veces son utilizados muestreadores de tubo,
particularmente cuando se muestrean sedimentos o micro-meiofauna. Un tipo particular
de muestreador particularmente apropiado para su uso en aguas someras son las
sorbonas (air lift), las cuales han sido diseadas para su uso con buzos y para el
muestreo cuantitativo de volmenes (o superficies) acotados.
Para el muestreo en aguas ms profundas se usan en general tres tipos principales de
equipos de muestreo: las dragas (grabs) que colectan sedimentos (en ocasiones
consiguen arrancar rocas duras del fondo) y organismos de las capas superficiales del
sustrato en volmenes acotados por sus dimensiones y en consecuencia son utilizadas
para el estudio cuantitativo de la distribucin horizontal de las variables; las rastras
(dredges), que colectan organismos y sedimentos de granulometra superior a su
tamao de malla (raramente sedimentos finos) y que en consecuencia son utilizadas para
estudios cualitativos de la distribucin horizontal de animales y plantas; y los
muestreadores de tubo (core samplers) que colectan un perfil vertical de los
sedimentos y en consecuencia proveen material para la determinacin de la distribucin
vertical de las variables. Las dragas, debido a la facilidad de su uso y a las cantidades
relativamente grandes de muestra obtenida, son ideales para el estudio de organismos
medianos o grandes y para el anlisis de contaminaciones recientes. Los muestreadores
de tubo en cambio, son apropiados para organismos pequeos (meiofauna) y para el
estudio de las variaciones temporales (histricas) de la contaminacin.
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El uso de un tipo u otro queda de equipo de muestreo queda determinado por los
objetivos del proyecto y por las caractersticas fsicas del lugar a muestrear.
4.1 Cuadrados de muestreo
Los cuadrados de muestreo son los instrumentos ms simples que pueden ser utilizados
para efectuar y estandarizar un muestreo. Consisten en marcos por lo general cuadrados
(metlicos, plsticos, etc.), cuyas dimensiones dependen del tipo de muestreo a efectuar
(Figura 2).
Figura 2: a, Cuadrados de muestreo (10 y 15 cm de lado); b, Muestreo con cuadrado en
el intermareal.
Su uso ms frecuente se da en los muestreos biolgicos de la zona intermareal, ya que
los organismos a muestrear deben ser obtenidos sacndolos manualmente del interior del
cuadrado. Dependiendo del sustrato a muestrear, los organismos son capturados con los
dedos, o utilizando esptulas y/o cuchillos (sustratos duros), o bien son obtenidos con la
ayuda de palas u otras herramientas para excavar (sustratos blandos). Por extensin, los
cuadrados de muestreo son tambin utilizados en muestreos llevados a cabo por buzos
autnomos en aguas someras (entre 0 a unos 20-25 m de profundidad), si bien para este
menester muchas veces son preferidos otros mtodos de muestreo (sorbonas).
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4.2 Dragas.
Las dragas consisten esencialmente en un par de cucharas articuladas que al cerrarse
(una vez que la draga ha tomado contacto con el fondo) recogen una parte ms o menos
superficial del sedimento y de los organismos que se hallan sobre y dentro de ste. En
algunos modelos (por ejemplo las dragas tipo Ekman), la cara superior de la draga posee
aberturas articuladas que permiten al agua fluir durante el descenso del artefacto,
reduciendo en consecuencia el disturbio del sedimento que de otra forma ocurrira por la
onda de choque frontal que se produce cuando la draga es bajada rpidamente.
La principal ventaja de las dragas es que son fciles de usar y permiten el muestreo de
cantidades relativamente grandes de sedimento y en consecuencia de los organismos
asociados. Sus principales desventajas son: a, Los organismos que se hallan en escasa
densidad, difcilmente son muestreados; b, Parte de los sedimentos finos (y organismos
pequeos) pueden ser lavados durante el ascenso del equipo; c, La profundidad de
penetracin en el sedimento es por lo general baja.
Se han desarrollado varios diseos diferentes de dragas, cuya utilidad depende en buena
medida del tipo de fondo a muestrear. Algunos de estos diseos se describen a
continuacin, donde nos limitaremos a aquellos de bajo costo o que pueden ser
construdos en forma casera.
4.2.1 Draga tipo Ekman.
Las dragas Ekman (o Birge-Ekman) son variables en tamao y los modelos ms grandes
requieren del uso de un guinche o gra para su operacin; esto ltimo hace que su uso
sea practicable slo en embarcaciones grandes (ej. buque oceanogrfico) y que la
maniobra de descenso y recuperacin de la draga sea llevada a cabo por personal
entrenado.
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Las dragas tipo Ekman para usar desde botes miden unos 15 x 15 cm de boca y se
construyen en bronce cromado o preferiblemente, en acero inoxidable (menos problemas
con la corrosin y menor probabilidad de contaminacin de las muestras obtenidas con
los metales de la draga).
Las cucharas se unen a la caja donde se recibe la muestra por un par de espigas
provistas de fuertes resortes y cada una de las cucharas est provista de un cable o
cadena que es parte del mecanismo de disparo (Figuras 3 a 5).
Figura 3: Diagrama de una draga tipo Ekman abierta y preparada para la toma de la
muestra.
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Figura 4: Draga tipo Ekman abierta, preparada para la toma de la muestra. a, vista
general lateral; b, extremos de los cables de las cucharas enganchados a los pivotes del
mecanismo disparador. El mensajero suelta el mecanismo al golpear sobre la pieza
blanca que se halla en su parte superior.
Para abrir la boca de la draga es necesario tirar de ambos cables por separado y
engancharlos sobre un par de pivotes existentes en el mecanismo disparador que se
halla en la parte superior; este ltimo se activa desde la superficie mediante el envo de
un mensajero. En la cara superior de la caja receptora hay un par de tapas mviles que
se abren cuando la draga es descendida, permitiendo que el agua fluya libremente a
travs de sta y que se cierran cuando la draga es recuperada. El sedimento puede ser
submuestreado a travs de estas tapas (para obtener muestras para el estudio de la
meiofauna por ejemplo) o puede ser volcado en una bandeja y tratado como una nica
muestra.
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Algunos modelos cuentan con pesos accesorios laterales para mejorar la penetracin de
la draga en el sedimento. Otros modelos tienen la posibilidad de subdividir la muestra
obtenida en varias submuestras horizontales, mediante la insercin de unas placas
metlicas ad hoc las que se pueden insertar en unas ranuras laterales (con guas)
presentes en la draga.
La draga de Ekman es apropiada para colectar sedimentos blandos de granulometra fina
(arenas, limos y arcillas) y los organismos asociados con stos. Los sustratos de
granulometra gruesa (pedregullo o grnulos) pueden provocar que las cucharas no
terminen de cerrarse, con la consecuente prdida del material colectado cuando la draga
es izada.
Figura 5: Draga tipo Ekman cerrada. a, vista general lateral; b, mecanismo disparador
donde pueden observarse los pivotes de enganche para los cables de las cucharas.
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Nota: Si ste u otro modelo de draga retorna a superficie con la boca parcialmente
abierta, la muestra debe ser descartada, ya que debe asumirse que todo o parte del
contenido se ha lavado durante el ascenso.
4.2.2 Dragas tipo Petersen
La draga de Petersen consiste en un par de pesadas cucharas semicilndricas provistas
cada una de un brazo metlico articulado y acopladas entre s por medio de un eje. En la
parte superior de cada cuchara puede haber una o ms ventanas cubiertas por una malla
metlica fina, que permiten fluir el agua mientras la draga es descendida. Unos pesos
auxiliares pueden ser agregados a las cucharas de manera de mejorar la penetracin de
la draga en los sustratos ms duros.
Cuando la draga es descendida, las cucharas permanecen abiertas ya sea mediante una
barra de apertura o bien por un gancho que mantiene al instrumento en la posicin
abierta a travs de cadenas; en ambos casos, estos mecanismos son parte del
dispositivo de disparo o cierre de la draga.
La ubicacin de las barras de cierre es variada. En algunos modelos (incluyendo el
original utilizado por Petersen) la barra est ubicada entre los brazos de la draga; en el
momento de impacto de la draga con el sustrato, los brazos se aflojan y la barra se
suelta, quedando libres las cucharas para cerrarse. El cierre se produce cuando la draga
es izada, este movimiento tira de los brazos articulados a a ambas cucharas y acerca a
stas entre s (Figura 6).
Otro mecanismo de cierre consiste en un gancho con contrapeso que sostiene al
instrumento en la posicin abierta, mientras ste es descendido. Este sustento se lleva a
cabo mediante un par de cadenas cortas unidas a ambas cucharas de la draga. Cuando
la draga llega al fondo, el cable de descenso se afloja, el gancho suelta a la cadena y la
draga queda libre para cerrarse. La suelta del gancho transfiere la unin del cable de
izado a una cadena de cierre, que une a ambas cucharas cuando se tira de l.
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La draga de Petersen es adecuada para la obtencin de materiales de fondo duros, tales
como arena, gravas y arcillas duras. Su profundidad de penetracin es de 1-2 cm (draga
de 0,1 m
2
) a 3 cm (draga de 0,2 m
2
).
Figura 6: Draga tipo Petersen con disparador de barra entre los brazos.
Una variante de la draga de Petersen, la draga Ponar, cuenta en la parte superior de las
cucharas con unas tapas rebatibles cubiertas con una malla metlica fina, stas dejan
que el agua fluya libremente a travs de la draga cuando sta es descendida, reduciendo
as la onda de choque frontal que precede a la draga; en adicin, la remocin de las tapas
permite el submuestreo del sedimento obtenido. La draga Ponar es apropiada para el
muestreo de sedimentos finos a gruesos.
26
4.2.3 Draga tipo van Veen
En las dragas tipo van Veen, a diferencia de las tipo Petersen, la fuerza para el cierre es
proporcionada por la accin tipo pinzas de dos largos brazos, uno para cada cuchara, a
los cuales esta unido el cable de izado. Este mtodo permite ejercer mayores fuerzas y
mejorar la penetracin de la draga en el sedimento (Figura 7).
Figura 7: Dragas tipo van Veen.
Al igual que las dragas tipo Petersen el peso de la draga puede incrementarse agregando
pesos suplementarios (o usando materiales mas gruesos). Los mecanismos de disparo
27
por su parte, consisten al igual que para las dragas Petersen, ya sea en una barra de
apertura (Figuras 7b, 7c y 8) o bien en un gancho de suelta (Figura 7a y 7d).
Existen diferentes modelos de dragas van Veen y sus principales diferencias estn
referidas a los mecanismos implicados en el cierre de los brazos. En uno de los diseos
se usan bridas (o cadenas) separadas para cada brazo (Figura 7a y 7d); en el otro
diseo, que proporciona un mayor palanqueo para el cerrado de la draga, se usa un
nico cable cerrado en anillo o lazo, que corre sobre roldanas ubicadas en los extremos
de cada brazo (Figura 7b y 7c)
Figura 8: Diagramas de dragas tipo van Veen con mecanismos disparadores de barra.
Las dragas tipo van Veen son adecuadas para la obtencin de materiales de tanto de
fondos duros como blandos, tales como gravas, grnulos, arenas y limos arcillas. Su
profundidad de penetracin es de 3-5 cm (draga de 0,1 m
2
) a 5-7 cm (draga de 0,2 m
2
).
28
4.3 Muestreadores de tubo o perforacin (core samplers)
Los muestreadores de tubo son capaces de penetrar el sedimento ms profundamente
que las dragas; en consecuencia pueden proveer una seccin de las diferentes capas de
sedimento y por lo tanto, informacin acerca de cmo ste se ha depositado. En general
son usados para el muestreo de las caractersticas fsico-qumicas de los sedimentos y en
el muestreo de la micro-meiofauna, dado que por su escasa superficie de muestreo no
son apropiados para el muestreo de organismos bentnicos grandes.
En su forma ms simple son tubos de material plstico rgido o metal de
aproximadamente 1 a 5 cm de dimetro, que son introducidos a mano en el sedimento
para obtener una muestra de ste, un ejemplo de stos es el muestreador de Hope.
Los muestreadores de tubo para aguas ms profundas son equipos algo ms
complicados que los anteriores y consisten en general en tubos plsticos o metlicos (con
un tubo plstico interno para la recoleccin de la muestra), provistos de pesos accesorios
para facilitar la penetracin del muestreador en el sedimento y de vlvulas y/o tapones
que impiden la prdida de la muestra obtenida; un ejemplo de ellos es el muestreador
tipo Kajak.
4.3.1 Muestreador de Hope
El muestreador de Hope consiste en un tubo de plstico (policarbonato, acrlico) de unos
40 cm de largo, unos 4 cm de dimetro y de pared preferiblemente fina (1 mm).
Externamente, en su extremo inferior, se le inscriben lneas para marcar la profundidad (o
el volumen) de la muestra a tomar. El extremo superior se cierra con un tapn de goma o
silicona (que se quita mientras el tubo es enterrado en el sedimento) y se practica un
agujero de 1 cm de dimetro, a unos 15 cm del extremo superior del tubo, este agujero es
tapado por un manguito o banda de goma de unos 3 cm de ancho.
El uso de muestreador de Hope es sencillo, se hunde el extremo inferior del tubo en el
sedimento (sin el tapn), se coloca el tapn y se extrae el muestreador del sustrato. La
29
muestra se extrae del muestreador, sosteniendo con una mano el tubo y con el pulgar
corriendo el manguito de goma y permitiendo que entre el aire. Usando la escala inscripta
es posible desalojar volmenes parciales de muestra y llevar a cabo submuestreos de la
misma.
Figura 9: a, Muestreadores tipo Hope; b, muestreador de jeringa.
Existen numerosas variantes del muestreador clsico de Hope, diseadas para usos
especficos. En la Figura 9a se observan un par de muestreadores de tubo para la
obtencin de muestras de sedimentos de los 30 cm superficiales del fondo.
4.3.2 Muestreador de jeringa.
Una variante del muestreador de tubo simple, consiste en una jeringa hipodrmica del
tipo descartable (de tamaos diferentes) en la cual se ha cortado (y afilado) el extremo
donde calza la aguja. Su uso; consiste en enterrar el muestreador en el sustrato con el
mbolo colocado en el extremo inferior y permitiendo que este se corra a medida el tubo
se hunde. El mbolo permite mantener el vaco dentro de la jeringa y evitar la prdida de
la muestra y asimismo para poder vaciar el muestreador con facilidad y/o llevar a cabo
submuestreos del sedimento obtenido (Figura 9b).
30
Los muestreadores de jeringa son tiles en el muestreo de sedimentos intermareales o en
la toma de submuestras (para el anlisis de bacterias o micro-meiofauna) a partir de
muestras profundas obtenidas con draga.
4.3.3 Meiostecher
El meiostecher es un muestreador de perforacin, utilizable en el muestreo de micro-
meiofauna intermareal, que consiste en una caja de acrlico de unos 10 cm de alto, 10
cm de ancho y 2,5 cm de espesor, abierta por sus caras superior e inferior y con los
bordes inferiores afilados. En uno de sus lados tiene una subdivisin estrecha
(separacin de acrlico) donde se encaja una lmina de plstico flexible, la cual puede
asimismo correr por unas ranuras (guas) ubicadas a aproximadamente 1 cm del borde
cortante inferior (Figura 10).
Figura 10: Meiostecher (segn Gerlach, 1968).
31
El muestreador es enterrado en el sedimento hasta la profundidad deseada y luego es
cerrado, bajando la lmina flexible y hacindola correr a travs de las ranuras inferiores.
La lmina tambin puede ser usada para obtener submuestras.
4.3.4 Muestreador tipo Kajak
Existen numerosas variantes comerciales de los muestreadores de tubo de gravedad tipo
Kajak, pero todos ellos consisten en un tubo de muestreo que penetra en el sedimento,
pesos que ayudan a la penetracin del muestreador y una vlvula superior que se cierra
cuando el tubo es izado y no permite la prdida del sedimento obtenido (Figura 11).
El tubo de muestreo puede estar construido en bronce, acero inoxidable o an acrlico,
por lo general incluye en su interior un segundo tubo de plstico que se ajusta al dimetro
del tubo externo. Este tubo plstico se extrae luego de la toma de cada muestra y se
reemplaza por uno nuevo. En algunos modelos como el de la Figura 11, no hay tubo
interno y se debe reemplazar el tubo en cada muestra. El tubo del muestreador cuenta
en su extremo con un cilindro bisel cortador que facilita la penetracin en el sedimento.
Los muestreadores tienen pesos suplementarios, por lo general ubicados en la parte
superior del equipo, y algunos modelos tambin llevan pesos inferiores para aumentar la
profundidad de penetracin en el sedimento.
En la parte superior del tubo se halla una vlvula o un tapn que ajusta a su extremo
superior, el cual se cierra cuando el muestreador es recuperado y evita de esta manera la
prdida del material colectado; esta vlvula o tapn pueden ser operados ya sea por un
mensajero enviado desde superficie o bien por la fuerza de traccin ejercida sobre el
muestreador cuando se lo saca del sedimento. Algunos modelos de muestreador cuentan
con una segunda vlvula tipo cscara de naranja en el extremo inferior del tubo
muestreador, la cual permite la entrada de material pero no su salida y que es
particularmente apropiada para sedimentos arenosos.
32
Figura 11: Muestreador tipo Kajak.
Finalmente en algunos modelos de muestreador es posible cambiar el sistema de
descenso por cable para aguas profundas, por un sistema para aguas someras (hasta
unos 6 metros), integrado por tubos que se adosan entre s y que permiten bajar y cerrar
el muestreador manualmente desde la superficie.
33
4.4. Rastras
Las rastras y diseos derivados son utilizados corrientemente para muestreos de ndole
cualitativa. Pueden tener tamaos muy diversos, desde unos 30 cm de ancho hasta un
par de metros, lo cual las hace aptas para usar desde los ms variados tipos de
embarcaciones. En general consisten en una boca rectangular y vertical hecha de un
armazn metlico resistente, a la cual se adosa una bolsa de red posterior (de material
sinttico resistente), en la que se recogen los organismos capturados y eventualmente
algo de sedimento; la red puede tener diferentes aberturas de malla, de las que depende
el tamao de los organismos capturados (Figura 12) En ocasiones la bolsa de red es
protegida contra la roturas, agregando una cubierta de lona resistente por fuera de la red
(Figuras 12a y 12c). El conjunto es arrastrado desde la embarcacin mediante un cable
convenientemente unido a la boca de la rastra mediante un par de brazos metlicos
rgidos o bien mediante cadenas o bridas.
Figura 12: Rastras. A, rastra cuadrangular; b, rastra cnica; c, rastra tipo Khalsico
(apoyada sobre su cubierta de lona) ; d, rastra de rocas.
34
La operacin de rastreo es simple, la rastra es bajada hasta el fondo con un largo de
cable equivalente a 3 o 3,5 veces la profundidad del sitio de muestreo, para que la fuerza
de arrastre sobre la rastra sea ejercida en forma horizontal. En ocasiones se coloca un
peso o una cadena pesada por delante de la rastra (unida al cable de tiro) para asegurar
un arrastre bien horizontal de la misma. El tiempo de arrastre, a muy baja velocidad, se
halla por lo general entre los 3 y los 10 minutos, dependiendo del tamao de la rastra y de
la densidad de organismos en el fondo. Con rastras medianas o pequeas y tiempos de
arrastre relativamente cortos, se corre un menor riesgo de mezclar en una muestra
diferentes poblamientos asociados a diferentes tipos de fondo; en todo caso, es
conveniente seguir durante el rastreo las lecturas de profundidad con una ecosonda, para
asegurarse de que la operacin ha sido llevada a cabo a profundidades uniformes.
En general las rastras de boca rectangular se hunden poco en el sedimento y en
consecuencia los muestreos responden principalmente a organismos epibentnicos. Para
permitir la captura de organismos enterrados se han diseado rastras de boca elipsoidal
que son bastante efectivas para este tipo de muestreo (profundidades de hasta unos 5
cm). En general cualquier desvo de una recta por parte del borde del marco, asegura un
mayor poder de enterramiento por parte de la rastra.
Si no se dispone de una draga o de un muestreador de tubo, se puede llevar a cabo la
toma de muestras de sedimentos utilizando para ello una rastra cnica con una bolsa de
red de malla muy apretada (Figura 12 b). Esta rastra est provista de dos o ms de
brazos metlicos rgidos para su arrastre y de pesos (anteriores y posteriores) para
asegurar que la misma se entierre en el sustrato.
Una variante de las rastras es la denominada red de Agassiz (Agassiz trawl) que es un
modelo adaptado para la captura de organismos epibentnicos (incluyendo los mviles),
especialmente cuando ha sido dotada de una red fina. Una red de Agassiz est
constituida de una armazn metlica anterior que combina un par de patines, el armazn
de la boca de la red y la estructura de arrastre (barra, cadenas o bridas); a continuacin
de la boca se halla una bolsa de red sinttica (con abertura de malla variable) con la que
se capturan los ejemplares.
35
Figura 13: Redes de Agassiz.
Cuando se efectan rastreos en sitios donde la presencia de piedras o rocas es probable,
es conveniente incluir una unin dbil (fusible) para liberar a la rastra en caso de que sta
se enganche. Esto se lleva a cabo por lo general, uniendo el cable de traccin a uno de
los brazos de la rastra con un grillete, mientras que el otro slo se ata con unas pocas
vueltas de alambre blando.
Las principales ventajas de las rastras y de los equipos de muestreo relacionados son: a,
La facilidad de uso, an con tiempo muy malo; b, La variedad de tamaos de
construccin, lo que las hace adaptables a las ms diversas embarcaciones; c, La
muestra obtenida representa un rea de muestreo mucho ms amplia que la obtenida con
una draga; d, Pueden muestrear sobre fondos rocosos, donde las dragas no pueden; e, A
diferencia de las dragas, las rastras pueden ser construidas fcilmente por personal
relativamente poco experto. Sus principales inconvenientes son: a, El muestreo obtenido
es slo cualitativo; b, La fraccin de organismos ms pequea generalmente es lavada
durante las operaciones de rastreo o de recuperacin del equipo; c, Se pueden llenar muy
rpido en fondos con sedimentos gruesos o con muchos organismos y en consecuencia
las capturas corresponden a reas de muestreo pequeas.
36
4.5 Sorbonas.
Las sorbonas, chupadores o muestreadores de succin (air lifts) se basan en el principio
de que un gas aumenta su volumen a medida que disminuye la presin sobre el mismo:
Si el gas forma burbujas dentro de un tubo vertical sumergido, entre dos burbujas
contiguas se halla una pequea columna de agua; a medida que las burbujas ascienden
se dilatan y aumenta su poder de traccin sobre las porciones de agua adyacentes. De
esta manera, en el extremo del tubo, el agua (y las partculas y objetos que arrastra)
tiende a entrar para reemplazar el agua ascendente, con una mayor fuerza cuanto mayor
sea el recorrido vertical de las burbujas dentro del tubo.
Nota: Algunos modelos de sorbonas basan su funcionamiento en el principio de Venturi.
En tales modelos el modo de funcionamiento es el mismo que se utiliza en las trompas de
vaco de laboratorio. Se crea una diferencia de presin por el pasaje de una corriente
agua a presin que pasa por un tubo con un estrechamiento. Esta diferencia de presin
provoca un efecto de succin que se utiliza para aspirar al sedimento y los organismos
(Reys & Salvat, 1971).
Una sorbona para macrozoobentos consiste, por lo general, en un tubo metlico de unos
5 10 cm de dimetro y unos 40 - 60 cm de largo, provisto de una manija de manipulacin
en su parte inferior, un acople para manguera de alta presin en su mitad inferior y una
manguera corrugada, del mismo dimetro del tubo, unida a su extremo superior; el largo
de esta ltima debe ser suficiente como para llegar hasta la superficie, donde se le adosa
una bolsa de red fina para retener los sedimentos y organismos muestreados (Figura 14).
La manguera de alta presin, de un largo conveniente, va acoplada por su otro extremo a
un compresor (en superficie) o a un tubo de aire a presin (en superficie o en el fondo). El
procedimiento de muestreo consiste en inyectar aire a presin en la sorbona de manera
tal que las burbujas que ascienden por el tubo y la manguera corrugada fuercen a los
sedimentos y organismos a subir por ellos y terminar en la bolsa recolectora. Los
organismos u objetos ms grandes son retirados a mano por el buzo, para evitar que
obturen el tubo o la manguera corrugada, para lo cual es conveniente que el buzo
disponga de una bolsa de red para guardarlos. El equipo debe ser manipulado por buzos,
37
con lo que la operabilidad del equipo queda limitada a aguas someras (de unos 3 a 35
metros).
Figura 14: Sorbonas. a, sorbona clsica,; b, sorbona con cmara de muestreo; c, detalle
de la boca (difusor de aire y entrada de agua) en un tercer tipo de sorbona.
38
Para la captura de organismos pequeos es posible la construccin y uso de sorbonas de
tamao reducido, a tal efecto puede consultarse Tanner et al. (1977), Levine (1984) y
Rostron (2001).
Las sorbonas pueden ser utilizadas tanto sobre fondos duros como blandos. En ambos
casos es conveniente contar con un delimitador del rea de muestreo, para circunscribir
la muestra a tomar. El delimitador, de un rea apropiada para el muestreo propuesto, es
generalmente un cilindro o caja de metal sin fondo ni tapa, de paredes altas; puede tener
un burlete de goma en su borde inferior en ocasin del muestreo de sustratos duros o
bien, para el caso de muestreo en sustratos blandos, contar con un borde fino que
permita enterrar el delimitador en el sedimento a la profundidad hasta donde se desee
obtener la muestra.
La principal ventaja de las sorbonas es que el muestreador captura prcticamente a todos
los organismos presentes dentro del delimitador, incluso a aquellos muy mviles que
generalmente se escapan en los muestreos llevados a cabo por otros medios. Las
principales desventajas son el uso francamente embrollado de los equipos grandes y la
eventual rotura de los organismos ms delicados durante su transporte por la manguera
hacia la superficie.
4.6 Equipos de muestreo en ambientes lticos.
En los ambientes lticos, en adicin a los muestreadores de sedimentos, son necesarios
otros tipos de equipamiento especialmente diseados para las particulares condiciones
de ros y arroyos.
Los equipos de muestreo usados para la captura de invertebrados en las zonas someras
de ros y arroyos (menos de 1 metro), usualmente son los muestreadores de Surber y de
Hess. La red de deriva tambin puede ser usada para capturar los estadios derivantes o
emergentes de invertebrados bentnicos.
39
En todos los casos la captura se lleva a cabo filtrando el agua con una red de malla fina.
La abertura de malla recomendada para la mayor parte de los muestreos es de 210 m,
si bien en estudios ms especializados pueden requerirse otros tamaos de malla.
4.6.1 Muestreador de Surber.
El muestreador de Surber consiste en dos marcos articulados por uno de sus lados
(Figura 15). Uno de los marcos se ubica horizontalmente sobre el fondo del curso de
agua y sirve para delimitar el rea de muestreo, el otro se dispone verticalmente y sirve
para sostener la red de captura, la cual puede o no tener un frasco colector en su
extremo.
Figura 15: Muestreador de Surber.
El muestreador se ha diseado para su utilizacin en aguas de 30 cm de profundidad o
menos y la tcnica de muestreo consiste en levantar las piedras contenidas dentro del
rea de muestreo, voltearlas y refregarlas ligeramente, dejando que los organismos que
se sueltan de ellas sean capturados por la red sostenida por el marco vertical. En general,
dada las bajas densidades de fauna, es necesario llevar a cabo muestras de tipo
40
compuesto, con tiempos de muestreo (para cada componente) de iguales intervalos de
duracin (por ejemplo 5 minutos por cada marco registrado).
4.6.2 Muestreador de Hess
El muestreador de Hess es un cilindro sin tapa ni fondo que puede ser construido en
diferentes materiales (metal, plstico u otros). En una de sus caras est provisto de una
ventana grande cerrada con una malla o cedazo, mientras que en la opuesta hay otra
ventana a la cual se halla adosada una red y un colector tal como los usados en las redes
de plancton (Figura 16) Existen modelos plegables donde los bordes superior e inferior
son dos aros o cilindros de acero inoxidable y se hallan unidos entre s por un cuerpo de
lona que es el que contiene a las ventanas; el conjunto se mantiene armado mediante
unas barras metlicas verticales cuyos extremos se encastran en los cilindros de metal.
Figura 16: Muestreador de Hess.
41
El muestreador es apoyado en el fondo del curso de agua con la ventana de cedazo
orientada hacia la corriente y la red hacia aguas abajo. El agua puede fluir libremente
entrando por la primer ventana y saliendo luego por la red posterior. Al igual que con el
muestreador de Surber, se recogen las piedras contenidas en el cilindro y se las refriega
para soltar los organismos adheridos a ellas; stos son finalmente capturados en la taza
colectora de la red posterior.
4.6.3 Red de deriva
Las redes de deriva son ancladas en cursos de agua para capturar a los macro-
invertebrados que estn migrando o que son arrancados de sus sitios de fijacin. Su uso
est limitado a cursos de agua pequeos, dado que idealmente las redes de deriva deben
abarcar todo el ancho de los ros o arroyos que se pretenden muestrear.
4.7 Buceo
El uso de buzos es prcticamente inevitable en los muestreos de bentos de aguas
someras, tanto marinas como de agua dulce. De hecho, el muestreo con buzos tiene,
con respecto al uso de equipos controlados desde superficie, marcadas ventajas cuando
se trata de superficies rocosas desparejas o muy inclinadas, o cuando se muestrean
reas con bloques rocosos. En adicin, los buzos pueden operar desde un bote
neumtico, lo que permite muestrear prcticamente a partir de la orilla; en cambio. el uso
de rastras o dragas implica por lo general el apoyo desde embarcaciones medianas o
grandes, las cuales necesitan a su vez de aguas de una profundidad adecuada al calado
y son de maniobra ms restringida.
El muestreo con buzos se halla limitado por el suministro de aire, por la profundidad y la
temperatura del agua. En cuanto al suministro de aire, resulta conveniente disponer de un
compresor de aire para tubos de buceo (slo usar compresores apropiados para buceo)
y de un nmero adecuado (en funcin del nmero de buzos) de tubos de recambio. La
profundidad mxima para observaciones o recoleccin de organismos rpida, sin uso de
equipos especiales, se halla hoy en da en unos 35 metros; para un trabajo de muestreo
42
convencional, sin recurrir a estadios de descompresin, la profundidad de trabajo es de
unos 20 metros. Las bajas temperaturas del agua tambin limitan el tiempo de buceo, sin
embargo este aspecto puede ser prevenido, si se utilizan los trajes de trabajo adecuados
(por ejemplo trajes secos).
Nota: Las pautas para un buceo seguro slo pueden ser puestas en prctica por un buzo
profesional (preferiblemente con licencia de buzo marisquero o al menos de buzo
deportivo), en consecuencia aconsejamos acompaarse de personal calificado cuando se
planee y ejecute un muestreo en ambientes de aguas someras.
Nota: Seguir la reglamentacin en vigencia respecto del buceo comercial o deportivo
(Prefectura Naval Argentina).
El muestreo con buzos consiste en realidad en una multiplicidad de tcnicas de muestreo,
que son aplicadas por el buzo. En general, muchas de estas tcnicas son semejantes a
las aplicables en los muestreos del intermareal, modificadas por supuesto por la
presencia de agua. Otras tcnicas (por ejemplo el uso de sorbonas), si bien no son
exclusivas, encuentran su mejor desarrollo cuando son usadas por buzos. En razn de
sta multiplicidad, los procedimientos sern descriptos en los puntos especficos
correspondientes, particularmente en la seccin 6.3.
En los casos donde se requiera de una revisin visual rpida del fondo y no sea
necesaria la toma de muestras, para ubicar bancos de especies comerciales por ejemplo
(y no se cuente con un equipo de televisin submarina), puede recurrirse al arrastre a
baja velocidad del buzo (provisto de tanque de buceo o de narguile) desde un bote u otra
embarcacin menor. Si bien esto puede llevarse a cabo con equipos de transporte
especiales (hidroplano), en casos de apuro se logra trabajar adecuadamente bien,
arrastrando directamente al buzo con el ancla del bote y su soga. El esquema de
arrastre, depende fundamentalmente de la visibilidad en el agua, pero tiende a ser
semejante (con disminucin de la distancia entre piernas de arrastre) al empleado en los
estudios de batimetra (en zig-zag por ejemplo).
43
4.8 Gua para la eleccin de un equipo de muestreo.
La eleccin de un equipo de muestreo para un propsito determinado es siempre una
solucin de compromiso, basada en consideraciones tales como:
a. Naturaleza del sustrato.
b. Profundidad del agua.
c. Tamao de la embarcacin a utilizar (si sta es parte de la estrategia de muestreo) y
disponibilidad en sta de guinches, gras u otros implementos para operar los equipos
de muestreo.
d. Tamao, densidad y hbitos de los organismos a colectar.
En los muestreos de ndole biolgica, es quizs deseable que el muestreo a encarar sea
de tipo cuantitativo, es decir que el equipo tome hasta una profundidad del sustrato donde
casi todos los organismos presentes en ste sean capturados y donde el rea
muestreada permita una buena estimacin de las densidades. La adquisicin de este tipo
de muestras requiere por lo general de condiciones de clima favorables y tiempos de
muestreo no limitados; estas condiciones por lo general no son frecuentes y muchas
veces es necesario conformarse con muestras ms pequeas y menos satisfactorias que
las ptimas. En adicin, las densidades o el tipo de distribucin de muchos organismos,
no resultan adecuadamente muestreados con equipos puntuales como las dragas. En
consecuencia, paradjicamente, a veces se obtienen resultados ms cuantitativos
cuando el muestreo se realiza con rastras en lugar de con dragas (Smith, 1932).
Las que siguen a continuacin son slo sugerencias en cuanto al uso de mtodos y
equipos, para diferentes condiciones de muestreo.
a. Muestreo intermareal
Cualitativo: Recoleccin manual, sin delimitacin de reas.
Cuantitativo: Cuadrados de muestreo.
Muestreador de Hope (particularmente para micro-meiofauna y
sedimentos).
44
Muestreador de jeringa.
Meiostecher
b. Muestreo en aguas someras
Cualitativo: Recoleccin manual y buceo, sin delimitacin de reas.
Rastra rectangular (para epibentos)
Red de Agassiz (para epibentos).
Rastra de marco oval (para infauna poco enterrada)
Cuantitativo: Buceo y cuadrados de muestreo
Muestreador de Hope (particularmente para micro-meiofauna y
sedimentos).
Muestreador de Kajak (particularmente para micro-meiofauna y
sedimentos).
Sorbonas.
Draga tipo Ekman.
c. Muestreo en ros y arroyos
Cualitativo: Buceo y recoleccin manual, sin delimitacin de reas.
Muestreador de Surber (con un rea mayor a la delimitada por el equipo).
Cuantitativo: Muestreadores de Hope (particularmente para micro-meiofauna y
sedimentos).
Sorbonas.
Draga tipo Ekman.
Muestreador de Hess.
Muestreador de Surber.
Red de deriva.
d. Muestreo en aguas profundas
Cualitativos: Rastras rectangulares (para epifauna).
Rastras de marco oval (para epifauna e infauna poco enterrada)
Dragas especiales tipo rastra de ancla (para infauna muy enterrada)
45
Cuantitativos: Muestreador de Kajak (particularmente para micro-meiofauna y
sedimentos).
Draga tipo Petersen (epifauna e infauna poco profundas)
Draga tipo van Veen (para epifauna e infauna poco profundas).
Muestreador de jeringa (submuestreo de sedimentos obtenidos con
draga)
4.9 Equipos para el tamizado a bordo de muestras biolgicas.
El tamizado de muestras de bentos reduce el volumen de sedimento que debe analizarse
en laboratorio y permite una fijacin ms apropiada de los organismos contenidos en l.
Los equipos de tamizado a bordo por lo general no son necesarios en los muestreos
obtenidos con rastras (excepto en los obtenidos con rastras cnicas), dado que los
sedimentos finos son por lo general lavados durante el arrastre o bien durante la
recuperacin del equipo. En los casos en que las rastras lleguen a la superficie con
sedimentos, muchas veces es suficiente mantenerlas con slo la boca fuera del agua,
hasta que el contenido se lave en el mar.
Estos equipos son en cambio imprescindibles en los muestreos con dragas o sorbonas,
para separar los organismos muestreados del sedimento y poder fijarlos o conservarlos
de la manera ms adecuada a sus caractersticas.
El aspecto de los equipos de tamizado es muy variado y depende del espacio disponible
en la embarcacin que recibe la muestra. Por ejemplo, en los muestreos con sorbona
desde bote, el equipo de tamizado consiste simplemente en una bolsa de red que se
adjunta al extremo superior del tubo de succin y en la cual se recoge la muestra
(organismos y sedimentos de una granulometra mas grande que la abertura de malla de
la red), mientras se mantienen la bolsa y el tubo por fuera de la borda. La bolsa tiene una
malla de abertura apropiada (por ejemplo, para macrofauna: 0,5 mm o 1 mm) y un
tamao proporcionado al tamao del delimitador, tipo de sedimento y a la profundidad de
46
muestreo. En salidas de corta duracin, ser posible extraer la muestra con el sedimento
y llevar a cabo la separacin de ambos en el laboratorio.
Para los muestreos con draga, llevados a cabo en embarcaciones medianas o grandes,
los equipos de tamizado a bordo pueden ser de mayor tamao y ms complejos.
Un equipo de tamizado debera cubrir los siguientes aspectos:
a- Utilizar al menos un par de juegos de tamices superpuestos (para macrofauna por
ejemplo: 0,5 cm para el superior y 0,5 mm para el inferior). Esto conducir a que los
organismos estn clasificados por tamao y permitir una mejor fijacin y
conservacin de stos.
b- La superficie de los tamices debe ser grande para permitir elaborar rpidamente el
contenido de una draga (por ejemplo de o 1 m
2
), pero asimismo deben ser
facilmente manipulables para poder vaciarlos (por ejemplo dividiendo cada juego en
tamices adyacentes de de m
2
).
c- Para la separacin de los organismos del limo u otros sedimentos, se debe disponer
de agua de mar (o agua dulce) a una presin no demasiado alta (para evitar la rotura
de los organismos). Esto se puede lograr ya sea con una manguera con un spray
con regulacin en su extremo o preferiblemente con un sistema de regadores ubicado
por encima de los tamices, ya que esta ltima opcin permite ayudarse con las manos
en la operacin de tamizado, especialmente cuando se trabaja con barros muy
cohesivos.
d- El agua del lavado debera poder ser eliminada directamente al mar o lago, para no
ensuciar la cubierta de la embarcacin.
e- Se debe disponer de bandejas grandes (donde quepan cmodamente los tamices,
por ejemplo las utilizadas en ampliaciones fotogrficas) para su vaciado y transporte a
la seccin de la embarcacin donde se lleva a cabo la separacin y fijacin de los
organismos (en otro sector de la cubierta o en un laboratorio). Se debe evitar la
contaminacin de las muestras con organismos de lavados previos dejados
inadvertidamente sobre los tamices.
47
Para muestras de pequeo volumen, como las obtenidas con un muestreador de tubo, es
posible usar tamices como los utilizados para estudios de granulometra (el dimetro
depende del tamao de la muestra). Por ejemplo, para muestras de bentos de agua dulce
se utilizan tamices de los nmeros #18 (1 mm) o #35 (0,5 mm) (consultar seccin 6.3.2);
un tamiz #35 retiene la mayor parte de los macroinvertebrados bentnicos de un sitio y se
recomienda para inventarios iniciales completos del sitio, un tamiz #18 se recomienda
para estudios a largo plazo de sitios que ya han sido estudiados con tamices #35. Cantos
rodados y basuras deben ser eliminadas manualmente de la muestra.
4.10 Otros equipos para el muestreo del bentos.
Los usos de la fotografa y/o de la televisin (incluyendo ROV: Remote Operated
Vehicles) como tcnicas de muestreo del bentos se hallan cada vez ms difundidos,
fundamentalmente en razn de las considerables bajas de precio y aumento de la calidad
de los equipos disponibles. En Argentina, sin embargo la utilizacin de este equipamiento
sigue siendo rara. Para descripciones de equipos y modos de aplicacin se sugiere
consultar (entre otros):
Holme & McIntyre (1971), para generalidades del tema.
http:/www.deepsea.com , para equipos de televisin para aguas profundas.
http:/www.rosys.com, para equipos de televisin para aguas profundas.
Para la captura de peces bentnicos (y demersales) se han diseado un gran variedad de
artefactos, de los cuales las redes (y todas sus variantes) son slo una parte. Los ms
importantes de ellos sern considerados en el manual de Mtodos estndar para el
muestreo de peces (en preparacin).
48
5. PROTOCOLOS GENERALES
El ambiente a muestrear determina el tipo de equipo y forma de muestreo ms
adecuados, en general los muestreos o mediciones llevados a cabo en playas de arena o
fangos del intermareal, requieren de mtodos distintos de los aplicados a las costas
rocosas o los ambientes ubicados por debajo del nivel del agua. En este punto se
desarrollan los protocolos generales para el muestreo del bentos de los siguientes tipos
de ambientes:
a. Intermareal.
b. Aguas someras.
c. Aguas profundas.
d. Ros y arroyos.
e. Aguas receptoras de efluentes.
Por otra parte, el muestreo del bentos implica a tres diferentes tipos de objetivos que por
lo general son complementarios:
a. El muestreo de los organismos bentnicos (que puede a su vez tener diferentes
intereses como estudios de ecologa, dinmica de poblaciones, composicin qumica,
etc.).
b. El muestreo de la capa de agua adyacente al sustrato (o que puede estar contenida
en ste), para determinar las caractersticas principales de ste medio (en su relacin
con los organismos, como cuerpo receptor de contaminantes, etc.). En ocasiones y de
resultar conveniente, este muestreo puede ser extendido a toda la columna de agua.
c. El muestreo del sustrato, para su caracterizacin (en su relacin con los organismos,
como receptor de contaminantes, etc.).
De acuerdo a lo anterior, la variedad de objetivos e intereses existente torna dificultoso
que una sola tcnica de muestreo pueda ser utilizada en forma general y la experiencia
indica que a lo mximo, una tcnica en particular puede servir para cumplir con las
exigencias de dos o tres de estos fines.
49
A continuacin se describen en esta seccin, los protocolos generales de muestreo para
diferentes ambientes de estudio. Para protocolos ms detallados sobre temas
especficos (mediciones de campo, muestreos biolgicos, etc.) consultar las
secciones 6.1 a 6.5.
5.1. Muestreo en ambientes intermareales
Los ambientes intermareales son relativamente fciles de muestrear, ya que los equipos
utilizados son asimismo sencillos (por ejemplo cuadrados de muestreo) y no es necesario
el uso de buzos, botes u otras embarcaciones.
En el muestreo de ambientes intermareales resulta imprescindible el conocimiento previo
del rgimen de mareas del lugar y de la hora de ocurrencia, para el da (o das) de
muestreo, de la marea baja o de la alta. La eleccin de una u otra marea depende del
conocimiento previo que se tenga del lugar y de las caractersticas de ste. Por ejemplo,
cuando se debe muestrear con un transecto un sitio que no es conocido, conviene llevar
a cabo el muestreo con la marea baja, de modo de poder establecer la ubicacin del
mismo, evitando las discontinuidades y/o las reas de muestreo peligrosas. Por otra
parte, si el sitio es conocido o se asume que es uniforme (como ocurre en la mayora de
las playas arenosas), es conveniente comenzar a trabajar con la marea alta, ya que de
esta forma el muestreo es ms seguro y se evita que el agua que sube, nos desaloje de
un sitio en el que estamos trabajando.
La caracterizacin del agua en los muestreos intermareales puede tener diferentes fines.
Estas caracterizaciones tiene rasgos propios y en conjunto implican tanto mediciones de
campo, como muestreos de agua para la determinacin de parmetros en laboratorio. El
ms general de los objetivos, ya que se utiliza en todo tipo de costa, es la caracterizacin
del agua que es adyacente al sitio de muestreo: Si una sola muestra (con rplicas) fuera
suficiente, entonces se puede muestrear el agua de la localidad durante la marea baja; si
fuera necesario un muestreo ms detallado, se podra muestrear el agua adyacente a
medida que la marea cubre o descubre el punto de muestreo.
50
En las playas de sustratos blandos, se puede caracterizar el agua intersticial (agua
retenida en el interior del sedimento durante la bajamar). En las costas rocosas se puede
caracterizar el agua contenida en piletas de marea y encharcados (el agua que queda
retenida en oquedades del terreno durante la bajamar). El muestreo del agua de piletas
de marea y encharcados slo se practica si este tipo de ambientes es parte del muestreo.
Dentro de los ambientes intermareales, los rocosos son en general los de muestreo
menos complicado, ya que slo implican la determinacin del nivel (seccin 6.1.2) y el
uso de cuadrados de muestreo en la obtencin de las unidades muestrales para estudios
biolgicos (ver tipos de muestreo especficos en secciones 6.3 y 6.4). Como
complemento, puede ser necesario caracterizar el tipo de sustrato (seccin 6.2.7), para lo
cual se deben tomar muestras de roca representativas. Los muestreos de agua
adyacente y/o de piletas de marea (o encharcados) han sido considerados al principio de
la seccin.
Protocolo general para el muestreo del intermareal rocoso.
a. Determinar la hora a la cual la marea est alta o baja (a partir de Tabla). Comenzar las
actividades preparatorias del muestreo (en el sitio de trabajo) una o dos horas antes
de esta hora.
b. Marcar los niveles o estaciones de muestreo (utilizar marcas que puedan removerse) y
establecer la distancia vertical existente entre cada uno de ellos y/o entre stos y el
nivel de la marea baja del da.
c. En cada nivel tomar las muestras de acuerdo a los protocolos respectivos (para algas,
meiobentos, macrozoobentos, etc.). Asegurar un tamao de cuadrado de muestreo
representativo y un nmero suficiente de rplicas.
d. En cada nivel tomar una o ms muestras del sustrato.
e. Llevar a cabo las mediciones de campo del agua a nivel de la marea baja, o en cada
una de las estaciones de muestreo cuando el agua las cubra y/o si el muestreo las
incluye, en las piletas de marea.
f. Tomar las muestras de agua que correspondan para el muestreo de parmetros fsico-
qumicos que no pueden ser determinados en el campo. Esto puede ser llevado a
51
cabo a nivel de la marea baja (agua adyacente), en cada una de las estaciones de
muestreo cuando el agua la cubra y/o si el muestreo las incluye, en las piletas de
marea.
Los muestreos en el intermareal de fondos muebles (fangos, arenas, fangos arenosos,
etc.) son algo ms complejos que en las costas rocosas, ya que implican, adems de los
muestreos ya considerados, el muestreo de sedimentos y del agua intersticial. Los
muestreos biolgicos en particular, requieren de la excavacin del sustrato con una pala
(usando como lmite un cuadrado de referencia u otro tipo de delimitador), hasta una
profundidad que garantice que todos los organismos que interesan han sido
muestreados, la extraccin del sedimento y su tamizado para apartar los organismos
contenidos en la muestra.
Protocolo general para el muestreo del intermareal de fondos blandos.
a. Determinar la hora a la cual la marea est alta o baja (a partir de Tabla), elegir
preferentemente la marea alta.
b. Marcar los niveles o estaciones de muestreo (estacas), a medida que estos vayan
descubriendo y establecer la distancia vertical existente entre cada uno de ellos y/o
entre ellos y el nivel de la marea baja del da.
c. En cada nivel tomar las muestras de acuerdo a los protocolos respectivos (para
meiobentos, macrozoobentos, etc.). Asegurar un tamao de cuadrado de muestreo
representativo y un nmero suficiente de rplicas.
d. Vaciar el contenido de la muestra en un tamiz de la malla adecuada y tamizar (bajo
agua) para separar los organismos del sedimento. Guardarlos en recipientes (fijar si
fuera necesario) y etiquetar.
e. En cada estacin tomar muestras del sedimento con un muestreador de tubo tipo
Hope.
f. En cada estacin, cavar uno o ms pozos y llevar a cabo las mediciones de campo del
agua intersticial (uniformizar tiempos, por ejemplo hora luego de que el agua
abandona el nivel). Si corresponde, tomar tambin las muestras de agua que
correspondan para el muestreo de parmetros fsico-qumicos.
52
g. A nivel de la marea baja llevar a cabo las mediciones de campo del agua adyacente.
Tomar en el agua adyacente, las muestras de agua que correspondan para el
muestreo de parmetros fsico-qumicos.
5.2. Muestreo en aguas someras
Los muestreos de bentos en aguas someras comparten caractersticas de los muestreos
del intermareal y de aguas profundas, ya que si el rea de muestreo queda expuesta en
la bajamar, pueden seguirse los protocolos de la seccin anterior (seccin 5.1), en tanto
si el rea no queda expuesta nunca, puede ser muestreada con los equipos usados en el
muestreo de bentos profundo (seccin 5.3). Por otra parte, las aguas someras son objeto
de un conjunto de tcnicas de muestreo, el muestreo con buzos, que slo pueden ser
aplicados a este tipo de ambientes. Entre las tcnicas de muestreo exclusivas del
muestreo con buzos, se halla por ejemplo el uso de sorbonas.
La toma de muestras en sitios cercanos a la orilla y de escasa profundidad (menos de 2
m) se lleva a cabo siguiendo los protocolos generales de la seccin 5.1. La escasa
profundidad de trabajo, complica en gran medida el trabajo y a esto se agrega en
ocasiones, la agitacin del agua propia de estos ambientes someros (por ejemplo en
costas marinas abiertas). Los muestreos biolgicos y de sedimentos en ambientes muy
someros requieren muchas veces del muestreo con buzos que practiquen snorkeling.
En funcin de su especificidad dejamos su descripcin para la secciones 6.3 y 6.4.
La recoleccin de muestras en aguas someras ms alejadas de la orilla, requiere que al
menos uno de los miembros del grupo de trabajo sea prctico con la operacin de botes y
de la seguridad en los mismos. Dado que los muestreos con bote pueden o no implicar el
uso de buzos, las caractersticas del muestreo dependen de esta circunstancia. En
ausencia de buzos, las caracterizacin del agua y el muestreo del bentos se llevan a cabo
haciendo uso de los protocolos generales de la seccin 5.3.
No se recomienda que el buzo lleve a cabo el muestreo de agua para mediciones de
campo o determinaciones de laboratorio, ya que esto le quita un tiempo valioso y la
53
probabilidad de contaminacin de las muestras es alta. Se sugiere en cambio el uso de
electrodos mltiples y/o botellas de muestreo desde el bote y antes de que el buzo
comience su trabajo.
Si bien es posible el uso de cuadrados de muestreo en el muestreo con buzos, la prdida
de material puede llegar a ser importante; se sugiere usar este mtodo de muestreo slo
cuando el principal objetivo del muestreo sea el estudio de organismos bentnicos ssiles
(macroalgas y macrofauna), asentados sobre sustratos rocosos. Mejor adaptados al
muestreo con buzos son los mtodos que usan sorbonas o air lifts para la captura de los
organismos; las sorbonas pueden aplicarse a sustratos duros o blandos con escasas
modificaciones en el diseo del equipo.
Por lo general, cada una de las muestras de sorbona est asociada a una muestra de
sedimento la cual es tomada de un sitio cercano a la ubicacin del delimitador (10-15
cm). Es comn que estas muestras se obtengan mediante un muestreador de Hope, cuyo
largo depende de la profundidad de muestreo deseada, la cual a su vez est en funcin
de la profundidad de muestreo realizada con la sorbona, la cual por lo general se halla
entre los 15 y los 30 cm.
Protocolo general para el muestreo del bentos de aguas someras (con buzo)
a. Anclar el bote, ubicar la estacin de muestreo (con GPS) y tomar la profundidad con
ecosonda. Anotar estos valores en la libreta de campo.
b. Tomar mediciones de campo con una sonda multiparmetro en la capa de agua
adyacente al fondo. En caso de que el cable de la sonda no alcance el fondo, tomar
una muestra con una botella Van Dorn para llevar a cabo las mediciones de campo en
la cubierta del bote (ver protocolo en la seccin 6.1). Para otros parmetros de campo
(no contenidos en sonda mltiple), usar los equipos correspondientes (luz,
transparencia, etc.). Anotar las lecturas correspondientes.
c. Con una botella Van Dorn obtener una muestra de agua de fondo. Llenar las botellas
de muestreo necesarias (ver protocolos en las secciones 6.1 a 6.3).
d. Tomar las muestras de organismos bentnicos con un cuadrado de muestreo y/o una
sorbona (ver protocolos en seccin 6.4).
54
e. Con un muestreador de tubo tomar una muestra de sedimento o alternativamente una
muestra representativa de roca para su identificacin.
5.3. Muestreo en aguas profundas.
La recoleccin de muestras de bentos en aguas profundas requiere que al menos uno de
los miembros del grupo de trabajo sea prctico con la operacin de botes y de la
seguridad en los mismos. Es deseable obtener previamente a la partida, de un pronstico
del tiempo fiable; ya que si las condiciones predichas son malas, es casi siempre
conveniente posponer la campaa.
Por otra parte, es probable que la campaa en aguas profundas se lleve a cabo desde un
barco especialmente preparado para la toma de este tipo de muestras (embarcacin
provista de un motor de propulsin, guinches para el manejo de muestreadores y al
menos un rea de para trabajo a cubierto en la elaboracin de las muestras) El muestreo
desde barcos se parece al muestreo desde botes, si bien los primeros estn
especficamente preparados para la toma de muestras en aguas profundas.
El muestreo del bentos profundo, implica siempre el uso de equipos generalmente
complejos, para la toma de las muestras. Por ejemplo las muestras biolgicas o de
sustrato son obtenidas con dragas o rastras (descriptas en la seccin 4), en tanto que las
muestras de agua son tomadas usualmente con botellas de muestreo de tipo Van Dorn (o
similares).
Los muestreos con dragas y rastras pueden ser tanto alternativos como
complementarios. En consideracin del alto costo bsico de las campaas, resulta
conveniente llevar a cabo ambos tipos de muestreo, siempre y cuando esto sea posible.
Las botellas Van Dorn han sido diseadas para muestrear a profundidades del orden de 2
m o mayores y un equipo tpico consiste en un tubo abierto de material plstico, donde las
dimensiones dependen de la capacidad de la botella (2 o ms litros) y cuyos dos
extremos pueden ser cerrados por un par de cierres de goma (sopapas), que ajustan
55
hermticamente. Se debe observar que las botellas Van Dorn estn disponibles tanto en
configuracin vertical como horizontal. La ventaja de la configuracin vertical es que el
agua fluye a travs de la botella a medida que esta es descendida y de esta manera se
garantiza de que el agua obtenida corresponde a la profundidad deseada. La ventaja de
la configuracin horizontal es que la muestra corresponde a un rango vertical muy
estrecho. Las botellas verticales son usadas en el muestreo de la columna de agua en
ambientes marinos y lagos grandes y profundos, en tanto que las botellas horizontales se
usan en lagunas, en muestras que deben ser colectadas justo por encima o por debajo de
la termoclina u obtenidas muy cerca del fondo.
Protocolo general para el muestreo del bentos en aguas profundas.
a. Llevar a cabo el muestreo del agua prxima al fondo con una botella Van Dorn o
equivalente (alternativamente llevar a cabo un casting de la columna de agua,
incluyendo una muestra cercana al fondo). Tomar la ubicacin de la estacin con GPS
y determinar su profundidad (anotar hora)
b. Tomar una o ms muestras con draga (para muestreos cuantitativos). Anotar la
ubicacin, profundidad y hora de cada lance de draga.
c. Una vez la draga en cubierta, abrir la tapa de muestreo superior y tomar con la ayuda
de un muestreador de tubo una o ms muestras del sedimento colectado,
preferentemente en la parte central de la muestra (hasta unos 10 cm de profundidad).
Guardar estas muestras debidamente identificadas.
d. Con un muestreador de jeringa tomar una o ms muestras de meiofauna, tambin de
la parte central de la muestra obtenida con draga. Guardar estas muestras
debidamente identificadas.
e. Vaciar el restante contenido de la draga en un cajn plstico y proceder a tamizar la
muestra. Elaborar la muestra. Lavar la draga cuidadosamente.
f. En forma complementaria o alternativa llevar a cabo uno o ms lances con una rastra
(u otros equipos de tipo cualitativo). Anotar la ubicacin (GPS) del inicio y del final de
cada lance de rastra, su profundidad y hora. Estandarizar el tiempo de los lances.
g. Una vez recuperada la rastra, vaciar su contenido en uno o ms cajones o bandejas
grandes. Elaborar la muestra. Lavar la rastra cuidadosamente.
56
5.4. Muestreo de ros y arroyos
El muestreo del bentos en ros y arroyos, es en esencia equivalente al muestreo que
puede llevarse a cabo en aguas someras, en consecuencia la variedad de tcnicas
aplicables es grande. Cuando la turbulencia del curso de agua es notoria se puede
admitir que la mezcla vertical es completa; en estas circunstancias es suficiente para la
caracterizacin del agua, con la toma de muestras de superficie, en caso contrario tomar
mediciones o muestras del agua adyacente al fondo.
Cada vez que sea posible, las muestras deben ser colectadas en el medio de la corriente
en lugar de la orilla. Las muestras tomadas en el medio de la corriente reducen las
probabilidades de contaminacin (efectos de orilla, remolinos, concentraciones debidas al
viento en aguas de baja velocidad, etc.). A veces es posible llegar al centro de la corriente
por vadeo, en otras ocasiones a travs de puentes o bien mediante el uso de botes.
El aspecto ms importante a tener en cuenta durante la toma de muestras es la
seguridad. No vadear nunca ros o arroyos que aparezcan como turbulentos, profundos
o turbios. Utilizar una soga de seguridad amarrada a la orilla en caso de duda.
Cuando el caudal del ro es grande, es conveniente el muestreo desde un puente o desde
un bote. En este ltimo caso, considerando que las aguas con mucho caudal son
peligrosas, es condicin que la persona que maneje la embarcacin de muestreo sea una
persona con amplia experiencia. Idealmente debe haber tres personas a borde del bote,
dos de ellas dedicadas a la toma de las muestras y a la libreta de campaa y la tercera la
manejo del bote. Los recorridos de muestreo deben comenzar aguas debajo de la zona
de inters y terminar aguas arriba de sta.
Siempre y cuando las caractersticas del sustrato lo permitan (ej. escasa cantidad de
cantos rodados o piedras), las muestras biolgicas o de sedimento pueden ser obtenidas
desde botes o puentes con los mtodos descriptos en secciones anteriores, como por
ejemplo el uso de buzos para el muestreo de macrofitas de la orilla con cuadrados de
muestreo, o bien el uso de equipos de muestreo (dragas, rastras, etc.), cuando el ro es
57
ms profundo o existe peligro para los buzos. Remitimos en consecuencia a las
secciones donde se describen estos protocolos generales (5.2 y 5.3).
En el muestreo de sedimentos en las reas profundas de ros y arroyos, raramente se
utilizan muestreadores de tubo, ya que estos equipos requieren para su correcto
funcionamiento de ambientes con caudales muy bajos. Alternativamente, los
muestreadores de tubo pueden ser utilizados con provecho en ambientes lticos poco
profundos (an con corrientes fuertes), simplemente empujando el muestreador (tipo
Hope) dentro del sedimento y recuperndolo manualmente.
En adicin a los mtodos anteriores, para el muestreo de macroinvertebrados en ros y
arroyos es usual disponer de algunos equipos que son especficos para ambientes
lticos, tales como los muestreadores de Surber y Hess.
Protocolo general para el muestreo de ros y arroyos vadeables
a. Vadear el curso de agua hasta su parte central y llevar a cabo el muestreo con
muestreador de Surber o Hess (muestras compuestas o no), volver a la orilla para
vaciar la red. Replicar de ser necesario.
b. Volver a vadear el curso y tomar las muestras correspondientes a parmetros fsico-
qumicos con las botellas necesarias. Identificar y guardar las botellas en una bolsa de
red.
c. Tomar las mediciones de campo correspondientes y anotar los valores en la libreta de
campo. Volver a la orilla y guardar las botellas en heladera con ice-packs.
d. Llevar a cabo las mediciones de caudal.
Protocolo general para el muestreo de ros y arroyos no vadeables
a. Llevar a cabo el muestreo con bote (alternativamente desde un puente o muelle).
Tomar las muestras correspondientes a parmetros fsico-qumicos utilizando una
botella de Van Dorn o con una vara de muestreo y las botellas necesarias. Identificar y
guardar las botellas en una heladera con ice-packs.
b. Manteniendo las referencias de costa (misma estacin de muestreo), tomar las
mediciones de campo correspondientes y anotar los valores en la libreta de campo.
58
c. En la parte central del curso de agua llevar a cabo el muestreo de bentos con una
draga o rastra (en este caso procurar que el bote marche hacia aguas arriba,
uniformizar tiempo de rastreo). Recoger la draga o rastra y vaciar su contenido en un
cajn o bandeja e identificar. Lavar el equipo cuidadosamente a un costado del bote.
Avanzar algo aguas arriba y replicar de ser necesario.
d. Llevar a cabo las mediciones de caudal a lo ancho del curso
5.5. Muestreo en aguas receptoras de efluentes.
Los efluentes pueden ser definidos como aguas servidas que fluyen hacia un cuerpo de
agua o ro/arroyo). El muestreo del bentos de aguas receptoras de efluentes no difiere de
lo ya especificado en esta seccin para distintos tipos de ambientes acuticos, en
consecuencia se remite a las secciones especficas.
Nota: Esto contrasta con los muestreos de agua en efluentes y aguas receptoras de
stos, los cuales s tienen protocolos especficos (ver Zaixso (2002): Manual de campo
para el muestreo de la columna de agua),
59
6. AGUA ADYACENTE, MEDICIONES DE CAMPO Y MUESTREOS ESPECIFICOS
La coleccin de muestras bentnicas puede ser clasificada en cuanto a las caractersticas
de obtencin. Por ejemplo una parte del muestreo se puede referir a aquellos parmetros
(generalmente fsico-qumicos) que son obtenidos en el campo en forma directa, ya que
son el producto del uso de sensores especficos cuya lectura se hace en el momento
(mediciones de campo). Otros muestreos puede consistir en la toma de muestras
formales, las cuales deben ser obtenidas, adecuadamente conservadas y enviadas para
ser analizadas en otro sitio (por ejemplo un laboratorio), ya que son complejas de analizar
(muestras biolgicas, tamao de partculas) o los equipos utilizados para evaluar el
parmetro no son porttiles (hidrocarburos, metales pesados) o no es posible
trasladarlos. Este tipo de muestreo puede referirse tanto al medio (muestreo de
parmetros fsico-qumicos), como a los organismos que viven en l (muestreos
biolgicos).
Dado que una parte importante de las mediciones de campo y de los muestreos de
parmetros fsico-qumicos se refiere al agua adyacente, compartiendo metodologas
comunes de muestreo, la primera parte de la seccin encarar la descripcin de los
protocolos generales para la toma de muestras de agua adyacente, para luego seguir con
los protocolos especficos para las mediciones de campo y la toma de muestras fsico
qumicas.
6.1. El muestreo del agua adyacente
En la mayor parte de los estudios bentnicos resulta conveniente poder establecer las
caractersticas que presenta el agua contigua al bentos. Esta caracterizacin tiene entre
otros objetivos relacionar las caractersticas biolgicas de las muestras con las del agua
circundante o bien estudiar dicha agua como cuerpo receptor de contaminantes. En
ocasiones, resulta provechoso extender el muestreo del agua circundante a toda la
columna de agua.
60
Como fuera indicado, el muestreo del agua contigua incluye aspectos de tanto de las
mediciones de campo como del muestreos para la determinacin de parmetros en
laboratorio.
En los muestreos intermareales, la caracterizacin del agua puede tener diferentes
finalidades. La ms general de ellas, ya que puede utilizarse en todo tipo de costa, es la
caracterizacin del agua que es adyacente al sitio de muestreo. Existen aqu dos
alternativas: el muestreo del agua de la localidad durante la marea baja o bien el
muestreo del agua adyacente a medida que la marea cubre o descubre cada estacin o
nivel de muestreo.
El muestreo del agua adyacente en la zona de la orilla, generalmente consiste en
muestras de inmersin tomadas en puntos especficos. Es importante que no haya
cambios en la ubicacin de la estacin de trabajo cuando se trata de muestreos
peridicos. En caso de que por razones de fuerza mayor, la ubicacin deba ser cambiada
por otra alternativa a sta, la descripcin de la nueva estacin y las razones del cambio
debern incluirse en la libreta de campo. Para evitar la contaminacin de las muestras a
partir de sedimentos resuspendidos, el colector de la muestra debe tomarla
preferiblemente en el punto donde las olas no remuevan el fondo. En el mar abierto, este
sitio a veces se halla ms all de la altura de una persona o una profundidad tal que
permita al agua entrar dentro del wader del muestreador. En estos casos en
conveniente el uso de un equipo de neopreno o equivalente, particularmente durante los
perodos fros del ao.
Protocolo para la caracterizacin del agua adyacente
a. Tomar los diferentes parmetros permitidos por la sonda o electrodo (en el caso de
oxgeno disuelto mover verticalmente la sonda o el electrodo a unos 30 cm por
segundo). Utilizar otros equipos de ser necesario (pH, luz, turbidez, redox, etc.).
b. En caso de que se necesiten muestras para su anlisis de laboratorio utilizar botellas
etiquetadas (las etiquetas pueden estar previamente llenas) y esterilizadas (para
bacteriologa). Se pueden llevar varias botellas en una bolsa de red para obtener
61
varias unidades muestrales de un solo vadeo. Internarse en el agua hasta el punto
donde no se observen sedimentos resuspendidos.
c. En este punto esperar 2 a 3 minutos para asegurar que los sedimentos levantados por
accin del vadeo puedan asentarse.
d. Si fuera necesario lavar la botella proceder desde el paso d, en caso contrario ir
directamente al paso j.
e. Tomar la botella por el cuello con una mano, remover la tapa de la botella con la otra y
tenerlo a un lado, sin tocar su superficie interna ni la parte interna de la tapa con la
mano u otros objetos.
f. Con un movimiento lento y continuo sumergir la botella dirigindola hacia delante
(hacia agua abiertas), llevndola por debajo de la superficie a una profundidad
uniforme hasta que se llene parcialmente (por lo general dos profundidades utilizadas
para muestras de superficie son 0,1 y 0,5 m). De esta forma el agua es forzada a
entrar en la botella sin que tome contacto con la mano del operador. Esta operacin
se puede llevar a cabo para varias botellas en forma sucesiva.
g. Reponer la tapa y agitar vigorosamente.
h. Remover la tapa y yendo algo hacia la orilla volcar el agua de la botella.
i. Repetir los pasos d a g un par de veces ms antes de colectar la muestra. Puede
observarse la conveniencia de trabajar con recipientes previamente limpiados.
j. Tomar la botella por el cuello con una mano, remover la tapa de la botella con la otra
y tenerlo a un lado, sin tocar su superficie interna ni la parte interna de la tapa con la
mano u otros objetos.
k. Con un movimiento lento y continuo sumergir la botella dirigindola hacia delante
(hacia agua abiertas), llevndola por debajo de la superficie a una profundidad
uniforme hasta que se llene. De esta forma el agua es forzada a entrar en la botella
sin que tome contacto con la mano del operador.
l. Eliminar de la botella agua suficiente como para permitir un espacio de 2,5 a 5 cm de
aire por encima de la muestra. Reponer la tapa inmediatamente. Completar la etiqueta
externa y rotular el frasco externamente (en el tapn o el costado) en forma abreviada
(por ejemplo Estacin, fecha y nmero de unidad muestral).
62
m. Proceder a tomar las mediciones de campo de acuerdo a instrucciones de los
electrodos (o sonda multiparmetro) utilizados (consultar seccin 6.1). Anotar los
valores en la libreta de campo.
n. Volver a la costa y colocar las botellas con muestras en una heladera con ice-pack en
cantidad suficiente (relacin volumen de ice-pack a volumen de muestras 2:1 en
verano y 1:1 en invierno) hasta que el tiempo y las condiciones permitan llevar a cabo
otros procedimientos (filtracin y/o preservacin de ser necesarios, embalaje).
En las costas rocosas se puede caracterizar el agua contenida en piletas de marea y
encharcados (el agua que queda retenida en oquedades del terreno durante la bajamar).
El muestreo del agua de piletas de marea y encharcados slo se practica si este
particular tipo de ambientes forma parte del muestreo del bentos. En las piletas de
marea, los valores de los parmetros obtenidos en las mediciones de campo o en las
muestras de parmetros fsico-qumicos son muy variables ya que dependen en alto
grado de la temperatura, luz, altura de la marea, etc. A no ser que se est particularmente
interesado en el estudio de su variabilidad, se debe estandarizar el muestreo para
hacerlos comparables. Un ejemplo de estandarizacin es su muestreo en el momento
previo a que el agua de la pileta comience a recambiarse por efecto de la marea que
sube.
Protocolo para la caracterizacin del agua en piletas de marea (y/o encharcados)
a. Estandarizar el momento para la toma de datos o muestras.
b. Tomar los diferentes parmetros permitidos por la sonda o electrodo (en el caso de
oxgeno disuelto mover verticalmente la sonda o el electrodo a unos 30 cm por
segundo). Utilizar otros equipos de ser necesario (pH, luz, turbidez, redox, etc.).
c. En caso de que se necesiten muestras para su anlisis de laboratorio, tomar las
muestras de inmersin necesarias en botellas limpias, sin tocar su superficie interna ni
la parte interna de la tapa con la mano u otros objetos. Usar guantes descartables
para no contaminar la muestra con las manos (ya que la cantidad de agua contenida
en una pileta de marea es limitada).
d. Una vez obtenidas las muestras (y sus rplicas), colocar las botellas en una heladera
con ice-pack en cantidad suficiente (relacin volumen de ice-pack a volumen de
63
muestras 2:1 en verano y 1:1 en invierno) hasta que el tiempo y las condiciones
permitan llevar a cabo otros procedimientos (filtracin y/o preservacin de ser
necesarios, embalaje).
En las playas de sustratos blandos, se puede caracterizar el agua intersticial (agua
retenida en el interior del sedimento durante la bajamar). El muestreo del agua intersticial
es parte fundamental de la caracterizacin de las playas de sustratos blandos,
particularmente cuando el objetivo del muestreo es el estudio de la micro-meiofauna.
Como en el caso del agua de piletas de marea, el valor de diferentes parmetros del agua
intersticial cambia con el tiempo transcurrido entre que el agua abandona el sitio y el
momento del muestreo y asimismo es funcin de la profundidad. Puede ser apropiado
uniformizar la profundidad de muestreo a la profundidad de la tabla de agua (agua
permanente) y el momento del muestreo a un tiempo estndar luego de que el agua de la
marea bajante, abandona el sitio de muestreo (30 minutos por ejemplo).
Protocolo para la caracterizacin del agua intersticial
a. Cavar a pala un pozo que llegue ms all del nivel de la tabla de agua (usualmente
unos 40 cm de profundidad).
b. Insertar en ste, lo ms ajustadamente posible, un tubo plstico de unos 50 cm de
largo y con un dimetro suficiente como para alojar a una sonda multiparmetro ( o a
los electrodos individuales); el extremo inferior del tubo se cierra con una malla de 1
mm o menos de abertura, para evitar el pasaje excesivo de arena hacia dentro del
tubo y el agua dentro de ste debe alcanzar al menos unos 20 cm de alto.
c. Tomar los diferentes parmetros permitidos por la sonda (en el caso de oxgeno
disuelto mover verticalmente la sonda o el electrodo a unos 30 cm por segundo). En
caso de que se necesiten muestras para su anlisis de laboratorio, tomar las muestras
de inmersin necesarias en botellas limpias, sin tocar su superficie interna ni la parte
interna de la tapa con la mano u otros objetos. Usar guantes descartables.
d. Una vez obtenidas las muestras (y sus rplicas), colocar las botellas en una heladera
con ice-pack en cantidad suficiente (relacin volumen de ice-pack a volumen de
muestras 2:1 en verano y 1:1 en invierno) hasta que el tiempo y las condiciones
64
permitan llevar a cabo otros procedimientos (filtracin y/o preservacin de ser
necesarios, embalaje).
La caracterizacin del agua en sitios de escasa profundidad (menos de 2 m) se lleva a
cabo mediante el mismo protocolo que para el muestreo del agua adyacente; la escasa
profundidad de trabajo, complica en gran medida el trabajo y a esto se agrega en
ocasiones, la agitacin del agua propia de estos ambientes someros (por ejemplo en
costas marinas abiertas). A mayores profundidades (2 a 20 m) las tcnicas de muestreo
pueden implicar el uso de botes provistos de sondas multiparmetro o botellas van Dorn.
Protocolo para la caracterizacin de aguas someras (3 a 25 m)
a. Ubicar la estacin de muestreo (con GPS).
b. Anclar el bote y tomar la profundidad con ecosonda.
c. Bajar una sonda multiparmetro o los electrodos correspondientes hasta llegar a la
capa de agua adyacente al fondo. Evitar tocar ste con la sonda o electrodos, dado
que podran arruinarse. Anotar las lecturas correspondientes.
d. En caso de que el cable de la sonda no alcance el fondo, tomar una muestra con una
botella Van Dorn para llevar a cabo las mediciones de campo (ver protocolo en
seccin 6.2).
e. Para otros parmetros de campo (no contenidos en sonda mltiple), usar los equipos
correspondientes (luz, transparencia, etc.). Anotar las lecturas correspondientes.
f. Con una botella Van Dorn obtener una muestra de agua de fondo. Llenar las botellas
de muestreo necesarias para tal fin (ver protocolo algo ms adelante).
e. Colocar las botellas en una heladera con ice-pack en cantidad suficiente (relacin
volumen de ice-pack a volumen de muestras 2:1 en verano y 1:1 en invierno) hasta
que el tiempo y las condiciones permitan llevar a cabo otros procedimientos (filtracin
y/o preservacin de ser necesarios, embalaje).
El muestreo de agua a profundidades mayores de 20 m implica necesariamente el uso de
botellas de muestreo de tipo Van Dorn o equivalentes. Las botellas Van Dorn han sido
diseadas para obtener muestras a profundidades del orden de 2 m o mayores y un
equipo tpico consiste en un tubo abierto de material plstico, donde las dimensiones
65
dependen de la capacidad de la botella (2 a 20 litros) y cuyos dos extremos pueden ser
cerrados por un par de cierres de goma (sopapas), que ajustan hermticamente. La
botella posee a un lado un mecanismo de sostn y disparo, que suelta a los cierres de
goma cuando es activado por un mensajero enviado desde superficie. En uno de sus
costados la botella cuenta con una vlvula de drenaje, a travs de la cual se puede vaciar
el contenido de la botella.
Se debe observar que las botellas Van Dorn estn disponibles tanto en configuracin
vertical como horizontal. La ventaja de la configuracin vertical es que el agua fluye a
travs de la botella a medida que esta es descendida y de esta manera se garantiza de
que el agua obtenida corresponde a la profundidad deseada. La ventaja de la
configuracin horizontal es que la muestra corresponde a un rango vertical muy estrecho.
Las botellas verticales son usadas en el muestreo de la columna de agua en ambientes
marinos y lagos grandes y profundos, en tanto que las botellas horizontales se usan en
lagunas, en muestras que deben ser colectadas justo por encima o por debajo de la
termoclina u obtenidas muy cerca del fondo.
Sea cual fuere el modelo o configuracin de la botella, resulta bastante dificultoso poder
bajar la botella a una distancia cercana al fondo (en general unos 50 cm), sin tocar a ste
y levantar en consecuencia una nube de sedimentos resuspendidos. Para evitar este tipo
de contaminacin de la muestra de agua, es posible adaptar la botella de manera tal que
el mecanismo de cierre se active, no por el envo de un mensajero desde superficie, sino
por el contacto de una varilla rgida de metal contra el fondo. Para una botella de
configuracin vertical es apropiado hacer los siguientes cambios (adaptar para otras
configuraciones):
- Hacer que el disparador (pieza de metal que recibe el impacto del mensajero) y la
vlvula de drenaje se hallen del mismo extremo de la botella. Para ello aflojar las
abrazaderas que unen el mecanismo de sostn y disparo al cuerpo de la botella y
volver a ajustarlo invertido. El extremo inferior de la botella se define ahora por la
presencia de la vlvula de drenaje y del disparador.
66
- Destornillar la pieza metlica que se halla en el extremo del disparador (la que recibe
el impacto del mensajero), de forma que quede expuesto el extremo roscado del
disparador.
- Preparar una varilla rgida de bronce de unos 60 cm de largo, con extremo superior
roscado y una placa de bronce soldada a su extremo inferior. Esta pieza es la que
tomar contacto con el fondo y accionar el mecanismo de disparo de la botella.
- Unir el extremo roscado de la varilla con el extremo roscado del disparador mediante
una tuerca larga de bronce.
Protocolo para uso de botellas Van Dorn.
a. Amarrar la botella a la soga con la que ser descendida (soga con marcas).
b. Abrir la botella Van Dorn tirando de los cierres de goma de los extremos. No tocar las
superficies internas de la botella o de los cierres (particularmente si parte de la
muestra va a ser utilizada en bacteriologa).
c. Armar el mecanismo de disparo de acuerdo a instrucciones del fabricante.
d. Bajar la botella a la profundidad deseada, asegurarse que el extremo de la soga est
atado al bote.
e. Si la botella no es de cierre automtico (por contacto de un disparador con el fondo),
entonces colocar el mensajero en la soga y enviarlo para que suelte el mecanismo de
disparo y la botella se cierre.
f. Recuperar la botella.
g. Abrir la vlvula de drenaje y dejar que fluya algo del agua contenida. De esta manera
se reduce la posibilidad de que muestras anteriores contaminen la muestra actual.
h. Utilizar el agua contenida en la botella para las mediciones de campo y para el
muestreo de parmetros fsico-qumicos.
i. Para mediciones de campo seguir los protocolos correspondientes de la seccin 6.1.
j. Para muestreos de parmetros fsico-qumicos, tomar una o ms botellas para
almacenamiento de muestras y lavarlas tres veces (si stas no han sido prelavadas)
antes de colectar la muestra. Transferir el agua desde la botella Van Dorn a una
botella de muestreo, usando la vlvula de drenaje. Procurar no tocar el extremo de la
vlvula de drenaje, el interior del tapn de la botella ni el agua que sale por la vlvula.
67
k. Tapar la botella, completar la etiqueta externa, rotular en forma abreviada y guardar
en heladera con ice-pack en cantidad suficiente (relacin volumen de ice-pack a
volumen de muestras 2:1 en verano y 1:1 en invierno). Proceder con la muestra
siguiente.
l. Las muestras que requieran filtracin y/o preservacin deben ser elaboradas cuando
se retorne a la costa.
Es usual en los muestreos desde embarcaciones grandes el descenso en cada estacin
de varias botellas simultneamente para muestrear, adems del agua prxima al fondo,
varias profundidades de la columna de agua al mismo tiempo. Este procedimiento se
denomina perfilado o casting y para llevarlo a cabo, cada botella de la lnea (excepto la
inferior) se arma junto con un mensajero de manera tal que al activarse el disparador de
la botella ubicada en el extremo superior, se suelta de sta un mensajero que activa a la
segunda botella y as sucesivamente. Es usual que en las embarcaciones de muestreo
grandes haya a bordo personal de marinera entrenado en todos los aspectos del armado
de un casting, por lo que evitaremos aqu su descripcin. Una vez que las botellas de
muestreo (Van Dorn u otras) se hallan fuera del agua, el procedimiento es como se ya se
describiera en esta misma seccin.
El muestreo del bentos en ros y arroyos, es en esencia equivalente al muestreo que
puede llevarse a cabo en aguas someras, en consecuencia la variedad de tcnicas
aplicables es grande. Cuando la turbulencia del curso de agua es notoria se puede
admitir que la mezcla vertical es completa; en estas circunstancias es suficiente para la
caracterizacin del agua, con la toma de muestras de superficie, en caso contrario tomar
mediciones o muestras del agua adyacente al fondo.
Cada vez que sea posible, las muestras deben ser colectadas en el medio de la corriente
en lugar de la orilla. Las muestras tomadas en el medio de la corriente reducen las
probabilidades de contaminacin (efectos de orilla, remolinos, concentraciones debidas al
viento en aguas de baja velocidad, etc.). A veces es posible llegar al centro de la corriente
por vadeo, en otras ocasiones a travs de puentes o bien mediante el uso de botes.
68
El aspecto ms importante a tener en cuenta durante la toma de muestras es la
seguridad. No vadear nunca ros o arroyos que aparezcan como turbulentos, profundos
o turbios. Utilizar una soga de seguridad amarrada a la orilla en caso de duda.
Protocolo para la caracterizacin del agua (por vadeo)
a. Tomar los diferentes parmetros permitidos por la sonda o electrodo (en el caso de
oxgeno disuelto mover verticalmente la sonda o el electrodo a unos 30 cm por
segundo). Utilizar otros equipos de ser necesario (luz, transparencia, redox, etc.).
Anotar valores obtenidos en libreta de campo.
b. En caso de que se necesiten muestras para su anlisis de laboratorio utilizar botellas
etiquetadas (las etiquetas pueden estar previamente llenas) y esterilizadas (para
bacteriologa). Se pueden llevar varias botellas en una bolsa de red para obtener
varias unidades muestrales de un solo vadeo. Internarse en el agua hasta el punto
donde no se observen sedimentos resuspendidos.
c. Ubicarse perpendicularmente al flujo con la cara hacia ste.
d. Remover el tapn de la una botella sin tocar su cara interna. Si algn lavado es
necesario, llenar y vaciar tres veces.
e. Con la otra mano tomar la botella por debajo del cuello, sumergirla bajo el agua (cerca
del fondo) orientando la boca hacia abajo e inmediatamente contra la corriente. Evitar
colectar suciedad u otras pelculas de la superficie.
f. Una vez la botella llena, sacarla del agua con un movimiento hacia la corriente y
reponer el tapn. Identificar, guardar en una bolsa de red y proceder con la siguiente
muestra hasta terminar.
g. Retornar a la orilla y guardar las muestras en heladera (con ice-packs).
. Cuando la corriente sea muy fuerte, el agua sea muy profunda o la turbidez impida ver
cuan profundo es el cauce, es ms seguro llevar a cabo el muestreo desde la orilla. En
ocasiones es posible utilizar una vara de muestreo, la cual en su forma ms simple es un
tubo de plstico rgido o metal (aluminio) de unos 2 m de largo, en cuyo extremo se ata o
sujeta la botella de muestreo. Existen modelos a la venta que permiten abrir y cerrar la
botella en el momento del muestreo.
69
Protocolo para la caracterizacin del agua desde la orilla
a. Asegurarse a algn objeto slido de la costa con una soga de seguridad. Como
medida extra de precaucin, una segunda persona debe estar cerca de la que est
muestreando.
b. Proceder a tomar las mediciones de campo, en la medida de los posible con una
sonda multiparmetro. Anotar en la libreta de campo.
c. Para muestreos a analizar en laboratorio utilizar botellas de muestreo prelavadas. Las
botellas pueden llevarse en una bolsa de red (atada a la cintura).
d. Remover el tapn de la botella y colocarlo dentro de una bolsa plstica limpia y
resellable (tipo Zip Lock), de manera tal que ambas manos estn disponibles para la
toma de la muestra.
e. Tomar la botella por el cuello o asegurarla a una vara de muestreo.
f. Extender el brazo (o ambos brazos con una vara de muestreo) y sumergir la botella
con su boca orientada primero hacia abajo e inmediatamente hacia la corriente (cerca
del fondo).
g. Una vez la botella llena, sacarla del agua con un movimiento hacia la corriente y
reponer el tapn. Identificar, guardar en una bolsa de red y proceder con la siguiente
muestra hasta terminar.
h. Retornar a la orilla y guardar las muestras en heladera (con ice-packs).
Algunas estaciones pueden ser muestreadas desde puentes. Esto permite el muestreo de
agua en la zona central de la corriente cuando el vadeo no es una opcin. Las muestras
pueden ser tomadas con un muestreador mltiple, el cual es bajado por el lateral del
puente. Dado que los muestreadores mltiples pueden contener varias botellas de
muestreo, es conveniente tomar todos las muestras necesarias a la vez (todas las
variables). Este permite ahorrar tiempo y esfuerzo y potencialmente adems una
correspondencia ms ajustada entre las variables obtenidas. Por supuesto que si se
carece de un muestreador mltiple, es posible trabajar bajando de a una botella a la vez
(provista de un lastre en su parte inferior para que se hunda fcilmente) o si la
profundidad lo permite, bajar una botella de Van Dorn de configuracin horizontal.
70
Cuando el caudal del ro sea grande, es conveniente el muestreo desde un bote.
Considerando que las aguas con mucho caudal son peligrosas, es condicin que la
persona que maneje el bote de muestreo sea una persona con amplia experiencia.
Idealmente debe haber tres personas a borde del bote, dos de ellas dedicadas a la toma
de las muestras y a la libreta de campaa y la tercera la manejo del bote. Los recorridos
de muestreo deben comenzar aguas debajo de la zona de inters y terminar aguas arriba
de sta.
Protocolo para la caracterizacin del agua (con bote)
a. Cuando se alcanza el sitio de muestreo el operador del bote debe maniobrar en la
corriente de manera tal de mantener el bote sobre un mismo sitio. Usar alguna
referencia de la costa para lograrlo.
b. La persona en la proa es la responsable por la toma de las muestras con botellas (ver
seccin 6.2), ya sea en forma directa (muestras de superficie) o bien de fondo a
travs de una botella Van Dorn de configuracin horizontal.
c. La tercera persona es la responsable por las mediciones de campo (ver seccin 6.1).
6.2 Mediciones de campo
Las mediciones de campo son aquellas que por lo general son obtenidas en el campo con
el auxilio de equipamiento ms o menos especializado y que no implican la toma de
muestras para la determinacin de parmetros en laboratorio. Dado que diferentes
modelos de equipos estn disponibles para la medicin de diferentes variables, en esta
seccin se discute su uso slo bajo una perspectiva general. Los encargados del
muestreo deben referirse a la documentacin provista por el fabricante. Un manual de
uso (preferiblemente una fotocopia) del equipo debe ser llevado junto con el instrumento
en todo momento y el mismo debe documentar la calibracin, operacin y mantenimiento
del equipo.
Varias de las mediciones de campo en estaciones de aguas someras o profundas son por
completo equivalentes a las mediciones correspondientes de la columna de agua
(temperatura, pH, oxgeno disuelto, etc.). Por otra parte, a diferencia del muestreo de la
71
columna de agua, donde se tiene inters en toda ella, los muestreos de agua en estudios
bentnicos pueden ser restringidos o limitados slo a la capa de agua en contacto con el
fondo.
6.2.1 Mareas
Las mareas de un sitio no son en realidad, excepto raras ocasiones, objeto de mediciones
de campo, ya que prcticamente todas las localidades de la costa de Argentina tienen sus
alturas de marea tabuladas en las Tablas publicadas por el Servicio de Hidrografa Naval,
debindose consultar las tablas especficas para el ao en curso. Para el caso de
localidades cuyas mareas no se hallen tabuladas, se cuenta con una tabla de puertos
secundarios, cuyas alturas de marea pueden ser estimadas a partir de las existentes para
puertos patrones ms cercanos a stas, que siempre figuran en las tablas. Las tablas de
marea para las principales localidades costeras de la Argentina tambin se hallan
disponibles en la pgina web del Servicio de Hidrografa Naval:
http://www.hidro.gov.ar/Oceanografia/Tmareas/Form_Tmareas.asp
Las alturas de marea slo son de inters en los muestreos de ambientes marinos, en
particular en aquellos que son llevados a cabo en la zona intermareal o en aguas
someras. Las alturas deben ser conocidas de antemano por el personal encargado del
muestreo, ya que las horas a que ocurren las mareas bajas o altas determinan, como
resulta obvio, la posibilidad de llevar a cabo un muestreo en un da determinado.
Las mareas cambian da a da en cuanto a su hora de ocurrencia y altura, razn por la
cual no pueden ser predichas de una forma simple, excepto por aproximaciones groseras.
Por otra parte es posible una prediccin diaria de las alturas, a partir de complejos
clculos realizados con computadora. Estas predicciones, muy ajustadas, son tabuladas
en forma de tablas de marea, especficas para un ao y una localidad determinados. Una
tabla de marea consiste en varias columnas verticales repetidas, donde se consigna para
un mes en particular, el da, la hora a que una marea alta o baja tiene lugar y la altura en
72
metros de dicha marea (respecto de un nivel de referencia arbitrario denominado plano
de reduccin).
Figura 17: Parte de una tabla de mareas (tal como puede ser bajada desde Internet) para
los meses de octubre a diciembre de 2002 en la localidad de Comodoro Rivadavia.
73
En la fraccin de tabla de mareas de la Figura 17 y que corresponde a la localidad de
Comodoro Rivadavia, se hallan indicadas las horas y alturas de marea para los primeros
das de los meses de octubre, noviembre y diciembre del ao 2002. Por ejemplo para el
da martes 1 de octubre se contabilizan dos mareas bajas y dos mareas altas alternadas
(como corresponde a una localidad con rgimen semidiurno de mareas). La primer marea
baja del da ocurre durante la madrugada, a las 5 horas 13 minutos y tiene una altura de
1,28 metros, en tanto que la marea alta (pleamar) subsecuente ocurre, seis horas con 22
minutos despus, a las 11 horas 35 minutos de la maana y tiene una altura de 4,36
metros. En general puede observarse que entre las mareas correspondientes de un da y
el siguiente (por ejemplo las dos primeras bajamares de ambos das) existe una
diferencia de aproximadamente unas 25 horas: Sobre el ejemplo anterior la primer
bajamar del da 1 de octubre tuvo lugar a las 5:13 horas, en tanto que la primer bajamar
del da 2 de octubre ocurri a las 6:21 horas.
La amplitud (diferencia entre una bajamar y la pleamar siguiente o viceversa) entre
mareas no es igual a lo largo de todo el mes o el ao. En un mes tpico, existe un da
donde las amplitudes son mximas y un da donde stas son mnimas, entre ambos
extremos las amplitudes van cambiando en forma gradual.
Otra informacin importante se halla por lo general al principio de la tabla de mareas para
una localidad (primera pgina de una localidad en las tablas publicadas), donde se indica
entre otros, la longitud y latitud de sta, el rgimen (o tipo) de mareas del sitio (diurno,
semidiurno o mixto) y una pequea tabla en la que se marcan la altura de las pleamares
y bajamares, tanto medias como extremas y las amplitudes mxima y media del lugar.
Esta primera hoja no cambia o tiene cambios menores entre las sucesivas ediciones
anuales de las Tablas impresas.
En ocasiones las tablas pueden presentar ms informacin respecto de las mareas de un
lugar como por ejemplo: la altura (en pleamar y bajamar) en mareas de cuadratura, de
sicigias y otras. Si bien a los efectos prcticos, la mayor parte de las veces es suficiente
con conocer los valores medios, para determinados trabajos en particular es conveniente
74
conocer que describen los trminos recin empleados (Consultar glosario en Tablas de
marea del Servicio de Hidrografa Naval).
6.2.2 Nivel y profundidad.
Nivel y profundidad hacen referencia a la distancia vertical que existe entre un
determinado nivel de referencia y una estacin de muestreo. A los efectos de este manual
se reserva el trmino nivel para la zona intermareal (que por lo general tiene lugar en
ambientes marinos) y se deja el trmino profundidad para las estaciones ubicadas por
debajo de la superficie del agua (por debajo del nivel de mareas bajas en ambientes
marinos).
6.2.2.1 Nivel
El trmino nivel define la altura de una estacin dentro de la zona intermareal, definida a
su vez sensu lato como una franja costera comprendida entre las mareas bajas y altas
de un sitio.
Los protocolos para la determinacin de niveles pueden variar de acuerdo a las
caractersticas de la costa (tipo de pendiente de la costa, extensin de la zona
intermareal, etc.) y a los equipos de medicin disponibles. As como con la profundidad, el
nivel debe ser estandarizado respecto de un nivel de referencia, el cual puede ser el
nivel de mareas altas (en cuyo caso es equivalente a una profundidad), o el nivel de
mareas bajas (en este caso corresponde a una altura). A veces, resulta necesario
diferenciar el tipo de marea a que se hace alusin, dado que existen diversos tipos de
stas (de sicigias, de cuadraturas, medias).
En adicin, resulta conveniente establecer primero un nivel de referencia provisorio,
que puede ser tanto el nivel de la marea alta o de la marea baja para el da de muestreo.
La eleccin de una u otra depende del conocimiento previo que se tenga del lugar y de
las caractersticas de ste. Por ejemplo, cuando se debe muestrear con un transecto un
sitio que no es conocido, conviene llevar a cabo el muestreo con la marea baja, de modo
75
de poder establecer la ubicacin del mismo, evitando las discontinuidades y las reas de
muestreo peligrosas. Por otra parte, si el sitio es conocido o se asume que es uniforme
(como ocurre en la mayora de las playas arenosas), es conveniente comenzar a trabajar
con la marea alta, ya que de esta forma el muestreo es ms seguro y se evita que el agua
que sube, nos desaloje de un sitio en el que estamos trabajando.
Protocolo en sustratos verticales (en marea baja).
a. Determinar la hora a la cual la marea est baja (a partir de Tabla). Comenzar las
actividades preparatorias del muestreo (en el sitio de trabajo) una o dos horas antes.
b. Marcar los niveles o estaciones de muestreo (con marcas que puedan removerse).
c. Medir con una cinta mtrica (plstica) la distancia vertical entre cada uno de los
niveles de muestreo y el nivel de la marea baja del da (nivel de referencia provisorio).
Estos niveles pueden denominarse h
1,
h
2
, h
3
, etc. (Figura 18a). Si el sustrato no fuera
vertical ver el siguiente protocolo.
d. Alternativamente al paso (c) se pueden medir las distancias verticales entre niveles de
muestreo (d
1-2
, d
2-3
, etc.) y la distancia vertical entre el nivel de muestreo inferior y el
nivel de bajamar del da (d
b-1
). Calcular (en laboratorio) las alturas de todos los niveles
de muestreo respecto del nivel de referencia provisorio como:
h
1
= d
b-1
h
2
= d
1-2
+ d
b-1
h
3
= d
2-3
+ d
1-2
+ d
b-1
e. Para el calculo de los niveles estandarizados, obtener en primer lugar la diferencia (d
b
)
de altura entre la altura de bajamar en el da de muestreo (h
b
) y la altura de una
bajamar media (h
m
), la cual puede hallarse en la primera pgina de la tabla de una
localidad) como d
b
= h
m
h
b
.
f. Calcular los niveles estandarizados a la marea baja media (h
i
) como:
h
1
= h
1
- d
b
h
2
= h
2
- d
b
h
3
= h
3
- d
b
76
Figura 18: Alturas y distancias a tomar en el campo para el establecimiento de alturas de
nivel estandarizadas respecto del nivel de bajamares medias (Bmedia). a, para sustratos
verticales; b, para otros tipos de sustrato. Bdia, bajamar del da de muestreo; Preduccion,
plano de reduccin de la localidad (Tablas). Para otras abreviaturas ver el texto.
El siguiente protocolo esta basado en los sistemas de vasos comunicantes y utiliza como
nivel una manguera plstica transparente llena de agua. Este sistema es muy exacto,
77
siempre y cuando la manguera tenga un dimetro suficiente y no tenga burbujas en su
interior (Figura 18b).
Protocolo para sustratos de pendiente intermedia, baja o irregular
a. Establecer los niveles de muestreo y marcarlos convenientemente (con marea baja),
alternativamente (con marea alta) ir marcndolos a medida que la marea va bajando.
b. Disponer de una manguera plstica transparente (1 a 2 cm de dimetro) de un largo
apropiado (la distancia horizontal entre niveles adyacentes ms un par de metros
extra).
c. Llenar la manguera de agua.
d. Desplegar la manguera entre dos niveles (o estaciones) de muestreo sucesivos,
permitiendo que ajuste a las irregularidades del terreno, ya que esto no afecta las
mediciones. En el nivel superior del par disponer el extremo de la manguera a ras del
sustrato (parte del agua contenida se derramar). En el nivel inferior del par, curvar la
manguera (sin estrangularla) y disponerla verticalmente. Con una regla o cinta mtrica
plstica medir la distancia entre el sustrato y el menisco de agua en la porcin vertical
de la manguera. Esta distancia es la diferencia de alturas entre ambos niveles (d
(n-1)-n
).
e. Con la ayuda del nivel de manguera, medir las distancias verticales (diferencias de
altura) entre niveles de muestreo sucesivos (d
1-2
, d
2-3
, etc.) y la distancia vertical entre
el nivel de muestreo inferior y el nivel de bajamar del da (d
b-1
). Calcular (en
laboratorio) las alturas de todos los niveles de muestreo respecto del nivel de
referencia provisorio (bajamar del da) como:
h
1
= d
b-1
h
2
= d
1-2
+ d
b-1
h
3
= d
2-3
+ d
1-2
+ d
b-1
f. Para el calculo de los niveles estandarizados, obtener en primer lugar la diferencia (d
b
)
de altura entre la altura de bajamar en el da de muestreo (h
b
) y la altura de una
bajamar media (h
m
), la cual puede hallarse en la primera pgina de la tabla de una
localidad) como d
b
= h
m
h
b
.
g. Calcular los niveles estandarizados a la marea baja media (h
i
) como:
h
1
= h
1
- d
b
h
2
= h
2
- d
b
78
h
3
= h
3
- d
b
Alternativamente a estandarizar las alturas de los niveles respecto de la marea media,
stos pueden estandarizarse respecto del plano de reduccin local. A diferencia del caso
anterior donde puede haber niveles con alturas negativas, en este caso las alturas son
siempre positivas.
h
i
= h
i
+ h
b
Notas:
- En la medicin de niveles es conveniente elegir das calmos para llevar a cabo el
muestreo ya que la precisin con que se puede determinar la hora en que el agua
llega o descubre un nivel es mayor. Cuando el rea a muestrear sea discontinua, es
posible transportar las alturas de un sitio a otro trabajando con niveles de manguera o
utilizando el nivel del mar para equiparar sitios.
Otros mtodos para la medicin de niveles, a diferencia de los anteriores, no implican la
comprobacin en el campo de las distancias verticales entre niveles, sino que el clculo
de su altura se basa en las predicciones de altura obtenidas de las tablas de marea.
Estos mtodos tienen un doble uso, ya que es posible calcular la altura de un nivel de
muestreo (respecto de un nivel de referencia) dada la hora en que el agua llega o deja al
nivel, o bien a la inversa, si la altura de los niveles est predeterminada (por ejemplo 1, 2
y 3 m por sobre el nivel de la bajamar media), se puede calcular a que hora el agua
descubrir (o cubrir) a dicho nivel. Con este mtodo las alturas que se obtienen (o las
horas a que esa altura ocurre) estn estandarizadas respecto del nivel del plano de
referencia de la localidad.
Estos procedimientos suponen que la variacin de la marea, en el intervalo entre una
pleamar y una bajamar consecutivas (o viceversa), puede representarse por una
sinusoide. Los resultados as obtenidos son suficientemente aproximados en sitios con
regmenes de marea de tipo diurno o semidiurno, perdindose precisin a medida que el
rgimen de marea se aleja de los mencionados (desigualdades diurnas). Por otra parte,
79
se ha observado que en varios puertos de rgimen semidiurno, la forma de la curva de
marea se aleja de una sinusoide (fondeadero San Romn, Puerto Madryn, Comodoro
Rivadavia, Caleta Paula, Puerto Deseado, San Julin, Punta Quilla, Punta Loyola,
Muelle el Turbio y Ro Grande) y en ellos es posible encontrar diferencias del orden del
10% de la amplitud de la marea, entre los valores de la prediccin armnica (de la que se
obtienen las tablas convencionales) y la estimacin sinusoidal. Para algunos de estos
sitios (los marcados en negrita) y algunos otros con regmenes de desigualdades diurnas,
las tablas de marea proporcionan, adems de las tablas convencionales (con slo
pleamares y bajamares), las predicciones horarias de la altura de marea. Para los casos
donde la estimacin sinusoidal no sea apropiada, es conveniente el uso del protocolo de
medicin de las distancias verticales entre cada nivel y el nivel de bajamar obtenido de
tablas (que es preciso) o bien del protocolo con nivel de manguera transparente.
De los mtodos para la medicin de niveles basados en las predicciones de altura de
marea podemos sealar:
a. El uso de las Tablas de Marea del Servicio de Hidrografa Naval de la Repblica
Argentina (Tercera Parte).
b. La consulta on line en sitios especficos de Internet.
Las Tablas de Marea del Servicio de Hidrografa Naval (SHN) proveen en su Tercera
Parte, mtodos para calcular la altura de marea en un instante prefijado, as como para
determinar la hora para la cual la altura de la marea alcanza un valor prefijado. Esta
informacin puede obtenerse haciendo uso de la tablas A o B de la citada Tercera Parte y
para su uso remitimos a cualquiera de las Tablas de Marea de aos recientes del SHN.
Alternativamente al clculo de niveles u horas a partir de las tablas de marea, es posible
llevar a cabo consultas on line en determinados sitios de Internet. Uno de estos sitios
que admite el clculo de niveles de marea a una hora determinada y el clculo de la hora
a que tiene lugar un determinado nivel es:
http://www.shom.fr/fr_page/fr_serv_prediction/ann_marees.htm
80
Figura 19: Pantallas obtenidas ante el requerimiento de las horas a las cuales tiene
lugar una altura de marea de 3 metros para el da 1 de octubre de 2002 en Comodoro
Rivadavia.
81
Una vez conectados con el sitio, el procedimiento consiste en primer lugar en acceder a
las predicciones, elegir la zona correspondiente del planisferio (Zona 4) y dentro de ella a
la localidad de inters. A continuacin se pueden elegir diferentes opciones, entre las que
figuran horas para una determinada altura de agua y alturas de agua para una hora
determinada. En la Figura 19 se indican los resultados de la consulta on line a la
primera de las opciones indicadas para la localidad de Comodoro Rivadavia, el da 1 de
octubre de 2002 y una altura de agua de 3 metros.
6.2.2.2 Profundidad.
La profundidad es uno de los primeros parmetros a conocer de una estacin, antes de
comenzar con la toma de muestras o de otros parmetros . Adems de contribuir a la
descripcin del medio en los estudios de poblaciones y comunidades, la profundidad
determina asimismo el largo de cable (o cuerda) a desplegar con diferentes equipos y la
velocidad de descenso de stos. Una velocidad de descenso alta produce una onda de
choque delante del equipo, la cual puede desplazar los sedimentos blandos no
consolidados que se hallan en la superficie del rea de muestreo. Un descenso rpido
tambin puede provocar un mal funcionamiento del equipo utilizado, como por ejemplo el
disparo del mecanismo de cierre antes de que la draga o el muestreador de tubo
alcancen el fondo. Por otra parte, en el caso de los muestreadores de tubo, una velocidad
de descenso baja puede conducir a la obtencin de una muestra de sedimento de escaso
volumen.
En ambientes con aguas muy someras de hasta unos 4 metros de profundidad (lagunas,
arroyos, algunos ros, etc.), es posible el uso de varas graduadas, con divisiones (marcas)
en metros, decmetros y centmetros. Por lo general los caudalmetros o correntmetros
de mano (canal abierto) estn provistos de varas de este tipo. La medicin se realiza por
vadeo (para profundidades del orden del metro) o bien con un bote en ambientes con
profundidades mayores o en ambientes lticos con corrientes fuertes.
82
Para aguas someras de hasta unos 20-30 metros es posible el uso de cuerdas plsticas
lastradas con divisiones en metros y decmetros, siempre y cuando pueda asegurarse la
verticalidad de la cuerda que se ha bajado (ambientes sin corrientes notorias o ausencia
de vientos fuertes que muevan la embarcacin). Un sistema como el indicado puede
implementarse en la cuerda del disco de Secchi, colocando marcas por metro y cada 10
centmetros.
Alternativamente, cuando se trabaja con buzos, existen actualmente relojes digitales
diseados especialmente a este tipo de actividades y que entre otras caractersticas
miden la profundidad (0 a 80 m) y la temperatura del agua (-11 a 40C).
Para aguas profundas el nico mtodo viable es el uso de ecosondas, las cuales se
pueden obtener en formatos y prestaciones muy diversos, desde las sondas digitales de
mano (hasta unos 80 m) y que no necesitan de instalaciones accesorias en el bote, hasta
las ecosondas digitales con GPS incluido con memoria no voltil de las ubicaciones y sus
profundidades.
Las ecosondas ms grandes, requieren de un transductor (que es parte del equipo) que
puede ser montado en forma fija a la parte inferior del casco de la embarcacin (si la
estructura de sta lo permite) o en forma porttil por uno de los costados del bote
(disposicin apropiada para botes neumticos). Adems precisan de una fuente de
energa externa, que por lo general es suministrada por una batera de 24 V.
Protocolo para ecosondas de mano.
a. Asegurar la correa de la sonda a la mueca y sumergir el extremo emisor del equipo
en el agua, procurando que ste se disponga perpendicular a la superficie del agua.
b. Tomar la profundidad leyendo sta en la pantalla lateral, anotar indicando unidades de
medicin del equipo (ya que varios de stos indican la profundidad en pies y no tienen
conversin a metros).
c. En ambientes marinos tomar asimismo la hora para poder estandarizar la profundidad
con respecto a un nivel de referencia.
83
Protocolo para ecosondas con transductores porttiles.
a. Conectar el transductor a la sonda, armar el soporte del transductor y disponerlo a un
costado de la embarcacin.
b. Conectar el equipo a la batera (u otra fuente de energa apropiada).
c. Acceder con el bote a la estacin de trabajo.
d. Encender el equipo, elegir las unidades de medicin y el rango de profundidad de
trabajo (en algunas sondas esta ltima operacin es tanto manual como automtica).
e. Para cada estacin anotar la profundidad, la latitud y longitud; adems en estaciones
en ambientes marinos, anotar la hora, para poder estandarizar la profundidad con
respecto a un nivel de referencia.
Notas:
- Cuando se muestrea a bordo de embarcaciones grandes es usual que el transductor
de la ecosonda est ubicado en la parte inferior del casco. Averiguar a que
profundidad se encuentra el transductor para sumar este valor a las lecturas de la
ecosonda.
En ambientes marinos sujetos a mareas importantes se deben estandarizar los valores de
profundidad refirindolos a un nivel de referencia comn (por lo general es conveniente
el nivel de las mareas bajas medias, el cual se toma como 0). Esto es particularmente
importante en los muestreos realizados en aguas someras, ya que al estar los muestreos
de las estaciones desplazados en el tiempo, las profundidades estn sujetas a los
cambios de nivel provocados por las mareas. Por ejemplo, en una localidad con una
amplitud de mareas de 4 m (diferencia entre las alturas de la marea baja y la marea alta),
un mismo sitio muestreado en distintos momentos del da, tendr profundidades que
pueden diferir en hasta 4 m, de acuerdo a la hora del da en que la profundidad fue
tomada.
Protocolo de estandarizacin de profundidades (ambientes marinos)
a. Para cada estacin de muestreo tomar nota del da, hora y profundidad (p) indicada
por la ecosonda. En el caso que el transductor no se halle a nivel de la superficie,
sumar la profundidad de ubicacin de ste en el casco de la embarcacin.
84
b. Estimar la altura de marea en el momento de la toma de la muestra (h
s
) siguiendo el
protocolo para hallar la altura de un nivel (o marea) a una hora determinada (seccin
anterior).
c. Determinar la diferencia (d
s
) entre la altura de marea en el momento de muestreo (h
s
)
y la marea baja media de la localidad (h
m
), esta ltima obtenida de tablas, como:
d
s
= h
s
- h
m
d. Calcular la profundidad estandarizada (p) al nivel medio de bajamares como:
p= p d
s
6.2.3 Temperatura del agua
La temperatura del agua en ambientes bentnicos puede ser medida con un termmetro
convencional de mercurio o alcohol o con un termmetro digital convenientemente
calibrado contra un termmetro certificado. Para la medicin de la temperatura del agua
con termmetros de tipo convencional, es preferible que los mismos estn protegidos
dentro de una carcaza plstica o metlica y que el bulbo quede sumergido en agua (en un
recipiente colector o balde inferior), cuando el termmetro es extrado de sta.
Todos los termmetros deben ser contrastados antes de su uso contra un termmetro de
referencia en laboratorio y a partir de esto con una frecuencia anual. Los termmetros
que no cumplan con los requisitos mnimos de calidad para el proyecto (por ejemplo
0,5C de la temperatura real) deben ser descartados.
Nota: Algunos termmetros digitales pueden ser calibrados automticamente en el campo
sumergiendo el sensor en una mezcla de hielo y agua dulce (0C).
Protocolo para termmetros
a. En la zona intermareal, en playas de sustratos blandos, excavar un pozo estrecho
donde quepa el termmetro, hasta encontrar agua. Sumergir el termmetro en el
agua, permitir que ste se equilibre y leer la temperatura con el bulbo (o sensor)
85
sumergidos. Este protocolo es inaplicable en costas rocosas, en stas solo es
posible tomar la temperatura del agua en piletas de marea y encharcados.
b. En aguas muy someras (menos de 1 m de profundidad), medir la temperatura del
agua directamente sumergiendo el termmetro en el agua, permitir que ste se
equilibre, leer la temperatura con el bulbo (o sensor) sumergidos.
c. Para profundidades mayores, tomar la temperatura en el agua inmediatamente
adyacente al fondo, ya sea en forma directa con un buzo o bien con una botella
(por ejemplo Van Dorn). En este ltimo caso, vaciar el contenido lentamente en un
recipiente de litro de capacidad, con el termmetro colocado, hasta que la lectura
de temperatura se equilibre.
d. Anotar la temperatura en la libreta de campo junto con el nmero de estacin y la
profundidad.
Muchos medidores incluyen junto con el electrodo especfico, un sensor para la medicin
de temperatura. Esto es corriente por ejemplo, en los medidores de oxgeno disuelto, ya
que la temperatura del agua influye fuertemente en la solubilidad del oxgeno en el agua y
ciertas medidas (porcentaje de saturacin del oxgeno disuelto) necesitan de la
temperatura tomada simultneamente con el oxgeno.
Protocolo para medidores varios
a. Calibrar el medidor a partir de las instrucciones suministradas para cada modelo.
b. Probar las lecturas de temperatura del medidor, tanto en agua como en aire, contra
las lecturas de un termmetro de precisin reconocida como control. Si las medidas no
se corresponden, el medidor deber ser ajustado a las lecturas del termmetro. Las
pruebas debern ser repetidas a lo largo del da para determinar si existe algn tipo
de deriva. Todos los ajustes debern ser consignados en la libreta de campo. Los
datos de temperatura en campo por lo general son ledos al 0,5C ms cercano.
c. Para medir la temperatura en playas de sustratos blandos intermareales, excavar un
pozo estrecho donde quepa el sensor, hasta encontrar agua. Sumergir el sensor en el
agua, permitir que ste se equilibre y leer la temperatura con el sensor sumergido.
Este protocolo es inaplicable en costas rocosas, en stas solo es posible tomar la
temperatura del agua en piletas de marea y encharcados.
86
Nota: En nuestros trabajos hemos encontrado conveniente cavar un pozo (hasta la
tabla de agua) en el cual se inserta, lo ms ajustadamente posible, un tubo plstico
de unos 50 cm de largo y con un dimetro suficiente como para alojar a una sonda
multiparmetro; el extremo inferior del tubo se cierra con una malla de 1 mm o menos
de abertura, para evitar un pasaje excesivo de arena hacia dentro del tubo.
d. Para medir la temperatura en aguas someras (hasta donde el largo de cable lo
permita), bajar el sensor hasta casi el fondo, evitando tocar ste (se puede agregar un
protector al sensor) y anotar la temperatura.
e. Para profundidades mayores, tomar la temperatura en el agua inmediatamente
adyacente al fondo con una botella Van Dorn (Ver Manual de campo para el
muestreo de la columna de agua (Zaixso, 2002)). Una vez recuperada, vaciar el
contenido lentamente en un recipiente donde quepa el sensor sumergido, anotar la
temperatura una vez que la lectura se estabilice.
f. Anotar el nmero de estacin, la fecha y la profundidad junto con la temperatura.
Como complemento al uso de termmetros o medidores es posible registrar la
temperatura del agua de fondo con data loggers, que se dejan sumergidos en la
estacin de trabajo y son capaces de guardar la informacin obtenida. El tiempo en que la
memoria del data loger se llena, depende de la frecuencia con que los datos son
tomados. Por ejemplo el Optic StowAway Temp permite elegir intervalos de muestreo
entre 0,5 segundos y 9 horas, pudiendo guardar 15 minutos de datos en el primer caso y
2979 das en el segundo). En adicin los data loggers pueden ser programados para
que realicen muestreos mltiples y guarden el promedio de las medidas.
Para la extraccin de los datos guardados en un data logger, puede disponerse de dos
alternativas. La primera es sacar el equipo del agua y enviarlo al laboratorio para la
extraccin de los datos, en este caso es necesario el reemplazo del data logger que
tiene los datos, por otro vaco. La segunda alternativa consiste en sacar el data logger
con datos del agua y en transferir la informacin guardada (vaciando el data logger) a
equipos de transporte de datos de campo (por ejemplo el Optic Shuttle), volver a sumergir
el data logger donde estaba y mandar al laboratorio el equipo de transporte, para la
extraccin de los datos; los equipos de transporte de datos de campo pueden guardar la
87
informacin de varios data loggers, por ejemplo un transportador Optic Shuttle puede
almacenar la informacin de 16 data loggers llenos, de 8K de memoria cada uno.
Nota:
- La medicin de la temperatura con termmetros o medidores no es reemplazable por
el uso de data loggers, ya que los equipos sumergidos pueden desprenderse o
romperse (particularmente en ambientes agitados) o pueden no ser ubicados
nuevamente. El uso de data loggers sin embargo, es un excelente complemento de
las mediciones convencionales, ya que stos permiten analizar en forma contnua la
evolucin de la temperatura a lo largo de varios perodos anuales.
El protocolo que sigue es apropiado para data loggers de temperatura tipo Stow Away y
es apropiado para fondeos de equipos en sitios con profundidades no mayores a los
30 metros.
Protocolo para fondeo de data loggers.
a. Llevar a cabo para cada data logger y con antelacin en el laboratorio, su instalacin
(con una PC y el software respectivo del equipo), considerando los siguientes
aspectos: el momento de inicio de la toma de datos por el data logger (ao, da y
hora aproximada), intervalo de muestreo y unidades de medida de la temperatura.
b. Armar con anticipacin el equipo de fondeo. Si la intencin es disponer el data logger
en el fondo, el equipo debe incluir un fondeo (muerto) del que se sujetarn tanto el
data logger como una boya de media agua (que no llega a la superficie), que servir
para poder recuperar ms fcilmente al equipo y evitar mientras tanto, robos o roturas
intencionales. Cuanto ms expuesto o agitado el sitio de colocacin, ms peso debe
tener el muerto (aproximadamente unos 5-10 kg para una boya de 0,5 a 1 litro). El
fondeo debe de tener un agarre o asa metlicos (o un par de agarres) donde se pueda
atar directamente el data logger y por separado la soga de la boya; el asa debe
forrarse con un trozo de manguera plstica para evitar el desgaste, eventual rotura de
la soga y/o prdida del equipo. Alternativamente, los data loggers pueden ser
ubicados en aguas someras (ros y arroyos por ejemplo), atados fuertemente a un
peso (no permitir que se muevan con la corriente pues podran romperse) o si existe la
88
posibilidad de que haya elementos a la deriva, protegido dentro de una caja de red
plstica resistente y convenientemente lastrada.
c. El fondeo de data loggers en una estacin implica conocer previamente su
profundidad, ya que la estanqueidad de los equipos est asegurada hasta algo ms
de 30 m y en adicin, los buzos que lo recuperarn, difcilmente quieran exceder esta
profundidad.
d. Amarrar el data logger y la boya de media agua al fondeo.
e. Ubicar la estacin con un GPS.
f. Bajar cuidadosamente el fondeo, soga y equipo, tratando de evitar nudos y
enganches. O alternativamente llevar a cabo los amarres directamente bajo el agua
con el auxilio de un buzo.
g. Visitar peridicamente el sitio para verificar la presencia de incrustaciones biolgicas
sobre la boya, soga y data logger, cuyo peso puede exceder la boyancia del sistema
y hundirlo. Eliminar las incrustaciones en caso de encontrarlas. Aprovechar para
vaciar los datos del data logger con un transportador de datos.
6.2.4. Temperatura del sustrato
En ambientes intermareales, en adicin a la toma de la temperatura del agua intersticial
o de piletas o encharcados, puede ser de inters tomar la temperatura del sustrato. Para
este fin es conveniente el uso de termmetros (preferiblemente protegidos del agua y
salpicaduras) con sensores de termistor intercambiables (tomar recaudo de que el tipo de
conector sea el adecuado). Existen numerosos tipos de sensores de termistor, por
ejemplo para la temperatura de sustratos blandos son convenientes los modelos de
insercin o los generales, en tanto que para sustratos duros se utilizan los modelos
denominados de contacto.
Notas:
- Cuando la velocidad de respuesta del sensor de termistor sea importante, prestar
atencin al valor de la constante de tiempo (que por lo general figura entre las
especificaciones) , que es el tiempo estimado para alcanzar el 63,2% de una nueva
89
lectura; para saber cuanto tiempo es necesario para alcanzar el 99% de una nueva
lectura, multiplicar la constante de tiempo por cinco.
- No utilizar los sensores de temperatura de equipos tales como oxmetros o sondas
multiparmetro en la medicin de temperaturas del sustrato, ya que se pueden
arruinar.
6.2.5 Oxgeno disuelto
El oxgeno disuelto (OD) puede ser medido tanto por titulacin qumica (mtodo de
Winkler) o mediante el uso de electrodos de membrana (oxmetros). Ambos tiene el
potencial de ser precisos y confiables, pero los dos requieren de algn entrenamiento
para lograr medidas adecuadas. Los oxmetros proveen un mtodo conveniente y
relativamente barato para llevar a cabo las mediciones y son los ms comnmente
usados.
Existen diferentes modelos de oxmetros y electrodos. Procurar que el equipo que va a
ser utilizado tenga compensacin (preferiblemente automtica) de temperatura, salinidad
y altura (o de presin baromtrica). Existen actualmente dos tipos de electrodos, los
polarogrficos que requieren de un tiempo de polarizacin (unos 15 a 30 minutos) antes
de ser utilizados y los galvnicos que son de uso inmediato.
Es importante remarcar que durante la lectura de la concentracin, el oxgeno es
consumido en el extremo del electrodo y en consecuencia es necesario mover la muestra
(o el electrodo) durante la medicin. Si el estancamiento tiene lugar se obtendrn valores
artificialmente bajos de OD. La velocidad aconsejada de movimiento de la muestra o del
electrodo es de unos 30 cm por segundo. Algunos electrodos (o sondas multipropsito)
cuentan con dispositivos que hacen circular el agua en el extremo del electrodo. Una
variante reciente de electrodos polarogrficos (Tipo Micro Electrode Array) elimina la
necesidad de agitar el electrodo durante la lectura.
El muestreo para la medicin de OD requiere un cuidado particular, dado que cualquier
contacto de la muestra con el aire, modificar los resultados. Si se debe obtener el
90
porcentaje de saturacin y el equipo no proporciona este parmetro en forma directa,
entonces debe tomarse simultneamente la temperatura del agua. Adicionalmente, puede
ser necesario medir la presin baromtrica o la altitud para determinar con precisin el
porcentaje de saturacin.
Los protocolos que se indican a continuacin son para la determinacin de OD (o
porcentaje de saturacin) con electrodos.
Protocolo para la medicin de OD (con oxmetro).
a. Seguir las instrucciones del fabricante respecto de la calibracin y uso del oxmetro.
Una vez que el equipo se enciende hay que esperar que ste se estabilice
(usualmente unos 15 minutos) antes de calibrarlo o usarlo. La calibracin es
conveniente llevarla a cabo cada vez que el equipo es apagado. Calibrar siempre a
una temperatura 10C de la temperatura de la muestra. Para la calibracin sin
compensacin automtica de presin y/o salinidad, es necesario conocer de
antemano la altitud (o presin baromtrica) del sitio de trabajo y la salinidad del agua
(0 para agua dulce y unas 33 partes por mil en aguas costeras patagnicas).
b. Para mediciones de oxgeno disuelto en el agua intersticial de playas, se puede cavar
un pozo (hasta la tabla de agua) en el cual se inserta, lo ms ajustadamente
posible, un tubo plstico de unos 50 cm de largo y con un dimetro suficiente como
para alojar cmodamente al electrodo o a una sonda multiparmetro; el extremo
inferior del tubo se cierra con una malla de 1 mm o menos de abertura, para evitar un
pasaje excesivo de arena hacia dentro del tubo. Mover el electrodo arriba y abajo en
el agua a una velocidad equivalente a unos 30 cm por segundo y esperar a que las
lecturas se estabilicen (lecturas estables).
c. Para aguas someras (o hasta largo del cable del equipo), descender el electrodo
hasta que se halle en la zona de agua adyacente al fondo (no tocar ste con el
electrodo, en caso de necesidad agregarle un protector, por ejemplo un cesto plstico
de aberturas grandes). Alternativamente tomar la medida en el agua superficial
(piletas de marea o agua de orilla o adyacente). En aguas con poco movimiento,
mover el electrodo arriba y abajo (o de un costado a otro) en el agua a una velocidad
91
de unos 30 cm por segundo; en ambientes lticos esto no es necesario. Permitir que
el electrodo se equilibre (la estabilizacin puede demorar de 2 a 5 minutos).
d. Para aguas ms profundas colectar la muestra de agua con una botella Van Dorn en
la zona adyacente al fondo (no tocar ste con la botella para evitar resuspender
sedimentos). Transferir la muestra con el tubo de vaciado de la botella Van Dorn a un
recipiente de boca ancha donde se ha colocado el electrodo. Dejar que el agua fluya
de manera que no se formen burbujas ni turbulencia, procurar para ello que el tubo
llegue hasta el fondo de la botella (si fuera necesario cambiarlo por un tubo ms largo)
y frente a la membrana del electrodo. Dejar el agua fluyendo suavemente hasta que
las lecturas se estabilicen.
e. Anotar las lecturas de OD (o porcentaje de saturacin) y eventualmente la
temperatura.
Notas:
- La vida de las membranas depende del uso y stas pueden durar largo tiempo si son
tratadas con cuidado (hasta un mes de trabajo continuo). Las membranas daadas,
sucias o con burbujas de aire por debajo de ellas dan lecturas errticas y por
supuesto incorrectas, cambiarlas inmediatamente. Ver protocolo para cambio de
membranas.
- Cuando se mida OD en ambientes con baja concentracin de oxgeno (hipolimnio de
un lago), no permitir que el electrodo quede en aguas con contenidos de OD menores
0,5 mg/l, ya que pueden daarse.
- Para una correcta operacin, el ctodo de oro del electrodo debe estar brillante, si as
no fuera, o se hubiere plateado con plata (ocurre cuando se usa un electrodo con una
membrana en mal estado), la superficie de oro debe ser restituida. Usar para ello los
productos recomendados por el fabricante.
- El electrodo de plata tambin puede contaminarse, para su limpieza seguir
instrucciones de limpieza del fabricante.
- Mantener el electrodo en la cmara de calibracin cuando no est en uso para evitar
que se seque. Verificar que la esponja est siempre hmeda.
92
- Usar membranas de alta sensibilidad (de menor espesor) en ambientes con bajas
temperaturas (menos de 15C) y bajas concentraciones de OD (menores de 5 mg/l o
saturaciones menores del 20% ).
- Los electrodos (de acuerdo a los modelos de oxmetro) presentan dos sistemas de
cambio de membranas. En uno de ellos, el ms antiguo y econmico, lo nico que se
reemplaza es la membrana, en tanto que en el otro se reemplaza todo el extremo del
electrodo (soporte plstico con la membrana ya colocada que se enrosca en el
extremo del electrodo). Consultar el protocolo de cambio de membranas en el Manual
de campo para el muestreo de la columna de agua (Zaixso, 2002).
6.2.6 Luz (irradiancia).
De relevancia slo cuando se encaran estudios bentnicos referidos (o que incluyan)
macrofitas acuticas o macroalgas. La cantidad fundamental a medir es la radiacin
luminosa, incidente o absorbida por unidad de rea y unidad de tiempo, especficamente
la densidad de flujo de radiacin o irradiancia. La irradiancia puede ser expresada en
unidades de energa, potencia o quanta (fotones), pero dado que la respuesta de los
vegetales a la luz es principalmente de naturaleza fotoqumica y depende del nmero de
quanta absorbidos, es ms adecuado expresar la irradiancia en trminos del nmero de
quanta disponibles o absorbidos por unidad de rea y unidad de tiempo (quanta m
-2
s
-1
).
Varios autores prefieren el uso de microeinstein por metro cuadrado (E m
-2
s
-1
), donde
un einstein es un mol de quanta (nmero de Avogadro, 6,02 .10
23
quanta). Para estudios
de productividad o fotosintticos (los ms comunes), es conveniente limitarse a la
radiacin fotosintticamente activa (photosynthetically active radiation: PAR) , cuya
distribucin espectral va de los 400 a los 700 nm.
La radiacin fotosintticamente activa se mide mediante sensores que pueden tener
diferentes aspectos, segn las diferentes marcas y modelos existentes. En general el
sensor comprende a: al sensor propiamente dicho (uno o ms detectores fotovoltaicos de
silicio con respuesta PAR: 400-700 nm); un colector de material translcido, el cual tiene
por objeto asegurar una adecuada respuesta direccional del sensor a la luz y donde la
distribucin angular de la sensibilidad depende de la forma del colector (plana,
93
semiesfrica o esfrica); un soporte de titanio o aluminio, que en algunos modelos puede
contener al sensor propiamente dicho y a un transductor de profundidad.
Un equipo bsico debe comprender un sensor sumergible, un sensor de superficie y
un medidor o un sistema de adquisicin de datos, adems de accesorios tales como
cables de conexin de los sensores y un marco de soporte (Figura 20).
Figura 20: Medicin de la irradiancia. a, sensores, en el sentido de la agujas de reloj,
sensor de superficie con colector plano y cable de conexin, sensor sumergible con
colector plano, sensor sumergible con colector esfrico; b, marco de soporte.
El sensor sumergible debe tener preferentemente un colector esfrico para medir el flujo
de fotones proveniente de todas las direcciones, incluso desde abajo (tal como ocurre con
las algas). El sensor sumergible debe estar montado sobre un marco de bajada. Algunos
modelos de sensores sumergibles vienen acompaados opcionalmente de un transductor
de profundidad, el cual si bien es indispensable para medidas ajustadas en aguas
profundas, aumenta considerablemente el costo del sensor; para estudios en aguas
someras, donde es relativamente sencillo obtener medidas precisas de profundidad con
el largo de la soga o cable, este accesorio puede ser evitado. El cable de conexin al
sistema de adquisicin de datos de superficie debe ser reforzado y tener un largo
94
apropiado para los estudios a encarar (en general no debera ser inferior a los 30 metros).
Los cables de conexin para el mismo modelo de sensor, cambian ya sea que los
sensores incluyan o no un transductor de profundidad.
Los marcos de soporte son de construccin metlica y estn diseados para el montaje
de uno o dos sensores (un sensor esfrico o dos sensores planos apuntando hacia arriba
y abajo respectivamente), al mismo tiempo proveen soporte para el cable de conexin y
un sitio de amarre seguro del marco a la superficie (con una soga o cable). En aadidura
el marco debe estar balanceado (y/o lastrado) para que el sensor se mantenga horizontal
(an en presencia de corrientes) y su estructura general debe minimizar la cantidad de
sombra que este accesorio proyecta sobre el sensor. Se debe procurar evitar que cuando
el marco de descenso se halle cerca del fondo, se produzca una resuspensin de
sedimentos que puedan alterar las lecturas a obtener; por otra parte es conveniente que
el mismo marco mantenga al sensor a una distancia del fondo fija y conocida (por ejemplo
0,25 m). Estas ltimas condiciones, ms o menos antagnicas, pueden resolverse
dotando al marco de patas de separacin de un largo adecuado al estudio encarado,
adosadas a la parte inferior del marco.
El sensor de superficie por lo general consta de un colector plano y si bien no es
necesario que sea sumergible, debe estar protegido de la lluvia y salpicaduras. Este
sensor acta como referencia del sensor sumergido y mide la PPFD (photosynthetic
photon flux density) de superficie para compararla con la obtenida por el sensor que se
halla sumergido. Esta comparacin es utilizada tanto en mediciones llevadas a cabo bajo
condiciones ambientales rpidamente cambiantes (olas, nubes, etc.), como en estudios
de perfilados verticales.
Ambos sensores van conectados a un equipo de superficie cuyas caractersticas (y costo)
son muy variables y dependen de las funciones que se pretenden de tal equipo. En su
versin ms simple es un medidor destinado a la lectura de las observaciones de
irradiancia obtenidas con los sensores, mientras que en su versin ms compleja es un
sistema de adquisicin de datos (con una microcomputadora y memorias) destinado a
operaciones como perfilados automticos de irradiancia (en este ltimo caso el detector
95
sumergible debe incluir un transductor de profundidad). Los equipos complejos en general
cuentan con hardware y software para su comunicacin con una PC, ya sea para la
transferencia de datos a sta, como para cambios en la configuracin del equipo.
Algunos modelos de sensores PAR permiten una conexin directa a una PC porttil
(laptop) o una hand held (Palm top), a las cuales se provee de un software especfico
para leer las medidas obtenidas.
Protocolo para la medicin de radiacin fotosintticamente activa (PAR).
a. Seguir las instrucciones del fabricante respecto del uso los sensores y uso y
configuracin del datalogger.
b. Para mediciones PAR en el intermareal utilizar slo el sensor plano de superficie.
Anotar la lectura del sensor (en la pantalla del datalogger) o guardarla en memoria.
c. Para mediciones PAR en aguas someras (o hasta largo del cable del equipo),
descender el marco de bajada con el/los sensor/es sumergible/s (un colector esfrico
o dos colectores planos apuntando arriba y abajo respectivamente) hasta que se halle
a la profundidad del sitio de trabajo (por ejemplo cerca del fondo para macroalgas
pequeas o a nivel de las frondes para algunas macroalgas grandes como
Macrocystis o Lessonia). Anotar las lecturas del sensor de superficie y del sensor
sumergido (evitar la sombra de la embarcacin sobre el sensor), guardar en memoria,
anotar o proceder a usar funciones de integracin para perfilados.
6.2.7 Conductividad/salinidad
Conductividad y salinidad pueden ser medidos con un medidor especfico
(conductivmetro o salinmetro) o un medidor multipropsito (como por ejemplo Horiba o
Hydrolab).
La conductividad es una expresin numrica de la capacidad de una sustancia para
transportar una corriente elctrica. Si la sustancia es una solucin acuosa entonces es
indistinto usar los trminos conductividad o conductancia. En las soluciones electrolticas
96
la capacidad de transporte de una corriente elctrica por depende de la cantidad de sales
disueltas (e ionizadas en aniones y cationes) que hay en la misma.
Por otra parte, el trmino salinidad se refiere al contenido en sales en porcentaje (o
unidades equivalentes) de una solucin. Debe notarse que existe una relacin entre
conductividad y salinidad y que esta relacin es constante a temperaturas determinadas.
Por lo general el termino conductividad es reservado para las mediciones en agua dulce
(con escasa cantidad de sales disueltas), en tanto que el trmino salinidad es utilizado
para las mediciones que se llevan a cabo en agua de mar (con cantidades grandes de
sales disueltas). En general, los salinmetros porttiles, determinan en primera instancia
la conductividad y la temperatura de la muestra y luego convierten a la primera a valores
de salinidad.
Protocolo para la medicin de salinidad en aguas intersticiales (intermareales).
a. Seguir las instrucciones del fabricante respecto de la calibracin y uso del equipo.
Probar la precisin del mismo con un estndar de salinidad.
b. Para mediciones de salinidad en el agua intersticial de playas, se puede cavar un
pozo (hasta la tabla de agua) en el cual se inserta, lo ms ajustadamente posible,
un tubo plstico de unos 50 cm de largo y con un dimetro suficiente como para alojar
al electrodo o a una sonda multiparmetro; el extremo inferior del tubo se cierra con
una malla de 1 mm o menos de abertura, para evitar un pasaje excesivo de arena
hacia dentro del tubo. Bajar el electrodo hasta que quede completamente sumergido,
agitar hasta que las lecturas se estabilicen y anotar los valores obtenidos.
c. Probar peridicamente las lecturas del salinmetro con muestras de agua medidas en
el laboratorio (subestndares).
Nota: En algunos muestreos del intermareal, como por ejemplo en el agua intersticial de
los niveles ms altos de la playa, o en piletas de marea o encharcados ubicados
asimismo en niveles superiores de la costa, las lecturas de salinidad pueden exceder el
rango de medicin del equipo disponible. Por ejemplo en el agua intersticial de playas de
la Patagonia se han llegado a medir valores de 7 %, siendo que algunos modelos de
sonda (Horiba) tienen un rango que slo va entre el 0 y el 4 %. En este caso (si no se
97
cuenta con otro equipo con un rango mayor), se debe tomar una muestra de agua en un
recipiente de cierre hermtico (en fro esta muestra puede durar meses). En laboratorio se
diluye la muestra a la mitad (midiendo su volumen con la mayor precisin posible) y se
vuelven a tomar las lecturas de salinidad. En caso de ser necesario repetir el proceso de
dilucin.
Protocolo para la medicin de conductividad / salinidad en aguas someras y piletas
de marea (largo del cable del electrodo).
a. Seguir las instrucciones del fabricante respecto de la calibracin y uso del equipo.
Probar la precisin del mismo con un estndar de conductividad o salinidad.
b. Obtener las lecturas de conductividad (o de salinidad) en la capa de agua adyacente
al fondo; en electrodos mltiples no dejar que la sonda toque el fondo, pues podra
arruinarse. Alternativamente tomar la medida en el agua superficial (pileta de marea o
muestreos de orilla). Permitir que el electrodo se equilibre (lecturas estables) antes de
anotar los valores obtenidos.
c. Probar peridicamente las lecturas del conductmetro con muestras de agua medidas
en el laboratorio (subestndares).
Notas:
- Como la conductancia de las soluciones cambia con la temperatura, se debe llevar a
cabo una correccin (por lo general automtica) para estimar la conductancia a 25C,
denominada conductancia especfica. Se debe notar que no todos los
conductmetros tienen compensacin automtica por temperatura; por otra parte es
frecuente que los equipos con compensacin automtica se daen de manera que
esta compensacin no funcione. En consecuencia durante el mantenimiento del
instrumento debe probarse tambin que la compensacin funcione.
- Las unidades de medida de conductancia (especfica) se expresan en S/cm (Siemens
por cm), en mS/cm (miliSiemens por cm) y/o S/cm (micro Siemens por cm).
- Las unidades de medida de salinidad cambian de acuerdo a los instrumentos. Algunos
de ellos miden la salinidad en trminos de conductancia especfica (S o mS), por lo
98
que hay que llevar a cabo la conversin (tablas suministradas con el equipo); otros
expresan la salinidad como partes de sal por ciento (%) o bien como partes por mil.
Protocolo para medicin de conductividad / salinidad en aguas profundas.
a. Seguir las instrucciones del fabricante respecto de la calibracin y uso del
conductmetro o salinmetro La calibracin es conveniente llevarla a cabo cada vez
que el equipo es apagado.
b. La muestra puede ser colectada en la capa de agua adyacente al fondo con una
botella Van Dorn (preferiblemente de configuracin horizontal). Ver protocolo en inicio
de la seccin 6.1.
c. Transferir la muestra con el tubo de vaciado de la botella Van Dorn a un recipiente de
boca ancha donde se ha colocado el electrodo. Dejar el agua fluyendo hasta que las
lecturas se estabilicen.
d. Anotar las lecturas de conductividad (o salinidad).
e. Probar peridicamente las lecturas del conductmetro con muestras de agua medidas
en el laboratorio (subestndares).
6.2.8 pH
La medicin del pH es por lo general fcil, sin embargo si no se comprende como usar el
equipo en forma adecuada, la probabilidad de obtener datos inexactos es muy alta.
El pH puede ser medido con un pH-metro (pehachmetro) o con un medidor
multipropsito. La medicin del pH es precisa slo en las muestras recin colectadas,
porque los valores de pH pueden presentar cambios rpidos debidos a la difusin de
gases, actividad biolgica y reacciones qumicas.
La medicin de pH se lleva a cabo comparando el potencial de soluciones con una
concentracin desconocida de iones H
+
, respecto de un potencial de referencia conocido.
Esto implica el uso de dos medias celdas (o electrodo): una celda de medida y una celda
de referencia. Actualmente, la mayora de los electrodos son electrodos de combinacin,
99
es decir combinan ambas celdas en un mismo cuerpo de electrodo. El algunas sondas
multipropsito ambas celdas se mantienen separadas.
Notas:
- Algunos tipos de electrodos viene llenos de un gel de referencia y estn sellados, en
tanto que otros deben ser rellenados (refillables) con una solucin electroltica de
referencia (por lo general de cloruro de K) y tienen una abertura superior por donde
puede cargarse la solucin de rellenado. Durante las mediciones asegurarse que el
agujero de rellenado est libre, para permitir que la solucin de rellenado fluya
adecuadamente a travs de la unin del electrodo.
- Muchos electrodos se transportan con una cubierta protectora de goma sobre el bulbo
sensor (en el extremo del electrodo), para prevenir que este se raye o rompa. Para
las mediciones esta cubierta debe ser quitada. Reponerla, cuando se guarde el
equipo, llenndola previamente (hasta la mitad) con una solucin 4M de ClK.
- Los electrodos deben mantenerse siempre hmedos. Si un electrodo se seca
sumergirlo en una solucin buffer de pH 4 durante 24 a 48 horas. Para guardarlos lo
ms adecuado es sumergirlos en una solucin 4M de ClK. Despus del guardado es
posible que se formen cristales de ClK sobre la parte externa del electrodo, esto
interfiere con las mediciones, simplemente lavar con agua destilada antes de usar. Si
se carece de solucin de ClK, guardar los electrodos en una solucin buffer 4 o 7 (en
ese orden) y en ltimo caso en agua de la canilla. No guardar nunca el electrodo en
agua destilada o deionizada, ya que electrodo puede daarse y quedar intil.
- Las soluciones buffer (utilizadas para guardar los electrodos) o ms comnmente para
calibrarlos generalmente se comercializan como soluciones estndar, pastillas o
cpsulas para disolver o en sobres sellados con la solucin preparada. Este ltimo
tipo de envase es particularmente til en el campo donde, si el tamao lo permite, se
puede sumergir directamente el electrodo dentro del sobre para su calibracin.
- El pH de una solucin es una funcin de la temperatura y en consecuencia es
necesario un ajuste para asegurar valores de pH estandarizados. La mayor parte de
las sondas multipropsito actuales tienen compensacin automtica de la temperatura
(ATC), en tanto que los pHmetros pueden no tener ninguna compensacin,
compensacin manual o ATC. La compensacin manual se lleva a cabo conociendo la
100
temperatura de la muestra (tomada con un termmetro), en tanto que la ATC es
llevada a cabo por el equipo a partir de un sensor de temperatura independiente o
utilizando un electrodo triple (de combinacin y temperatura).
Cuando la eleccin del electrodo a usar es posible (es decir cuando el sensor
corresponde a un pHmetro especfico y no a una sonda multipropsito), conviene saber
que los electrodos estn disponibles en diferentes modelos, cada uno de los cuales se
adeca a aplicaciones distintas:
- Para las mediciones de campo en general los electrodos aconsejables son aquellos
de combinacin, propsito general y cuerpo de resina epoxi (con proteccin de
bulbo).
- Para mediciones en efluentes, aguas contaminadas o aguas conteniendo metales
pesados, son convenientes los de combinacin de doble unin (preferiblemente con
cuerpo de resina y proteccin de bulbo).
- Para fluidos viscosos, emulsiones o agua con slidos suspendidos (agua intersticial
por ejemplo), son convenientes los electrodos de combinacin tipo doble unin,
pHree-flow , Sure-flow o ISFET (ion-specific field effect transistor). Preferiblemente
con cuerpo de resina y proteccin de bulbo).
- Para aguas con fuerza inica baja o lluvia cida utilizar electrodos de combinacin
tipo pHree-flow o Sure-flow (preferiblemente con cuerpo de resina y proteccin de
bulbo).
Protocolo para la medicin de pH en aguas intersticiales (intermareales).
a. Seguir las instrucciones del fabricante para la calibracin del electrodo (s) y uso del
pH-metro. Remover la cubierta de goma del bulbo (y en electrodos rellenables
asegurarse que el agujero de rellenado est abierto) antes de efectuar medidas.
Calibrar el pH-metro en el campo utilizando al menos dos soluciones buffer, una a pH
7 y otra a pH 4 o 5 (y/o a pH 8 o 9). Colocar el electrodo en cada buffer al menos un
minuto (lavar bien con agua destilada entre soluciones buffer). Si las lecturas no
corresponden con las de la solucin buffer ajustar el pHmetro de acuerdo al
instrucciones.
101
b. Para mediciones de pH en el agua intersticial de playas, se puede cavar un pozo
(hasta la tabla de agua) en el cual se inserta, lo ms ajustadamente posible, un
tubo plstico de unos 50 cm de largo y con un dimetro suficiente como para alojar al
electrodo o a una sonda multiparmetro; el extremo inferior del tubo se cierra con una
malla de 1 mm o menos de abertura, para evitar un pasaje excesivo de arena hacia
dentro del tubo. Bajar el electrodo hasta que quede completamente sumergido, agitar
hasta que las lecturas se estabilicen.
c. Anotar las mediciones obtenidas con uno o dos decimales.
Protocolo para la medicin de pH en aguas someras y piletas de marea (largo del
cable del electrodo).
a. Seguir las instrucciones del fabricante para la calibracin del electrodo (s) y uso del
pH-metro. Remover la cubierta de goma del bulbo (y en electrodos rellenables
asegurarse que el agujero de rellenado est abierto) antes de efectuar medidas.
Calibrar el pH-metro en el campo utilizando al menos dos soluciones buffer, una a pH
7 y otra a pH 4 o 5 (y/o a pH 8 o 9). Colocar el electrodo en cada buffer al menos un
minuto (lavar bien con agua destilada entre soluciones buffer). Si las lecturas no
corresponden con las de la solucin buffer ajustar el pH-metro de acuerdo al
instrucciones.
b. Si el cable lo permite, descender el electrodo hasta la capa de agua adyacente al
fondo. En mediciones de agua de orilla o de piletas de marea, sumergir el extremo del
electrodo directamente en el agua para mediciones de superficie o bien en una botella
con una muestra de inmersin. Permitir que las lecturas se estabilicen antes de
anotarlas.
c. Anotar las mediciones obtenidas con uno o dos decimales.
Protocolo para la medicin de pH en aguas profundas
a. Seguir las instrucciones del fabricante respecto de la calibracin y uso del equipo. La
calibracin es conveniente llevarla a cabo cada vez que el equipo es apagado.
Calibrar el pH-metro en el campo utilizando al menos dos soluciones buffer, una a pH
7 y otra a pH 4 o 5 (y/o a pH 8 o 9). Colocar el electrodo en cada buffer al menos un
minuto (lavar bien con agua destilada entre soluciones buffer). Si las lecturas no
102
corresponden con las de la solucin buffer ajustar el pH-metro de acuerdo a las
instrucciones.
b. La muestra puede ser colectada en la capa de agua adyacente al fondo con una
botella Van Dorn (ver protocolo en inicio de la seccin 6.1).
c. Transferir la muestra con el tubo de vaciado de la botella Van Dorn a un recipiente de
boca ancha donde se ha colocado el electrodo. Dejar el agua fluyendo hasta que las
lecturas se estabilicen. Alternativamente sumergir el electrodo directamente en la
botella Van Dorn para tomar las lecturas.
d. Anotar las lecturas de pH con uno o dos decimales.
6.2.9 Potencial de xido-reduccin
El potencial de xido-reduccin es por lo general medido con sondas multipropsito (por
ejemplo Horiba o Hydrolab), si bien pueden encontrarse equipos especficos
(redoxmetros). Estos equipos son semejantes a los pH-metros y de hecho los electrodos
de referencia son frecuentemente los mismos; en cambio el electrodo de pH es
reemplazado por un electrodo de un metal noble (platino u oro). El potencial de xido-
reduccin es la diferencia entre los potenciales medidos por el electrodo de metal y el de
referencia y corresponde a las concentraciones y actividades de todas las reacciones
participantes que se hallan en la solucin medida. Los valores de medicin se expresan
en mV (miliVolt) y tienen un rango de 2000 mV.
Los electrodos de metal noble pueden ser contaminados (recubiertos) por carbonatos,
sulfuros y otros subproductos del proceso redox, lo que da por resultado lecturas
incorrectas. La mejor manera de remover estos contaminantes es identificar a los
productos que puede haber en el proceso par luego eliminarlos con las sustancias ms
apropiadas (por ejemplo un depsito de carbonato de calcio puede ser eliminado con una
solucin dbil de ClH).
Dado que el potencial de xido-reduccin es una medida caracterstica de un equilibrio
redox, el electrodo redox no requiere calibracin o estandarizacin y el potencial medido
es absoluto. Sin embargo es conveniente probar el instrumento para ver si funciona
103
correctamente o el electrodo de metal se ha contaminado. Para estas pruebas, se han
desarrollado soluciones estndar de quinhidrona en soluciones buffer de pH 4 y pH 7, que
tienen un potencial conocido y que permiten en consecuencia verificar el correcto
funcionamiento del equipo o electrodo (ver para mayor informacin se puede consultar
http://www.sensorex.com/Products/ORP/ORPcalibrate.htm).
Protocolo para la medicin redox en aguas intersticiales (intermareales).
a. En laboratorio seguir las instrucciones del fabricante para la verificacin y uso de la
sonda y en particular para el electrodo redox. Si las lecturas redox no se
corresponden con los estndares, se puede sospechar la presencia de incrustaciones
en el electrodo de metal noble, proceder a desincrustarlo de acuerdo a instrucciones.
b. Para mediciones redox en el agua intersticial de playas, se puede cavar un pozo
(hasta la tabla de agua) en el cual se inserta, lo ms ajustadamente posible, un
tubo plstico de unos 50 cm de largo y con un dimetro suficiente como para alojar al
electrodo o a una sonda multiparmetro; el extremo inferior del tubo se cierra con una
malla de 1 mm o menos de abertura, para evitar un pasaje excesivo de arena hacia
dentro del tubo. Bajar el electrodo hasta que quede completamente sumergido, agitar
hasta que las lecturas se estabilicen.
c. Anotar las mediciones obtenidas con uno o dos decimales.
Protocolo para la medicin redox en aguas someras y piletas de marea (largo del
cable del electrodo).
a. En laboratorio seguir las instrucciones del fabricante para la verificacin y uso de la
sonda y en particular para el electrodo redox. Si las lecturas redox no se
corresponden con los estndares, se puede sospechar la presencia de incrustaciones
en el electrodo de metal noble, proceder a desincrustarlo de acuerdo a instrucciones.
b. En el campo, descender el electrodo hasta la capa de agua adyacente al fondo. En
otro caso, sumergir el electrodo directamente en el agua para mediciones de
superficie (en aguas de orilla o adyacentes) o bien en una botella con una muestra de
inmersin. Dejar que las lecturas se estabilicen antes de anotarlas.
c. Anotar las mediciones obtenidas.
104
Protocolo para la medicin redox en aguas profundas
a. En el laboratorio seguir las instrucciones del fabricante respecto de la verificacin y
uso del equipo. Si las lecturas redox no se corresponden con los estndares, se
puede sospechar la presencia de incrustaciones en el electrodo de metal noble,
proceder a desincrustarlo de acuerdo a instrucciones
b. La muestra puede ser colectada en la capa ade agua adyacente al fondo con una
botella Van Dorn (ver protocolo en inicio de la seccin 6.1).
c. Transferir la muestra con el tubo de vaciado de la botella Van Dorn a un recipiente de
boca ancha donde se ha colocado el electrodo. Dejar fluir el agua hasta que las
lecturas se estabilicen. Alternativamente sumergir el electrodo directamente en la
botella Van Dorn para tomar las lecturas.
d. Anotar las lecturas obtenidas.
Nota: A medida que la sonda se acerca al fondo (usar mapas batimtricos o una
ecosonda para determinar la profundidad), las lecturas pueden caer rpidamente, en este
punto tener cuidado que la sonda no contacte con el sedimento.
6.2.10 Turbidez
La turbidez del agua est relacionada con sustancias que se hallan como dispersiones
coloidales o dispersiones gruesas. La turbidez no puede ser medida por mtodos
qumicos sino por mtodos fsicos. La turbidez no est asociada directamente con el
tamao de las partculas, sino ms bien con su nmero, tipo de distribucin y estructura
de su superficie.
Un parmetro relacionado a la turbidez es la transparencia, pero as como la primera se
aplica a pequeos volmenes de agua y en consecuencia es apropiada para caracterizar
la capa de agua adyacente al fondo, la transparencia es un parmetro que se refiere a la
columna de agua y sirve para caracterizar a esta ltima. La medicin de la transparencia
es descripta en el Manual de campo para el muestreo de la columna de agua (Zaixso,
2002).
105
La turbidez del agua puede ser medida con equipos especficos (turbidmetros) o con
sondas multipropsito que incluyan el sensor especfico. Por lo general la turbidez se
mide en NTU (unidades nefelomtricas de turbidez), si bien existen otras unidades (FTU:
unidades formazina de turbidez). No es un parmetro que se aplique a la caracterizacin
de aguas intersticiales o de piletas de marea.
Protocolo para la medicin de turbidez en aguas poco profundas (largo del cable
del electrodo).
a. Seguir las instrucciones del fabricante para la calibracin y uso del turbidmetro.
Calibrar el equipo en laboratorio utilizando agua deionizada (turbidez = 0) y una
solucin estndar de formazina (se puede hacer o comprar). Si las lecturas de turbidez
no se corresponden con los estndares, ajustar el turbidmetro de acuerdo al
instrucciones.
b. Descender el sensor hasta llegar a la capa de agua adyacente al fondo, no tocar el
fondo con el electrodo ni disturbarlo de alguna manera, ya que de las lecturas
obtenidas pueden resultar errneas. En las mediciones del agua de orilla, sumergir el
electrodo directamente en el agua para mediciones de superficie o bien en una botella
con una muestra de inmersin; como en el caso anterior procurar no disturbar el fondo
antes de obtener las lecturas.
c. Anotar las mediciones obtenidas.
Protocolo para la medicin de turbidez en aguas profundas
a. Seguir las instrucciones del fabricante respecto de la calibracin y uso del equipo. La
calibracin es conveniente llevarla a cabo cada vez que el equipo es apagado.
b. La muestra puede ser colectada en profundidad (capa de agua adyacente al fondo)
con una botella Van Dorn (ver protocolo en inicio de la seccin 6.1).
c. Transferir la muestra con el tubo de vaciado de la botella Van Dorn a un recipiente de
boca ancha donde se ha colocado el electrodo. Dejar fluir el agua hasta que las
lecturas se estabilicen. Alternativamente se puede sumergir el electrodo directamente
en la botella Van Dorn para tomar las lecturas.
d. Anotar las lecturas obtenidas.
106
6.2.11 Movimientos del agua
Bajo la denominacin movimientos del agua se engloban una serie de mediciones de
campo que comprenden la medicin del caudal en ros y arroyos, la velocidad de
corrientes y la estimacin de la agitacin del agua.
En ambientes marinos costeros, al margen de los posibles mtodos cuantitativos para la
medicin de la agitacin del agua, casi siempre resulta de utilidad una estimacin
subjetiva de sta por parte del muestreador. Esta estimacin se denomina moda y se la
clasifica generalmente en calma (con olas pequeas slo en circunstancias
excepcionales), mediana (con olas grandes unos pocos das al mes, olas pequeas
permanentes), agitada (con olas grandes muy frecuentes, olas pequeas permanentes) y
muy agitada (con olas grandes en forma permanente). Lamentablemente, esta
apreciacin implica un conocimiento extenso, ya sea a lo largo del tiempo o al menos en
muy diferentes condiciones meteorolgicas, del rea que se pretende evaluar.
6.2.11.1 Medicin de caudales
La medida ms precisa del caudal de un ro o arroyo se consigue con un correntmetro
utilizado en varios puntos a lo ancho de la seccin de la corriente. Sin embargo si las
estimaciones no necesitan ser muy precisas, pueden utilizarse mtodos ms simples (por
ejemplo un objeto flotante). El protocolo con correntmetro puede ser consultado en el
Manual de campo para el muestreo de la columna de agua (Zaixso, 2002); aqu se
describir el protocolo de medicin con objeto flotante.
Protocolo
a. Medir el ancho del curso de agua (A) y la profundidad promedio (P). Donde A el
ancho del agua excluyendo el sector seco del cauce; P puede ser estimada a partir
de varias mediciones a lo ancho del curso (con agua), pero por lo general es 0,4 o 0,6
de la profundidad mxima en cursos someros o profundos respectivamente.
b. Medir una lnea de 3 metros de largo (L) a lo largo de la orilla, dentro del sector
medido en el punto a. En cursos de agua muy rpidos podra ser necesario medir
107
lneas de mayor largo. Elegir un sitio donde el flujo y el sustrato sean lo ms uniforme
posible y representativas del ancho, aspecto y direccin del curso de agua. Las reas
con recodos deben ser evitadas.
c. Soltar un objeto flotante (corcho, madera o boya pequeas, etc.) algo aguas arriba de
la lnea medida y en el centro del cauce. Tomar el tiempo (en segundos) en que el
flotador tarda en recorrer el segmento de tres metros. Repetir la medicin cinco o ms
veces hasta que al menos tres mediciones sean muy semejantes.
d. El caudal puede entonces ser calculado como:
q = A. P. L. a / t
donde q = caudal en m
3
por segundo
A= ancho del curso de agua
P= profundidad promedio del curso
L= largo del segmento de recorrido del flotador
a= coeficiente de rugosidad del fondo [0,8 si es rugoso (cantos rodados
grandes), 0,9 si es liso (fango o arena)]
t= tiempo de recorrido del flotador
6.2.11.2 Medicin de corrientes
Para la medicin de velocidad de corrientes en la zona cercana al fondo, existen
actualmente equipos que permiten llevar a cabo esta medicin de manera muy exacta,
entre estos se hallan los correntmetros Doppler. Dependiendo del modelo, algunos de
estos equipos son asimismo apropiados para la medicin de velocidades del agua en
ambientes de agua dulce, an a muy bajas velocidades e incluso en cursos de agua de
unos pocos centmetros de profundidad.
Dado que en general el costo de estos equipos es bastante alto, es deseable su
reemplazo por mtodos de medicin ms econmicos, como por ejemplo los que hacen
uso de colorantes fluorescentes. Estos mtodos son aplicables slo a ambientes de
aguas someras, ya que su utilizacin implica que la dispersin del colorante sea
controlada por buzos. El colorante de uso ms comn es la rodamina B, que es de color
108
rojo violceo y muy visible y puede utilizarse ya sea bajo la forma de soluciones acuosas,
o bien como tabletas que se disuelven lentamente en el agua (5 a 8 minutos).
Como con otros mtodos para la medicin de corrientes, resulta conveniente estandarizar
el da y la hora de la medicin. Para estandarizar el da, llevar a cabo la medicin durante
las mareas de mayor amplitud dentro del mes (corrientes mximas) y/o durante las de
menor amplitud (mnimas) y/o en mareas de amplitud intermedia (promedio). Para
estandarizar la hora, llevar a cabo la medicin hacia la mitad del perodo entre dos
mareas opuestas sucesivas.
Protocolo para la medicin de corrientes de fondo con colorantes.
a. Si se deseara usar colorante en solucin, disolver un poco de rodamina en agua de
mar o dulce (unos 0,5 g por litro) y llenar uno o ms frascos goteros flexibles de
plstico (procurar taparlos ajustadamente). Usar guantes y alguna proteccin para la
mesada de trabajo (film plstico), ya que este colorante mancha mucho.
b. Descender (un par de buzos) al sitio de medicin. Elegir un sitio de fondo uniforme,
sin rocas grandes, escalones u otra irregularidades que puedan afectar la medicin.
c. Llevar a cabo una prueba preliminar para determinar la direccin general de la
corriente. Esto se puede llevar a cabo vaciando. cerca del fondo (5 cm) algunas gotas
del colorante contenido en un gotero.
d. Clavar una estaca en el fondo y usar sta para fijar el extremo de una cinta mtrica
plstica (o de fibra de vidrio). . Desplegar la cinta mtrica en la direccin de la
corriente. Con la ayuda de la cinta se alinearn en el sentido de la corriente algunas
estacas marcadas (2 m, 4 m, 6 m, etc.). En caso de que se tengan dudas acerca de la
direccin de la corriente en los puntos ms alejados, volver a usar el mtodo del
gotero en los segmentos problemticos.
e. Uno de los buzos volcar unas gotas de la solucin de colorante cerca del fondo,
hasta que se forme una mancha bien visible pero no demasiado grande. Estas
emisiones pueden repetirse peridicamente, a intervalos de, por ejemplo, 10
segundos o ms.
f. El otro buzo, provisto de un cronmetro y alejado varios metros (en funcin de la
visibilidad) perpendicularmente al trayecto de la(s) mancha(s) de colorante, anotar
109
(en una pizarra) el tiempo transcurrido entre la emisin del colorante y el pasaje de la
mancha de colorante por cada una de las estacas de marcacin (es preferible tener la
pizarra ya preparada para las anotaciones). Si la dispersin vertical de la mancha
fuera grande, utilizar para el cronometraje, el sector de sta adyacente al fondo. En
general una distancia recorrida de entre 2 y 6 m es suficiente para llevar a cabo
buenas estimaciones de velocidad. Preferiblemente usar los tiempos de recorrido a
partir de la segunda estaca para evitar interferencias debidas a la presencia del buzo.
g. Repetir la medicin cinco o ms veces (si es posible en lugares vecinos) hasta que al
menos tres mediciones sean muy semejantes.
Nota: Si slo interesara la medicin de corrientes en superficie o a media agua, se
sugiere como otra alternativa econmica a las mediciones con correntmetros Doppler, el
uso combinado de flotadores y GPS. El protocolo correspondiente se halla descripto en el
Manual de campo para el muestreo de la columna de agua (Zaixso, 2002).
6.2.11.3 Medicin de la agitacin del agua
La medicin de la agitacin del agua es una tarea compleja, sin embargo es factible de
ser estimada, si se aceptan algunas limitaciones a la cantidad de informacin obtenida.
En primer lugar corresponde indicar que los correntmetros Doppler 3D son los
instrumentos idneos para la medicin de las velocidades del agua (y otros parmetros)
en sus tres componentes espaciales, an en condiciones de campo muy complejas. Sin
embargo, estos equipos son an muy caros, para un uso generalizado de los mismos.
Si slo interesara una medicin acumulada y relativa de la agitacin de agua, entonces
existen algunos mtodos muy simples para llevar a cabo estas estimaciones. El mtodo
de las esferas (o semiesferas) de yeso se encuentra entre ellos. Este procedimiento se
basa en el desgaste producido por disolucin en el agua, de esferas de yeso
estandarizadas y es particularmente til cuando slo se pretende una medida relativa de
la agitacin del agua, la cual por supuesto puede ser usada para comparar localidades
110
entre s o niveles de una localidad entre s, en el supuesto de que los materiales y
protocolos utilizados son los mismos en todas las mediciones efectuadas.
El yeso comn puede ser reemplazado por yeso para moldes dentales o por mezclas
comerciales para reparaciones de mampostera (Poximix para interiores por ejemplo); en
todos los casos es conveniente que la mezcla hmeda contenga cantidades
estandarizadas de agua. El molde (a llenar con una jeringa plstica sin aguja) puede ser
ya sea un molde para cubitos esfricos o mejor an pelotitas de ping-pong de celuloide.
Un alambre grueso de un largo conveniente (slo el extremo, que debe estar doblado) o
bien un clavo (la cabeza) deben ser incluidos dentro del molde, antes de que la mezcla
frage. En el caso de los moldes de pelotitas de ping-pong, una vez la mezcla bien
fraguada, se pasan stas por una llama y el celuloide se consume instantneamente y sin
dejar residuos. En determinados ambientes (intermareal por ejemplo) es conveniente el
uso de semiesferas de yeso (el molde puede ser una pelota plstica de unos 10 cm de
dimetro), que una vez fraguadas se pegan con cemento de contacto a una base
cuadrada de plstico (acrlico), madera o aluminio, en la cual se perforan (en las
esquinas) un par de agujeros para sujecin. Ya se trate de esferas o semiesferas, estas
deben terminar de secarse (con su soporte y sin el molde) a temperatura ambiente o en
una estufa a baja temperatura (unos 25-40C), hasta peso constante (varios das). En
este momento se pesan y se identifican en el soporte (alambre o base).
Protocolo para mediciones en costas rocosas.
a. Disponer de un taladro elctrico porttil (si es posible con percusin) y de brocas para
piedra (zincadas).
b. Ubicar el sitio de medicin (en marea baja) y perforar un agujero de unos 7-10 cm de
profundidad, llenarlo con pegamento epoxi de fraguado rpido e introducir el alambre
(o clavo) que hace de base a la esfera de yeso.
c. Alternativamente para semiesferas, marcar sobre la roca la ubicacin de los agujeros
de sujecin que hay en la base plstica y perforar a una profundidad suficiente como
para poder insertar un par de tarugos plsticos de unos 5 cm de largo. Insertar los
tarugos y sujetar la base con la ayuda de tornillos de bronce. Existen varios otros
mtodos alternativos para la colocacin de esferas o semiesferas en el terreno,
111
cualquiera sea el elegido procurar que la esfera y su base puedan ser desmontadas
una vez terminado el perodo de exposicin.
d. De acuerdo al tamao de la esfera o de la semiesfera, exponer stas a la agitacin
durante un perodo estandarizado (un ciclo de marea o preferentemente perodos ms
largos).
e. Desmontar la esfera con su base y guardarlos bien amortiguados en un recipiente de
transporte.
f. Dejar secar en estufa y pesar. Obtener la diferencia de pesos.
Notas:
- El mtodo no es muy apropiado para playas de sustratos blandos ya que los
sedimentos resuspendidos pueden erosionar la esfera y resultar en lecturas
aberrantes. En cambio, si los sedimentos son estables (playas de limos), se puede
soldar una tuerca en el extremo de las bases de alambre de las esferas, de tal
manera que se puedan atornillar a varillas de metal de extremo roscado, de unos 50
cm de largo, las cuales son enterradas completamente en el sedimento y actan como
ancla (existen varios otros diseos de anclado al sustrato).
- Cuando el perodo de exposicin sea largo es conveniente que las partes roscadas
sean de bronce o galvanizadas.
Protocolo para mediciones en el submareal.
a. Preparar un muerto de metal (hierro) u hormign de dos o tres kilogramos de peso
(indicativo), Incluir en el muerto, ya sea uno (para esferas) o un par de tornillos (para
semiesferas) que puedan encastrar en los agujeros de ajuste de la base plstica.
b. En caso de usar esferas, en cada base de alambre soldar una tuerca en su extremo
libre (pesar la esfera luego de esta operacin). Atornillar al muerto.
c. En caso de usar semiesferas encastrar en los tornillos del muerto y ajustar con un par
de tuercas.
d. Ubicar con el buzo el sitio de medicin y disponer en ste el muerto con la esfera o
semiesfera.
e. De acuerdo al tamao de la esfera o de la semiesfera, exponer stas a la agitacin
durante un perodo estandarizado (desde 1 da a una semana por ejemplo).
112
f. Retirar con el muerto. Destornillar y guardar bien amortiguada en un recipiente de
transporte.
g. Dejar secar en estufa y pesar. Obtener la diferencia de pesos.
En muchas ocasiones resulta til estimar la mxima fuerza o velocidad del agua a que
puede estar sometido un organismo (un alga flexible por ejemplo). El mtodo del disco
de arrastre, ha sido diseado para obtener la mxima fuerza de arrastre en la zona
intermareal. Este procedimiento consiste en un equipo para medir fuerzas, como por
ejemplo un medidor de fuerza digital (tambin puede usarse una balanza de resorte), el
cual es utilizado para registrar la mxima fuerza de arrastre ejercida sobre un pequeo
disco que se mantiene perpendicular al flujo de agua.
Las mediciones de fuerza mxima, pueden ser usados como tales (expresados en
Newton) o bien utilizados para estimar la velocidad del agua a travs de la siguiente
ecuacin:
Velocidad = [(2 f) / ( R
2
C
d
)]
1/2
Donde (respetando las unidades indicadas para mantener la dimensionalidad de la
velocidad en m s
-1
):
f = fuerza de arrastre (en Newton: kg m s
-2
)
= densidad del agua de mar (1024 kg m
-3
)
= 3,1416
R = radio del disco de arrastre (en metros)
C
d
= Coeficiente de arrastre (adimensional). Este valor es igual a 1,2 para un disco de 2
cm de dimetro y velocidades del agua que vayan entre 0,1 y 100 m s
-1
, las cuales
incluyen las velocidades posibles en el intermareal.
La ecuacin para el clculo de la velocidad no toma en cuenta los componentes de la
fuerza debidos a la aceleracin. Si las fuerzas de aceleracin existen, entonces la
ecuacin tiende a sobrestimar la velocidad del agua
113
Nota: El dimetro del disco puede ser cambiado de tal forma que las fuerzas de arrastre
permanezcan dentro del rango del medidor de fuerzas. Hoerner (1965) proporciona
valores de C
d
para diferentes nmeros de Reynolds y dimetros de disco.
6.2.12 Inclinacin del sustrato
La inclinacin de las superficies estudiadas puede medirse con diferentes metodologas,
siendo las ms sencillas de entre ellas las estimaciones de orden (pendiente abrupta,
pendiente intermedia, pendiente baja) y algunas cuantificaciones aproximadas de rango
(0-10, 10-30, 30-60 y ms de 60). Algo ms complicadas, pero ms precisas, son las
estimaciones de pendiente basadas en las diferencias de altura entre puntos (seccin
6.1.2.1); si se cuenta para cada par de puntos con su diferencia de altura (cateto opuesto:
d
1-2
) y la distancia en lnea recta entre ambos (hipotenusa: c
1-2
), entonces la pendiente ()
puede ser estimada a partir de la frmula trigonomtrica (Figura 21):
= inversa seno (cateto opuesto / hipotenusa)
Las medidas a tomar dependen del tipo de costa a muestrear, por ejemplo por lo general
en las costas rocosas de pendiente moderada a abrupta los cambios de pendiente o
inflexiones son claramente visibles y conviene tenerlos en cuenta; en cambio, para playas
arenosas o de fango donde es difcil observar puntos de inflexin, la estrategia de
medicin es diferente.
Protocolo para costas con inflexiones netas del terreno
a. Identificar los puntos de inflexin independientemente de las estaciones o niveles de
muestreo.
b. Tomar las diferencias de altura y distancias en lnea recta entre pares adyacentes de
puntos de cambio de pendiente.
c. Calcular la pendiente por la frmula general. Todos los niveles de muestreo
comprendidos dentro de un par adyacente de puntos de inflexin tienen la misma
pendiente.
114
Figura 21: Inclinacin. a, mediciones en costas con inflexiones abruptas; b, mediciones
en costas sin inflexiones; c, mediciones en costas de pendiente uniforme.
115
Protocolo para costas sin inflexiones netas del terreno
a. Cuando es difcil observar puntos de inflexin (cambio de pendiente) identificar las
estaciones de muestreo y para cada una de ellas identificar dos puntos accesorios,
uno por arriba y otro por debajo de la estacin. La distancia de la estacin a ambos
puntos accesorios debe ser aproximadamente la mitad de la distancia a las
estaciones de muestreo adyacentes, de manera que un punto accesorio sirva a dos
estaciones consecutivas.
b. Tomar las diferencias de altura y distancias en lnea recta entre pares adyacentes de
puntos accesorios.
c. Calcular la pendiente de la estacin de muestreo por la frmula general, utilizando las
distancias entre puntos accesorios.
Para sitios con pendientes relativamente uniformes se pueden usar para el clculo de las
inclinaciones, las diferencias de altura entre niveles de muestreo.
6.2.13 Penetrabilidad del sedimento
Este es un parmetro a caracterizar slo en muestreos de la zona intermareal de playas
de sustratos muebles. A los efectos prcticos se puede definir la penetrabilidad como la
profundidad de penetracin en el sedimento de un objeto pesado y puntiagudo que cae
desde una altura predeterminada.
No hemos encontrado un mtodo estandarizado para llevar a cabo las mediciones de
penetrabilidad. El equipo usado por nosotros consiste en:
- Un tubo de plstico rgido de 1,5 cm de dimetro y 100 cm de largo.
- Una barra de hierro de 1cm de dimetro y 60 cm de largo, provista de una punta
cnica de 1,5 cm de largo. A 10 cm del extremo romo (superior), se marc un lnea
con pintura de color.
Protocolo
a. Disponer el tubo plstico verticalmente sobre el sustrato.
b. Introducir por su extremo superior la barra de hierro hasta la marca de pintura.
116
c. Soltar la barra para que por su peso se inserte en el sustrato.
d. Inmediatamente retirar verticalmente el tubo algunos centmetros, de forma de
exponer a la barra.
e. Marcar sobre la barra el nivel de penetracin en el sustrato (con el pulgar). Extraer la
barra y medir el nivel con una regla milimetrada.
6.2.14 Profundidad de la tabla de agua
A caracterizar slo en muestreos de la zona intermareal de playas de sustratos muebles,
la profundidad de la tabla de agua se puede definir como la profundidad (estandarizada a
un tiempo determinado, por ejemplo a la hora de la bajamar) a la que se encuentra agua
en forma permanente.
Protocolo
a. Practicar un hoyo a pala en el sustrato, hasta que se observe fluir agua contenida en
los sedimentos.
b. Esperar un par de minutos y medir la profundidad desde el borde del pozo hasta el
nivel de agua.
117
6.3 Muestreo de parmetros fsico-qumicos
Incluye a todos aquellos parmetros cuyas muestras deben ser enviadas al laboratorio
para su estimacin, ya que su complejidad (o por la ausencia de un equipamiento
adecuado, o por la imposibilidad de llevar a ste al campo) no permite su evaluacin
inmediata. Todos aquellos parmetros de la seccin anterior (pH, oxgeno, salinidad,
etc.), que no puedan ser determinados en el momento, pasan automticamente a formar
parte de esta categora.
6.3.1 Qumica general en agua adyacente
Corresponde a los muestreos del agua adyacente al fondo y su coleccin se hace de
acuerdo a los protocolos descriptos en la seccin 6.1 y que comprenden, la toma directa
de muestras con botellas (en aguas de orilla) o con equipos especializados como las
botellas de Van Dorn (en aguas someras o profundas).
6.3.1.1 Qumica general (incluye pH, potasio, nitrgeno, fsforo, slice, dureza,
acidez, alcalinidad, sulfatos, fluoruros, cloruros y turbidez)
Protocolo
a. Colectar las muestras de acuerdo a los protocolos de la seccin 6.1 y guardar en
botellas plsticas limpias y pre-etiquetadas (de 250 ml hasta 2 litros de acuerdo al
nmero de los anlisis a efectuar).
b. Colocar el tapn y enfriar inmediatamente en heladera.
c. No filtrar ni preservar.
6.3.1.2 Otros
Consultar seccin 5.2 del Manual de muestreo de la columna de agua (Zaixso, 2002) para
los protocolos de anlisis tales como nutrientes en bajas concentraciones, metales
pesados, hidrocarburos y clorofila a.
118
6.3.2 Tamao de partculas (granulometra)
Sobre las muestras de sedimentos se pueden tomar las submuestras necesarias para
llevar a cabo la determinacin de varios parmetros propios de los sustratos blandos,
tales como la granulometra, el contenido en materia orgnica y carbonatos. Asimismo, a
partir de las mismas muestras, si stas son adecuadamente manipuladas, pueden
obtenerse submuestras para la determinacin de metales pesados e hidrocarburos.
Los protocolos para la obtencin de muestras para anlisis de sedimentos dependen del
tipo de ambiente muestreado y de los equipos utilizados para ello y si bien es posible
obtener submuestras para diferentes determinaciones a partir de una nica muestra, a los
efectos prcticos conviene llevar a cabo los muestreos por separado. Se comenzar con
los protocolos para el muestreo de granulometra.
La granulometra es el anlisis de la distribucin de las frecuencias de tamao de las
partculas en una muestra de sedimento. Este anlisis se lleva a cabo tamizando la
muestra a travs de una batera de tamices estandarizados de abertura de malla
decreciente y/o para las fracciones ms finas pipeteando una suspensin de sedimento a
tiempos determinados. El tamao de las partculas si bien es una variable continua, es
usualmente expresado segn una escala de grado, con clases o categoras discretas,
cada una con un lmite superior y un lmite inferior. Se han diseado varias escalas de
grado arbitrarias, pero las ms comunes son la escala de Wentworth y la escala phi. La
escala de Wentworth es geomtrica y milimtrica; la escala phi se basa en la anterior y se
halla aplicando log
2
a los valores de la escala Wenworth.
Protocolos para el intermareal
a. Ubicar la estacin de muestreo (latitud y longitud con GPS y su nivel vertical).
b. Colectar la muestra para granulometra con un muestreador de Hope hasta la
profundidad a que se encuentren los organismos estudiados (o alternativamente los
ubicados ms profundamente).
c. De ser posible y sin sacar del muestreador, describir en el campo: largo de la muestra
obtenida y si existen capas, entonces indicar largo de cada una de ellas y su color.
119
d. Si la muestra va a ser considerada en conjunto, entonces guardar en una bolsa
plstica hermtica (tipo Whirl-Pak), identificada interna y externamente y luego enfriar
en heladera.
e. Si la muestra va a ser estudiada por capas, entonces extruir cada una de ellas en
sendas bolsas plsticas identificadas y guardar en heladera (ver nota).
f. Si el tiempo hasta su elaboracin es largo puede ser conveniente congelar la muestra.
Nota: La extrusin por capas de una muestra obtenida con un muestreador de Hope se
lleva a cabo colocando el muestreador vertical (sobre un recipiente o bolsa de
recoleccin) y con el pulgar de la mano que sostiene el muestreador, se corre la banda de
goma que tapa el orificio de entrada de aire. Permitiendo o cerrando la entrada de aire, la
muestra se desliza hacia el extremo inferior de manera y la muestra puede fraccionarse.
Protocolo para aguas muy someras (orilla) o someras (con buzo)
a. Ubicar la estacin de muestreo (latitud y longitud con GPS y su profundidad).
b. Colectar (el muestreador o el buzo) la muestra para granulometra con un muestreador
de Hope hasta la profundidad a que se encuentren los organismos estudiados (o
alternativamente los ubicados ms profundamente).
c. Extraer el muestreador y tapar ambos extremos con tapas o tapones.
d. Si se deben tomar varias muestras, mantenerlas en posicin vertical hasta su
descripcin general (para comodidad de los buzos es posible usar un soporte plstico
o de alambre forrado (rack) como los usados en laboratorios para sostener tubos de
ensayo).
e. De ser posible y sin sacar del muestreador, describir en el campo (o bote): largo de la
muestra obtenida y si existen capas, entonces indicar largo de cada una de ellas y su
color.
f. Si la muestra va a ser considerada en conjunto, entonces guardar en una bolsa
plstica hermtica (tipo Whirl-Pak), identificada interna y externamente y luego enfriar
en heladera.
g. Si la muestra va a ser estudiada por capas, entonces extruir cada una de ellas (en la
orilla) en sendas bolsas plsticas identificadas y guardar en heladera.
h. Si el tiempo hasta su elaboracin es largo puede ser conveniente congelar la muestra.
120
Nota: No es conveniente usar muestreadores ms largos de lo necesario, ya que se
llenan de agua y esto puede disturbar la muestra.
La toma de muestras en aguas profundas requiere que al menos uno de los integrantes
del equipo de muestreo sea prctico con las operaciones de botes y las de seguridad a
bordo. Es conveniente antes de salir estar informado acerca del pronstico de tiempo, ya
que las predicciones no son buenas es conveniente posponer la campaa.
Protocolo para muestreo de aguas profundas con dragas.
a. Ubicar la estacin de muestreo (latitud y longitud con GPS y su profundidad).
b. Disponer la draga en posicin de disparo. En esta etapa tener mucho cuidado en la
manipulacin del equipo (particularmente con dragas tipo Ekman), ya que su cerrado
accidental puede causar serios daos al operador.
c. En embarcaciones chicas, asegurarse que la soga (o cable) se halle adecuadamente
unida por un extremo a la draga y por el otro, atada al bote.
d. Bajar la draga hasta que tome contacto con el sedimento (es conveniente tener una
idea previa de la profundidad del sitio de muestreo). Por lo general el propio peso de
la draga es suficiente para penetrar en el sedimento. En este punto, el aflojamiento de
la soga o cable, hace que en las dragas tipo Petersen o van Veen, se active el
mecanismo de cierre.
e. Para las dragas tipo Ekman, enviar el mensajero para soltar el mecanismo de cierre.
f. Recuperar la draga lentamente para minimizar el efecto de disturbio de la turbulencia
sobre el sedimento recogido (que puede resultar en la prdida/alteracin de los
sedimentos de la superficie de la muestra).
Nota: Si la draga sube a superficie con las cucharas parcialmente cerradas, la
muestra debe ser descartada. El descarte debe ser temporalmente dispuesto en un
balde u otro recipiente, hasta tanto se termine con el muestreo del sitio, para evitar
contaminar las otras muestras a tomar.
g. En cubierta, disponer la draga cerrada sobre un recipiente poco profundo
(dependiendo del tamao de la draga: una bandeja o un cajn de pescado).
121
h. Abrir la(s) tapa(s) de la cara superior y extraer con un muestreador de tubo (Hope),
una o ms muestras de la parte central del sedimento recogido. La profundidad de la
muestra depende del ambiente de muestreo: en ambientes lacustres muchas veces es
suficiente con muestrear uno o dos centmetros de la superficie; en ambientes marinos
se muestrean unos 10 a 15 cm. Si la muestra es lo suficientemente abundante, vaciar
el resto en el recipiente y seguir con los protocolos para muestreos biolgicos.
i. Alternativamente, particularmente si el tamao de la draga es pequeo (Ekman)
puede resultar necesario guardar todo el contenido de sta.
j. Alternativamente, vaciar el contenido de la draga en el recipiente, mezclar bien con
una esptula y tomar una alcuota.
k. Para muestras replicadas, lavar bien la draga y reiniciar en b.
l. Guardar la muestra en un recipiente plstico de boca ancha (o una bolsa tipo Whirl-
pak), convenientemente identificado interna y externamente. Enfriar en heladera (y
congelar en cuanto sea posible si la muestra va a ser usada en parte para la
determinacin de materia orgnica).
m. Anotar en la libreta de campo: la apariencia del sedimento, textura, color, olor,
presencia de detritos, etc.
Los muestreadores de tubo son capaces de penetrar el sedimento ms profundamente
que las dragas; en consecuencia pueden proveer una seccin de las diferentes capas de
sedimento y por lo tanto, informacin acerca de la depositacin del mismo. En general
son usados para el muestreo de las caractersticas fsico-qumicas de los sedimentos y en
el muestreo de la micro-meiofauna, dado que por su escasa superficie de muestreo no
son apropiados para el muestreo de organismos bentnicos grandes.
Es raro el uso de muestreadores de tubo en el muestreo de sedimentos en ros y arroyos,
ya que estos equipos requieren de aguas de flujo mnimo. Alternativamente, los
muestreadores de tubo son comunes en los muestreos de sedimentos de orilla, como
fuera antes descripto.
Protocolo para el muestreo de aguas profundas con muestreador tipo Kajak
a. Ubicar la estacin de muestreo (latitud y longitud con GPS y su profundidad).
122
b. Abrir la vlvula y armar el mecanismo de disparo. Asegurarse que la soga (o cable) se
halle adecuadamente unida por un extremo del muestreador y por el otro, atada al
bote.
c. Bajar el muestreador hasta casi tocar el sedimento y luego apoyar suavemente el
equipo, dejando que penetre por su propio peso en ste.
d. De acuerdo a los modelos, cerrar el extremo superior del muestreador ya sea
enviando un mensajero o bien extrayendo al equipo del sedimento.
e. Recuperar el equipo lentamente y una vez en superficie y sin sacarlo del agua,
colocarle (si carece de una vlvula cscara de naranja) un tapn en su abertura
inferior.
f. Remover el tubo interno del muestreador (asegurarse de que tenga unos 20-30 cm de
muestra) y colocarle un tapn en su extremo superior. Almacenar verticalmente e
identificar.
g. Repetir a partir de b (con un nuevo tubo interno) si se deben obtener rplicas.
h. Una vez en la costa, sifonear el agua que se halla por encima de la muestra, dejando
unos 2-3 mm. No alterar la interfase agua-sedimento.
i. Llevar a cabo una cuidadosa descripcin de la muestra, incluyendo: largo total de la
muestra obtenida, longitud (en mm), color y textura de cada una de las capas que
aparecen como diferentes.
j. Con una varilla de extrusin (generalmente vienen con el equipo y consisten en una
varilla con una pieza de goma en su extremo, la cual ajusta al dimetro interno del
tubo), forzar al contenido suavemente a que salga por el extremo superior del tubo.
k. A medida que la muestra es extruda, cortar con una esptula limpia rebanadas del
largo de una capa o menos. Guardar en bolsas adecuadamente identificadas y anotar
en la libreta de campo los detalles del extrudo.
Algunas estaciones de muestreo han sido diseadas para ser muestreadas desde
puentes. Consecuentemente las muestras pueden ser obtenidas desde el centro del
canal sin tener que recurrir al uso de botes.
123
Protocolo para muestreo de ros o arroyos desde puentes
a. Disponer la draga en posicin de disparo. En esta etapa tener mucho cuidado en la
manipulacin del equipo (particularmente con dragas tipo Ekman), ya que su cerrado
accidental puede causar serios daos al operador.
b. Asegurarse que la soga (o cable) se halle adecuadamente unida por un extremo a la
draga y por el otro, atada al puente. Utilizar el lado del puente ubicado aguas arriba.
c. Bajar la draga hasta que tome contacto con el sedimento (es conveniente tener una
idea previa de la profundidad del sitio de muestreo). Por lo general el propio peso de
la draga es suficiente para penetrar en el sedimento. En este punto, el aflojamiento de
la soga o cable, hace que en las dragas tipo Petersen o van Veen, se active el
mecanismo de cierre.
d. Para las dragas tipo Ekman, enviar el mensajero para soltar el mecanismo de cierre.
e. Recuperar la draga lentamente para minimizar el efecto de disturbio de la turbulencia
sobre el sedimento recogido (que puede resultar en la prdida/alteracin de los
sedimentos de la superficie de la muestra).
Nota: Si la draga sube a superficie con las cucharas parcialmente cerradas, la
muestra debe ser descartada. El descarte debe ser dispuesto en la orilla o aguas
abajo (del lado opuesto del puente), para evitar contaminar las otras muestras a
tomar.
f. Una vez en el puente, apoyar la draga cerrada sobre un recipiente poco profundo (una
bandeja por ejemplo).
g. Abrir la(s) tapa(s) de la cara superior y extraer con un muestreador de tubo o una
esptula, una o ms muestras de la parte central del sedimento recogido. Vaciar el
resto de la muestra en el recipiente (y de ser necesario seguir protocolos para los
muestreos biolgicos).
h. Alternativamente, particularmente si el tamao de la draga es pequeo (Ekman)
puede resultar necesario guardar todo el contenido de sta.
i. Alternativamente, vaciar el contenido de la draga en el recipiente, mezclar bien con
una esptula y tomar una alcuota.
j. Para muestras replicadas, lavar bien la draga y reiniciar en b.
k. Guardar la muestra en un recipiente plstico de boca ancha (o una bolsa tipo Whirl-
pak), convenientemente identificado interna y externamente. Enfriar en heladera (y
124
congelar en cuanto sea posible si la muestra va a ser usada en parte para la
determinacin de materia orgnica).
l. Anotar en la libreta de campo: la apariencia del sedimento, textura, color, olor,
presencia de detritos, etc.
El muestreo de ambientes lticos con flujos altos puede ser complicado y requiere del
uso de botes. Al igual que para el muestreo de aguas profundas, la persona que opera el
bote debe ser adecuadamente experimentada en esta actividad. Idealmente debera
haber tres personas en el muestreo con bote de ros caudalosos, dos de ellas a cargo de
la toma de las muestras y la tercera como responsable de la operacin del bote
exclusivamente.
El muestreo debe comenzar siempre en el sitio ubicado ms aguas abajo y procediendo
con las muestras ubicadas hacia la cabecera. De existir problemas con el motor del bote,
la corriente se encargar de acercar al equipo al vehculo de transporte.
Protocolo para el muestreo de ros o arroyos desde bote
a. Cuando un sitio de muestreo es alcanzado, el botero debe maniobrar de forma de
mantener al bote en dicho sitio. Usar referencias de la costa para lograr este objetivo.
b. La persona ubicada en la proa es la responsable de la toma de las muestras (las
correspondientes al agua adyacente, antes que las de fondo).
c. Obtener las muestras de sedimento con una draga (tipo van Veen o Petersen) de
acuerdo a los protocolos ya descriptos en esta seccin.
Una descripcin de la elaboracin de muestras para granulometra es detallada en el
Apndice 4.
6.3.3 Carbonato de calcio y materia orgnica.
Dado que para determinar la materia orgnica contenida en una muestra de sedimento,
algunas de las tcnicas usadas implican la eliminacin previa de los carbonatos, es
posible entonces usar la misma muestra para ambos propsitos.
125
Para la determinacin de las cantidades de carbonato de calcio y de materia orgnica en
sedimentos, se puede tomar una alcuota de la muestra destinada a granulometra
(homogeneizando la muestra antes de tomarla) o alternativamente obtener una nueva
muestra.
Protocolo
a. Tomar la muestra de sedimento con un muestreador de Hope, Kajak o draga, de
acuerdo a lo que resulte ms apropiado de acuerdo a la profundidad o conveniencia y
seguir los protocolos descriptos en la seccin 6.3.2.
b. Guardar en bolsas plsticas hermticas (tipo Whirl-Pak) e identificar interna y
externamente.
c. Enfriar inmediatamente en heladera. Cuando sea posible congelar hasta el momento
de elaboracin.
6.3.4 Metales pesados
Los protocolos de toma de muestras para la determinacin de metales pesados son en
esencia los mismos que los utilizados en el muestreo para estudios granulomtricos,
debindose tomar algunas precauciones particulares.
Protocolo
a. Tomar la muestra con un muestreador de Hope, de Kajak o una draga, de acuerdo a
lo que resulte ms apropiado de acuerdo a la profundidad o conveniencia y seguir los
protocolos descriptos en la seccin 6.3.2. Tener en cuenta que: El muestreador de
Hope debe ser de material plstico; en los muestreadores de tipo Kajak, utilizar
preferiblemente aquellos que son de tubo nico recambiable y sin cilindro bisel
cortador; la esptula para separar capas (en la extrusin) tambin debe ser de
plstico; en muestreos con draga tomar la submuestra para metales con un
muestreador de tubo de plstico, en la parte central de la muestra de sedimento.
b. Guardar la muestra en recipientes de plstico (o bolsas hermticas) ultralimpios.
c. Enfriar en heladera.
126
6.3.5 Hidrocarburos y orgnicos
Los protocolos de toma de muestras para la determinacin de hidrocarburos y otros
orgnicos (organoclorados, etc.) son en esencia los mismos que los utilizados en el
muestreo para estudios granulomtricos, debindose tomar algunas precauciones
particulares.
Protocolo
a. Tomar la muestra con un muestreador de Hope, de Kajak o una draga, de acuerdo a
lo que resulte ms apropiado de acuerdo a la profundidad o conveniencia y seguir los
protocolos descriptos en la seccin 6.3.2. Tener en cuenta que: El muestreador de
Hope debe ser de metal (preferiblemente acero inoxidable); en muestreadores de tipo
Kajak, el tubo interno debe ser metlico y la esptula para separar capas (en la
extrusin) tambin debe ser de metal; en muestreos con draga tomar la submuestra
para orgnicos con un muestreador de tubo metlico.
b. Guardar la muestra en recipientes de vidrio de boca ancha ultralimpios con tapa (o
contratapa) de tefln. Si la muestra es para anlisis de orgnicos voltiles o
semivoltiles entonces el frasco debe llenarse hasta el tope, sin dejar espacios vacos.
Para otros anlisis ms especficos el laboratorio que llevara a cabo los anlisis debe
proveer de los recipientes y preservantes adecuados.
c. Enfriar en heladera.
6.3.6 Otros anlisis en sedimentos
Otros anlisis en sedimentos pueden incluir la determinacin de las concentraciones de
nitrgeno y fsforo en los mismos. A continuacin se describe el protocolo de muestreo.
Protocolo
d. Tomar la muestra con un muestreador de Hope, de Kajak o una draga, de acuerdo a
lo que resulte ms apropiado de acuerdo a la profundidad o conveniencia y seguir los
protocolos descriptos en la seccin 6.3.2.
127
e. Guardar la muestra en recipientes de vidrio ultralimpios con tapa (o contratapa) de
tefln.
f. Enfriar en heladera.
6.3.7 Caracterizacin de los sustratos duros
En muchos ambientes de muestreo los sustratos duros son el sustrato dominante, siendo
necesaria su caracterizacin a los fines de la descripcin general del habitat. Dicha
caracterizacin es conveniente que la lleve a cabo un petrlogo o un gelogo, para lo cual
se debe tomar una o ms muestras del sustrato de aproximadamente unos 300 cm
3
cada
una. La muestra debe ser representativa del rea de trabajo y no debe presentar signos
de haber sido meteorizada (alterada por el ambiente).
128
6.4 Muestreos biolgicos generales
Las tcnicas y equipos de muestreo utilizados en estudios taxonmicos, biolgicos y
ecolgicos, son sensiblemente semejantes. La principal diferencia entre ellos, es la
cantidad mnima de ejemplares requeridos y las caractersticas del muestreo, ya que por
ejemplo, a los efectos taxonmicos es suficiente una muestra cualitativa de unos pocos
individuos (como extremo un nico individuo); para estudios de biologa se requieren por
lo general muestras cualitativas o cuantitativas del orden de unas pocas decenas de
individuos o ms; finalmente para estudios de ecologa son necesarios muestras
cuantitativas del orden de decenas o unas pocas centenas de ejemplares.
Los muestreos taxonmicos sirven principalmente para la obtencin de especmenes de
referencia taxonmica. Los especmenes de referencia, constituyen valiosos registros
cientficos y su coleccin y manipulacin subsecuente deben ser hechos con todo el
cuidado posible, para que el tiempo empleado en estas tareas no se malgaste. Los
muestreos biolgicos son utilizados principalmente para el estudio de ciclos de vida,
fenologa, crecimiento o fisiologa. Por su parte los muestreos ecolgicos se utilizan para
estudios de demografa o dinmica de poblaciones (reclutamiento de juveniles en la
poblacin, cambios estacionales de la biomasa, mortalidad, etc.) o para el estudio de
comunidades (estructura, diversidad, rea ocupada, etc.).
6.4.1 Bacterias
Los protocolos de toma de muestras para bacteriologa en sedimentos son los
correspondientes al muestreo con dragas y muestreadores de jeringa, debindose tomar
para el caso algunas precauciones particulares.
Protocolo
a. Siguiendo los protocolos descriptos en la seccin 6.3.2, tomar la muestra
preferentemente con una draga que tenga tapa para submuestreo en su parte superior
(de acuerdo al modelo que resulte ms apropiado para la profundidad y ambiente).
129
b. Una vez extrada la draga del agua se toman las submuestras para bacteriologa con
un muestreador de jeringa. La jeringa se mantiene perpendicular al sustrato y al
tiempo que se tira del mbolo, se la introduce lentamente en el sedimento hasta la
marca de 5 cc.
c. Guardar la jeringa con la muestra en bolsas tipo Whirl-Pak (esterilizadas) o
alternativamente en un recipiente esterilizado con tapa (o contratapa) de tefln.
Etiquetar.
d. Enfriar en heladera.
e. A continuacin se pueden tomar otras muestras de la draga (granulometra,
macrofauna, etc.).
6.4.2 Macroalgas y macrofitas.
En todos los muestreos obtener especmenes de referencia. An cuando el trabajo
encarado sea de ndole ecolgica, biolgica o para anlisis de tejidos, siempre se deben
colectar y guardar especmenes de referencia de las especies muestreadas. Los
especmenes de referencia pueden ser guardados en herbarios por muchos aos y
proveen de registros permanentes de las especies que han sido muestreadas (y
registradas o analizadas) en un trabajo en particular y que pueden ser consultados por
especialistas para estudios taxonmicos generales.
Es conveniente que el herbario al cual se envan los especmenes de referencia,
garantice el mantenimiento del material recolectado y sea adecuadamente conocido por
los especialistas de los diferentes grupos taxonmicos; al respecto consultar con la
Universidad (Facultad de Ciencias Naturales) o Museo de Ciencias Naturales ms
cercano. Por otra parte, es conveniente guardar algunos especmenes de referencia (con
la misma identificacin que los enviados al herbario) en una pequea coleccin en el
lugar de trabajo; cuando se disponga de una identificacin confirmada, incluirla en una
etiqueta extra, con indicacin del nombre del especialista que la llev a cabo.
Nos referiremos en primer lugar a la coleccin de especmenes para referencia y
biologa. En general se deben colectar plantas enteras. Muchos grupos (particularmente
130
de algas) no pueden ser adecuadamente identificados (a nivel de gnero o especie) si la
planta colectada no cuenta con estructuras reproductivas (macroalgas: esporangios y/o
gametangios; macrofitas: flores y/o frutos maduros).
Protocolo para colectar especmenes de macroalgas y macrofitas blandas para
referencia y estudios biolgicos
a. Recoger, con el mtodo ms apropiado al sitio de muestreo (manualmente, buzo,
rastra, etc.), algunas plantas en un recipiente de plstico, vidrio, bolsa plstica
hermtica o bolsa de red fina (en muestreos con buzos). Para estudios de biologa por
lo general es suficiente colectar entre 30 y 100 ejemplares.
b. Si el laboratorio estuviera cercano, guardar en una bolsa plstica o recipiente con un
poco de agua. Para viajes ms largos, envolver en papel absorbente mojado y
guardar en una bolsa plstica; transportar dentro de una heladera de telgopor con ice-
packs.
c. Alternativamente, preservar los especmenes en una solucin al 5% de formalina en
agua de mar (o dulce segn los casos). Se pueden transportar con agua y fijar en la
costa. Etiquetar internamente con etiqueta de papel vegetal, escrito con lpiz comn.
Etiquetar externamente para una referencia ms sencilla del material.
d. Alternativamente, adems de los ejemplares fijados llevar a cabo el montaje en
cartulina de especmenes de referencia. Para ello colectar especmenes enteros y
guardarlos hasta que las condiciones sean apropiadas para su montaje. No dejar al
sol. Las plantas no deben ser expuestas al sol porque se arruinan; pueden ser
sumergidas en agua (no demasiada) dentro de una bolsa plstica. Es mejor mantener
cada planta por separado en una bolsa.
e. Las notas de referencia de la muestra deben ser escritas con lpiz en la cartulina
sobre la que se van a colocar las plantas, antes de colocar stas, ya que no es posible
escribir cuando la cartulina est hmeda. Para escribir, utilizar la esquina inferior
derecha de la cartulina.
f. Para montar cada espcimen, utilizar una bandeja de fotografa (de mayor tamao
que las cartulinas) y llenarla de agua. Disponer la cartulina en la bandeja y luego la
planta o plantas (varias si son chicas). Con la ayuda de un pincel y/o pinzas
reacomodar la planta sobre la cartulina de manera que quede bien esparcida. Es
131
conveniente llevar a cabo el arreglo, primero sobre el conjunto y luego sobre sectores
chicos, empezando por el extremo de la cartulina ms cercano al operador (la zona de
la raz). A medida que un sector es terminado, se saca esta zona de la cartulina fuera
del agua, ya que una vez fuera del agua la planta permanece en su sitio. No cubrir la
zona de las notas de referencia. En el caso de plantas pequeas, llenar la cartulina
con varios ejemplares del mismo grupo o clon, de manera que muestren la variabilidad
morfolgica que puede ser hallada.
g. Una vez arreglada toda la cartulina, tomar por una esquina superior y escurrir bien el
agua contenida.
h. Para macrofitas con fruto maduro recoger las semillas en una bolsita de papel y
adjuntar estas bolsitas a la hoja de herbario terminada.
i. Para macrofitas, despus de montar la planta sobre la cartulina, disponer una hoja
gruesa de papel absorbente directamente sobre el espcimen (Figura 22b).
j. Para macroalgas, despus de montar la planta sobre la cartulina, disponer
directamente sobre la planta una tela no muy gruesa (liencillo o tela de sbanas) y por
encima de ella, una hoja de papel secante. La tela no se remover hasta que el alga
est completamente seca, ya que evita que la misma se adhiera al papel secante.
Para ayudar al secado, un segundo papel secante puede ser colocado por debajo de
la cartulina (Figura 22a).
k. Tomar varias hojas de papel de diario, doblarlas por su pliegue central de manera que
formen un sobre, dentro del cual se dispondr el sndwich (cartulina-planta ms
accesorios) armado en el paso i o el paso j.
l. Para facilitar el secado (particularmente para macrofitas), separar los sobres de papel
de diario con un rectngulo de cartn corrugado (disponer los cartones con las
corrugaciones todas en el mismo sentido para facilitar la operacin de secado) y
prensarlos en una prensa de herbario.
m. Secar las muestras sin sacarlas de la prensa. Si se retorna rpidamente al laboratorio
usar para ello una estufa (preferiblemente con circulacin forzada de aire) a unos
40C. En caso contrario utilizar ya sea la calefaccin del hotel y/o caloventiladores (o
secadores de pelo) y/o secar al sol si el tiempo es seco y ventoso y/o utilizar la
calefaccin del vehculo cuando el personal de desplaza de un sitio a otro.
132
Figura 22: Montaje en cartulina de especmenes de referencia. a, macroalgas, b,
macrofitas.
n. Alternativamente (para macroalgas) y en ambientes secos, el secado en estufa puede
ser obviado a condicin de que se cambie peridicamente el papel de diario. Este
procedimiento puede ser recomendable para macroalgas delicadas.
o. A medida que las plantas se secan, ajustar la prensa diariamente, para que las
plantas se mantengan chatas.
p. Los especmenes deben ser remitidos a un herbario, donde las especies sern
identificadas y almacenadas para referencias futuras.
Notas:
- Para algunas macroalgas (Gigartinales por ejemplo), es conveniente que antes del
montado en cartulina los ejemplares sean fijados en formol al 5% durante unos 5 a 10
minutos.
133
Protocolo para colectar especmenes de macrofitas flotantes pequeas para
referencia y estudios biolgicos
a. Recoger, con el mtodo ms apropiado al sitios de muestreo, algunas plantas en un
recipiente de plstico, vidrio o bolsa plstica hermtica. Para estudios de biologa por
lo general es suficiente colectar entre 30 y 100 ejemplares.
b. Si el laboratorio estuviera cercano, guardar en una bolsa plstica o recipiente con un
poco de agua. Para viajes ms largos, transportar dentro de una heladera de telgopor
con ice-packs.
c. Alternativamente, preservar los especmenes en una solucin de alcohol etlico al
70%, 25% de agua y 5% de formalina. Se pueden transportar con algo de agua y fijar
en la costa.
d. Etiquetar internamente con etiqueta de papel vegetal, escrito con lpiz comn.
Etiquetar externamente para una referencia ms sencilla del material.
e. En especmenes de referencia remitir al herbario para su identificacin y
almacenamiento.
Protocolo para colectar especmenes de macrofitas emergentes grandes (rgidas)
para referencia y estudios biolgicos
a. Colectar especmenes enteros y guardarlos hasta que las condiciones sean
apropiadas para su montaje. No dejarlos al sol. Las plantas emergentes no deben ser
sumergidas, pero pueden ser mantenidas en una bolsa plstica con algo de agua en
el fondo para mantener la humedad. Es mejor mantener cada planta por separado en
una bolsa y todas las bolsas de un sitio (o lago) dentro de una bolsa grande (tipo
consorcio). Para estudios de biologa por lo general es suficiente colectar entre 30 y
100 ejemplares.
b. Las notas de referencia de la muestra deben ser escritas con lpiz en la cartulina
sobre la que se van a colocar las plantas, antes de colocar stas, ya que no es posible
escribir cuando la cartulina est hmeda. Para escribir, utilizar la esquina inferior
derecha de la cartulina.
134
c. Para montar cada espcimen, ubicar la planta sobre la cartulina, con las races en la
esquina inferior izquierda (doblar el extremo superior de la planta si esta fuera
demasiado larga). No cubrir la zona de las notas de referencia.
d. Esparcir hojas y flores sobre la cartulina, de manera que el ejemplar ocupe toda la
hoja. En el caso de plantas pequeas, llenar la cartulina con varios ejemplares del
mismo grupo o clon, de manera que muestren la variabilidad morfolgica que puede
ser hallada.
e. Para plantas con fruto maduro recoger las semillas en una bolsita de papel y adjuntar
estas bolsitas a la hoja de herbario terminada.
f. Despus de montar la planta sobre la cartulina, disponer una hoja gruesa (o varias) de
papel absorbente (rollo de cocina o papel secante) sobre el espcimen, para ayudar a
que la planta se seque rpido.
g. Tomar varias hojas de papel de diario, doblarlas por su pliegue central de manera que
formen un sobre, dentro del cual se dispondr la cartulina con la planta.
h. Cuando se hayan armado varios sobres de cartulina-planta-diario, separarlos con
rectngulos de cartn corrugado (disponer las corrugaciones todas en el mismo
sentido para facilitar la circulacin de aire durante el secado subsiguiente) y
prensarlos en una prensa de herbario.
i. Secar las muestras sin sacarlas de la prensa. Si se retorna rpidamente al laboratorio
usar para ello una estufa (preferiblemente con circulacin de aire forzada) a unos
40C. En caso contrario utilizar ya sea la calefaccin del hotel y/o caloventiladores (o
secadores de pelo) y/o secar al sol si el tiempo es seco y ventoso y/o utilizar la
calefaccin del vehculo cuando el personal de desplaza de un sitio a otro.
j. A medida que las plantas se secan, ajustar la prensa diariamente, para que las
plantas se mantengan chatas.
k. Los especmenes deben ser remitidos a un herbario, donde las especies sern
identificadas y almacenadas para referencias futuras.
Los estudios ecolgicos, donde interesan la diversidad de especies o su biomasa,
requieren de protocolos de muestreo diferentes (se excluye de esta descripcin la
discusin de estrategias de muestreo).
135
La mayor parte de las macroalgas, particularmente las intermareales, pueden ser
removidas con equipos simples, como cuchillos o esptulas. Las algas incrustantes
requieren de un esfuerzo mayor, ya que es necesario sacarlas junto con el sustrato que
las soporta, utilizando cinceles y martillo. Una sorbona pequea puede ser til en los
muestreos submareales de algas chicas. Las dragas y rastras por lo general no son
aconsejables como mtodo de muestreo, ya que adems de daar a los especmenes
recogidos, estos equipos no son apropiados para muestreos en aguas someras y de
sustratos rocosos, que son los ambientes preferidos por las algas. Las algas adheridas al
sustrato son preferibles a las arrancadas por mares de fondo o tormentas, las cuales en
muchos casos estn daadas o en mal estado fisiolgico. Asimismo, se debe hacer un
esfuerzo por colectar plantas enteras, incluyendo las estructuras de adhesin (que
ayudan en la determinacin taxonmica de algunas especies) y plantas con estructuras
reproductivas, las cuales pueden ser crticas para la identificacin de los ejemplares.
No existe un protocolo nico para el muestreo cuantitativo de algas, ya que estos
dependen, entre otros aspectos, del sustrato, la profundidad del sitio de muestreo, la
visibilidad y el tamao de los organismos. En general, en estudios de demografa, se
requiere del orden de 100 o ms ejemplares.
Protocolo para estudios ecolgicos en macroalgas pequeas o medianas.
a. Utilizar muestreo directo en el intermareal o con buzos en el submareal (no ms de 30
m de profundidad). Usar cuadrados de entre 0,1 m
2
para plantas pequeas y/o en
densidades altas, hasta de 0,5 m
2
para plantas grandes y/o en densidades bajas.
b. Para muestreos intermareales, raspar cuidadosamente el rea de la muestra con una
esptula, recoger y guardar en una bolsa plstica. Para muestreos submareales,
cubrir primero las frondes con una bolsa de red fina (0,5 mm de abertura) y luego
extraer las plantas a mano (en sustratos blandos) o con esptula (en sustratos duros),
cuidando de obtener las partes basales. Cerrar la bolsa.
c. En superficie embolsar en bolsa plstica con algo de agua, etiquetar y enfriar, o
alternativamente fijar con solucin de formalina al 5%.
136
Protocolo para estudios ecolgicos en macroalgas grandes.
a. Utilizar muestreo directo en el intermareal o con buzos en el submareal. Usar
cuadrados de entre 0,25 m
2
para plantas pequeas a medianas y/o en densidades
altas, hasta de 1 m
2
para plantas medianas a grandes y/o en densidades bajas. Para
plantas muy grandes como las de Macrocystis se requieren tamaos mayores.
b. Para muestreos intermareales, raspar cuidadosamente el rea de la muestra con una
esptula, recoger y guardar en una bolsa plstica.
c. Para muestreos submareales, cubrir primero las frondes con una bolsa de red fina (0,5
mm de abertura) y luego extraer las plantas a mano (en sustratos blandos) o con
esptula (en sustratos duros), cuidando de obtener las partes basales. Cerrar la bolsa
y en superficie, embolsar en bolsa plstica con algo de agua, etiquetar y enfriar, o
alternativamente fijar con solucin de formalina al 5%.
Los muestreos cuantitativos (biomasa y densidad de tallos) para macrofitas siguen el
siguiente protocolo.
Protocolo para estudios ecolgicos en macrofitas.
a. Utilizar muestreo con buzos y cuadrados de 0,1 m
2
para plantas en densidades altas
hasta de 0,5 m
2
para plantas en densidades bajas.
b. Cubrir los tallos con una bolsa de red fina (0,5 mm de abertura) y luego cortarlos.
Cerrar la bolsa.
c. Muestrear las partes enterradas de las plantas con una sorbona. Excavar hasta una
profundidad de unos 15 a 20 cm. Recoger las partes enterradas y embolsar.
d. En superficie, lavar las partes enterradas a travs de un tamiz de 0,5 mm de abertura.
e. Embolsar en bolsas plsticas separadas a ambas porciones del muestreo. Etiquetar.
Embolsar en una bolsa general de color claro. Identificar externamente con un
marcador indeleble. Enfriar y transportar para determinaciones en laboratorio.
f. Alternativamente, una vez en la costa, sacudir las muestras para eliminar el agua que
puedan tener en exceso y pesar para obtener el peso hmedo, con balanza
electrnica con una precisin de 0,01 g para plantas pequeas o de 1 g para plantas
grandes. Reembolsar, enfriar y transportar para determinaciones en laboratorio.
137
Como alternativa, o complemento a los anteriores protocolos de muestreo, es posible
llevar a cabo una descripcin de la muestra tomada, a travs de una estimacin de la
abundancia de los organismos muestreados. Esta tcnica es de uso corriente en el
muestreo de plantas e inclusive puede ser el nico tipo de muestreo efectuado en el
campo. Sin embargo es condicin, para este tipo de evaluacin, que el muestreador
tenga directamente a la vista el rea a muestrear (en el intermareal por ejemplo); es decir
no es un mtodo apropiado para muestreos con dragas o buzos (a no ser que stos
tomen anotaciones debajo del agua) y menos an con equipos de muestreo de carcter
cualitativo (como rastras).
Existen muchas formas posibles de escalar las abundancias y en general para plantas, la
ms comn es la referida al porcentaje de la superficie cubierta por cada especie. Esta
forma de cuantificacin es particularmente til cuando los organismos muestreados no
presentan individuos discernibles unos de otros, o cuando el conjunto de individuos
representan a una colonia de clones. La cuantificacin se lleva a cabo a travs de la
estimacin visual del porcentaje de la superficie de la muestra que es cubierta por una
especie en particular. La suma de los porcentajes de todas las especies de una muestra
se denomina recubrimiento y puede sumar ms del 100% ya que varias especies
pueden disponerse en capas que se recubren entre s. En este esquema de
cuantificacin es preferible no recurrir a escalas simplificadas (por ejemplo 1= 0-25% de
la muestra, 2= 26-50% de la muestra, etc.), sino a la estimacin de un valor aproximado
aunque concreto (por ejemplo: especie a 30% de la muestra). Con muestras
relativamente chicas es posible ayudarse, para la estimacin de los porcentajes, con
marcos (metlicos o plsticos), divididos (con hilos por ejemplo) en cuadrados menores.
Protocolo para la estimacin de coberturas
a. Colocar una plantilla (con divisiones) en el sitio de muestreo.
b. Estimar el porcentaje cubierto por cada una de las especies.
c. Anotar estos valores en la planilla de muestreo a un lado del nombre comn o
cientfico de la especie. De no conocerse el nombre, utilizar un nombre de trabajo
suficientemente explcito.
138
d. Tomar un par de submuestras (o ms) del rea de la muestra y guardar juntas en una
muestra compuesta adecuadamente etiquetada y fijada.
e. Replicar las veces necesarias, repitiendo los puntos a hasta d.
f. En laboratorio, analizar las muestras compuestas y estimar el porcentaje de superficie
cubierta para las especies no detectadas durante el muestreo visual (raras o escasas)
el cual es menor al 10%. Las especies raras tienen porcentajes de cobertura del orden
del 1% o menores (por ejemplo arbitrariamente se les puede asignar un porcentaje
entre 0,001 y 1%).
6.4.3 Perifiton.
El perifiton se define como los organismos vegetales y animales adheridos a objetos
sumergidos, como piedras grandes (bloques, guijones) y plantas acuticas (Cole, 1994).
Si bien los muestreos ecolgicos en el anlisis de la comunidades perifticas pueden ser
algo ms complicados, por su carcter cuantitativo, que los taxonmicos o biolgicos, en
esencia hay poca diferencia entre ambos y se sugiere seguir los protocolos de tipo
cuantitativo, ya que stos sirven a ambos fines.
En general en muestreos para el clculo de la biomasa y la diversidad (y por extensin
para taxonoma, biologa y nmero de especies), se halla implcita la coleccin de todos
los organismos de una superficie de rea conocida. No existen equipos diseados ad
hoc para tal fin, pero pueden adaptarse para ello, algunos que pueden obtenerse del
mercado comn. Por ejemplo, puede usarse para muestrear una sopapa grande (para
inodoros), donde el agujero de insercin del mango ha sido agrandado (manteniendo la
forma circular) para ajustar a las dimensiones pretendidas para el rea de muestreo. La
sopapa se aplica por la parte convexa (la del agujero agrandado) sobre una roca; el
dimetro del agujero es conocido, en consecuencia la superficie expuesta de la roca
ubicada bajo ste, tambin es conocida. Un burlete de neopreno puede pegarse
siguiendo el contorno del agujero, para evitar la prdida de agua y organismos durante su
recoleccin. Otros elementos necesarios son: una piseta con agua (deionizada o de mar
segn los casos), un cepillo de dientes (para raspar las algas de la roca) y una pera de
139
goma (o equivalente) como las usadas en cocina para baar piezas asadas (para
transferir el material recolectado desde la sopapa al recipiente de la muestra). Los
protocolos de trabajo son diferentes segn se trate de muestreo de organismos sobre
rocas o sobre plantas sumergidas (rgidas).

Protocolo para muestreo de rocas


a. Elegir un sitio de muestreo donde el sustrato bajo el agua sea lo ms uniforme
posible. En ros y arroyos trabajar hacia la cabecera. Seleccionar al azar (de no haber
instrucciones en contrario) rocas que sean relativamente planas y lo suficientemente
grandes como para acomodar tres o ms submuestras tomadas con la sopapa. Para
esto, caminar por el lecho sin prestar atencin a las posibles concentraciones de
algas, detenerse y recoger la primer piedra que sea de la forma y tamao apropiados.
Llevar la piedra muestreada a la orilla y repetir el proceso hasta obtener en total de 4 a
6 piedras.
b. Adosar la sopapa con su cara convexa (la del agujero de muestreo) contra una de las
piedras muestreadas. Con el cepillo de dientes raspar la superficie expuesta y lavar
con la piseta con pequeas cantidades de agua (no exceder la capacidad de
almacenamiento de la sopapa).
c. Transferir con una pera de goma (si es necesario con el extremo cortado para
agrandar el agujero), la mezcla de agua y algas a un recipiente de muestreo
etiquetado externamente.
d. Lavar, raspar con el cepillo y lavar nuevamente. Colectar este ltimo lavado con la
pera de goma y transferir al recipiente de muestreo.
Nota: La muestra puede ser simple o compuesta, en ste ltimo caso se aconseja
tomar entre 3 y 6 discos por piedra, dependiendo de la densidad de perifiton.
Anotar en el recipiente de muestreo el nmero de discos que componen la muestra.
e. Alternativamente a los pasos b-d, particularmente cuando la cantidad de perifiton es
grande, adosar a la roca una plantilla (de goma o plstica) del tamao de la muestra
deseada. Eliminar, con cepillo, todo el perifiton ubicado por fuera de la plantilla, hasta
por ejemplo unos 5 cm alrededor. A continuacin recoger el perifiton ubicado por
debajo de la plantilla con un bistur. Este mtodo lleva a un mnimo la cantidad de
agua utilizada para la muestra.
140
f. Si el objeto del estudio fuera taxonoma o un anlisis de la diversidad, fijar la muestra
con Lugol a razn de 1 ml por cada 250 ml de mezcla de perifiton y agua de lavado. Si
la cantidad de perifiton fuera muy alta aumentar la cantidad de Lugol utilizado (para el
mismo volumen de agua de muestra). Agitar suavemente para mezclar el fijador con el
agua.
g. Si el objeto del estudio fuera un anlisis de biomasa de microalgas, ubicar la muestra
dentro de una bolsa de residuos negra y sta en una heladera de telgopor con ice-
packs en la cantidad apropiada para la poca del ao (dos veces el volumen de las
muestras en meses clidos y una vez el volumen en meses fros).
h. Biomasa (continuacin). Preparar la muestra para anlisis de clorofila filtrando la
muestra a travs de un filtro de 0,45 m de poro (consultar H. Zaixso (2002): Manual
de campo para el muestreo de la columna de agua). Una vez filtrada la muestra,
colocar el filtro sobre un filtro de papel Whatman (de 8 a 10 cm de dimetro) y plegar
varias veces, mantener plegado con un clip plstico. Anotar sobre el filtro de papel las
especificaciones de la muestra (Sitio, estacin, fecha, rea muestreada, etc.). Guardar
el filtro en un recipiente con desecante (silica-gel) y a ste dentro de una heladera con
ice-packs (preferentemente de congelacin) para su envo a laboratorio.
i. Repetir los pasos b-i para obtener replicados.
Protocolo para muestreo de plantas sumergidas
a. Elegir un sitio de muestreo donde las condiciones ambientales sean uniformes.
Seleccionar varias plantas al azar (de no haber instrucciones en contrario) y llevarlas
a la orilla.
b. En cada planta cortar de la parte sumergida, un segmento de dimetro
aproximadamente uniforme (el largo lo determina la densidad de perifiton), unos
centmetros ms largo que el sector que interesa muestrear. Colocar una mscara de
film plstico en el extremo que no se va a muestrear, tomar este sector entre pulgar e
ndice y con un cepillo y una piseta limpiar el sector de muestreo, recogiendo el lavado
en una bandeja pequea, plstica, preferiblemente con pico vertedor en una de sus
esquinas.
Nota: No usar bistures para la limpieza, para evitar arrastrar clulas superficiales de
la planta sostn.
141
c. Transferir la muestra (mezcla de agua y organismos) a un recipiente de muestreo
etiquetado externamente.
d. Raspar con el cepillo y lavar nuevamente. Transferir este ltimo lavado al recipiente de
muestreo. Lavar con piseta la bandeja y transferir al recipiente de la muestra. En lo
posible no usar mucho agua para los lavados.
e. Si el objeto del estudio fuera taxonoma o un anlisis de la diversidad, fijar la muestra
con Lugol a razn de 1 ml por cada 250 ml de mezcla de perifiton y agua de lavado. Si
la cantidad de perifiton fuera muy alta aumentar la cantidad de Lugol utilizado (para el
mismo volumen de agua de muestra). Agitar suavemente para mezclar el fijador con el
agua.
f. Si el objeto del estudio fuera un anlisis de biomasa de microalgas, ubicar la muestra
dentro de una bolsa de residuos negra y sta en una heladera de telgopor con ice-
packs en la cantidad apropiada para la poca del ao (dos veces el volumen de las
muestras en meses clidos y una vez el volumen en meses fros).
g. Biomasa (continuacin). Preparar la muestra para anlisis de clorofila filtrando la
muestra a travs de un filtro de 0,45 m de poro (consultar H. Zaixso (2002): Manual
de campo para el muestreo de la columna de agua). Una vez filtrada la muestra,
colocar el filtro sobre un filtro de papel Whatman (de 8 a 10 cm de dimetro) y plegar
varias veces, mantener plegado con un clip plstico. Anotar sobre el filtro de papel las
especificaciones de la muestra (Sitio, estacin, fecha, profundidad, rea muestreada,
etc.). Guardar el filtro en un recipiente con desecador (silica-gel) y a ste dentro de
una heladera con ice-packs (preferentemente de congelacin) para su envo a
laboratorio.
h. Guardar el segmento de planta muestreado en una bolsa tipo Whirl-Pak con formol al
5% (etiquetada de la misma forma que la muestra de perifiton), para control en
laboratorio de la superficie de muestreo.
i. Repetir los pasos b-i para obtener replicados.
Para tcnicas de muestreo de algas epiplicas o episammicas en ambientes marinos se
sugiere consultar Round & Hickman (1971).
142
6.4.4 Meiozoobentos y microzoobentos
En general, la mayora de los instrumentos para el muestreo de la macrofauna son
apropiados tambin para el muestreo del meiobentos (ver seccin siguiente: 6.4.5). La
principal diferencia entre la meiofauna y la macrofauna es que la primera es mucho ms
abundante y en consecuencia son apropiadas las muestras de menor tamao. Si bien
estas muestras pueden obtenerse a partir de alcuotas de muestras mayores, dado que
esto introduce errores en el muestreo, es preferible tomar y elaborar muestras enteras.
Para los muestreos del intermareal o de aguas someras (con buzos) los muestreadores
ms eficientes son los de tipo Hope, los cuales se entierran manualmente en el
sedimento (ver descripcin en seccin 4.3). Alternativamente, para el intermareal se
puede usar un meiostecher, cuyo protocolo de uso es semejante al de un muestreador
de Hope.
Protocolo con muestreador de Hope (intermareal o submareal)
a. En el intermareal ubicar la estacin de muestreo y su nivel. En submareal, anclar el
bote, ubicar la estacin con GPS y anotar la profundidad.
b. Tomar la muestra enterrando (manualmente o con martillo) un muestreador de Hope
(identificado de acuerdo a la estacin y eventualmente a unidades muestrales dentro
de sta), sin su tapn superior. Para el intermareal por lo general es suficiente una
muestra de 20 a 30 cm de largo (profundidad), mientras que para muestreos
submareales, dado que los organismos viven en las capas superficiales, alcanza con
muestras del orden de los 10 cm de profundidad.
c. Tapar el extremo superior del muestreador.
d. Extraer al muestreador del sustrato, si fuera necesario excavando lateralmente al
mismo.
e. Colocar el tapn inferior. Si fuera necesario, este tapn debera ser diferenciable del
superior para poder establecer la polaridad de la muestra.
f. Guardar verticalmente dentro de una heladera. Enfriar.
g. Una vez en la costa, sifonear el agua que se halla por encima de la muestra, dejando
unos 2-3 mm. No alterar la interfase agua-sedimento.
143
h. Llevar a cabo una cuidadosa descripcin de la muestra, incluyendo: largo total de la
muestra obtenida, longitud (en mm), color y textura de cada una de las capas que
aparecen como diferentes.
i. La muestra se extrae del muestreador, sosteniendo con una mano el tubo y con el
pulgar corriendo el manguito de goma y permitiendo que entre el aire. Usando la
escala inscripta es posible desalojar volmenes parciales de muestra y llevar a cabo
submuestreos de la misma.
j. A medida que la muestra es extruda, cortar con una esptula limpia rebanadas del
largo de una capa o menos. Guardar en bolsas adecuadamente identificadas y anotar
en la libreta de campo los detalles del extrudo. Enfriar o fijar.
Los muestreos en aguas profundas, donde es peligroso que el buzo descienda, pueden
realizarse tanto con muestreadores de tubo tipo Kajak (descripcin en seccin 4.1.3) o
con dragas (descripcin en seccin 4.1.2).
Protocolo con muestreador tipo Kajak (aguas profundas)
a. Ubicar la estacin de muestreo (latitud y longitud con GPS y su profundidad).
b. Abrir la vlvula y armar el mecanismo de disparo. Asegurarse que la soga (o cable) se
halle adecuadamente unida por un extremo del muestreador y por el otro, atada al
bote.
c. En sedimentos muy blandos, bajar el muestreador hasta casi tocar el sedimento y
luego apoyar suavemente el equipo, dejando que penetre por su propio peso en ste.
En sedimentos algo ms duros, dejar caer el muestreador desde unos 2 a 6 m del
fondo. En todos los casos, la altura de cada libre se determina por prueba y error.
d. De acuerdo a los modelos, cerrar el extremo superior del muestreador ya sea
enviando un mensajero o bien extrayendo al equipo del sedimento.
e. Recuperar el equipo lentamente y una vez en superficie y sin sacarlo del agua,
colocarle (si carece de una vlvula cscara de naranja) un tapn en su abertura
inferior.
f. Remover el tubo interno del muestreador (asegurarse de que tenga al menos unos 20
cm de muestra) y colocarle un tapn en su extremo superior. Identificar y almacenar
verticalmente al fro (heladera).
144
g. Repetir a partir de b (con un nuevo tubo interno) si se deben obtener rplicas.
h. Una vez en la costa, sifonear el agua que se halla por encima de la muestra, dejando
unos 2-3 mm. No alterar la interfase agua-sedimento.
i. Llevar a cabo una cuidadosa descripcin de la muestra, incluyendo: largo total de la
muestra obtenida, longitud (en mm), color y textura de cada una de las capas que
aparecen como diferentes.
j. Con una varilla de extrusin (generalmente vienen con el equipo y consisten en una
varilla con una pieza de goma en su extremo, la cual ajusta al dimetro interno del
tubo), forzar al contenido suavemente a que salga por el extremo superior del tubo.
k. A medida que la muestra es extruda, cortar con una esptula limpia rebanadas del
largo de una capa o menos. Guardar en bolsas adecuadamente identificadas y anotar
en la libreta de campo los detalles del extrudo. Enfriar o fijar.
Protocolo para muestreo con dragas (aguas profundas)
a. Ubicar la estacin de muestreo (latitud y longitud con GPS y su profundidad).
b. Preparar la draga en posicin abierta y amarrada con una soga al bote. Descender el
equipo con cuidado por uno de los costados. De ser necesario, enviar un mensajero
para el cierre de la draga. En embarcaciones mayores esta parte del protocolo
cambia por el uso de guinches.
c. Recuperar la draga. Si esta llegara abierta a la superficie, descartar la muestra y
tomarla nuevamente.
d. Una vez la draga en cubierta, abrir la tapa de muestreo superior y tomar con la ayuda
de un muestreador de tubo (tipo Hope o de jeringa de acuerdo con el tamao de la
draga) una o ms muestras del sedimento colectado, preferentemente en la parte
central de la muestra (hasta unos 10 cm de profundidad). Extruir por capas de ser
necesario y guardar estas muestras debidamente identificadas. Enfriar o fijar.
e. Lavar cuidadosamente la draga con agua a presin y dejarla dispuesta para la
siguiente muestra.
En lneas generales se puede indicar que para la meiofauna es preferible llevar a cabo la
separacin de los animales antes de proceder a fijarlos, sin embargo este tipo de
elaboracin es poco probable que se pueda llevar a cabo durante el desarrollo de una
145
campaa, particularmente si esta se lleva acabo en un barco que no retorna a puerto en
varios das. En estos casos es posible mantener las muestras en buenas condiciones
bajo refrigeracin, slo por uno o dos das; luego las muestras deben enviarse a
laboratorio para la extraccin de los animales; alternativamente, siempre como ltimo
recurso, se pueden preservar las muestras obtenidas con un fijador adecuado.
Nota: Descripciones detalladas de las tcnicas de separacin de la meiofauna del
sedimento, tanto en vivo como a partir de material preservado, pueden encontrarse en
Hulings & Gray ( 1971) y en Holme & McIntyre (1971).
Protocolo para la fijacin-preservacin de muestras con sedimento
a. Para meiofauna blanda (nematodes, oligoquetos, etc.) se indica el uso de fijador de
Bouin caliente (60C) durante un par de horas, preferentemente siguiendo al uso de
relajantes o anestsicos (dejar el sedimento durante 2 horas en una solucin de 73,2
g Cl
2
Mg por cada litro de agua destilada: isotnico con agua de mar 34 ups).
Alternativamente fijar con solucin de formalina al 5% con aditivos al menos 24 horas.
b. Para meiofauna dura (moluscos, ostrcodos, etc.) fijar con solucin de formalina al
5% con aditivos por al menos 24 horas.
c. Preservar la meiofauna blanda en alcohol 70%, preferiblemente llegando a esta
concentracin luego de varios cambios sucesivos a concentraciones crecientes (por
ejemplo: hora de alcohol 30% y hora de alcohol 50%). No usar con nematodes.
d. Preservar la meiofauna dura en solucin de formalina al 5% con aditivos.
e. Utilizar bolsas tipo Whirl-Pak etiquetadas.
Notas:
- Procurar que la relacin fijador a sedimento drenado sea del orden de 3 a 1 o mayor.
- Para los diferentes taxa existen tcnicas particulares de muestreo, como por ejemplo
el tipo de muestreador ms efectivo, el volumen mnimo a muestrear, los fijadores y
tinciones ms comunes y otros. Para un mayor detalle en cuanto a los taxa de la
meiofauna marina se puede consultar a Hulings & Gray ( 1971).
Para estudios de microfauna (protozoos por ejemplo), la mayor parte de los mtodos
descriptos para la meiofauna son apropiados. Para estudios cuantitativos de la
146
microfauna es posible trabajar con muestras de tamao an ms pequeo que las usadas
para meiofauna (por ejemplo tubos de jeringa de 1 cm de dimetro interno).
6.4.5 Macrozoobentos (macroinvertebrados).
6.4.5.1 Ambientes intermareales
En los ambientes intermareales tanto de sustratos duros como blandos los muestreos se
llevan a cabo por lo general mediante el uso de cuadrados de muestreo.
Protocolo de muestreo en fondos duros
a. Determinar la hora a la cual la marea est alta o baja (a partir de Tabla), elegir
preferentemente la bajamar. Comenzar las actividades preparatorias del muestreo (en
el sitio de trabajo) una o dos horas antes de este momento.
b. Con la marea subiendo, marcar los niveles o estaciones de muestreo (utilizar marcas
que puedan ser removidas) y establecer la distancia vertical existente entre cada uno
de los niveles de muestreo y el nivel de la marea baja del da (o entre niveles).
c. Alternativamente, con la marea bajando, determinar los niveles de muestreo a alturas
igualmente espaciadas (calcular la hora a que tiene lugar una altura de marea
determinada de acuerdo a la seccin 6.2.2). Marcar los niveles o estaciones de
muestreo (utilizar marcas que puedan ser removidas) a medida que el agua vaya
bajando.
d. Apoyar el cuadrado de muestreo sobre la superficie a muestrear y con la ayuda de las
manos, esptulas (de punta y recta) y/o cuchillos, extraer todos los organismos
contenidos dentro del cuadrado. En sustratos relativamente blandos, con la ayuda de
esptulas, extraer asimismo los organismos perforadores que se hallan dentro de la
roca. Asegurar un tamao de cuadrado de muestreo representativo (el tamao del
cuadrado depende del tipo de organismo/s a muestrear y de su densidad) y un
nmero suficiente de rplicas.
e. Embolsar la muestra e identificarla adecuadamente con una etiqueta de papel vegetal
escrito con lpiz. Fijar con formol al 5-10%.
147
f. En laboratorio usar los lquidos conservadores ms adecuados para cada tipo de
organismo.
Nota: En el muestreo de un nivel particular es preferible tomar varias muestras chicas, en
vez de una sola muestra grande de la misma superficie que las muestras chicas
sumadas. De esta forma se puede, con el mismo trabajo de separacin y determinacin
de especies, pesos, largos, etc., obtener una estimacin de la varianza de los parmetros
a medidos y llevar a cabo pruebas estadsticas de igualdad entre muestras .
Protocolo de muestreo en fondos blandos.
a. Determinar la hora a la cual la marea est alta o baja (a partir de Tabla), elegir
preferentemente la marea alta. Comenzar las actividades preparatorias del muestreo
(en el sitio de trabajo) una o dos horas antes de esta hora.
b. Con la marea subiendo, marcar los niveles o estaciones de muestreo (utilizar marcas
que puedan ser removidas) y establecer la distancia vertical existente entre cada uno
de los niveles de muestreo y el nivel de la marea baja del da (o entre niveles).
c. Alternativamente, con la marea bajando, determinar los niveles de muestreo a alturas
igualmente espaciadas (calcular la hora a que tiene lugar una altura de marea
determinada de acuerdo a la seccin 6.2.2). Marcar los niveles o estaciones de
muestreo (utilizar marcas que puedan ser removidas: estacas) a medida que el agua
vaya bajando.
d. Delimitar con un marco apoyado en el sustrato el rea de la muestra. Con una pala
extraer el sedimento hasta la profundidad adecuada al tipo de organismo a muestrear
(usualmente entre 20 y 50 cm) Asegurar un tamao de cuadrado de muestreo
representativo y un nmero suficiente de rplicas.
e. Vaciar el sedimento obtenido en un tamiz de la malla adecuada (#18 o #35), llevar el
tamiz hasta la orilla y tamizar (bajo agua) para separar los organismos del sedimento.
f. Embolsar la muestra e identificarla adecuadamente con una etiqueta de papel vegetal
escrito con lpiz. Fijar con formol al 5-10%.
g. En laboratorio usar los lquidos conservadores ms adecuados para cada tipo de
organismo.
148
6.4.5.2 Aguas someras
La recoleccin de muestras en aguas someras ms alejadas de la orilla, requiere que al
menos uno de los miembros del grupo de trabajo sea prctico con la operacin de botes y
de la seguridad en los mismos. Dado que los muestreos con bote (o embarcaciones
mayores) pueden o no implicar el uso de buzos, las caractersticas del muestreo
dependen de esta circunstancia. En ausencia de buzos, el muestreo del bentos se llevan
a cabo haciendo uso de los protocolos descriptos en la seccin 6.4.5.3.
Si bien es posible el uso de cuadrados de muestreo en el muestreo con buzos, la prdida
de material puede llegar a ser importante; se sugiere usar este mtodo de muestreo slo
cuando el principal objetivo del muestreo sea el estudio de organismos bentnicos ssiles
(macrofauna y macroalgas), asentados sobre sustratos rocosos. Mejor adaptados al
muestreo con buzos son los mtodos que usan sorbonas o air lifts para la captura de los
organismos; las sorbonas pueden aplicarse a sustratos duros o blandos con escasas
modificaciones en el diseo del equipo.
Protocolo para el uso de sorbonas.
a. Fondear la embarcacin y ubicar la estacin (GPS).
b. Armar la sorbona y descenderla por el costado del bote con la ayuda de una soga
amarrada al tubo metlico de su extremo inferior. Verificar que la manguera de alta
presin est acoplada al tubo y que el extremo superior de sta quede en la cubierta
del bote.
c. En el extremo superior de la manguera corrugada (que es conveniente quede fuera
del agua), adosar una bolsa de red con la abertura de malla adecuada a los
organismos que se desean capturar.
d. Acoplar el extremo superior de la manguera de alta presin a un tubo de buceo o un
cilindro de aire llenos.
e. El buzo (B: tarea realizada por el buzo) debe bajar el delimitador de metal y enterrarlo
en el sitio de muestreo, si es necesario con ayuda de una maza, hasta la profundidad
de muestreo.
f. (B) Abrir la llave de paso de aire.
149
g. (B) Aspirar el contenido del delimitador. Sacar con la mano los organismos ms
grandes y colocarlos en una bolsa de red.
h. (B) Una vez terminada la muestra, cerrar la llave de paso y adjuntar los organismos
juntados a mano con el contenido de la bolsa de red en superficie.
f. Mantener la muestra dentro de la bolsa de red y sta dentro de una heladera con ice-
packs, en cantidad suficiente (relacin volumen de ice-pack a volumen de muestras
2:1 en verano y 1:1 en invierno), hasta que el tiempo y las condiciones permitan llevar
a cabo otros procedimientos: elaboracin de la muestra y separacin de los
organismos.
Por lo general, cada una de las muestras de sorbona est asociada a una muestra de
sedimento la cual es tomada de un sitio cercano a la ubicacin del delimitador (10-15
cm). Es comn que estas muestras se obtengan mediante un muestreador de Hope, cuyo
largo depende de la profundidad de muestreo deseada, la cual a su vez est en funcin
de la profundidad de muestreo realizada con la sorbona, la cual por lo general se halla
entre los 15 y los 30 cm.
Nota: No es conveniente usar muestreadores ms largos de lo necesario, ya que se
llenan de agua y esto puede disturbar la muestra.
6.4.5.3 Aguas profundas
Los invertebrados bentnicos en ambientes marinos profundos, lagos o ros grandes y
lentos son colectados de la misma forma que las muestras de sedimento para
granulometra y en consecuencia se remite a la Seccin 6.3.2 para la descripcin de los
protocolos respectivos. Las tcnicas difieren slo en el procesado ulterior de la
muestra obtenida. Los muestreadores de tubo son raramente usados para el muestreo
del macrozoobentos.
Protocolo para el muestreo con dragas
a. Obtener la muestra con la draga ms adecuada para el ambiente y organismos a
muestrear.
150
b. Una vez la draga en cubierta, ubicar un recipiente bajo y amplio por debajo de sta
(una bandeja en caso de una draga tipo Ekman o un cajn grande de plstico en el
caso de una draga grande tipo van Veen o Petersen).
c. En el caso de muestras chicas (Ekman) colocar uno o dos cedazos (#5 y #35) entre la
draga y la bandeja, abrir las cucharas y permitir que el sedimento caiga sobre el
cedazo superior (#5).
d. En el caso de muestras grandes, los pasos a seguir dependen del diseo de los
equipos de tamizado. Algunos modelos aceptan, como en el caso de las muestras
chicas, que todo el contenido de la draga pueda ser volcado sobre el tamiz, en otros
casos, se deber volcar el contenido de la draga en el cajn receptor y desde ste se
transfieren a los cedazos con una pala, cantidades apropiadas de sedimento que
permitan un adecuado tamizado.
e. Lavar el contenido del tamiz con agua del sitio y remover la mayor cantidad de
sedimento posible. Lavar la muestra con suavidad (se puede hacer uso de las manos)
para no romper los organismos presentes.
f. Transferir el contenido del o los cedazos a una o ms bandejas grandes.
g. Si no hubiera tiempo, fijarlos en conjunto con formol al 5%, para luego conservarlos en
lquidos conservadores adecuados a cada tipo de organismo. Alternativamente, fijar a
los organismos con el fijador ms adecuado a sus caractersticas.
h. Usar bolsas hermticas o frascos plsticos para la conservacin, Etiquetarlos con
etiquetas de papel vegetal e indicar en cada una de ellas el nmero total de
bolsas/frascos que componen la muestra.
i. Limpiar escrupulosamente con agua a presin la draga y los tamices para prepararlos
para la siguiente muestra.
Nota: Si en la muestra de sedimento (granulometra) asociada a la muestra de bentos
aparecieran durante su elaboracin organismos del macrozoobentos, separar stos,
identificarlos, contarlos y descontar su peso seco del peso de la muestra de
granulometra. Incorporar estos valores a la planilla de macrozoobentos.
Como alternativa o complemento de los muestreos con dragas, el uso de rastras es
general en los estudios del bentos de aguas profundas. En consideracin del alto costo
151
bsico de las campaas, resulta conveniente llevar a cabo ambos tipos de muestreo,
siempre y cuando esto sea posible, ya que la informacin que brindan ambas tcnicas de
muestreo es diferente.
Protocolo para muestreo con rastras
a. Preparar la rastra en cubierta unida a una soga o cable de un largo suficiente como
para acceder a todas las estaciones del muestreo (3 a 3,5 veces la profundidad de la
estacin). Atar el extremo libre de la soga o cable de arrastre a algn punto reforzado
de la popa del bote. Tomar nota de la ubicacin de la estacin (GPS) y su
profundidad; descender el equipo con cuidado por uno de los costados. En
embarcaciones mayores esta parte del protocolo se cambia por el uso de guinches.
b. Iniciar el rastreo tomando nota de la hora. La velocidad del bote debe ser muy baja
(prcticamente con el motor regulando). Estandarizar el tiempo de rastreo.
c. Finalizado el rastreo, tomar la posicin del punto final del arrastre (GPS), su
profundidad y la hora de finalizacin. Recuperar la rastra.
d. Una vez recuperada la rastra, vaciar su contenido en uno o ms cajones o bandejas
grandes. Si se dispone de un sitio adecuado, entonces elaborar la muestra. En caso
contrario almacenar el cajn o bandeja debidamente identificado, para su elaboracin
en costa.
e. Lavar la rastra cuidadosamente con agua a presin y dejarla preparada para el
siguiente lance.
Cuando la campaa se lleva a cabo a bordo de una embarcacin grande con laboratorios
y otras facilidades y hay tiempo suficiente entre estaciones, es posible llevar a cabo una
elaboracin preliminar rpida de las muestras tomadas (de draga o rastra), la cual es de
mucha utilidad en la elaboracin definitiva que se llevar a cabo en el laboratorio, ya que
por una parte permite fijar a las especies obtenidas con el fijador ms adecuado a su
carcter y por otra permite identificar bolsas de muestras que por error hayan ido a parar
a un lugar equivocado y en casos extremos, subsanar en parte la prdida de alguna
muestra.
152
Esta elaboracin previa, implica una descripcin preliminar de la muestra tomada,
incluyendo en sta una estimacin de la abundancia relativa de los organismos
muestreados. Existen muchas posibles escalas de abundancia relativa y la ms
adecuada depende, entre otros aspectos, de las especies y del sitio muestreados. Por
ejemplo la cuantificacin de la abundancia relativa puede hacerse a travs del porcentaje
de la superficie de la muestra que es cubierta por una especie en particular
Protocolo para elaboracin preliminar de muestras
a. Disponer la muestra tamizada en una bandeja, preferiblemente de color blanco. Dejar
una fina pelcula de agua para evitar que los organismos recogidos se deshidraten.
b. Identificar las especies componentes, si es que su nombre cientfico o comn es
conocido. En caso contrario, describirlas por el taxa al que pertenecen y/o algn
carcter notorio de su morfologa.
c. Anotar sus nombres en la planilla de muestreo correspondiente, preferentemente
ordenadas por grupo taxonmico y si se halla disponible, repetir este listado (e ir
completndolo a medida que aparezcan ms especies en otras muestras) en una
pizarra que se halle a la vista de aquellos que elaboran las muestras. Mantener los
nombres otorgados, a lo largo de todo el muestreo.
d. Asignar un valor de abundancia relativa a cada especie y anotarlo en la planilla de
muestreo (en caso de especies notorias en bajo nmero, indicar directamente la
densidad).
e. Guardar los animales (de acuerdo al taxa y/o al fijador) en bolsas plsticas tipo Whirl-
Pak o equivalentes. Identificar con etiqueta interna indicando: Campaa, fecha,
estacin, nmero de bolsa y total de bolsas de la muestra (por ejemplo bolsa 3 de 5) y
fijar con el fijador ms adecuado.
f. Hacer constar en la planilla de muestreo el nmero de bolsas total correspondiente a
la muestra en cuestin.
6.4.5.4 Ambientes lticos poco profundos (menos de 1 m)
Como fuera indicado el muestreo en ambientes lticos grandes y velocidades del agua
bajas es semejante al recin descripto. En adicin a los mtodos anteriores, para el
153
muestreo de macroinvertebrados en ros y arroyos poco profundos es usual disponer de
algunos equipos que son especficos para ambientes lticos, tales como los
muestreadores de Surber y Hess.
Protocolo para muestreador de Surber.
a. Buscar un sitio de muestreo donde el sustrato sea lo ms uniforme posible. Ubicar al
muestreador en una posicin al azar, paralelo a la corriente y con la red hacia aguas
abajo. La abertura de malla de la red debe ser compatible con el objetivo del
muestreo.
Nota: Tomar recaudo de no alterar el sustrato aguas arriba del muestreador.
b. Con mucho cuidado, tomar cada una de las piedras ubicadas dentro del marco inferior
del muestreador y refregarlas con las manos o un cepillo, de manera tal que todos los
organismos adheridos a ellas se suelten y sean capturados por la red del
muestreador. Verificar que no quedan organismos adheridos antes de descartar la
piedra hacia un lado del sitio de muestreo. En razn de poder comparar entre
estaciones de muestreo, uniformizar el tiempo de manipulacin de piedras y rodados
(se recomienda 5 minutos).
c. Revolver la grava remanente con las manos hasta una profundidad de 5 a 10 cm.
d. Dado que generalmente la densidad de organismos es baja, mover el muestreador a
un nuevo sitio seleccionado al azar y repetir los pasos a hasta c. Continuar este
proceso hasta totalizar una muestra compuesta de 2 a 6 marcos de muestreo
(estandarizar este nmero dentro de un muestreo), cada uno de los cuales debe ser
obtenido aguas arriba del anterior. La superficie muestreada total depende del tamao
del marco del muestreador y del nmero de marcos muestreados. Anotar el nmero
de marcos de la muestra compuesta en la libreta de campo.
e. Retornar a la orilla desarmar el frasco colector y volcar su contenido en un recipiente o
bolsa plstica (Whirl-Pak).
f. Si el muestreador no tiene frasco colector o si quedan organismos pegados a la red,
dar vuelta a sta y volcar su contenido en una bandeja con agua. Transferir los
organismos de la bandeja al recipiente o bolsa plstica anteriores y fijarlos con
solucin de formaldehido al 4 %.
g. Lavar la red y el colector antes de tomar otra muestra.
154
Protocolo para muestreador de Hess
a. Buscar un sitio de muestreo donde el sustrato sea lo ms uniforme posible. Ubicar el
muestreador, enterrndolo parcialmente en el sustrato, en un sitio al azar, paralelo a la
corriente, con la ventana con cedazo apuntando hacia la corriente y la red apuntando
aguas abajo. La abertura de malla de la red debe ser compatible con el objetivo del
muestreo.
b. Tomar cada una de las piedras contenidas dentro del cilindro y refregarlas con las
manos o un cepillo, de manera tal que todos los organismos adheridos a ellas se
suelten y sean capturados por la red del muestreador. Verificar que no quedan
organismos adheridos antes de descartar la piedra hacia un lado del sitio de
muestreo. En razn de poder comparar entre estaciones de muestreo, uniformizar el
tiempo de manipulacin de piedras y rodados (se recomienda 5 minutos).
c. Revolver la grava remanente con las manos hasta una profundidad de 5 a 10 cm.
d. Dado que generalmente la densidad de organismos es baja, mover el muestreador a
un nuevo sitio seleccionado al azar y repetir los pasos a hasta c. Continuar este
proceso hasta totalizar una muestra compuesta de 2 a 6 marcos de muestreo
(estandarizar este nmero dentro de un muestreo), cada uno de los cuales debe ser
obtenido aguas arriba del anterior. La superficie muestreada total depende del tamao
del marco del muestreador y del nmero de marcos muestreados. Anotar el nmero
de marcos de la muestra compuesta en la libreta de campo.
h. Retornar a la orilla desarmar el frasco colector y volcar su contenido en un recipiente o
bolsa plstica (Whirl-Pak).
i. En el caso de que queden organismos en la red, Invertir a sta y volcar su contenido
en una bandeja con agua. Asegurarse de que no quedan organismos en la red.
Transferir los organismos al recipiente o bolsa plstica anteriores y fijarlos con
solucin de formaldehido al 4 %.
j. Lavar la red y el colector antes de tomar otra muestra.
155
6.4.6 Peces.
Para la coleccin de peces y protocolos de procesamiento consultar los Mtodos
estndar para el muestreo de peces (en preparacin). Para la identificacin de especies
de peces de agua dulce de la regin patagnica consultar: Del Valle, A. 1996. Peces de
agua dulce de la regin patagnica. En tanto que para la identificacin de especies
marinas remitimos a: Cousseau, M. B. y Perrota, R. G. 2000. Peces marinos de
Argentina.
6.5 Muestreos biolgicos en estudios de composicin qumica.
Los estudios de composicin qumica en muestras biolgicas son principalmente anlisis
de tejidos que se utilizan en la determinacin de las concentraciones de metales,
pesticidas y otros productos naturales o no (metabolitos, lpidos, etc.) en organismos
vegetales o animales.
Por lo comn las muestras para composicin qumica son muestras de tipo compuesto,
es decir que los anlisis son llevados a cabo sobre una muestra constituida por varios
organismos (de la misma especie) cuyos tejidos se han homogeneizado para formar
dicha muestra. Esta forma de muestreo, sin embargo no permite llevar a cabo un anlisis
estadstico de las muestras, como por ejemplo establecer la existencia de diferencias
significativas entre las concentraciones de una sustancia particular en dos o ms fechas
de muestreo, ya que no se dispone de informacin acerca de la variabilidad (varianza).
Este problema puede solucionarse si cada muestreo consta de varias unidades
muestrales, constituidas cada una por un individuo y estas unidades son analizadas por
separado. Sin embargo en este tipo de muestreo, la cantidad de biomasa disponible en
cada unidad muestral individual puede ser demasiado exgua para llevar a cabo los
anlisis previstos.
Una solucin intermedia, aconsejada por la United States Environmental Protection
Agency, es el uso de muestras compuestas replicadas por cada estacin de muestreo.
156
Protocolo general para la obtencin de muestras compuestas replicadas
a. Determinar el nmero de muestras compuestas replicadas a obtener por sitio de
muestreo (se aconseja un mnimo de tres).
b. En general, el plan de muestreo debe especificar el tamao de los organismos a
muestrear. Si no fuera as, los individuos ms grandes constituyen para estudios de
contaminacin el peor caso posible de exposicin al contaminante; en estudios de
organismos que sirven como alimento, se deben utilizar ejemplares que tengan al
menos un tamao legal de cosecha o captura (o en su defecto, cuando no hay reglas
al respecto, un tamao comn para mercado).
c. Los ejemplares usados en las muestras compuestas deben ser todos de un tamao
equivalente. El largo (o peso) del individuo ms pequeo de la muestra no debe ser
inferior al 75% del largo (o peso) del individuo ms grande de la muestra.
d. El nmero de individuos en cada muestra compuesta debe ser el mismo. Este nmero
depende del tamao de los organismos y en general puede oscilar para
macroinvertebrados, entre 10 y 50 individuos; y para peces en unos 3 a 10
ejemplares. Como regla puede indicarse que son necesarios aproximadamente unos
500 g de tejidos homogeneizados por cada anlisis a efectuar.
e. La media de largo (o peso) de una muestra compuesta individual no debe diferir en
ms de un 10% de la media general de largo (o peso) de las rplicas combinadas.
6.5.1 Macroalgas y macrofitas.
Los tejidos de plantas acuticas pueden ser colectados para anlisis de metales,
pesticidas, nutrientes, productos vegetales, para el anlisis de su composicin porcentual
(protenas, glcidos y lpidos), o para otros anlisis de laboratorio. En todos los casos,
particularmente si la muestra tuviera que ser parcialmente elaborada en el campo, se
debe colectar un ejemplar entero, intacto y se lo debe archivar en un herbario, como
documento de lo que fue analizado, para lo cual se deben seguir los protocolos descriptos
en la seccin anterior (6.4).
157
En ocasiones, las especies de gran tamao individual (por ejemplo el alga parda
Macrocystis pyrifera), pueden asegurar la cantidad de material necesario para llevar a
cabo una o ms determinaciones. En estos casos, la eleccin entre muestras compuestas
o individuales debe decidirse en el diseo del plan de estudio encarado.
Protocolo
a. Colectar, con los mtodos ms adecuados para la profundidad y tamao de los
especmenes, plantas enteras y mantenerlas sumergidas y cubiertas hasta que
puedan ser procesadas (no permitir que se sequen).
b. Para anlisis generales (composicin proximal): Transportar los ejemplares en
heladera de telgopor, dentro de recipientes plsticos con tapa hermtica o en bolsas
tipo Whirl-Pak o en bolsas de residuos (bien cerradas con un nudo). Colocar una
etiqueta de identificacin interna. Enfriar con ice-packs.
c. Para anlisis de metales: Transportar los ejemplares en heladera, dentro de
recipientes plsticos o de vidrio, con tapa hermtica, o en bolsas tipo Whirl-Pak o en
bolsas de residuos. Colocar etiqueta de identificacin interna. Enfriar con ice-packs
envueltos en bolsas limpias tipo zip-lock.
d. Para anlisis de sustancias orgnicas traza: Transportar los ejemplares en heladera,
dentro de recipientes de metal, vidrio (con contratapa de film de aluminio) o
porcelana, tapados con film aluminio grueso y etiqueta de identificacin interna.
Alternativamente envolver a los ejemplares con film de aluminio (doble). Envolver los
ice-packs dentro de film de aluminio (doble).
e. Algunas muestras requieren slo de enfriado, otras de congelacin, por lo cual deben
guardarse en una heladera ya sea con ice-packs o bien con hielo seco (o ice-packs
para congelacin) en la cantidad apropiada. Manejar el hielo seco con guantes.
6.5.2 Macrozoobentos (macroinvertebrados).
Al igual que el caso anterior, los ejemplares a muestrear deben estar bien identificados y
el colector debera tomar un pequeo curso sobre la taxonoma del grupo,
particularmente si existe la posibilidad de que haya en el sitio de muestreo, especies
vecinas a la buscada. En todo caso, si la muestra tuviera que ser parcialmente elaborada
158
en el campo, se deben colectar algunos ejemplares enteros y se los debe conservar en
fijador, como documento de lo que fue analizado, para lo cual se deben seguir los
protocolos descriptos en la seccin anterior (6.4).
Algunos macroinvertebrados, como por ejemplo los bivalvos intermareales, son capaces
de sobrevivir perodos prolongados fuera del agua (un da o ms), particularmente a bajas
temperaturas (unos 0 a 4C). Los mejillones por ejemplo, cuando son sumergidos en un
balde con agua de mar, mantienen su ritmo metablico normal y filtran agua, consumen
oxgeno y excretan productos metablicos en el agua; en cambio en un ambiente fro y
hmedo, su metabolismo est muy reducido. En consecuencia, para el transporte de
mejillones (y otros bivalvos), es preferible hacerlo con los animales fuera del agua, a baja
temperatura y en un ambiente hmedo.
Un equipo de transporte para animales vivos puede llegar a adaptarse a partir de una
heladera de telgopor convencional. En primer lugar se debe disponer de dos rejillas o
grillas (plsticas u metlicas, de acuerdo a los anlisis a efectuar) que ajusten a
diferentes alturas dentro de la heladera: una aproximadamente unos 3 cm del fondo y otra
a unos 15-20 cm de la anterior. En el compartimento inferior se coloca una capa de lana
de tefln de unos 2 cm de espesor (filtros para purificadores de aire de cocina),
humedecida con agua. En el compartimento central van los animales de la/s muestra/s,
dentro de cajas con tapas perforadas como para permitir un adecuado pasaje de la
humedad y el fro, pero no la salida de los animales. En el compartimento superior se
coloca una capa de ice-packs, los cuales mantienen fro al muestreo.
Protocolo para la conservacin de animales vivos (bivalvos, caracoles y cangrejos
intermareales).
a. Colectar, con los mtodos ms adecuados, la cantidad de ejemplares que aseguren
un tamao de muestra (compuesta o individual) adecuado para el anlisis a encarar.
b. Para anlisis generales (composicin proximal): Transportar a los animales en una
heladera (con cmara hmeda e ice-packs) como la descripta ms arriba, dentro de
recipientes plsticos con tapa y etiqueta de identificacin interna.
159
c. Para anlisis de metales: Transportar a los animales en una heladera (con cmara
hmeda y grillas plsticas) como la descripta ms arriba, dentro de recipientes
plsticos con tapa y etiqueta de identificacin interna. Envolver los ice-packs dentro de
una bolsa tipo zip-lock.
d. Para anlisis de sustancias orgnicas traza: Transportar a los animales en una
heladera (con cmara hmeda y grillas metlicas) como la descripta ms arriba,
dentro de recipientes de metal, porcelana o esmaltados (sin cachaduras), tapados
con film aluminio grueso perforado y etiqueta de identificacin interna.
Alternativamente envolver a los animales con film de aluminio con perforaciones
(doble de ser necesario). Envolver los ice-packs dentro de film de aluminio (doble).
Los macroinvertebrados ms delicados (bivalvos submareales, langostinos, centollas,
etc.), mueren rpidamente una vez que han sido extrados del agua. Para su transporte
es suficiente con una heladera de telgopor convencional con ice-packs de enfriamiento,
siempre y cuando el transporte sea inferior a las 24 horas.
Protocolo para transportes de hasta unas 24 horas
a. Colectar, con los mtodos ms adecuados, la cantidad de ejemplares que aseguren
un tamao de muestra (compuesta o individual) adecuado para el anlisis a encarar.
b. Para anlisis generales (composicin proximal): Transportar a los animales en
heladera de telgopor, dentro de recipientes plsticos con tapa hermtica y etiqueta de
identificacin interna. Enfriar con ice-packs.
c. Para anlisis de metales: Transportar a los animales en heladera, dentro de
recipientes plsticos o de vidrio, con tapa hermtica, o en bolsas tipo Whirl-Pak.
Colocar etiqueta de identificacin interna. Enfriar con ice-packs envueltos en bolsas
limpias tipo zip-lock.
d. Para anlisis de sustancias orgnicas traza: Transportar a los animales en heladera,
dentro de recipientes de metal, vidrio (con contratapa de film de aluminio) o porcelana,
tapados con film aluminio grueso y etiqueta de identificacin interna. Alternativamente
envolver a los animales con film de aluminio (doble). Envolver los ice-packs dentro de
film de aluminio (doble).
160
Si los muestreos son llevados a cabo con una embarcacin que no vuelve a puerto en
menos de 24 horas, entonces congelar las muestras en las instalaciones de que dispone
el barco, evitando toda posible contaminacin. Se sugiere guardar las muestras dentro de
los recipientes adecuados hasta tanto se congelen, luego guardarlas dentro de heladeras
de telgopor bien selladas.
Para transportes de ms de 24 horas se sugiere congelar las muestras con hielo seco o
equivalente.
Protocolo para transportes de ms de 24 horas
a. Colectar, con los mtodos ms adecuados, la cantidad de ejemplares que aseguren
un tamao de muestra (compuesta o individual) adecuado para el anlisis a encarar.
b. Para anlisis generales (composicin proximal): Transportar a los animales en
heladera de telgopor, dentro de recipientes plsticos con tapa hermtica o en bolsas
tipo Whirl-Pak. Colocar etiqueta de identificacin interna. Enfriar con ice-packs de
congelacin o hielo seco.
c. Para anlisis de metales: Transportar a los animales en heladera, dentro de
recipientes plsticos con tapa hermtica o en bolsas tipo Whirl-Pak. Colocar etiqueta
de identificacin interna. Enfriar con hielo seco o ice-packs de congelacin envuelto/s
en bolsas limpias tipo zip-lock.
d. Para anlisis de sustancias orgnicas traza: Transportar a los animales en heladera,
dentro de recipientes de metal, vidrio (con contratapa de film de aluminio) o porcelana,
tapados con film aluminio grueso y etiqueta de identificacin interna. Alternativamente
envolver a los animales con film de aluminio (doble). Enfriar con hielo seco o ice-packs
de congelacin envuelto/s dentro de film de aluminio (doble)
Notas:
- Los animales adheridos a caos metlicos, cascos de barcos, u otras superficies que
sean potenciales causas de contaminacin, no deben ser incluidos en las muestras.
- Uniformizar el tamao de los ejemplares recolectados: por ejemplo en mejillones se
acostumbra colectar animales de unos 4 a 5 cm de largo (umbo-borde posterior), en
161
langostinos de 8 a 10 cm de largo (rostro-telson), en cangrejos de 2 a 4 cm de largo
de caparazn.
- En los muestreos de cangrejos es suficiente conservar una de las quelas en lugar de
todo el animal. Este procedimiento disminuye las probabilidades de contaminacin de
la muestra.
6.5.3 Peces.
Los ejemplares a muestrear deben estar bien identificados y el colector debera tomar un
pequeo curso sobre la taxonoma del grupo, particularmente si existe la posibilidad de
que haya en el sitio de muestreo, especies vecinas a la buscada. En todo caso, si la
muestra tuviera que ser parcialmente elaborada en el campo, se deben colectar algunos
ejemplares enteros y se los debe conservar en fijador, como documento de lo que fue
analizado, para lo cual se deben seguir los protocolos descriptos en la seccin anterior
(6.3).
Los protocolos de muestreo son semejantes a los descriptos para macrozoobentos
(seccin 6.4.3).
162
7. EMBALAJE.
Dado que algunos tipos de anlisis tienen tiempos de conservacin restringidos (ver
Apndice 3), la planificacin del trabajo diario debe ser hecha con mucho cuidado de
manera tal que se pueda asegurar que las unidades muestrales llegarn al sitio de
anlisis dentro del horario de trabajo y sin exceder el mximo de horas posible para ese
anlisis en particular.
El siguiente es el procedimiento a seguir para asegurar la integridad de las unidades
muestrales durante su transporte.
Notas:
a. Generalmente, todas las muestras, excepto las bacteriolgicas y las destinadas a
taxonoma, pueden ser empacadas en forma segura dentro de heladeras de telgopor
o plsticas grandes. Las muestras bacteriolgicas son por lo general empacadas en
heladeras o recipientes de telgopor pequeos. Las muestras taxonmicas se hallan
conservadas en fijadores y no necesitan enfriamiento para el transporte; por lo
general resulta til su empacado en recipientes hermticos en caso de prdida de
lquidos, las heladeras sirven bien a este propsito siempre y cuando sean utilizadas
slo con este objeto en el futuro.
b. Los ice-packs no son reemplazables por bolsas de hielo excepto en emergencias.
Cuando el hielo se derrite el contenido de las heladeras puede moverse y
potencialmente permitir la rotura de las botellas y/o permitir la contaminacin de las
unidades muestrales con hielo derretido.
Protocolo.
a. Empacar las unidades muestrales en la heladera de forma vertical, con una (1) vez
(en invierno) o dos (2) veces (en verano, otoo y primavera) el volumen de ice-packs
respecto del volumen de muestras. Asegurar que las botellas de vidrio estn
separadas unas de otras por ice-packs, botellas de plstico o material de empacar
(telgopor) limpio, para evitar roturas durante el transporte.
b. Para algunos anlisis (tejidos por ejemplo) estos requieren estar congelados para lo
que es necesario disponer de hielo seco o de ice-packs especiales para congelar.
163
c. Completar las planillas de datos para el laboratorio de anlisis, encerrarlas
hermticamente en una bolsa plstica que pueda ser sellada y colocarlas en la
heladera encima de las muestras. El mnimo de informacin recomendable en estas
planillas debe incluir:
c. Nombre de la campaa.
d. Nombre o nmero de la/s estacin/es de muestreo.
e. Fecha de recoleccin.
f. Nombre del colector.
g. Tipo de anlisis a llevar a cabo.
h. Si en la heladera hubiera envases destinados a diferentes tipos de anlisis,
discriminarlos e identificarlos por el nmero de la botella.
i. Comentarios de campo: Comentarios sobre la apariencia de la unidad muestral,
condiciones del tiempo y sobre cualquier circunstancia que ayude a interpretar los
datos.
d. Sellar la heladera con una cinta de embalaje fuerte para evitar que la misma se abra
accidentalmente. Las heladeras que lleguen al laboratorio sin su cinta bien colocada
pueden alertar al personal que algn accidente puede haber ocurrido durante el
transporte.
e. Pegar una etiqueta grande indicando destino y remitente.
f. Llevar al medio de transporte y avisar telefnicamente de la salida del material
muestreado.
164
8. BIBLIOGRAFA SUMARIA.
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170
APENDICE 1: LISTADO GENERICO PARA CAMPO (incluye muestreos en la columna
de agua, en fondos, biota y efluentes).
1. Generales.
GPS, mapas de acceso, cartas y fotografas areas y satelitales del sitio de trabajo.
Libretas (tipo rite in the rain), lpices (y sacapuntas) o lpices de mina (y minas de
repuesto), gomas de borrar.
Heladeras (con ice packs y/o hielo seco) y/o heladeras elctricas porttiles.
Marcadores indelebles nuevos.
Sogas.
Cinta aisladora y adhesiva.
Cinta de medir.
Cmara fotogrfica, film y pilas o bateras. Cmara de video, cintas y bateras
recargables (cargador).
Etiquetas de papel vegetal y/o autoadhesivas plsticas.
Bolsas plsticas cerrables (tipo Wirhl-Pak) o sellables o bien rollo de tubo de
polietileno y selladora porttil.
Agua deionizada (10 litros).
Cortador (cutter) con hojas de repuesto.
Pegamento (cianacrilato).
Tarjeta de crdito.
Credencial de trabajo.
Autorizaciones.
Llaves de candados (si hay tranqueras que pasar).
Binoculares.
Calculadora.
Telfono celular o satelital.
Formularios para laboratorio.
171
2. Botellas etiquetadas (pueden en algunos casos ser reemplazadas por bolsas
plsticas tipo Whirl-Pak). Procurar que los recipientes plsticos sean de tefln y que
los de vidrio tengan contratapas de este material. La cantidad debe ser apropiada para
los muestreos siguientes:
Qumica general (2 litros).
Metales disueltos, metales totales.
Carbono total, nutrientes.
Coliformes.
Zooplancton, fitoplancton.
Perifiton, invertebrados.
Macrofitas.
Tejidos.
Sedimentos.
Extras (para solventar roturas o muestreos no previstos).
3. Equipo de muestreo (limpio, en funcionamiento y con las bateras cargadas o
nuevas).
Muestreador de oxgeno disuelto (botella BOD).
Pipeta automtica ajustable (de 1 a 10 ml) y abundantes tips descartables.
Medidor de oxgeno disuelto (o reactivos Winkler)
Medidor redox.
Termmetro.
Phmetro.
Conductivmetro (o salinmetro).
Turbidmetro (o remplazando a todos o algunos de los anteriores una sonda
multiparmetro).
En algunos casos donde la evaluacin de parmetros del agua no sea esencial en su
precisin puede usarse un espectrofotmetro porttil con test includos (tipo Hach). En
este caso asegurarse de disponer de las drogas necesarias para llevar a cabo todas
las determinaciones.
172
Disco de Secchi, soga con divisiones para profundidad.
Botellas Van Dorn (o equivalentes), soga con divisiones y mensajeros.
Ecosonda.
Batera de 12 o 24 V (para ecosonda) y cables de conexin.
Muestreador de costa para agua.
Draga para sedimento y/o bentos.
Muestreador tipo Hope o de jeringa (para micro-meiobentos), tipo Hope de plstico
(para metales pesados) o de tubo de metal (para hidrocarburos).
Muestreador tipo Kajak para sedimentos profundos.
Flujmetro tipo open channel (includo en algunas sondas multiparmetro).
Redes de plancton (zoo y fitoplancton) y soga.
Balanza porttil (preferiblemente de 1 a 3 kg de capacidad y 0,1 a 0,01 g de precisin)
y/o balanza de colgar.
Juego de tamices (ASTM).
Bandejas blancas de unos 6-8 cm de profundidad y un dimetro que permita sumergir
un tamiz de los anteriores.
Bomba de pistn o bomba de vaco y grupo electrgeno porttil.
Trompa de vaco y mangueras
Equipo de filtracin y membranas de filtracin (0,45 m Sartorius), tubos plsticos
reforzados y abrazaderas (incluye Kitasato de 1l, preferiblemente de material plstico).
Embudo Buchner (preferiblemente plstico)
Pinzas de tefln.
Desecador porttil (o frasco con tapa hermtica) con placas de silicagel como
desecante.
Filtros tipo Whatman de 9 cm de dimetro (#50).
Clips plsticos.
Equipo para muestreo de invertebrados (muestreador Hess, muestreador Surber, red
de deriva, sorbona).
Equipo para muestreo de perifiton (cepillo de dientes, sopapa modificada, pera de
goma, bandeja, recipientes/bolsas de recoleccin)
173
Equipo para muestreo de macrofitas (bolsas plsticas, prensa, trapos limpios, papel
absorvente, diarios, hojas de herbario o cartulina blanca, carpetas, etc.).
Equipo para pesca elctrica.
Redes de pesca.
Calibre. Si se va a trabajar con muestras hmedas o mojadas evitar los calibres
electrnicos.
Manuales de uso (fotocopias) de los equipos a utilizar.
4. Fijacin-preservacin.
Formaldehido (solucin comercial 40%) y probeta o frasco marcado para hacer
diluciones ad hoc. Alternativamente formol diluido al 5% (para algas) y/o 10% (para
invertebrados-peces), en agua dulce o agua de mar segn corresponda y
convenientemente neutralizado con glicerofosfato de sodio.
Alcohol etlico 70% o alcohol etlico 70% glicerinado (para fijacin de equinodermos
y/o crustceos).
Solucin de Lugol.
Glicerofosfato de sodio (aproximadamente 100 g por cada botella de formaldehido de
1 litro).
Fijador de Bouin.
Suspensin de carbonato de magnesio (para clorofila a).
Preservantes varios
5. Equipamiento para botes.
Bote neumtico u otro.
Remos.
Motor fuera de borda y combustible.
Equipo bsico de reparaciones (incluye caja de herramientas bsicas, bujas y
reparaciones de flotadores).
Soga y ancla.
174
Salvavidas.
Chalecos salvavidas.
6. Equipo personal y de seguridad.
Comida calrica (y eventualmente agua dulce).
Equipo de fro y recambios de ropa.
Traje de agua.
Botas.
Waders.
Guantes de abrigo y/o impermeables.
Protector solar.
Repelente de insectos.
Linterna.
Equipo de primeros auxilios.
Radios VHF o UHF preferiblemente waterproof.
Guantes de ltex.
Anteojos de seguridad.
Extinguidor de tipo general.
175
APENDICE 2: EJEMPLOS DE PLANILLAS PARA SU USO EN CAMPO.
Localidad: Muestra: Fecha: Hoja:
Lat: Long:
Sustrato:
Dureza:
Inclinacin:
Retencin agua:
Hora:
Nivel:
Nivel relativo:
Moda relativa:
Moda:
Temperatura: pH: DO: Salinidad:
Turbidez: Amplitud:
Observaciones generales:
Especie Abundancia
Observaciones
Campaa: Fecha:
Muestra Latitud inicio Longitud inicio Prof.
inicial
Latitud final Longitud final Prof.
final
Hora Observaciones
176
177
Estacion: Rastra Draga
Bolsa N Especies Abund. Bolsa N Especies Abund. Fecha: Hora:
Profundidad:
Draga
Lat:
Long:
Rastra
Lat ini:
Long ini:
Lat fin:
Long fin:
Submuestras
Meiofauna
Mat. Organ.
Granulom.
Observaciones:
Campaa:
Fecha:
N muestra:
Campaa:
Fecha:
N muestra:
Caractersticas cualitativas: Caractersticas cualitativas:
Peso seco total (A): Peso seco total (A):
Pesos secos parciales % Pesos secos parciales %
Tamiz 5: -------------
Tamiz 10: -------------
Tamiz 18: -------------
Tamiz 35: -------------
Tamiz 60: -------------
Tamiz 120: -------------
Tamiz 230: -------------
Subtotal (B):
Fraccin fina (A - B)------------
Tamiz 5: -------------
Tamiz 10: -------------
Tamiz 18: -------------
Tamiz 35: -------------
Tamiz 60: -------------
Tamiz 120: -------------
Tamiz 230: -------------
Subtotal (B):
Fraccin fina (A - B)------------
Observaciones: Observaciones:
178
179
APENDICE 3: MUESTRAS DE BENTOS (SEDIMENTOS, AGUA ADYACENTE Y
BIOLOGICAS): TIPO DE ANALISIS, TIPO DE RECIPIENTE, MODO DE
PRESERVACION Y TIEMPO DE CONSERVACION.
TIPO DE ANALISIS TIPO DE
RECIPIENTE
MODO DE
PRESERVACION
TIEMPO DE
CONSERVACION MAXIMO
SEDIMENTOS
Granulometra Plstico o vidrio boca
ancha, 100-150 g
En fro (4C) 6 meses
Qumica general Plstico de boca ancha,
200 g
En fro (4C) 72 horas
Metales pesados (excepto
mercurio)
Plstico o vidrio de boca
ancha, 50 g
En fro (4C)
Congelado (-18C)
6 meses
2 aos
Mercurio Plstico o vidrio de boca
ancha, 1 g
Congelado (-18C) 28 das
Carbono orgnico total Plstico o vidrio boca
ancha, 25 g
En fro (4C)
Congelado (-18C)
14 das
6 meses
Amonio Plstico o vidrio boca
ancha, 25 g
En fro (4C) 7 das
Aceites y grasas Vidrio boca ancha, 100
g
En fro (4C) con ClH
Congelado (-18C) con ClH
28 das
6 meses
Compuestos orgnicos
voltiles
Vidrio mbar boca
ancha, tapa tefln, 50 g
En fro (4C) sin aire
Congelado (-18C) sin aire
14 das
14 das
Compuestos orgnicos
semivoltiles
Vidrio de boca ancha,
tapa de tefln, 50-100 g
En fro (4C)
Congelado (-18C)
10 das
1 ao
Sulfuros totales Plstico o vidrio de boca
ancha, 50 g
En fro (4C) con acetato de
Zn (1 N), sin aire
7 das
Haluros orgnicos extrables Vidrio, 50 g Congelado (-18C) 6 meses
AGUA ADYACENTE
Nitratos Plstico, 200-500 ml En fro (4C) 72 horas
Nitritos Plstico, 200-500 ml En fro (4C) 72 horas
Ortofosfato total disuelto Plstico, 200-500 ml En fro (4C) 72 horas
Fosforo niveles bajos Vidrio mbar, 250 ml,
lavado con cido
En fro (4C) 72 horas
Amonio Plstico, 250 ml En fro (4C) 72 horas
Sulfuros totales Plstico o vidrio, 500 ml 1 ml de acetato de cinc 2N,
excluir aire
72 horas
Metales totales Plstico, 125 ml En fro (4C), agregar
NO
3
H
2
hasta pH menor de 2
72 horas
180
Metales disueltos Plstico, 125-1000 ml Filtrada, agregar

NO
3
H
2
hasta pH menor de 2,
conservar en fro (4C)
6 meses
Mercurio total Vidrio mbar, 1 litro,
lavado con cido
Agregar 6 ml sol. 10%
Cr
2
O
7
K
2
y 6 ml SO
4
H
2
por
litro
28 das
Carbono total
inorgnico/orgnico
Plstico o vidrio, 100 ml En fro (4C) 72 horas
DBO Plstico, 500-1000 ml En fro (4C) excluir aire 72 horas mximo (preferible 24
horas)
Hidrocarburos Vidrio mbar, 250 ml En fro (4C) 30 das
Orgnicos semivoltiles Vidrio mbar, 1litro,
tapn de teflon
Agregar 5 ml de SO
4
H
2
En
fro (4C)
5 das
Otros: ver Muestreo de la columna de agua
BIOLOGICOS
Bacterias Muestreador de jeringa
esterilizado, llenar hasta
5 cc (un muestreador por
muestra) y bolsa plstica
esterilizada.
En fro (4C) 48 horas
Macroalgas Plstico, vidrio o bolsas
tamao variable.
Alternativamente secas
en herbarios.
Formol 5% como fijador. Aos
Macrofitas grandes Secas en herbarios. En seco Aos
Macrofitas flotantes
pequeas
Plstico, vidrio o bolsas
tamao variable.
Mezcla de alcohol,
formalina y agua como
fijador.
Aos
Macrozoobentos Plstico, vidrio o bolsas
tamao variable
Formol 5-10% como fijador
inicial.
Aos
Peces Plstico, tamao variable
de acuerdo al largo de
los animales.
Formol 10% como fijador.
Alcohol etlico 70% como
conservador.
Aos.
Metales-elementos traza Plstico, boca ancha,
100 g
Congelado en hielo seco 48 horas
Histologa (piezas de 1
cm mxima dimensin)
Plstico, boca ancha, 50
ml
Bouin 24 horas
181
APENDICE 4: GRANULOMETRIA.
En ocasiones, adems de la toma de muestras para el anlisis de los sedimentos, resulta
necesaria la elaboracin de las mismas a los fines de su interpretacin. El anlisis de la
granulometra es una de las tcnicas relativamente sencillas y bsicas, que pueden ser
utilizadas en la caracterizacin de los fondos blandos.
La granulometra es el anlisis de la distribucin de las frecuencias de tamao de las
partculas en una muestra de sedimento. Este anlisis se lleva a cabo tamizando la
muestra a travs de una batera de tamices estandarizados de abertura de malla
decreciente y/o para las fracciones ms finas pipeteando una suspensin de sedimento a
tiempos determinados. El tamao de las partculas si bien es una variable continua, es
usualmente expresado segn una escala de grado, con clases o categoras discretas,
cada una con un lmite superior y un lmite inferior. Se han diseado varias escalas de
grado arbitrarias, pero las ms comunes son la escala de Wentworth y la escala phi. La
escala de Wentworth es geomtrica y milimtrica; la escala phi se basa en la anterior y se
halla aplicando log
2
a los valores de la escala Wenworth. Las categoras en las escalas
Wentworh y phi, adems de los nmeros de los tamices correspondientes utilizados para
separar cada fraccin, son descriptas en la Tabla 1.
Como primera etapa en el anlisis granulomtrico de una muestra de sedimento es
necesario considerar la presencia de sales disueltas en el agua intersticial de la muestra.
Este problema se presenta slo para las muestras obtenidas en ambientes marinos y
salobres. En las muestras obtenidas de agua dulce se puede proceder directamente al
secado de la muestra.
Protocolo para desalinizar muestras de sedimento
a. Colocar la muestra de sedimento en un recipiente de vidrio o plstico grande.
b. Llenarlo de agua dulce (preferiblemente agua destilada). La proporcin sedimento-
agua debe ser aproximadamente 1 a 10 (100 g de sedimento en 1 litro de agua).
Mezclar agua y sedimento, revolviendo suavemente con una varilla de vidrio.
182
c. Dejar reposar el tiempo suficiente para que el contenido sedimente (depende de la
cantidad presente de fracciones granulomtricas muy finas). Por lo general son
suficientes unas 24 horas.
d. Cuando el agua por encima del sedimento est limpia, sifonear el sobrenadante con
cuidado de no disturbar el sedimento subyacente.
e. Repetir los pasos b a d.
f. Vaciar en un recipiente que pueda ir a estufa.
g. Secar la muestra hasta peso constante (a unos 70-80C) y pesar.
Tabla 1: Equivalencias entre escala Wentworth y phi e indicacin de tamices utilizables.
En la columna de nombre de clase se indica en primer lugar el nombre del agregado
suelto (sedimento) y entre parntesis el nombre de las partculas de sedimento aisladas .
Nombres de clase
(Wentworth)
Esc.
Wentworth
Lmites (mm)
Escala
Phi
Abertura de
malla en mm
(tamices)
Nmero de malla
en tamices U.S.
Nmero de malla
en tamices
ASTM
Aglomerado (bloque) (1) Ms de 256 -------------- -------------- -------------- --------------
Grava gruesa (guijn) (1) 256-64 -------------- -------------- -------------- --------------
Grava mediana (guijarro) (1) 64-16 -------------- -------------- -------------- --------------
Grava fina (guija) (1) 16-4 -3 -------------- -------------- --------------
Sbulo (grnulo) -2 4,00 5 5
Sbulo (grnulo)
4-2
-1,5 2,83 7 --------------
Arena muy gruesa (grano) -1 2,00 10 10
Arena muy gruesa (grano) -0,5 1,41 14 --------------
Arena muy gruesa (grano)
2-1
0,0 1,00 18 18
Arena gruesa (grano) 0,5 0,71 25 --------------
Arena gruesa (grano)
1-0,5
1 0,50 35 35
Arena mediana (grano) 1,5 0,35 45 --------------
Arena mediana (grano)
0,5-0,25
2 0,25 60 60
Arena fina (grano) 2,5 0,177 80 --------------
Arena fina (grano)
0,25-0,125
3 0,125 120 120
Arena muy fina (grano) 3,5 0,083 170 --------------
Arena muy fina (grano)
0,125-0,0625
4 0,0625 230 230
Limo (partcula) (2) 0,063-0,004 8 -------------- -------------- --------------
Arcilla (partcula) (2) Menor de 0,004 -------------- -------------- -------------- --------------
(1) Por medicin directa (con metro o calibre).
(2) a determinar por pipeteo o por diferencia, consultar Buchanan & Kain (1971).
183
Una vez la muestra seca y pesada (al miligramo) se procede a tamizarla a travs de una
serie de tamices de malla decreciente. Una de las opciones es disponer una serie de 13
tamices separados 0,5 unidades en la escala phi (entre # 2 y # 4); alternativamente se
puede usar una serie ms corta de 7 tamices ASTM (# 5 a 230). En ambos casos, los
sedimentos que pasen a travs del tamiz de malla ms fina (0,0625 mm) se consideran
limos y arcillas y su porcentaje se obtiene por diferencia respecto del peso seco inicial del
sedimento lavado. Los sedimentos retenidos por los tamices corresponden principalmente
a la serie de arenas.
Protocolo para la separacin de fracciones arenosas (en hmedo).
a. Disponer la serie de tamices uno sobre otro y ordenados de acuerdo a su tamao de
malla (el de malla mayor en la parte superior).
b. Disponer el sedimento previamente pesado en el tamiz superior y lavar con un
regador que disperse el agua en forma de lluvia.
c. Lavar hasta que no pase ms sedimento por el tamiz superior. Asegurarse de esto
sacndolo de la serie, colocndolo sobre una bandeja de color blanco y lavndolo
individualmente. Si no pasara ms sedimento dejar a este tamiz a un lado y continuar
con los de abajo. Si quedara sedimento en la bandeja seguir lavando y luego volcar el
contenido de la bandeja en el siguiente tamiz.
d. Repetir el paso c hasta que no queden tamices por lavar.
e. Recoger el contenido de cada tamiz con una esptula y/o un pincel y volcarlo en un
recipiente que pueda ir a estufa. Secar a 70-80C hasta peso constante.
f. Pesar cada una de las fracciones al miligramo.
Nota: Como gua general se puede indicar que un tamiz de 3,75 cm de dimetro puede
procesar 15 g de sedimento, uno de 7,5 cm de dimetro puede procesar 30 g de
sedimento y un tamiz de 15 cm de dimetro puede procesar 60 gramos.
El material de limos y arcillas que pasa a travs del tamiz de 0,0625 mm se halla por
debajo de la capacidad prctica de procesamiento con tamices. Si la subdivisin de la
fraccin de limos-arcillas tuviera que ser llevada a cabo, entonces corresponde emplear
alguna de las tcnicas de sedimentacin. El principio de estas tcnicas es que en un
184
tiempo determinado, las partculas ms grandes caen ms rpidamente que las de
tamao ms pequeo en una columna de agua destilada. Un ejemplo de cmo una de
estas tcnicas de separacin puede ser llevada a cabo, se halla descripta con detalle en
Buchanan & Cain (1971).
En muchas muestras de sedimentos no elaboradas (crudas), parte del material puede
existir en varios estados semiconsolidados en la forma de pellets fecales, tubos de
poliquetos, etc. Estos agregados naturales son en ocasiones de considerable inters
ecolgico, ya que ayudan a definir la heterogeneidad del sustrato, sin embargo ellos son
por lo general destruidos y sus partculas dispersas con los mtodos estndar de anlisis
granulomtrico. Si se estuviera interesado en ellos, seguir el siguiente protocolo, el cual
debe practicarse en tierra luego de la toma de las muestra y que no es apto para seguir
luego del transporte de la muestra:
Protocolo para la descripcin de agregados naturales.
a. Dado que los agregados naturales se hallan por lo general verticalmente
estratificados, obtener la muestra con un muestreador de tubo.
b. Limitar la profundidad de muestra a la de enterramiento de los organismos de inters.
c. Mantener el muestreador con la muestra (adecuadamente tapado) y guardado en
heladera en posicin vertical hasta el momento del anlisis.
d. Si interesara mantener la estructura de estratificacin, llevar a cabo la descripcin de
los agregados presentes en las diferentes capas extrudas individualmente del
muestreador.
e. Disponer la muestra suavemente en un tamiz apto para la fraccin arenosa de mayor
tamao (#10: 2 mm) y sumergir a ste con cuidado en un recipiente de color blanco
lleno con agua.
f. Agitar muy suavemente.
g. El material que pas a travs del primer tamiz es transferido suavemente junto con el
agua a un segundo tamiz de malla #18, ubicado en un segundo recipiente blanco.
h. Repetir los pasos e, f y g, usando tamices de mallas progresivamente menores y el
mismo par de recipientes blancos, hasta que no se observen ms agregados.
185
i. Volcar el contenido de los tamices, con mucho cuidado (con pinceles blandos) en
cpsulas de Petri y los agregados descriptos (preferiblemente bajo lupa), contados y
si se desea, secados para su pesado (se los puede guardar con agua en recipientes
de vidrio etiquetados, para secarlos en laboratorio).
j. Es posible la elaboracin total de la muestra (para granulometra), utilizando una serie
completa de tamices (ASTM #: 5, 10, 18, 35, 60, 120, 230), con secado y pesado de
todas las fracciones. La fraccin de limos-arcillas (que pasa a travs del tamiz #230)
es filtrada suavemente (con embudo Buchner kitasato y una trompa de vaco) a travs
de un filtro de papel (Whatman #50, prelavado, secado y pesado), el cual es
subsecuentemente secado y pesado, para sacar el peso de esta fraccin por
diferencia.
186
APENDICE 5: FIJADORES Y CONSERVADORES.
Por regla general una muestra puede traer consigo una variedad tan grande de
organismos, tan diferentes en su composicin qumica, fsica y tamao, que cualquier
fluido fijador y conservador que se utilice para todos ellos, representa en el mejor de los
casos una solucin de compromiso.
Formaldehido.
El formaldehido se considera uno de los fijadores-conservadores de uso ms prctico, por
su precio, la posibilidad de transportarlo concentrado y porque se adapta a gran variedad
de organismos. Por otra parte se sabe que el formaldehido puede ser cancergeno y en
muchos sitios se lo usa slo como fijador temporal para luego reemplazarlo por lquidos
de preservacin menos nocivos.
El formaldehido se comercializa en forma de solucin a concentraciones del orden del
40%. A baja temperatura ambiental el formaldehido en solucin se polimeriza en
paraformaldehido (sustancia blanca que se deposita en el fondo de los envases, enturbia
la solucin restante y disminuye en esta ltima la concentracin de fijador); los fabricantes
recomiendan temperaturas de almacenamiento de 10 a 25C: El fenmeno de
polimerizacin puede revertirse calentando la solucin o agregando pequeas cantidades
de una solucin de hidrxido de sodio al 0,5%.
El formaldehido tiende a acidificarse con el tiempo tanto en presencia de especmenes
(reaccin de Sorensen del formol en solucin acuosa con los grupos NH
2
de los
aminocidos), como en ausencia de stos (reaccin de Canizzaro de los aldehidos a
transformarse en cidos y alcoholes). En consecuencia, como fijador y preservador, el
formaldehido producir un lquido cido, ya sea que se lo almacene puro o se lo ponga
en contacto con los especmenes. La tendencia a la acidificacin es tanto ms marcada
en agua dulce que en agua de mar, dado que esta ltima posee sales que pueden actuar
como buffer. Entre las sustancias que estabilizan el pH de las soluciones de formaldehido
en un valor neutral se recomienda el uso de glicerofosfato- de sodio o bien una mezcla
187
de fosfato monobsico de sodio monohidratado (PO
4
NaH
2
. H
2
O) y fosfato dibsico de
sodio anhidro (PO
4
HNa
2
).
Existe una considerable confusin en cuanto a la concentracin de las soluciones de
formaldehido, dado que coexisten dos nomenclaturas. En una de ellas se habla de
soluciones de formaldehido y toma en cuenta la concentracin al 40% de la solucin
comercial de formaldehido y se habla en consecuencia de soluciones en agua al 4% (1
parte de solucin de formaldehido al 40% y 9 de agua) y 2% (1 parte de formaldehido y
19 de agua). Por otra parte, se habla de soluciones de formol o formalina y se
consideran las diluciones como si la solucin comercial (al 40%) no estuviera diluda,
obtenindose en consecuencia soluciones al 10% (equivalente a la solucin previa del
4%) y al 5% (equivalente a la solucin del 2%). Dado que estas son las dos
concentraciones utilizadas ms frecuentes, los porcentajes que se indiquen implicarn
consecuentemente una u otra nomenclatura.
La preparacin de soluciones fijadoras-preservadoras en base a formaldehido se resume
en el siguiente protocolos.
Protocolos
a. Mantener la solucin comercial de formaldehido a una temperatura entre 10 y 25C
para evitar precipitaciones de paraformaldehido. Si estas tuvieran lugar agregar de a
poco una solucin al 0,5% de NaOH hasta lograr su disolucin.
b. Para preparar una solucin de formol al 10% con pH neutro, diluir 1 (una) parte de
solucin comercial en 9 (nueve) partes de agua (dulce o de mar). Agregar 1% de
glicerofosfato de sodio. Por ejemplo para preparar 1 litro de solucin de formol al 10%,
diluir 100 ml de sol. de formaldehido (40%) en 900 ml de agua y agregar 10 g de
glicerofosfato. Apta para invertebrados y peces.
c. Alternativamente para preparar un litro de solucin de formol al 10% con buffer
fosfato, diluir 100 ml de solucin de formaldehido en 900 ml de agua dulce o de mar y
agregarle 4 g de PO
4
NaH
2
. H
2
O y 6 g de PO
4
HNa
2
.
d. Para preparar una solucin de formol al 5% con pH neutro, diluir 1 (una) parte de
solucin comercial en 19 (diecinueve) partes de agua (dulce o de mar). Agregar 0,5-
188
1% de glicerofosfato de sodio. Por ejemplo para preparar 1 litro de solucin de formol
al 5%, diluir 50 ml de sol. de formaldehido (40%) en 950 ml de agua y agregar entre 5
y 10 g de glicerofosfato. Apta para zooplancton, algas e invertebrados pequeos.
Fijador de Bouin
De uso general en histologa el fijador de Bouin tiene la frmula siguiente:
- 15 partes (en volumen) de una solucin saturada de cido pcrico: prepararla con
agua tibia y agregar cido pcrico agitando, hasta que ste se deposite en el fondo (se
conserva indefinidamente).
- 5 partes de solucin comercial de formaldehido (40%).
- 1 parte de cido actico glacial.
Se recomienda prepararla en el momento de uso.
Las piezas fijadas en formol que vayan a ser usadas en histologa pueden ser refijadas en
Bouin. Este fijador es muy cido por lo que descalcifica las piezas en l sumergidas.
Las piezas a fijar en Bouin deben tener menos de 5 mm en su mxima dimensin, se
recomiendan tiempos de fijacin de unas 48 horas. El fijador de Bouin no es un lquido
preservador.
Si hubiere la intencin de fijar y simultneamente descalcificar (eliminar la concha por
ejemplo) piezas pequeas, el tiempo de estancia en el fijador puede aumentarse a varios
das.
Alcoholes
Los alcoholes son considerados como malos fijadores, pero pueden ser utilizados en la
conservacin de muestras durante perodos largos.
En general para muestras de bentos o de peces se recomienda una fijacin de 2 das a
una semana en una solucin en agua de mar de formaldehdo al 2 o 4% segn los casos
189
(5 o 10 % de formalina), neutralizado con brax u otros compuestos y el almacenamiento
subsiguiente en alcohol etlico al 70% o isoproplico al 50%. El pasaje a alcohol debe
estar precedido de un lavado de la muestra en agua en condiciones de buena ventilacin.
Notas:
- Es usual para la conservacin de equinodermos la fijacin previa en formaldehido y
pasaje a alcohol etlico 70% adicionado de glicerina (5%).
- En peces grandes, para asegurar la fijacin/conservacin de las vsceras, practicar
una incisin corta en la pared abdominal, que permita la entrada de fijadores y/o
conservadores.
Solucin de Lugol
Se prepara mezclando una solucin de 10 g de yoduro de potasio neutro en 100 ml de
agua destilada, con otra de 5 g de yodo cristalino disuelto en 10 ml de cido actico
glacial; dejar que decante y usar el sobrenadante como fijador. Debe conservarse en un
frasco hermtico de color oscuro. Agregar a la muestras de fitoplancton a razn de 2 a 3
gotas (0,4 a 0,8 ml) por cada 200 ml de muestra (2 a 4 ml por litro de muestra). El color de
la muestra debe ser el del coac o de un t claro. El efecto de fijacin dura entre uno y
varios aos.
Nota: No usar en recipientes plsticos ya que stos retiran yodo de la solucin.
A continuacin se indica con referencia a diferentes taxa generales o especficos las
soluciones fijadoras, de lavado y de conservante ms apropiados para cada uno de ellos
(Tabla 1).
190
Tabla 1: Soluciones fijadoras, de lavado y conservantes para diferentes taxa animales.
Taxa Fijador Lavado Conservante
Meiofauna en bloque con
sedimento
Formalina 10% con buffer ----------------------- Formalina 10% con buffer
Meiofauna en bloque sin
sedimento
Formalina 5% con buffer ------------------------ Formalina 5% con buffer
Macrofauna en bloque Formalina 5-10% con buffer Alcohol etlico al 70% Alcohol etlico al 70-80%
Nematodes Formalina 5% con buffer ----------------------- Formalina 5% con buffer
Rotferos (los de agua dulce
se tratan como zooplancton)
Formalina 5-10% con buffer Alcohol etlico al 70% Alcohol etlico al 70%
Tardgrados Formalina 3-7% con buffer ----------------------- Formalina 3-7% con buffer o
alcohol al 70-80%
Porferos Formalina 10% con
metenamina como buffer
Alcohol etlico al 70-80%,
cambiar dos veces
Alcohol etlico al 70-80%
Cnidarios (antozoos e
hidrozoos)
Formalina 4-10% en agua
de mar con buffer
Alcohol etlico al 70% Alcohol etlico al 70%
Cnidarios (medusas) Formalina 5-10%
(dependiendo del tamao)
en agua de mar con buffer
------------------------ Formalina 5% con buffer
Ctenforos cido tricloroactico (1 g) en
agua de mar (99 ml)
----------------------- Propilen fenoxetol (1,5 ml),
propilen glicol (3 ml),
formaldehido al 40% (10 ml)
y agua destilada o de mar
(83,5 ml)
Anlidos Formalina 10% en agua de
mar con buffer
Alcohol etlico al 70% Alcohol etlico al 70%
Moluscos bivalvos Formalina 10% con buffer o
alcohol 70%
Alcohol etlico al 70% Alcohol etlico al 70%
Moluscos cefalpodos Formalina 6-10%
(dependiendo del tamao)
en agua de mar con buffer o
alcohol 70%
Drenar la cavidad del manto
de fluidos, luego lavar con
alcohol 70-75% o alcohol
isoproplico
Alcohol etlico al 70-75% o
alcohol isoproplico.
Moluscos gasterpodos y
poliplacforos
Formalina 10% en agua de
mar con buffer
Alcohol etlico al 70% Alcohol etlico al 70%
Braquipodos Formalina 10% en agua de
mar con buffer
Alcohol etlico al 70% Alcohol etlico al 70% o
seco
Nemertinos Formalina 5-10% en agua
de mar con buffer
----------------------- Formalina 5-10% en agua
de mar con buffer
Briozoos Formalina 5% con buffer Alcohol etlico al 70% Alcohol etlico al 70% o
seco
191
Artrpodos (crustceos
medianos o grandes)
Formalina 5-10%
(dependiendo del tamao)
en agua de mar con buffer o
alcohol 75%
Alcohol etlico al 70% Alcohol etlico al 70%
Artrpodos (insectos) Alcohol 70-75% ----------------------- Alcohol etlico al 70-75%
Equinodermos Alcohol etlico al 70-75% ----------------------- Alcohol etlico al 70%,
puede ser adicionado de 5%
de glicerina para evitar
accidentes por evaporacin
Ascidias Formalina 10% en agua de
mar con buffer
------------------------ Formalina 10% en agua de
mar con buffer