Cuestionario Previo.

Espectrofotometra

1.- Cmo se determina el espectro de absorcin de una solucin colorida?

Existen dos mtodos fotomtricos generales:

La fotometra directa: Es el mtodo ms general. Se mide la
absorbancia de la especie a determinar, si es coloreada, o bien el
producto de su reaccin de un reactivo si no presenta color. La
absorbancia es proporcional a la concentracin de la sustancia.
La fotometra indirecta: la sustancia a determinar origina la
desaparicin del color que se aprovecha con fines cuantitativos. La
disminucin de absorbancia es proporcional a la concentracin de la
sustancia a determinar.

2.- Cmo se selecciona la longitud de onda apropiada en un espectro para la
aplicacin en la determinacin de concentraciones por espectrofotometra?

La radiacin que incide sobre la muestra absorbente debe de ser lo ms
monocromtica posible, es decir, debe tener slo un pequeo rango de
longitudes de onda, porque:

Cuanto ms monocromtica sea la radiacin, mejor se cumplir la ley de
Beer. puede aumentarse la selectividad, puesto que las sustancias absorban a
otra longitud de onda no interferirn si el rango es estrecho. La sensibilidad
es mucho mayor si se selecciona la longitud de onda de mxima absorcin.

3.- Qu establece la ley de Lambert-Beer-Bourger?

Ley de Lambert-Beer-Bourger:

A = -log T
A = log ( I / I0 ) = ( x b) x c
ABSORBANCIA = ( x b) x c
que establece una relacin lineal entre la absorbancia y la concentracin,
donde:

.- es la constante de proporcionalidad llamada coeficiente de absorcin
molar, absortividad molar o coeficiente de extincin (M-1 cm-1). Es la
caracterstica de una sustancia que nos dice cunta luz absorbe a una
longitud de onda determinada.
b.- es el paso ptico, anchura de la celda que contiene la muestra (cm).
c.- es la concentracin de la especie de la cual estamos midiendo la
absorbancia (M).

La ecuacin mencionada es el fundamento de la espectrofotometra. La ley
de Lambert-Beer Bourger se cumple para una radiacin monocromtica que
atraviesa una disolucin diluida ( 0.01M), cuando la especie absorbente no
participa en un equilibrio que dependa de su concentracin.

4.- Qu es, para qu sirve y cmo se construye una curva patrn?

Una curva patrn se construye usando soluciones de concentraciones conocidas
de un compuesto determinado.

Luego de determinar la longitud de onda de mxima absorcin y las
condiciones necesarias para alcanzar excelentes resultados, el siguiente paso es
construir la curva de calibracin utilizando una solucin patrn del analito en
cuestin, y a partir de aqu realizar los anlisis cuantitativos para determinar
las concentraciones desconocidas en disoluciones de las muestras. La curva de
calibracin se construye con las parejas de datos concentracin y absorbancia.

Para alcanzar la exactitud mxima (mnimo error relativo), deben tomarse
las medidas sobre una muestra de concentracin tal, que la transmitancia
quede comprendida en el intervalo de 20% a 60%.

El error no es demasiado grande para valores de transmitancia entre 20% y
60 %.