Ana Karen Cabrera Lpez Fecha de entrega: 24 de abril del 2014
Seccin: Jueves 9-11
En este trabajo se realiz el anlisis de 20 artculos que van desde el ao 2002 hasta la actualidad el 2014. Todos estos relacionados con el parasito Trichomonas vaginalis en el cual tambin se describir de manera simultnea con los artculos. Trichomonas vaginalis Definicin: Es un protozoo descrito por primera vez en 1836 por Donne, y Hoehne en 1916 comprob que era el agente etiolgico de una infeccin vaginal especfica. En el hombre puede hallarse en la uretra y en la prstata sin causar sntomas. Esta infeccin se transmite por relaciones sexuales con personas contaminadas. Como el hombre no tiene sntomas, despus de un coito con una mujer contaminada, el hombre no sabe que est infectado y puede transmitirlo a una mujer sana, la cual despus de unos das comienza a tener una vaginitis. Siempre existe la posibilidad de que una persona contaminada por tricomonas puede tener otras infecciones (ETS: Enfermedades de Transmisin Sexual), como Sida, Hepatitis-B, siflis Clamidias trachomatis, por lo que ante un diagnstico de tricomonas, siempre debe hacerse un anlisis de sangre para descartar ETS. El protozoo flagelado Trichomonas vaginalis es un parsito genitourinario humano obligado y la causa ms frecuente de enfermedad de transmisin sexual en todo el mundo. La mayora de los aislados clnicos de T. vaginalis se persistentemente infectados con uno o ms ARN de doble cadena (dsRNA ) virus del gnero Trichomonasvirus , familia de los Totivridos , que parece influir no slo la biologa protozoo sino tambin la enfermedad humana. 1 Taxonoma:
Epidemiologia: T. vaginalis solo afecta a humanos, por lo que stos son sus reservorios. Se considera que el varn es en la mayora de los casos un portador asintomtico causante de la propagacin de la infeccin. Se estima que unos 250 millones de individuos son infectados cada ao. La prevalencia de la tricomoniasis vara mucho de unas regiones a otras dependiendo de factores como la edad, el estado de salud, la promiscuidad sexual, la higiene y las condiciones socioeconmicas. En cualquier caso, la mayor prevalencia la presentan las mujeres de edades comprendidas entre los 16 y los 35 aos y especialmente aquellas dedicadas a la prostitucin (prevalencia 50-70%). Aunque la transmisin es exclusivamente venrea, ha habido casos de mujeres infectadas por el uso de esponjas o toallas hmedas infectadas, solo explicables por la capacidad de T. vaginalis de sobrevivir algunas horas en ambientes clidos e hidratados. La aparicin del sida ha fomentado el uso de medidas profilcticas y esto ha generado un descenso lgico de los casos de tricomoniasis. Se han reportado los siguientes datos: Prevalencia de Trichomonas vaginalis en trabajadores sexuales Se estudi en forma retrospectiva una poblacin de 720 personas asistidas por el Programa Provincial de ITS de Mendoza. Entre febrero de 2007 y junio de 2009 se procesaron 1692 muestras con un muestreo por reposicin. La distribucin por sexo fue de 687 mujeres y 33 varones con edades comprendidas entre 15 y 65 aos. La prevalencia de tricomoniasis determinada en esta poblacin en riesgo fue de 7.6% para las mujeres, sin encontrarse infecciones en el grupo de los hombres. La prevalencia hallada en este grupo en riesgo muestra una poblacin con alta vulnerabilidad para contraer otras ITS de mayor gravedad. En otro sentido, sugiere una importante falta de adhesin al uso de barreras mecnicas para prevenir infecciones de transmisin sexual. Este trabajo justifica la elaboracin de una gua de procedimientos para el manejo de la infeccin por tricomonas en el marco del Programa de Salud Reproductiva (PROSAR). Por el examen en fresco y/o por Giemsa, se identific T. vaginalis, en el contenido vaginal de 52 mujeres. El estudio secuencial demostr que en 8 casos (15.4% de las 52 mujeres) se produjeron entre 3 y 4 reinfecciones. Se consider reinfeccin todo episodio que contara al menos con una muestra negativa entre dos positivas. En 6 casos (11.6% de las 52 mujeres) se observ coinfeccin con Candida albicans, especie comprobada por la posterior formacin del tubo germinativo. La prevalencia de tricomoniasis determinada en esta poblacin en riesgo fue de 7.6% (52/687 mujeres). 2 Prevalencia de Trichomonas vaginalis y coinfeccin por Chlamydia trachomatis y Neisseria gonorrhoeae en los Estados Unidos segn lo determinado por el ensayo APTIMA Trichomonas vaginalis amplificacin del cido nucleico
Un anlisis de T. vaginalis prevalencia por grupos de edad revel que la infeccin por T. vaginalis afecta a mujeres de todas las edades y que la prevalencia de T. vaginalis es ms alta en las mujeres > 40 aos y ms en las mujeres <40 aos de edad. Esta distribucin por edad contrasta con la de C. trachomatis y N. gonorrhoeae, cuya prevalencia fue mayor en mujeres <30 aos o ms en mujeres 40 aos de edad. Un anlisis de la prevalencia de ITS por grupo tnico mostr grandes disparidades. T. vaginalis, C. trachomatis , N. gonorrhoeae y prevalencia fueron ms altas en poblaciones negras , una tendencia documentado en la poblacin de los EE.UU. para T. vaginalis , as como para C. trachomatis y N. gonorrhoeae. 3 En Mxico la tricomoniasis urogenital ocup el 12o. lugar entre las "Veinte principales causas de enfermedades transmisibles", con 113 843 casos notificados, equivalentes a 104.23 casos/100 000 habitantes. Las mujeres fueron ms afectadas que los hombres en una proporcin de 36:1, y el grupo de edad con mayor nmero de casos correspondi al de 25-44 aos. En cuanto a incidencia, se registraron las cifras mayores en los Estados de Puebla, Tlaxcala, Veracruz, seguidos de Zacatecas, Oaxaca y Durango. Morfologa Ninguna de las especies del gnero produce quistes; por lo tanto solo son conocidas en su estadio de trofozoito. La multiplicacin se realiza en forma asexuada por fisin binaria longitudinal, la que se inicia por divisin del ncleo seguida por separacin del citoplasma en dos organismos. Tienen un aspecto piriforme, el trofozoito mide entre 7 a 23 m de longitud por 5 a 12 m de ancho no existe forma de resistencia. Posee 4 flagelos anteriores libres que forman un penacho.
Ciclo de vida La forma infectante son los trofozoitos. Generalmente le hombre adquiere la infeccin al tener contacto sexual con una mujer parasitada. El hombre al estar con tricomoniasis infecta a otra mujer al mantener contacto sexual. O bien reinfecta a la misma mujer.
Mecanismos de transmisin Es una infeccin de transmisin es sexual. Aunque se ha indicado la posibilidad de transmisin no venrea, no existen casos bien documentados. La tricomoniasis se transmite a travs de las relaciones sexuales, de modo que es una enfermedad de transmisin sexual. En los hombres, el parsito vive y se multiplica pero raramente causa sntomas. Por lo tanto, las mujeres con frecuencia son infectadas repetidamente por sus compaeros de relaciones sexuales, ya que no saben que ellos estn infectados. Patogenicidad Trichomonas vaginalis no puede vivir sin estar en contacto con los tejidos vaginales, uretrales o prosttico. Por tanto, fuera del cuerpo humano este parsito muere con facilidad, ya que no tolera la luz solar directa, la desecacin o temperaturas superiores a 40 C. El parsito tambin muere si est en el agua por un perodo superior a 30 minutos. Por qu afecta ms a las mujeres? La Trichomonas vaginalis afecta ms a las mujeres debido a cambios hormonales y a que durante la menstruacin el parsito aprovecha el hierro existente en el flujo sanguneo que le permite aumentar su capacidad de adherencia a tejidos. En los periodos en que no hay menstruacin las concentraciones de hierro son reducidas, lo que provoca que el protozoario tenga movilidad y busque alimentarse. Esto sugiere que este protozoario adaptarse a las condiciones ambientales cambiantes de la vagina y permanecer en ella. Respecto a lo que sucede en el organismo del hombre infectado, las concentraciones de zinc contenidas en su semen tienen capacidad trichomonicida que destruye al protozoario. En varones con niveles bajos de zinc, el parsito vive en estado latente convirtindose los varones en portadores de la enfermedad. A su vez, las mujeres embarazadas y enfermas de trichomoniasis tienen un embarazo de alto riesgo, con partos prematuros y fetos que nacen con bajo peso. Esta enfermedad no produce secuelas, como en el caso de la sfilis, que puede causar ceguera al producto de la concepcin. Sin embargo, recin nacido de menor peso corre el riesgo de tener repercusiones en su desarrollo inicial al ser ms susceptible a otros padecimientos. La vagina de la mujer presenta en condiciones normales pH alcalino, pero durante la menstruacin el pH se torna cido y toma valores prximos a 4,5. Es entonces cuando se puede desencadenar la infeccin, ya que le es el medio ms favorable de vida, alimentndose aqu de bacterias y de leucocitos. La infeccin por Trichomonas vaginalis durante el embarazo es frecuente y se ha asociado con mucha frecuencia al desarrollo de partos pretrminos y al nacimiento de nios de bajo peso. 4 Los daos a las clulas epiteliales inician con la formacin microcanales superficiales, despus, induce cambios en la membrana plasmtica, seguida por la muerte de la clula y la separacin de las clulas lysed MDCK, lo que manifiesta un proceso de adherencia mas que una fagocitosis verdadera. La formacin de pseudocystos y la capacidad de estos para adherirse a la clula husped, sugieren que no son formas degenerativas, sino que, existe la posibilidad de la existencia de dos formas de tricomonas: los tropozoitos, caracterizados por clulas mviles que presentan estructura esqueltica axial, y los pseudocystos, clulas redondeadas e inmviles, con un diverso modo de mitosis, y una participacin activa en la adherencia. Por lo otro lado, se encontr que para sobrevivir adquiere alimentos, elimina el ambiente celular hostil en la cavidad vaginal, y ejerce sus mecanismos patgenos con un proceso fagocitario eficiente. 5 En artculos relacionados con el tema se encontr lo siguiente: Trichomonas vaginalis dependiente del contacto de citolisis de las clulas epiteliales Trichomonas vaginalis es un protozoo parsito extracelular que se une al epitelio del tracto urogenital humano durante la infeccin. En este estudio se analizaron las tendencias de 26 cepas de T. vaginalis que ocasiona la lisis de prstata (HBP -1) y ectocervical (Ect1) epitelio y lisis de los glbulos rojos (GR) . Se encontr que slo tres de las cepas tenan una preferencia estadsticamente significativa para la HPB - 1 (MSA1103) o Ect1 (LA1 y MSA1123). En general, se observ que los niveles de adherencia son muy variables entre las cepas, con un rango de 12 veces de la adhesin en las clulas Ect1 y un rango de 45 veces en las clulas HPB - 1. Los niveles de citlisis muestran incluso una mayor variabilidad, desde no detectables de citlisis a 80 % o 90 % de citlisis Ect1 y HBP - 1, respectivamente. Los niveles de adherencia y de citlisis se correlacionan para las cepas dbilmente adherentes / citolticos, y un umbral de unin se encontr que era necesario para desencadenar la citlisis; sin embargo, este umbral se puede llegar sin inducir citolisis. Adems, citolisis fue completamente bloqueado cuando se impide s el apego de los parsitos a las clulas husped al tiempo que permite el acceso completo de factores solubles. Se demuestra que la hemlisis era un rasgo poco frecuente, con slo 4 de las 26 cepas capaces de lisar > 20 % glbulos rojos con una relacin de 01:30 parsito / RBC. La hemlisis tambin no se correlacion con la adhesin o la citlisis de cualquiera de macho (HBP - 1) - o hembra (Ect1) derivados de lneas de clulas epiteliales. Nuestros resultados ponen de manifiesto que a pesar de una amplia gama de propiedades patgenas entre diferentes cepas de T. vaginalis, todas las cepas muestran estricta citolisis dependiente del contacto. Llegamos a la conclusin de que mientras que el detonante de la citlisis es el apego, los mecanismos de citolisis son independientes del archivo adjunto. La adherencia es probable que sirva como un disparador para la activacin y / o secrecin de factores crticos adicionales inmediatamente despus del contacto. 6
Trichomonas vaginalis tiene una gran familia de genes BSpa-like: evidencia de la diversidad funcional de la organizacin estructural y la transcriptmica. El hbitat de la mucosa sesgada para las especies microbianas que codifican protenas BSpa-like, la caracterizacin de un gran diversidad estructural de las protenas TvBspA, la expresin diferencial de un subconjunto de los genes TvBspA y la localizacin celular y datos inmunolgicos para una TvBspA; todos apuntan a la importancia de las protenas TvBspA a diversos aspectos de T. vaginalis para la patobiologa en la interface husped-patgeno. Teniendo en cuenta los fenotipos de organismos que codifican protenas BSpa-como, en su mayora agentes patgenos, comensales o mutualistas que prosperan en las superficies mucosas de vertebrados; la funcin establecida de protenas BSpa-como en la patogenicidad de dos bacterias mucosas (boca T. forsythia y T. denticola ); el tamao de la familia de protenas TvBspA extraordinariamente grande con su amplia diversidad estructural, los patrones de expresin diferencial demostr para algunos genes TvBspA y la expresin en la superficie celular y la induccin de una respuesta de anticuerpos durante las infecciones para una protena TvBspA; juntos sugieren que las protenas desempean TvBspA diversos e importantes papeles en T. vaginalis patobiologa ', contribuyendo a las infecciones de la invasin y de largo plazo del tracto urogenital humano. Protenas TvBspA similares representan fuertes candidatos protenas de superficie que median la interaccin con diversos puntos de inters de las mucosas, incluyendo el moco; VEC, clulas epiteliales uretra y otras clulas husped; Protenas ECM y la microflora vaginal o adhesin clula- clula durante enjambre parsito. TvBspA tambin podra mediar la endocitosis de diversas protenas del husped y virus, as como la fagocitosis de bacterias y apuntalan diversas clulas husped. Finalmente protenas TvBspA podran orquestar la modulacin del sistema inmune innato a travs de TLR de sealizacin durante la infeccin y mediar la evasin inmune a travs de la expresin diferencial. 7 Trichomonas vaginalis: entregan los exosomas a la carga a las clulas husped y mediante el huesped: Interacciones de parsitos Este estudio, el primero en identificar y caracterizar los exosomas del parsito T. vaginalis, revela un papel para estas vesculas secretadas en husped: interacciones parsito. En T. vaginalis se encontraron exosomas para aumentar sustancialmente la adhesin de este parsito de transmisin sexual a mujer (ECT) y macho (BPH1) las clulas epiteliales a travs de un efecto sobre ambos parsitos y clulas husped. Como un parsito extracelular, la unin de T. vaginalis a las clulas husped es vital para la supervivencia y la patogenia. Similar a la descrita para los exosomas producidos por diferentes clulas y tejidos de los mamferos. Los exosomas de parsitos altamente adherentes son capaces de aumentar la adherencia del parsito a las clulas husped, mientras que los de parsitos mal adheridos no lo son. La entrega de contenido exosomal cepa especfica puede afectar tanto la respuesta inmune del husped, as como el apego parsito a las clulas husped. Una mejor comprensin de cmo los exosomas aumenta la adherencia del parsito a las clulas husped y modular la respuesta de las clulas de acogida proporcionar conocimientos sobre patognesis y, posiblemente, nuevas vas para el diagnstico y la terapia. Mecanismos de Patogenicidad de la Trichomonas vaginalis El investigador, miembro correspondiente de la Academia Mexicana de Ciencias desde 2006, mencion que el primer paso para que se establezca la enfermedad es el contacto de T. vaginalis con las clulas del epitelio vaginal (VECs, por sus siglas en ingls). La citoadherencia del parsito depende de varias protenas (adhesinas) reguladas por hierro, tanto en su sntesis como en la ubicacin en la superficie. El doctor Alderete mencion que una de estas adhesinas, la AP65, es la enzima descarboxilasa mlica del hidrogenosoma que adems tiene la funcin de adhesina al estar localizada en la superficie. La regin amino-terminal de la AP65 posee el eptopo que une a T. vaginalis con la superficie de las VECs. Durante la adhesin, AP65 regula la expresin de ciertos genes de las clulas VECs, entre ellos interleucina 8 (IL-8) y COX 2, el primero relacionado con la inflamacin y el segundo con carcinognesis. En estudios de otros investigadores, referidos por el doctor Alderete, se ha mostrado que la sntesis aumentada de prostaglandinas inducida por COX-2, estimula la proliferacin de clulas cancergenas, inhibe la apoptosis y promueve la angiognesis en varios tipos celulares. COX 2 se sobre expresa consistentemente en todos los cnceres primarios y metastsicos de clulas epiteliales, incluyendo el de prstata y el cervicouterino. Se menciona que en el caso de las mujeres, el parsito puede llegar a invadir inclusive las trompas de Falopio. La razn por la que T. vaginalis facilita la infeccin por VIH y otro tipo de padecimientos, estriba en que la infeccin produce una fuerte infiltracin de leucocitos en la vagina o en el pene, que constituyen el blanco de infeccin del VIH. Por lo tanto, estas clulas se infectan ms fcilmente al encontrarse en grandes cantidades debido a la infeccin. 9 Asociacin con otros patgenos En muchos artculos se menciona varias asociaciones con otro tipo de infecciones: Trichomonas vaginalis se asocia con la enfermedad inflamatoria plvica (EPI) en las mujeres infectadas con el Virus de Inmunodeficiencia Humana En este artculo nos habla sobre la evaluacin de la asociacin entre los agentes causantes de la secrecin vaginal y la enfermedad inflamatoria plvica (EIP), se estudi el papel desempeado por la coinfeccin por el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1. Se tomaron muestras cervicales para detectar Neisseria gonorrhoeae , Chlamydia trachomatis , Trichomonas vaginalis y vaginosis bacteriana. La Infeccin VIH-1 se estableci mediante el uso de pruebas de anticuerpos sricos. Un total de 696 mujeres con flujo vaginal fueron reclutadas, 119 de los cuales tenan PID. Los pacientes con tricomoniasis tuvieron un mayor riesgo de EPI, que las mujeres sin la tricomoniasis. PID no se asoci con ninguno de los otros agentes patgenos. Cuando los pacientes fueron estratificados de acuerdo al VIH - 1 el riesgo de EPI en pacientes infectados por VIH - 1 con T. vaginalis se increment significativamente. Su gestin est formada por el inicio inmediato de la terapia antimicrobiana para cubrir las posibles causas de la infeccin. En este estudio, mostramos que, en las mujeres infectadas por VIH- 1, la infeccin del tracto genital inferior con este organismo se asocia con un mayor riesgo de EPI. Sin embargo, la infeccin por T. vaginalis cada vez ms tiende a asociarse con complicaciones del tracto reproductivo, incluyendo sepsis que se produce despus de un aborto y despus de la cesrea, as como los resultados adversos del embarazo. Esta asociacin siempre ha sido reportada en combinacin con un estado alterado del aparato reproductor, el puerperio, y la coinfeccin con otras infecciones de transmisin sexual. Nuestros datos sugieren que la coinfeccin con VIH - 1 tambin puede alterar la relacin husped- microbio, lo que resulta en un aumento del riesgo aparente de PID en la presencia de T. vaginalis. Sin embargo, existen, no hay datos que sugieren un mecanismo para tal asociacin. La patognesis de la infeccin con este protozoo es poco conocido. 10 Infecciones tempranas repetidas con Trichomonas vaginalis entre VIH-positivo y mujeres VIH-negativas
El propsito del estudio fue examinar la repeticin temprana de infecciones debido a Trichomonas vaginalis entre VIH en mujeres positivas y VIH negativas y si son reinfecciones, nuevas infecciones, o los casos de fracaso del tratamiento. Se tomaron 60 mujeres VIH- positivas con tricomoniasis ,11 (18,3 %) fueron T. vaginalis positivo 1 mes despus tratamiento. Los 11 recurrencias fueron clasificados como 3 reinfecciones probables (27 %), 2 infecciones probables de una nueva pareja sexual (18 %), y 6 fracasos del tratamiento probables (55 %); 2 de los 6 pacientes que experimentaron probable fracaso del tratamiento haba aislamientos con resistencia leve a metronidazol. De 301 mujeres sin VIH, 24 (8,0 %) fueron T. vaginalis positivo 1 mes despus del tratamiento. Los 24 recurrencias fueron clasificados como 2 reinfecciones probables (8 %) y 22 fracasos del tratamiento probables (92 %); de los 22 pacientes que experimentaron fracaso del tratamiento probable, 2 tenan cepas con resistencia moderada a metronidazol, y 1, una cepa con una leve resistencia al metronidazol. En conclusin las mujeres con VIH fueron ms propensas a tener una nueva exposicin sexual que las que eran VIH- negativas, aunque la tasa de fracaso del tratamiento fue similar en ambos grupos. Las altas tasas de fracaso del tratamiento entre ambos. Las mujeres VIH - positivas y VIH- negativas indican que una dosis de 2 g de metronidazol puede no ser adecuado para el tratamiento de algunas. 11 Infeccin humana por Trichomonas vaginalis y su relacin con otros agentes patgenos. El articulo menciona que en general, las manifestaciones clnicas de la trichomonosis son inespecficas y son semejantes a las provocadas por Neisseria gonorrhoeae, Candida albicans, Chlamydia trachomatis y Gardnerella vaginalis, por lo cual es necesario saber cul puede ser su posible relacin entre ellas. La asociacin entre T. vaginalis y VIH ha sido sugerida por algunos autores quienes plantean que en los individuos infectados por T. vaginalis puede aumentar la predisposicin a contraer VIH. Se ha concluido que la trichomonosis vaginal constituye la ITS ms comn encontrada en mujeres positivas al VIH. De un total de 1578 mujeres infectadas con el virus, 30,2 % resultaron ser portadoras de T. vaginalis. En otros estudios realizados con 1 335 prostitutas seronegativas a VIH-1, que fueron monitoreadas por un perodo de 566 das, se encontr que 806 adquirieron T. vaginalis y 265 mujeres del total resultaron seropositivas al virus al final del estudio. En este mismo estudio, se hall asociacin entre la trichomonosis y el incremento en el riesgo de contraer VIH-1 que fue de 1,52 veces. Sobre la base de esta asociacin, algunos autores plantean que cada da se hace ms importante el control de la trichomonosis, lo que podra ayudar a prevenir la transmisin del VIH. 12 Cuadro clnico Una vez que el parsito entra en contacto con la mucosa vaginal produce una reaccin inflamatoria y una descamacin del epitelio, en este momento la cantidad de parsitos presentes en el exudado vaginal es muy elevada. Las secreciones vaginales son caractersticas, se hacen ms lquidas y se tornan de color verde o amarillento. El perodo de incubacin oscila entre 5 y 30 das. Se estima que 10 - 50% de las mujeres infectadas permanece asintomtico. El cuadro clnico incluye: descarga vaginal (42%) de coloracin variable - amarillenta, verdosa, griscea, espumosa en un 10% de los casos, olor, con cierta frecuencia ftido (50%), edema o eritema en pared vaginal y crvix (22 - 37%), prurito e irritacin. El "crvix en fresa", debido a eritema y hemorragias puntiformes, puede identificarse mediante colposcopa, pero difcilmente mediante la exploracin habitual con espejo vaginal (2-3 %).Tambin pueden presentarse disuria, dispareunia, dolor abdominal bajo. Los signos y sntomas pueden acentuarse durante o despus de la menstruacin. Son poco frecuentes los reportes de endometritis y salpingitis. En mujeres embarazadas deben contemplarse: aborto, parto prematuro, ruptura prematura de membranas fetales, infeccin del producto, endometritis postparto. La infeccin se asocia a una susceptibilidad mayor a HIV y a una mayor prevalencia de cncer cervicouterino invasivo.
Vaginitis por T. vaginalis. Abundante secrecin purulenta. CDC.
T. vaginalis. "Crvix en fresa". CDC. Los sujetos de sexo masculino infectados habitualmente no presentan signos y sntomas (50-90%), aunque recientemente se ha reportado un mayor nmero de casos de uretritis no gonocccica (uretritis con descarga uretral clara o mucopurulenta y disuria) ocasionalmente aunado a epididimitis, e incluso a pequeas ulceraciones en pene. Tambin se han reportado prostatitis, balanitis, infertilidad, sta asociada al proceso inflamatorio e interferencia de la funcin de los espermatozoides, con baja motilidad y disminucin en viabilidad. Los sujetos sintomticos HIV+ presentan altos nmeros de partculas virales en lquido seminal. En un estudio relacionado registrado por una revista Cubana Obstet Ginecol Mayo-ago. 2005. Se obtuvo lo siguiente: A un cierto nmero de pacientes se le realiz una encuesta para conocer los signos y sntomas clnicos que presentaban. Los datos obtenidos se analizaron por comparacin mltiple de proporciones y prueba de Duncan. Los datos solicitados fueron: la edad de las pacientes y la presencia o no de leucorrea, prurito y fetidez. Las pacientes parasitadas por T. vaginalis se dividieron en 5 grupos de acuerdo con la edad: las menores de 20, las que se encontraban entre 20 y 29 aos, entre 30 y 39 aos, 40 y 49 y las mayores de 50. 13 En la tabla se muestran los resultados relacionados con la edad de las pacientes y la infeccin vaginal. Se observa que la trichomoniasis vaginal es ms frecuente en pacientes entre 20 y 39 aos de edad. Tabla Relacin entre la edad de las pacientes y la infeccin vaginal por Trichomonas vaginalis Edad Nmero de mujeres positivas por cultivo Menores de 20 18 20-29 51 30-39 57 40-49 10 Mayores de 50 1 En la siguiente tabla 4 se observan los resultados de la encuesta relacionada con los signos y sntomas clnicos que presentan las pacientes con trichomoniasis. Se aprecia que de 156 mujeres encuestadas, 5 presentaron leucorrea amarillenta, 28 presentaron prurito y 51 fetidez. Se evidenci en este trabajo que la caracterstica clnica significativamente ms frecuente en la trichomoniasis vaginal, es la leucorrea de color amarillo. 13 Resultados de la encuesta realizada a mujeres con trichomoniasis vaginal Signos y sntomas clnicos Resultados N de mujeres Leucorrea Amarillenta 95 Blanca 31 Otras 12
Sin secreciones 18 Prurito Con prurito 28
Sin prurito 128 Fetidez Sin fetidez 51 Con fetidez 105 Diagnstico El pH de la secrecin vaginal normal oscila ente entre 3.8 y 4.2. Un pH mayor a 4.5 se observa en aproximadamente 80 % de las mujeres con vaginosis bacteriana y tricomoniasis. La determinacin del pH no es de utilidad en la vaginitis debida a Candida, ya que se conserva dentro de lmites normales. En Mxico, las herramientas diagnsticas disponibles en la mayor parte de los laboratorios clnicos son el examen en fresco de secreciones y cultivo de exudado cervico-vaginal. Tcnica (mujeres) Sensibilidad (%) Especificidad (%) Examen en fresco (mtodo convencional) * 50 - 60 >90 Cultivo * 76 - 95 >95 Papanicolaou en base lquida 60 - 96% 98 - 100% Cultivo en bolsa "InPouch" (minutos - das) 85 - 95 >95 PCR (resultados segn estndares del laboratorio) >90 >95 Affirm VPIII (prueba rpida - minutos) >90 >95 OSOM Trich (prueba rpida - minutos) 94.7 >95 APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 95 - 100 >95 Tcnica (hombres) Sensibilidad (%) Especificidad (%) Examen en fresco * ~ 30 Baja Cultivo de exudado uretral * ~ 60 Alta Cultivo de sedimento urinario ~ 60 Alta Cultivo uretral y de orina * >60 Alta PCR (resultados segn estndares del laboratorio) >90 >90 * Disponibles en la mayor parte de los laboratorios clnicos de Mxico. 2013 Diagnstico diferencial: Vaginosis bacteriana Infecciones por Candida spp. Vulvovaginitis de etiologa no infecciosa. Debe realizarse un tamizado de los pacientes con trichomonosis para la bsqueda de otros patgenos de transmisin sexual, entre ellos Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae y el virus de la inmunodeficiencia humana. En un estudio relacionado registrado por una revista Cubana Obstet Ginecol Mayo-ago. 2005. Se obtuvo lo siguiente: Se realizaron los siguientes estudios y sus resultados en cuanto a especificidad y sensibilidad. 1. Toma de muestra del exudado vaginal Se realizaron 1129 exudados vaginales a mujeres que presentaban trastornos ginecoobsttricos y asistieron a las consultas de los hospitales "Ramn Gonzlez Coro" materno "Hijas de Galicia", Policlnico del Este, en Ciudad de La Habana y materno de San Jos de las Lajas, y centros de Higiene y Epidemiologa en Provincia Habana. El exudado vaginal se tom con un hisopo estril y con la ayuda de un espculo tambin estril. La muestra recogida se coloc en un tubo de ensayo que contena entre 1-2 mL de solucin salina estril hasta su observacin y cultivo. 2. Observacin directa al microscopio Para efectuar la observacin directa se elimin el sobrenadante del exudado y se coloc una gota del sedimento en un portaobjeto, se cubri con un cubre objeto y se observ al microscopio ptico en un lente 40x. 3. Prueba rpida de ltex La prueba rpida de ltex globulina se realiz eliminando primero parte del sobrenadante del exudado, se agit el resto para despus depositar 20 L del sedimento de ste, ms 20 L del reactivo de ltex acoplado; ambas cantidades se depositaron en una superficie de cristal. Con un agitador se mezclaron ambas gotas y se procedi a imprimir un movimiento de rotacin por 3 min. Durante ese tiempo se observ contra una superficie oscura y se determin la positividad por la presencia de una aglutinacin, similar a la del control positivo. 4. Cultivo del exudado Se colocaron alrededor de 100 L del exudado vaginal en un tubo de cultivo de tapa de rosca que contena 5 mL de medio de cultivo Diamond modificado. Posteriormente se incub a 37C durante 48 h, pasado ese tiempo se tom una gota del sedimento con ayuda de una pipeta Pasteur y se coloc sobre un portaobjeto para observarla en el microscopio en el lente de 40x. 13 Resultados Del total de exudados vaginal analizados resultaron positivos por la prueba directa 97, para el 8,5 % y por la prueba rpida de ltex y el cultivo 156, para el 13,5 %. La observacin directa al microscopio detect un nmero menor de exudados positivos comparado con el cultivo de las muestras y la tcnica de ltex. 13 Resultados del diagnstico de T. vaginalis en diferentes centros asistenciales del pas aplicando 3 tcnicas de laboratorio Centro asistencial No. de muestras Positivas por Ltex Cultivo Examen directo "Ramn Gonzlez Coro" 564 33 33 31 Materno San Jos 166 23 22 14 Higiene y Epidemiologa 167 15 14 13 Policlnico del Este 47 7 7 6 Materno 10 de octubre 185 78 80 33 Total % 1 129 156 (13,5%) 156 (13,5%) 97 (8,5 %) La sensibilidad, especificidad y eficacia entre la prueba de ltex y el examen directo se realiz tomando como verdaderos positivos las muestras en que se aisl el microorganismo en el cultivo. Se puede observar que el reactivo de ltex presenta mayor sensibilidad y eficacia que el examen directo, aunque ambos mtodos tienen semejante especificidad. Resultados de la sensibilidad, especificidad y eficacia entre la prueba rpida de ltex y el diagnstico directo Indicadores de calidad Resultado (%) Ltex Directo Sensibilidad 98,7 61,9 Especificidad 99 99,8 Eficacia 99 94 En otros artculos se mencionan los siguientes avances: PCR en tiempo real para la deteccin de Trichomonas vaginalis en genes b-tubulina y 18S rRNA en muestras genitales femeninas. Nos habla sobre que en Australia la prevalencia de este parasito es muy alta en zonas rurales asociada tambin con el aumento del riesgo de transmisin del virus de la inmunodeficiencia humana. En este artculo nos habla de un mtodo en esta orientacin a el anlisis de la b - tubulina y los genes de 18S rRNA para ello se utilizaron las pruebas de PCR en tiempo real el cual mostro en este estudio que proporcionan una herramienta de diagnstico rpido para la deteccin de T. vaginalis y el uso de sondas de hibridacin FRET aumenta la especificidad de las pruebas en comparacin con otros ensayos de PCR en tiempo real. Se cree que la focalizacin de dos regiones genticas diferentes, b- tubulina y 18S rRNA, de T. vaginalis proporciona una mayor especificidad de la prueba y en general es muy poco probable que acuse falsos positivos. Los ensayos de PCR en tiempo real que se describen en este estudio mostraron una alta sensibilidad (96-100 %) y una especificidad del 100 % para los de deteccin de ADN de T. vaginalis. La prevalencia de tricomoniasis fue del 18% (89 /500) en este estudio de 500 pacientes de sexo femenino.
La alta sensibilidad y especificidad de la PCR reportado en este estudio podra ofrecer una herramienta de deteccin rpida y til lo cual podra reducir la propagacin y transmisin de la infeccin, en particular de pacientes asintomticos. 14 Prueba rpida del antgeno que se compara favorablemente con la transcripcin mediada por amplificacin de ensayo para la deteccin de Trichomonas vaginalis en mujeres jvenes
Este estudio pone de relieve la necesidad de mejorar la deteccin de T. vaginalis infeccin en mujeres adolescentes, porque la mitad de los casos se han alcanzado por montaje hmedo. La infeccin de T. vaginalis se ha implicado en la adquisicin y el derramamiento de varias infecciones graves, incluyendo el virus del herpes simple, el virus del papiloma humano, e infecciones por VIH.
Para este estudio se seleccionaron mujeres adolescentes sexualmente activas de entre 14-21 aos. Se detect T. vaginalis en 61 participantes (18,5 %). En comparacin con un estndar de referencia de material compuesto (es decir, cualquier Prueba de la T. vaginalis con resultados positivos), la sensibilidad de montaje hmedo, la prueba rpida de antgenos y TMA fueron 50,8 %, 82 %, y 98,4 %, respectivamente. Utilizando el anlisis de clases latentes, la sensibilidad de preparacin en fresco (56 %) fue significativamente inferior a la de otras pruebas. TMA tuvo una sensibilidad del 98,2 % y una especificidad del 98 %. Pruebas realizadas igualmente bien independientemente de si el participante haba sangrado u otra infecciones. La sensibilidad de la prueba rpida de antgenos y TMA fueron comparables (92,5 % y 97,5 %, respectivamente) en las mujeres que tenan sntomas vaginales. Conclusiones. Solo montaje hmedo es insuficiente para el diagnstico fiable de la infeccin de TV en las mujeres. TMA y pruebas rpidas de antgenos son altamente sensibles y especficas, y ambas son superiores a mojar montura. Prueba rpida de antgenos es equivalente a la cultura, y que se compara favorablemente con la sensibilidad de TMA para la deteccin de T. vaginalis. 15
Avances en el laboratorio en la deteccin de Trichomonas vaginalis El mtodo de diagnstico tradicional para la tricomoniasis tiene se centra en la n visualizacin microscpica de parsitos mviles de T. vaginalis en secreciones uretrales. En una prueba barata, sin embargo, la sensibilidad se calcula en 51-65 %, y vara en funcin de la realizacin personal de la prueba y de la prontitud con la cual es interpretada.
La cultura ha sido considerada el estndar de oro para el diagnstico de la tricomoniasis, con una especificidad cercana al 100%, pero no es ampliamente utilizado y su sensibilidad puede ser tan baja como 75 a 96%. El papanicolaou a base de lquido convencional no son aptos diagnstico de rutina de T. vaginalis, ya que la sensibilidad es pobre.
El OSOM (antes Xenostrip) Se realiza en las secreciones vaginales con resultados disponibles en 10 minutos. Especificaciones de prueba incluyen sensibilidad 82-95% y especificidad 97-100%. 16 Investigacin de Trichomonas vaginalis durante el embarazo mediante diferentes metodologas La infeccin por Trichomonas vaginalis durante el embarazo reviste gran importancia ya que dicha infeccin predispone a rotura prematura de membrana, labor pretrmino y bajo peso al nacer. La prevalencia del parsito obtenida por cultivo (medio lquido ms medio slido) fue de 4,5% (10/223) siendo la deteccin por examen en fresco, coloracin de May-Grunwald Giemsa, fresco con solucin actica formolada (SAF)/azul de metileno y por cultivo en medio slido y lquido de 1,3%, 1,8%, 1,8% y 4,5% respectivamente. La sensibilidad del examen en fresco fue 30%, para el May-Grunwald Giemsa y el SAF/azul de metileno fue 40%. Utilizando conjuntamente los tres exmenes microscpicos, la sensibilidad se elev al 50% y la especificidad fue 100% para todos los exmenes microscpicos. El cultivo en medio lquido detect el 100% de los casos positivos, mientras que el medio slido slo el 50%. Por la baja sensibilidad de la microscopa para T. vaginalis, en embarazadas asintomticas recomendamos la utilizacin del cultivo en medio lquido durante el embarazo, para instaurar un tratamiento precoz. 17 Trichomonas vaginalis: revisar las opciones de pruebas de diagnstico disponibles Las opciones de pruebas de laboratorio de los T. vaginalis incluyen un ensayo inmunocromatogrfico basado en antgeno que tiene una buena sensibilidad, la deteccin de aproximadamente el 80% de las infecciones 16 (este ensayo se pretende como una prueba de punto de atencin); una prueba basada en el instrumento directa basada en el ADN sonda de muestra para diagnstico (para el uso en el mbito clnico para identificar el agente causante de la vaginitis-slo para ser utilizado en muestras de pacientes sintomticos); una prueba de amplificacin de cido nucleico; reaccin en cadena de la polimerasa; y la cultura. El ensayo de sonda de ADN se ha estimado en aproximadamente 62% sensible en comparacin con NAAT. En general, el costo en comparacin con preparacin en fresco, que se considera que tiene una sensibilidad aceptable, ha sido el factor que impide la absorcin de estos ensayos. Esos ensayos moleculares proporcionan claras ventajas sobre otros tipos de diagnsticos. En primer lugar, pueden realizarse usando muestras recogidas para el cribado de clamidia / gonorrea en sistemas totalmente automatizados. Esto permite a los mdicos ordenan un panel ms completo de diagnstico o evaluacin de una sola muestra. Adems, estos ensayos son ideales para las muestras vaginales, el tipo de muestra recomendado para el cribado de clamidia / gonorrea, y pueden ser auto-obtenido. Dadas las altas estimaciones de prevalencia entre las mujeres que son apropiados para el cribado de clamidia / gonorrea, adems de la deteccin de Trichomonas tiene un alto potencial para la identificacin de infecciones que antes no. Ms all de cribado combinado de las mujeres que se estn probando para la clamidia / gonorrea, la distribucin de las tricomonas es algo diferente de estas otras enfermedades de transmisin sexual, con tasas de prevalencia en horas pico en las mujeres de mayor edad (40-55 aos de edad). Por lo tanto, para las mujeres con riesgo elevado de comportamiento o para las mujeres con sntomas, esta tecnologa ofrece resultados muy precisos para las poblaciones que no estn siendo rutinariamente para detectar la clamidia / gonorrea. La disponibilidad del diagnstico molecular, especialmente la capacidad de utilizar muestras no restringidas a la recogida por un mdico, ha mejorado nuestra capacidad para comenzar a recoger datos epidemiolgicos sobre la distribucin y los riesgos asociados de T. infeccin vaginal. Como se generan ms datos, los laboratorios deben esperar ver aumentos continuos en las solicitudes de T. vaginalis pruebas. Esto puede conducir a la mejora de los estudios de los resultados negativos de las infecciones no tratadas, as como nuevos ensayos de tratamiento para evaluar el impacto del tratamiento en la prevencin de las consecuencias de la infeccin. Sin embargo, a pesar del aumento esperado en las solicitudes de prueba, no debemos esperar la presente ITC se agregue a la lista de enfermedades de declaracin obligatoria en cualquier momento en un futuro prximo. Hasta que se disponga de datos epidemiolgicos y de prevencin ms fuerte, utilizando los recursos de salud pblica para hacer un seguimiento de esta infeccin en la poblacin no est justificada. 18 Tratamiento El metronidazol es el agente antimicrobiano ms usado para el tratamiento contra la triconomiasis. Pero como, los Centros para el Control y la Prevencin de ETS recomiendan terapia con metronidazol para los pacientes con infeccin de la TV diagnosticada con la preparacin mojada y para los pacientes con exposicin a una pareja TV-INFECTADA; sigue siendo el tratamiento de opcin para los pacientes, por lo que son necesarios ms estudios en pacientes con sntomas de la vulvo-vaginitis para saber el verdadero predominio de la resistencia. Por esto, hubo una necesidad de desarrollar nuevos medicamentos antitriconomiasis, en este contexto el medicamento quinolinium bisquaternary (MQB) es casi tan efectivo como el metronidazol y tiene baja toxicidad con las clulas humanas, pero son necesarios ms estudios para aprobar su uso en quimioterapia contra T. vaginalis. La produccin de spermine en el ciclo de vida de T. vaginalis es inhibido por la accin del DENSpm, lo que proporciona el potencial de esta va como blanco para el diseo de agentes antitricomonas. Sin embargo, las recomendaciones de terapia con metronidazol para mujeres se pueden instituir en instalaciones para el cuidado mdico, ya que este antibitico es barato, seguro y bien tolerado y no debe ser ignorado. Trichomonas vaginalis Resistencia Bacteriana en 6 ciudades de EE.UU., la Red de Vigilancia de enfermedades de transmisin sexual. Nitroimidazoles (metronidazol y tinidazol) son los nicos medicamentos recomendados para el tratamiento de la infeccin por Trichomonas vaginalis , y las muestras anteriores que evaluaron la resistencia de estos aislamientos se han limitado en su alcance geogrfico. Se evalu la prevalencia de metronidazol aerbico in vitro y tinidazol resistencia entre T. vaginalis aislamientos de mltiples sitios geogrficos en los Estados Unidos. Las muestras se obtuvieron de las mujeres que se sometieron a exmenes plvicos de rutina en las clnicas de enfermedades de transmisin sexual en 6 ciudades de Estados Unidos. De 538 T. vaginalis 23 aislamientos (4,3 %) mostraron bajo nivel de resistencia a metronidazol vitro (concentraciones mnimas letales 50-100 mg / mL). No hay aislamientos mostraron de moderada a la resistencia al metronidazol alto nivel o resistencia tinidazol. Los resultados destacan la posibilidad de que la dependencia de una sola clase de medicamentos antimicrobianos para el tratamiento de T. vaginalis y estas infecciones pueden aumentar la vulnerabilidad a la aparicin de resistencia. Por lo tanto, se necesitan nuevas opciones de tratamiento. 19 Los frmacos de 5 - nitroimidazoles, de los cuales el metronidazol es el ms prescrito, son los aprobados, medicamentos eficaces para tratar la tricomoniasis. La resistencia contra el metronidazol se informa con frecuencia y resistencia cruzada entre la familia de las drogas 5 - nitroimidazoles es comn, dejando otra alternativa para el tratamiento, con algunos casos an no resueltos. El mecanismo de resistencia a metronidazol en T. vaginalis de fracasos del tratamiento no se entiende bien, a diferencia de la resistencia que se desarrolla en el laboratorio bajo una creciente presin metronidazol. En la ltima situacin, la funcin hydrogenosomal que est implicado en la activacin del profrmaco, metronidazol, es el regulado. La reversin a la sensibilidad es incompleta despus de la eliminacin de la presin de drogas en los parsitos altamente resistentes mientras que las cepas clnicamente resistentes, hasta ahora analizados, mantienen sus niveles de resistencia en la ausencia de presin de drogas. Aunque la resistencia anaerbica ha sido considerado como un fenmeno inducido de laboratorio, que se ha demostrado claramente en los aislados clnicos. Persecucin de ambos enfoques permitir la diseccin de los mecanismos subyacentes. Muchos medicamentos y tratamientos alternativos se han probado in vivo en los casos de tricomoniasis refractario, as como in vitro con algunos xitos incluyendo el amplio espectro de la nitazoxanida frmaco anti - parasitario. 20
Prevencin No se han publicado estudios sobre los predictores de esta infeccin entre mujeres adolescentes, ya que en adultos pueden ser diferentes, reflejando la necesidad de disear sesiones de educacin individual y grupal que promuevan evitar el uso de la marigana, sexo con parejas mayores y no constantes (sin proteccin) y la delincuencia para reducir la incidencia de T vaginalis. Ya que la infeccin con T vaginalis y los tratamientos existentes aumenta resultados adversos durante el embarazo, los tratamientos no deben ser recomendados. Por lo que la prueba de la susceptibilidad de T vaginalis al metronidazol, bajo concentraciones de oxigeno in vitro, se debe realizar ms a menudo, sin embargo este anlisis solo es sugerido para laboratorios clnicos avanzados de microbiologa, lo que refleja una urgente necesidad de un nuevo mtodo para determinar esta susceptibilidad.
Bibliografa: Articulos [1] Structure of a Protozoan Virus from the Human Genitourinary Parasite Trichomonas vaginalis Marzo 2013 [2] Prevalencia de Trichomonas vaginalis en trabajadores sexuales Medicina (B. Aires) vol.71 no.5 Ciudad Autnoma de Buenos Aires oct. 2011 [3] Prevalence of Trichomonas vaginalis and Coinfection with Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae in the United States as Determined by the Aptima Trichomonas vaginalis Nucleic Acid Amplification Assay J Clin Microbiol. Aug 2012; 50(8): 26012608 [4] Tricomonosis urea Pereira y Mnica Prez vol. 22 nm. 4 abril 2003 [5] Trichomonas vaginalis: Parasito nmero uno de transmisin sexual Laboratorio de zoologa Escuela de biologa, Universidad autnoma de Sinaloa Diciembre del 2003. [6] Trichomonas vaginalis Contact-Dependent Cytolysis of Epithelial Cells May 2013; 81(5): 14111419 [7] Trichomonas vaginalis vast BspA-like gene family: evidence for functional diversity from structural organisation and transcriptomics BMC Genomics. 2010; 11: 99 [8] Trichomonas vaginalis Exosomes Deliver Cargo to Host Cells and Mediate HostParasite Interactions Published: July 11, 2013DOI: 10.1371/journal.ppat.100348 [9] Mecanismos de Patogenicidad de la Trichomonas Agosto 16, 2007 [10] Trichomonas vaginalis Is Associated with Pelvic Inflammatory Disease in Women Infected with Human Immunodeficiency Virus Prashini Moodley,1 David Wilkinson,4 Cathy Connolly,3 Jack Moodley,2 and A. Willem Sturm 15 febrero del 2002 [11] Early Repeated Infections with Trichomonas vaginalis among HIV-Positive and HIV-Negative Women Abril 2008 [12] Infeccin humana por Trichomonas vaginalis y su relacin con otros agentes patgenos. Rev Cubana Obstet Ginecol v.35 n.4 Ciudad de la Habana oct.-dic. 2009 [13] Diagnstico y sntomas clnicos de la trichomoniasis vaginal Rev Cubana Obstet Ginecol v.28 n.2 Ciudad de la Habana Mayo-ago. 2005 [14] Real-time PCRs for detection of Trichomonas vaginalis b-tubulin and 18S rRNA genes in female genital specimens Journal of Medical Microbiology (2007), 56, 772777 [15] Rapid Antigen Testing Compares Favorably with Transcription-Mediated Amplification Assay for the Detection of Trichomonas vaginalis in Young Women 15 julio 2007 [16] Advances in laboratory detection of Trichomonas vaginalis 2013 [17] Investigacin de Trichomonas vaginalis durante el embarazo mediante diferentes metodologas Revista: Argentina de Microbiologa 2007 39(2) [18] Trichomonas vaginalis: reviewing the available diagnostic testing options Por Barbara Van Der Pol, PhD, MPH, agosto 2013 [19] Trichomonas vaginalis Antimicrobial Drug Resistance in 6 US Cities, STD Surveillance Network, 20092010 Jun 2012; 18(6): 939943 [20] Drug resistance in the sexually transmitted protozoan Trichomonas vaginalis Cell Research (2003) 13, 239 249. doi:10.1038/sj.cr.7290169 Paginas de internet [21] http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/001331.htm [22] http://www.youngwomenshealth.org/sptrich.html [23] http://es.scribd.com/doc/16839852/trichomonas [24] http://www.webmd.com/sexual-conditions/guide/trichomoniasis [25] http://www.gineblog.com/ginecologia/patologia-genital/infeccion-genital-trichomona-vaginalis.html [26] http://www.tayrona.org/trichomonas/tricomonas.html [27] http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/parasitologia/tricomoniasis.html [28] Informacin Epidemiolgica de Morbilidad Anuario 2011-Versin Ejecutiva 2011 Libros [29] Atlas de Parasitologia Lawrence R. Ash, Thomas C. Orihel 5ta EDICIN [30] Microbiologia y parasitologia humana Ral Romero Cabello - 2007 [31] Parasitologia Medica 2edicion Becerril [32] Parasitologa/ Othon Cruz Lopz. [33] Parasitologa: Diagnostico, prevencin y tratamiento / Edward K. Markell ; Marietta Voge ; tr. Victor A. de la Garza Estrada.