UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL

INSTITUTO DE QUMICA





ALANA CARINA KLEIN






CROMATOGRAFIA INICA COMO MTODO ANALTICO
ALTERNATIVO PARA A ANLISE QUANTITATIVA DE ANALITOS










Porto Alegre, 2010.
1

UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL

INSTITUTO DE QUMICA



ALANA CARINA KLEIN




CROMATOGRAFIA INICA COMO MTODO ANALTICO
ALTERNATIVO PARA A ANLISE QUANTITATIVA DE ANALITOS





Trabalho de concluso de curso apresentado junto
atividade de ensino Projeto Tecnolgico do
curso de Qumica Industrial, como requisito parcial
para obteno do grau de Qumico Industrial.

Prof. Tnia Mara Pizollato
Orientadora




Porto Alegre, 2010.
2

AGRADECIMENTOS

Primeiramente, agradeo a toda minha famlia, em especial aos meus pais,
Carlos e Ins, que estiveram presentes ao longo desta trajetria, sempre me orientando,
me acolhendo e me incentivando a seguir adiante em busca de meus sonhos. E tambm
por me entenderem nos momentos de ausncia, principalmente nesta ltima etapa, no
trabalho de concluso de curso.
Agradeo, em especial, ao Ado, pelo amor e compreenso nos momentos de
ausncia.
Agradeo minha orientadora, Tnia Mara Pizzolato, por estar presente e atenta
durante toda a elaborao do meu trabalho de concluso de curso.
E, finalmente, agradeo Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)
e ao Instituto de Qumica, pelo ensino de elevada qualidade e infra-estrutura, que me
proporcionaram uma formao acadmica de excelente qualidade.












3

LISTA DE ABREVIATURAS

1. CP Cromatografia em Papel....................................................................Figura 1
2. CCD Cromatografia em Camada Delgada..............................................Figura 1
3. CGL Cromatografia Gasosa-Lquida......................................................Figura 1
4. CGS Cromatografia Gasosa-Slida........................................................Figura 1
5. CGFL Cromatografia Gasosa com Fase Ligada.....................................Figura 1
6. CSS Cromatografia Slida Supercrtica..................................................Figura 1
7. CSFL Cromatografia Slida em Fase Ligada.........................................Figura 1
8. CLL Cromatografia Lquido-Lquido.....................................................Figura 1
9. CLS Cromatografia Lquido-Slido.......................................................Figura 1
10. CLFL Cromatografia Lquida com Fase Ligada.....................................Figura 1
11. CTI Cromatografia por Troca Inica......................................................Figura 1













4

SUMRIO
1. Introduo............................................................................................................07
2. Reviso Bibliogrfica
2.1 Mtodos Cromatogrficos
2.1.1 Introduo Geral................................................................................08
2.1.2 Classificao Geral............................................................................08
2.1.3 Termos Tcnicos................................................................................10
2.1.4 Cromatografia Gasosa.......................................................................11
2.1.5 Cromatografia Lquida......................................................................15
2.1.6 Comparao entre Cromatografia Lquida e Gasosa.........................19
2.2 Cromatografia Inica
2.2.1 Introduo.........................................................................................19
2.2.2 Histrico............................................................................................20
2.2.3 Aplicaes.........................................................................................20
2.2.4 Princpios Bsicos..............................................................................21
2.2.5 Capacidade do trocador de ons.........................................................23
2.2.6 Seletividade.......................................................................................23
3. Sistema de Controle de Qualidade atual da Salbego Laboratrio Farmacutico
3.1 Introduo......................................................................................................24
3.2 Espectofotmetro...........................................................................................24
3.3 Fotmetro de chama......................................................................................26
3.4 Easylyte.........................................................................................................27
4. Metodologia
4.1 Introduo......................................................................................................28
4.2 Fase mvel.....................................................................................................28
4.3 Coluna Analtica (Fase estacionria).............................................................29
4.4 Detectores
4.4.1 Mtodos Eletroqumicos....................................................................30
4.4.2 Detector Espectomtrico....................................................................31
5. Cromatografia Inica para o sistema de Controle de Qualidade Sugesto de
melhoria...............................................................................................................32
5.1 Ordem de eluio dos analitos.......................................................................32
5.2 Concentrao dos analitos.............................................................................33
5

5.3 Comparao entre o sistema atual e a proposta de Cromatografia Inica na

determinao de analitos...............................................................................36
5.3.1 Tempo de anlise...............................................................................36
5.3.2 Viabilidade econmica......................................................................37
5.3.3 Confiabilidade do sistema.................................................................39
5.4 Discusso de resultados.................................................................................40
6. Concluso............................................................................................................41
7. Referncias Bibliogrficas...................................................................................42

RESUMO

O presente trabalho est dividido em seis captulos. O primeiro captulo uma
introduo geral.
O segundo captulo, chamado de Reviso Bibliogrfica, fornece um panorama
geral a respeito dos mtodos cromatogrficos existentes, dando uma nfase maior
cromatografia lquida e gasosa. Em um segundo momento, faz-se uma explanao
detalhada a respeito do funcionamento da tcnica adotada, a Cromatografia Inica, em
substituio ao sistema atual, que utiliza os equipamentos Espectrofotmetro, Easylyte e
Fotmetro de Chama na determinao de analitos. Ento, citam-se exemplos de
aplicaes desta tcnica, seu desenvolvimento enquanto tcnica analtica, princpios
bsicos e uma explicao geral relacionado aos trocadores inicos.
No terceiro captulo, chamado de Sistema de Controle de Qualidade atual da
Salbego Laboratrio Farmacutico, faz-se uma explanao do sistema adotado pelo
setor, assim como os equipamentos utilizados para as anlises de controle de qualidade.
No quarto captulo, define-se a Cromatografia Catinica como proposta
analtica, definindo variveis adequadas para os analitos em questo, tais como: eluente,
fase estacionria, assim como os sistemas de deteco necessrios para a
reprodutibilidade de resultados.
No quinto captulo, apresenta-se como exemplo, um cromatograma para
determinao dos mesmos ctions que so atualmente determinados no Controle de
Qualidade para a produo do medicamento Concentrado Polieletroltico para
Tratamento da Hemodilise. Alm disso, apresenta-se, as curvas analticas referentes a
cada um dos ctions em estudo, assim como uma comparao entre os dois sistemas, em
relao ao tempo de anlise, a viabilidade econmica e a confiabilidade da tcnica.
Por fim, tem-se uma concluso a respeito da proposta, principalmente em
relao a sua viabilidade.



7

1. INTRODUO

Atualmente, h uma grande preocupao por parte das indstrias qumicas em
atender as exigncias de um mercado cada vez mais competitivo, buscando sempre
qualidade e baixo custo para aquilo que produzido. Em vista disso, o Controle de
Qualidade de uma empresa torna-se um dos setores mais importantes, tendo em vista
que este o setor responsvel pela qualidade do produto, recebendo ento, cada vez
mais investimento por parte dos empresrios.
Dentro deste contexto, a Qumica Analtica ganha cada vez mais espao, sendo
ela a responsvel por resultados precisos e confiveis, que garantem se o produto est
ou no dentro de especificaes determinadas. A Cromatografia, por sua vez, atua como
o mtodo de separao e anlise mais utilizado atualmente, determinando,
quantitativamente, o que est presente na amostra.
Neste trabalho, ser investigada a Cromatografia por Troca Inica como
mtodo alternativo para a determinao de ctions presentes em amostras do Controle
de Qualidade da Salbego Laboratrio Farmacutico, substituindo o mtodo utilizado
atualmente, que utiliza os equipamentos Easylyte, Espectrofotmetro e o Fotmetro de
Chama na determinao destes analitos. O objetivo deste trabalho a otimizao do
sistema atual, tendo em vista melhores resultados, em termos de confiabilidade,
reprodutibilidade e tempo de anlise.









8

2. REVISO BIBLIOGRFICA
2.1 Mtodos Cromatogrficos
2.1.1 Introduo Geral
A cromatografia uma ferramenta analtica que abrange um conjunto de
mtodos fsico-qumicos de separao com caractersticas bsicas comuns. As
separaes cromatogrficas envolvem, invariavelmente, o transporte dos componentes
de uma mistura atravs de uma coluna (ou equivalente fsico). Esta coluna contm uma
fase estacionria, que pode ser lquida ou slida, capaz de interagir com os componentes
da mistura. O transporte dos componentes atravs desta fase estacionria est a cargo da
fase mvel, que pode ser gasosa ou lquida.
A fase estacionria (FE) exerce um papel de retardamento seletivo com a fase
mvel (FM), na medida em que retarda a passagem dos componentes da mistura,
determinando diferentes velocidades efetivas para cada um dos componentes presentes
na amostra. Em conseqncia desta migrao diferencial, os vrios componentes
tendem a se agregar em diferentes bandas, distribuindo-se entre a FE e a FM.
O processo de passagem de um lquido ou de um gs por uma coluna
cromatogrfica conhecido como eluio, enquanto o fluido que entra na coluna o
eluente, aquele que emerge ao final dela o eluato.

2.1.2 Classificao
So vrios os critrios usados para a classificao das diferentes modalidades
de cromatografia, sendo mais comuns aqueles relacionados tcnica empregada, ao
mecanismo de separao envolvido e aos diferentes tipos de fases utilizadas.
A forma fsica do sistema de cromatografia define a tcnica geral: a fase
estacionria pode ser colocada em um tubo cilndrico ou disposta sobre uma superfcie
planar. Baseando-se nesta, a cromatografia pode ser subdividida em cromatografia em
coluna e cromatografia planar. Na primeira, de acordo com o tamanho do dimetro
interno do tubo, tm-se as colunas preparativas (6-50 mm), analticas (2-6 mm), com
microdimetro (1-2 mm) e capilares ( 1 mm). As colunas preparativas e analticas
sempre apresentam a fase estacionria na forma de partculas, e a fase ativa na
separao pode ser um slido ou um lquido, que tanto pode recobrir a superfcie do
slido como estar quimicamente ligado a ele. As colunas com microdimetro e as
colunas capilares tambm podem ser recheadas com a fase estacionria particulada, ou
9

podem possuir a fase estacionria sob a forma de um filme ou de partculas somente

aderidas s paredes do tubo.
Considerando o estado fsico da fase mvel, distingue-se a cromatografia
gasosa, na qual a fase mvel um gs inerte, a cromatografia lquida, na qual a fase
mvel um lquido que pode interagir com os solutos, participando da separao, e a
cromatografia supercrtica, na qual se usa como fase mvel um vapor pressurizado, em
temperatura e presso acima de seu ponto crtico, com as vantagens de ter viscosidade
menor que um lquido, mas mantendo as propriedades de interao com os solutos.
A cromatografia lquida em coluna divide-se em dois grupos: a cromatografia
lquida clssica, feita em colunas de vidro, sob presso atmosfrica, com o fluxo da
fase mvel devido fora da gravidade (por isso esta tcnica tambm chamada
cromatografia lquida por fora da gravidade); e a cromatografia lquida que
normalmente utiliza colunas metlicas e presses da fase mvel elevadas, obtidas com
auxlio de uma bomba de elevada presso (por isso, , as vezes, chamada
cromatografia lquida de alta presso), que pode empurrar a fase mvel com vazo
mais rpida, resultando em outro nome, cromatografia lquida de alta velocidade. A
expresso inglesa atribuda a essa modalidade, high-performanceliquidchromatografy,
tem sido traduzida literalmente por cromatografia lquida de alto desempenho,
designada desta forma devido a sua elevada eficincia atingida na separao.
O estado fsico da fase estacionria pode ser lquido ou slido. O lquido pode
estar simplesmente espalhado sobre um suporte slido ou imobilizado sobre este. A
imobilizao pode envolver ligaes qumicas entre o lquido e o suporte, ou somente
entre as cadeias do prprio lquido. Devido s vantagens de volatilidade e solubilidade
reduzidas atribudas s fases estacionrias contendo o lquido ativo na separao
quimicamente imobilizado sobre o suporte, comum considerar-se esta uma categoria
distinta, ou seja, a cromatografia com fase ligada. Justifica-se essa distino pelo fato de
seu mecanismo de separao diferir com frequncia dos mecanismos atribudos s fases
estacionrias lquidas ou slidas
1,2,34
.
A figura a seguir mostra as classificaes da cromatografia, segundo as formas
fsicas mais encontradas.


10

Figura 1. Classificao da cromatografia pelas formas fsicas das fases mveis e
estacionrias
4
.


2.1.3 Termos tcnicos
A cromatografia tem aplicaes qualitativas e quantitativas, obtidas por meio da
anlise do cromatograma depois de seu desenvolvimento, quer diretamente na superfcie
planar quer pelo sinal registrado aps o eluato de uma coluna passar por um detector. Os
mtodos para obteno de informaes quantitativas so especficos para cada tipo de
cromatografia.
A cromatografia em coluna procede com fluxo contnuo da fase mvel, at que
todos os componentes tenham sado da coluna e sua presena seja detectada por um
detector e indicada graficamente. Alternativamente, o eluato pode ser coletado em
fraes de volumes idnticos, suas concentraes medidas e o cromatograma
construdo, considerando-se o nmero do tubo de cada frao equivalente a uma
unidade de tempo, expressa normalmente em minutos. Este tempo chamado de tempo
de reteno, o tempo gasto desde a injeo at a sada do ponto mximo do pico,
impressa pelos dispositivos eletrnicos, frequentemente acoplados a sistemas
automatizados
4
.
11

No cromatograma apresentado na figura abaixo, a linha de base representa a

passagem da fase mvel apenas atravs do detector. Quando os componentes da amostra
eluem, registram-se picos cujos perfis so proporcionais s concentraes respectivas.
Denomina-se d
R
a distncia percorrida pelo analito desde o instante da injeo da
amostra na coluna at o mximo do pico traado, e d
M
a distncia desde a injeo at a
eluio de um componente que no interage com a fase estacionria (um composto
chamado de no-retido).

Figura 2. Cromatograma tpico obtido por cromatografia em coluna.
4


2.1.4 Cromatografia Gasosa
2.1.4.1 Introduo
A tcnica de desenvolvimento usada em cromatografia gasosa a eluio. Uma
corrente de gs passa continuamente pela coluna e, quando a amostra vaporizada
introduzida rapidamente nessa corrente de gs, ela arrastada atravs da coluna. As
substncias presentes na amostra, depois de separadas, chegam ao detector, que gera um
sinal para um sistema de registro e tratamento de dados.
De acordo com o tipo de fase estacionria usada, a cromatografia gasosa pode
ser classificada em cromatografia gs-slido e cromatografia gs-lquido. Na
cromatografia gs-slido, a fase estacionria um slido com uma grande rea
superficial e a separao baseia-se em mecanismos de adsoro das substncias nesse
12

slido. utilizada, principalmente, na anlise de gases permanentes e compostos

apolares de massa molar baixa. Na cromatografia gs-lquido, a fase estacionria um
lquido pouco voltil. A separao baseia-se em mecanismos de partio das substncias
entre a fase lquida e a fase gasosa. A sua utilizao corresponde a cerca de 95% do total
de aplicaes.


2.1.4.2 Funcionamento geral
O funcionamento geral de um cromatgrafo gasoso baseia-se no arraste da
amostra pelo gs de arraste. Este gs, conhecido como fase mvel, carrega a amostra
durante sua eluio pela coluna, chegando at o detector, onde detectado e registrado
pelo sistema em forma de um sinal. A figura a seguir representa de forma esquemtica
este funcionamento.

Figura 3. Esquema de funcionamento de um cromatgrafo a gs.
4

2.1.4.3 Coluna cromatogrfica
A coluna cromatogrfica um tubo longo, contendo a fase estacionria. Esse
tubo pode ser de cobre, ao inoxidvel, alumnio, vidro, slica fundida, entre outros.
Idealmente, o material de construo da coluna no deve interagir com o recheio, nem
com as substncias presentes na amostra.
As colunas podem ser classificadas em colunas recheadas (analticas) e
capilares. As colunas recheadas so geralmente feitas de ao inoxidvel ou de vidro,
optando por colunas polimricas (politetrafluoretileno) quando forem utilizadas para
13

anlise de compostos corrosivos. O formato da coluna varia de acordo com o aparelho,

sendo normalmente encontradas em espiral.
As colunas capilares forem introduzidas em 1958, sendo, atualmente,
empregadas na grande maioria das aplicaes. Dentre algumas vantagens da utilizao
deste tipo de coluna, pode-se citar: h um aumento significativo no nmero de pratos
por coluna, pois a presso muito menor do que em colunas recheadas, ento, o
comprimento da coluna pode ser bem maior; existe a eliminao do alargamento de
bandas, devido a irregularidade no enchimento, bem como anlises mais rpidas,
mesmo em baixas temperaturas.
5,6

2.1.4.4 Sistemas de deteco
As substncias presentes na amostra passam atravs da coluna, onde so
separadas, e chegam ao sistema de deteco. extremamente importante a escolha do
detector ideal, que atenda as necessidades da amostra e certas caractersticas devem ser
atendidas, como: seletividade (sendo o detector mais seletivo perante a substncia
analisada, melhor ser sua separao e deteco), sensibilidade, rudo (so efeitos
eletrnicos do sistema de deteco, que devem ser mnimos) e o sistema deve detectar a
mnima presena de substncia, para uma anlise correta. Dentre os detectores
existentes para a cromatografia gasosa, pode-se citar: por condutividade trmica, por
ionizao em chama e por captura de eltrons.
Os detectores por condutividade trmica so de resposta universal, isto , no
seletivos, baseando-se no princpio de que um corpo quente perde calor a uma
velocidade que depende da composio dos gases que o circundam. Este corpo quente
um conjunto de filamentos metlicos (platina, tungstnio, nquel) dentro de um bloco
metlico. O gs de arraste usado com este detector deve ter uma condutividade trmica
elevada, isto , massa molar pequena. Sendo a amostra geralmente constituda por
molculas de elevadas massas molares, provocando, ento, uma diminuio da
condutividade do gs. A perda de calor do filamento, provocada pela diminuio de
condutividade, medida para gerar um sinal.
Os detectores por ionizao em chama so bastante populares devido aos seus
nveis de detectabilidade e resposta quase universal. Seu funcionamento baseia-se na
queima de molculas presentes no gs de arraste por uma chama, formando ons, que
so coletados por um eletrodo. A corrente gerada amplificada e capturada e, ento,
convertida em voltagem.
14

Os detectores por captura de eltrons so detectores seletivos, respondendo a

compostos orgnicos halogenados, aldedos conjugados, nitrilas, nitratos e
organometlicos. Seu funcionamento baseia-se na passagem do gs de arraste (N
2
) pelo
detector, sendo ionizado por partculas beta emitidas por uma fonte de
63
Ni, produzindo
eltrons, que so coletados em um nodo. Ento, molculas eluindo da coluna, capazes
de capturar eltrons, diminuem essa corrente de eltrons, gerando um sinal proporcional
a sua concentrao.
7,8

2.1.4.5 Cromatogramas
A seguir, so apresentados alguns exemplos de cromatogramas, obtidos a
partir dos sistemas de deteco citados acima.


Figura 4. Cromatograma obtido para a anlise do gs da FCC (gases oriundos dos
processos de craqueamento cataltico em leito fluidizado), utilizando cromatgrafo
SCD-DP, com coluna em tubo sulfinert de 2 m de comprimento e detector por ionizao
em chama.
9

15

Figura 5. Cromatograma obtido para a anlise e quantificao de piretrides em gua,
utilizado cromatgrafoShimadzu GC 17 A, com detector por captura de eltrons e uma
coluna capilar Agilent Technologies HP-5 de 30 cm de comprimento.
10

2.1.5 Cromatografia Lquida
2.1.5.1 Introduo
A cromatografia lquida de alta eficincia um importante membro de toda
uma famlia de tcnicas de separao, uma vez que consegue separar misturas que
contm um grande nmero de compostos similares. Ela tem a capacidade de realizar
separaes e anlises quantitativas de uma grande variedade de compostos presentes em
diversos tipos de amostras, em escala de tempo de poucos minutos, com alta resoluo,
eficincia e detectabilidade.
Dentro da cromatografia lquida, existem diferentes mecanismos que
governam as separaes de misturas. De acordo com estes mecanismos, pode-se
classificar a cromatografia lquida em: cromatografia por adsoro, cromatografia por
partio, cromatografia com fase ligada, cromatografia lquida quiral, cromatografia por
troca inica, cromatografia por bioafinidade e cromatografia por excluso.

2.1.5.2 Princpio geral de funcionamento
Existe uma ampla variedade de cromatgrafos lquidos que se diferenciam
pelo custo, versatilidade e complexidade. Certas caractersticas devem ser avaliadas
antes da aquisio de um equipamento, tais como: versatilidade (o equipamento deve
ser capaz de analisar diferentes tipos de amostras e realizar um nmero mximo de
16

operaes), rapidez na anlise de amostras, estabilidade e detectabilidade (o

equipamento deve gerar sinais aprecveis, mesmo com pequenas quantidades de
amostra).
Apesar do grande nmero de equipamentos existentes para cromatografia
lquida, eles seguem uma linha de funcionamento, que representada a seguir.


Figura 6. Esquema de um cromatgrafo lquido
4
.

Antes de injetar a amostra, a fase mvel bombeada sob alta presso e a uma
vazo controlada at obter uma linha de base estvel. Uma pequena quantidade de
amostra introduzida por meio de uma vlvula de injeo, sendo arrastada pela fase
mvel atravs da coluna. A FM, contendo os componentes da amostra, ao sair da coluna
chega ao detector, que gera um sinal proporcional concentrao do soluto, que
enviado para um sistema de registro e tratamento de dados, produzindo um
cromatograma.

2.1.5.3 Colunas cromatogrficas
Em um cromatgrafo lquido, podem ser usados trs tipos de colunas: a coluna
de saturao, a coluna de separao e a coluna de guarda.
17

A coluna de saturao, tambm conhecida como pr-coluna, colocada entre a

bomba e o injetor e utilizada para condicionar a fase mvel. Mas, com a utilizao das
fases quimicamente ligadas, no h necessidade de usar este tipo de coluna, cujo recheio
igual a de uma coluna de separao.
A coluna de guarda colocada entre o injetor e a coluna de separao. Ela
possu a finalidade de proteger a coluna de separao, aumentando seu tempo de uso,
prevenindo que impurezas, como compostos fortemente retidos, contaminem a coluna
de separao.
A coluna de separao considerada o corao do sistema cromatogrfico, que
vez que responsvel pela separao dos componentes presentes na amostra. Elas so
consitudas de um pedao de tubo de material inerte, capaz de resistir s presses que
podem ser utilizadas. O ao inoxidvel o mais usado entre todos os materiais, e alguns
tubos de plstico duro so encontrados para uso em determinaes de traos de metais.

2.1.5.4 Sistemas de deteco
O detector mede, de forma contnua, alguma propriedade fsica ou fsico-
qumica da amostra, ou da soluo que a contm, e envia um sinal para registro,
geralmente diretamente proporcional concentrao da componente na amostra. Dentre
os mtodos existentes, pode-se dividi-los em detectores seletivos e no seletivos. Os
detectores seletivos so os que respondem, diretamente, a uma mudana na propriedade
fsica do analito, enquanto os detectores no seletivos reagem a uma alterao na
propriedade fsica do on eluente, causado pela eluio do on analito.
Os mtodos de deteco aplicados na cromatografia lquida so divididos em
duas classes, os mtodos eletroqumicos e os mtodos espectomtricos. Deteces por
condutometria e amperometria so ditos mtodos eletroqumicos enquanto os mtodos
espectomtricos incluem deteco Fotomtrica, Fluorescncia e ndice de Refrao. Na
maioria dos casos, a escolha do mtodo de deteco depende, principalmente, dos
analitos a serem separados e do eluenteesolhido.
Posteriormente, sero exemplificados alguns destes mtodos, assim como suas
aplicaes.
11,12


18

2.1.5.5 Cromatogramas
A seguir, so apresentados alguns exemplos de cromatogramas, obtidos a partir
dos sistemas de deteco citados acima.

Figura 7. Cromatograma obtido por cromatografia lquida dos carotenides presentes no
mamo, utilizando uma coluna analtica monomrica C18, de comprimento de 150
mm.
13

Figura 8. Cromatogramade hidrocarbonetos policclicos aromticos presentes no
guaran em p, utilizando cromatgrafo Walters com deteco por fluorescncia e
coluna C18.
14
19

2.1.6 Comparao entre Cromatografia Gasosa e Cromatografia Lquida
Em termos gerais, na cromatografia gasosa, necessrio que a amostra seja
suficientemente voltil, a fim que possa passar atravs da coluna na forma de vapor, e
estvel termicamente, para no se decompor nas condies de separao. Pode-se
aumentar a sua volatilidade, derivando os compostos ou aumentando a temperatura de
trabalho, que tem seu limite em, aproximadamente 400 C. Por isso, somente os gases e
cerca de 20% dos compostos orgnicos conhecidos podem ser analisados com este
mtodo.
J na cormatografia lquida, a amostra deve ser solvel na fase mvel, sendo
considerado o mtodo ideal para a separao de espcies inicas ou macromolculas de
interesse biolgico e produtos naturais lbeis, bem como uma imensa variedade de
outros compostos de massa molar alta e estabilidade trmica baixa.
Em comparao com as duas tcnicas cromatogrficas, a cromatografia gasosa
possui uma menor aplicao, mas possui menores tempos de anlise, melhores limites
de deteco e a instrumentao mais fcil de ser manuseada. J a cromatografia lquida
possui alta resoluo, resultados quantitativos, boa detectabilidade, pecando apenas no
fato de ser considerada uma tcnica cara.


2.2 Cromatografia Inica
2.2.1 Introduo
A cromatografia inica encontra-se no grupo em que a fase estacionria um
slido e a fase mvel um lquido, sendo uma subdiviso do grupo conhecido como
cromatografia lquida.
uma tcnica bastante difundida, tendo em vista a sua aplicabilidade em
amostras que contenham ons, possuindo boa reprodutibilidade e confiabilidade. Nesta
tcnica cromatogrfica, a fase estacionria possui trocadores inicos (catinicos ou
aninicos) formados a partir de polmeros de estireno divinil-benzeno ou de slicas
funcionalizadas.



20

2.2.2 Histrico
A extrao de ons metlicos de solues aquosas utilizando resinas de troca
inica uma tcnica que vem sendo utilizada com sucesso desde meados do sculo
XIX. As primeiras observaes, registradas na literatura, referentes a troca inica, foram
feitas por Way e por Thompson em 1850. Esses pesquisadores descobriram a
capacidade dos solos de removerem ons NH
4+
de solues que os atravessavam,
substituindo-os por uma quantidade equivalente de ons Ca
2+
. A partir destas
observaes, foram feitas vrias tentativas visando produzir trocadores inicos
inorgnicos mais apropriados. As principais dificuldades encontradas estavam
relacionadas basicamente com o acesso s espcies a serem trocadas no material
utilizado como suporte. Isso refletia em uma baixa capacidade de troca, aliada
dificuldade na regenerao dos trocadores inicos para sua reutilizao. Apesar das
dificuldades encontradas, a recompensa pelos esforos investidos foi conseguida com a
aplicao do processo de troca inica no tratamento da gua.
Em 1917, a literatura registrou uma das primeiras tentativas de emprego do
processo de troca inica para resolver problemas analticos na rea da bioqumica. O
trabalho desenvolvido por Folin e Bell relata a utilizao do mtodo para a
determinao do teor de amnio na urina.
Por volta de 1935, comearam a ser produzidas resinas de troca inica
orgnicas muito mais eficientes que passaram a constituir um meio qumico de valor
extraordinrio em processos analticos.
O termo Cromatografia Inica foi introduzido em 1975, pelos pesquisadores
Small, Stevens e Baumann, abrangendo termos como troca inica, excluso inica e
cromatografia lquida de elevada performance (HPLC). Atualmente, a Cromatografia
Inica o mtodo dominante na determinao de nions, ao invs de mtodos de
espectroscopia atmica, comumente utilizado para a determinao de ctions.
15

2.2.3 Aplicaes
A Cromatografia inica apresenta muitas aplicaes em vrias reas do
conhecimento, em especial na Qumica, Biologia e Bioqumica, tanto na pesquisa
quanto na indstria. Entre as aplicaes gerais e mais rotineiras, pode-se citar a
deionizao da gua e de muitos licores aucarados de frutos, bem como a
despigmentao destes, sendo produzidas resinas polimricas especficas para estes fins.
21

Em Qumica Analtica, a principal aplicao na anlise de ctions e nions

em guas ou solues aquosas diludas.
No campo da Biologia, a cromatografia por troca inica encontra aplicao na
separao de isoenzimas. Estas macromolculas possuem massas moleculares prximas,
sendo a separao baseada ento, em processos de diferena de carga eltrica.
No campo da Bioqumica, esta tcnica vem sendo intensamente utilizada em
autoanalisadores de aminocidos. O trabalho pioneiro de Spackman, Stein e Moore em
1958, no Instituto de Rockefeller em Nova York, conseguiu um esquema funcional de
separao de aminocidos, utilizando duas colunas de cromatografia, uma para
aminocidos neutros e cidos e outra para aminocidos bsicos.
16

2.2.4 Princpios Bsicos
Na cromatografia inica, o mecanismo que rege o processo de separao, o
da interao eletrosttica entre os ons presentes na amostra e os contra-ons da FE que
possui grupos com carga. Os grupos derivados do cido sulfnico e do cido carboxlico
so utilizados para a troca de ctions, enquanto que os sais de amnio quaternrio e
aminas so utilizados como trocadores de nions.
O processo de troca inica ocorre na condio de equilbrio, e a eficincia da
separao destes ons depende fortemente da interao existente entre eles e os
grupamentos funcionais da fase estacionria. A figura a seguir representa, de forma
esquemtica, o processo de troca catinica e aninica. Os ons da soluo que est sendo
analisada so representados pela letra A, enquanto os ons eluentes que competem com
eles so representados pela letra E
12
.
22

Figura 9. Esquema representando a eluio dos ons durante o processo
cromatogrfico
12
.

Em geral, o trocador de ons um polmero complexo cuja carga eltrica
exatamente neutralizada pelas cargas dos contra-ons. Estes contra ons so ctions em
um trocador de ctions e nions em um trocador de nions. A figura a seguir representa
uma resina de troca catinica tpica, largamente utilizada. Ela obtida pela co-
polimerizao do estireno com uma pequena proporo de divinil-benzeno, seguida da
sulfonao. Observa-se a presena de ctions H
+
evidenciando o carter cido deste tipo
de resina.

Figura 10. Representao de um trocador de ctions
16
.
23

Os trocadores de nions so de carter bsico, devido a presena de bases
fracas, como o grupamento amino. Um dos trocadores de nions mais utilizados
preparado pela co-polimerizao de estireno com um pouco de divinil-benzeno, seguida
por cloro-metilao e reao com uma base como a trimetilamina. A figura abaixo
representa a estrutura hipottica de uma resina de troca de nions derivada de
poliestireno.
16

Figura 11. Representao de um trocador de nions
16
.
2.2.5 Capacidade do trocador de ons
De uma maneira geral, a capacidade de um trocador uma medida da
quantidade de troca de ons que pode ocorrer entre a matriz e os ons presentes na fase
mvel. Em resumo, a capacidade ideal a quantidade de grupos carregados, ou
potencialmente carregados, que podem ser trocados por grama de peso seco do trocador.
Esta medida expressa em meq/g ou meq/100 mL de suspenso de resina, sendo
determinada por titulao.
A capacidade disponvel, como o nome j indica, a capacidade real do
trocador, ou seja, a capacidade ideal calculada considerando as condies de operao
da coluna cromatogrfica, entre as quais a fora inica, pH e a temperatura que o
eluente est sendo introduzido.

2.2.6 Seletividade
O conhecimento da seletividade de determinado trocador inico muito
importante no momento de sua escolha, pois, alguns trocadores podem ser seletivos
24

para determinados ons, mas, para outros, podem no ser, comprometendo a eficincia
da tcnica.
Embora este fator dependa muito das condies de operao da coluna, pode-
se destacar: a seletividade de um trocador aumenta com o incremento do grau das
ligaes cruzadas da matriz; ons com carga elevada so ligados mais fortemente ao
trocador que ons de carga baixa, nas mesmas concentraes; ons com a mesma carga,
porm com diferentes tamanhos em soluo, tem grau de afinidade diferentes. Este
efeito se relaciona melhor com o poder de polarizao do on e seu grau de hidratao,
sendo que a afinidade diminui com o aumento do raio do on hidratado.
17


3 SISTEMA DE CONTROLE DE QUALIDADE ATUAL DA SALBERGO
LABORATRIO FARMACUTICO
3.1 Introduo
O Controle de Qualidade da Salbego Laboratrio Farmacutico o setor
responsvel pela qualidade dos produtos produzidos pela empresa, ou seja, tudo que
produzido deve ser analisado por este setor para que possa, posteriormente, ser vendido
ao cliente. As amostras recebidas pelo Controle de Qualidade so pequenas fraes dos
lotes produzidos diariamente, conhecidos como Concentrado Polieletroltico para
Hemodilise (CPHD). Este concentrado uma soluo aquosa de sais para utilizao no
tratamento de problemas renais. Dentre os componentes deste medicamento, pode-se
citar: Cloreto de Sdio (NaCl), Cloreto de Potssio (KCl), Cloreto de Magnsio
(MgCl
2
) e Cloreto de Clcio (CaCl
2
).
O sistema atual adotado pela empresa consiste na determinao quantitativa
criteriosa com relao a estes ons, uma vez que concentraes diferentes do que as
estabelecidas podem causar prejuzos sade dos pacientes. Assim sendo, o controle
deste concentrado deve ser preciso, correto e de elevada confiabilidade.
Atualmente, o controle analtico realizado utilizando-se Espectofotmetro,
Fotmetro de Chama e Easylyte. Com o Espectofotmetro, atravs de leituras de
Absorbncia, obtm-se a concentrao do ction Magnsio (Mg
2+
) presente na amostra,
a partir de um comprimento de onde () definido. Utilizando o Fotmetro de Chama,
obtm-se a quantidade presente do ction Sdio (Na
+
) e, a com o Easylyte determinam-
se os valores de Sdio (Na
+
), Clcio (Ca
2+
) e Potssio (K
+
) presentes na amostra. As
25

anlises de sdio so realizadas em dois equipamentos para aumentar a confiabilidade

dos resultados.

3.2 Espectofotmetro
O Espectofotmetro um aparelho amplamente utilizado em diversas reas do
conhecimento, como fsica, qumica, biologia, bioqumica e biologia molecular. O
criador deste importante equipamento foi o qumico americano Arnold O. Beckman, em
1940. A principal funo do espectofotmetro medir e comparar a quantidade de luz
(energia radiante) absorvida por uma determinada soluo, sendo o resultado desta
obteno a identificao e determinao de substncias presentes nas amostras que
absorvem energia radiante, a partir da utilizao de um padro. Em resumo, o
espectrofotmetro controla o comprimento de onda da luz incidente na amostra e indica
a razo entre a intensidade da luz que incidiu e a luz que conseguiu, de fato, atravessar a
amostra.
Em geral, um espectrofotmetro possui uma fonte estvel de energia radiante
(normalmente uma lmpada incandescente), um seletor de faixa espectral
(monocromatizadores como os prismas, que seleciona o comprimento de onda da luz
que passa atravs da soluo de teste), um recipiente para colocar a amostra a ser
analisada (a amostra deve estar em recipientes apropriados como as cubetas e tubos de
ensaio) e, um detector de radiao, que permite uma medida relativa da intensidade da
luz. A base da espectrofotometria, portanto passar um feixe de luz atravs da amostra
fazer a medio da intensidade da luz que atinge o detector. O espectrofotmetro
compara quantitativamente a frao de luz que passa atravs de uma soluo de
referncia e uma soluo de teste. A figura a seguir representa, esquematicamente, o
funcionamento deste aparelho.
18

26

Figura 12. Esquema de funcionamento interno de um Espectofotmetro.

O espectofotmetro utilizado pelo Controle de Qualidade da empresa da
marca FEMTO, modelo 700 plus, representado pela figura abaixo. Utilizando este
aparelho, faz-se leituras de absorbncia, ou seja, leituras da quantidade de luz
transmitida atravs da soluo. A partir das absorbncias lidas, para a soluo amostra e
para a soluo padro, obtm-se a concentrao de Magnsio presente na amostra.

Figura 13. Espectofotmetro marca FEMTO, modelo 700 plus.
18

3.3 Fotmetro de Chama
27

A Fotometria de Chama a mais simples das tcnicas analticas baseadas em

espectroscopia atmica. Neste aparelho, a amostra contendo ons metlicos inserida
em uma chama e analisada pela quantidade de radiao emitida pelas espcies atmicas
ou inicas excitadas. Os elementos, ao receberem energia de uma chama, geram
espcies excitadas que, ao retornarem para o estado fundamental, liberam parte da
energia recebida na forma de radiao, em comprimentos de onda caractersticos para
cada elemento qumico.
O fotmetro de chama utilizado da marca CELM, modelo FC 280,
representado na figura abaixo. Este equipamento , originalmente, utilizado para a
deteco de ons Sdio (Na
+
), Potssio (K
+
) e Ltio (Li
+
).
19

Antes da leitura das amostras, faz-se a calibrao do aparelho, utilizando uma
soluo padro.


Figura 14. Fotmetro de Chama, marca CELM, modelo FC 280.
19

3.4 Easylyte
O Easylyte um analisador automatizado e controlado por microprocessadores
capazes de detectar e quantificar ons como Sdio (Na
+
), Clcio (Ca
2+
), Ltio (Li
+
),
Potssio (K
+
) e Cloreto (Cl
-
) presentes em amostras biolgicas, como sangue, plasma,
28

soro e urina. Sua principal aplicao na rea mdica, em laboratrios de anlises

clnicas.
Seu funcionamento baseado na tecnologia de eletrodos ons seletivos, ou
seja, existe um eletrodo para deteco de cada um dos ons presente na amostra. Existe,
neste sistema, um eletrodo referncia para os diferentes eletrodos presentes no
equipamento, sendo conhecido como Eletrodo de Referncia, que mantm seu potencial
(voltagem) fixo e estvel. Os eletrodos de ons seletivos consistem, basicamente, de
uma pequena cmara, contendo um eletrodo inerte, envolto em um eletrlito, que se
comunica com a soluo a ser analisada por uma membrana, permitindo apenas a
passagem do on que ser analisado. A concentrao do on obtida a partir da relao
logartmica existente entre o potencial do eletrodo referncia e o potencial do eletrodo
seletivo.
O Easylyte utilizado da marca Medica Corporation, modelo
EasylyteNa/K/Ca/pH, conforme representao da figura abaixo. Para cada anlise so
consumidos 100 L de amostra, em um intervalo de tempo de 60 segundos, possuindo
limites de deteco entre 135 a 148 mEq/L para o ction Sdio (Na
+
) e 3,50 a 5,30
mEq/L para o ction Potssio (K
+
) .
20

Figura 15. Easylyte, utilizado para determinao dos teores de Na
+
,K
+
e Ca
2+
.
20

4 METODOLOGIA
4.1 Introduo
29

Tendo em vista o produto analisado pelo Controle de Qualidade, pode-se

perceber que as anlises feitas tm como objetivo a quantificao dos ctions presentes
na amostra, que so os ctions Magnsio (Mg
2+
), Sdio (Na
+
), Clcio (Ca
2+
) e Potssio
(K
+
).
Para que o processo seja otimizado, tornando-o mais eficiente e reprodutvel
importante que ele sofra modificaes. O presente trabalho tem este como seu objetivo
principal, sugerir a metodologia por cromatografia inica, em especfico a
cromatografia catinica, como alternativa s metodologias atualmente empregadas. O
estudo ser centrado em alguns aspectos importantes, como, por exemplo: a capacidade
desta tcnica em analisar todos os ctions simultaneamente, a anlise de possveis
interferentes, considerando a matriz utilizada, o eluente e a fase estacionria utilizados.

4.2 Fase mvel
A fase mvel em cromatografia Inica pode ser constituda por solues
aquosas cidas, bsicas ou ainda por solues tampo.
Na analise de ctions, solues cidas aquosas diludas so as mais
recomendadas, pois a troca inica ocorrer entre os ctions analitos e os ctions
presentes na fase mvel, originados do cido, que, por sua vez, so os contra-ons dos
grupamentos funcionais da fase estacionria. Assim, pode-se considerar os cidos
minerais e os cidos orgnicos como as possveis escolhas na maioria dos casos. Os
cidos mais utilizados para esta finalidade so o clordrico e o sulfrico.


4.3 Coluna Analtica (Fase Estacionria)
Encontra-se no mercado vrias opes em termos de colunas analticas para a
cromatografia inica. O quadro abaixo trs especificaes de algumas destas colunas
que podem ser empregadas para analise de ctions.


Tabela 1. Colunas existentes no mercado para anlise de ctions.

Resina
Tipo de amostra
ao qual se destina
Tamanho de
partcula (mm)
Fluxo utilizado
(mL cm
-2
min
-1
)
Presso
Mxima
(MPa)
Amberlite IR-100 Grupo de trio 0,074 0,088 1,2
30

Dowex 50 Metais raros 0,044 0,055 1,0

Dowex 50-X-12 Metais raros 0,035 1,0
Zeokarb 215 Aminocidos 0,25 0,36 2,4
IonPac CS1 Metais alcalinos e
alcalinos terrosos
0,002 3 5
IonPac CS2 Metais alcalinos e
alcalinos terrosos
0,0015 3 10


4.4 Detectores
Os principais detectores utilizados na cromatografia inica so divididos em
duas classes, os eletroqumicos (de condutividade e amperomtrico) e o espectomtrico.


4.4.1 Mtodos Eletroqumicos
4.4.1.1 Deteco por Condutividade
O detector de condutividade foi o primeiro a ser utilizado em Cromatografia
Inico, sendo ainda hoje o mais difundido.
A condutividade a capacidade de uma espcie em conduzir corrente eltrica.
Em termos matemticos, a condutividade k determinada pela resistncia R que uma
soluo produz entre dois eletrodos de rea A e distncia L.

Tendo conhecimento da condutividade, pode-se introduzir o conceito de
condutividade equivalente, que relaciona a condutividade da soluo com a
concentrao de um eletrlito em especfico, como segue:

31

Ento, pode-se concluir que a condutividade de uma soluo eletroltica est

relacionada com as condutividades equivalentes de cada um dos eletrlitos presentes em
soluo, como representado abaixo:

De acordo com a lei de Kohlrauschs, a condutividade de uma soluo diluda
proporcional a soma das condutividades equivalentes de todos os ons presentes
relacionadas com suas respectivas concentraes, como mostrado na frmula:


Onde:
a condutividade em S cm
-1
a condutividade equivalente expressa em S cm
2
(z mol)
-1
a concentrao, em z mol L
-1
onde z a carga do on em questo.

O fator 1000 originado do fato de que 1 Litro equivale a 1000 cm
3
.
Finalmente, a mudana de condutividade causada pelo on analito
proporcional a concentrao do eluato, como representado a seguir:



onde A e E representam as condutividades equivalentes dos ons analito e eluente,
respectivamente. Esta variao de condutividade indicada acima a forma matemtica
de expressar a teoria existente por trs deste mtodo. Em outras palavras, pode-se dizer
que a condutividade do pico cromatogrfico est relacionada diretamente com as
condutividades equivalentes de ambos os ons, mostrando a no seletividade deste
mtodo.
16

4.4.1.2 DetectorAmperomtrico
Em princpio, o detector voltamtrico pode ser utilizado para todos os
compostos que podem ser facilmente oxidados ou reduzidos. Entre eles, o detector
amperomtrico se destaca como o mais importante.
Neste detector, um potencial eltrico aplicado entre um eletrodo de
referncia e um eletrodo de trabalho. Se existir, na soluo analisada, um on
32

eletroquimicamente ativo dentro deste intervalo de potencial eltrico, ele ir se reduzir

ou se oxidar, e, ento, uma corrente eltrica ir fluir entre estes eletrodos e este ser o
sinal medido por este detector.
O detector amperomtrico , em geral, bastante sensvel, sendo sua taxa de
converso de cerca de 10%. Existem algumas excees, como o caso de poucos
ctions, Fe
3+
e do Co
2+
e de alguns nions, nitrito, nitrato, tiossulfato e halognios, que
possuem taxas mais elevadas de converso. Devido a sua baixa converso, suas
aplicaes so restritas, podendo citar a anlise de acares por cromatografia aninica
e anlises clnicas.

4.4.2 Detector Espectomtrico (UV-Vis)
O detector Espectrofotomtrico (UV-VIS) utilizado em Cromatografia Inica
recomendado para nions como nitratos, brometos ou iodetos. Para os ctions,
utilizado para determinao de amnia e para quelatos de metais de transio.
16

5 CROMATOGRAFIA INICA PARA O SISTEMA DE CONTROLE DE
QUALIDADE SUGESTO DE MELHORIA
Como j citado anteriormente, os ons a serem analisados nesta proposta so
os ctions Sdio (Na
+
), Potssio (K
+
), Clcio (Ca
2+
) e Magnsio (Mg
2+
). Para a
interpretao do cromatograma, necessrio o entendimento da ordem de eluio destes
ons, assim como a obteno de suas respectivas concentraes.
Para melhor visualizao e entendimento do sistema proposto, apresentado a
seguir um cromatograma referente ao mesmo grupo de ons em estudo, para uma
concentrao de 10 ppm. Este cromatograma padro foi obtido experimentalmente, em
rotina de laboratrio, pelo grupo de estudos orientado pela professora Tnia Mara
Pizollato.

33

Figura 16. Cromatograma obtido para os ons Na
+
, K
+
, Ca
2+
e Mg
2+
, na concentrao
de 10 ppm. Equipamento utilizado: Cromatgrafo inico DX-120, utilizando como
eluente o cido Metanosulfnico 15 mM e coluna IonPac CS14 4 mm.

5.1 Ordem de eluio dos analitos
Para elucidar o cromatograma obtido, necessrio, inicialmente, entender
como ocorre a eluio dos componentes da mistura, e, principalmente, identificar os
picos cromatogrficos de acordo com seu respectivo on. Para tanto, importante
observar os tempos de reteno de cada um dos ons.
Tempo de reteno o tempo que o componente leva para ser eludo atravs da
coluna cromatogrfica. Este tempo diferente para cada um dos ons presentes, e
depende de vrios fatores, como por exemplo, a resina utilizada, a vazo em que a
eluilo ocorre e tambm a composio da fase mvel, entre outros fatores.
Entre os metais alcalinos e os metais alcalinos terrosos, os ctions polivalentes
so mais fortemente atrados pela fase estacionria, possuem uma interao mais forte,
tendo maiores tempos de reteno. Em outras palavras, eles so mais fortemente retidos
pela coluna cromatogrfica, sendo seus picos posicionados mais a direita do
cromatograma. Ento, os ctions Clcio (Ca
2+
) e Magnsio (Mg
2+
) sero eludos aps
os ctions Potssio (K
+
) e Sdio (Na
+
).
Analisando o grupo dos ctions alcalinos, sabe-se que a afinidade da resina com
o ction aumenta com o aumento da massa molar deste on, ou seja, o ction com maior
34

massa molar levar mais tempo para ser eludo atravs da coluna cromatogrfica. Ento,
em posse da massa molar dos componentes, pode-se dizer que o ction Sdio (Na
+
) elui
antes do que o ction Potssio (K
+
). A mesma regra vale para o grupo de ctions
alcalinos terrosos, sendo o ction Magnsio (Mg
2+
) eludo antes do que o ction Clcio
(Ca
2+
).
Seguindo o raciocnio proposto acima, pode-se dizer que a ordem de eluio dos
ctions : Sdio (Na
+
), Potssio (K
+
), Magnsio (Mg
2+
) e, por fim, o ction Clcio
(Ca
2+
). importante salientar que esta ordem mantida constante, sendo a variao
apenas na concentrao destes ctions, dependendo da amostra analisada.
21


5.2 Concentrao dos analitos
A concentrao analtica para cada analito na amostra a varivel mais
importante a ser determinada nesta proposta, sendo relacionada diretamente com a rea
do pico correspondente. De uma forma resumida, quanto maior a rea do pico
cromatogrfico obtido, maior ser sua concentrao na amostra desconhecida.
Para esta determinao, necessrio, inicialmente, a obteno de um
cromatograma para cada uma das solues padres, construindo, em seguida, uma curva
de calibrao, para cada um dos ctions, como representada abaixo. Para a obteno de
uma curva analtica confivel, necessrio cinco pontos de concentrao. A partir da
equao de reta da curva analtica, faz-se uma relao direta com a rea do pico da
amostra de concentrao desconhecida, obtendo, ento, a concentrao de cada anlito
em especfico.
35

Figura 17. Curva analtica para o ction Potssio (K
+
).


Figura 18. Curva analitica do ction Sdio (Na
+
).
36

Figura 19. Curva analitica para o ction Magnsio (Mg
2+
).


Figura 20. Curva analitica do ction Clcio (Ca
2+
).

Com relao ao coeficiente de correlao (R) sabe-se que, para R = 1 tem-se
uma correlao linear perfeita positiva entre as duas variveis. Para as curvas analticas
37

apresentadas, obtiveram-se valores de coeficiente de correlao muito prximos a 1,

indicando, ento, uma correlao linear quase perfeita entre a rea do pico e a
concentrao de cada analito, em cada soluo padro analisada. Em outras palavras, o
valor deste coeficiente mostra a confiabilidade e a validade de cada curva obtida, e, em
geral, da tcnica como um todo.

5.3 Comparao entre o sistema atual e a proposta de Cromatografia Inica
na determinao de analitos
Apresentou-se, neste trabalho, os dois sistemas para anlise dos ctions, o que
atualmente utilizado pelo Controle de Qualidade da Salbego Laboratrio Farmacutico e
a proposta de Cromatografia Inica. Em vista disso, pode-se fazer uma comparao
entre estes dois sistemas, analisando itens como: tempo de anlise, confiabilidade do
mtodo e custos operacionais.

5.3.1 Tempo de anlise
Para o sistema atual, pode-se dizer que o tempo de anlise longo, na medida
em que so utilizados trs equipamentos para determinao da concentrao de analitos.
Assim, existe a necessidade de calibrao destes equipamentos diariamente, o que leva
um tempo maior do que poderia levar, enquanto outras atividades poderiam estar sendo
exercidas dentro do setor. Em mdia, o tempo gasto para analisar todos os ctions em
todas as amostras de seis horas, sendo realizadas separadamente, para seis lotes do
produto produzido diariamente. Ento, leva-se, em mdia, uma hora para a anlise de
cada lote.
No caso da Cromatografia Inica, para a obteno de cada cromatograma
necessrio um tempo mdio de vinte minutos. E, para a obteno da curva analtica,
considera-se que cada soluo padro ser analisada em triplicata, aumentando a
confiabilidade dos resultados. Assim, para a construo da curva analtica tem-se, em
mdia, um tempo de cinco horas. Ento, considerando a curva analtica e cada um dos
lotes dirios, tem-se um total de sete horas de anlise. Nesta proposta, considera-se que
cada lote (amostra) ser analisado uma nica vez, e no em triplicata, seguindo as
exigncias da empresa. A curva analtica no feita diariamente, mas, sim, a cada vez
que trocado o eluente. Considerando, nesta proposta, a utilizao de uma garrafa de
1,5 L de eluente, constroem-se, ento, a curva analtica a cada dois dias. Assim, tem-se,
38

no primeiro dia sete horas de anlise diria, mas, no segundo dia, apenas duas horas de
anlise.


5.3.2 Viabilidade econmica
5.3.2.1 Sistema atual
Para o sistema atual, os custos operacionais so: manuteno peridica dos
equipamentos, reagentes e padres.
Para o Espectofotmetro, os custos so da aquisio de Magnsio
Monoreagente (Magon), conhecido como reagente de cor e tambm de um padro de
Magnsio, sendo que a combinao de ambos cora a soluo amostra, indicando a
presena do ction. Para cada anlise na determinao de Magnsio, utilizado 1 mL de
Magnsio Monoreagente e 0,5 mL de padro magnsio. Sendo seis lotes dirios e mais
a calibrao, tem-se um consumo dirio de 7mL de Magnsio Monoreagente e 4mL de
padro magnsio. Considerando um consumo mensal, 22 dias teis, tem-se,
aproximadamente 150mL de Magnsio Monoreagente e 88mL de padro magnsio.
Para o Easylyte, os custos so da aquisio do Pacote de soluo modular,
considerado um acessrio, que consiste em 800 mL de soluo limpeza. Esta limpeza
realizada automaticamente pelo equipamento aps a sua utilizao, para limpeza e
manuteno dos eletrodos, sendo substitudo com uma frequncia de, aproximadamente,
duas vezes ao ms.
Os custos operacionais mensais relacionados ao sistema atual esto relacionados
na tabela abaixo

Tabela 2. Custos operacionais do sistema atual.
Equipamento Acessrio Custo mensal
aproximado
Espectofotmetro Magnsio Monoreagente 150 mL R$ 62,00
Padro de Magnsio R$ 37,00
Easylyte Pacote de soluo modular R$ 997,00
Eventuais manutenes R$109,60
Total de custos mensais R$ 1.250,60

39

Em eventuais manutenes, considera-se um valor fixo de 10% sobre o valor

total, tendo em vista possveis troca de peas ou conserto de danificaes.

5.3.2.2 Proposta
Para implementao da Cromatografia Inica como mtodo de determinao de
analitos, um investimento inicial indispensvel, na medida em que necessrio a
aquisio do equipamento para realizao das anlises, o cromatgrafo inico. Estes
custos iniciais esto relacionadas na tabela abaixo.

Tabela 3. Custos iniciais para implementao da proposta de analise de ctions por
Cromatografia Inica.
Custos iniciais Valor
Cromatgrafo inico DX-120

R$50.336,00
Cilindro de Nitrognio (N
2
) de 8 m
3
R$293,76
cido Metasulfnico (500 mL) R$ 213,00
Total de custos iniciais R$50.842,76

O valor do cromatgrafo inico foi obtido em dlar, $ 28.600,00 e considerando
sua cotao em R$1,76, chega-se ao valor citado acima.
O cilindro de nitrognio (N
2
) acoplado ao equipamento. Considerando as
anlises realizadas diariamente, pode-se considerar que este cilindro ter vida til de,
aproximadamente, dois meses.
Custos iniciais relacionadas com vidrarias e padres no esto includos, pois
eles j so utilizados pelo setor.
Aps a obteno dos valores relacionados a implementao do sistema, deve-se
analisar os custos mensais, como as eventuais manutenes, o custo relacionado s
colunas utilizadas e tambm o custo do eluente e do cilindro de N
2
.
Para que os dados analticos sejam confiveis, necessrio fazer uma curva de
calibrao cada vez que a fase mvel trocada. O reservatrio do eluente, de um dos
equipamentos mais simples de Cromatografia Inica, tem uma capacidade de 2 L, mas
no se utiliza o frasco com sua capacidade mxima. Em mdia, utiliza-se 1,5 L de
eluente a cada recarga. Como o fluxo de eluente de 1 mL/min, o consumo de eluente,
40

considerando o tempo de cada anlise acrescido de 40% a mais para estabilizao e

intervalos entre as analises, ser de 100 mL/h. Ento, diariamente, tm-se um uso de,
aproximadamente, 700 mL de eluente, sendo necessrio uma garrafa de 1,5 L a cada
dois dias. Considerando a concentrao do eluente, 15 mM, sua massa molar e sua
densidade, pode-se obter o valor de 1,46 mL de eluente utilizados a cada dois dias. Para
o clculo dos custos mensais, considera-se a utilizao do eluente para as anlises e
tambm para a manuteno preventiva do cromatgrafo, que deve ser realizada ao final
de cada semana, utilizando o eluente em uma concentrao maior do que o utilizado
para as anlises rotineiras.
Com relao a manuteno das colunas analticas e supressoras, deve-se
observar a vida til de cada uma delas. Sabe-se que a coluna supressora tem uma vida
til, de, aproximadamente, cinco anos, e, a coluna analtica, por sua vez, possui uma
vida til de, aproximadamente, dois anos. Atravs da empresa Dionex Brasil,
considerando o custo da coluna e tambm os impostos inclusos, tem-se um valor de
R$6.514,20 para a coluna supressora e R$1.100,00 para a coluna analticaIonPac AS14,
4mm.

Tabela 4. Custos operacionais mensais
Acessrios Custos mensais
Coluna supressora R$108,57
Coluna analtica R$45,83
Cilindro de N
2
R$146,88
cido Metanosulfnico R$11,00
Eventuais manutenes R$31,23
Total de custos mensais R$343,56


Assim como para o sistema atual, nas manutenes, considera-se a troca
eventual de peas do equipamento ou outro custo no registrado, fixando em 10% sobre
o valor total mensal obtido.

5.3.3 Confiabilidade do sistema
41

5.3.3.1 Sistema atual

O sistema atual utilizado pelo setor apresenta alguns problemas, relacionados
principalmente a confiana nos resultados obtidos.
O Easylyte, principal equipamento utilizado, originalmente usado para
anlise de amostras biolgicas, como citado anteriormente, ou seja, no o
equipamento adequado para a anlise do tipo de amostra em questo. Para estas
anlises, segundo o fabricante, os resultados obtidos representam uma mdia da
quantidade presente de determinada substncia, ou seja, o valor no preciso e exato,
sendo alvo tambm de interferentes.
Com relao fotometria de chama, a qualidade dos dados obtidos
considerada satisfatria.


5.3.3.2 Proposta
A Cromatografia Inica um mtodo de anlise quantitativa de analitos
bastante conhecido e consagrado, devido, principalmente, a sua elevada confiabilidade
na obteno de resultados.
Considerando o produto a ser analisado, um medicamento, torna-se de extrema
importncia o cuidado e a escolha do mtodo empregado, e, a Cromatografia Inica,
alm de ser um mtodo analtico, de determinao precisa e exata, especfico para os
elementos analisados, se encaixando nas necessidades do setor e tambm do paciente
que utilizar o produto.

5.4 Discusso de resultados

A partir dos resultados apresentados, pode-se fazer uma discusso a respeito,
analisando as condies de implementao da tcnica, suas vantagens e desvantagens, e,
principalmente qual a real viabilidade de sua implementao como mtodo de anlise
e determinao de analitos.
Com relao ao tempo de anlise, de forma comparativa entre os dois sistemas,
pode-se dizer no h grandes discusses a serem feitas, na medida em que os dois
sistemas apresentam, aproximadamente, o mesmo tempo de anlise dirio. Mas,
considerando o tempo de anlise semanal, tem-se um tempo menor de anlise para a
Cromatografia Inica, pois a curva de calibrao, que concentra a maior parte do tempo,
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deve ser feita a cada dois dias, havendo, ento, uma otimizao no tempo final de
anlise.
Com relao a viabilidade econmica da proposta, pode-se dizer que, em um
primeiro momento, tem-se um custo razoavelmente elevado de implementao, na
medida em que o equipamento necessrio para as anlises deve ser adquirido, assim
como os instrumentos e acessrios acoplados ao sistema como um todo, o que
esperado para qualquer nova tcnica implementada. Mas, deve-se ter em mente,
principalmente, os resultados a longo prazo, que so extremamente positivos, tanto em
relao aos custos mensais, e principalmente, confiabilidade da tcnica empregada,
tendo-se resultados com maior confiabilidade analtica. Com relao aos custos fixos
mensais, a nova proposta apresenta um decrscimo de, aproximadamente, 34% em
relao ao mtodo empregado atualmente, o que, a longo prazo, representa uma
economia para a empresa, representado uma grande diminuio nas despesas mensais
com este setor.
O principal fator a ser apontado neste trabalho com relao a confiabilidade e
reprodutibilidade dos resultados obtidos a partir da Cromatografia Inica. Este mtodo
se aplica de forma coerente e especfica para os analitos em questo, apresentando
resultados mais precisos e confiveis, como ilustrado na curva analtica apresentada.

6 CONCLUSO
O presente trabalho teve, como objetivo principal, a otimizao do processo de
anlise quantitativa de analitos utilizada pelo Controle de Qualidade. A proposta foi
baseada na utilizao da tcnica de Cromatografia Inica em substituio ao sistema
atual, propondo definir variveis adequadas para a realidade deste setor.
De uma forma geral, pode-se concluir que o trabalho atingiu seu principal
objetivo, na medida em que fez uma explanao da tcnica, definindo as principais
variveis necessrias para a implantao do novo sistema, assim como a apresentao
de exemplos correspondentes realidade, o que refora a viabilidade do sistema
proposto.
Para este setor, o principal parmetro a ser definido a concentrao de analitos,
e, por ser o setor responsvel por esta determinao, de extrema importncia a
confiabilidade no mtodo utilizado para a gerao de resultados, por parte dele e de toda
a empresa, gerando, nos funcionrios e nos clientes, maior satisfao e motivao.
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Assim, pode-se concluir que esta meta foi atingida, na medida em que comprovou-se a
eficincia do Cromatografia Catinica enquanto tcnica analtica, na anlise e
interpretao de resultados.

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