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Sistemas

de
secrecin
Nature Reviews Microbiology 5, 839-851 (November 2007)
Transporte de molculas al
exterior del citoplasma
Translocacin. Transporte de protenas intra o a travs de la
membrana.
Exportacin. Cuando la protena es translocada al periplasma.
Secrecin. Cuando la protena es transportada al medio
extracelular, dentro de otra clula o a la superficie celular.
Excrecin. Transporte extracelular de molculas que nos son de
origen proteico (por ejemplo productos de la fermentacin).
Transporte de
protenas
Ocurre en las clulas de los tres
dominios de la vida.
La tercera parte de las protenas de
las clulas es secretada a travs o
insertada en las membranas.
Bacterias Gram positivas solo en la
membrana citoplasmtica.
Bacterias Gram negativos tambin
ocurre en la membrana externa.
Bacterias fottrofas adems en las
membranas fotosnteticas.
Clulas eucariotas en las
membranas de los organelos.
Bacterias patgenas en la
membrana citoplasmtica de las
clulas hospederas y las toxinas en
su sitio blanco.
Mechanisms of regulated
unconventional protein secretion
Walter Nickel & Catherine Rabouille
Nature Reviews Molecular Cell Biology
10, 148-155 (February 2009)
Secrecin de protenas
Enzimas hidrolticas.
Lipoprotenas periplsmicas.
Toxinas.
Apndices de superficie.
Protenas integrales de membrana:
~Transporte.
~Produccin de energa.
~Divisin celular.
~Receptores de seales extracelulares.
~Biognesis.
Nature Reviews Microbiology 5, 883-891 (November 2007)
Sistemas generales de secrecin
Sistema Sec (General Secretory Pathway GSP). Sistema de
translocacin y exportacin de protenas no plegadas.
Sistema Tat (Twin arginine translocation). Sistema de
translocacin y exportacin de protenas plegadas.
Translocasa YidC. Sistema de translocacin de protenas de
Membrana Interna.
Nature 406, 575-577 (10 August 2000)
Sistema Sec
Componentes:

1. Pptido lder
2. Protena chaperona (SecB)
3. Complejo de protenas de unin (SecYEG)
4. ATPasa citoplasmtica (SecA)
General Secretory Pathway (GSP). Sistema de translocacin y
exportacin de protenas no plegadas.
Sistema Sec
SecYEG + Sec A= translocasa. Es la responsable del movimiento de
la protena a travs de la membrana citoplasmtica.
El complejo SecYE forma un canal conocido como translocn o
canal conductor de protenas (CCP).
SecG, estimula el transporte y SecD, SecF y yajC son regulatorias.
Nature Reviews Microbiology 5, 839-851 (Nov 2007)
Pptido lder (secuencia
lder o secuencia seal).
La protena que ser
translocada es
sintetizada con este
pptido y es removido
durante la translocacin.
Peptidasa del pptido
seal (SPaseI). Libera la
protena translocada del
translocn.
Sistema Sec
1. Reconocimiento y gua a la protena (translocacin
co-traduccional y post-traduccional)
2. Translocacin.
3. Liberacin y maduracin.
Nature Reviews Microbiology 5, 839-851 (Nov 2007)
Translocacin post-traduccional.
Sistema Sec.
1) La protena chaperona SecB se une a una preprotena naciente
en el citosol, estabilizando su conformacin no plegada.
2a) El complejo SecB-preprotena es dirigido hacia la translocasa
SecYEG unida a SecA (3a).
2b) El complejo SecB-preprotena se asocia a la protena SecA y se
dirige a SecYEG en la MI (3b).
MENSAJE BIOQUMICO, Vol. XXVII (2003)
Translocacin post-traduccional.
Sistema Sec.
4) Se une la secuencia seal a SecA, lo cual estabiliza la interaccin
SecB-SecA.
5) La preprotena se transfiere a SecA. La unin de ATP por SecA
promueve el inicio de la translocacin y la liberacin de SecB del
complejo ternario.
La hidrlisis del ATP permite el paso de la protena a travs del
translocn.
MENSAJE BIOQUMICO, Vol. XXVII (2003)
Translocacin de la
pre-protena
dependiente de
SecA
Nature Reviews Microbiology 5, 839-851 (Nov 2007)
SecA y SecY se
muestran como
monmeros y el
extremo carboxilo de
SecA, donde se cree
que SecB se une
(etapas 1-4 y 12).
Contornos irregulares
indican cambios
conformacionales.
La lnea gruesa de
color naranja
representa a la pre-
secrecin de protenas
y el rectngulo naranja
representa el N-terminal
del pptido de seal.
D: ADP
T: ATP.
Translocacin co-traduccional.
Signal Recognition Particle (SRP)
La translocacin de
protenas es
mediada por una
ribonucleoprotena
(SRP), su receptor
(FtsY) en la
membrana y el
complejo SecYEG.
Requiere la hidrlisis
de GTP en la SRP y
FtsY para liberar la
protena naciente a
travs de SecYEG.
Nature Reviews Microbiology 4, 537-547 (July 2006)
Sec en diferentes organismos
Nature Reviews Microbiology 4, 537-547 (July 2006)



<>
Composicin de la translocasa
Sec en los dominios de la vida
Nature Reviews Microbiology 4, 537-547 (July 2006)
Sistema Tat
Nature Reviews Molecular Cell Biology 2, 350-356, 2001.
Twin arginine translocation (Tat).
Sistema de translocacin y
exportacin de protenas
plegadas.

Se ha encontrado en:
La membrana citoplasmtica en
bacterias y arqueas.
Membranas tilakoides de los
cloroplastos en plantas.
Posiblemente en la membrana
interna de la mitocondria.
Componentes twin-arginine
translocase (Tat)
Peptido seal (SRRxFLK) en el extremo amino terminal.

3 Dominios
Amino terminal, cargada positivamente.
Hidrofbico
Carboxilo terminal

Corte de la
peptidasa
Annu. Rev. Microbiol. 2006. 60:37395
Pptido seal
Biochemical Society Transactions (2007) Volume 35, part 5
Aminocido Cdigo de tres letras Cdigo de una letra
Alanina Ala A
Arginina Arg R
Asparagina Asn N
cido asprtico Asp D
Cistena Cys C
Glutamina Gln Q
cido glutmico Glu E
Glicina Gly G
Histidina His H
Isoleucina Ile I
Leucina Leu L
Lisina Lys K
Metionina Met M
Fenilalanina Phe F
Prolina Pro P
Serina Ser S
Treonina Thr T
Triptfano Trp W
Tirosina Tyr Y
Valina Val V
N
o
m
e
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c
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o

c
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d
o
s

Protenas TatABC
Tat translocasa: Protenas membranales (TatA, TatB y TatC).
TatA forma el poro por medio de subunidades .
TatB tiene funcin semejante a TatC sin embrago no se
encuentra presente en todos los microorganismos.
TatC funciona en el reconocimiento de las protenas.
Annu. Rev. Microbiol. 2006. 60:37395
Presencia de
Tat B
TatA (verde)
TatB (amarillo)
TatC (prpura)

A) E. coli K-12
B) Bacillus subtilis
C) Halobacterium sp.
D) Tilakoides de maz

Tat B pudiera servir como
mediador entre Tat A y C.
Modelo de translocacin de Tat
en E. coli y cloroplastos
Nature Reviews Microbiology 10, 483-496 (July 2012)
Modelo Tat
Annu. Rev. Microbiol. 2006. 60:37395
Trasporte de protenas plegadas
Nature Reviews Microbiology 10, 483-496 (July 2012)
Translocasa YidC
EMBO reports 4, 10, 939943 (2003)
Translocacin e insercin de
protenas de Membrana
Interna.

Las protenas de membrana
interna (IMP) pueden
translocarse e insertarse a
travs de tres formas
propuestas:

A. Ruta de YidC.
B. Ruta YidC-SRP ?
C. Ruta translocasa Sec-YidC
o SecSRP-YidC
Protenas en las membranas
Hay dos tipos de protenas
integrales de membrana en las
membranas celulares:

Las que contienen regiones
transmembranales (TM) a-hlices
ampliamente distribuidas.

Las que poseen mltiples
plegamientos , que se
encuentran predominantemente
en la membrana externa de las
bacterias Gram negativas
y de la membrana externa
mitocondrial y de cloroplastos de
las eucariotas.
Topologas de protenas de
membrana interna
(secuencias topognicas)
YidC insertasa dependiente e
independiente de Sec
Nature Reviews Microbiology 6, 234-244 (March 2008)
La insertasa YidC tienen la
funcin de promover la
insercin de protenas de
membrana en
conjuncin con la
translocasa Sec (o Sec-
SRP) o independiente de
ella.
Insercin por las
translocasas
Sec y YidC en la MI
Durante la insercin en la
membrana los segmentos
transmembranales de la
protena recin sintetizada se
unen a YidC, la cual facilita el
desplazamiento lateral de los
segmentos hidrofbicos dentro
de la bicapa y/o asiste en el
plegamiento y ensamblaje. YidC
tambin acta como protena
insertasa de membrana
independiente de Sec de ciertas
pequeas protenas de
membrana. Estas protenas se
unen directamente a YidC o
posiblemente utilizan el sistema
SPR y FtsY para la unin. An se
desconoce que determina que
las protenas recin sintetizadas
empleen un sistema Sec-
dependiente o Sec-
independiente. PMF: fuerza
protn motriz.
Microbial Cell Factories 2008 7:10
YidC interacta con los
segmentos TM de dos maneras
Nature Reviews Microbiology 6, 234-244 (March 2008)
En el modelo secuencial, el primer segmento TM es liberado de
YidC para entrar en la fase lipdica antes de unirse a la siguiente
hlice TM (a).
YidC interacta con los
segmentos TM de dos maneras
Nature Reviews Microbiology 6, 234-244 (March 2008)
En el modelo de ensamblaje de sitio, YidC tiene un papel
importante en el acomodo de las regiones TM en un paquete (b).
El conjunto de los segmentos TM se libera de YidC y entran en la
bicapa lipdica al mismo tiempo.
En ambos casos, los segmentos TM pasan el canal SecYEG uno a
la vez mientras que YidC acta como un acompaante
transfiriendo los dominios TM en la bicapa lipdica.
Sistemas de secrecin en
bacterias
BMC Microbiology 2009, 9(Suppl 1):S2
Propuesta. Biognesis de la
membrana externa
Nature Reviews Microbiology 4, 57-66, 2006
FL(LP) y LPS Omp (Omp85) LPP
Pie de figura.
Biogenesis of the outer membrane. After synthesis at the inner leaflet of the inner
membrane (IM), both lipopolysaccharide (LPS) and phospholipids (PL) are flipped
to the outer leaflet of the IM. MsbA is required for the translocation of LPS and
possibly phospholipids across the IM, but helical transmembrane domains have
also been shown to translocate phospholipids. How both LPS and phospholipids
travel from the IM to the outer membrane(OM), and how LPS is flipped to its outer
leaflet, remains unknown, although the OM protein (OMP) Imp is required for the
assembly of LPS. Both OM lipoproteins and OMPs are synthesized in the cytoplasm
and are translocated across the IM by the Sec translocon. After undergoing lipid
modification and signal-sequence processing (not shown), OM lipoproteins
interact with the ATP-binding cassette (ABC) transporter LolCDE, which hands them
over to the periplasmic chaperone LolA. LolA escorts OM lipoproteins across the
periplasm and delivers them to the OM-assembly site, the OM lipoprotein LolB.
After translocation through the Sec machinery, OMPs are transported to the OM
by an unknown mechanism, although the periplasmic chaperones Skp, DegP and
SurA have been implicated. At the OM, the YaeT/YfgL/YfiO/NlpB complex
assembles OMPs by an unknown mechanism.
Nature Reviews Microbiology 4, 57-66, 2006
Principales sistemas de
secrecin en bacterias Gram
negativas
Nature Reviews Microbiology 7, 703-714, 2009
Chaperonas
1. Las subunidades son
exportadas
individualmente a travs
de la membrana por el
sistema Sec y la regin
amino terminal de la
secuencia seal es
procesada.
2. En el periplasma cada
subunidad se une a
protenas chaperonas
periplsmicas.
Secreta estructuras de
virulencia como las fimbrias P y
tipo 1 en E. coli uropatgena.
The EMBO Journal (2005) 24, 20752086
Chaperonas
3. El complejo chaperona-subunidad migra a la protena
portera (usher) que se encuentra en la membrana externa
y forma un canal.
4. La chaperona se une al usher y transfiere la subunidad a
este. Ms chaperonas transfieren las subunidades para
ensamblar el filamento a travs del usher.

EMBO reports 7, 7, 734738 (2006)
SSTV. Autotransportadores
1. El pptido lder dirige la
secrecin va el sistema Sec y
se procesa en la cara
periplasmtica de la
membrana interna (MI).
2. El dominio b del intermediario
periplsmico adquiere la
conformacin de barril b y se
inserta en la membrana
externa (ME) para formar el
poro.
3. Se transloca el dominio
pasajero a la superficie.
Transporta protenas con diferentes
funciones: proteasas, txinas, invasinas,
adhesinas.
SSTII
Principal va para
la secrecin de
protenas en
bacterias Gram
negativas:
enzimas
hidrolticas y
toxinas.
Emplea el sistema Sec para transportar las protenas la
periplasma y la secuencia lder es removida por proteasas en
la cara externa de la MI. La regin amino terminal de la
secuencia seal es procesada.
SSTII
1. Las protenas se pliegan en una forma cercana a la
nativa.
2. Son excretadas por un sistema llamado secretn
que consiste de protenas localizadas en la MI y en
la ME que presentan dominios en el periplasma.
3. Las protenas a secretar pasan a travs del poro
formado por la protena GspD (secretina) y que es
estabilizado por las lipoprotenas chaperonas GspS
para su correcto plegamiento y actividad.
4. En el modelo de la toxina de V.cholerae Las
protenas Gsp E , L y M regulan la secrecin de la
extracelular comunicando la fosforilacin o hidrlisis
del ATP entre la MI y el poro.
5. Las protenas GspG, H, I, J y K son procesadas por
Gsp O y forman una estructura de pilus,
principalmente GspG y se postula que acta
empujando la toxina a travs del poro con
movimientos de contraccin.
SSTII
El sistema de secrecin tipo II es empleado para la biognesis de
la fimbria tipo IV y para el flagelo de las arqueas.
SSTI
La secrecin protena se da en un solo paso desde el citosol hasta
el exterior de la clula. Este mecanismo lo realizan la mayora de
las bacterias para la secrecin de toxinas y exoenzimas (proteasas
y lipasas).

SSTI
1. La secuencia exportar es reconocida por la
secuencia seal del extremo carboxilo terminal por el
transportador ABC en la MI.
2. El transportador ABC interacta con las protenas de
fusin membranales (MFP).
3. Cuando se forma el complejo Protena-ABC-MFP, se
produce una conexin con la protenas de los
factores de membrana externa (OMFs) y se forma un
poro de salida.
4. En la toxina a-hemolisina (HlyA) de E. coli interacciona
con el trasportador ABC (HlyB) y la protena de fusin
trimrica en un proceso dependiente de la fuerza
protn motriz (FPM). La translocacin de HlyA requiere
la interaccin entre HlyD y el transportador trimrico
TolC, as como de la hidrlisis de ATP.

SSTIII
Sistema de secrecin
que ocurre en un solo
paso y est asociado a
la secrecin de factores
de virulencia en
bacterias patgenas de
humanos, animales y
plantas (Bordetella,
Chlamydia, Erwinia, E.
coli, Pseudomonas,
Ralstonia, Rhizobia,
Salmonella, Shigella,
Xanthomonas y Yersinia),
as como en la
biognesis flagelar.
SSTIII (inyectisoma)
Nature Reviews Microbiology 4, 811-825 (November 2006)
Tanto el flagelo,
como el translocn de
secrecin de molculas
efectoras, son sistemas
complejos que requieren
de ms de 20 protenas
que se ensamblan
en largas estructuras
macromoleculares
que atraviesan
ambas membranas
bacterianas, y en los
sistemas de virulencia,
tambin la membrana
plasmtica eucarionte.
Esta compuesto por protenas de MI relacionadas a las del cuerpo
basal del flagelo y protenas que formar anilllos en la MI y en la ME.
La translocacin de las protenas se lleva a cabo por el interior de las
estructuras y se requiere la energa de la hidrlisis del ATP.
Secrecin de factores de
virulencia
SSTIV
Sistema verstil que se
emplea tanto para la
secrecin de cidos
nucleicos como protenas.
Se encuentra en
bacterias Gram positivas y
Gram negativas.

Puede ser Sec
dependiente (toxina de
Bordetella pertusis ) o Sec
independiente.
Nature Reviews Microbiology 7, 703-714, 2009
SSTIV
Nature Reviews Microbiology 7, 703-714, 2009
SSTVI
THE EMBO JOURNAL (2009) 28, 309 - 310
Bacterias Gram
negativas.
Inyectisoma.
Es requerido para los
factores de virulencia en
patgenos de humanos,
animales y plantas.
Presente en bacterias
simbiontes (fijacin de N
2
)
y no simbiontes
formadoras de
biopelculas)
Se asemeja al SSTIII y SSTIV
con la presencia probable
de chaperonas.
Infeccin por Rhizobium
(SSTIII y SSTIV)
Nature Reviews Microbiology 7, 312-320, 2009
SSTVII
(ESX)
Presente en
Mycobacterium.
SecA-1 (GSP)
SecA-2 (Va
alternativa)
Tat
Sistemas
especializados
(ESAT-6-, SNM-, ESX-,
or type VII secretion)
Nature Reviews Microbiology 5, 883-891, 2007