un bloque humedo es dlflcll de corLar

orlenLacln de los bloques Llene q ser la correcLa, el caso mas comun es la plel.( de mas blando a mas duro
es la forma adecuada de corLar)
es me[or corar de 4 mlcrones a q de 2 y se desLruya -
cuando uno saca una clnLa los prlmeros corLes son mas gruesos (expansln Lermal) con el Llempo de
corLe
-
unlformldad de glro de la manlvela -
Angulo nava[a -
condlcln de la nava[a de corLe -
LnLre las conslderaclones q afecLan el grosor de corLe:
se debe usar una nava[a nueva un angulo de 10. -
corLes Llblos Llenden a generar esLaLlca. -
desgasLe del bloque se hace en Llblo para saber sl el Le[ldo es duro o blando, los corLes generalmenLe sa
hacen en frlo, pero hay excepclones en Le[ldos mas celulares, un corLe frlo va a sallr mas pare[o y unlforme.
la experlencla no la susLlLuye nada -
usar un lado de la nava[a con el fllo nuevo para corLar y oLro secLor para desgasLar. -
cuando no sale la clnLa hay q enfrlar el corLe o bloque (Loalla nova con hlelo sln ensuclar) -
los corLe de manera lenLa son pLlmos -
cuando salga un corLe no debe parar, se plerde el rlLmo y se produce arLefacLo de corLe alLernado. -
LxL8lLnClASA A8A PACL8 8uLnCS CC81LS
el bano de floLacln debe ser de 3 a 9 C ba[o el punLo de fusln de la paraflna. (34-38) la 1 agua 43
C (hay paraflnas de dlsLlnLo punLo de fusln)
-
asegurarse de q agua esLe llbre de burbu[as ( uso de agua bl-desLllada), cuando suben las burbu[as
esLas quedan deba[o del a muesLra, cuando hay burbu[as el Le[ldo no queda adherldo a la muesLra. Sl
esLe Le[ldo se seca se produclrn agu[eros en la muesLra. ( se rompe el Le[ldo anLes de procesar)
-
el lado brlllanLe debe esLar hacla aba[o, para q no se formen burbu[as. -
ocupar un porLa llmplo para de[ar Le[ldo y oLro para recoger ( llmplo) -
hay q recoger con un barrldo suave en Angulo de 90 -
el Le[ldo debe ser anallzado en el agua ( ver las lmperfecclones del corLe) -
recoger corLe cenLrado con una clnLa y en ngulo recLo, asegurndose de q escurra el agua. -
se recomlenda q el agua esLe llmpla, por q los Lrozos de paraflna hacen q se rompa el Le[ldo o se
desprenda
-
la medlda ldeal de agua es hasLa donde se vea el roLulado en el porLa. -
Lener blen roLulado el porLa -
sacar adecuadamenLe el porLa ob[eLo con las muesLras y de[ar en forma verLlcal 10 mln -
8ARC uL lLC1AClCn
secado no debe superar los 63C -
el secado debe ser al menos 1 hora para asegurar q el corLe no se desprenda. -
el secado en lPC debe ser Loda a noche 24P 37*c ( el secado depende de la LemperaLura ) -
SLCAuC
culdados esLn esLablecldos en el LC 1.1 LC1.2 LC1.3 amblLo 3 LC , amblLo 6 lnS -
(LnCA8CA8nCS uL LA 8LvLnClCn 8LvLn1lvA) hacer una exLensln de garanLla xq la genLe q
callbra debe ser capaclLada.
cada ves q ocupo el equlpo debe quedar llmplo, es a dlarlo.( no llmplar con xllol, dana las plezas de
plsLlco)
-
Llmplar com,pano seco sln pelusas. -
lubrlcar equlpos. -
manLencln una ves al ano. -
CuluAuCS CCn LL MlC8C1CMC
L88C8LS uL CC81L ( mlrando al mlcroscoplo)
araflna arrasLra Le[ldo o corLe muy rapldo q no permlLe la dllaLacln. 8)
Soluclones no Lamponadas -
!"#"$%!&"' -
La forma en la cual el coloranLe se une al Le[ldo son Lodas las formas de unln. no hay nlngun mecanlsmo
de accln dlsLlnLo a esLos excepLo el meLodo de lmpregnacln.
La coloracln es un evenLo qulmlco q esLa medlado por alguna de esLas cuaLro formas de unln.
Ln camblo la lmpregnacln se caracLerlza por ser un meLodo flslco ( e[. nlLraLo de plaLa)
luerzas elecLromagneLlcas -
Lnlaces covalenLes -
uenLes de hldrogeno -
luerzas de van uerWalls -
lC8MAS uL unlCn
una ()*)+,(-).es un evenLo qulmlco medlado por esLas cuaLro formas de unlon.
una -/0+12.,(-).es un meLodo flslco ( como las Llnclones argenLlcas) como el nlLarLode plaLa y sales
meLallcas pesada q se posan sobre los Le[ldos.

Los te[|dos an|ma|es son |nco|oros.
1|nc|on: es la unlon molecular del coloranLe acLlvo con algun componenLe del Le[ldo.
Co|orante: susLancla qulmlca comple[a que conflere color a oLro cuerpo modlflcando qulmlcamenLe su
esLrucLura, lo que slgnlflca su resonancla.
Acldos -
8slcos -
neuLros -
lndlferenLes -
MeLacromaLlcos -
1lpos de coloranLes ue acuerdo a sus propledades qulmlcas
1ICS DL CCLCkAN1LS
naLurales -
ArLlflclales -
Segn or|gen: 1.
'%34$%#56: Los coloranLes se exLraen de clerLas planLas y anlmales.
- Crlgen anlmal:
Carmln: vlene de la cochllla , Llne el g||cogeno, es algo parecldo al AS ( en una Lecnlca q se llama carmln
de besL)
- Crlgen vegeLal:
PemaLoxlllna (es el coloranLe unlversal de los nc|eos y es el mas uLlllzado en la hlsLologla acLual, se exLrae
de un arbol el campeche.
Crcelna (uLlllzado para f|bras e|ast|cas y Lamblen se exLrae de un arbol) Crcelna unaLancer
Azafrn: es un coloranLe que no Llene uLllldad en la Lecnlca hlsLologlca
%$3&7&!&#56: ColoranLes se obLlenen a parLlr de anlllna. 6). 9,*19 0+):;(-:,9 :1 *, ;.-<. :1 ;., =,91 > ;.
?(-:)@ CenerlcamenLe se les conoce como coloranLes derlvados de la anlllna. La anlllna es un compuesLo
lncoloro cuyas modlflcaclones qulmlcas producldas en el anlllo bencenlco le confleren a los compuesLos
nuevos un color deLermlnado. ( benceno un compuesLo lncoloro q Llene una longlLud de onda de 200nm).
son Lodos sales (derlvados de la anlllna) -
DLACULkDC A kCILDADLS UIMICAS
Acldos -
8slcos -
neuLros -
lndlferenLes -
MeLacromaLlco -
*!)*)+,.A19 ?(-:)9B 8s|cos y neutros poseen un componente c|do y uno bs|co. pero solo uno de ellos
se encuenLra acLlvado (para cldo y bslco), en el caso del neuLro, ambos grupos se encuenLran acLlvados.
*La Llncln con coloranLes lndlferenLes es una Llncln flslca, uLlllzada prlnclpalmenLe en la ldenLlflcacln de
llpldos.
C(-:)9: !roducto de la unin de un cromgeno de baja intensidad dbilmente bsico al que se le
aaden grupos auxocromos fuertemente acido lo que le dan dicho carcter al colorante tie
estructuras bsicas celulares en el citoplasma celula.
sal: bse |nco|ora y e| componente c|do t|ene co|or ( es act|vo) -
()*)+,.A1 (-A)0*,9/?A-() -
carga .12,A-D, EFGB -
coloranLe anlnlco. -
Las susLanclas que aLraen elecLrlcamenLe a los coloranLes cldos se denomlnan acldfllos. -
*L[: Loslna, lucslna clda, Ac. lcrlco, Crange C, safradlna , crlsLal vloleLa.
H?9-()9I Asociacin de un cromgeno de baja intensidad y de carcter dbilmente cido al que se
le aade grupos auxocromos catinicos fuertemente bsicos que son los responsables de la
carga global del colorante por eso se utilizan para teir estructuras cidas.
Sal: base es co|oreada y su porc|n c|da es |nco|ora. -
ColoranLe .;(*1,+ , aflnldad por cldos nuclelcos (unA, 8nA) -
$1,((-).,. (). *)9 2+;0)9 J)9J,A) :1 *)9 ?(-:)9 .;(*1-()9. -
carga 0)9-A-D, EKG -
coloranLe caLlnlco. -
*L[: Azul de meLlleno o clorhldraLo de azul de meLlleno, que debe su propledad coloranLe a la base azul de
meLlleno y no al PC, que es lncoloro.
*CLros e[. es la |aca de nematox|||na (que es |evemente ac|do pero e| mord|ente |e da |a caracter|st|ca
bs|ca), 1lonlna, Azul de 1oluldlna, lucslna bslca.
Colorantes Neutros: unin colorante cido y bsico para formar un precipitado comnmente
insoluble en agua y muy estable en disolucin alcohlica de esta forma siendo su carga floral
neutra conservan en parte la propiedad de colorear conjunta o separadamente diferentes
estructuras dependiendo de que sean o no capaces de atrapar algunos iones generando cuando
la sal se disocia tras ser inestabilizada al colocarla en disolucin acuosa. Ejemplo Giemsa.
Sal parte bs|ca como |a c|da proporc|onan co|or. -
1lne slmulLneamenLe los componenLes nucleares y a los clLoplasmLlcos. -
Son coloranLes excluslvamenLe uLlllzados para hemaLalogla -
Ll "#$#%&'() ')+(%# (,)') +'& -&%(,"+$&%,.&. / )0 1+) 0#' /1L(*,9 :1 ()*)+,.A19@ -
preparar en eLanol. -
*L[: LoslnaLo de azul de meLlleno (WrlghL, May Crunwald glemsa, glemsa, papenhem) -
glemsa = azul A + azul 8 + eoslnaLo de sodlo enLonces los paLologos lo ven como solo un coloranLe que Llne
de dlsLlnLos colores.
-
Colorantes Indiferentes: En condiciones normales colorean los tejidos por un mecanismo de
impregnacin fsica no poseen carcter cido, bsico o salino definido por ejemplo la tincin
argntica.
!)/0;19A)9 .) -<.-()9 -.(,0,(19 :1 *, :-9)(-,(-<. 1*1(A+)*MA-(,B .) J)+/,. 9,*19 -
no Llene aflnldad por nlnguna esLrucLura del Le[ldo. (no es lonlco) -
Mecanlsmo A-.(-<. /?9 =-1. JM9-()B .) N;M/-()@ -
0+10,+, 1. ,*()O)* :1 PQR E9)*D1.A1GB 9). -.9)*;=*19 1. ,2;,@ -
Se dlsuelven me[or en llpldos que en el solvenLe !Llpoflllco (coloranLe por solubllldad dlferenclal !
mecanlsmo flslco de Llnclon).
-
A-1.1 ,J-.-:,: 0)+ 1* *-0-:) E*-0)J-*-()9) , hldrfobos y no Llene nlnguna poslbllldad de dlsolverse en el
agua. LnLonces hay que probar con dlsLlnLas graduaclones de alcoholes e[, el CP de 93 se dlsuelven los
coloranLes pero dlsuelve el llpldo, en camblo el CP de 70 es un buen solvenLe de los coloranLes, y cuando
se han dlsuelLo y esLan en conLacLo con un Le[ldo graso, va haber una compeLencla enLre el CP de 70 y la
grasa y el co|orante se depos|ta con mayor fac|||dad en |a grasa. Ls una Llnclon fea pero basLanLe eflclenLe,
porque donde uno qulera enconLrar grasa se va Lenlr negro.
-
S3-T1. 9;9A,.(-,9 N;1 A-1.1. ;. 0):1+ :-9)*D1.A1 9;01+-)+ ,* :1* *MN;-:) N;1 O, 91+D-:) 0,+, 0+10,+,+ *,
9)*;(-<. ()*)+,.A1@ 3-T1. 0)+ 9)*;=-*-:,: :-J1+1.(-,* E /,9 9)*;=*1 1. 1* 9)*;A) N 1. 1* 9)*D1.A1G@
*L[: Sudan negro, Sudan lll y lv
La lmporLancla de ldenLlflcar llpldos en el Le[ldo se da en la blopsla muscular (musculo no se conLrae en
presencla de llpldos. Se anallza sl esLe conserva gllcgeno) y en la blopsla cerebral (esLa se da en casos de
auLopsla)!8lopslas en corLes congelados excluslvamenLe.
-
Se usan en corLes congelados.
Colorantes Metacromticos: en condiciones normales la mayor parte de los colorantes tien los
tejidos con un color parecido a l, esta propiedad es la ORTOCROMASIA, sin embargo cuando se
utilizan ciertos colorantes bsicos derivado de la anilina algunas estructuras titulares se tien con
tonos diferentes al que cabria esperar por el colorante usado. Por ejemplo los grnulos de los
mastocitos presentan color rojo con el azul de metileno o el azul de toluidina, este efecto es la
METACROMASIA y estructuras teidas LA CROMOTROPAS, los colorantes metacromticos
son sustancias qumicamente puras y no de carcter salino. La explicacin se cree que se
debe a que se produce una polimerizacin entre las molculas de colorante adyacente a las
estructuras a teir. Existen estructuras como son por ejemplo glcidos complejos o cartlago que
se observan mejor con estos colorantes metacromticos.
CLASIIICACICN
Crtocromac|a: Le[ldo adqulere una coloracln lgual a la de la solucln empleada.
Metacromac|a: Son co|orantes 8ASICCS (qu|m|camente sustanc|as puras)
un componenLe del Le[ldo se Llne con un color dlferenLe al color empleado.
Lodos son baslcos -
ollmerlza y dependen del Le[ldo ya q esLe Llene q Lener moleculas anlonlcas. -
no Lodos los coloranLes baslcos son meLacromaLlcos -
Son Llonlna , azul de Loluldlna, azul de meLlleno -
LxlsLe meLacromacla de dlsLlnLos Llpos son 3 (depende del poll anln q esLe en el Le[ldo) 1)
Alfa --> C4 ( fosfaLo) ---> azul . A)
8eLa--> CCCP ( carboxllo) ---> vloleLa 8)
Cama --> SC2 , SC3 ( sulfaLo) ---> ro[o C)
son 6 los poll anlones'?
ANIC1LkCS: no son coloranLes neuLros son coloranLes meLacromaLlcos como el azul de
meLlleno.(baslcos).
ML1CDCS DL CCLCkACICN UIMICCS
D|rectos: aflnldad dlrecLa x el Le[ldo (eoslna) x el clLoplasma del Le[ldo (elecLroesLaLlca)
Ind|rectos: 8equlere de lnLermedlarlos (mordlenLe) para que la coloracln Lenga lugar (el mas comun la
hemaLoxlllna) C.l 73290
5UI V1/,A)W-*-.,@
por sl sola no Llne, es un coloranLe lnacLlvo, hay que oxldarlo para que Llna y un mordlenLe para que se una
al Le[ldo. ( cada ves que se qulera me[orar la Llncln y el brlllo se apllca un mordlenLe).
Co|orac|nS
nematox|||na CI: 7S290
Se procede a Lenlr con hemaLoxlllna duranLe 7 mln (esLe Llempo es relaLlvo ya que depende del esLado de
la hemaLoxlllna) por sl sola la hemaLoxlllna no Llne, slendo la hemaLelna una hemaLoxlllna madurada por
oxldacln con oxldo ro[o de mercurlo, yodaLo de sodlo u oLro meLodo de oxldacln, naLural o qulmlco. LsLa
hemaLelna Llene que ser acompanada de un mordlenLe, el mordlenLe es el que se une al Le[ldo
corresponde a una sal meLllca bl o LrlbalenLe que le permlLe al coloranLe unlrse al Le[ldo con ms de un
enlace. LsLe es sulfaLo de k y Al (en Px de Parrls), formando asl una laca.
PemaLoxlllna oxldada ( PemaLelna + mordenLada (Al o caLlon)) ( quelaLo + Le[ldo ) = laca
mordlenLe: 4. -<. /1A?*-() 0)*-D,*1.A1 N;1 J)+/, ()/0*1U)9 :1 ())+:-.,(-<. (). (-1+A)9 A-.A19@
CuelaLo: Un complejo de coordinacin formado entre un in (cation) de metal polivalente y ciertos tintes.
este es soluble en agua si tiene una valencia de 3 (unido a 3 hemateinas y esta estabilizado)
HM+ cation + tejido = laca
D|ferenc|ac|n
Se reallza con Alcohol cldo CP-Cl2 solo un dlpplng ya que esLe Llende a sacar mucho el coloranLe, esLo es
una exLraccln selecLlva de el exceso de coloranLe, por lo general 0,3 - cldo clorhldrlco 1 en eLanol al
70 (alcohol de cldo esLndar).
Sl es suflclenLe observaremos el (nucleo celular) ya q es esLe el ob[eLlvo, y no Lenlr Loda la muesLra de
hemaLoxlllna, sl nos excedemos lavamos con agua corrlenLe, luego desLllada y LraLaremos de re-Lenlr. ?
conLlnuamos con la Lecnlca.
Azu|am|ento
Cuando se apllca a parLlr de un medlo cldo, como la mayorla de hemaLoxlllnas esLas son, el color lnlclal
ro[o ladrlllo. LsLe color no es permanenLe y se debe camblar a azul. La fase ro[a de alumbre-hemaLelna es
soluble, y se fllLrar lenLamenLe de las esLrucLuras en cualquler medlo, lncluso ba[o el cubreob[eLos. La fase
azul es lnsoluble y generalmenLe se consldera que es permanenLe
Ll camblo se reallza alLerando el pP. Ls hablLual colocar las secclones Lenldas y dlferenclados en un medlo
alcallno por un par de mlnuLos para converLlr la mancha, a conLlnuacln, a lavar con agua para ellmlnar
Lodo lo que se uLlllza para modlflcar el pP.
Ll medlo ms slmple es agregar unas goLas de amonlaco slldo con un poco de agua hasLa que Lenga un pP
de aproxlmadamenLe 9 a 10, a conLlnuacln, colocar las secclones en ella hasLa que esLen unlformemenLe
azul. CLros agenLes azulado son adecuados son la solucln 0,1-1 de carbonaLo de llLlo, aceLaLo de sodlo al
0,3, 2 de blcarbonaLo de sodlo o una solucln ms comple[a, como susLlLuLo del agua del grlfo.
Ln el caso del laboraLorlo usaremos borax o Lamblen llamado boraLo de sodlo duranLe (30 segundos).
uespues de azular pasamos por agua desLllada conLlnuando con la eoslna.
rogres|vos: cuando la solucln de Llncln se le de[a acLuar lenLamenLe hasLa alcanzar el efecLo deseado.
Se hace acLuar al "#$#%&'() 2&0(& 1+) $$)3+) & 0+ -+'(# #-(,4#5 esLe lo deLermlna el usuarlo. -
Se recomlenda para Le[ldos muy celulares, amlgdalas, gangllos (se debe conocer el Llempo opLlmo del
coloranLe).
-
el problema es q es una Llnclon demaclado varlable -
caracter corto 1 m|n -
kegres|vo: Se reallza una sobrecoloracln y luego se ellmlna el resLo del coloranLe por medlo de
.,6)%)'",&.#%)0 (ellmlna coloracln especlflcamenLe).
se ocupa mas en ellaboraLorlo -
Aqul se sobreLlne el Le[ldo y despues se dlferencla, aqul se exLrae selecLlvamenLe el exceso, e[emplo sl
Lenlmos por 10 mlnuLos en hemaLoxlllna, sacamos y lavamos en agua desLllada, veremos Lenldos los
nucleos las flbras elsLlcas, algunas membranas basales debll, Llncln clLoplasmLlca Lamblen debll, flbras
musculares y colgenos muy deblles como celesLe, lo que se hace como vamos a apllcar un segundo
coloranLe, neceslLamos sacar el exceso de coloranLe selecLlvamenLe sln qulLar la Llncln del nucleo, por lo
que se usa un reacLlvo, que es la comblnacln de acldo clorhldrlco 1 con alcohol de 70 , que nos
permlLe medlanLe un solo paso sacar el exceso y luego al lavar en agua va a quedar blanco Lodo lo que no
sea nucleo = Llncln regreslva concepLo muy lmporLanLe, esLe proceso nos permlLe volver aLrs y recuperar
la Llncln en caso de que se me haya olvldado sacar las placas en hemaLoxlllna. 1amblen es uLll cuando no
hay mas Le[ldo y neceslLo hacer una Llncln especlal, enLonces Lomo una placa que esLa Lenlda con P/L y la
blanqueo para hacer la nueva Llncln.
-
La eoslna se va con el alcohol de 93 enLre 10 a 13 mlnuLos. ara desLenlr una placa con P/L hago Lodo el
proceso lnverso, e[ para desmonLar de[o la placa en xllol, luego hldraLar empezando con alcohol de 100.
Ls esLe meLodo que se usa Lamblen para Lenlr una muesLra endoscplca anLes de la lnclusln, con el
ob[eLlvo de dlferenclarla, se qulLa luego con alcohol y no lnLerflere con la posLerlor Llncln solo que se de[a
por menos Llempo en la eoslna
S|mp|e: Se uLlllza solo un coloranLe para Lenlr algun componenLe celular o Llsular.
Comb|nado: compuesLa o comblnada: Apllcacln de varlos coloranLes con la flnalldad de desLacar,
medlanLe dlferenLes colores, esLrucLuras especlflcas.
7& "#$#%&",8' "#4-+)0(& -+).) 0)% 9,4+$(:')& # 9+")0,;&< !#% )=)4-$# $& >?
- 6-/;*A?.1,: Se produce cuando en una mlsma solucln de coloracln se 4)@"$&' ;&%,#0 "#$#%&'()0
(Lodos los cldos funclonan de esLa manera).NC SCN NLU1kCS ( un so|o bao var|os co|rantes)
Son dlsLlnLos coloranLes en un solo bano, generando una Llncln varlada. Ln Lrlcromlcos podemos usar
glemsa scarleLL con fucslna aclda= 2 cloranLes acldos dlsLlnLos. C!C en Lrlcromlcos como veremos mas
adelanLe sl hay mezclas pero son neuLras. ( e[emplo de slmulLanea ponceau) ( las celulas superflclales
lnLermedlas de cuello uLerlno son orageoflllcas), Llnen de dlsLlnLos colores dlsLlnLos eLsLraLos del eplLello.
Suces|va: ConslsLe en apllcar a los Le[ldos soluclones suceslvas de varlos coloranLes, con la flnalldad
que clerLos componenLes se Llnan con algunos de ellos.
-
anopt|co: Coloracln comblnada con coloranLes neuLros acLuando suceslvamenLe, son ;&%,#0 A&B#0
suceslvos.( co|orantes neutros)
ancrom|ca: uLlllza solo coloranLes neuLros en un solo bano, e[emplo el Clemsa, se usa para Le[ldo
hemaLopoyeLlco, paraslLos y mlcroorganlsmos en general, se pone 30 mlnuLos en el bano, se lava, se pasa
por alcoholes, se monLa y llsLo.
GILMSA
CrLocromaLlco : nucleo Azul
MeLacromaLlco: prolongaclon de las esLrucLuras hemaLologlcas.
Sl la mezcla no Llene eoslnaLo y meLanol, la mezcla no saldra como lo esperamos -
Son esLos 2 requlslLos
LoslnaLo de sodlo -
MeLanol -
A8LnuL8SL : progreslva, regreslva, pancromlca y panpLlca.
1eorlas de la coloracln.
A los radicales qumicos responsables de la modificacin molecular a la que se debe la aparicin
del color se le llama grupo cromforo y se denomina cromgeno al conjunto formado por el grupo
cromforo y el anillo bencnico. Cromgeno no es sinnimo de colorante ya que el cromgeno no
siempre tiene apetencia por el tejido o no se une fuertemente al tejido.
Etileno --------------------------------------- (>C=C<)
Carbonilo --------------------------------------- (>C=O)
Tiazlico --------------------------------------- (>C=S)
Imino --------------------------------------- (>C=N)
Azoico --------------------------------------- (-N=N-) Orange G; rojo congo; sudanes; ponceau S
Nitroso --------------------------------------- (-N=O)
Nitro --------------------------------------- (-NO)
La conversin del cromgeno en colorante est vinculada a la adiccin sobre la molcula
cromtica de otros grupos atmicos que la confieren o le dan la oportunidad de disociarse
electrolticamente o de formar sales con los diferentes tejidos. Estos radicales se los denomina
grupos auxocrmos o potenciadotes del color. Generalmente tienen carga elctrica es decir posee
carcter cido o bsico y son los responsables de que el colorante tenga mayor o menor afinidad
por la estructura que va a teir.
Clasificacin de los colorantes segn los Grupos Cromforos. -
Los grupos auxocrmos de importancia son: el grupo hidroxilo, carboxilo, amino, sulfidrilo y
determinados iones derivados del Fe, Cr, Al y del Mb.
En funcin del grupo cromgeno que contienen. Existen 8 grupos de colorantes:
Nitrocolor
ante
Colorante
azoico
Antraquin
ona
Acridina
Oxacina Azu| de n||o Tiacina Azur A, azur 8, Azu| de met||eno, t|on|na ,
azu| de to|u|d|na
Acina D|fen||metanos, ro[o neutro,
safran|na
Trienal
metano
Iucs|na ac|da, fucs|na bas|ca ( rosan|||n),
Cr|sta| v|o|eta,
Xianteno Ftalocianina
de Cobre
Clasificacin de los colorantes segn los Grupos Auxocrmos y Apetencia Tisular. -
El cdigo -numrico nos remite a lo que se denomina C.I. que es el ndice Calorimtrico del
colorante que nos sirve para identificarlo y lleva 5 dgitos.
Cinco grupos fundamentales:
1) Colorantes Bsicos: asociacin de un cromgeno de baja intensidad y de carcter
dbilmente cido al que se le aade grupos auxocromos catinicos fuertemente bsicos que son
los responsables de la carga global del colorante por eso se utilizan para teir estructuras cidas.
Ejemplo: laca de hematoxilina - colorante nuclear.
Fucsina bsica
Galocianina
2) Colorantes cidos: productos de la unin de un cromgeno de baja intensidad dbilmente
bsico al que se le aaden grupos auxocromos fuertemente acido lo que le dan dicho carcter al
colorante tie estructuras bsicas celulares en el citoplasma celular: Eosina-C. Citoplasmtica /
Fucsina-cida.
3) Colorantes Neutros: unin colorante cido y bsico para formar un precipitado comnmente
insoluble en agua y muy estable en disolucin alcohlica de esta forma siendo su carga floral
neutra conservan en parte la propiedad de colorear conjunta o separadamente diferentes
estructuras dependiendo de que sean o no capaces de atrapar algunos iones generando cuando
la sal se disocia tras ser inestabilizada al colocarla en disolucin acuosa. Ejemplo Giemsa.
Las estructuras as coloreadas adquieren una tonalidad policroma = multicolor.
4) Colorantes Indiferentes: En condiciones normales colorean los tejidos por un mecanismo de
impregnacin fsica no poseen carcter cido, bsico o salino definido por ejemplo la tincin
argntica.
5) Colorantes Metacromticos: en condiciones normales la mayor parte de los colorantes tien
los tejidos con un color parecido a l, esta propiedad es la ORTOCROMASIA, sin embargo
cuando se utilizan ciertos colorantes bsicos derivado de la anilina algunas estructuras titulares se
tien con tonos diferentes al que cabria esperar por el colorante usado. Por ejemplo los grnulos
de los mastocitos presentan color rojo con el azul de metileno o el azul de toluidina, este efecto es
la METACROMASIA y estructuras teidas LA CROMOTROPAS, los colorantes metacromticos
son sustancias qumicamente puras y no de carcter salino. La explicacin se cree que se debe a
que se produce una polimerizacin entre las molculas de colorante adyacente a las estructuras a
teir. Existen estructuras como son por ejemplo glcidos complejos o cartlago que se observan
mejor con estos colorantes metacromticos.
Teora del Proceso de Coloracin o Mecanismos de Coloracin -
Los mtodos de tincin se fundamentan en una serie de procesos fisicoqumicos complicados que
venan segn los colorantes algunos son todava desconocidos no se sabe si la coloracin se
efecta por procesos fsicos o qumicos. Aunque ambas teoras intervienen y adems se produce
una serie de procesos complicados que entran en el campo de la fsico-qumica (aunque el
proceso de coloracin la
- M. Fsicos: ligados a las propiedades de disolucin e impregnacin del colorante sobre el tejido,
el colorante es ms soluble en el tejido que en el disolvente que acta como medio de transporte,
suele ser agua, un ejemplo: la tincin para grasas, en esta el colorante se disuelve mas fcil en
los lpidos titulares que en la solucin alcohlica siguiendo reglas de la difusin para el colorante
de la solucin colorante a las estructuras de su predileccin tambin el proceso de impregnacin
se basa en m. Fsicos en este caso el colorante tiene un gran volumen molecular o bien se hace
una precipitacin selectiva en forma de agregados insolubles de manera que el colorante queda
atrapado entre la mellad e clulas y fibras que constituyen los tejidos.
- M. Qumicos: La reaccin entre colorante y tejido ocurre por procesos qumicos bien definidos
de manera que al interaccionar se produce un nuevo cromgeno responsable del color obtenido,
los procedimientos que se fundamentan en este mecanismo. Se agrupan en el campo de la
histotecnologa que estudia la estructura qumica y la composicin de los tejidos mediante
reacciones qumicas especificas para la localizacin microscpica de determinadas sustancias.
- M. Fsico-Qumicos: Se basa en la formacin de uniones intermoleculares por atraccin
electrosttica (cargas diferentes) de manera que el colorante cido tiene estructuras bsicas y
viceversa.
VOCABULARIO EN LAS TENICAS DE COLORACIN:
Coloracin progresiva: en ella se deja actuar el colorante hasta que la coloracin alcanza la
intensidad deseada, se lleva el control exacto de los tiempos y el punto exacto se controla con el
microscopio.
Coloracin regresiva: en ella una se sobrecolorea y luego se elimina el exceso de colorante, a
ste ltimo proceso se le llama diferenciacin que se puede hacer con agua, con cidos, alcohol,
bases o con soluciones metlicas.
Coloracin Terminal: Colorea estructuras cuya intensidad es independiente del tiempo que
acta el colorante.
Impregnacin: en ella se utilizan sales metlicas como cloruro de oro, nitrato de plata y se
origina precipitados metlicos en las estructuras.
Coloracin en Bloque: en ella las piezas se tien, se incluyen, se cortan tal cual.
Coloracin directa: el colorante tie por el mismo, necesita mordiente.
Coloracin indirecta: el colorante no tie por si mismo sino que hay que tratar con un mordiente
Coloracin Topogrfica: es aquella que proporciona una visin de conjunto, de manera que se
pueden separar todos los componentes arquitecturales.
Coloracin estructural: nos sirve para resaltar ciertas estructuras titulares. Ejemplo: ncleos,
fibras elsticas
CulmlcamenLe los coloranLes se componen de dos elemenLos, uno es e| cromoforo y otro es e| an|||o
bencen|co, sl nosoLro enconLamos una esLrucLura q Lenga un doble enlace enLre los bencenos, -n=n-
LsLamos en presencl ade un coloranLe azo|co.
L[: Ln este caso es D|- azo|co -N=N-
ero deacuerdo a| auxocromo
Cromoforo:
uado que, por deflnlcln, coloranLes son compuesLos aromLlcos su esLrucLura lncluye anlllos de arllo que
han deslocallzado slsLemas de elecLrones. LsLos son responsables de la absorcln de radlacln
elecLromagneLlca de longlLudes de onda varlables, dependlendo de la energla de las nubes de elecLrones.
or esLa razn, los cromforos no hacen LlnLes de color en el senLldo de que les confleren la capacldad de
absorber la radlacln. Ms blen, cromforos func|n med|ante |a a|terac|n de |a energ|a en |a .;=1 :1
1*1(A+).19 :19*)(,*-L,:,de| co|orante, y esta a|terac|n resu|ta en que e| compuesto absorba |a
rad|ac|n dentro de |a gama v|s|b|e en |ugar de fuera de e||a. nuesLros o[os deLecLan que la absorcln, y
responden a la falLa de una compleLa gama de longlLudes de onda por ver el color.
Auxocromo:
Ls el componenLe q hace q el anlllo bencenlco recclone con el Le[ldo. Corresponden a |os aux|||ares de|
co|or, q estan en cond|c|ones de reacc|onar.
keacc|onan con |as fuerzas e|ectroestt|cas q son |as q mas actuan.
-nP 3 (+) -CCCP (-) -PSC 3 (-) -CP (-) Ll SP valencla +1 o -1
Amlno Carboxllo Sulfonlco Pldroxllo Ln algunos casos
-Cl2 - 8r
LsLa esLrucLura cuando no hay mordlenLe o sl ( quelaLo) es q hay cumple la funclon de unlrse al Le[ldo.
nay axocromos de 2 t|pos
Acldos -
8aslcos -
Sl se une a una esLrucLura x medlo de un axocromo dlremos q es
Axocromo baslco Llpo azo -n=n- Ll caso de ( ro[o congo) hay q ver la valencla de 8 .. .. .. .. 2 x cara
Cromogeno
Ls cuando no exlsLe auxocromo en la esLrucLura bencenlca ( 2 muy lmporLanLes)
Au8 ( dlamlno bencldlna) coloranLe Llpo cromogeno con anlllo pero sln auxocromo, no se puede unlr s
nada, la unlca manera es reduclendose, solo por redlpucclon cambla de color, PlC uA8 se reduce y Llne de
cafe Lodas las esLrucLuras.
-
CkCMC1kCC
Ls el susLraLo de los coloranLes meLacromaLlcos, sl vlramos y se Llne se dlce q ese es su cromoLropo.
Clemsa -
Azul Loluldlna -
MeLacromaLlcas baslcas -
Shlf Cuando acLua solo sobre los aldehldos ( Lodos los hldroxllos Lenemos q pasarlos a aldehldo) -
ALp asa -
ClLocromo oxldasa -
Amllasa sallbal -
LZ -
Sustanc|as cromotropas son |as q se t|en con mucosustanc|as .??!?. Duda preguntar a| profe
42320 , fucslna baslca ( rosanllln) lucslna baslca es una mezla
Cada ves q uno ve e| te[|do t|ene q f|[arse en tres cosas |mportantes.
( cons|derac|ones f|s|cas genra|es) |eer y marcar
..
..
Ln|aces con[ugados
enlaces alslados, y exlsLen lndependlenLemenLe de oLros dobles enlaces en la mlsma molecula. S| |os
tomos adyacentes t|enen dob|es en|aces se denom|nan en|aces dob|es con[ugados y los bonos
lnLeracLuar unos con oLros. Conflguraclones cromforo exlsLen a menudo como varlas unldades, despues
de haber con[ugado dobles enlaces, y son ms eflcaces cuando lo hacen. LsLo es debldo a la lnLeraccln
enLre los dobles enlaces, lo que provoca la deslocallzacln parclal de los elecLrones que parLlclpan en los
enlaces.
uependlendo de el Lamano de la parLlcula y su peso molecular q esLa muy relaclonado Lenlremos
dlferenclalmenLe dlsLlnLas esLrucLuras del Le[ldo.
1|nc|on de VAN GILSCN ( tr|crom|co) en e| |ab ocupamos ponseau S y se ocupa fucs|na ac|da.
1lnclon del musculo ( ba[o peso molecular ) acldo plcrlco M : 229,1 gr/mol Cl :10.303 -
onseau S ( alLo peso molecular ) Llne la colagena M: 760,6 Cr/mol Cl : 27.793 -
Ll susLraLo bebe permlLlr la dlfusln por algun espaclo sub mlcroscoplco.
.
Se hace un efecLo bloqueo en la enLrada o el cuello de la porosldad. ColoranLe Llende a colocarse en la
parLe de afura , el coloranLe esLa mas concenLrado afuera. ( la expllcacln de la Llnclon y la sobreLlnclon).
LsLo es lo q ellmlnamos en la dlferenclacln, por eso es Lan pellgrosa.
regunLa
luerza elecLro esLLlca A)
uenLes hldrogeno 8)
Lnlace covalenLe C)
luerzas van der walls u)
MeLodos qulmlcos?
lmpregnacln ( Llnclones argenLlcas) A)
MeLodo flslco
regunLa
ulferencla enLre coloranLe y Llnclon?
1: unlon mol.C.acL.a. Comp.Le[. A)
C: susL,qulm, conf , col, a, oLra
esLrucLura mod. Culm, esLr, y
resonancla.
8)
regunLa
ColoranLe A)
1ermlno cromoforo se asocla mas a?
Acldos A)
MordlenLes 8)
CxldanLes C)
Ll caso de la eoslna no es ulferenclacln ya
q los dlferencladores solo pueden ser ?
Comblnada...slmulLanea o suceslva. A)
CuL 1lC uL 1lnClCn LS LA PL?
regunta
Cual es la dlferencla enLre slmulLaneo y
panopLlco?
SlmulLaneo : acldos por lo
general u oLros, es parLe de una
comblnada.
A)
ancromlco: solo coloranLes
neuLros
8)
8arlos coloranLes en un mlsmo bano
PL A)
1rlcromlcos 8)
van gleson C)
Masson u)
Son slmulLaneos?
Son pancromlcos?
Clemsa ( coloranLes neuLros) A)
regunLa
Secclones gruesas A)
Core sobre agua sucla ( espaclos x
arrasLre Le[ldo)
8)
Llneas nava[a mellada C)
ulsgregacln ( agua muy callenLe) u)
CorLe craquelado ( bloque frlo) L)
8ugosldad ( nava[a no apreLada) l)
llegues ( corLe muy callenLe e[.
uLero)
C)
Lxceslva compresln P)
Sobre exposlcln en floLacln l)
8urbu[as ba[o la seccln !)
resencla de polvo k)
Lrrores mas apreclables en el Le[ldo?
regunLa
PemaLoxlllna A)
Crcelna 8)
Azafran C)
Carmln ( anlmal) u)
Son coloranLes naLurales?
regunLa
Loslna A)
lucslna aclda 8)
Ac. lcrlco C)
Crange C u)
CrlsLal vloleLa L)
Safranlna l)
Son coloranLes acldos?
lucslna baslca A)
PemaLoxlllna ( mordenLado) 8)
1lonlna C)
Azul de Loluldlna u)
azul de meLlleno L)
ColoranLes baslcos
Son coloranLes neuLros ( mezclas)
WrlghL A)
Clemsa 8)
May grun wald glemsa C)
apenhem u)
ColoranLes de hemaLologla
Sudan negro A)
Sudan 3 8)
Sudan 4 C)
lndlferenLes ( no lonlcos, no forman sales,
sln dlsoclacln elecLrollLlca) Soluble solo en
CP
regunta
Sudan negro , 3 y 4 A)
unlco coloranLe q no se puede pasar a lavar
en agua ?
regunLa
Solo puede ser con corLe congelado A)
no lavar en agua sl no q solo
alcoholes
8)
1lne por solubllldad dlferenclal. C)
CaracLerlsLlca de la blopsla en sudan?
regunLa
Loslna A)
Son e[emplos de orLocromacla ( no lmporLa
el orlgen)
es un coloranLe AnC8CMlCC?
A) glemsa
son meLa cromLlcos ( baslcos)?
a) azul Loluldlna
b) Llonlna
c) azul de meLlleno
d) baslcos
Ls una coloraclon lndlferenLe?
a) argenLlcas
b) sudan negro
c) sudan 3 y 4
es coloranLe dlrecLo?
a) eoslna
es coloranLe lndlrecLo (mordlenLe)?
a) hemaLoxlllnas
b) harrls, mayer, hlll, carazzl
c) welgerL, verhoff
color lndlce de la hemaLoxlllna ?
a) 73290
b) Llpo naLural (no hay cromoforos)
oxldanLe de la hemaLoxlllna
A) ox.ro[o de mercurlo
b) nalC3 (yodaLo de sodlo)
mordlenLe de la hemaLoxlllna
A) sulfaLo de alumlnlo (Al2(SO4)3)
8) sulfaLo de le ( FeSO4)
hematoxilinas aluminicas
a) harris
b) mayer
c) carazzi
d) Gill 1,2,3
e)
hematoxilinas ferricas
a) weigert
b) verhoff
c)
d)
Cl fucslna baslca C 8CSAnlLln?
a) 42310 unlco para reacLlvo shlff
para AS Triarylmethane
Cl ac. plcrlco?
a) 10303 (nlLro
Cl fucslna aclda
42685 Triarylmethane
que slgnlflca una valencla 2 ?
mordlenLe unldo a 2 moleculas de
coloranLe (quelaLo)
val 3 lo mlsmo
8LCun1A 8ClL
dlferencla enLre enlace covalenLe
y enlace covalenLe cohordlnado?
a)
laca
A) Pm+ caLlon + Le[ldo
quelaLo
a) PM + caLlon
Llnclon regreslva
a) se usa mas
b) usa dlferenclador
hemaLoxlllna
A) regreslva
b) baslca
c)
PL A)
Son Lecnlcas suceslvas ?
1rlcromlcas A)
onceaus 8)
LA30 C)
Son de carcLer slmulLneo?
panopLlco y pancromlca
(coloranLes neuLros)?
pancromlca 1 bano
a) glemsa
b)m.g.glemsa
c)
panopLlca varlos banos (suseslvos)
a)
8)
c)
A LA30
a) verde luz
b) pardo vlsmark
c) eoslna
coloraclon 9-/;*A,.1,(acldos mezclas)
a) Lrlcromlcos
b)LA30
Clrmsa ( mescla de coloranLes) en neuLro, es pancrom|co
Azur A ( meLacromaLlco) A)
Azur 8 ( meLacromaLlco) 8)
LoslnaLo de sodlo (Acldo) C)
Ls una mezcla q se Lransformo en sal.
La gracla es q azur A y azur 8 son meLacromaLlcos
Suceslva A)
PL LS uL CA8AC1L8 ?
uno neuLro : glemsa A)
CLro acldo: masson , van gleson 8)
SlMuL1AnLC SL CCnlunuL CCM AnC1lCC
regunLa
Clemsa A)
Cue Llnclon ocuparla para un paraclLo y Lamblen
para hemaLologlcas?
Loslna es Llpo f|uorona
PemaLoxlllna natura|
uA8 A)
un Llplco cromogeno
Clemsa A)
MeLacromaLlcos ( baslcos) 8)
1lplco cromoLropo
PemaLoxlllna ?
1amano parLlcula coloranLe M A)
orosldad del susLraLo 8)
LfecLo lnLerfaclal C)
1res conslderaclones flslcas lmporLanLes
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lunes, 19 de mayo de 2014 3:37 p.m.