Caracterização de Polimeros Inteligentes para Aplicações Biomedicas

Maria Carolina Morando Costa
MESTRADO INTEGRADO EM ENGENHARIA BIOMDICA

FACULDADE DE CINCIAS E TECNOLOGIA
UNIVERSIDADE DE COIMBRA

Caracterizao de Polmeros Inteligentes para
Aplicaes Biomdicas

Dissertao apresentada Universidade de Coimbra para
cumprimento dos requisitos necessrios obteno do grau de
Mestre em Engenharia Biomdica, realizada sob a orientao do
Professor Doutor Filipe Antunes.

Setembro 2012

Esta cpia da tese fornecida na condio de que quem a
consulta reconhece que os direitos de autor so pertena do
autor da tese e que nenhuma citao ou informao obtida a
partir dela pode ser publicada sem a referncia apropriada.
This copy of the thesis has been supplied on condition that
anyone who consults it is understood to recognize that its
copyright rests with its author and that no quotation from the
thesis and no information derived from it may be published
without proper acknowledgement.
Agradecimentos
No final de mais uma etapa crucial na minha vida, depois de um
percurso com bastantes altos e baixos, esta a prova de mais
uma histria com um final feliz, citando as palavras do
Professor Miguel Morgado, a quem desde j agradeo por todos
os esforos dedicados ao curso de Engenharia Biomdica em
Coimbra e o interesse pelos seus alunos; para alm de professor
revela-se tambm um amigo.

Um Muito Obrigado, ao Professor Doutor Filipe Antunes,
orientador do meu Projeto de Mestrado, pelo crdito e confiana
depositados em mim, pelos sbios conselhos e por me ter dado a
oportunidade de aprender e de trabalhar no seio de um grupo de
excelncia.

Ao Fafe, importante ser e colega no Departamento de Qumica,
agradeo todo o apoio e pacincia que me ajudaram a dar
facilmente os primeiros passos num mundo que j pensava
quase desconhecido.

Agradeo tambm ao Professor Jorge Coelho e Rose Cordeiro, do
Departamento de Engenharia Qumica, pelo seu precioso tempo
e disponibilizao dos polmeros necessrios realizao do
projeto; ao Professor Antnio Ribeiro pela autorizao de uso do
equipamento de DLS existente na Faculdade de Farmcia, e
Ana Cludia, pela disponibilidade e ajuda prestadas na
introduo tcnica.

Reservo agora um espacinho para todos aqueles que foram
importantes ao longo destes anos de faculdade, e os quais no
poderiam passar em branco:

Aos P&T, um grupo de amigos fantstico que nasceu em
Coimbra e sem os quais o meu percurso acadmico no teria tido
metade do interesse. Um grupo cheio de personalidades que em
nada se assemelham e que em conjunto o tornam to especial.
Um obrigado a todos pela amizade, pelo apoio nos momentos
difceis e sobretudo pela presena nos momentos importantes da
minha vida.

Ao Duarte, meu namorado e grande amigo, a quem tive o prazer
de conhecer nesta cidade de encantos, um obrigado pelos
sorrisos partilhados em todas as vitrias e pela mo estendida
nos momentos mais difceis, sem a qual se tornaria difcil por
vezes manter-me de p.

Por fim, agradeo com todo o meu corao minha famlia, cuja
dedicao e apoio foram sempre incondicionais, e sem os quais
no me teria sido permitido chegar at aqui, com toda uma
bagagem de boas experincias que me ajudaram a crescer e a
definir objetivos, fazendo de mim o que sou hoje!

OBRIGADO a todos!

Nas grandes batalhas da vida,
o primeiro passo para a vitria
o desejo de vencer.
Mohandas Ghandi

Resumo
Este trabalho baseado no estudo de polmeros termossensveis
para o seu uso como sensores de temperatura na superfcie da
pele do beb.
De acordo com alguns pediatras, a temperatura da pele do beb
pode variar entre os 35C e os 37,8C. Normalmente, eles
apresentam uma temperatura superior de um adulto, uma vez
que ainda no so capazes de regular bem a temperatura
corporal. importante a monitorizao constante da sua
temperatura e, principalmente, verificar se esta se encontra
acima dos 37,8C. Para este estudo foram escolhidos dois
polmeros que, quando em soluo, respondem dramaticamente
a mudanas de temperatura e, como tal, podem servir como
sensores de temperatura.
Os polmeros exibem uma temperatura crtica denominada LCST
(low critical solution temperature); um aumento de temperatura do
sistema diminui a solubilidade do polmero em gua devido
alterao da polaridade e consequente predominncia das
interaes hidrofbicas. A LCST definida como a temperatura
acima da qual o polmero sofre uma transio de fase de um
estado de completa dissoluo em gua (cadeia linear estendida)
para um estado insolvel em gua (cadeia compactada em forma
de glbulo). Quando a soluo do polmero atinge a LCST
observada uma alterao na turbidez da soluo, devido
agregao polimrica.
Os polmeros tm uma LCST perto dos limites de temperatura
normais do corpo humano. O principal objetivo deslocar essa
temperatura para valores prximos de 38C, por forma a
poderem ser usados como sensores de febre.
Os polmeros usados foram o PNIPAM e o PDMAEMA e o seu
comportamento em soluo aquosa foi caracterizado atravs de
estudos reolgicos, espectroscpicos e de disperso dinmica de
luz (DLS).
Existe uma forte relao entre o tamanho dos agregados,
turbidez e viscosidade das solues. Aumentando a
temperatura, aumenta o tamanho das partculas, devido
formao de agregados, assim como a viscosidade, devido
formao de uma rede tridimensional essencialmente alicerada
por associaes hidrofbicas, e a soluo torna-se turva como
resultado da luz dispersa pelos largos agregados.
O ajuste da LCST dos polmeros em soluo , neste trabalho,
efetuada atravs da adio de co-solventes, sais e surfatantes,
bem como atravs de alteraes de concentrao e peso
molecular.

Abstract
This work is based on the study of thermoresponsive polymers
for their use as thermosensors on baby's skin.
According to some pediatricians the baby skins temperature
could vary from 35C to 37.8C. They are a little warmer than
adults, because they do not regulate their temperature so well. It
is important to constantly monitor their temperature and
particularly to check if the temperature is above 37.8C.
For this study, we chose two polymers that respond
tremendously to temperature changes and that can be used as
thermosensors. They exhibit a LCST (low critical solution
temperature); an increase in temperature decreases the solubility
of the polymer in water due to changes in polarity and
consequently predominating hydrophobic associations. LCST is
defined as the temperature at which the polymer solution
undergoes a phase transition from a completely soluble state in
water (a random coil form) to an insoluble state (collapsed form
of the polymeric chain). When the polymer solution is reaching
the LCST a change in the turbidity of the solution can be
observed, due to polymeric aggregation.
The polymers have their LCST near the limits of a normal
human body temperature and the main aim is to shift these
critical temperatures to around 38C for using them as fever
sensors.
The polymers used in this work were PNIPAM and PDMAEMA,
and their behavior in aqueous solution was mainly driven by
rheological, spectroscopy and dynamic light scattering (DLS)
studies.
There is a strong relationship between particle size, turbidity and
shear viscosity. By heating the systems, the particle size
increases, because of cluster formation, as well as the viscosity
due to the formation of 3D network mainly sustained by
hydrophobic associations, and the solution becomes cloudy as a
result of the scattered light induced by the large aggregates.

In this work, the adjustment of the LCST of the polymers in
solution is made by the addition of co-solvents, salts and
surfactants, as well as changes in concentration and molecular
weight.

Lista de Abreviaturas
CTAB Brometo de Cetiltrimetilamnio
cac Concentrao de agregao crtica
cmc Concentrao micelar crtica
HCl cido clordrico
LCST Temperatura de soluo crtica mnima
LGTT Temperatura de gel crtica mnima
KSCN Tiocianato de potssio
NaOH Hidrxido de sdio
NaCl Cloreto de sdio
PEO Polioxietileno
PNIPAA Poli-N-isopropilacrilamida
PDMAEMA Poli-2-dimetilaminoetil metacrilato
SDS Dodecil Sulfato de Sdio
UCST Temperatura de soluo crtica mxima
UGTT Temperatura de gel crtica mxima

ndice
ndice de Figuras ................................................................................ i
ndice de Tabelas .............................................................................. iii
ndice de Grficos ............................................................................ iv
1. Introduo ...................................................................................... 1
1.1. Polmeros Inteligentes ............................................................3
1.2. Polmeros Termossensveis ....................................................8
1.2.1. Polmeros com comportamento do tipo LCST ............ 10
1.2.2. Poli-N-isopropilacrilamida ........................................... 13
1.2.3. Poli-2-dimetilaminoetil metacrilato ............................. 15
1.2.4. Mecanismos propostos para explicar a transio de
fase ............................................................................................ 17
1.3. Co-solutos que alteram as propriedades dos polmeros ... 21
1.3.1. Sais .................................................................................. 21
1.3.2. Surfatantes ...................................................................... 23
2. Experimental................................................................................ 25
2.1. Materiais ................................................................................ 25
2.2. Tcnicas ................................................................................. 26
2.2.1. Mtodo de preparao das amostras ........................... 27
2.2.2. Espectrofotometria UV-Visvel ..................................... 28
2.2.3. Reologia .......................................................................... 29
2.2.4. Disperso Dinmica da Luz (DLS) ............................... 34
3. Resultados e Discusso ............................................................... 38
3.1. Dependncia da viscosidade Newtoniana em funo da
temperatura ................................................................................. 38
3.1.1. Influncia do peso molecular e concentrao em
soluo ...................................................................................... 43
3.1.2. Influncia do pH do meio ............................................. 48
3.1.3. Influncia da adio de aditivos e co-solventes na
temperatura crtica .................................................................. 50
3.2. Turbidez das solues em funo da temperatura ............ 60
3.3. Dimenso das partculas em funo da temperatura ........ 62
3.4. Propriedades viscoelsticas ................................................. 65
3.5. Reprodutibilidade do sistema PNIPAM-gua ................... 69
4. Concluso ..................................................................................... 70
Referncias ....................................................................................... 73

i

ndice de Figuras
Figura 1. Diagramas de fase de solues polimricas no plano temperatura-
concentrao. a) diagrama do tipo UCST; b) diagrama do tipo LCST.
14
............ 9
Figura 2. Estrutura de polmeros que apresentam LCST. (a) Poli(N-
isopropilacrilamida (PNIPAM); (b) Poli(N,N-dietilacrilamida) (PDEAAm); (c)
Poli(dimetilaminoetil metacrilato) (PDMAEMA); (d) Poli(N-(L)-(1-hidroximetil)
propilmetacrilamida) (PHMPMAA).
3
............................................................. 10
Figura 3. Comportamento termossensvel em soluo aquosa; "Coil-to-gloube
transition". ................................................................................................... 11
Figura 4. Estrutura qumica do poli(N-isopropilacrilamida).
3
.................................. 13
Figura 5. Grupos oxietileno a baixas temperaturas (A) e a altas temperaturas (B).
11
20
Figura 6. Srie de Hofmeister. ................................................................................ 21
Figura 7. Trs interaes bsicas envolvidas no efeito de Hofmeister. (a)
polarizao das molculas de gua que hidratam os grupos amida; (b) a
tenso de superfcie tem efeitos na hidratao hidrofbica das
macromolculas e pode ser modelada pela adio de sais; (c) interao direta
do anio com os grupos amida.
41
.................................................................. 22
Figura 8- Estrutura de um surfatante aninico. ...................................................... 23
Figura 9. Estrutura do modelo pearl-necklace para os complexos polmero-
surfatante.
47
................................................................................................. 24
Figura 10. Esquema ilustrativo da incidncia de luz sobre a amostra. .................... 28
Figura 11. Fluido Newtoniano. Tenso de deformao () em funo da taxa de
deformao (D).
11
......................................................................................... 30
Figura 12. Modelo de duas placas usado por Newton. F- fora (deformao)
aplicada; A-rea das placas; h espao entre as placas e U viscosidade com
que a placa superior se move.
51
.................................................................... 30
Figura 13. Limite do comportamento de fludos Newtonianos.
51
........................... 31
Figura 14. Sistema de cone e prato; o ngulo entre o cone e o prato e r o raio
de ambos.
49
.................................................................................................. 32
ii

Figura 15. Dimetro hidrodinmico.
54
.................................................................... 34
Figura 16. Flutuaes de intensidade ao longo do tempo como resultado da
disperso de luz por parte das partculas contidas na amostra.
59
.................. 35
Figura 17. Soluo de 5wt% de PDMAEMA(11k) a pH=9,1. Dependncia da
viscosidade Newtoniana do em funo da temperatura. Turbidez da soluo
aquosa de PDMAEMA abaixo (A) e acima (B) da LCST. .................................. 39
Figura 18. Soluo de 5wt% de PNIPAM(39k). Dependncia da viscosidade
Newtoniana em funo da temperatura. Turbidez da soluo aquosa de
PNIPAM abaixo (A) e acima (B) da LCST. ....................................................... 40
Figura 19. Ilustrao do comportamento de fase do tipo LCST. .............................. 41
Figura 20. Efeito da qualidade do solvente na configurao do polmero.
51
........... 50
Figura 21. Efeito de vrios lcoois na LCST do PNIPAM.
62
....................................... 53
Figura 22. Ciclos de subida e descida da temperatura usando a mesma soluo de
PNIPAM(20k) de 5wt%. a) e c) representam as subidas e b) e d) representam
as descidas. Os grficos foram obtidos pela ordem alfabtica representada,
com velocidades de aquecimento e arrefecimento iguais (1C/3min). ......... 69

iii

ndice de Tabelas
Tabela 1. Classificao da forma fsica das cadeias polmricas e os diferentes tipos
de resposta.
3,11
................................................................................................ 6
Tabela 2. Pesos moleculares mdios (M
n
) das amostras e respetivos ndices de
polidispersividade(M
w
/M
n
). .......................................................................... 25

iv

ndice de Grficos
Grfico 1. Efeito da variao do peso molecular do PNIPAM (solues de 5wt%).
Dependncia da viscosidade Newtoniana em funo da temperatura (subida
da temperatura). .......................................................................................... 43
Grfico 2. Efeito da variao do peso molecular do PDMAEMA (solues de 5wt%).
da temperatura). .......................................................................................... 43
Grfico 3. Efeito da variao da concentrao de PNIPAM(39k). Dependncia da
viscosidade Newtoniana em funo da temperatura (subida da temperatura).46
Grfico 4. Efeito da variao da concentrao do PDMAEMA(11k). Dependncia da
viscosidade Newtoniana em funo da temperatura (subida da temperatura).47
Grfico 5. Efeito da variao do pH da soluo de PDMAEMA(11k) (solues de
5wt%). Dependncia da viscosidade Newtoniana em funo da temperatura
(subida da temperatura). .............................................................................. 48
Grfico 6. Efeito da variao do pH da soluo de PNIPAM(39k) (solues de
5wt%). Dependncia da viscosidade Newtoniana em funo da temperatura.
(subida da temperatura). .............................................................................. 49
Grfico 7. Efeito da adio de diferentes concentraes de etanol soluo de
PNIPAM(39k) (5wt%). Dependncia da viscosidade Newtoniana em funo da
temperatura (subida da temperatura). ......................................................... 51
PDMAEMA(19k) (5wt%). Dependncia da viscosidade Newtoniana em funo
da temperatura (subida da temperatura). .................................................... 51
Grfico 9. Efeito da adio de 2 sais diferentes soluo de PNIPAM(20k) (5wt%).
da temperatura). .......................................................................................... 54
Grfico 10. Efeito da adio de 2 sais diferentes soluo de PDMAEMA(19k).
da temperatura). .......................................................................................... 55
v

Grfico 11. Efeito da adio de diferentes concentraes de SDS soluo de
temperatura (subida de temperatura). ......................................................... 57
Grfico 12. Efeito da adio de diferentes concentraes de CTAB soluo de
temperatura (subida de temperatura). ......................................................... 58
Grfico 13. Transmitncia das amostras PNIPAM(20k) e PDMAEMA(11k).
Comprimento de onda selecionado: = 450 nm. .......................................... 60
Grfico 14. Variao do dimetro hidrodinmico das partculas (Dh) com o
aumento da temperatura. ............................................................................ 62
Grfico 15. Perfil de viscosidade Newtoniana, dimetro hidrodinmico das
partculas e transmitncia de luz da amostra com o aumento da temperatura
das solues. Solues de 5wt% PNIPAM(20k) para as medidas da
viscosidade Newtoniana e transmitncia de luz e de 1wt% para a obteno
do dimetro hidrodinmico das partculas.................................................... 63
partculas e transmitncia de luz da amostra com o aumento da temperatura
das solues. Solues de 5wt% PDMAEMA(11k) para as medidas da
viscosidade Newtoniana e transmitncia de luz e de 1wt% para a obteno
do dimetro hidrodinmico das partculas.................................................... 64
Grfico 17. Mdulo elstico (G) e viscoso (G) em funo da frequncia para a
soluo de PNIPAM(20k) a: a) 30C(<LCST) e b) 37 C (>LCST). A imagem
mostra uma soluo lquida acima da LCST. .................................................. 65
soluo de PNIPAM(39k) a: a) 30C(<LCST) e b) 35 C (>LCST). A imagem
mostra um gel acima da LCST........................................................................ 66
Grfico 19. Mdulo elstico (G) e viscoso (G) em funo da frequncia para: a)
34C(<LCST) e b) 50C (>LCST). A imagem mostra uma soluo lquida acima
da LCST. ........................................................................................................ 67

vi

1

Captulo 1
1. Introduo
O presente trabalho tem como objetivo o estudo e a
caracterizao de polmeros termossensveis, uma subclasse dos
polmeros inteligentes ou ambientalmente sensveis, para a
sua aplicao como possveis sensores de temperatura corporal
na pele do beb. O sistema pensado faz uso de um simples
mecanismo (mudana de cor), para atender a uma das grandes
preocupaes dos pais, indicando a ultrapassagem do valor
limite de temperatura considerado normal numa criana.
A ideia seria chegar a um produto final capaz de manter a
temperatura corporal da criana sob monitorizao contnua ao
longo do dia, incorporando um acessrio prtico, cmodo e com
algum nvel esttico ajustvel ao pulso. Poder ainda ter uma
segunda funcionalidade, servindo como pulseira de
identificao.
De acordo com alguns pediatras, a temperatura na pele de um
beb pode variar entre os 35C e os 37,8C. importante estar
atento s variaes de temperatura que ocorrem frequentemente
no corpo do beb, uma vez que o mecanismo de regulao
2

trmica, estando ainda em fase de maturao, no atua
corretamente. Um sintoma de febre detetado tardiamente e
atingindo um valor de 38,5C pode dar origem a sintomas como
vmitos e convulses febris.
O foco ser mantido numa possvel temperatura crtica (38C)
superfcie da pele do beb e a partir do qual indicado que este
apresenta sintomas de febre. A temperatura crtica estimada para
a pele do beb corresponder a uma temperatura crtica dos
polmeros em estudo, acima da qual sofrero uma transio de
fase reversvel, visvel a nvel macroscpico. Para alm disso,
importante perceber a relao estrutura-propriedades desta
classe de polmeros em soluo, de modo a ser possvel alterar a
temperatura crtica de forma desejada e obter um sistema
reprodutvel durante uma infinidade de vezes.
Tendo em conta a aplicao final deste trabalho, estaremos
interessados apenas em sistemas com um comportamento do
tipo LCST, temperatura acima da qual a soluo tomar um
aspeto branco opaco.
Atravs de uma cuidadosa seleo de solventes e aditivos ser
estudada a melhor forma de ajustar a temperatura para o valor
desejado.

3

1.1. Polmeros Inteligentes
Podemos afirmar que a vida polimrica na sua essncia se nos
lembrarmos que macromolculas como as protenas, os
polissacardeos e os cidos nuclecos constituem os principais
componentes de uma clula viva.
1,2
Estes biopolmeros tm a
propriedade de adotar conformaes especficas consoante o
ambiente envolvente e formam a base em torno da qual a maior
parte dos processos biolgicos so controlados.
3,4,5
O que torna
alguns biopolmeros particularmente interessantes a sua
sensibilidade na presena ou ausncia de estmulos externos.
Pequenas mudanas ambientais podem provocar uma resposta
dramtica do polmero.
3,5
As suas respostas no lineares so
causadas por interaes altamente cooperativas.
6
A compreenso
do mecanismo dessas interaes nos biopolmeros abriu
caminho para a possibilidade de tentar imitar o seu
comportamento em sistemas sintetizados em laboratrio.
1,2,3

Polmeros sintticos foram desenvolvidos com vrias formas
funcionais para atender a aplicaes industriais e cientficas.
1

Estes polmeros so geralmente solveis em gua, ou solues
aquosas (ex.: fludos biolgicos), e so geralmente conhecidos
como polmeros "inteligentes" dada a sua habilidade de
adaptao sob condies facilmente controladas, semelhana
dos biopolmeros, da a sua crescente atratividade nas reas da
biotecnologia e da medicina.
1,7,6
A sua singularidade reside no
s nas mudanas rpidas que ocorrem a nvel macroscpico na
4

sua estrutura, mas tambm no carcter reversvel dessas mesmas
transies.
2,3,6
A sua classificao feita de acordo com o
estmulo ambiental que induz a resposta (ex.: Termossensveis,
pH-sensveis), e por isso podem tambm ser chamados de
polmeros de "estmulo-resposta" ou polmeros "ambientalmente
sensveis".
1,5
Os estmulos de maior importncia, sob o ponto de
vista biomdico, so o pH e a temperatura.
2,3
O exemplo mais
comum de estmulo trmico a elevao da temperatura
corporal sob condies febris provocadas por pirogneos.
8

Variaes de pH esto presentes no corpo humano, em
diferentes rgos, tecidos e compartimentos celulares, ou at
mesmo reas tumorais. Estas variaes tornam-se bvias no trato
gastrointestinal, onde o pH passa de cido (pH=2), no estmago,
a bsico (pH=5-8), no intestino.
2,3
Sistemas que transitam de fase
sob condies fisiolgicas so propostos como potnciais
aplicaes em sistemas injetveis minimamente invasivos.
Outros estmulos comuns so ainda, a fora inica, os campos
eltrico e magntico, a luz na regio UV-visvel, as biomolculas
e a concentrao de eletrlitos ou glicose, entre outros.
1,2,3,4,5,6,9,10

Muitas vezes, dois ou mais estmulos podem ainda ser
combinados.
5,9
Dada a ampla gama de estmulos possveis, existe
tambm uma vasta gama de aplicaes para este tipo de
polmeros, incluindo sistemas de (bio)sensores ou atuadores
biomimticos, sistemas de libertao controlada de agentes
teraputicos (frmacos ou genes), engenharia de tecidos
(scaffolds), superfcies termossensveis, dispositivos de
5

bioseparao, bioconjugados, novos biocatalisadores
imobilizados e suportes para cultura de clulas.
1,2,3,5,6,10

A estrutura qumica das cadeias polimricas importante para
conhecer o tipo de resposta macroscpica, e a sua configurao
em soluo depende da relao entre as interaes polmero-
polmero e polmero-solvente (tabela 1).
1,5,11

Polmeros ambientalmente sensveis podem apresentar um
comportamento de gel reversvel, transio sol-gel, quando o seu
peso molecular e concentrao em soluo so suficientes para
que seja formada uma rede tridimensional. Hidrogel o nome
frequentemente atribudo a gis polimricos cujo solvente a
gua.
7

Hidrogis fsicos tm uma importncia diferente dos hidrogis
qumicos. Enquanto os primeiros formam redes transientes que
podero ser extinguidas por adio de aditivos, sendo assim
teis para aplicaes onde se pretende essa reversibilidade, os
hidrogis qumicos mantm a sua integridade por perodos
normalmente maiores, no so reversveis e necessitam de um
iniciador para a reao. Os hidrogis fsicos so facilmente
injetveis e tm uma frmula farmacutica mais simples, por
dissoluo, revelando-se vantajosos em relao aos hidrogis
qumicos.
12

Hidrogis fsicos formados por polmeros inteligentes sofrem
rpidas mudanas reversveis na sua microestrutura. Para tal,
requerido um apropriado balano hidroflico/hidrofbico na
estrutura molecular do polmero para que a transio de fase
6

ocorra.
6
Cadeias lineares em soluo passaro de um sistema
monofsico a um sistema bifsico, devido ao colapso do
polmero aps a aplicao de um estmulo externo.
1,3
Algumas
solues polimricas sofrem uma transio sol-gel que
acompanha a separao de fase.
5,12

Tabela 1. Classificao da forma fsica das cadeias polmricas e os diferentes tipos
de resposta.
3,11

A presente dissertao foca a classe de polmeros com
capacidade para responder a variaes de temperatura, um
estmulo simples de aplicar. Dentro desta classe foram estudados
dois polmeros pertencentes famlia dos polmeros de
acrilamida N-substituda, o Poli-N-isopropilacrilamida
(PNIPAM) e o Poli-2-dimetilaminoetil metacrilato (PDMAEMA).
7

Ambos so homopolmeros lineares, sendo que o PDMAEMA
tem uma resposta temperatura dependente do pH do meio.

8

1.2. Polmeros Termossensveis
Polmeros termicamente sensveis sofrem uma transio de fase,
a uma determinada temperatura de soluo crtica, o que reflete
rpidas alteraes no estado de solubilidade.
2,3

As solues aquosas destes polmeros podem exibir uma fase
(estado isotrpico) abaixo da temperatura de soluo crtica, e
duas fases acima desta (estado anisotrpico), sendo geralmente
conhecida como temperatura de soluo crtica mnima (LCST,
na sigla inglesa). Por outro lado, solues polimricas que se
apresentam monofsicas acima da temperatura de soluo crtica
e bifsicas abaixo desta, exibem uma temperatura de soluo
crtica mxima (UCST, na sigla inglesa).
2,3,10,13,14

Os dois tipos de comportamento referidos podem ser explicados
atravs da termodinmica, considerando a equao da energia
livre de Gibbs ( ).
3,10,11
Em causa, est o balano
entre os efeitos hidrofbicos e o estado de ordem das molculas
de gua nas proximidades do polmero.
2
A transio de fase ocorre
quando variaes de entalpia e entropia da mistura resultam em valores
negativos de .
15
O termo entlpico () est relacionado com as
interaes entre o polmero e o solvente, favorecendo a dissoluo do
polmero, enquanto o termo entrpico () se relaciona com as
interaes hidrofbicas, levando precipitao do mesmo.
2,3,10,12

Assim sendo, de notar que um comportamento LCST um processo
entrpico, j um comportamento UCST um processo entlpico.
10

9

Figura 1. Diagramas de fase de solues polimricas no plano temperatura-
concentrao. a) diagrama do tipo UCST; b) diagrama do tipo LCST.
14

Os hidrogis correspondentes possuem transies semelhantes,
sendo as temperaturas de gel crticas mnima e mxima as LGTT
e UGTT, nas respetivas siglas inglesas.
2

Sistemas do tipo LCST e UCST no se restringem a solues
aquosas, contudo as aplicaes de interesse biomdico so
direcionadas para o uso destes polmeros em ambientes
fisiolgicos, sendo por isso os mais estudados.
2

10

1.2.1. Polmeros com comportamento do tipo LCST
A famlia dos polmeros de acrilamida N-substituda o grupo
mais representativo de polmeros que apresentam LCST (Figura
2), entre os quais o PNIPAM o polmero mais estudado, por
apresentar uma temperatura crtica entre a temperatura
ambiente e a temperatura corporal humana.
3,10

Figura 2. Estrutura de polmeros que apresentam LCST. (a) Poli(N-
isopropilacrilamida (PNIPAM); (b) Poli(N,N-dietilacrilamida) (PDEAAm); (c)
Poli(dimetilaminoetil metacrilato) (PDMAEMA); (d) Poli(N-(L)-(1-hidroximetil)
propilmetacrilamida) (PHMPMAA).
3

Os polmeros representados apresentam LCSTs de: (a) 33C, (b)
26-35C, (c) 32C-53C e (d) 30C.
2,3,10,16,17
Os monmeros que os
constituem que lhes conferem as caractersticas LCST em meio
aquoso. Alterando a composio do polmero atravs da
incorporao de monmeros mais hidroflicos ou mais
hidrofbicos, consegue-se uma deslocao da LCST das solues
para temperaturas mais ou menos elevadas.
15

As solues aquosas deste tipo de polmeros so caracterizadas
por um comportamento de dissoluo inverso e
11

termorreversvel, acompanhado pelo aumento da turbidez da
soluo, quando aquecidas acima de uma determinada
temperatura.
10,11,18,19
Aparentemente, a baixas temperaturas, as
solues so homogneas e transparentes, tornando-se opacas
quando a temperatura excede a LCST.
1,2

Abaixo da LCST as cadeias apresentam-se em conformaes
estendidas, rodeadas pelo solvente, predominando as interaes
hidroflicas entre o polmero e o solvente. Acima da LCST a
transio acompanhada pela desidratao das cadeias que
passam a estar completamente empacotadas em forma de
glbulos, devido ao crescente pronunciamento das interaes
hidrofbicas.
20
Por esta razo, geralmente denominada de coil-
to-globule transition (Figura 3).
12

Figura 3. Comportamento termossensvel em soluo aquosa; "Coil-to-globule
transition".

O efeito hidrofbico promove que haja agregao de vrios
glbulos com reduzida polaridade, quando em soluo aquosa.
Este efeito resulta na formao de agregados cujo tamanho
suficiente para dispersar a luz, causando a aparncia trbida.
12

A rapidez com que o mecanismo de resposta termorreversvel
estabelecido foi atribuda a duas etapas consecutivas. Em
primeiro lugar ao colapso das cadeias durante a transio coil-to-
globule, e em segundo lugar, agregao dos glbulos
resultantes.
15,21
medida que as interaes hidrofbicas se
tornam predominantes o polmero precipita formando uma fase
inteiramente diferente, como um todo de agregados
polimricos.
1,2
A formao de precipitado no ocorre sempre,
podendo ser substituda pela formao de um hidrogel caso a
concentrao e/ou Mw do polmero sejam suficientemente
elevados.

13

1.2.2. Poli-N-isopropilacrilamida

Figura 4. Estrutura qumica do poli(N-isopropilacrilamida).
3

Os polmeros termossensveis mais estudados so as
poliacrilamidas, em especial o polinipam, ou simplesmente
PNIPAM.
22,23,21
Existem outros polmeros solveis em gua que
exibem comportamento do tipo LCST, mas o PNIPAM continua
a ser o polmero com maior potencial em aplicaes biomdicas,
por exibir uma temperatura crtica (LCST) prxima da
temperatura corporal humana, entre 30-35C, embora seja muitas
vezes considerada na literatura como 33C.
24,25,26
um homopolmero no inico que contm domnios
hidroflicos e hidrofbicos abaixo e acima da LCST.
22
Aps a
ocorrncia de precipitao, muitos dos grupos carbonil (83%)
ainda formam pontes de hidrognio com a gua.
12
A separao
de fase acima da LCST reversvel e depende do balano
hidroflico-hidrofbico, passando instantaneamente de uma
soluo clara a uma soluo trbida.
23,24

A solubilidade do PNIPAM temperatura ambiente devida s
pontes de hidrognio formadas entre os grupos amida
14

(RCONR
2
) e a gua. O aumento da temperatura para valores
prximos da LCST provoca o crescente rompimento dessas
ligaes, levando ao colapso gradual das cadeias. O carcter
hidrofbico do polmero torna-se cada vez mais pronunciado
com a contnua elevao da temperatura acima da temperatura
crtica, induzindo a associao das cadeias em agregados de
grandes dimenses.
21,24

15

1.2.3. Poli-2-dimetilaminoetil metacrilato

Figura 5. Estrutura qumica do poli(2-dimetilaminoatil metacrilato).
3

O PDMAEMA um polmero cuja termossensibilidade
dependente do pH.
27
Possui aminas tercirias ao longo da sua
cadeia que so protonadas em meio cido.
18,28
Ao contrrio do
PNIPAM, o PDMAEMA exibe separao de fase (do tipo LCST)
somente para uma determinada gama de pH.
29
O seu pK
a
de
aproximadamente 7, o que indica que a pH=4 as aminas esto
praticamente todas ionizadas e o polmero completamente
solvel em gua, isto porque a repulso eletrosttica entre as
cargas geradas provoca uma rpida extenso da cadeia
polimrica.
1,3,18
Para alm disso, a existncia de contraies
promove a solubilidade (efeito da entropia dos contraies) e um
aumento de presso osmtica que favorece o swelling do
polmero. Em solues neutras e bsicas o polmero passa a
exibir um comportamento termossensvel, apresentando uma
LCST entre 32C e 53C, dependendo do peso molecular do
16

polmero, pH do meio e concentrao de sal.
18,27,30
O PDMAEMA
possui grupos oxietileno (-O(CH
2
CH
2
)), possivelmente
responsveis pela termossensibilidade do polmero, por
inverterem a sua polaridade com a variao de temperatura.
11,31

Tal como acontece com o PNIPAM, o colapso das cadeias
polimricas seguido da agregao intermolecular dos glbulos
formados.
O PDMAEMA e os copolmeros de PDMAEMA esto entre os
polmeros anfiflicos mais importantes a nvel acadmico e
industrial. Podem interagir com frmacos polianinicos, enzimas
e DNA atravs de interaes eletrostticas, j que formam um
policatio em condies cidas ou neutras.
27, 29
Para alm disso,
apresentam uma boa resposta pH/temperatura em soluo
aquosa, bastante til no design de sistemas de libertao
controlada de frmacos e genes.
32

17

1.2.4. Mecanismos propostos para explicar a transio de fase
Tm sido feitos esforos para compreender melhor o
comportamento de transio de fase, e os parmetros que afetam
a LCST.
33
Certos autores atribuem o colapso das cadeias
diminuio da polaridade de alguns segmentos polimricos com
a temperatura, enquanto outros defendem a existncia de uma
estrutura local nas molculas de solvente que rodeiam os grupos
hidrofbicos do polmero, induzindo alteraes no efeito
hidrofbico.
15

Ainda existem muitas incertezas acerca da
solubilidade/insolubilidade do PNIPAM e dos demais
polmeros com comportamentos semelhantes. Contudo, existem
teorias que tentam explicar a natureza dessa separao de fase.
Kojima et al. introduziram recentemente o conceito de
hidratao cooperativa para tentar explicar a alta sensibilidade
do PNIPAM.
34,35,36

18

Figura 6."pearl-necklace conformation"; Ligaes entre grupos isopropil formam
glbulos colapsados; sequncias de pontes H so formadas devido
cooperatividade entre as molculas de gua mais prximas.
37

A cooperatividade na hidratao das cadeias polimricas
causada pelo "sucesso" da ligao da primeira molcula de gua
com um grupo amida do polmero, facilitando a ligao da
molcula de gua seguinte e assim sucessivamente, causando o
deslocamento dos grupos isopropil (hidrofbicos) e criando
melhor acesso para a molcula seguinte. Esta ocorrncia
consecutiva leva a uma conformao da cadeia parecida com um
colar de prolas, conhecida como "pearl-necklace conformation"
como mostra a figura 4.
34
Quando a soluo aquecida, cada
sequncia desidratada em grupo, resultando a rpida transio
de fase, caracterstica do PNIPAM.
35

19

J outros autores, Sarkar e Hussain, defendem que as molculas
de gua formam uma estrutura rgida e local em redor dos
grupos metilo (-CH
3
) impedindo a interao entre os grupos
isopropil de cada monmero, o que leva total dissoluo do
polmero temperatura ambiente. Quando a temperatura
elevada acima da LCST, esta estrutura rgida das molculas de
gua quebra, os grupos hidrofbicos associam-se, levando a uma
consequente agregao intermolecular e a precipitao ou
gelificao (gel fsico reversvel).
38,39

No caso de polmeros que possuam grupos oxietileno, como o
polietileno (PEO), uma alterao na polaridade da cadeia leva
separao de fase a elevadas temperaturas.
11
Os grupos
oxietileno podem adoptar 25 configuraes rotacionais com
diferentes energias, das quais duas so polares e as outras 23 so
apolares.
31
As configuraes de menor energia (polares) so
preferidas a baixas temperaturas e possuem um grande
momento dipolar. Com o aumento da temperatura outras
configuraes vo sendo favorecidas, com dipolos menores ou
mesmo ausentes. A interao com a gua menos favorecida,
reduzindo a hidratao do polmero e induzindo a associao
hidrofbica.
11,31

20

Figura 5. Grupos oxietileno a baixas temperaturas (A) e a altas temperaturas (B).
11

Tal como o PEO e como j foi referido, o PDMAEMA possu
grupos oxietileno na sua estrutura, o que poder estar na origem
da sua termossensibilidade.

21

1.3. Co-solutos que alteram as propriedades dos polmeros
1.3.1. Sais
Hofmeister estudou o efeito da adio de sais a solues aquosas
de protenas.
40
Estudo que levou a concluir que os anies,
presentes nos solutos inicos, em geral, tm um efeito bastante
mais pronunciado do que os caties.
41

Figura 6. Srie de Hofmeister.

Os anies mais esquerda so conhecidos como cosmtropos ou
positivamente hidratados, enquanto aqueles que se encontram
mais direita so conhecidos como catropos ou negativamente
hidratados.
41,42

Yanjie Zhang et al., atravs dos seus estudos com um dispositivo
microfluidico de gradientes de temperatura juntamente com
microscopia de campo-escuro, determinaram o mecanismo de
precipitao e agregao do PNIPAM, como resultado de
22

interaes com vrios anies. Esto 3 interaes envolvidas,
dependendo de condies como, efeitos da tenso superficial,
interao direta do anio com a macromolcula e a polarizao
das molculas de gua que hidratam os grupos amida.
41,43

Figura 7. Trs interaes bsicas envolvidas no efeito de Hofmeister. (a)
polarizao das molculas de gua que hidratam os grupos amida; (b) a tenso de
superfcie tem efeitos na hidratao hidrofbica das macromolculas e pode ser
modelada pela adio de sais; (c) interao direta do anio com os grupos amida.
41

As duas primeiras interaes esto envolvidas na precipitao
do polmero (a e b), efeito caracterstico dos ies cosmtropos
(ex: Cl
-
), enquanto a segunda est envolvida na solubilizao do
polmero (c), efeito caracterstico dos ies catropos (ex: SCN
-
).
41,43,44

Para este trabalho os dois sais usados foram o NaCl e o KSCN.

23

1.3.2. Surfatantes
Os surfatantes, tambm designados de tensioativos, so
compostos por duas partes, uma hidroflica (grupo polar) e uma
hidrofbica (apolar), e a sua classificao feita segundo os
grupos polares que os constituem.
45

Figura 8- Estrutura de um surfatante aninico.

Assim podem ser classificados como: no-inicos, o grupo polar
no possui carga; catinicos, o grupo polar tem carga positiva;
aninicos, o grupo polar tem carga negativa e os zwiterionicos,
com propriedades combinadas de tensioativos inicos e no-
inicos.
Para muitos sistemas polmero-surfatante, as molculas de
surfatante so adsorbidas na cadeia do polmero formando
agregados micelares. Os complexos formados entre o polmero e
o surfatante so descritos pelo pearl necklace model como se
pode ver na figura 21.
46,47
Este modelo consiste em
macromolculas decoradas com agregados micelares de SDS.
24

Figura 9. Estrutura do modelo pearl-necklace para os complexos polmero-
surfatante.
47

A concentrao micelar crtica (cmc), a concentrao a partir da
qual se formam as micelas de surfatante livre em soluo. Na
presena de polmero essa mesma concentrao encontra-se um
pouco abaixo da cmc e recebe o desgnio de concentrao de
agregao crtica (cac).
45
O SDS interage com o PNIPAM acima
do cac (0,69mM a 25C), para formar complexos carregados.
46

Em gua, a interao com os polmeros no-inicos geralmente
mais forte com os surfatantes aninicos do que com os
catinicos. Tal como para os sais, as explicaes sugeridas para
esta diferena baseiam-se no tamanho dos grupos polares e na
interao de cada io com a primeira camada de hidratao do
polmero, que favorecida com os anies.
45

Neste trabalho foram usados o SDS, surfatante aninico, e o
CTAB, catinico.

25

Captulo 2
2. Experimental
2.1. Materiais
Foram sintetizadas e disponibilizadas, pelo Departamento de
Engenharia Qumica, quatro amostras de polmeros sensveis a
variaes de temperatura, duas de PNIPAM e outras duas de
PDMAEMA. Os pesos moleculares (M
n
) e os ndices de
polidispersividade (M
w
/M
n
), obtidos atravs da cromatografia
de permeao em gel (GPC), esto indicados na tabela seguinte.

Tabela 2. Pesos moleculares mdios (M
n
) das amostras e respetivos ndices de
polidispersividade(M
w
/M
n
).
Amostras (M
n
) (M
w
/M
n
)
PNIPAM (20k) 20,262 Da 3,40
PNIPAM(39k) 39,384 Da 1,56
PDMAEMA(11k) 11.651 Da 1,31
PDMAEMA(19k) 19.603 Da 1,41

Para efeitos de variao do pH da soluo de PDMAEMA, foram
usados HCl diludo (cido) e NaOH (base). Para fazer variar o
pH das solues, o ajuste foi feito atravs da adio de pequenos
26

volumes de NaOH/HCl e medindo seguidamente at se obter o
valor pretendido.
A fim de estudar efeitos na estabilidade dos dois polmeros em
soluo, em relao separao de fase, foram usados como
aditivos dois sais diferentes, um hidroflico (NaCl) e um
hidrofbico (KSCN), e como co-solvente o etanol (C
2
H
5
OH). No
caso dos sistemas com PNIPAM foram ainda usados dois tipos
de surfatantes, um catinico, CTAB (98,0% pureza, Sigma
Aldrich) e um aninico, o SDS (99% pureza, Sigma Aldrich).
2.2. Tcnicas
Neste trabalho as tcnicas usadas para o estudo do
comportamento de fase dos polmeros foram: a espectroscopia
UV-vis, importante para verificar que a transmitncia de luz de
cada amostra decresce quando se faz aumentar a temperatura do
sistema, devido disperso de luz causada pelos agregados
polimricos que se formam acima da LCST; a reologia, para
perceber o comportamento reolgico dos polmeros em soluo
aquosa, a pH diferente e na presena de aditivos; o DLS para
confirmar a presena de agregados hidrofbicos, sugerida pelo
aumento do dimetro hidrodinmico das partculas a
temperaturas acima da LCST.
De seguida ser explicado o modo como as amostras foram
preparadas, assim como os princpios de funcionamento de cada
tcnica evidenciada.
27

2.2.1. Mtodo de preparao das amostras
Nos testes de espectroscopia as solues dos dois polmeros
encontram-se a uma concentrao de 5wt% em gua destilada.
Primeiro pesada a massa de polmero necessria e em seguida
colocada gua destilada at perfazer o volume total
estabelecido. Para todas as tcnicas, as amostras so sempre
agitadas at dissoluo total do polmero.

Nos testes reolgicos o procedimento o mesmo para os
sistemas contendo apenas o polmero e gua destilada. Quando
se adicionam concentraes pequenssimas de aditivos, como no
caso dos sais e surfatantes em que as concentraes esto abaixo
de 1wt%, por uma questo de facilidade na pesagem, primeiro
so pesadas as massas do sal/surfatante e s depois
adicionado o polmero e a gua, na ordem j referida. No caso
dos lcoois, pesada a massa de polmero, em seguida usada
uma pipeta adequada para a quantidade de lcool calculada e o
volume restante preenchido com gua destilada.

Para os testes de DLS, o procedimento o mesmo que o
explicado inicialmente, apenas usada uma concentrao mais
baixa de 1wt%.

28

2.2.2. Espectrofotometria UV-Visvel
A espectrofotometria um mtodo analtico que se baseia na
interao da matria com a radiao eletromagntica (luz).

Figura 10. Esquema ilustrativo da incidncia de luz sobre a amostra.

A cor das amostras (luz transmitida) deve-se absoro e/ou
disperso, de certos comprimentos de onda constituintes da luz
branca e/ou UV.
A transmitncia de luz de cada amostra, a diferentes
temperaturas, foi medida usando o Shimadzu UV-VIS
Spectrophotometer, UV-2450. Para a realizao dos grficos foi
escolhido um comprimento de onda no intervalo do espectro de
luz visvel, por forma a acompanhar a linha de transmitncia do
mesmo comprimento de onda, antes, durante e aps a separao
de fase de cada amostra.

29

2.2.3. Reologia
A reologia a cincia que estuda o modo como a matria flui ou
se deforma sob determinadas condies de teste, e assenta sobre
as leis da viscosidade e da elasticidade propostas por Newton e
Hooke, respectivamente.
48,49,50
Slidos e fludos (lquidos ou
gases), respondem de diferentes formas deformao, os
primeiros so caracterizados por uma resposta elstica, enquanto
os segundos seguem um fluxo viscoso. Os polmeros esto
includos numa ampla classe de fludos complexos e so
caracterizados pelas suas propriedades viscoelsticas.
11
A
contribuio de cada componente, viscosa ou elstica, varia
consoante as condies de tenso, deformao e temperatura,
assim como da concentrao e distribuio de pesos
moleculares.
48,51,52

Viscosidade de Fludos Newtonianos
A viscosidade uma propriedade quantificvel da deformao
de um lquido e definida como uma medida de resistncia ao
fluxo da matria.
51

O comportamento mais simples, e o que ser abordado, o de
um Fludo Newtoniano. O modelo de Newton obedece a uma
relao linear entre a tenso e a taxa de deformao, em que a
constante de proporcionalidade a viscosidade, e esta depende
apenas de fatores como a temperatura e a presso.
51

30

Figura 11. Fluido Newtoniano. Tenso de deformao () em funo da taxa de
deformao (D).
11

Este modelo segue o fluxo laminar simples. Se tivermos duas
placas, uma delas mvel (placa superior), com uma separao
constante entre elas, e esse espao for preenchido por um fluido,
existe uma variao linear da taxa de fluxo na direo de y, e
ento D igual em todas as direes.
11,53

Figura 12. Modelo de duas placas usado por Newton. F- fora (deformao)
aplicada; A-rea das placas; h espao entre as placas e U viscosidade com que a
placa superior se move.
51

De acordo com a figura, podemos definir alguns parmetros
como:
Tenso de deformao, (Pa)
Deformao,
31

Taxa de deformao,
(s
-1
)

Todos os fludos se tornam no-Newtonianos, se a taxa de
deformao for suficientemente elevada (Figura 7). A gua um
solvente Newtoniano com uma viscosidade de 10
-3
Pas.
48
Para
que se observasse um comportamento do tipo no-Newtoniano
na gua, seriam necessrias velocidades na ordem de 10
12
s
-1
.
51

Figura 13. Limite do comportamento de fludos Newtonianos.
51

Viscoelasticidade
A viscoelasticidade pode ser estudada atravs de testes
oscilatrios, medindo G (mdulo elstico) e G(mlulo viscoso).
Os dois limites de comportamento observados para sistemas
quase puros, so um lquido, quando G > G e a viscosidade
dinmica independente da frequncia, ou um gel elstico,
quando G > G, e a viscosidade dinmica decresce com a
frequncia.
11

32

A dependncia da viscosidade Newtoniana, foi estudada em
funo da temperatura, usando o Thermo Scientific HAAKE
MARS III, com um sistema de medida de cone e prato (dimetro:
35 mm; ngulo: 1) (Figura 11) e configurao automtica do zero
(zero gap, espao entre a placa e o cone). Possui um reservatrio
de gua para controle de testes de temperatura, com largo
intervalo de seleo de temperaturas (-150C a 600C). O
HAAKE MARS III permite medir as propriedades viscoelsticas
das solues polimricas em funo da deformao,
alongamento, tempo, frequncia, tenso e temperatura. No
presente trabalho, as propriedades viscoelsticas dos dois
polmeros foram estudadas em funo da frequncia, para duas
temperaturas distintas, abaixo e acima da LCST de cada
polmero.

Figura 14. Sistema de cone e prato; o ngulo entre o cone e o prato e r o raio
de ambos.
49

33

Testes Rotacionais

Nos testes rotacionais de viscosidade vs. temperatura, a rampa
de temperaturas escolhida foi de 20-50C com uma velocidade de
aquecimento de 1C/3min.
A tenso aplicada s amostras de PDMAEMA e PNIPAM(20k)
foi de 1Pa. Para o PNIPAM(39k) a tenso usada foi de 10Pa. A
tenso aplicada s amostras escolhida tendo em conta a fluidez
observada das solues. Tenses mais baixas do que o necessrio
chegariam a um ponto em que o cone deixaria de conseguir
rodar sobre a amostra, surgindo valores negativos de
viscosidade e indicando que a tenso no a mais apropriada.

34

2.2.4. Disperso Dinmica da Luz (DLS)
A Disperso dinmica da luz (DLS), tambm conhecida como
Espectroscopia de Correlao Fotnica (PCS), uma tcnica
usada para medir o tamanho e a distribuio de tamanhos das
molculas ou partculas, na regio do submicron.
54,55,56
Esta
tcnica aplicada a molculas dispersas ou dissolvidas num
lquido, entre as quais podero ser protenas, polmeros, micelas,
nanopartculas e colides, entre outras.
54, 57

O princpio usado bastante simples e assenta em dois
pressupostos: todas as partculas em soluo seguem o
movimento Browniano, um movimento aleatrio causado pelo
choque com as molculas de solvente; o dimetro obtido o de
uma esfera que tem o mesmo coeficiente de difuso translacional
que a partcula a ser medida (figura 7).
54,55

Figura 15. Dimetro hidrodinmico.
54

35

A esfera definida pela rotao da molcula em todas as
direes com uma adicional camada de hidratao, modificada
pela facilidade que o solvente tem em atravessar tal volume.
58
O
dimetro medido chamado de dimetro hidrodinmico e
refere-se facilidade que as partculas tm em difundir num
determinado fluido.
54,55,58

A amostra contida na clula iluminada por um feixe laser e as
flutuaes da luz dispersa so detetadas a um determinado
ngulo conhecido, por um fotodetetor de alta sensibilidade.
56,57

A intensidade da luz que detetada flutua a uma taxa que
depende do tamanho das partculas. Naturalmente partculas
mais pequenas movem-se mais rapidamente aquando do choque
com as molculas de solvente.
54, 57

Figura 16. Flutuaes de intensidade ao longo do tempo como resultado da
disperso de luz por parte das partculas contidas na amostra.
59

Quanto mais rapidamente as molculas difundirem, mais
rpidas sero as variaes de intensidade. A velocidade dessas
36

mudanas est diretamente relacionada com o movimento das
partculas. O coeficiente de difuso translacional dado pela
intensidade de luz dispersa em funo do tempo. Fatores como a
temperatura, a viscosidade do solvente, o tamanho da partcula e
a estrutura da sua superfcie, concentrao e tipo de ies no
meio, afetam o movimento das partculas.
55,56,58
Correlacionando as flutuaes de intensidade determina-se o
coeficiente de difuso translacional do movimento Browniano, e
obtm-se a distribuio de tamanhos da populao existente na
amostra atravs da relao de Stokes-Einstein:

Onde D
h
o dimetro hidrodinmico da partcula, k a
constante de Boltzmann's, T a temperatura absoluta em graus
Kelvin, a viscosidade do solvente e D
0
o coeficiente de
difuso translacional.
54,55,58

No presente trabalho foi usado o Delsa
TM
Nano C Submicron da
Beckman Coulter, capaz de analisar amostras com concentraes
de 0.001% a 40% e de medir tamanhos inferiores a 1nm (0.6 nm
7 m). No necessita de grandes quantidades de amostra, sendo
o mnimo necessrio de 60 l.
56
O sistema possui 3 ngulos de
deteo a 15, 30 e 165, o que permite determinar a distribuio
de tamanhos total das partculas, enquanto que, se consistisse
apenas de um ngulo fixo seria apenas possvel obter uma mdia
37

das distribuies num intervalo limitado de tamanhos.
56,57
A
temperatura a que as amostras podem ser submetidas varia
entre os 15C 0.3C e os 90C 0.3C.
56

38

Captulo 3
3. Resultados e Discusso
Na introduo foi dito que a resposta ao aumento da
temperatura, acima da temperatura crtica (LCST), atribuda ao
colapso individual das cadeias polimricas, seguido da
agregao dos glbulos resultantes. Esta proposio suportada,
no presente trabalho, por estudos reolgicos, espectroscpicos e
de disperso dinmica de Luz (DLS).
3.1. Dependncia da viscosidade Newtoniana em funo da
temperatura
Foram preparadas, inicialmente, solues de 2, 5 e 10% de cada
amostra de polmero para um volume total de 2 ml de soluo,
usando sempre a gua como solvente. Cada amostra foi
mergulhada num banho de gua quente, fazendo variar a
temperatura entre 20C a 50C, a fim de abranger um largo
intervalo que compreende os valores limite da temperatura
corporal humana. Para o PDMAEMA(11k), a transio de fase
foi verificada entre os 38C e os 39C, com um aumento da
turbidez da soluo, passando de um amarelo translcido a
39

opaco. Para o PDMAEMA(19k) a transio de fase revelou-se um
pouco mais baixa, entre os 37C e os 38C, dado que o aumento
do tamanho das cadeias polimricas em soluo reduz o espao
entre polmeros acentuando as interaes hidrofbicas . Para as
solues de PNIPAM, a transio foi verificada entre os 33C e os
34C, com um aumento de turbidez bastante mais acentuado,
passando de uma soluo completamente transparente a um
branco totalmente opaco. Em simultneo, foram obtidas as
curvas de dependncia da viscosidade Newtoniana com a
temperatura. Os resultados iniciais so mostrados nas figuras
seguintes.

Figura 17. Soluo de 5wt% de PDMAEMA(11k) a pH=9,1. Dependncia da
viscosidade Newtoniana do em funo da temperatura. Turbidez da soluo
aquosa de PDMAEMA abaixo (A) e acima (B) da LCST.

0,001
0,01
0,1
1
15 20 25 30 35 40 45 50 55
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)

T (C)
PDMAEMA(11k)
A
B
40

Figura 18. Soluo de 5wt% de PNIPAM(39k). Dependncia da viscosidade
Newtoniana em funo da temperatura. Turbidez da soluo aquosa de PNIPAM
abaixo (A) e acima (B) da LCST.

Para temperaturas abaixo da LCST, as cadeias permanecem
estendidas e hidratadas pelas molculas do solvente, o que
indicado pela baixa viscosidade da soluo. Neste intervalo de
temperaturas a soluo permanece transparente e homognea. O
colapso das cadeias ocorre quando se atinge a temperatura
critica. Neste ponto, o espao ocupado pelas cadeias menor, o
que se traduz na diminuio da viscosidade e a soluo mantm-
se transparente.

0,01
0,1
1
10
100
1000
10000
100000
15 20 25 30 35 40 45 50 55
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)

T (C)
PNIPAM(39k)
A
B
41

Figura 19. Ilustrao do comportamento de fase do tipo LCST.

A associao hidrofbica intermolecular das cadeias inicia
quando a temperatura ultrapassa a LCST, levando ao aumento
da viscosidade das solues, com a formao de largos
agregados. Nas curvas de PNIPAM, o fenmeno que ocorre
quando se atinge a LCST perfeitamente delineado. No caso do
PDMAEMA, o ponto exato onde ocorre a transio de fase no
to facilmente percetvel. Existe uma notria diferena de
comportamentos entre os dois polmeros em soluo. Enquanto
o PNIPAM revela uma resposta abrupta, imediatamente a seguir
LCST, no caso do PDMAEMA essa resposta dada de uma
maneira mais gradual, sugerindo mecanismos de transio de
fase diferentes. Na seco 1.2.4. foram abordados alguns
mecanismos propostos por alguns autores para a ocorrncia de
separao de fase. No caso do PNIPAM, a resposta pode ser
provocada pela quebra de uma estrutura rgida formada pelas
molculas de gua e em redor dos grupos metilo (-CH
3
),
42

permitindo associaes hidrofbicas abruptas entre os grupos
isopropil. As associaes hidrofbicas do PDMAEMA so mais
moderadas, sugerindo que o mecanismo possa ser devido
rotao gradual dos grupos oxietileno.

43

3.1.1. Influncia do peso molecular e concentrao em soluo

Grfico 1. Efeito da variao do peso molecular do PNIPAM (solues de 5wt%).
Dependncia da viscosidade Newtoniana em funo da temperatura (subida da
temperatura).

Grfico 2. Efeito da variao do peso molecular do PDMAEMA (solues de 5wt%).
temperatura).
No caso das solues de PNIPAM, o peso molecular tem uma
notvel influncia na viscosidade do polmero, diferindo quase
0,001
0,01
0,1
1
10
100
1000
10000
100000
15 20 25 30 35 40 45 50 55
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)

T (C)
PNIPAM(39k)
PNIPAM(20k)
0,001
0,01
0,1
1
15 20 25 30 35 40 45 50 55
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)

T (C)
PDMAEMA(11k),
pH=9,1
PDMAEMA(19k),
pH=8,2
44

por um fator de 100. Quanto maior o peso molecular, mais
elevada ser a viscosidade da soluo e maior ser a
probabilidade de ocorrncia de uma transio sol-gel. Com o
aumento do peso molecular do polmero o espao entre as
cadeias reduz-se, possibilitando um maior nmero de
associaes hidrofbicas entre elas e conduzindo formao de
um gel fsico (rede tridimensional reticulada). No que toca
LCST do polmero, esta mantm-se muito prxima, no sendo
notvel alguma dependncia com o peso molecular. De acordo
com a literatura, alguns autores afirmam que a LCST das
solues de PNIPAM independente do peso molecular,
enquanto outros afirmam ser diretamente dependente ou ainda
inversamente dependente do peso molecular.
26
As diferenas
revelam-se particularmente notveis quando se comparam
resultados de amostras com pesos moleculares elevados com
amostras de pesos moleculares relativamente baixos (Mw<20,000
Da), para os quais a natureza qumica dos grupos finais tem um
impacto significante na LCST das solues de PNIPAM.
Fujishige et al. afirmam mesmo no haver qualquer efeito
significativo nem no que diz respeito ao peso molecular nem no
que diz respeito concentrao, embora s tenham considerado
amostras com um mnimo de 5x10
4
Da e o efeito da concentrao
tenha sido apenas avaliado para amostras com pesos
moleculares de 8,4x10
6
Da.
60

Olhando agora para as curvas do PDMAEMA, pode observar-se
que, com o aumento do peso molecular do polmero, a LCST
45

deslocada para um valor mais baixo, que neste caso varia de -
1C. J a viscosidade da soluo mantem-se dentro dos mesmos
valores. Estes dados podero significar que o 5wt% de PNIPAM
39kDa superior concentrao crtica, ou seja, concentrao
onde se inicia o regime semi-diludo e as cadeias se comeam a
entrelaar. Ao reduzir a Mw do polmero para 20kDa h uma
diminuio clara da viscosidade, possivelmente atribuda a uma
passagem para o sistema diludo. Nos sistemas com
PDMAEMA, a invarincia da viscosidade com o aumento da
Mw indicativo de que os sistemas esto ambos no regime
diludo.

No que diz respeito variao da concentrao das amostras em
soluo, para concentraes muito baixas de PNIPAM, os
glbulos resultantes da transio coil-to-globule formam tambm
agregados, s que estes so to pequenos que no conseguem
formar pontes entre eles, no se formando por isso uma
estrutura tridimensional. Para concentraes mais elevadas os
valores crescentes de viscosidade no apresentam variaes
significativas, e por isso foram sempre usadas solues com
concentraes de 5wt%, nos estudos decorrentes. A LCST
aparenta ser a mesma para qualquer das concentraes. Para o
PDMAEMA, a LCST diminui com o aumento da concentrao
em soluo. Havendo maior quantidade de polmero em
soluo, o nmero de associaes hidrofbicas cresce, ou seja, a
associao intermolecular aumenta, e o polmero transita de fase
46

a uma temperatura mais baixa. Posto isto, a viscosidade tambm
ser menor para concentraes mais baixas. Acima da LCST a
viscosidade aumenta com o aumento da concentrao de
polmero em soluo. A 2wt%, possivelmente no se formar
uma estrutura tridimensional na ntegra, existindo em soluo
apenas aglomerados de glbulos.

Grfico 3. Efeito da variao da concentrao de PNIPAM(39k). Dependncia da
viscosidade Newtoniana em funo da temperatura (subida da temperatura).

0,0001
0,001
0,01
0,1
1
10
100
1000
10000
100000
1000000
15 20 25 30 35 40 45 50 55
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)

T (C)
2wt%
5wt%
10wt%
47

Grfico 4. Efeito da variao da concentrao do PDMAEMA(11k). Dependncia da
viscosidade Newtoniana em funo da temperatura (subida da temperatura).

0,0001
0,001
0,01
0,1
1
10
15 20 25 30 35 40 45 50 55
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)

T (C)
2wt%, pH=9,2
5wt%, pH=9,1
10wt%, pH=9,1
48

3.1.2. Influncia do pH do meio

Grfico 5. Efeito da variao do pH da soluo de PDMAEMA(11k) (solues de
5wt%). Dependncia da viscosidade Newtoniana em funo da temperatura
(subida da temperatura).

O PDMAEMA um polmero que possui grupos ionizveis, em
meio cido, ao longo da estrutura da sua cadeia (aminas
tercirias). Dessa forma, o polmero solvel no intervalo de
temperaturas selecionado, a pH baixo. Esta boa relao do
polmero com a gua traduz-se numa impossibilidade de haver
gelificao, como se pode ver pela curva cuja soluo apresenta
um pH de 2,7: no verificada qualquer transio de fase.
medida que o pH aumenta acima de 7, um pequeno aumento na
viscosidade comea a ser evidenciado, tornando-se cada vez
mais pronunciado medida que o pH aumenta para valores
cada vez mais elevados de basicidade (pH=9,1). Dada esta
0,001
0,01
0,1
1
15 20 25 30 35 40 45 50 55
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)

T (C)
pH=9,1
pH=2,1
49

dependncia da resposta temperatura com o pH do meio,
evidente que medida que o pH aumenta e as aminas so
desprotonadas (polmero neutro), o aumento da hidrofobicidade
do polmero leva diminuio da LCST.

Grfico 6. Efeito da variao do pH da soluo de PNIPAM(39k) (solues de
5wt%). Dependncia da viscosidade Newtoniana em funo da temperatura.
(subida da temperatura).

Relativamente ao grfico do PNIPAM, sendo um polmero
neutro, a LCST no varia com o pH. Existe apenas uma ligeira
diminuio da viscosidade da soluo a pH=1,4, que pode ser
explicada pela presena de uma quantidade mais elevada de ies
H
+
e Cl
-
. Embora residualmente, estes ies competem pela gua,
levando desidratao parcial do polmero e consequente
diminuio de tamanho e de viscosidade.
0,001
0,01
0,1
1
10
100
1000
10000
100000
15 20 25 30 35 40 45 50 55
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)

T (C)
pH=8,7
pH=1,4
50

3.1.3. Influncia da adio de aditivos e co-solventes na
temperatura crtica
A qualidade do solvente um importante parmetro, cujos
efeitos na viscosidade devem ser considerados.
11, 51

Figura 20. Efeito da qualidade do solvente na configurao do polmero.
51

Uma vez que o comportamento termossensvel depende das
interaes entre o solvente e o polmero e do balano
hidroflico/hidrofbico na estrutura do polmero, pretendemos
saber se determinados aditivos iro influenciar a localizao da
temperatura crtica. Sais, surfatantes e co-solventes presentes nas
solues aquosas de polmeros, causam alteraes nas interaes
polmero-solvente ou no balano hidroflico/hidrofbico do
polmero. Os surfatantes, por exemplo, so adsorvidos na
estrutura do polmero, gerando complexos polmero-surfatante
com propriedades distintas.
2

51

3.1.3.1. Efeito da adio de co-solventes

temperatura (subida da temperatura).

PDMAEMA(19k) (5wt%). Dependncia da viscosidade Newtoniana em funo da
temperatura (subida da temperatura).

0,001
0,01
0,1
1
10
100
1000
10000
100000
15 20 25 30 35 40 45 50 55
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)

T (C)
0wt% etanol
10wt% etanol
100wt% etanol
0,001
0,01
0,1
1
15 20 25 30 35 40 45 50 55
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)

T (C)
0wt% etanol
5wt% etanol
10wt% etanol
52

Os resultados mostram que a presena de etanol faz aumentar a
viscosidade das solues de PDMAEMA a baixas temperaturas.
Este facto deve-se provvel grande compatibilidade entre o
etanol e o polmero, que promove um aumento do tamanho do
polmero na soluo e consequente aumento da viscosidade. A
temperaturas mais elevadas, a presena de etanol faz aumentar a
LCST, uma vez que o etanol torna o PDMAEMA mais estvel em
soluo. Para alm disso, a adio de etanol, um solvente menos
polar do que a gua, ir promover que as associaes
hidrofbicas no ocorram de um modo to forte como se o
solvente fosse gua, uma vez que a driving-force para a
associao hidrofbica ser menor quando o solvente tem menor
polaridade. Assim, a presena de etanol promove um aumento
da LCST por ser necessria uma temperatura mais alta e maior
hidrofobicidade nas molculas para se iniciar a construo das
pontes hidrofbicas inter-agregados. O valor mximo de
viscosidade obtido em solues com lcool sempre inferior ao
das solues sem lcool, pelo enfraquecimento que o lcool
promove nas interaces hidrofbicas. Um sistema com 10% de
etanol no apresenta qualquer LCST na gama de temperaturas
estudadas.
Com o PNIPAM, o efeito oposto. O PNIPAM mais solvel em
gua do que em etanol, facto sugerido pela diminuio da
viscosidade na presena de etanol, a baixas temperaturas. Ao
induzir a compactao do PNIPAM, o etanol est a desviar a
LCST para valores mais baixos. A adio de 10% de etanol, faz
53

deslocar a LCST da soluo pelo menos -9C. Na literatura, so
reportados casos semelhantes, mas com o uso de metanol como
co-solvente.
35,61
A este fenmeno atribudo o nome de co-no-
solvncia, ou seja, dois solventes que so bons para o polmero
separadamente, tornam-se maus quando misturados.
24
A
mistura voltar a tornar-se num bom solvente quando for
maioritariamente composta por etanol/metanol. Tanaka et al.
atribuem este peculiar comportamento competio pelas
interaes hidroflicas, entre a gua e o metanol, com o polmero.
35

Em geral, a adio de lcoois a solues de PNIPAM, diminui a
LCST.
62
Quanto maior for a cadeia do lcool, mais rpido ser
esse decrscimo (Figura 15).

Figura 21. Efeito de vrios lcoois na LCST do PNIPAM.
62

54

3.1.3.2. Efeito da adio de sais
Os eletrlitos so conhecidos por elevarem ou diminurem a
LCST dos polmeros, devido aos seus ies individuais e
habilidade que eles tm em alterar a estrutura das molculas de
gua nas proximidades do polmero.
24, 41,44,62
A mesma concentrao de dois sais diferentes, cloreto de sdio
(NaCl) e tiocianato de potssio (KSCN), foi adicionada a
solues contendo PNIPAM(20k) e PDMAEMA(19k). Os dois
sais foram escolhidos por terem propriedades distintas, descritas
anteriormente. O SCN- mais hidrofbico do que o NaCl e tem
maior preferncia pela adsoro ao longo da cadeia polimrica.

Grfico 9. Efeito da adio de 2 sais diferentes soluo de PNIPAM(20k) (5wt%).
temperatura).
0,001
0,01
0,1
1
10
100
1000
10000
15 20 25 30 35 40 45 50 55
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)

T (C)
0wt% sal
0,5wt% NaCl
0,5wt% KSCN
55

Grfico 10. Efeito da adio de 2 sais diferentes soluo de PDMAEMA(19k).
temperatura).

A LCST de ambos os polmeros decresce na presena de NaCl,
enquanto que na presena de KSCN aumenta, com um efeito
muito mais pronunciado na soluo de PDMAEMA.
O SCN
-
menos estvel em gua do que o Cl
-
e adsorve ao longo
da cadeia polimrica. O polmero assim convertido num
polieletrlito que, embora muito fraco, possui cargas que o
mantm solvel em gua mesmo acima da LCST original. S
quando a cadeia polimrica est fortemente hidrofobizada que
o polmero compacta e colabora na construo da rede
tridimensional com base nas pontes hidrofbicas entre os
agregados. Dessa forma, a presena de um sal hidrofbico
desloca a LCST para valores superiores.
O NaCl um sal hidroflico e tem um papel oposto ao do KSCN.
O NaCl quando em soluo comete com o polmero pela gua,
causando uma desidratao parcial. Este efeito foi apresentado
0,0001
0,001
0,01
0,1
1
15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)

T (C)
0wt% sal
0,5wt% NaCl
0,5wt% KSCN
56

na literatura para explicar a diminuio do Cloud Point de
surfatantes no inicos.
11
O NaCl conduz assim compactao
polimrica e consequente diminuio da LCST.

57

3.1.3.3. Efeito da adio de surfatantes inicos, no caso do PNIPAM
sabido, da literatura, que surfatantes aninicos como o SDS,
so capazes de solubilizar molculas polimricas em gua.
25

Uma vez que a temperatura crtica da soluo de PNIPAM se
encontra abaixo da temperatura para a aplicao pretendida,
foram adicionadas diferentes quantidades de SDS com o objetivo
de deslocar a LCST para valores mais elevados.

Grfico 11. Efeito da adio de diferentes concentraes de SDS soluo de
temperatura (subida de temperatura).

A cac do SDS na presena de PNIPAM de 0,69 mM.
46
As
concentraes de SDS no grfico esto acima desse valor (17-
24mM).
O surfatante atua como se fizesse parte do polmero, rodeando
os grupos hidrofbicos e tornando-o num polieletrlito, com
0,01
0,1
1
10
100
1000
10000
100000
15 20 25 30 35 40 45 50 55
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)

T (C)
0wt% SDS
0,5wt% SDS
0,6wt% SDS
0,7wt% SDS
58

uma conformao mais estendida. Da os valores de viscosidade
mais baixos. A LCST desloca-se para valores elevados com a
adio de SDS. Isso devido ao aumento do carcter hidroflico
do polmero.
Foram tambm usadas diferentes concentraes de um
surfatante catinico, o CTAB. A cac deste surfatante na presena
de PNIPAM de 7,6 mM a 25C.
46

Grfico 12. Efeito da adio de diferentes concentraes de CTAB soluo de
temperatura (subida de temperatura).

O efeito da deslocao da LCST para valores mais elevados
maior em sistemas com SDS, o que mostra que o PNIPAM
interage mais fortemente com o SDS do que com o CTAB.
Mesmo a baixas concentraes de SDS, o efeito verificado,
enquanto que em sistemas com CTAB so requeridas
concentraes mais elevadas. Como j foi referido na introduo,
as explicaes sugeridas baseiam-se no tamanho dos grupos
0,001
0,01
0,1
1
10
100
1000
10000
100000
1000000
10000000
15 20 25 30 35 40 45 50 55
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)

T (C)
0wt% CTAB
0,5wt% CTAB
1wt% CTAB
5wt% CTAB
59

polares que os constituem e na interao de cada io com a
primeira camada de hidratao do polmero, que favorece a
interao com os surfatantes aninicos.

60

3.2. Turbidez das solues em funo da temperatura
O aumento da turbidez da soluo resultado da disperso da
luz por parte dos agregados formados acima da temperatura
crtica (LCST). Atravs da anlise espectroscpica de
transmitncia a diferentes temperaturas, dentro da regio de
comprimentos de onda do visvel, podemos facilmente observar
uma diminuio, na luz que atravessa a amostra, acima da LCST
de cada polmero.

Grfico 13. Transmitncia das amostras PNIPAM(20k) e PDMAEMA(11k).
Comprimento de onda selecionado: = 450 nm.

Para a amostra de PNIPAM, a diminuio na transmitncia, a
uma temperatura imediatamente acima da LCST (35C), mais
evidente quando comparada com a amostra de PDMAEMA, que
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
110
20 25 30 35 40 45 50 55
T
(
%
)

T(C)
PNIPAM(5wt%)
PDMAEMA(5wt%)
(pH=9,1)
61

quase impercetvel a 40C. S para valores mais elevados da
temperatura que a diminuio na transmitncia se torna bem
evidenciada, podendo indicar um aumento da intensidade das
interaes hidrofbicas que levar formao de agregados cada
vez maiores.

62

3.3. Dimenso das partculas em funo da temperatura

Grfico 14. Variao do dimetro hidrodinmico das partculas (Dh) com o
aumento da temperatura.

Ambas as curvas resultantes mostram que o tamanho das
partculas aumenta para valores acima da LCST. Pode perceber-
se ainda que existe uma diferena no comportamento de cada
um deles, que vai de acordo com os resultados evidenciados
anteriormente pela transmitncia de cada amostra. As partculas
de PNIPAM aumentam dez vezes o seu tamanho para valores
imediatamente acima da LCST, enquanto as partculas de
PDMAEMA aumentam cerca de seis vezes. A 45C, o tamanho
das partculas mximo, o que se mostra em concordncia com a
anlise feita anteriormente para as curvas de transmitncia.
A temperaturas mais elevadas, o tamanho das partculas de
ambos os polmeros comea a decrescer, devido ao carcter mais
hidrofbico dos polmeros que vai promover maior compactao
0
100
200
300
400
500
600
700
800
900
1000
20 25 30 35 40 45 50 55
D
h
(
n
m
)

T(C)
PNIPAM(1wt%)
PDMAEMA(1wt%)
(pH=9,2)
63

da rede formada. A temperaturas ainda mais elevadas ocorre
destruio do hidrogel, devido quebra de ligaes que unem os
agregados, devido compactao e aumento da distncia entre
eles.
Podemos ento afirmar, que existe uma forte relao entre o
tamanho das partculas, a turbidez das solues e o aumento da
viscosidade (grficos 15 e 16). Elevando a temperatura acima da
LCST, aumenta o tamanho das partculas devido formao dos
agregados polimricos, assim como a viscosidade, devido
formao de uma rede tridimensional, e a soluo torna-se turva
como resultado da luz dispersa pelos largos agregados.

partculas e transmitncia de luz da amostra com o aumento da temperatura das
solues. Solues de 5wt% PNIPAM(20k) para as medidas da viscosidade
Newtoniana e transmitncia de luz e de 1wt% para a obteno do dimetro
hidrodinmico das partculas.

0
100
200
300
400
500
600
700
800
0.001
0.01
0.1
1
10
100
1000
10000
15 20 25 30 35 40 45 50 55
D
i
m
e
t
r
o

h
i
d
r
o
d
i
n
m
i
c
o

(
n
m
)
V
i
s
c
o
s
i
d
a
d
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)
T (C)
Viscosidade
Newtoniana
Dimetro
hidrodinmico
Transmitncia
100
75
50
25
0
T
r
a
n
s
m
i
t
n
c
i
a

(
%
)
64

partculas e transmitncia de luz da amostra com o aumento da temperatura das
solues. Solues de 5wt% PDMAEMA(11k) para as medidas da viscosidade
Newtoniana e transmitncia de luz e de 1wt% para a obteno do dimetro
hidrodinmico das partculas.

0
200
400
600
800
1000
1200
0.001
0.01
0.1
1
10
100
15 20 25 30 35 40 45 50 55
D
i
m
e
t
r
o

h
i
d
r
o
d
i
n
m
i
c
o

(
n
m
)
V
i
s
c
o
s
i
d
a
e

N
e
w
t
o
n
i
a
n
a

(
P
a
.
s
)
T (C)
Viscosidade
Newtoniana
Dimetro
hidrodinmico
Transmitncia
100
75
50
25
0
T
r
a
n
s
m
i
t
n
c
i
a

(
%
)
65

3.4. Propriedades viscoelsticas
Para ambos os polmeros, foram estudadas as mudanas
estruturais da soluo durante a separao de fase, atravs de
testes oscilatrios (mdulos dinmicos: G e G), para duas
temperaturas, uma abaixo e outra acima da LCST.

soluo de PNIPAM(20k) a: a) 30C(<LCST) e b) 37 C (>LCST). A imagem mostra
uma soluo lquida acima da LCST.
0,000001
0,00001
0,0001
0,001
0,01
0,1
1
0,01 0,1 1
G
'
,
G
'
'

(
P
a
)
;

|
*
|
(
P
a
.
s
)

f (Hz)
a)
G'
G''
|*|
0,001
0,01
0,1
1
10
0,01 0,1 1
G
'
,
G
'
'

(
P
a
)
;

|
*
|

(
P
a
.
s
)

f (Hz)
b)
G'
G''
|*|
66

soluo de PNIPAM(39k) a: a) 30C(<LCST) e b) 35 C (>LCST). A imagem mostra um
gel acima da LCST.

A soluo de PNIPAM(20k) um lquido Newtoniano para
ambas as temperaturas (G > G), enquanto a soluo B mostra
um comportamento Newtoniano abaixo da LCST e propriedades
0,00001
0,0001
0,001
0,01
0,1
1
10
0,01 0,1 1
G
'
,
G
'
'

(
P
a
)
;

|
*
|
(
P
a
.
s
)

f (Hz)
a)
G'
G''
|*|
1
10
100
1000
10000
0,01 0,1 1
G
'
,
G
'
'

(
P
a
)
;

|
*
|

(
P
a
.
s
)

f (Hz)
b)
G'
G''
|*|
67

elsticas acima da LCST (G > G). Na figura B pode observar-se
o aspeto de gel que a soluo apresenta acima da LCST. Massas
moleculares, ou concentraes, mais elevados so requeridos
para que haja formao de um gel fsico.

Grfico 19. Mdulo elstico (G) e viscoso (G) em funo da frequncia para: a)
34C(<LCST) e b) 50C (>LCST). A imagem mostra uma soluo lquida acima da
LCST.
0,000001
0,00001
0,0001
0,001
0,01
0,1
1
0,01 0,1 1
G
'
,
G
'
'

(
P
a
)
;

|
*
|
(
P
a
.
s
)

f (Hz)
a)
G'
G''
|*|
0,1
1
10
100
0,01 0,1 1
G
'
,
G
'
'

(
P
a
)
;

|
*
|
(
P
a
.
s
)

f (Hz)
b)
G'
G''
|*|
68

Para as amostras de PDMAEMA o G sempre maior que o G,
o que significa que a soluo tem um carcter lquido.

69

3.5. Reprodutibilidade do sistema PNIPAM-gua

Figura 22. Ciclos de subida e descida da temperatura usando a mesma soluo de
PNIPAM(20k) de 5wt%. a) e c) representam as subidas e b) e d) representam as
descidas. Os grficos foram obtidos pela ordem alfabtica representada, com
velocidades de aquecimento e arrefecimento iguais (1C/3min).

Os ciclos de temperatura seguidos mostram que as solues de
PNIPAM mantm a sua integridade fsica depois de vrias
subidas e descidas de temperatura. portanto, um sistema
perfeitamente reprodutvel para ser usado como sensor de
temperatura, mantendo a credibilidade nas respostas.
As LCST nas curvas de descida indicam que a reversibilidade do
sistema quando em arrefecimento um pouco mais lento, com -
2C de diferena. Isto porque, presumivelmente, so formadas
pontes de hidrognio intramoleculares a elevadas temperaturas
(estado de glbulos), o que torna mais difcil a dissoluo do
polmero quando se torna a arrefecer o sistema.
70

Captulo 4
4. Concluso
O estudo desenvolvido demonstra como a estabilizao das
solues dos dois polmeros podem ser afetadas por fatores
como a concentrao de polmero, o pH (no caso do
PDMAEMA) e a adio de sais, solventes, e surfatantes inicos.
Provou-se como estes fatores podem fazer deslocar a LCST para
valores desejados, consoante a exigncia de cada aplicao.

Para amostras de PNIPAM acima de 20kDa, o peso molecular
no influencia a LCST da soluo. No caso do PDMAEMA, a
LCST diminui com o aumento do peso molecular. Cadeias
maiores reduzem o espao entre polmeros acentuando as
associaes hidrofbicas e a transio de fase ocorre para
temperaturas mais baixas.
A LCST das solues de PNIPAM tambm no afetada pela
variao de concentrao, embora concentraes baixas (2wt%)
revelem incapacidade de formar uma estrutura tridimensional,
existindo apenas pequenssimos aglomerados de glbulos em
soluo. Neste caso a soluo permanece incolor acima da LCST.
Para o PDMAEMA, o aumento de concentrao diminui a LCST,
dado o crescimento das associaes hidrofbicas.
71

A adio de co-solutos e co-solventes revelam alguns resultados
importantes. O etanol tem melhor afinidade com o PDMAEMA
comparativamente gua, tornando o polmero mais solvel e
fazendo aumentar progressivamente a LCST do PDMAEMA.
Por outro lado, diminui a LCST da soluo de PNIPAM at uma
certa frao molar adicionada, formando com a gua um par co-
no-solvente. Quando a quantidade de etanol sobrepe a da
gua, a mistura torna a comportar-se como um bom solvente.
Os sais hidrofbicos como o KSCN, so adsorvidos na cadeia do
polmero adicionando cargas que o mantm solvel at
temperaturas mais elevadas. Os sais hidroflicos competem com
os polmeros pelas ligaes com a gua, desidratando-os
parcialmente e deslocando a LCST para valores mais baixos.
Os surfatantes, tanto aninicos como catinicos, interagem com o
PNIPAM convertendo-o num polielectrlito, solubilizando-o e
deslocando a LCST para valores acima. Contudo, a interao de
surfatantes aninicos com o PNIPAM mais forte do que com
aos catinicos, por isso, para a mesma concentrao adicionada
dos dois surfatantes, o SDS desloca a LCST para temperaturas
mais elevadas relativamente ao CTAB.

O comportamento caracterstico do PNIPAM em soluo, faz
dele um melhor candidato a sensor de temperatura, dada a
rapidez da sua resposta imitando um sistema on/off.

72

O sistema PNIPAM-gua perfeitamente reprodutvel, podendo
ser implementado como sensor de temperatura.

No futuro, seria interessante a combinao das suas
caractersticas com o uso de partculas com emisso de diferentes
comprimentos de onda consoante o ambiente polar ou apolar em
que se encontrem, de maneira a usar as cores como indicao de
uma temperatura corporal normal ou febril.

73

Referncias
1. Kumar, A.; Srivastava, A.; Galaev, I. Y.; Mattiasson, B., Smart
polymers: Physical forms and bioengineering applications. Progress in
Polymer Science 2007, 32 (10), 1205-1237.
2. Schmaljohann, D., Thermo- and pH-responsive polymers in
drug delivery. Advanced Drug Delivery Reviews 2006, 58 (15), 1655-
1670.
3. M.R.Aguilar, C. E., A. Gallardo, B. Vzquez, and J.S. Romn,
Smart Polymers and Their Applications as Biomaterials. Topics in
Tissue Engineering 2007, Vol. 3.
4. Roy, D.; Cambre, J. N.; Sumerlin, B. S., Future perspectives and
recent advances in stimuli-responsive materials. Progress in Polymer
Science 2010, 35 (12), 278-301.
5. Jeong, B.; Gutowska, A., Lessons from nature: stimuli-
responsive polymers and their biomedical applications. Trends in
Biotechnology 2002, 20 (7), 305-311.
6. Galaev, I. Y.; Mattiasson, B., Smart polymers and what they
could do in biotechnology and medicine. Trends in Biotechnology
1999, 17 (8), 335-340.
7. Jagur-Grodzinski, J., Polymeric gels and hydrogels for
biomedical and pharmaceutical applications. Polymers for Advanced
Technologies 2010, 21 (1), 27-47.
8. Chaterji, S.; Kwon, I. K.; Park, K., Smart polymeric gels:
Redefining the limits of biomedical devices. Progress in Polymer
Science 2007, 32 (89), 1083-1122.
9. Ahn, S.-k.; Kasi, R. M.; Kim, S.-C.; Sharma, N.; Zhou, Y., Stimuli-
responsive polymer gels. Soft Matter 2008, 4 (6), 1151-1157.
10. Ward, M. A.; Georgiou, T. K., Thermoresponsive Polymers for
Biomedical Applications. Polymers 2011, 3 (3), 1215-1242.
11. Krister Holmberg, B. J., Bengt Kronberg and Bjorn Lindman,
Surfactants and Polymers in Aqueous Solution. Second Edition ed.;
John Wiley & Sons, Ltd: 2002.
12. Jeong, B.; Kim, S. W.; Bae, Y. H., Thermosensitive solgel
reversible hydrogels. Advanced Drug Delivery Reviews 2002, 54 (1), 37-
51.
13. Plamper, F. A.; Ruppel, M.; Schmalz, A.; Borisov, O.; Ballauff,
M.; Mller, A. H. E., Tuning the Thermoresponsive Properties of Weak
74

Polyelectrolytes: Aqueous Solutions of Star-Shaped and Linear
Poly(N,N-dimethylaminoethyl Methacrylate). Macromolecules 2007,
40 (23), 8361-8366.
14. Teraoka, I., Polymer Solutions: An Introduction to Physical
Properties. John Wiley & Sons, Inc.: 2002.
15. Barker, I. C.; Cowie, J. M. G.; Huckerby, T. N.; Shaw, D. A.;
Soutar, I.; Swanson, L., Studies of the Smart Thermoresponsive
Behavior of Copolymers of N-Isopropylacrylamide and N,N-
Dimethylacrylamide in Dilute Aqueous Solution. Macromolecules
2003, 36 (20), 7765-7770.
16. Qiu, Y.; Park, K., Environment-sensitive hydrogels for drug
delivery. Advanced Drug Delivery Reviews 2001, 53 (3), 321-339.
17. Cho, S. H.; Jhon, M. S.; Yuk, S. H.; Lee, H. B., Temperature-
induced phase transition of poly(N,N-dimethylaminoethyl
methacrylate-co-acrylamide). Journal of Polymer Science Part B:
Polymer Physics 1997, 35 (4), 595-598.
18. Btn, V.; Armes, S. P.; Billingham, N. C., Synthesis and
aqueous solution properties of near-monodisperse tertiary amine
methacrylate homopolymers and diblock copolymers. Polymer 2001,
42 (14), 5993-6008.
19. Liu, R.; Fraylich, M.; Saunders, B., Thermoresponsive
copolymers: from fundamental studies to applications. Colloid &
Polymer Science 2009, 287 (6), 627-643.
20. Liu, G.; Wu, D.; Ma, C.; Zhang, G.; Wang, H.; Yang, S., Insight
into the Origin of the Thermosensitivity of Poly[2-
(dimethylamino)ethyl methacrylate]. ChemPhysChem 2007, 8 (15),
2254-2259.
21. Al-Manasir, .; hu, .; nisen, A.-L.; nudsen, . .;
arlsson, G. r.; ystrm, B., Effects of Temperature and pH on the
Contraction and Aggregation of Microgels in Aqueous Suspensions.
The Journal of Physical Chemistry B 2009, 113 (32), 11115-11123.
22. Pelton, R., Poly(N-isopropylacrylamide) (PNIPAM) is never
hydrophobic. Journal of Colloid and Interface Science 2010, 348 (2),
673-674.
23. Dumitriu, R. P.; Mitchell, G. R.; Vasile, C., Rheological and
thermal behaviour of poly(N-isopropylacrylamide)/alginate smart
polymeric networks. Polymer International 2011, 60 (9), 1398-1407.
24. Winnik, M. N. T. O. a. F. M., Poly(N-isopropylacrylamide)-based
Smart Surfaces for Cell Sheet Tissue Engineering. Material Matters
2010.
75

25. Klaus Tauer, D. G., Susanne Schulze, Antje Vlkel and Rumiana
Dimova, Thermal property changes of poly(N-isopropylacrylamide)
microgel particles and block copolymers. Colloid & Polymer Science
2009, 287, 299312.
26. Pamies, R.; Zhu, K.; Kjniksen, A.-L.; Nystrm, B., Thermal
response of low molecular weight poly-(N-isopropylacrylamide)
polymers in aqueous solution. Polymer Bulletin 2009, 62 (4), 487-502.
27. Zhang, M.; Liu, L.; Zhao, H.; Yang, Y.; Fu, G.; He, B., Double-
responsive polymer brushes on the surface of colloid particles. Journal
of Colloid and Interface Science 2006, 301 (1), 85-91.
28. Zha, L.; Hu, J.; Wang, C.; Fu, S.; Elaissari, A.; Zhang, Y.,
Preparation and characterization of poly ( N-isopropylacrylamide-co-
dimethylaminoethyl methacrylate) microgel latexes. Colloid & Polymer
Science 2002, 280 (1), 1-6.
29. Liu, Q.; Yu, Z.; Ni, P., Micellization and applications of narrow-
distribution poly[2-(dimethylamino)ethyl methacrylate]. Colloid and
Polymer Science 2004, 282 (4), 387-393.
30. Ding, Y.; Zhang, G., Folding of a single polymer chain and phase
transition. Chinese Science Bulletin 2009, 54 (11), 1908-1911.
31. Antunes, F. Mixed Solutions of Polymers and Surfactants. PhD
Thesis, Universidade de Coimbra, Coimbra, 2006.
32. Jiang, X.; Lok, M. C.; Hennink, W. E., Degradable-Brushed
pHEMApDMAEMA Synthesized via ATRP and Click Chemistry for
Gene Delivery. Bioconjugate Chemistry 2007, 18 (6), 2077-2084.
33. Housni, A.; Narain, R., Aqueous solution behavior of p(N-
isopropyl acrylamide) in the presence of water-soluble
macromolecular species. European Polymer Journal 2007, 43 (10),
4344-4354.
34. Tanaka, H. K. a. F., Cooperative Hydration Induces
Discontinuous Volume Phase Transition of Cross-Linked Poly(N-
isopropylacrylamide) Gels in Water. Macromolecules 2010, 43, 5103
5113.
35. Tanaka, F.; Koga, T.; Kojima, H.; Winnik, F., Hydration and
phase separation of temperature-sensitive water-soluble polymers.
Chinese Journal of Polymer Science 2011, 29 (1), 13-21.
36. Kojima, H.; Tanaka, F., Cooperative Hydration Induces
Discontinuous Volume Phase Transition of Cross-Linked Poly(N-
isopropylacrylamide) Gels in Water. Macromolecules 2010, 43 (11),
5103-5113.
76

37. Tanaka, F.; Koga, T.; Winnik, F., Competitive Hydrogen Bonds
and Cononsolvency of Poly(N-isopropylacrylamide)s in Mixed Solvents
of Water/Methanol Gels: Structures, Properties, and Functions.
Springer Berlin / Heidelberg: 2009; Vol. 136, pp 1-7.
38. Sarkar, N., Kinetics of thermal gelation of methylcellulose and
hydroxypropylmethylcellulose in aqueous solutions. Carbohydrate
Polymers 1995, 26 (3), 195-203.
39. Hussain, S.; Keary, C.; Craig, D. Q. M., A thermorheological
investigation into the gelation and phase separation of hydroxypropyl
methylcellulose aqueous systems. Polymer 2002, 43 (21), 5623-5628.
40. Bostrm, M.; Williams, D. R. M.; Ninham, B. W., Why the
properties of proteins in salt solutions follow a Hofmeister series.
Current Opinion in Colloid & Interface Science 2004, 9 (12), 48-
52.
41. Zhang, Y.; Furyk, S.; Bergbreiter, D. E.; Cremer, P. S., Specific Ion
Effects on the Water Solubility of Macromolecules: PIPAM and the
Hofmeister Series. Journal of the American Chemical Society 2005, 127
(41), 14505-14510.
42. Freitag, R.; Garret-Flaudy, F., Salt Effects on the
Thermoprecipitation of Poly-(N-isopropylacrylamide) Oligomers from
Aqueous Solution. Langmuir 2002, 18 (9), 3434-3440.
43. Zhang, Y.; Furyk, S.; Sagle, L. B.; Cho, Y.; Bergbreiter, D. E.;
Cremer, P. S., Effects of Hofmeister Anions on the LCST of PNIPAM as a
Function of Molecular Weight. The Journal of Physical Chemistry C
2007, 111 (25), 8916-8924.
44. Zhang, Y.; Cremer, P. S., Interactions between macromolecules
and ions: the Hofmeister series. Current Opinion in Chemical Biology
2006, 10 (6), 658-663.
45. Sjstrm, J. Surfactant Responsive Cross-Linked Polymer
Hydrogels. PhD Thesis, Lund University, Lund, 2002.
46. Loh, W.; Teixeira, L. A. C.; Lee, L.-T., Isothermal Calorimetric
Investigation of the Interaction of Poly(N-isopropylacrylamide) and
Ionic Surfactants. The Journal of Physical Chemistry B 2004, 108 (10),
3196-3201.
47. Zeng, X.; Osseo-Asare, K., Partitioning behavior of silica in the
PEG/dextran/H2O aqueous biphasic system. Colloids and Surfaces A:
Physicochemical and Engineering Aspects 2003, 226 (13), 45-54.
48. Sperling, L. H., INTRODUCTION TO PHYSICAL POLYMER
SCIENCE. F ed.; John Wiley & Sons, Inc: 2006.
77

49. Khan, A. U.; Mahmood, N.; Bazmi, A. A., Direct comparison
between rotational and extrusion rheometers. Materials Research
2009, 12, 477-481.
50. Sunthar, P., 1 Phenomenology. In Polymer Rheology,
Department of Chemical Engineering, Indian Institute of Technology
(IIT) Bombay.
51. Barnes, H. A., A HANDBOOK OF ELEMENTARY RHEOLOGY.
University of Wales Institute of Non-Newtonian Fluid Mechanics:
2000.
52. Filipe E. Antunes, L. G., Lorena Tavano, Cesare Oliviero Rossi,
Rheological characterization of the thermal gelation of poly(N-
isopropylacrylamide) and poly(N-isopropylacrylamide)co-Acrylic Acid.
Applied Rheology 2009, 19 (4), 42064.
53. Ferreira, E. E.; Brando, P. R. G.; Klein, B.; Peres, A. E. C.,
Reologia de suspenses minerais: uma reviso. Rem: Revista Escola de
Minas 2005, 58, 83-87.
54. Malvern Dynamic Light Scattering (DLS).
http://www.malvern.com (accessed 17-05-2012).
55. Malvern Dynamic Light Scattering: An Introduction in 30
Minutes; Malvern Instruments Ltd.
56. Coulter, B. Your solution for nanoparticle sizing and zeta
potential measurements; Beckman Coulter, Inc: 2008.
57. AG, L. I. http://www.lsinstruments.ch (accessed 17-05-2012).
58. Technology, W. http://www.wyatt.eu (accessed 17-05-2012).
59. Rowle, A., "The basic principles of particle size analysis", Part 3
- Light scattering techniques for PSA. Malvern Instruments, Inc.: 2011.
60. Fujishige, S.; Kubota, K.; Ando, I., Phase transition of aqueous
solutions of poly(N-isopropylacrylamide) and poly(N-
isopropylmethacrylamide). The Journal of Physical Chemistry 1989, 93
(8), 3311-3313.
61. Tanaka, F.; Koga, T.; Winnik, F. M., Temperature-Responsive
Polymers in Mixed Solvents: Competitive Hydrogen Bonds Cause
Cononsolvency. Physical Review Letters 2008, 101 (2), 028302.
62. Patel, T.; Ghosh, G.; Yusa, S.-i.; Bahadur, P., Solution Behavior
of Poly(n-Isopropylacrylamide) in Water: Effect of Additives. Journal of
Dispersion Science and Technology 2011, 32 (8), 1111-1118.

Caracterização de Polimeros Inteligentes para Aplicações Biomedicas

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Caracterização de Polimeros Inteligentes para Aplicações Biomedicas

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Maria Carolina Morando Costa

MESTRADO INTEGRADO EM ENGENHARIA BIOMDICA

Anda mungkin juga menyukai