ACCIN DEL CALOR SECO Y EL CALOR HMEDO EN LOS MICROORGANISMOS

I. INTRODUCCION
Existen diversos mtodos fsicos de esterilizacin y de inhibicin del crecimiento microbiano, como
pueden ser el calor, la filtracin y la radiacin, pero el ms ampliamente usado es el calor, ya sea
hmedo o seco, los cuales tienen diferente penetrabilidad.
Conforme aumenta la temperatura por encima de la temperatura mxima de crecimiento, se
producen efectos letales en los microorganismos.
La muerte de las bacterias por el calor es consecuencia de la desnaturalizacin de sus protenas.
Los enlaces intracelulares e intermoleculares (puentes de Hidrgeno), de las protenas de los
cuales depende su funcionalidad son ms lbiles cuando las protenas estn hidratadas que
cuando no lo estn, de tal manera que el calor hmedo es ms efectivo en la desnaturalizacin
de enzimas y otros componentes proteicos importantes para la clula que el calor seco.
Es por eso que se dice que el calor hmedo tiene mayor penetrabilidad que el calor seco.
El calor, de cualquier forma, es utilizado extensamente como un agente letal bacteriano y se
puede aplicar a numerosos instrumentos, materiales y substancias, con el propsito de matar a las
bacterias que ellos contengan. Este proceso se flama Esterilizacin y al material, cultivo medio
de cultivo sometido a ste, se le denomina entonces Estril, es decir, desprovisto de toda forma
viviente.
El calor puede ser generado en diversos aparatos y por lo tanto se puede esterilizar por calor
hmedo y por calor seco.
En ambos casos hay numerosos factores que condicionan la efectividad del proceso: Cantidad de
agua, temperatura, presin, tiempo de contacto, superficie de esterilizacin, pH, edad de las
bacterias, la presencia o no de esporas, composicin del medio de suspensin, etc.
Las clulas vegetativas y las endosporas bacterianas de un mismo organismo varan
considerablemente en cuanto a su resistencia al calor.
La muerte de los microorganismos es ms rpida a pH cido.
Las concentraciones elevadas de azcares, protenas o grasas disminuyen la penetracin del calor
y habitualmente aumentan la resistencia de los organismos al calor, mientras que las elevadas
concentraciones de sal pueden incrementar o bien reducir la resistencia al calor, dependiendo del
organismo
II. OBJETIVOS
Demostrar la diferencia de penetrabilidad del calor seco y del calor hmedo, usando
como indicador la viabilidad de una bacteria.
Determinar el tiempo mnimo necesario para eliminar las formas vegetativas y las formas
espuraladas de las bacterias
III. MATERIALES Y METODOS
A) Efecto de la Ebullicin.
Se proporcion cultivos de un microorganismo, siendo rotulados en tubos (Bacillus
sp.) y (staphiloccus aerus); tome una muestra del tubo con el asa bacteriolgica para
el tiempo 0, seguidamente colocar los caldos en agua hirviendo y tomar muestras a los
5 y 10 minutos a 100 grados en bao mara, luego Incubar a 37 C por 24 horas.


B) PASTEURIZACION RAPIDA
se rotulo tubos con caldo comn con 0,5,10 minutos para bacillus subtilis y
staphilococcus ,de igual manera se procedi con aspergillus niger en caldo sabouraud
inoculamos aspticamente 0,2 ml y colocamos en los tubos rotulados con 2 y 10 men
bao mara a 72 grados.
Se incubo los tubos rotulados a 37 grados durante 24 horas y durante 7 dias
aspergillus niger.
C) CALOR SECO
Se rotulo en tubos caldo comn con 0, 60, 80, 100 grados Celsius para bacillus subtilis
asi como para staphilococcus aerus
Se inoculo aspticamente la suspensin microbiana en 0, 2 ml en los tubos
Trascurrido el tiempo sealado se retiro y se dejo a temperatura ambiente para que se
enfren
Se incubo a 37 grados durante 24 horas
Observamos la turbidez
IV. RESULTADOS
A. CALOR HMEDO
A.1. Ebullicin
Tiempo (min) D.O.
Staphylococcus aerus Bacillus subtilis
0 0.016 0.068
5 0.020 0.649
10 0.025 0.112
La DO a los 5 y 10 minutos de Bacillus subtilis obtenidos el 08/07/2014 se va a
comprobar con aquellos valores que se obtendrn el 09/07/2014 o el 10/07/2014.
Grfica (08/07/2014)
min
D.O. S. aerus D.O. B. subtilis
0 0.016 0.068
5 0.02 0.649
10 0.025 0.112




A.2. Pasteurizacin rpida
Tiempo (min) TURBIDEZ
Bacillus subtilis Staphylococcus
aerus
Aspergillus niger
0 Mayor crecimiento Mayor crecimiento
5 Mayor crecimiento Crecimiento
mediano

10 Crecimiento
mediano
Crecimiento pobre,
casi nulo.

La incubacin del A. niger es de 3-7 das, por lo que an no hay resultados.
B. CALOR SECO
Temperatura (C) TURBIDEZ
Bacillus subtilis Staphylococcus aerus
0 Crecimiento Crecimiento
60 Crecimiento Crecimiento
80 Crecimiento Crecimiento
100 Crecimiento Crecimiento mediano


V. DISCUSION
Solo la muerte de los microorganismos seleccionados y aceptados internacionalmente durante un
proceso de esterilizacin garantiza la destruccin de potenciales contaminantes patgenos menos
resistentes que aqullos, De all la importancia de contar con este tipo de control en los
laboratorios consultorios odontolgicos y con la posibilidad de instrumentarlo como
procedimiento de rutina, ya que existe un potencial riesgo de exposicin tanto del profesional
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0 2 4 6 8 10 12
D.O. S. aerus
D.O. B. subtilis


como de otros pacientes al contacto con microorganismos que producen enfermedades como el
SIDA y las Hepatitis B y C (12, 13). Existe una gran y creciente cantidad de bibliografa relacionada a
los riesgos de infeccin cruzada por instrumentos contaminados e inadecuadamente esterilizados
en la prctica. Es por tanto una obligacin tico profesional para todos los miembros del equipo de
asegurar que se realizan apropiadamente todos los procedimientos necesarios para protegerse
ellos mismos y sus pacientes de la infeccin cruzada
VI. CONCLUSION
Calor seco, es accin letal se debe a la oxidacin de componentes celulares. El aire es mal
conductor del calor y el aire caliente entra ms lentamente que el vapor en los materiales.
Por ello se requiere ms temperatura y tiempo de exposicin que en la esterilizacin con
calor hmedo.
Pasteurizacin: Es la aplicacin de una temperatura inferior a 110C por 30 minutos. La
aplicacin del calor va seguida de un rpido enfriamiento. Se usa para prevenir las
infecciones de origen lcteo y retrasar la descomposicin de la leche, ya que las bacterias
de la leche no forman esporas (bacilo tuberculoso, salmonella, streptococo y brcela)
VII. REFERENCAS
J. A. Garca Rodrguez y otros. "Microbiologa Clnica". Ed. Haurcourt Brace. Barcelona.
1999.BIBLIOGRAFICAS

http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/Seminarioesterilizacion.htm.

http://es.scribd.com/doc/191878357/LABO4-INFORME

CUESTIONARIO
1. Menciona el tiempo y la temperatura para eliminar las formas vegetativas de las
bacterias y mohos, as mismo sus de sus respectivas esporas.



2. Cmo acta el calor seco (temperatura por encima de 70 grados Celsius) en las
clulas bacterianas?
Calor seco destruye al oxidar sus constituyentes qumicos en accin letal del calor es
una relacin de temperatura y tiempo afectada por muchas condiciones. Por ejemplo,
pasado los 70 grados las esporas de Clostridium botulinum son destruidas en 4 a 20
minutos a 120 C en calor hmedo

3. la resistencia trmica de los microorganismos seria la misma cundo se suspenden
en agua destilada, en comparacin con el caldo comn?