Dentro de las especies de P.

aeruginosa , cinco variantes distintas de la subunidad

estructural Pila, que varan en secuencia de aminocidos , longitud , y la presencia de
modificaciones posteriores a la traduccin han sido identificados (grupo I a pilinas V ) . Un
trisacrido O- ligado unido covalentemente a travs de la B - . de carbono del residuo de
serina C -terminal se encuentra en el grupo cepa I de P. aeruginosa 1244 pilina el glicano
se identific como un - 5NbOHC47NFmPse - ( 2 -4 ) b - Xyl - (1 - 3 ) - B - FucNAc - ( 1 - .
3 ) - B - Ser y tiene la misma composicin de azcar y secuencia que el antgeno O -
unidad de P. aeruginosa 170046 repetir , una cepa perteneciente al serotipo de LPS O7
Esto sugiere un origen biosinttico comn entre la glicosilacin de pilina y O - la
produccin de antgeno [ 110 ] . la modificacin de glicanos en la pilina de la cepa grupo
IV Pa5196 se determin que era un homooligomer inusual de un - 1 ,5 vinculado -D-
arabinofuranosa ( D - Araf ) O- ligada a residuos de treonina , un azcar que se produce
principalmente en el arabinogalactano pared celular y lipoarabinomannan ( LAM )
polmeros de micobacterias [ 111 ] .

Tipo IVb pili . Tipo IVb pili se encuentra principalmente en las bacterias asociadas a las
infecciones intestinales humanas , por ejemplo, EPEC , ETEC , Salmonella typhi y Vibrio
cholerae. En esta revisin, nos centraremos en el pilus paquete de formacin ( BFP) de
EPEC y la toxina pilus co -regulado (TCP ) de V. cholerae.
Bundle de formacin del pilus ( BFP ) de EPEC . Escherichia coli enteropatgena ( EPEC
) es una causa importante de la diarrea infantil en los pases en desarrollo [ 112 ] .
Adems de pili tipo 1 ( vase ms arriba ) , EPEC llevar a pili de tipo IV conocido como el
paquete de formacin de pili ( BFP) , en reconocimiento a su capacidad para asociarse y
formar agregados cuerda-como entrelazadas . Estas estructuras son mayores de 15 mm
de largo y tienen una localizacin polar en la clula. interacciones entre bacterias
mediadas BFP son responsables de la formacin de tres dimensiones
microcolonias en la superficie de los epitelios [ 113 ] . Esto se ha referido como la
adherencia localizada ( LA) y es un paso importante en la colonizacin. Durante la
adhesin , BFP organizarse en cables de orden superior de dimetro creciente y la fuerza
[ 114 ] . Bundlin es la principal de pilina de BFP y se codifica por el gen bfpA plsmido
transmitidas , que es el primer cistrn de la BFP opern 14 - gen . Tanto la formacin de
cable y la dispersin de los agregados requiere la protena de unin de nucletidos
citoplsmica BfpF [ 114 ] . resultan conflictivos se han propuesto los resultados sobre el
papel de BFP como una adhesin de la clula husped , y varios receptores de BFP
diferentes . Jagannatha et . al [ 115 ] inform de cepas de EPEC que espectculo La
unin a asialo - GM1 , asialo - GM2 , globsido y lacto - N - neotetraosa , basado en el
reconocimiento de GalNac - B - 1 - .. 4 grupos Gal Otros grupos informaron de la
inhibicin de la unin a LA por N - acetil - galactosamina [ 116 ] , N -acetil-lactosamina y
LewisX [ 117 ] Ms recientemente , bundlin recombinante se demostr que inhibir las
clulas LA toHEp - 2 . Bundlin tambin obligado a clulas HEp-2 y , con constantes de
asociacin milimolar , a sinttica N -acetil-lactosamina como se muestra por
espectrometra de masas de ionizacin de nanoelectropulverizacin [ 118 ] . Otro grupo
mostr que purificada BFP era capaz de unirse fosfatidiletanolamina ( PE ) , y que esta
interaccin fue inhibida por anticuerpos contra bundlin [ 119 ] . en contraste , Hicks et al . [
120 ] encontraron que no haba diferencias en la adherencia inicial entre una cepa de tipo
salvaje EPEC y una BFP - mutante . Ellos propusieron que otros factores, como el apego
ntimo a travs de la intimina conduce a la inicial? adhesin y esfacelamiento ? fenotipo ,
mientras que BFP estn involucrados en el reclutamiento de otras bacterias para formar
las micro- colonias tridimensionales.
La estructura de bundlin (BFPA) fue analizado recientemente por RMN y revel una
arquitectura pilina IVb tipo general, en el segmento C- terminal de la formacin de la
cadena central de la b- hoja. Sin embargo, la estructura tambin mostr diferencias
significativas en la composicin y relativa orientacin de los elementos de estructura
secundaria [ 121 ] .
Toxina co - regulados de pilus (TCP) de Vibrio cholerae . V. cholerae es el agente
etiolgico del clera , una diarrea deshidratante devastadora causada por la produccin
de toxinas de bacterias que colonizan la mucosa del intestino factor de colonizacin OFV
intestine.Acritical humana . Cholerae es la toxina pilus (TCP) -co- regulados, como los
mutantes de V. cholerae en TCP deficientes son capaces de colonizar el intestino [ 122 ] .
La estructura de TCP se monta como un homopolmero de repetir subunidades de pilina
TcpA. Al igual que el BFP en EPEC, la PTF son estructuras polares de ms de 15
Longitud mmin que la auto -agregado, con lo que las bacterias juntos en microcolonias. La
estructura primaria de TcpA es altamente conservada entre V. cholerae serogrupos y
biotipos demostrado ser patgenos para los seres humanos, que est en agudo contraste
con la variacin antignica visto en otra pili de tipo IV , tales como los pili de Neisseria.

La estructura cristalina de una forma soluble , monmera de TcpA , sin los hidrfobos N-
terminal de 28 residuos se resolvi a 1,3 ? Resolucin [ 123 ] . En las estructuras de pilina
conocidos PAK andGC , este segmento de forma que sobresale la mitad N-terminal ( ?
Cucharn manejar ? ) de un ahelix extendida . Morfolgicamente , TCP aparece como
largos haces de fibras de pilus asociados lateralmente ms similares a los de la pilus de
formacin de haz ( BFP ) que se encuentra en EPEC . Sin embargo , las subunidades de
monmero ( TCPA y BFPA ) muestran claras diferencias y no se complementan entre s
para el ensamblaje del pilus [ 121 ] . Anlisis de la estructura de TCP por espectrometra
de masas de cambio de hidrgeno / deuterio revel un acondicionamiento hermtico de la
N- terminal de a-hlices de TcpA ( el mango ? cuchara ? ) , pero el embalaje suelto de los
dominios globulares C-terminal . Esto da lugar a importantes lagunas , con segmentos
anfipticos ricas en glicina expuestos en la superficie de pilus [ 124 ] . los autores
propusieron que la estructura explica la extrema flexibilidad de la fibra del pilus y sugiere
una base molecular para la interaccin de pilus - pilus .
Los genes que codifican el TCP de pilina y funciones de la biognesis TCP estn
organizados como un opern situado en la 39 kpb Vibrio isla de patogenicidad ( VPI ) [
125 ] . La adquisicin de VPI por V. cholerae dota al organismo con la capacidad de
expresar TCP, que actos como un receptor para el gen de la toxina del clera llevar
lisognico bacterifago CTXf [ 126 ] . Aunque se ha sugerido que el TCP est involucrado
en la adhesin celular epitelial , no hay receptores especficos han sido identificados y el
mecanismo por el cual TCP media la colonizacin y si TCP o no es el nico factor
necesario para la colonizacin sigue siendo difcil de alcanzar . Estructura y Montaje de
pili de tipo IV . a diferencia de la va ujier acompaante , que se utiliza para el montaje de
tipo I y P pili , el mecanismo de ensamblaje de pilus de tipo IV es slo poco conocido.
Aqu, nosotros usamos la nomenclatura de las protenas componentes de pilus GC / MC (
vase tambin . Fig. 2B ) . individuales subunidades de pilina se sintetizan como
molculas precursoras ( prepilins ) en el citosol y translocados a travs de la membrana
interna por la maquinaria de Sec. seguido por plegado de el dominio globular y la
introduccin de la estabilizacin de los enlaces disulfuro intramoleculares por una enzima
oxidorreductasa ( DsbA ) [ 127 ] . la secuencia lder N - terminal es entonces cortada por
una peptidasa prepilin dedicado ( PILD ) , que tambin aade un grupo metilo a la N -
amina terminal [ 128 ] .
El ensamblaje del pilus se produce a partir de una plataforma molecular y requiere la
hidrlisis de ATP . La plataforma consta de una protena de membrana interior ( PILG ) y
un conjunto de ATPasa ( PilB ) . Anlisis de N. meningitidis recombinante PILG por
microscopa electrnica revel que PILG existe como un tetrmero con un estructura
bilobulado asimtrica que permite el contacto con las protenas tanto citoslicas y
periplsmicos [ 129 ] . PilB es una ATPasa hexameric que se reclut al lbulo citoslico de
la protena transmembrana interior PILG por una protena de membrana pili [ 130 ] .
Retractile tambin requieren una retraccin ATPasa ( PILT ) para una rpida
despolimerizacin del filamento , lo que confiere crispar la motilidad y permite que las
bacterias se mueven a lo largo de las superficies semi - slidos , para la transduccin de
fagos y tomar upDNA ( revisado en [ 131 ] ) . Ambas ATPasas pertenecen al tipo II / IV
secrecin NTPase superfamilia . El reciente anlisis estructural de un relatedATPase ,
PILT de Aquifex aeolicus , revel que la movilidad se basa en grandes domainmovements
y sugiere que pueden existir diferentes estados de unin en una sola hexamer PILT y que
los cambios conformacionales en una subunidad podra
. afectar subunidades vecinas [ 132 ] Sobre la base de estos y otros hallazgos , Craig y Li
[ 62 ] han propuesto recientemente un modelo para el ensamblaje del pilus de tipo IV en la
que : a) subunidades de pilina se suspenden en la membrana interna a travs de su
hidrfobo un N-terminal -hlices (regin A1 - N); b ) interacciones complementarias entre
una conservadas con carga negativa de la cadena lateral ( Glu5 en el A1 - Nregion ) y el
residuo N-terminal cargado positivamente , y las interacciones adicionales entre las
regiones discretas de el dominio globular , contribuyen a acoplamiento de las subunidades
de pilina en el crecimiento de la fibra del pilus , c ) el filamento se extruye en el periplasma
debido a la fuerza mecnica generada a partir de un solo evento hidrlisis de ATP , y d )
subunidades de pilina se aaden de uno en uno , pero en tres sitios correspondiente de
forma simultnea a cada hebra de filamentos en el haz de tres hlice.
Por ltimo, la estructura de pilus montado tiene que pasar a travs de la membrana
externa, que se consigue por la secretina de la membrana externa (PilQ), un miembro de
la superfamilia de secretina que tambin se utiliza en sistemas de secrecin de tipo III de
tipo II y en forma filamentosa y la liberacin del fago [133]. PilQ tiene una estructura en
forma de jaula con simetra cudruple, consistente con un dodecmero que comprende un
tetrmero de trmeros PilQ [134]. El complejo PilQ es un canal cerrado que requiere un
cambio conformacional sustancial para permitir que un filamento de pilus intacto pase a
travs.
pili curli
Curli fueron descritos por primera vez en 1989 como fibras enrolladas proteicos que se
encuentran en bacterias entricas tales como E. coli y Salmonella spp. [135]. Se
componen de subunidades repetitivas de la principal csgA de pilina (o curlin) que carece
de homologa estructural a cualquier otro de pilina conocida protena. Curiosamente, curli
compartir algunas propiedades bioqumicas y estructurales con las fibras amiloides
eucariotas se encuentran en algunas enfermedades neurodegenerativas, como el
Alzheimer? s y la enfermedad de Parkinson? s, y en las enfermedades prinicas [136].
Ellos son no ramificacin, hoja b fibras ricos que son resistentes a la digestin de la
proteasa y 1% de dodecilsulfato de sodio (SDS) [137]. Sin embargo, a diferencia de las
fibras amiloides eucariotas, curli son producidos por un proceso altamente regulado y no
todas las cepas de E. coli que codifican la subunidad estructural puede montarlo en una
fibra [135].
Curli han sido implicados en un nmero de procesos biolgicos, incluyendo la formacin
de biopelculas, la agregacin celular, la adhesin de la clula husped y la invasin, y
como inductores potentes de la anfitrin? S respuesta inflamatoria. Tanto E. coli y
Salmonella spp. Curli son importantes para el desarrollo de biopelculas . Austin et al.
[138] han demostrado que curli permiten Salmonella enteritidis a adherirse a tefln y acero
inoxidable y han sugerido que la persistencia de la bacteria en estas superficies podra
tener implicaciones para la industria alimentaria. bind curli a varias protenas del husped,
pero su papel en la patognesis no est del todo claro, ya que se cree que el conjunto de
curli se produce preferentemente a temperaturas inferiores a 308C [135]. sin embargo, la
expresin curli a 378C tambin se ha informado [139].
Se unen de Curli a la fibronectina protena de la matriz extracelular [ 135 ] , lo que podra
ayudar en la colonizacin de acogida . De unin a plasmingeno y activador del
plasmingeno de tipo tisular (t - PA ) simultnea , lo que resulta en la conversin de
plasmingeno en la plasmina activa , tambin se ha reportado . Plasmina es un
anticoagulante que degrada la fibrina en la formacin de cogulos de sangre , lo que
facilita la propagacin bacteriana . Herwald et al . [ 140 ] informaron de la unin del
fibringeno y las protenas de fase de contacto como Hkininogen , y el factor XII a curli en
la superficie celular bacteriana . como consecuencia , la va proinflamatoria se activa a
travs de la liberacin de bradiquinina , un potente inductor de la fiebre , dolor e
hipotensin . la absorcin de estas protenas por protenas de superficie bacterianas
agota los factores de coagulacin pertinentes , lo que resulta en retraso en la coagulacin
de la sangre , facilitando la propagacin bacteriana . los autores sugirieron que el
interaccin de las protenas de la superficie de microbios y los factores de contacto de la
fase de acogida puede contribuir a los sntomas de la sepsis y el shock sptico. Curli
tambin se han caracterizado como patrones moleculares asociados a patgenos ( PAMP
) que son reconocidos por toll-like receptor 2 ( TLR2 ) , lo que resulta en la activacin de la
respuesta inmune innata por la estimulacin de IL- 8 expresin [ 141 ] . Curli se
ensamblan a travs de la va de precipitacin modelo de nucleacin [ 142 ] . En este
modelo , csgA solubles ( curlin ) y CSGB son secretadas en el medio extracelular con la
ayuda de una lipoprotena de membrana externa, CsgG . Este proceso tambin requiere
de dos protenas accesorias , CSGE y CSGF , que tanto interactuar con CsgG y facilitar la
secrecin CSGA y montaje. Fuera de la celda, CSGA se nuclea en una fibra por CSGB .
Familia pilus CS1
CS1 pili son el prototipo de una familia de los pili serolgicamente distinta asociada con E.
coli enterotoxignica ( ETEC ) , que tambin incluye CFA / I , CS2 , CS4 , CS14 , CS17 y
CS19 ( revisado en [ 143 ] ) y, a veces se clasifican como chapern alternativa familia ujier
de pili , Clase 5 o un fimbriae.ETECis amajor causa de enfermedades diarreicas humana
en todo el mundo y es responsable tanto de viajero? s diarrea y mortalidad entre los
lactantes y nios pequeos en los pases en desarrollo [ 144 ] . Slo cuatro estructural y
se requieren protenas de ensamblaje para producir pili totalmente funcional. La principal
pilina 15,2 kDa CS1, COOA , carece de homologa de secuencia significativa con otras
pilinas y tambin carece de residuos de cistena para formar los tpicos puentes disulfuro
intramoleculares que se encuentran en pilinas y pilinas tipo IV en chapern va ujier Pili
montado [ 145 ] . cood es una pilina menor de 38 kDa asociado con la punta del pilus de
CS1 . se ha demostrado que la conversin de alanina de un nico residuo de cood (
Arg181 ), suprimi la hemaglutinacin sin afectar el ensamblaje del pilus , lo que sugiere
que cood podra ser esencial para CS1 - .. mediada por clulas apego acogida [ 146 ] sin
embargo , COOD es tambin necesaria para la morfognesis pilus , como CS1 pili no se
producen en ausencia de COOD [ 147 ] COOB es una protena de 28 kDa y tiene un
papel esencial en el ensamblaje del pilus , aunque no se asocia con la fibra del pilus .
COOB tiene una funcin de tipo chapern a travs del cual se estabiliza COOA , COOC y
cood en el periplasma [ 148 ] . pesar de la falta de homologa entre CS1 y Pili
relacionados con Papanicolaou , sus acciones de montaje comn algunos caractersticas.
CS1 pili se reuni por la chaperona alternativa va ujier ? ? . Sekellaris y Scott [ 143 ] han
propuesto un modelo para el ensamblaje del pilus en la que un complejo COOD - COOB
encuentra un complejo CooCCooB libre en la membrana externa de iniciar el montaje, la
liberacin de la COOB chapern . complejo A CooBCooA desplaza entonces COOD de
COOC sustituirlo por proceso CooA.Arepeated permitira la incorporacin de COOA en la
base de pilus que resulta en la extensin de la estructura de pilus .
Pili en bacterias Gram - positivas
Estructuras de pilus en bacterias Gram - positivas fueron descritos por primera vez en
1968 , cuando un estudio de microscopa electrnica mostr varillas flexibles en la
superficie de Corynebacterium renale [ 149 ] . Desde entonces , los pili se han descubierto
en muchas otras bacterias Gram - positivas , incluyendo Actinomyces , Ruminococcus ,
Enterococcus , Clostridium , y varias especies de Streptococcus ( revisado en [ 150 , 151 ]
. Dos tipos de pili en bacterias Gram - positivas han sido identificados por microscopa
electrnica . , varillas cortas y delgadas que se extienden entre 70 y 500 nm de longitud ,
con dimetros de 1-2 nm se han encontrado en la superficie de Streptococcus salivarius ,
S. gordonii y S. oralis ( Willcox , 1989 ) . Mucho ms flexible de los pili ( 0,3-3 mm ) con un
dimetro de 3-10 nm se han descrito en Corynebacterium spp . y estreptococos
patgenos , tales como S. pneumoniae , S. agalactiae y S. pyogenes . Estos se
componen de mltiples copias de una nica columna vertebral de pilina subunidad que
forma el eje de pilus , junto con las pilinas de accesorios , o protenas de pilus de menor
importancia , que no son necesarios para la integridad pilus , pero podra funcionar como
adhesinas . las primeras ideas sobre el mecanismo de unin de los pili Gram -positivos
fueron proporcionados por Thon- eso y Schneewind trabajando en diphteriae
Corynebacterium [ 152 ] . Ellos demostraron que , a diferencia de Gram - negativo pili , los
principales subunidades de pilus estn conectados covalentemente y la varilla de pilus es
entonces ancladas a la pared de la clula por una enzima sortase ( un transpeptidasa
especializada ) , similar a la de anclaje de la pared celular de las protenas que se refiere
como ? componentes de la superficie microbianos Reconociendo matriz adhesiva
molculas ? ( MSCRAMMs ) ( revisado en [ 153 ]. Una estructura pilus IV Gram -negativas
- como el tipo que confiere la motilidad de deslizamiento tambin se encontr en
Clostridium perfringens [ 64 ] y en Ruminococcus [ 65 ] .