UNIVERSIDADE DE SO PAULO

ZHAO LILI



SNTESE E CARACTERIZAO DO COPOLMERO
TRIBLOCO ANFIFLICO BIODEGRADVEL POLI(L, L-
LACTDEO-STAT- -CAPROLACTONA)-BLOCO-
POLI(XIDO DE ETILENO)-BLOCO-POLI(L,L-LACTDEO-
STAT- -CAPROLACTONA)





Dissertao de mestrado apresentada ao
Departamento de Engenharia Metalrgica e de
Materiais da Escola Politcnica da Universidade
de So Paulo como parte dos requisitos para a
obteno do ttulo de Mestre em engenharia.






So Paulo

2007
1
SUMRIO

AGRADECIMENTOS ....................................................................................................... i
RESUMO ............................................................................................................................ ii
ABSTRACT ....................................................................................................................... iii
LISTA DE FIGURAS ........................................................................................................ iv
LISTA DE TABELAS ...................................................................................................... vii
LISTA DE ABREVIATURAS ........................................................................................ viii


1. INTRODUO................................................................................................................ 4
2. OBJETIVOS ................................................................................................................... 10
3. REVISO BIBLIOGRFICA...................................................................................... 12
3.1. POLISTERES ......................................................................................................... 12
3.1.1.cido Lctico....................................................................................................... 12
3.1.1.1. Produo do cido lctico............................................................................... 14
3.1.1.2. Preparao de polmeros baseados em cido lctico..................................... 17
3.1.2. Poli (cido Gliclico)......................................................................................... 20
3.1.3. Poli(-caprolactona) .......................................................................................... 22
3.2. POLI(GLICOL ETILNICO)/POLI(XIDO DE ETILENO) ................................. 24
3.2.1. Propriedades do PEG......................................................................................... 25
3.2.2. Aplicaes do PEG............................................................................................. 27
3.3. POLIMERIZAO POR ABERTURA DE ANEL................................................. 28
3.4. BIODEGRADAO................................................................................................ 32
2
3.4.1. Fatores que Influenciam a Degradao............................................................. 35
3.4.1.1. Localizao do Implante ............................................................................. 35
3.4.1.2. Composio Qumica .................................................................................. 36
3.4.1.3. Cristalinidade.............................................................................................. 37
3.4.1.4. Massa molar ................................................................................................ 37
3.4.1.5. Reticulao.................................................................................................. 37
3.4.1.6. Morfologia................................................................................................... 38
3.5. ENGENHARIA DE TECIDOS................................................................................. 39
4. PARTE EXPERIMENTAL........................................................................................... 43
4.1. MATERIAIS ................................................................................................................. 43
4.2. EQUIPAMENTOS: ......................................................................................................... 43
4.3. METODOLOGIA........................................................................................................... 44
4.3.1. Procedimento geral para sntese de copolmero tribloco com PEG20K (1) ..... 45
4.3.2. Sntese de PEG modificados (PEG-MODIF) a partir de PEG com 4000 u.m.a.
(PEG 4K) (2) ................................................................................................................ 47
4.3.2.1. Fundamentos tericos e clculos ................................................................ 47
4.3.2.2. Procedimento da sntese de poli(glicol etilnico)s a partir de PEG com
4000 u.m.a. (2).......................................................................................................... 49
4.3.3. Sntese de copolmero tribloco Poli(PLLA-CL-b-PEG-b-PLLA-CL)a partir de
PEG -MODIF (3).......................................................................................................... 50
5. CARACTERIZAO E RESULTADOS.................................................................... 51
5.1. RESSONNCIA MAGNTICA NUCLEAR (RMN-
13
C E RMN-
1
H).................................. 51
5.2. ANLISE TRMICA DINMICO-MECNICA (DMTA).................................................... 62
3
5.3. CALORIMETRIA EXPLORATRIA DIFERENCIAL (DSC)................................................ 67
5.4. TERMOGRAVIMETRIA / TERMOGRAVIMETRIA DERIVADA (TG/DTG)......................... 74
5.5. ANLISE POR DIFRAO DE RAIO-X (WIDE ANGLE X-RAY SCATTERING WAXS) ........ 81
5.6. MICROSCOPIA TICA DE LUZ POLARIZADA (MOLP)................................................... 87
5.7. MICROSCOPIA ELETRNICA DE VARREDURA (MEV) .................................................. 91
5.8. TESTES DE BIOCOMPATIBILIDADE............................................................................... 94
6. CONCLUSES............................................................................................................... 97
7. BIBLIOGRAFIA............................................................................................................ 99



























4
1. INTRODUO

Neste incio do sculo XXI, aproximadamente seis bilhes de pessoas vivem no
planeta Terra e, estima-se que a populao ultrapasse os dez bilhes at meados do sculo.
Por causa desse aumento explosivo da populao, o mundo comeou a enfrentar vrios
problemas srios, como escassez de recursos energticos, alimentcios e a poluio
ambiental. A cincia e a tecnologia fizeram um progresso surpreendente no ltimo sculo,
particularmente depois da Segunda Guerra Mundial, tornando a vida cotidiana mais
confortvel e conveniente. Da mesma forma, para os materiais polimricos, a variedade de
polmeros sintticos est aumentando cada vez mais e suas aplicaes esto substituindo os
usos tradicionais de fibras naturais, madeiras e borrachas naturais. Os polmeros sintticos
so utilizados em um campo imenso de aplicaes, tais como transporte, construo,
embalagens, reas mdicas, etc. Hoje em dia, 150 milhes de toneladas de plsticos so
produzidos anualmente em todo o mundo e, a produo e o consumo continuam crescendo.
A maioria desses plsticos originada do petrleo e o aumento da produo deles, como
conseqncia, resulta no crescimento do consumo de leo. O ponto mais preocupante que
a grande durabilidade desses polmeros sintticos causa um impacto ambiental muito
significativo devido ao seu lento processo de degradao.
[1]

Uma das estratgias que resolvem esses difceis problemas de recursos fsseis e do
meio ambiente a reciclagem dos materiais polimricos eliminados. De fato, a reciclagem
do plstico tem se tornado altamente popular em todo o mundo. A reciclagem do plstico
deveria ser disseminada com maior amplitude, porm a poluio causada pelos mesmos no
pode ser solucionada apenas por meios de reciclagem. Nem sempre possvel recuperar
todo o plstico utilizado. Nesses casos deveria ser indispensvel o uso de polmeros
5
biodegradveis. Alm disso, percebe-se que esses processos de reciclagem, tanto a
mecnica quanto a qumica, consomem considervel quantidade de energia trmica e por
este motivo, no se pode recicl-los para sempre, sendo esses materiais geralmente
destinados queima ou aterros sanitrios. Tendo isto em considerao, entende-se
facilmente a necessidade dos polmeros biodegradveis, os quais so reciclados por
microorganismos sem o consumo de energia trmica.
[1,2]

Polmeros biodegradveis so definidos como polmeros que so degradados,
eventualmente transformados em dixido de carbono e gua, por microorganismos tais
como bactrias e fungos.
[3]
Portanto, quando esses polmeros vierem a ser degradados, eles
no devero gerar quaisquer substncias danosas ao meio ambiente. Polmeros
biodegradveis podem ser classificados em: i. Polmeros naturais (colgeno, lipdios,
celulose e polissacardeos, entre outros); ii. Polmeros naturais modificados (por
exemplo, reticulao de gelatina utilizando-se formaldedo, reticulao de quitosana
utilizando-se glutaraldedo ou transformao de celulose a acetato de celulose); iii.
Polmeros sintticos (poli(lcool vinlico), poli(cido acrlico), poli(acrilamidas),
poli(etilenoglicol), polisteres, etc
[4-6]
).

Entre os polisteres, tem-se o poli(glicoldeo) como
polmero aliftico linear mais simples. Na grande famlia de polmeros biodegradveis,
destacam-se dois grupos: o primeiro de plsticos biodegradveis para consumos dirios
comuns tais como sacos de lixos, embalagens de alimentos, cosmticos, de produtos de
limpeza, etc, substituindo os viles da poluio ambiental; e um segundo grupo constitudo
por polmeros com aplicaes na rea mdica e farmacutica, tais como implante de
dispositivos mdicos, rgos artificiais, dispositivos de liberao controlada de drogas,
prteses, etc.
[7]
Para esses usos, exige-se do polmero tanto biodegradabilidade quanto
biocompatibilidade.
6
No primeiro grupo tem-se um famoso representante, o poli(hidroxibutirato) (PHB),
cuja descoberta ocorreu graas a uma bactria chamada Burkholderia sacchari, a qual se
alimenta diretamente de acar, transformando o excedente do seu metabolismo em um
plstico biodegradvel, o que foi nomeado de PHB, posteriormente.
[3],[4]
Tecnicamente, o
PHB possui propriedades mecnicas semelhantes ao polipropileno: resistente a gua e
possui a impermeabilidade a gases. Quanto biodegradabilidade, ele se decompe em uma
grande diversidade de meios, liberando apenas gua e gs carbnico. Em fossas spticas, a
perda da massa chega a 90% em 180 dias e em aterro sanitrio perde 50% da massa em 280
dias, enquanto que o plstico de origem petroqumica pode levar centenas de anos para se
degradar.
[10]
A fabricao do PHB em escala industrial pode ser integrada totalmente linha
de produo da usina de acar. A energia para cultivo da bactria vem da queima de
bagao de cana.
[8][9]
O alimento o prprio acar e o solvente usado para retirar o
polmero das bactrias um derivado da produo de etanol. At os efluentes da linha de
produo tm aplicao dentro da cadeia produtiva: so usados para adubar e irrigar
plantaes. Alm disso, a alta produtividade (para cada 3 quilos de acar utilizado para
alimentar as bactrias possvel obter 1 quilo de plstico), revelada pelos pesquisadores do
IPT (Instituto de Pesquisas Tecnolgicas), tornou a produo industrial do PHB ainda mais
atraente.
[10]

J na famlia dos polisteres alifticos, os polmeros, tais como o poli(-
caprolactona), poli(l-lactdio) e poli(cido gliclico), atualmente, so produzidos
comercialmente e suas vendas continuam crescendo
[9],[11]
. Alm desses polisteres
alifticos, vrios tipos de polmeros sintticos biodegradveis tm sido projetados e
testados para aplicaes prticas. Muitos copolmeros desses materiais so utilizados como
7
sistema de liberao controlada de frmacos. Essa tecnologia envolve diferentes aspectos
multidisciplinares e pode contribuir muito para o avano da sade humana. O chamado
drug delivery system oferece inmeras vantagens quando comparados a outros de
dosagem convencional:
[12-16]

a) Maior eficcia teraputica, com liberao progressiva e controlada do frmaco, a
partir da degradao da matriz;
b) Diminuio significativa da toxicidade e maior tempo de permanncia na
circulao;
c) Natureza e composio dos veculos variados e, ao contrrio do que se poderia
esperar, no h predomnio de mecanismos de instabilidade e decomposio do
frmaco (bio-inativao prematura);
d) Administrao segura (sem reaes inflamatrias locais) e conveniente (menor
nmero de doses);
e) Direcionamento a alvos especficos, sem imobilizao significativa das espcies
bioativas;
f) Tanto substncias hidroflicas quanto lipoflicas podem ser incorporadas.

Outra aplicao interessante a confeco de implantes, suportes (scaffolds) para
crescimento celular, suturas de uso temporrio
[17-18]
e no removveis. Por ter uma
biodegradao atxica em uma escala de tempo programvel, a principal vantagem clnica
destes dispositivos temporrios e bio-assimilveis, a reduo de infeces e reduo de
custo, pois no necessitam de uma segunda cirurgia para remoo do implante.
[19]

Na engenharia de tecidos, o primeiro passo para a reconstruo de um rgo ou
tecido visa seleo do suporte para as clulas. Assim, o material polimrico utilizado no
8
caso de necessidade de scaffolds desenvolvido de forma a suportar fsica e
mecanicamente as clulas, da inoculao at o reimplante no organismo hospedeiro.
Portanto, o material tem funo como um suporte para o crescimento celular e
paralelamente servir como substituto mecnico/estrutural do tecido original at a formao
do novo tecido. Enquanto o tecido se desenvolve, o polmero degradado e reabsorvido
gradualmente, permitindo espao para a proliferao celular; a cultura in vitro e o tecido
maduro so formados no final dessa etapa. Somente aps a formao completa do tecido, o
implante inserido no organismo.
[20-21]

Durante a dcada de 90, grandes investimentos foram feitos em pesquisas e
desenvolvimentos de engenharia de tecidos cartilaginosos e sseos, liderados por mdicos e
engenheiros e os scaffolds de PGA e PLA foram relatados em usos de reconstrues
cartilaginosas. Nos ltimos anos, eles foram testados experimentalmente visando at a
reproduo total ou parcial de estruturas anatmicas humanas, como por exemplo: tecido
heptico, mandbula, nervos perifricos, vlvulas e ductos urolgicos, vasos e regenerao
de tecido sseo.
[22-26]
Um relato mais completo das informaes existentes sobre a
engenharia de tecidos citado no captulo 3.5.
A Figura 1.1 ilustra um exemplo de implante tipo stent intravascular biodegradvel
feito de blenda de polilactdeo e carbonato de trimetileno.
[5]

Para melhorar ainda mais a biocompatibilidade com os tecidos vivos, surge a
necessidade de desenvolver materiais com propriedades hidrofbicas e hidroflicas,
simultaneamente, tais como copolmeros em bloco. Esse tipo de copolmero, contendo
ambas as partes, chamado copolmero de propriedade anfiflica.

9


Figura 1.1 Prottipo de um stent intravascular biodegradvel (blenda de polilactdeo e
carbonato de trimetileno).
[5]
















10
2. OBJETIVOS

O trabalho tem como enfoque principal sintetizar e caracterizar copolmeros
anfiflicos e estudar detalhadamente a sua preparao e a influncia da sua microestrutura
nas propriedades qumicas e fsicas, principalmente, as propriedades mecnicas.
Este Projeto de pesquisa se insere nos trabalhos do grupo de polmeros
biodegradveis e envolve a preparao de copolmeros em bloco de etileno glicol, -
caprolactona e l-lactdeo, cujas composies estudadas foram baseadas nas pesquisas
desenvolvidas no laboratrio anteriormente
[27-28]
. A cadeia de poli(l,l-lactdeo) (PLA)
contribui para melhorar a propriedade mecnica e, a fase amorfa dominada por poli(-
caprolactona) (PCL) que, por sua vez, contribuir na reduo do tempo de degradao do
copolmero. A cadeia do poli(xido de etileno) (PEO) tem caracterstica hidroflica, assim,
com a adio desse material, torna o copolmero um produto de natureza anfiflica. A
presena do PEO no copolmero pode aumentar a biocompatibilidade do material,
originando a menor reao imunolgica possvel, quando usado como material de
implantes. Sabe-se que a sua propriedade mecnica varia com o tamanho da cadeia, e por
outro lado, trechos menores possuem maior facilidade de excreo pelo organismo.
Portanto, sintetizar uma nova cadeia de poli (xido de etileno) para atender essas duas
finalidades tornou-se tambm uma parte dos objetivos desse trabalho.
Resumidamente, este trabalho engloba as seguintes etapas:
Sintetizar e caracterizar copolmeros contendo segmentos de PLA e PCL, a partir de
PEG com massa molar de 20.000 u.m.a;
Sintetizar e caracterizar cadeias de PEG com pesos moleculares maiores, a partir de
PEG com 4.000 u.m.a;
11
Sintetizar e caracterizar o copolmero tribloco usando PLA, PCL e PEG sintetizado
no item anterior;
Realizar testes de biocompatibilidade.

PEG usualmente terminado em dois grupos hidroxila, os quais so facilmente
ativados pelo di(etil-hexanoato) de estanho (SnOct
2
), e reage como iniciador das reaes
para preparao de PLA e PCL por abertura de anel, possibilitando a formao de
copolmeros com estrutura tribloco poli(l,l-lactdeo-stat--caprolactona)-bloco-poli(xido
de etileno)-bloco-poli(l,l-lactdeo-stat--caprolactona) (Figura 2.1).

O C
O
O C
O
O C
O
n m
y x
n
m
OCH
2
CH
2
O C
O
O C
O
O C
O
x

Figura 2.1 Representao estrutural do copolmero tribloco.












12
3. REVISO BIBLIOGRFICA

3.1. POLISTERES

A maioria dos polisteres alifticos biodegradvel, sendo que os trs que mais se
destacam nesse grupo para o uso na rea biomdica esto representados na Tabela 3.1.

Tabela 3.1 Os principais polisteres biodegradveis usados na rea biomdica.
[5],[15],[22]

Polmero Sigla Frmula T
g
(C) T
m
(C)
Mdulo de
elasticidade
(GPa)
Tempo de
degradao
(meses)
Poli (cido
gliclico)
PGA
O
O
n

35-40 225-230 8,4 6-12
Poli (l-cido
lctico)
PLLA
O
O CH
3
n

60-65 173-178 2,7 >24
Poli (-
caprolactona)
PCL
O
O
n

(-65)-(-60) 58-63 0,4 24-36

3.1.1.cido Lctico


cido lctico (cido 2-hidroxipropanico) um cido orgnico encontrado em
vrios produtos de origem natural. O primeiro relato do isolamento desse cido do leite foi
por volta do ano 1780 e, a solidificao pela sua prpria esterificao foi descoberta alguns
13
anos depois. A dimerizao formando lactdeo pela policondensao do cido lctico e sua
polimerizao pelo mecanismo de abertura de anel foram descritos por Carothers et al em
1932. Desde a dcada de 60 do sculo passado, as vantagens desse material na rea mdica
foram pesquisadas e reveladas, e em seguida, a fabricao desses polmeros foi realizada
em escala industrial.
[1],[29]

Polisteres baseados em poli(cido lctico) (PLA), poli(cido gliclico) (PGA) e
seus copolmeros poli (cido lctico-co-cido gliclico) (PLGA) so os melhores
biomateriais para projetos numa vasta rea biomdica. cido lctico contendo um carbono-
assimtrico, o qual descrito tipicamente na forma D ou L, em termo de isomeria
clssica, ou apresentado em forma R e S, respectivamente, como mostra na Figura 3.1 Para
homopolmeros, as formas enantiomricas so poli (D-cido lctico) (PDLA) e poli (L-
cido lctico) (PLLA). PDLA e PLLA apresentam propriedades fsico-qumicas
semelhantes, so pticamente ativos em relao a feixe de luz polarizada, enquanto que o
PLA racmico tem caractersticas bastante diferentes. Por exemplo, as temperaturas de
transio vtreas de ambos so em torno de 60C, mas PLLA apresenta uma cristalinidade
bastante elevada com seu ponto de fuso, T
m
de 170C; enquanto o PLA racmico
completamente amorfo
.[29-30]



Figura 3.1 Estereoismeros de cido lctico.

14
Por ser a forma natural, o PLLA considerado mais biocompatvel. Os polmeros
so derivados de monmeros produzidos pelo metabolismo do corpo humano, a degradao
desses materiais considerada segura para usos in vivo. Para esta finalidade, os produtos
de degradao freqentemente definem a biocompatibilidade de um polmero no
necessariamente o polmero em si. Muito embora o PLGA seja extensivamente utilizado e
represente a nata dos polmeros degradveis, o aumento da acidez local devido
degradao pode levar a uma irritao durante a utilizao do polmero. A introduo de
sais bsicos tem sido investigada como uma tcnica de controle de pH no meio local dos
implantes de PLGA.
[31-34]


3.1.1.1. Produo do cido lctico

L-cido lctico, a estereoforma presente nos organismos de mamferos, por
exemplo, produzido pelo msculo com atividade intensa no conhecido Ciclo Cori.
cido lctico pode ser produzido tanto por processos de fermentao quanto pelas rotas
sintticas existentes. Entretanto, a primeira opo ainda mais adotada por sua
simplicidade e baixo custo. Por isso, atualmente, somente um fabricante japons
(Musashino) e um americano (Sterling Chemicals Inc.) utilizam a rota de sntese qumica
para a produo de cido lctico racmico a qual est esquematizada na Figura 3.2.
[33],[35-36]




15
(a) Adio do cido ciandrico
CH
3
CHO
aldedo actico
+ HCN
cido ciandrico

Catalisador

CH
3
CHOHCN
lactonitrila

(b) Hidrlise por H
2
SO
4

CH
3
CHOHCN
lactonitrila
+ H
2
O + 1/2H
2
SO
4

cido sulfrico

CH
3
CHOHCOOH
cido lctico
+ 1/2(NH
4
)
2
SO
4
sulfato de amnio

(d) Esterificao
CH
3
CHOHCOOH
cido lctico
+ CH
3
OH
metanol

CH
3
CHOHCOOCH
3
lactato de metila
+ H
2
O

(e) Hidrlise por H
2
O
CH
3
CHOHCOOCH
3
lactato de metila


+ H
2
O

CH
3
CHOHCOOH
cido lctico
+ CH
3
OH
metanol

Figura 3.2 Rota de sntese qumica na obteno de cido lctico.

A fermentao ocorre normalmente em processos por bateladas ou contnuos. Os
parmetros importantes na fermentao so valores de pH, temperatura, atmosfera e em
alguns casos, agitao.
16
Na fermentao por bateladas, o valor de pH geralmente mantido constante pela
adio dos agentes neutralizantes como CaCO
3
, Ca(OH)
2
, Mg(OH)
2
, NaOH, ou NH
4
OH.
Essa fermentao feita tipicamente comeando de 5% de concentrao de acar e com
presena de nitrognio-nutriente. A converso de 90-99% de cido lctico pode ser obtida
em dois dias. Em processo contnuo, os parmetros e os aditivos so semelhantes ao
primeiro e a sua vantagem a maior produtividade em relao ao outro.
Aps o processo de fermentao, em muitos casos, o cido lctico obtido
purificado para uma possvel polimerizao seguinte. Neutralizao com a base seguida por
uma filtrao, concentrao e uma acidificao o processo tradicional para a fabricao de
cido lctico de alta pureza. O processo de extrao lquido/lquido utilizado para a
recuperao de cido lctico e o processo baseado na esterificao com lcoois seguida por
uma destilao e hidrlise tambm uma das importantes rotas. Esses processos
mencionados acima podem ser usados combinados com as tcnicas de separao incluindo
ultrafiltrao, nanofiltrao etc. para obteno de produtos com melhor qualidade.
Segue abaixo o fluxo de processo de fermentao (Figura 3.3).
(a) Fermentao e neutralizao
C
6
H
12
O
6

glicose
+ Ca (OH)
2

hidrxido de clcio

Fermentao


(2CH
3
CHOHCOO
-
) Ca
2+
lactato de clcio
+ 2H
2
O

(b) Hidrlise por H
2
SO
4

2(CH
3
CHOHCOO
-
) Ca
2+
lactato de clcio
+
H
2
SO
4
cido sulfrico

2 CH
3
CHOHCOOH
cido lctico
+
Ca SO
4
sulfato de clcio
17
(c) Esterificao
CH
3
CHOHCOOH
cido lctico
+
CH
3
OH
metanol

CH
3
CHOHCOOCH
3

lactato de metila
+
H
2
O

(d) Hidrlise por H
2
O
CH
3
CHOHCOOCH
3
lactato de metila
+
H
2
O

CH
3
CHOHCOOH
cido lctico
+
CH
3
OH
metanol

Figura 3.3 Rota de fermentao na obteno de cido lctico.
[35]


3.1.1.2. Preparao de polmeros baseados em cido lctico

As propriedades de polmeros baseados em cido lctico variam muito dependendo
da distribuio e composio dos dois estereoismeros. Os polmeros podem ser fabricados
por diversas rotas de polimerizao, como mostrado esquematicamente na Figura 3.4. A
nomenclatura para esses polmeros se distingue pelas diferentes rotas de preparao, como
exemplos de polmeros derivados do cido lctico pela policondensao (PC) so
geralmente referidos como poli(cido lctico) e outros preparados a partir do lactdeo pela
polimerizao de abertura de anel (ring opening polymerization, ROP) so chamados
polilactdeo. Ambos os tipos podem ser encontrados na literatura, simbolizados por PLA,
embora muitos autores definam lactdeo como dmero cclico de cido lctico.
[33-34]

18

Figura 3.4 Processo esquematizado de polimerizaes do PLA.

A desvantagem da PC que os polmeros obtidos tm baixa massa molar, e ento,
vrios estudos foram realizados para a elevao de massa molar como por exemplo
manipulando o equilbrio entre o monmero de cido lctico, gua e o poli (cido lctico)
em um solvente orgnico ou adio de agentes ramificados multifuncionais para obteno
de estruturas estrelares por exemplo. Na presena de agentes bifuncionais (diis,
dicidos, etc) do formas telequlicas aos polmeros os quais podem aumentar suas massas
molares com o uso de agentes ligantes de cadeias. A massa molar do poli(cido lctico)
sintetizado pela policondensao partindo do monmero de cido lctico relativamente
baixa, por isso, somente o processo de PC no seria suficiente para a produo de
polmeros de alta massa molar.
A segunda categoria de polimerizao pela abertura de anel. Esse processo
tambm inclui policondensao do cido lctico seguido por uma despolimerizao para
19
um dmero cclico desidratado, lactdeo (3, 6-dimetil-1,4-dioxano-2,5-diono), o qual pode
ser polimerizado pela ROP (ring opening polymerization) para obteno de polmeros com
alta massa molar. A despolimerizao convencionalmente feita pelo aumento da
temperatura da PC e abaixamento da presso, e destilao do lactdeo produzido. Devido
aos dois estereoismeros do cido lctico, o lactdeo opticamente ativo correspondente
pode ser encontrando em duas formas diferentes, isto , D,D-lactdeo e L,L-lactdeo (Figura
3.5). Alm disso, o lactdeo pode ser formado por uma molcula de D- e outra de L-cido
lctico, formando D,L-lactdeo (meso-lactdeo). O aumento da cristalinidade pode ser
manipulado tambm pela aplicao de uma tenso de orientao, induzida a
aproximadamente 10C acima da T
g
, reorientando as cadeias durante o processamento do
material.

Figura 3.5 Estereoismeros de lactdeos.

A preparao dos polmeros baseados em cido lctico pela ROP pode ser realizada
em polimerizao em soluo, em massa, em suspenso ou polimerizao em estado
fundido. O mecanismo envolvido em ROP pode ser reao inica ou insero por
coordenao, dependendo do sistema do catalisador usado. Diversos tipos de catalisadores
foram testados ao longo do tempo: compostos metlicos de estanho (II), alumnio, zinco,
potssio, etc. Entre eles, o Sn(Oct)
2
, 2-etil-hexanoato de estanho mais utilizado, pois ele
20
aceito pela FDA (Food and Drug Administration) para fins alimentcios e mdicos em
inmeros pases.
[37]
Assim, o Sn(Oct)
2
facilmente encontrado comercialmente
(ex.Cargill/Dow e Purac) para sntese do poli(cido lctico) para usos em rea mdica.
Alm disso, o Sn(Oct)
2
apresenta solubilidade em solventes orgnicos e em monmeros de
steres cclicos, facilitando a reao. O sistema reativo do l,l-lactdeo com o Sn(Oct)
2
gera
produtos de alta massa molar com baixa taxa de racemizao, conseqentemente,
melhorando as propriedades mecnicas dos poli(l,l-lactdeo).
O homopolmero de l-lactdeo tem caracterstica semicristalina. Portanto, seus
copolmeros exibem alta resistncia trao e pouco alongamento e, esse mdulo elevado
faz com que eles sejam mais adequados do que os outros polmeros amorfos para
aplicaes ortopdicas.
[34]
O poli(d,l-lactdeo) um polmero amorfo o qual contm uma
distribuio estatstica de seus dois ismeros, assim, impossibilitando a cristalizao da sua
cadeia, provocando reduo de suas propriedades mecnicas em relao ao primeiro.
[38]
Porm, a degradao mais rpida desse material torna-o mais atrativo para sistemas de
liberao de drogas.

3.1.2. Poli (cido Gliclico)

Poli (cido gliclico) um material termoplstico rgido com alta cristalinidade (46
a 50%). Sua temperatura de transio vtrea e temperatura de fuso so 36C e 225C,
respectivamente. Por causa desta alta cristalinidade, PGA insolvel na maioria dos
solventes orgnicos. E pelo mesmo motivo, PGA tem a melhor propriedade mecnica entre
todos os polisteres biodegradveis (veja na Tabela 3.1). Semelhante ao PLA, o mtodo
preferencial para a produo de polmeros de alta massa molar ROP, quando Sn(Oct)
2

21
usado como iniciador do sistema, a temperatura mais usual da reao de 175C e a
polimerizao dura entre 2 a 6 horas.
[39]
As tcnicas de processamento por extruso,
injeo e termoformagem viabilizam a produo de PGA em vrias formas, porm, a alta
sensibilidade degradao hidroltica do material requer um controle muito cuidadoso das
condies do processamento.
[40]
O material, ao sofrer a biodegradao, produz cido
gliclico, o qual um resultado natural do metabolismo corpreo, com carter inofensivo
ao organismo. Numerosos estudos foram feitos, provando a simplicidade de seu processo
de biodegradao por eroso homognea, reduzindo o tempo de sua biodegradao total.
Por isso, o PGA tem demonstrado maior aplicao na rea mdica como suturas
bioreabsorvveis. (Dexon, American Cyanamide Co)
[41]

Na literatura, encontra-se uma quantidade considervel de estudos sobre
copolmeros de PLA-PGA, tambm denominado como PLGA. Pois o PLGA apresenta uma
degradao mais rpida comparado a quaisquer outros homopolmeros.
[34]
Um fio de
sutura pode ser absorvido pelo corpo em 3 meses, o que observado para o copolmero
PLGA (10/90), com nome comercial de Vicryl, desenvolvido pela Ehicon. Publicada em
1977, a pesquisa que analisou os copolmeros PLGA de vrias composies, comprovou
que o material PLGA (50/50) tem a menor meia-vida (Figura 3.6). Isto se deve ao fato da
estrutura do copolmero com 25-70% de glicoldeo ser amorfa, assim, a regularidade da
cadeia pode ser facilmente interrompida por outro monmero. O mesmo acontece com
outros copolmeros de poli(-caprolactona) e poli(cido lctico).
[38]



22



Figura 3.6 Grfico de degradao de PLGA (tempo de meia vida X composio).
[5] [38]


3.1.3. Poli( -caprolactona)


Poli(-caprolactona) um polister aliftico linear e semicristalino. A utilizao de
diferentes mecanismos de polimerizao pode afetar a massa molar, a sua distribuio e a
estrutura qumica de seus copolmeros produzidos. O mtodo mais comum a
polimerizao por ROP como no caso da polimerizao de PLA e PGA.
[36]

A temperatura ambiente, o material solvel em vrios solventes orgnicos, tais
como clorofrmio, diclorometano, benzeno, tolueno, ciclohexano e 2-nitropropano.
pouco solvel em acetona, 2-butanona, acetato de etila e dimetilformamida e insolvel em
lcoois e teres.
Poli(-caprolactona) apresenta uma temperatura de transio vtrea na faixa de -
60C e a temperatura de fuso por volta de 60C. O homopolmero PCL apresenta um
23
tempo de degradao de aproximadamente 2 anos.
[42-44]
Os copolmeros de CL com D,L-
lactdeo foram sintetizados e investigados para elevar a taxa de degradao. Por ter
propriedades mecnicas inferiores como visto na Tabela. 1, blendas e copolmeros com
outros polisteres biodegradveis so produzidos e testados em inmeras pesquisas para
atingir as propriedades desejadas. Por exemplo, a presena do poli(-caprolactona) com
PGA apresenta rigidez inferior, quando comparado com homopolmero de cido gliclico
(PGA),
[45-46]
j existente no mercado, vendido como sutura monofilamentoso
MONOCRYL

, tambm fabricado pela Ethicon.

[5]

24
3.2. POLI(GLICOL ETILNICO)/POLI(XIDO DE ETILENO)


Os polmeros poli(glicol etilnico)s ou popularmente conhecidos como poli(etileno
glicol) e PEG, so molculas aparentemente simples. Eles apresentam estrutura linear ou
ramificada e so politeres neutros, solveis em gua e na maioria dos solventes orgnicos.
[47]

O
HO CH
2
CH
2
O
H
n
CH
2
CH
2


Figura 3.7 Esquema de reao de sntese de poli(glicol etilnico)

PEGs possuem uma variedade de propriedades aplicveis na rea biomdica e
biotcnica. Isso porque primeiramente o PEG raramente efetivo para excluir outros
polmeros quando esto presentes num ambiente aquoso
[48]
. Essa propriedade mostra-se na
sua conjugao com protenas e na formao de sistemas bifsicos com outros polmeros.
Alm disso, o polmero atxico e no prejudicial s atividades proticas e celulares,
embora interaja com membranas celulares. Os PEGs tambm esto sujeitos s modificaes
qumicas e associaes com outras molculas, esse ltimo afeta muito pouco sua
propriedade qumica original, porm controla sua solubilidade e aumenta o seu tamanho de
cadeia, dependendo da quantidade da cadeia adicional.
[49]




25
3.2.1. Propriedades do PEG

PEGs so chamados tambm de poli(xido de etileno), de modo geral, o poli(glicol
etilnico) se refere aos de massa molar abaixo de 20.000, poli(oxido de etileno) se refere a
polmeros de massa molar mais elevada.
Com o aumento da massa molar da cadeia, aumenta a cristalinidade da estrutura e,
conseqentemente, a viscosidade torna-se mais elevada, por isso, os PEGs que apresentam
massa molar abaixo de 1000 g.mol
-1
so lquidos viscosos e incolores, os que apresentam
massa molar acima desse valor so brancos e quebradios. O ponto de fuso do slido
proporcional sua massa molar e varia na faixa de 30 a 60C. Os PEGs utilizados em
aplicaes mdicas e biotcnicas so os de massa molar desde 200 at 20000 g.mol
-1
. O
PEG geralmente preparado por uma iniciao aninica com pouca transferncia de cadeia
e terminao. Pode-se notar que, entretanto, os teres monometlicos do PEG exibem uma
larga distribuio da massa molar, por causa da presena do PEG de alta massa molar. Esse
PEG produzido a partir do seu terminal hidroxila agindo como um iniciador, por ser um
polmero bifuncional, ele cresce em ambos os lados e, sendo assim, apresenta um aumento
maior de massa molar.
[50]

Quando o poli(glicol etilnico) adicionado gua, h uma reduo de volume e a
dissoluo envolve desprendimento de calor de 50-59 J/g (12-14cal/g) para uma mistura de
50/50 de gua e PEG de massa molar de 300-600, como se pode esperar para um estado
altamente estruturado na soluo. Para PEGs em estado slidos, essa reduo neutralizada
por um calor de fuso endotrmico maior, 155-192 J/g (37-46 cal/g), porque o calor de
dissoluo do PEG slido negativo, assim, uma aplicao do calor externo facilita sua
dissoluo.
26
A solubilidade em gua e em diferentes solventes orgnicos de diferentes PEGs
mostrada nas Tabelas 3.2 e 3.3, respectivamente. Geralmente, quanto menor for a massa
molar do PEG, maior a sua solubilidade. A solubilidade dos PEGs em solventes orgnicos
polares boa, mas pouco solvel em hidrocarbonetos e outros solventes com pouca
polaridade. Pode-se perceber pela tabela que a solubilidade tambm fortemente afetada
pela temperatura.

Tabela 3.2 Propriedades de poli(glicol etilnico) Carbowax
[50]

PEGs Massa molar /
u.m.a
Ponto de fuso
(T
m
)/ C
Solubilidade em gua
a 20C/ %, p/p
Viscosidade em 99C/
(cSt)
300 285-315 -15 at -8 completo 5,8
400 380-420 4-8 completo 7,3
600 570-630 20-25 completo 10,5
1000 950-1050 37-40 70
a
17,4
4600 4400-4800 57-61 50
a
160-230
8000 7000-9000 60-63 50
a
700-900
20M * 15000-20000 50-55
b
65
a
14500
a
aproximadamente.
b
ponto de amolecimento
PEG20M* composto do Carbowax, preparado pela condensao de PEGs de peso 8M com
o epxido multifuncional.



27
Tabela 3.3 Solubilidade de poli(glicol etilnico)s Carbowax, em % em peso.
[50]

400 Blenda 540
a
3350 Solvente
20C 50C 20C 50C 20C 50C
gua S S 73 97 62 84
Metanol S S 48 96 35 S
Acetona S S 20 S <1 99
Acetato etlico S S 15 S <1 93
ter etlico insolvel 1
b
insolvel 1
b
insolvel 1
b

Tolueno S S 13 S <1 S
heptano insolvel insolvel 0,5 0,01 <0,01 <0,01
S = > 100g/100ml do solvente.
a
poli(glicol etilnico)s Carbowax a mistura de 41/59 em peso do PEG 300 e PEG 1450.
b
insolvel em ponto de ebulio.
3.2.2. Aplicaes do PEG


PEGs so largamente utilizados em sistemas para liberao controlada de drogas e
em produtos cosmticos de cuidados pessoais, e aqueles com massa molar abaixo de 4000
u.m.a. podem ser eliminados do organismo, sendo que 98 % do seu total ingerido pode ser
excretado do corpo humano atravs da urina.
[51-54]
Por ltimo, a soluo de PEG forma um
ambiente hospedvel para a sobrevivncia de clulas, demonstrando a sua alta
biocompatibilidade e por isso, PEG amplamente utilizado em culturas de tecidos e
tambm na preservao de rgos, sendo, por isso, considerado um biomaterial na rea de
medicina hospitalar.
[47-48]

28
3.3. POLIMERIZAO POR ABERTURA DE ANEL

O mecanismo de polimerizao por abertura de anel de l,l-lactdeo pode ser dividido
em 3 classes de reao: catinica, aninica e coordenao-insero. As duas primeiras so
consideradas rotas alternativas, sendo que a ltima mais utilizada industrialmente.
[55-57]

A rota catinica precisa de cidos extremamente fortes para iniciar a reao e, alm
disso, a substituio nuclefila em carbono quiral pode causar a racemizao do produto,
assim, impedindo a obteno de polmero com taticidade e massa molar elevada. Essas
caractersticas tornam-na uma rota pouco vivel.
[57-58]

A segunda alternativa de reao aninica normalmente iniciada por alcxidos de
metais alcalinos. Tanto a iniciao quanto a propagao consiste em um ataque nucleofilo
de um nion ao carbono carbonila do l,l-lactdeo seguido pela clivagem da ligao CO-O
do anel. A tcnica possibilita a desprotonao do monmero l,l-lactdeo, gerando um nion
lactdeo planar. Devida a essa planaridade, as reaes de protonao e desprotonao
podem levar ao produto racmico tambm e, conseqentemente, ao baixo controle
esteroqumico e baixa massa molar do produto.
[59-61]

A rota mais provvel e mais importante via insero por coordenao. Essa
tambm a rota selecionada para sintetizar os copolmeros nesse trabalho. Os compostos
organometlicos tm sido utilizados nas copolimerizaes e copolimerizaes de poli(-
hidrxi cidos), com o objetivo de desenvolver catalizadores metlicos ativos de baixa
toxidez e controlar a microestrutura do polmero, o que afeta as suas propriedades
mecnicas e taxa de biodegradao.
[62-64]

Neste trabalho foi usado o iniciador mais utilizado atualmente, di(2-etil-hexanoato)
de estanho (II) (Sn(Oct)
2
). A reao envolve duas etapas. Na primeira, o catalisador
29
Sn(Oct)
2
reage com compostos doadores de hidrognio (hidroxilas, lcool, umidade contida
no sistema), co-catalisador, gerando o alcxido de estanho, considerado o verdadeiro
iniciador da reao. (1)
O sistema reacional deve ser mantido seco, pois a umidade pode provocar reaes
indesejveis
[37]
:
a) Competir com o co-iniciador impedindo a formao do copolmero de massa molar
elevado;
b) Decompor o catalisador e inativando-o a altas temperaturas no meio reacional;
c) Induzir a ocorrncia de reao de hidrlise do polister.

Em uma segunda etapa, o monmero cclico se insere entre a ligao Sn-OPEG
formada na etapa anterior, promovendo o crescimento da cadeia. (etapa da propagao).
Pesquisas foram anteriormente descritas
[28],[65-67]
descrevendo a formao de cadeia de
copolmeros de -caprolactona com l,l-lactdeo com estrutura estatstica. Assim, acredita-se
que a insero de l,l-lactdeo e -caprolactona seja totalmente estatstica como mostram as
equaes esquematizadas (2 e 3) na Figura 3.8.

O
O
Sn
O
O
R R + HO-(CH
2
-CH
2
-O)
k
-H
(CH
2
-CH
2
) O Sn O (CH
2
CH
2
)


+
2 R
O
OH



(1)
30
_
_
O OctSn CH
CH
3
C O CH C O R
O CH
3
O
_
R O OctSn
_
_
O
O
O
O

R = (CH
2
CH
2
-O)
k





(2)
_
_
O OctSn CH
2
_
R O OctSn
_
_
O
O
5
C
O
O R




(3)
O
O
O
O
CH
3
CH
3
O
O
+
_
_ O OctSn CH
2
CH
2
O +
k
O C
O
O C
O
O C
O
n m
y x
n
m
OCH
2
CH
2
O C
O
O C
O
O C
O
x




(4)

Figura 3.8 Representao esquemtica das reaes da sntese do copolmero.

31
O aumento da concentrao do co-iniciador resulta em polmeros com massas
molares reduzidas. Kowalski
[55]
atribuiu este comportamento ao duplo papel desempenhado
pelo co-iniciador na formao do verdadeiro iniciador e como agente de transferncia. Na
ausncia de reao de transferncia, o M
n
(massa molar mdia numrica) do polmero
cresce linearmente com a converso do monmero. Transferncias reduzem a massa molar
e aumentam a polidispersidade do homopolmero ou do copolmero final.
















32
3.4. BIODEGRADAO

O processo de biodegradao e bioabsoro dos poli(-hidrxi cidos) descrito na
literatura como sendo uma sucesso de eventos. Exposto ao ambiente aquoso, inicialmente
o material sofre hidratao. Com a presena das molculas de gua, o processo de
degradao d-se atravs da hidrlise das ligaes steres, originando produtos na forma de
oligmeros (ou monmeros) solveis e no txicos. A degradao prossegue por um
processo biologicamente ativo (por enzimas) ou pela clivagem hidroltica passiva, sendo
caracterizada pela perda de massa, diminuio de massa molar ponderal mdia e pela perda
das suas propriedades mecnicas, como a resistncia trao e compresso.
[68-70]

A reao de hidrlise pode ser descrita pela equao cintica cuja constante de
velocidade k e os reagentes so grupos carboxila e ster.
ROH COOH O H HOOC COOR + + 2
2

Nos estgios iniciais da reao temos a equao cintica que relaciona a formao
de grupos carboxlicos ([COOH]) com o desaparecimento de grupos ster (-[ster]) em
funo do tempo:
dt ster k
COOH
COOH d
ster COOH k
dt
COOH d
] [
] [
] [
] ][ [
] [
=

=
Nos estgios iniciais da reao a concentrao [ster] muito elevada e a sua
variao muito pequena, de forma que se pode assumir nestas condies [ster] como
constante:
a ster = ] [
Integrando-se a equao cintica obtm-se:
kat
COOH
COOH
=
0
] [
] [
ln
33
ou ainda:
) (
0
] [ ] [
akt
e COOH COOH

=

Como [COOH] diretamente proporcional a e M
n
pode-se escrever:
) (
0
t ak
e

=
) ( t ak o
n n
M
e M M

=
Relacionando essas duas ltimas equaes de e M
n
, chega-se deduo de
equao relacionada quela de Mark-Houwink, demonstrando o decrscimo exponencial da
viscosidade intrnseca () em relao massa molar (M
n
).
o
n
n
M
M
M
k
k
ln ln
0

=
ou ainda:

=
M
k
k
n o
n
M
M

0

isto :

v v
M K = (equao Mark-Houwink)

No observada a perda de massa na fase inicial da biodegradao, pois acontecem
apenas quebras de cadeias nessa etapa, transformando cadeias longas em pequenas. A
segunda fase caracterizada pela evidente perda de massa do material. Aps a primeira
etapa, as cadeias com baixa massa molar continuam produzindo fragmentos ainda menores,
facilitando a sua prpria difuso, aumentando a chance da ao da fagocitose.
[71-76]

Dentre os produtos da hidrlise das ligaes steres, a presena de terminais cidos
catalisa a reao de degradao. Tal fenmeno chamado efeito autocataltico dos poli(-
34
hidrxi cidos). O processo homogneo inicialmente, quando os produtos da superfcie
difundem para o meio, entretanto, quando baixa a taxa de difuso dos produtos da reao
no interior do material, gera um acmulo de cidos, fazendo com que estruturas densas
tenham uma eroso inicial na superfcie, mas apresentem uma degradao mais acentuada
no centro.
[77-82]

O efeito autocataltico foi avaliado e confirmado em estudos de degradao in vitro
de copolmeros dos poli(-hidrxi cidos). Os testes in vivo tambm demonstram essa
degradao de forma heterognea.
A bioabsoro pelo organismo ocorre quando a biodegradao gera produtos e
subprodutos com as caractersticas dos metablitos orgnicos, especificamente os cidos do
Ciclo de Krebs. Para os PLAs, ao terminar a hidrlise do material, a degradao segue o
processo de oxidao do cido lctico, que por sua vez so convertidos em cido pirvico.
Na presena da acetil coenzima A, ocorre a liberao de CO
2
e, conseqentemente, a
decomposio em citrato. O citrato ser ento incorporado no Ciclo de Krebs, resultando
em CO
2
e H
2
O, podendo sua eliminao ser feita atravs da urina, fezes e da respirao.
Nenhuma quantidade significativa de acmulo de resduos da degradao encontrada em
rgos vitais. O material ento foi absorvido e metabolizado.
[83-86]

J o mecanismo da biodegradao do PCL iniciado por uma hidrlise abitica do
polmero para cido -hidrxi caprico. Em seguida, esse produto degradado em ciclo de
TCA (cido tricarboxilico).
[87-88]

H muitos fatores que influenciam a reao do corpo presena de um implante
biodegradvel. A resposta pode estar relacionada com o tamanho e com a composio do
implante, da mesma forma que o local do implante. A taxa de degradao do polmero e a
35
capacidade do local do implante de eliminar o composto degradado tm um papel muito
importante na reao do tecido ao implante
.[89-90]
Se o tecido do local no puder eliminar os
produtos cidos de um implante de rpida degradao, ento poder haver uma reao
inflamatria ou txica.
[91]

A degradao in vitro mostra-se como uma boa alternativa quando comparados aos
estudos in vivo, sendo fundamentais e necessrios. Os custos so menores, o processo pode
ser acelerado e as condies do ensaio, como temperatura, pH, produtos e subprodutos de
degradao, podem ser quantificados e monitorados.

3.4.1. Fatores que Influenciam a Degradao

A taxa de degradao influenciada por fatores de configurao estrutural, tais
como o grau de copolimerizao, cristalinidade, massa molar, morfologia, quantidade de
monmero residual e porosidade, ambiente do implante etc.
[92-95]


3.4.1.1. Localizao do Implante

Na localizao do implante, deve-se levar em conta a vascularizao local e a
solicitao mecnica. Se um polmero bioabsorvvel implantado num local de alta
vascularizao (grande atividade vital), sua velocidade de degradao ser mais rpida em
relao a uma regio menos vascularizada, de funes passivas. Locais de grande
solicitao mecnicos tambm tm sido descritos como aceleradores da degradao.


36
3.4.1.2. Composio Qumica

No exemplo do poli(cido lctico), a quiralidade do carbono permite a sntese de
compostos enantimeros, dando origem uma famlia de polmeros: poli(L-cido lctico)
(PLLA), poli(D,L-cido lctico) (PDLLA) e copolmeros em diferentes propores. Devido
distribuio aleatria das unidades L e D na cadeia polimrica, o polmero racmico no
possui domnios cristalinos, sendo um material amorfo e com propriedades mecnicas
significativamente menores quando comparado ao semicristalino PLLA, o que j foi
relatado com mais detalhes no item anterior 3.1.1. Por isso, enquanto o PLLA demora mais
de 2 anos para degradar, o PDLLA leva um tempo bem menor em sua degradao.
Os grupos hidroflicos, tais como -NH, -COOH, -OH e -NCO, entre outros,
auxiliam o processo de degradao. Assim, o grupo metila presente nas cadeias de PLA
responsvel pelo impedimento estreo na reao de hidrlise. Dessa forma, a presena de
unidades de cido gliclico favorece a penetrao da gua e conseqentemente a taxa de
degradao. Vrias pesquisas e estudos foram feitos baseados nessas informaes a fim de
descobrir um copolmero PLGA que melhor atenda s necessidades de controle do tempo
de degradao e ao mesmo tempo, no deixe a desejar em suas propriedades mecnicas.
[38]

Os estudos de biodegradao realizados tanto in vivo quanto in vitro verificaram a
biocompatibilidade do PLA e PGA. Bergsma e seus colaboradores realizaram um estudo
em pacientes que receberam implantes de PLLA para fraturas zigomticas. Eles removeram
e analisaram o material depois de 3,3 at 5,7 anos. Algumas partculas de alta cristalinidade
de PLLA ainda permaneceram depois desse perodo. Essas partculas no so danosas s
clulas, mas induzem uma reao na forma de inchamentos locais.
37
3.4.1.3. Cristalinidade

Devido disposio espacial das cadeias polimricas, o efeito da cristalinidade
influi na taxa de absoro de gua pelo polmero. O primeiro estgio de degradao
consiste na penetrao e difuso das molculas de gua nas regies amorfas do material, e
subseqente ciso hidroltica das ligaes steres das cadeias polimricas. A segunda etapa
se d quando parte considervel da regio amorfa est degradada, e prossegue no centro dos
domnios cristalinos. A literatura descreve um aumento porcentual da poro cristalina
devido absoro dos fragmentos pela rede cristalina e pela formao de novos cristais,
atravs do rearranjo das cadeias de menor massa molar originadas no processo de
degradao.
[72]

3.4.1.4. Massa molar

Polmeros com alta massa molar so extremamente durveis. As amostras de
pequena massa molar so mais susceptveis degradao, devido habilidade de fcil
transporte intracelular. Entretanto, essas macromolculas com baixa massa molar tm
utilidades muito limitadas apesar dessa propriedade vantajosa.
[70]

3.4.1.5. Reticulao

As ligaes cruzadas reduzem consideravelmente a taxa de degradao mesmo
quando uma molcula apresente massa molar pequena. As cadeias lineares aumentam a
susceptibilidade da molcula ao ataque enzimtico, promovendo assimilao do micro
organismo.
[70]


38
3.4.1.6. Morfologia

A influncia da porosidade e geometria do suporte polimrico tambm relatada
como um dos fatores determinantes na velocidade de degradao e induo ao crescimento
celular.
Vrios estudos revelam que a invaso e o crescimento celular esto diretamente
relacionados com o tamanho dos poros e a cristalinidade do material. Para muitos
polmeros biodegradveis e bioabsorvveis, na faixa de 50-150m, quanto maior o tamanho
do poro do material maior a facilidade de ancorar e crescer as clulas devido facilidade
de difuso dos nutrientes dos fluidos orgnicos locais.
Em muitos casos, durante a degradao in vivo, PLA e PGA produzem solues
txicas provavelmente em conseqncia da degradao produzir cido. Esta a
preocupao principal nas aplicaes ortopdicas onde requerem os implantes com
tamanhos considerveis, que pode resultar em uma liberao de produtos de degradao
com concentraes cidas locais elevadas. Um outro ponto preocupante a liberao de
partculas pequenas durante a degradao, podendo provocar uma resposta inflamatria.
[73]


39
3.5. ENGENHARIA DE TECIDOS


Engenharia de tecidos um novo campo multidisciplinar que envolve a aplicao
dos princpios e mtodos de engenharia de materiais junto aos conhecimentos das reas
biolgicas e mdicas. A grande vantagem da engenharia de tecidos a superao dos
limites de tratamentos convencionais baseados em transplantes de rgos ou implantes de
biomateriais dentro do corpo humano.
[50-54]
Em princpio, pode-se produzir substitutos
artificiais imunologicamente tolerantes de rgos e de tecidos danificados que podem
crescer no paciente. Isso conduzir a uma soluo permanente, sem a necessidade de
terapias suplementares a longo prazo.
[71],[74]

Essa nova engenharia trata resumidamente de um cultivo de clulas in vitro e em
seguida, introduo em estudos in vivo. A dificuldade de insero direta e proliferao de
clulas trouxeram a necessidade de uma matriz pr-implantao a qual chama-se scaffold,
suporte de crescimento celular. Antes do implante, o processo de cultivao de clulas
segue o fluxograma abaixo:





40
(a) Oxignios de nutrientes apropriados
so fornecidos, atravs do scaffold
poroso para criar um ambiente
adequado para o crescimento celular.

(b) As clulas so depositadas na
superfcie do scaffold.

(c) As clulas comeam a proliferar-se e
migram para dentro dos poros da
matriz.

(d) As clulas colonizam inteiramente os
poros do scaffold e comeam a
construir a sua prpria matriz
extracelular.

(e) Muitas vezes, as camadas superiores de
clulas consomem a maior parte do
oxignio e nutrientes, dificultando a
difuso deles e conseqentemente a
imigrao das mesmas.
Pp simboliza a profundidade de penetrao

Figura 3.9 Diagrama esquemtico de cultivo de clulas.
[77]


41
Vrios requisitos foram identificados para a produo de scaffolds na engenharia de
tecidos.
(1) O scaffold deve possuir poros interconectados de escala apropriada para
favorecer a integrao e a vascularizao do tecido.
(2) O material do scaffold deve apresentar biodegradabilidade para que
eventualmente seja substitudo pelos tecidos vivos.
(3) Deve ter superfcies com propriedades qumicas adaptadas para favorecer o
ancoramento e crescimento de clulas.
(4) Possuir propriedades mecnicas adequadas de acordo com o local pretendido
de implante.
(5) No devem induzir nenhuma resposta inflamatria.
(6) Sejam fabricados facilmente em uma variedade de formas e tamanhos.

Atendendo a todas essas exigncias, diversos materiais podem ser selecionados para
a fabricao do scaffold.
Inicialmente, materiais cermicos sintticos e naturais inorgnicos (hidroxiapatita e
fosfato triclcio) foram investigados como candidatos de confeco de scaffold na rea de
engenharia de tecidos sseos. Isso porque estes materiais cermicos assemelham-se ao
componente inorgnico natural do osso e tem propriedades de osteocondutividade.
Entretanto, esses cermicos so inerentemente frgeis embora se ajustem s propriedades
naturais do osso. Pode-se interpretar que o sistema sseo funciona como uma matriz
polimrica reforada com partculas cermicas, o polmero a protena colgeno, e
representa aproximadamente 30% do peso total, e a hidroxiapatita, 70%.
42
Porm, os scaffolds cermicos no podem ser apropriados para crescimentos de
clulas de tecidos macios (tecido do msculo de corao) os quais requerem propriedades
mecnicas diferentes. Assim, os polmeros sintticos e naturais tornaram-se uma alternativa
verstil para a construo de scaffolds da maioria dos tecidos.
[79]

Existem vrios mtodos na fabricao desses suportes: evaporao de solvente com
adio e lixiviao de sal, inverso de fase, extruso, FDM (Fused Deposition Modelling),
essa ultima tcnica permite a confeco de scaffolds com maior preciso em escala
nanomtrica.
Os polisteres sintticos e seus copolmeros ou blendas citados no captulo anterior
so muito usados para a fabricao de scaffolds.


















43
4. PARTE EXPERIMENTAL

4.1. Materiais

Os reagentes e solventes qumicos utilizados neste trabalho foram utilizados como
recebidos, quando no mencionado nenhum tratamento especfico para purificao:
2-Etil-hexanoato de estanho procedncia: Aldrich;
Clorofrmio P.A - procedncia: Casa Americana, Vetec;
Clorofrmio-d procedncia: Cambridge Isotope laboratories.Inc;
-caprolactona - procedncia: Aldrich, pureza 99%;
Hexano-1,6-diisocianato procedencia: Sigma;
Hexano P.A procedncia: Casa Americana;
L,l-lactdeo (3,6,dimetil-1,4 dioxano-2,5 diona) - procedncia: Aldrich, pureza
98%;
Poli(glicol etilnico) de massa molar 4000 u.m.a (PEG4K) - procedncia:
Oxiteno do Brasil;
Poli(glicol etilnico) de massa molar 20.000 u.m.a Carbowax 20 M (PEG20K)
procedncia: Supelco.;
Tetrahidrofurano (sem inibidor) procedncia: Tedia Brasil;

4.2. Equipamentos:

Alm dos equipamentos comuns necessrios para a realizao da pesquisa, tais
como vidraria, balana analtica, etc. Utilizaram-se tambm os seguintes equipamentos:
Cmara Glove-box;
44
Calormetro diferencial exploratrio - DSC 50 da Shimadzu; - equipamento
pertencente ao IPEN
Analisador termogravmetro TGA 50 da Shimadzu; - equipamento pertencente
ao IPEN
Analisador trmico dinmico-mecnica (DMTA) Rheometric Scientific
modelo DMTA-V.
Microscpio tico de luz polarizada (MOLP) Olympus BX50; aquecedor
Mettler Toledo FP82HT; processador Mettler Toledo FP90.
Microscpio eletrnico de varredura (MEV) Phillips modelo XL-30.
Difratometro de Raio-X Phillips modelo MPD 1880.
Espectrometro de ressonncia magntica nuclear (RMN) modelo Bruker 200
equipamento pertencente a Central Analtica do Instituto de Qumica USP

4.3. Metodologia


Como dito anteriormente, a parte experimental engloba 3 etapas: (1) sntese de
copolmero tribloco com PEG20K, (2) sntese de PEG4K modificado, e por ltimo, (3)
sntese do copolmero tribloco utilizando o PEG4K modificado. A polimerizao foi
efetivada atravs da reao por abertura de anel, a razo molar entre os reagentes foi pr-
determinada segundo Castro e Wang
[28]
As cadeias desses copolmeros foram planejadas
para manter um trecho de PEG como segmento central, enquanto segmentos formados por
LA e CL crescem com estrutura aleatria a partir de seus grupos terminais.

45
4.3.1. Procedimento geral para sntese de copolmero tribloco com PEG20K (1)

Na cmara glove-box , purgada com nitrognio, foram realizadas as pesagens dos
reagentes. Para o copolmero 1, foi mantida na alimentao, a seguinte proporo mssica
entre os reagentes: LA:CL:EO = 30:45:25. Preparou-se primeiramente o PEG e o
catalisador (octanoato de estanho) no balo, fechado com parafilme para evitar qualquer
contato com a umidade do ar. Feito isso, o balo foi levado para um banho de silicone pr-
aquecido a 70C a fim de obter uma ativao mais homognea. Aps 1 hora de ativao, o
balo foi retirado do banho, transferido para dentro da cmara seca e introduzidos os
reagentes restantes LA e CL. O recipiente foi selado novamente em atmosfera seca e
levado a outro banho de silicone a 120C sob agitao magntica. Esta reao teve a
durao de 168 horas (1 semana). O copolmero obtido foi dissolvido em clorofrmio e
precipitado em hexano a baixa temperatura (8-10C). O produto ento foi seco ao ar livre
por 24 horas e a vcuo por 72 horas.
O copolmero 2 seguiu a mesma rota de sntese do primeiro, diferindo-se do anterior
no tempo das reaes, 2 horas e 336 horas (2 semanas) para a ativao e a polimerizao,
respectivamente .
O copolmero 3 apresentou uma composio diferente na alimentao, com um
pequeno aumento da frao do LA, objetivando uma melhoria na propriedade mecnica do
material, a razo mssica LA:CL:EO = 45:30:25 foi utillizada. E o tempo da ativao e o
da reao igual a do copolmero 2, 2 horas e 336 horas (2 semanas), respectivamente.
A rota desses procedimentos simplificada no seguinte fluxograma.
46
Preparao
(clculo de quantidade, secagem do
material, preparao no glove-box)
Ativao do PEG
(com Sn(Oct)
2
e PEG pr-determinado,
reagindo por 1 ou 2 horas no banho a
120C)
Dissoluo e Precipitao
(O produto da reao dissolvido em
CHCl
3
e precipitado em hexano)
Reao
(PLA, PCL e PEG j ativado, reao
por 1 ou 2 semanas a 120C)
Secagem
(Ao ar livre por 24 horas e em seguida
no estufa a vcuo por 72 horas)

Figura 4.1 Fluxograma do procedimento da copolimerizao.

47
Esses trs copolmeros obtidos apresentam a cor branca fosca levemente amarelada
com aspecto elastomrico.

4.3.2. Sntese de PEG modificados (PEG-MODIF) a partir de PEG com 4000 u.m.a.
(PEG 4K) (2)
4.3.2.1. Fundamentos tericos e clculos
Para promover a melhoria de sua propriedade mecnica, foi necessrio sintetizar um
poli(glicol etilnico) com massa molar mais elevada baseado em trechos menores a fim de
facilitar a quebra de cadeias e sucessivamente a sua biodegradao.
Foi selecionado o reagente hexano-1,6-diisocianato (industrialmente chamado HDI)
como extensor para reagir com o PEG de massa molar de 4.000 u.m.a, aumentando o
tamanho da cadeia. O procedimento para a sua obteno est esquematizado na Figura 4.2:
OH
m
CH
2
CH
2
O H
6
CH
2
N C O N C O
+

HDI PEG

6
CH
2
N N
H H
C C
O O
O O
CH
2
CH
2
O
m
CH
2
CH
2
O
m

PEG modificado com ligao uretana.

Figura 4.2 Esquema da extenso da cadeia de PEG 4000 com 1,6-hexametileno-
diisocianato
48

O diisocianato reage como um ligante entre as cadeias PEGs, assim a cadeia
cresce, tendo sua maior parte constituda por poli(glicol etilnico). Segundo Carothers, o
controle estequiomtrico expresso pela Equao 1:

Xn = (1+r)/(1+r-2rp) Equao 1.

Onde: r = razo molar dos reagentes;
p = converso dos grupamentos funcionais;
X
n
= grau de polimerizao.
Supondo que a reao tenha converso completa, ou seja, o valor do p igual a 1, a
equao pode ser reescrita:

X
n
= (1+r)/(1-r) Equao 2.

Para uma massa molar de 50.000 u.m.a como produto da reao, sendo massa molar
de HDI igual a 168,2 u.m.a, e PEG 4.000 u.m.a, tem-se:
50.000/(168,2+4000) = (1+r)/(1-r)
Obtendo-se, ento o valor de r = 0,846;
n
HDI
/n
PEG =
0,846
O valor pr-estabelecido de PEG foi de 20g para esta reao, assim:
n
HDI
= 0,846 x (20/4000); n
HDI
= 0,00423;

49
A quantidade a ser adicionada de HDI : 168,2 x 0,00423 = 0,712g;

Uma quantidade mnima de solvente, no caso, o clorofrmio, foi adicionado para
homogeneizar os reagentes a fim de promover uma completa reao.
A reao de formao de uretano extremamente rpida e exotrmica, porm, neste
trabalho estabelecemos o tempo da reao em 15 horas para garantir converso completa,
possibilitando que alta massa molar seja atingida. A temperatura da reao foi 75C.

4.3.2.2. Procedimento da sntese de poli(glicol etilnico)s a partir de PEG com 4000
u.m.a. (2)
Os reagentes e a vidraria necessrios foram introduzidos na cmara glove-box,
purgada com nitrognio. A umidade relativa foi mantida abaixo de 15%. As quantidades
pr-estabelecidas de reagentes foram pesadas dentro da cmara e colocadas no balo de
reao. Este balo foi fechado e selado com parafilme e em seguida, retirado da cmara
seca e imerso num banho aquecido de silicone a 75C. A reao durou 15 horas sob
agitao constante tanto do banho, como na reao dentro do balo. O copolmero obtido
foi dissolvido em clorofrmio e precipitado em hexano e, em seguida, foi seco ao ar livre
primeiramente por 24 horas e depois a vcuo por 72 horas. O produto final apresentou-se
como slido com cor branca.

50
4.3.3. Sntese de copolmero tribloco Poli(PLLA-CL-b-PEG-b-PLLA-CL)a partir de PEG
-MODIF (3)

Foi utilizado um procedimento semelhante quele descrito em 4.3.1, porm o PEG
modificado necessitou de ser dissolvido em quantidade mnima de tetrahidrofurano (THF)
seco antes de ser ativado. Por causa da evaporao do solvente na temperatura relativamnte
alta da reao, foi necessrio o uso de sistema de refluxo purgado com N
2
para manter a
reao em ambiente seco e inerte.
Os copolmeros 4 e 5 foram preparados atravs desse procedimento, diferem-se um
do outro pela composio na alimentao. O copolmero 4 tem a razo mssica LA:CL:EO
= 30:45:25, igual aos copolmeros 1 e 2, enquanto o copolmero 5 tem a razo mssica
LA:CL:EO = 45:30:25, igual ao copolmero 3.

Tabela 4.1 Condies utilizadas para preparao dos copolmeros triblocos estudados.
Amostra Composio (%)
LA:CL:EO
Tempo de
ativao
Tempo de
reao
Solvente

Copolmero 1 30:45:25 1 hora 168 horas ____
Copolmero 2 30:45:25 2 horas 336 horas ____
Copolmero 3 45:30:25 2 horas 336 horas ____
Copolmero 4 30:45:25 2 horas 336 horas THF
Copolmero 5 45:30:25 2 horas 336 horas THF

51
5. CARACTERIZAO E RESULTADOS

5.1. Ressonncia Magntica Nuclear (RMN-
13
C e RMN-
1
H)

RMN uma tcnica bastante usada para determinao de estruturas de compostos.
O princpio do funcionamento baseado na aplicao de um campo magntico externo,
com a interao spin-spin apresentando uma energia envolvida para cada prton na
molcula. Conseqentemente, consegue-se identificar a configurao estrutural. Desde que
a eficincia da relaxao longitudinal seja tal que se verifique a distribuio de Boltzman, a
razo entre as intensidades das bandas de absoro medida pelas reas que elas envolvem,
a prpria razo do nmero de prtons em cada grupo.
[96-100]

Neste trabalho, a anlise dos espectros RMN-
1
H e RMN-
13
C dos copolmeros
dissolvidos em CDCl
3
, permitiu a sua caracterizao qualitativa e quantitativa.
No caso do copolmero tribloco poli(l,l-lactdeo-stat--caprolactona)-bloco-
poli(xido de etileno)-bloco-poli(l,l-lactdeo-stat--caprolactona), foi preciso a anlise das
duas tcnicas em conjunto, pois em RMN-
1
H, os sinais de metila e metilenos, multipletos,
de LL e CL, respectivamente, so muito prximos, dificultando a interpretao devido
baixa resoluo dos espectros. J no RMN-
13
C, com a ampliao na regio de 170ppm, os
picos de carbonila de caprola e lactidila podem ser facilmente distinguidos. Por outro lado,
no espectro de RMN-
1
H, o metileno da cadeia principal do PEG observado com grande
intensidade na regio 3,6-3,7ppm.
Os espectros das cinco amostras de RMN-
13
C ampliados na regio 170ppm so
apresentados nas Figuras 5.1 a 5.5. E os deslocamentos qumicos da carbonila das trades
52
relevantes so mostrados na Tabela 5.1. Os resultados esto de acordo com os dados da
literatura.
167.5 168.0 168.5 169.0 169.5 170.0 170.5 171.0 171.5 172.0 172.5 173.0 173.5 174.0 174.5

Figura 5.1 Espectro de RMN-
13
C do copolmero 1.
167.5 168.0 168.5 169.0 169.5 170.0 170.5 171.0 171.5 172.0 172.5 173.0 173.5 174.0 174.5


Figura 5.2 Espectro de RMN-
13
C do copolmero 2.
53
167.5 168.0 168.5 169.0 169.5 170.0 170.5 171.0 171.5 172.0 172.5 173.0 173.5 174.0 174.5


Figura 5.3 Espectro de RMN-
13
C do copolmero 3.
167.5 168.0 168.5 169.0 169.5 170.0 170.5 171.0 171.5 172.0 172.5 173.0 173.5 174.0 174.5


Figura 5.4 Espectro de RMN-
13
C do copolmero 4.
54
167.5 168.0 168.5 169.0 169.5 170.0 170.5 171.0 171.5 172.0 172.5 173.0 173.5 174.0 174.5


Figura 5.5 Espectro de RMN-
13
C do copolmero 5.

Tabela 5.1 Diferentes trades e seus picos caractersticos em copolmeros.
[28]

Seqncia Trade Ressonncia de
carbonila, ppm
Seqncia Trade Ressonncia de
carbonila, ppm
CL-CL-CL 173,504 0,026 LL-LL-CL 170,344 0,012
LL-CL-CL 173,434 0,020 CL-LL-CL 170,244 0,013
CL-CL-LL 172,852 0,028 CL-LL-LL 170,098 0,012
LL-CL-LL 172,796 0,017 LL-LL-CL 169,741 0,012
LL-LL-LL 169,588 0,010


A Tabela 5.1 mostra os picos caractersticos dos trechos caprola e lactidila na
regio de 169 174 ppm. Nos copolmeros 3 e 5, a rea onde indica a participao do PLA
maior em relao rea do PCL, compatvel com a maior alimentao de LL nessas duas
amostras. A integrao de cada sinal de carbonila no espectro considerada
55
quantitativamente proporcional concentrao relativa das unidades caprola e lactato
(meia unidade do lactdeo). A converso de mols de carbonila, determinados por RMN-
13
C,
em quantidades molares relativas permite a obteno de concentraes relativas de
segmentos LL e segmentos CL (Tabela 5.2), sendo o clculo feito pela equao 3.:
b
a
b
a
CL
LL
2
2
= = Equao 3.
Onde: a = rea integrada dos sinais de carbonila do LA.
b = rea integrada dos sinais de carbonila do CL.

Utilizando-se o clculo da razo molar, a razo em massa tambm pode ser obtida
multiplicando pela massa molar de cada componente.

Tabela 5.2 Razo molar e razo mssica obtidas dos espectros de RMN-
13
C.
Copolmero 1 Copolmero 2 Copolmero 3 Copolmero 4 Copolmero 5
LA:CL (molar %)
a
48:52 53:47 71:29 59:41 77:23
LL:CL (molar %)
b
32:68 36:64 55:45 42:58 63:37
PLA:PCL (massa %) 37:63 42:58 61:39 48:52 68:32
a
razo molar obtida diretamente do espectro de RMN-
13
C.
b
razo molar obtida da Equao 3.

Nota-se a coerncia entre as porcentagens de PLA:PCL calculadas pelo espectro
RMN-
13
C e as da alimentao. Nos copolmeros 1, 2 e 3 , a variao oscila em torno de 2%
comparando com os dados da alimentao. Entretanto, no caso do copolmero 4 e do
copolmero 5, essa alterao subiu para mais de 8%. Apesar disso, a presena de LA ainda
56
est muito abaixo da esperada
[28]
. O resultado tambm esclarece o porqu do material
apresentar um aspecto predominante de slido viscoso. Segundo Castro e Wang
[28]
, no
copolmero estatstico de PLA-PCL, a reatividade de LL apresenta-se maior em relao a
CL. Isto , para 40% e 60% de monmero de lactdeo na alimentao, obteve-se 76% e
90% de LL calculado pela RMN-
13
C, o que no ocorreu neste trabalho. O anel lactdeo
considerado apolar por apresentar sua estrutura simtrica, em oposio ao -caprolactona
que apresenta polaridade. Contudo, a cadeia PEG extremamente polar, por ter massa
molar elevada, a sua polaridade ao longo da cadeia pode afetar a reatividade do LL em
relao ao CL, diminuindo a velocidade de reao do LL, por limitar a sua solubilidade
local. No caso dos copolmeros 4 e 5, a presena do solvente THF serviu como
minimizador das interaes dipolares entre o PEG e LL, por ter polaridade relativamente
menor que PEG e pelo fato do PEG estar dissolvido nele. Outro motivo pode ser atribudo
ao fato do tempo de reao relativamente mais longo, comparado aos observados na
literatura. O tempo prolongado pode promover a maior homogeneizao na incorporao
dos reagentes.

Na Figura 5.6, analisando-se os espectros de RMN-
1
H dos cinco copolmeros com o
auxlio da Tabela 5.3, confirma-se a efetivao da reao de copolimerizao com
formao da estrutura tribloco, pois na regio 4,1 ppm, apareceram em todos os espectros,
os sinais caractersticos da ligao metileno da cadeia PEG com a PLA e PCL, indicando o
sucesso da ativao nas extremidades da PEG e, conseqentemente, a reao por insero
dos trechos PLA e PCL. Porm, na mesma regio, um tripleto tpico de CL observado em
57
conjunto. Esse sinal aparece mais forte nos copolmeros 1, 2 e 4, onde h maior presena da
unidade caprola, coerente com a anlise anterior de RMN-
13
C.

0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0
Copolmero 1
Copolmero 2
Copolmero 3
Copolmero 4
Copolmero 5


Figura 5.6 Picos caractersticos dos copolmeros por RMN-
1
H






58
Tabela 5.3 Picos caractersticos do RMN-
1
H.
Estrutura Pico de RMN-
1
H
[51]

(ppm)
Nos copolmeros
C CH Lac
O CH
3
Lac
a

5,2 presente
C CH Cap
O CH
3
Lac
b

5,12 presente
C CH Lac
O CH
3
Cap
c

5,02 presente
C CH Cap
O CH
3
Cap
d

4,95 ausente
PEG
O CH
2
CH
2
O CH
2
CH
2
O Cap
e f


3,6 (e); 4,05 (f) presente
PEG
O CH
2
CH
2
O CH
2
CH
2
O Lac
g h

3,7 (g); 4,1 (h) presente
i
C CH
2
CH
2
O Cap
O
Cap

3,9 ausente

O pico singleto em 3,65 ppm atribudo aos prtons metilenos centrais do bloco
PEG. A grande intensidade desse sinal demonstra o grande bloco da cadeia, de acordo com
a quantidade de PEG introduzida na alimentao. Para calcular a proporo molar entre as
59
unidades xido de metileno e lactdeo, foi escolhida a rea correspondente regio dos
picos 5,0-5,2 ppm, os quais marcam a presena de metino do PLA, e o pico relativo
cadeia de PEG a 3,4-3,7.
O clculo foi feito pela integrao das reas.

O PEG utilizado tem a massa molar
inicial de 20.000 u.m.a, isto corresponde ao grau de polimerizao, DP = 454. Assim, pode-
se obter o nmero de unidades constitutivas de lactato, LA
n
, ou lactdeo, LL
n
.

a
b DP
LL LL
a
b DP
LA
n n n
. 2
2
. . 4
= = = Equao 4.

onde: a= integrao da rea relativa aos metinos da unidade LA (5,1-5,3ppm).
b= integrao da rea relativa aos metilenos do PEG (3,4-3,7ppm).

A estimativa da concentrao relativa de PCL pode ser feita por diferena, tendo-se
a concentrao relativa de PEG/ PLA e conhecendo-se a concentrao relativa PLA/PCL,
obtida por RMN-
13
C (Tabela 5.2). Alm disso, conhecendo-se a massa molar inicial do
PEG utilizado igual a 20.000 u.m.a, possvel calcular a massa molar mdia numrica.

000 . 20 . + + =
PCL n PLA n copolmero
Mn CL Mn LL Mn Equao 5.
1
1
. 114
. 144

=
=
mol g Mn
mol g Mn
PCL
PLA




60
Tabela 5.4 Composio dos copolmeros triblocos por RMN-
13
C e RMN-
1
H.
Composio (em massa %) Amostra
Nominal Copolmero
M
n
do copolmero
(g.mol
-1
)
PEG20K LA CL PEG20K LA CL
Copolmero 1 25 30 45 26,2 27,2 46,6 76300
Copolmero 2 25 30 45 27,0 30,4 42,6 74200
Copolmero 3 25 45 30 25,6 45,2 29,2 78300

Calculou-se a massa molar apenas para os copolmeros 1, 2 e 3. A massa molar do
PEG estendido com 1,6-hexametilenodisiocianato ainda no foi determinada devido a
dificuldades experimentais para a sua realizao, impedindo no momento a avaliao das
M
n
s dos copolmeros 4 e 5.
Entre os primeiros trs copolmeros, o copolmero 3 se destaca com uma maior
concentrao de LL, reafirmando a sua maior converso. Todos os resultados confirmaram
que nos copolmeros formados, a proporo PEG/PLA/PCL apresenta valor prximo da
alimentao.

A pequena diferena observada entre a composio na alimentao e composio
calculada pode ser causada pelas diferenas nas constantes de velocidade das reaes
envolvidas. O objetivo foi sintetizar o copolmero tribloco poli(l,l-lactdeo-stat--
caprolactona)-bloco-poli(xido de etileno)-bloco-poli(l,l-lactdeo-stat--caprolactona),
tendo a cadeia PEG como o segmento central ligado aos blocos formados por PLA-PCL.
Como as ligaes LL e CL cadeia PEG so estatsticas, isto , no apresentam uma ordem
61
especfica, a composio depende das condies experimentais, tais como, temperatura,
presso, meio reacional, composio dos reagentes, entre os fatores mais relevantes. Alm
disso, pode existir outra arquitetura de cadeia no produto final, tal como o copolmero
dibloco PEG-b-(PLA-stat-PCL), quando somente uma extremidade do PEG for ativada, ao
invs da ativao em ambas as extremidades.
De forma geral, pode-se concluir atravs das anlises RMN que, primeiramente,
houve a copolimerizao com formao do copolmero tribloco esperado poli(l,l-lactdeo-
stat--caprolactona)-bloco-poli(xido de etileno)-bloco-poli(l,l-lactdeo-stat--
caprolactona). O tempo mais longo de reao favorece a formao do copolmero. A
incorporao de grupos lactdeo no apresentou a reatividade relativa maior em relao aos
grupos caprola, como reportado na literatura
[28]
. A no homogeneidade dos produtos
(formao de copolmeros dibloco e tribloco) pode ser evitada pela diminuio da
quantidade de iniciador e maiores cuidados durante manuseio para impedir a entrada de
umidade e oxignio.







62
5.2. Anlise trmica dinmico-mecnica (DMTA)
Com a aplicao de uma pequena tenso senoidal de uma freqncia angular,
possvel obter os valores de propriedades como mdulo de armazenamento, mdulo de
perda e demais informaes a respeito do comportamento viscoelstico do material. A
partir dessas variveis, pode-se correlacionar propriedades mecnicas dos materiais
polimricos, tais como tenacidade, resistncia ao impacto, etc. Uma das utilizaes mais
comuns da tcnica de DMTA ocorre tambm na determinao da temperatura de transio
vtrea (Tg), temperatura de fuso (Tm) e temperatura de cristalizao (Tc). Essas
temperaturas caractersticas so detectadas por uma mudana brusca no mdulo de
armazenamento do material ou definidas atravs de mximos nas curvas do amortecimento
mecnico (tan) como uma funo da temperatura.
[101-103]

Os corpos de prova foram prensados a vcuo para reduo de espessura e
eliminao de bolhas de ar. Aps a prensagem, foram cortadas tiras com dimenses
aproximadas de 1 x 6 x 30 (espessura x largura x comprimento) em unidades de milmetro.
A anlise foi feita no modo de trao, utilizando a freqncia de 1 Hz e a faixa de
temperatura de teste de -120C a temperatura ambiente com taxa de aquecimento de
2C/min. Utilizou-se o N
2
lquido para o resfriamento do sistema. Os resultados so
mostrados em grficos representados em mdulo de armazenamento (E), mdulo de perda
(E) e amortecimento (tangente delta) cujo valor igual a E/E. Por ser material
elastomrico, os copolmeros apresentam uma contrao significativa a baixa temperatura,
por isso, as amostras foram reapertadas a 60C para evitar a descontinuidade nas medidas,
quando a amostra escorrega das garras.
63
Por dificuldades na preparao de corpo de prova, no foi possvel a realizao dos
testes dos copolmeros 4 e 5, foram feitas anlises somente dos copolmeros 1, 2 e 3. Nas
Figuras 5.8 a 5.10, pode-se observar que esses trs copolmeros apresentaram
comportamentos dinmico-mecnicos similares: iniciam-se com um valor de E alto e
sofrem uma reduo suave at determinada temperatura e, por fim, observado um trecho
de decaimento brusco, o qual atribudo relaxao devido a T
g
do material. Alm disso,
percebe-se facilmente que os copolmeros apresentam miscibilidade entre as fases politer e
polister. Isto cada copolmero apresentou somente uma nica etapa de relaxao
acentuada correspondente fase amorfa. Isso nos d idia de que houve a modificao de
ligaes qumicas entre as cadeias e a cadeia principal o copolmero de polisteres e
politer. Porm, cada um desses copolmeros apresentou sua prpria relaxao deslocada
em relao ao outro, em termos de temperatura (Figura 5.7). A temperatura do pico da
relaxao da tg de cada copolmero foi registrado, assim como a faixa de temperatura em
que ocorre a relaxao devido transio vtrea, observada por DMTA (Tabela 5.5).
-140 -120 -100 -80 -60 -40 -20 0 20 40 60
1E7
1E8
1E9

E

(
P
a
)
Temperatura (C)
copolmero 1
copolmero 2
copolmero 3

Figura 5.7 Grfico de anlise de DMTA do copolmero 1, 2 e 3 em conjunto.
64

Tabela 5.5 Temperaturas de transio obtidas pela interpretao dos grficos de DMTA.
Copolmero 1 Copolmero 2 Copolmero 3
Tg (C) (-35,5) (4,5) (-31,4) (8,4) (-21,4 ) (32,8)
Pico de tangente (C) (-15,8) (-10,3) (12,6)

Tabela 5.6 Comparao de valores de E dos trs copolmeros em diferentes temperaturas.
Mdulo de Armazenamento (E) (Pa)
Temperatura (C) Copolmero 1 Copolmero 2 Copolmero 3
-60 3,11 x 10
9
3,57 x 10
9
3,44 x 10
9

-40 2,76 x 10
9
3,31 x 10
9
3,21 x 10
9

-20 6,59 x 10
8
1,23 x 10
9
2,85 x 10
9

0 3,46 x 10
7
7,32 x 10
7
1,05 x 10
9

20 1,69 x 10
7
3,26 x 10
7
8,78 x 10
7


O pico de tangente indica a maior taxa de transio de 2 ordem. Nota -se que h
um aumento da T
g
, em outras palavras, um aumento do ponto de deflexo do
amortecimento, quando vai do copolmero 1 para o copolmero 3. Porm, de 1 a 2, a
mudana pouco mais de 4C, muito pequena comparada com a variao do copolmero
1 a 3 ou do copolmero 2 a 3, cujas diferenas apresentaram-se maiores que 10C. Os dados
obtidos mostraram que a composio dos reagentes tem maior influncia do que o tempo de
reao, sobre o produto formado e que, com o acrscimo da quantidade do lactdeo,
melhora-se a propriedade mecnica do copolmero final.
65
Todos os trs copolmeros apresentaram seus valores de mdulo de armazenamento
superiores queles observados para a borracha natural a temperatura ambiente
(aproximadamente 1,2MPa), apontando assim a vantagem dos copolmeros por serem
materiais elastomricos com boa propriedade mecnica, juntamente com sua caracterstica
de biodegradabilidade.
[104]

-140 -120 -100 -80 -60 -40 -20 0 20 40
1E7
1E8
1E9

E

e

E

(
P
a
)
Temperatura (C)
E' (Pa) E" (Pa)
-0,1
0,0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
tan_delta

t
a
n
g
e
n
t
e
_
d
e
l
t
a

Figura 5.8 Grfico de anlise DMTA do copolmero 1.
66
-140 -120 -100 -80 -60 -40 -20 0 20 40
1E7
1E8
1E9
E

e

E

(
P
a
)
Temperatura (C)
E' (Pa) E" (Pa)
0,0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5

t
a
n
g
e
n
t
e
_
d
e
l
t
a
tan_delta

Figura 5.9 Grfico de anlise DMTA do copolmero 2.
-140 -120 -100 -80 -60 -40 -20 0 20 40 60
1E7
1E8
1E9
E

e

E

(
P
a
)
Temperatura (C)
E' (Pa) E" (Pa)
-140 -120 -100 -80 -60 -40 -20 0 20 40 60
0,0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5

T
a
n
g
e
n
t
e
_
d
e
l
t
a
tan_delta

Figura 5.10 Grfico de anlise DMTA do copolmero 3.
67
5.3. Calorimetria Exploratria Diferencial (DSC)

DSC um tipo de anlise no qual se acompanha a variao da energia entre
a amostra e a referncia, mantendo-se a temperatura de ambas igual. Existem dois modelos
de DSC: DSC de fluxo de calor e DSC de compensao de potncia. Na primeira tcnica, a
amostra e a referncia so colocadas em suas respectivas cpsulas, posicionadas sobre um
disco de metal, a troca de calor entre o forno e a amostra ocorre preferencialmente pelo
disco por uma nica fonte de calor. A diferena de temperatura detectada entre a amostra e
a referncia por meio de termopares proporcional variao de entalpia, capacidade
calorfica e resistncia trmica total ao fluxo calrico. A DSC de fluxo de calor o mais
comum e utilizado neste trabalho para determinao de temperatura de transio vtrea
(Tg) e temperatura de fuso (Tm) dos materiais polimricos
[101-104]

Uma pequena quantidade dos copolmeros (10mg) pesada dentro de cadinho de
alumnio, o qual posteriormente selado antes de submeter a amostra anlise por DSC.
Foi utilizado Al
2
O
3
selado em cadinho de alumnio como referncia. Para evitar a umidade
e interferir no resultado da anlise, as amostras dentro dos cadinhos foram levados para
estufa a vcuo para a secagem a temperatura ambiente por 2 horas, antes da realizao da
anlise.
Utilizou-se o nitrognio lquido para o resfriamento do sistema e a taxa de
aquecimento foi 10C/min. Durante o processo, o gs N
2
com taxa de 30mL/min. foi
introduzido e circulado dentro do forno para manter o ambiente inerte. O equipamento foi
calibrado com ndio (T
m
= 156,6 C e H
f
= 3,26 kJ.mol
-1
) nas mesmas condies das
anlises.
68
A Tabela 5.7 mostra resumidamente as informaes obtidas pela anlise das curvas
de DSC.

Tabela 5.7 Caracterizao dos homopolmeros de partida e dos polmeros preparados.
Amostra T
g
(C) T
m
(C) H
m
(J/g)
PEG 20K -106,16 62,46 130,75
PEG 4K _____ 52,01 91,34
PEG 4K modificado -86,53 54,79 87,71
Copolmero 1 -34,99 47,20 19,12
Copolmero 2 -36,12 45,25 23,32
Copolmero 3 -17,06 43,73 26,73
Copolmero 4 -39,43 37,24 157,37 28,33 8,81
Copolmero 5 -31,58 33,30 158,51 12,92 0,47

Atravs dos grficos de anlise de DSC (Figura 5.11 a Figura 5.15), verifica-se que
as amostras apresentam uma nica fase amorfa, uma vez que apenas uma nica Tg para
cada curva foi observada. Este resultado sugere que a copolimerizao foi bem sucedida,
pois os segmentos apresentam estruturas qumicas bastante distintas, mas a introduo de
ligaes covalentes entre eles inibe uma separao de fases. Foram observados dados
variados de T
g
e T
m
, conforme as diferenas massas molares dos segmentos PCL, PLA e
PEG. Para o homopolmero PLA, a T
g
observada na literatura varia ao redor de 65C
enquanto a T
m
, ao redor de 170C; para o homopolmero PCL, a T
g
observada na literatura
fica por volta de 60C e a T
m
normalmente est ao redor de 60C.
[5][29][52][70]

69
Os copolmeros 1, 2 e 3 foram obtidos a partir do PEG20K, cujos valores de T
g
e T
m

foram determinados e eram 106C e 62C, respectivamente.
Os resultados obtidos foram analisados com base na regra de mistura, anteriormente
sugerida por Fox-Flory:

C
g
C
B
g
B
A
g
A
copolmero
g
T
W
T
W
T
W
T
+ + =
1
Equao 5.
Onde T
g copolmero
Temperatura de transio vtrea do copolmero;
W
A
, W
B
, W
C
so fraes mssicas do LA, CL e EO;
T
gA
, T
gB
, T
gC
so temperaturas de transio vtrea em Kelvin dos respectivos
homopolmeros PLA, PCL e PEG.

Para o copolmero 1: C 77 53 K 23 219
167
262 0
213
466 0
338
272 0
1
T
copolmero
g
= =
+ +
= , ,
, , ,

Para o copolmero 2: C 57 51 K 43 221
167
270 0
213
426 0
338
304 0
1
T
copolmero
g
= =
+ +
= , ,
, , ,

Para o copolmero 3: C 21 37 K 79 235
167
256 0
213
292 0
338
452 0
1
T
copolmero
g
= =
+ +
= , ,
, , ,

Para o copolmero 4: C 6 42 K 4 230
5 186
25 0
213
45 0
338
3 0
1
T
copolmero
g
= =
+ +
= , ,
,
, , ,

Para o copolmero 5: C 9 27 K 1 245
5 186
25 0
213
3 0
338
45 0
1
T
copolmero
g
= =
+ +
= , ,
,
, , ,

Os resultados calculados apresentam-se diferentes daqueles observados experimentalmente
atravs de anlises DSC. Os valores calculados de T
g
para copolmeros 1,2 e 3 so
70
aproximadamente 20 C inferiores. Esta diferena atribuda reao incompleta, a qual
ocasiona baixas massas molares e diferenas entre as razes mssicas na alimentao e no
copolmero, assim como formao da(s) fase(s) cristalina(s). Alm disso, as temperaturas
de T
g
dos homopolmeros utilizadas foram aquelas observadas na literatura, cujas massas
molares so elevadas, enquanto no caso destes copolmeros, os segmentos apresentam
massas molares relativamente baixas, estando, portanto, ainda sujeitos grande influncia
da presena das terminaes das cadeias na T
g
.
No caso dos copolmeros 4 e 5 (Figura 5.14 e 5.15), foram identificados dois picos
de fuso, um em torno de 37C e outro em 158 C, os quais so atribudos a PEG e PLA,
respectivamente. Essa diferena de comportamento em relao quele observado para os
copolmeros 1,2 e 3, pode ser atribuda cadeia de PEG modificado. As ligaes uretanas
podem interferir na reatividade do SnOct
2
, na ativao, ao mesmo tempo, a adio do
solvente THF, aumenta a mobilidade do sistema, facilita o encontro do catalisador com os
grupos hidroxilas nas extremidades da cadeia PEG modificado, uma vez que todas as
cadeias PEG estejam ativadas pelo SnOct
2
, quantidades remanescentes deste reagente
podem ser prejudiciais reao seguinte, pois podem iniciar as reaes de
homopolimerizao de lactdeo e -caprolactona. No caso dos copolmeros 4 e 5, a
presena predominante de PLA pode ser entendido pela sua maior reatividade em relao
ao PCL.
[28]

A obteno de copolmeros em bloco neste Trabalho requer a eliminao de
resduos indesejveis, impedindo a ocorrncia de reaes paralelas, como j citadas, o que
inclui a reduo da quantidade de SnOct2, para tornar a polimerizao especfica a partir do
PEG modificado.
71
Para todos esses copolmeros, difcil determinar a cristalinidade de cada um
somente pela interpretao de suas curvas DSC, porque trata-se de um sistema tribloco e a
escassez de informaes sobre estes sistemas polimricos na literatura, dificultam mais
ainda esta finalidade. Todavia, o uso de outros mtodos de anlise, principalmente, por
difratometria de raios-X pode oferecer esclarecimento sobre a estrutura cristalina presente
nos copolmeros.


-100.00 0.00 100.00
Temp [C]
-4.00
-2.00
0.00
mW
DSC
-38.95C Onset
-31.21C Endset
-34.99C Mid Point
47.20C Peak
-193.07mJ
-19.12J/g
Heat

-100.00 0.00 100.00
Temp [C]
-6.00
-4.00
-2.00
0.00
mW
DSC
-41.96C Onset
-30.54C Endset
-36.12C Mid Point
45.25C Peak
-256.54mJ
-23.32J/g
Heat

Figura 5.11 Curva de DSC do copolmero 1.

Figura 5.12 Curva de DSC do copolmero 2.
72
-100.00 0.00 100.00 200.00
Temp [C]
-5.00
0.00
mW
DSC
43.73C Peak
-302.02mJ
-26.73J/g
Heat
-25.22C Onset
-9.16C Endset
-17.06C Mid Point

-100.00 0.00 100.00 200.00
Temp [C]
-6.00
-4.00
-2.00
0.00
mW
DSC
-45.39C Onset
-32.16C Endset
-39.43C Mid Point
37.24C Peak
-305.99mJ
-28.33J/g
Heat
157.37C Peak
-95.20mJ
-8.81J/g
Heat

Figura 5.13 Curva de DSC do copolmero 3. Figura 5.14 Curva de DSC do copolmero 4.

-100.00 0.00 100.00 200.00
Temp [C]
-3.00
-2.00
-1.00
0.00
1.00
2.00
mW
DSC
-38.63C Onset
-23.33C Endset
-31.58C Mid Point
33.30C Peak
-146.04mJ
-12.92J/g
Heat
158.51C Peak
-5.28mJ
-0.47J/g
Heat

-100.00 0.00 100.00
Temp [C]
-20.00
-10.00
0.00
mW
DSC
-99.77C Onset
-117.28C Endset
-106.16C Mid Point
62.46C Peak
-1.33J
-130.75J/g
Heat

Figura 5.15 Curva de DSC do copolmero 5.

Figura 5.16 Curva de DSC do PEG20K.
73
-50.00 0.00 50.00 100.00 150.00
Temp [C]
-10.00
-8.00
-6.00
-4.00
-2.00
0.00
2.00
mW
DSC
52.01C Peak
-465.83mJ
-91.34J/g
Heat

-100.00 -50.00 0.00 50.00 100.00 150.00
Temp [C]
-10.00
-8.00
-6.00
-4.00
-2.00
0.00
2.00
mW
DSC
54.79C Peak
-421.00mJ
-87.71J/g
Heat
-86.53C Tg

Figura 5.17 Curva de DSC do PEG4K. Figura 5.18 Curva de DSC do PEG4K modificado.















74
5.4. Termogravimetria / Termogravimetria Derivada (TG/DTG)

A termogravimetria (TG) uma tcnica da anlise trmica na qual a variao da
massa da amostra (perda ou ganho) determinada em funo da temperatura e/ou tempo,
enquanto a amostra submetida a uma programao controlada de temperatura. A TG pode
ser usada para monitorar qualquer evento trmico que envolve uma fase de gs como a
oxidao ou desidratao, possibilitando a determinao da temperatura de decomposio e
deteco de alteraes qumicas na faixa de temperatura definida. Este mtodo til para
determinar a pureza e a gua na amostra, os contedos de carboneto e orgnicos e para o
estudo das reaes de decomposio. Existem trs tipos de TGs: TG isotrmica, TG quase-
isotrmica e TG dinmica. Neste trabalho, foi utilizado a TG dinmica em que a amostra
aquecida num termobalana num ambiente purgado por nitrognio e sob variao linear
pr-fixada de temperatura.
Na termogravimetria derivada (DTG), as curvas so registradas a partir das curvas
da TG e correspondem primeira derivada do termograma da TG. Essas curvas podem ser
obtidas por mtodos de diferenciao manual da curva TG ou por diferenciao eletrnica
do sinal de TG. Com a complementao da DTG, as curvas tornam a interpretao mais
fcil, permitindo a visualizao com maior nitidez de reaes sobrepostas as quais so
dificilmente detectados somente baseados nas curvas de TG.
[101-104]

Foram efetuadas anlises termogravimtricas para os cinco copolmeros, PEG20K e
PEG modificado. As amostras com massa aproximada de 6mg foram colocadas no
recipiente aberto de platina e o aquecimento foi programado a 5C/min sob atmosfera de
gs N
2
at 600C, quando toda decomposio de materiais orgnicos usualmente
75
observada. Semelhante a anlise de DSC anterior, as amostras primeiramente foram secas a
vcuo para impedir o aparecimento de sinais de umidade nas curvas de anlise.
Foi observado nitidamente que, para PEG20K e PEG modificado (Figura 5.19 e
Figura 5.20), suas curvas termogravimtricas mostram uma nica etapa de degradao. Esta
etapa estende de 250C a 450C, e ocorre uma perda de massa total acima de 96%. Junto
com a interpretao da DTG, verifica-se que a maior taxa de degradao para PEG20K e
PEG modificado acontece a 416C e a 425C, respectivamente, o que indica pico de
degradao caracterstica das ligaes da cadeia PEG. Alm da perda maior e temperatura
mais alta, tambm pode ser notada facilmente que o PEG modificado tem a perda de massa
total menor em relao ao PEG20K. O motivo dado novamente ligao uretana por sua
estabilidade na alta temperatura, assim, retarda a degradao da cadeia.

0.00 100.00 200.00 300.00 400.00 500.00 600.00
Temp [C]
-100.00
0.00
100.00
%
TGA
-1.00
0.00
1.00
2.00
mg/min
DrTGA
-98.947 % Weight Loss
416.14 C
-0.70 mg/min
TGA
DrTGA

Figura 5.19 Curva de anlises TG e DTG do PEG20K.
76
0.00 100.00 200.00 300.00 400.00 500.00 600.00
Temp [C]
-100.00
0.00
100.00
%
TGA
-1.00
0.00
1.00
2.00
mg/min
DrTGA
-96.624 % Weight Loss
-0.84 mg/min
424.95 C
TGA
DrTGA

Figura 5.20 Curva de anlises TG e DTG do PEG4K modificado.

J os copolmeros, apresentam duas etapas visveis de degradao, uma por volta de
420C, indicando a degradao de cadeia PEG. Essa suposio tambm pode ser
confirmada pela porcentagem da perda de massa que na faixa de 25% da massa total,
correspondente massa do PEG na alimentao. Outro pico de degradao ocorre a
aproximadamente 380C para os copolmeros 1 e 2 (Figura 5.21 e Figura 5.22 ), e 320C
para os copolmeros 4 e 5 (Figura 5.24 e Figura 5.25). A razo dessa alterao de
temperatura pode ser atribuda labilidade trmica dos trechos PLA no copolmero, como
explicado na parte de anlise de DSC. Por ser copolmero tribloco, estas etapas de
degradao podem estar relacionadas com a quebra da cadeia polimrica nos diferentes
segmentos do polister PLA-PCL e do politer PEG. Um indcio de reaes sobrepostas na
primeira etapa confirma essa hiptese, embora ambos PLA e PCL apresentem ligao ster,
77
o mecanismo de degradao destes trechos especificamente, podem apresentar diferenas
em funo da estabilidade trmica e da facilidade de formao e volatilizao dos produtos
de decomposio, dmeros cclicos lactdeo e monmero cclico -caprolactona para trechos
de PLA e PCL, respectivamente. PLA comparado com PCL apresenta maior nmero de
ligao ster por peso de amostra, isso o torna menos estvel termicamente, provocando o
primeiro estgio de degradao logo seguido por outra do PCL, ocasionando os picos
sobrepostos de degradao.
[37]
Foi relatado na literatura
[105][106]
, que a temperatura do pico
de decomposio de PLA e PCL encontra-se ao redor de 295C e 385C, respectivamente, o
que so confirmados pelos resultados obtidos experimentalmente nesse trabalho. Quanto
maior era a concentrao de LL no copolmero, os picos de degradao apresentram-se
suavemente deslocados para temperaturas mais baixas, tornando os picos de degradao
mais difceis de serem resolvidos, como mostra a Figura 5.23. O copolmero 3 mostrou uma
perda de massa diferenciada dos outros copolmero, isso tornou-se forte indcio de uma
possvel reduo do rendimento na polimerizao.

78
100.00 200.00 300.00 400.00 500.00 600.00
Temp [C]
-100.00
0.00
100.00
%
TGA
-0.50
0.00
0.50
1.00
mg/min
DrTGA
-68.334 % Weight Loss
-27.270 % Weight Loss
-0.23 mg/min
389.95 C
-0.16 mg/min
425.00 C

reao
sobreposta

TGA
DrTGA

Figura 5.21 Curva de anlises TG e DTG do copolmero 1.
100.00 200.00 300.00 400.00 500.00 600.00
Temp [C]
-100.00
0.00
100.00
%
TGA
-0.50
0.00
0.50
1.00
mg/min
DrTGA
-68.370 % Weight Loss
-26.079 % Weight Loss
-0.22 mg/min
382.13 C
-0.19 mg/min
424.05 C
Reao
Sobreposta
TGA
DrTGA

Figura 5.22 Curva de anlises TG e DTG do copolmero 2.
79
100.00 200.00 300.00 400.00 500.00 600.00
Temp [C]
-100.00
0.00
100.00
%
TGA
-0.50
0.00
0.50
1.00
mg/min
DrTGA
-59.040 % Weight Loss
-34.312 % Weight Loss
-0.21 mg/min
415.54 C
reaes
subrepostas
TGA
DrTGA

Figura 5.23 Curva de anlises TG e DTG do copolmero 3.
100.00 200.00 300.00 400.00 500.00 600.00
Temp [C]
-100.00
0.00
100.00
%
TGA
-0.50
0.00
0.50
1.00
mg/min
DrTGA
-66.642 %
Weight Loss
-27.844 % Weight Loss
-0.39 mg/min
425.12 C
332.31 C
-0.22 mg/min
reao
sobreposta
TGA
DrTGA

Figura 5.24 Curva de anlises TG e DTG do copolmero 4.
80
0.00 100.00 200.00 300.00 400.00 500.00 600.00
Temp [C]
-100.00
0.00
100.00
%
TGA
-0.50
0.00
0.50
1.00
mg/min
DrTGA
-68.666 % Weight Loss
-24.058 % Weight Loss
-0.24 mg/min
423.23 C
-0.32 mg/min
315.29 C
TGA
DrTGA

Figura 5.25 Curva de anlises TG e DTG do copolmero 5.












81
5.5. Anlise por Difrao de Raio-X (Wide Angle X-ray Scattering WAXS)

A difrao de raio-X uma tcnica bastante utilizada na caracterizao e
identificao de materiais de estrutura cristalina. No caso de polmeros semicristalinos,
possvel a observao de espectros de difrao caractersticos decorrentes dos seus
parmetros de rede cristalina. A anlise do espectro de difrao possibilita a determinao
dos planos de difrao e em comparaes com os espectros de materiais conhecidos de
referncia, possvel ainda a identificao da presena de diferentes componentes nas
amostras. Alm disso, a tcnica tem sido utilizada pelos pesquisadores para a determinao
da frao cristalina dos polmeros semicristalinos. A aplicao do mtodo para esta
finalidade, no estudo de polmeros sintticos, foi primeiramente sugerida por Natta, na
pesquisa de polipropileno isottico.
[107]

A porcentagem de cristalinidade de polmero semicristalino a partir da tcnica de
difrao de raio-X apresenta como principal problema a separao dos picos de difrao
dos planos cristalinos da curva contnua de espalhamento (halo amorfo), a qual decorrente
de estruturas desordenadas provenientes de movimentos trmicos e imperfeies
cristalinas.
[108-111]
O mtodo mais utilizado para o delineamento da rea amorfa sob os picos
cristalinos foi proposto por Hermans e Weidinger
[109-111]
. O mtodo baseia-se na correlao
linear entre as reas amorfa e cristalina, conforme a equao a seguir:
c
am
c
O
O
k
X
+
=
1
1

Onde X
c
a porcentagem de cristalinidade, O
am
e O
c
so as reas de difrao normalizadas
do halo amorfo e dos picos cristalinos, respectivamente, e k o coeficiente de difrao
82
correspondente razo entre as reas para amostras 100% cristalinas e 100% amorfas, que
podem ser determinadas a partir de amostras com diferentes graus de cristalinidade.
Para a maior parte dos estudos comparativos de cristalinidade, os dados de reas dos
difratogramas so utilizados sem a aplicao do coeficiente k, cuja determinao requer um
nmero razovel de amostras com diferentes graus de cristalinidade.
Neste trabalho, as cristalinidades dos copolmeros foram determinadas por difrao
de raios-X usando radiao de Cu, a 40kV e 40mA, com ngulo inicial de 2,5 e ngulo
final de 70, e o tamanho de passo de 0,02. As amostras foram preparadas sem qualquer
tratamento trmico prvio, para no ocorrer nenhum tipo de alterao da cristalinidade nas
amostras. As Figura 5.26 a Figura 5.29 mostram os difratogramas de raio-X e suas
respectivas decomposies de picos, para os 3 copolmeros sintetizados e o PEG 20K. Os
ajustes de picos e reas foram feitos com o auxlio do programa de grficos Origin 5.0.


10 15 20 25 30 35 40
0
500
1000
1500
2000
2500
3000
amostra PEG 20K
I
n
t
e
n
s
i
d
a
d
e
2 teta (
o
)

Figura 5.26 Difratogramas de raio-X da amostra PEG20K.

83


5 10 15 20 25 30 35
0
100
200
300
400
500
Copolmero 1
I
n
t
e
n
s
i
d
a
d
e
2 teta (
o
)

Figura 5.27 Difratogramas de raio-X da amostra L1.



Figura 5.28 Difratogramas de raio-X da amostra L2.


84

5 10 15 20 25 30 35
0
500
1000
1500
2000
Copolmero 3
I
n
t
e
n
s
i
d
a
d
e
2 teta (
o
)

Figura 5.29 Difratogramas de raio-X da amostra L3.


Observando-se as Figuras 5.26-5.29, pode-se notar que os picos caractersticas
correspondentes aos planos cristalinos do PEG20K localizam-se nos ngulos (2) 18,9 e
23,5, em todas as amostras. Nos copolmeros triblocos, houve uma grande diminuio de
intensidade dos picos, aumentando, ao mesmo tempo, o halo da parte amorfa. Pela
literatura, sabe-se que a estrutura cristalina do PLL atribuda estrutura
pseudoortorrmbica , com uma conformao de cadeia helicoidal, com os picos principais
de difrao encontrados nos ngulos (2)16,5 e 18,9, os quais correspondem aos planos (0
0 1 0) e (1 0 1 0), respectivamente
[28]
. J no caso de PCL, a estrutura cristalina atribuda a
uma clula unitria ortorrmbica , com os principais picos de difrao localizados nos
ngulos (2) 21,35, 21,9 e 23,75, os quais correspondem aos planos (1 1 0), (2 0 0) e (0 2
0), respectivamente. Devido estrutura PCL-PLL estatstica e a cristalizao dos
85
segmentos apresenta-se dificultada e o aparecimento dos picos caractersticas de PCL e
PLL minimizado, valorizando-se somente os da cadeia de PEG20K.
Para cada difratograma, a soma das reas dos picos foi considerada como rea da
parte cristalina do material, o restante da rea foi avaliado como rea da parte amorfa. O
grau de cristalinidade o percentual que representa a relao entre a rea cristalina e rea
total (rea cristalina + rea amorfa).
Os resultados dos clculos dos graus de cristalinidade das amostras esto
apresentados na Tabela 5.8.

Tabela 5.8 Graus de cristalinidade calculados pelo difratograma de raio-X.
Amostra Cristalinidade (%)
PEG20K 63,8
L1 9,5
L2 13,5
L3 14,5

Os dados obtidos de grau de cristalinidade confirmam o resultado esperado. O
tempo longo de reao e maior quantidade de LL na reao de copolimerizao torna o
copolmero tribloco mais cristalino. Entretanto, existe uma diferena bastante notvel entre
a cristalinidade de PEG20K e os trs copolmeros, houve uma reduo brusca de grau de
cristalinidade, de 63,8% do PEG20K para 14,5% do L3, 13,5% do L2 e 9,5% do L1. A
intensidade dos picos tambm segue a mesma tendncia. Essa diminuio pode ser
explicada pela estrutura do copolmero tribloco. A cadeia central de PEG, por ter ligado nas
duas extremidades com segmentos de PLA-PCL, no consegue atingir a mesma
86
cirstalinidade do seu homopolmero correspondente, porque no capaz de obter os
mesmos dobramentos uniformes da cadeia polimrica e as cadeias estatsticas de PLA-PCL,
tambm no contribuem de forma significativa no grau de cristalinidade do copolmero
tribloco.
As cristalinidades calculadas para cada amostra via difratometria de raio-X
apresentam coerncia em relao s anlises anteriores (DSC, TG). Baseado nos dados H
m

obitdo pela DSC na Tabela 5.7 e a cristalinidade calculado pela WAXS na Tabela 5.8,
ambos para caso de PEG20K, supondo que as cristalinidades apresentadas nos copolmeros
tratam-se de contribuio da cadeia PEG20K, pode-se calcular as cristalinidades das
amostras L1, L2 e L3. Como por exemplo, a fuso da fase cristalina da PEG20K apresenta
um calor H
m
= 130,75J/g, e ela corresponde 63,8% de cristalinidade obtido pelo WAXS, por
tanto, para amostra L1 a qual tem H
m
= 19,12J/g, ela corresponder 9,33%. Assim aplicando para
todas os copolmeros, tem-se:

Tabela 5.9 Comparao de graus de cristalinidades DSC x WAXS
Amostra Cristalinidade (%)
WAXS
Cristalinidade (%)
DSC
L1 9,5 9,33
L2 13,5 11,38
L3 14,5 13,04

Os dados comparativos mostram que a coerncia evidente e a suposio para
aplicao de todos os calculos torna-se verdadeira, ou seja, a cristalinidade dos copolmeros
resume na maior contribuio da cadeia de PEG20K.
87
5.6. Microscopia tica de luz polarizada (MOLP)

Durante a solidificao de um polmero fundido, pode haver o chamado de processo
de rearranjo de cadeias. Quando ocorre a nucleao, as cadeias polimricas freqentemente
se organizam tangencialmente e as regies solidificadas crescem em direo radial
denominados de esferulitos. Estes podem ser vistos na microscopia ptica de luz polarizada
como os formatos de Cruz de Malta. Quando estes esferulitos aumentam de tamanho e se
encontram, a fronteira que os separam tornam-se poligonal.
A anlise de polmeros por microscpia tica de luz polarizada uma alternativa
para verificar a cristalinidade e, conseqentemente, a propriedade mecnica do material,
atravs de sua formao de esferulitos em diferentes condies. Portanto, trata-se de uma
tcnica complementar junto aos demais mtodos de anlise.
As amostras dos copolmeros so preparadas sob lminas de vidro e recobertas por
lamnulas apropriadas para microscopia. Em seguida, elas so aquecidas rapidamente at
70C e resfriadas a uma velocidade de 10C/min at a temperatura ambiente. As
transformaes so observadas pelo microscpio tico com lentes para luz polarizada,
como mudanas na textura da amostra.
Foram tiradas fotos dos copolmeros 1, 2 e 3 (Figura 5.30-5.32); e dos PEG 20K e
PEG modificado (Figura 5.33-5.35). Pode-se verificar na tabela 5.9 a diferena de
temperatura do surgimento dos primeiros esferulitos para cada amostra analisada, a qual
tambm chamada de incio de nucleao.



88
Tabela 5.10 As temperaturas de nucleao dos copolmeros e dos PEGs.
Amostra Copolmero 1 Copolmero 2 Copolmero 3 PEG 20K PEG modificado
T
nucleao
(C) 37 36 32 56 35

Os aspectos dos cristalitos podem ser vistos nas seguintes fotos.


Figura 5.30 Copolmero 1 a 30C, 100X.

Figura 5.31 Copolmero 2 a 30C, 100X.

Figura 5.32 Copolmero 3 a 30C, 100X.

Figura 5.33 PEG 20K a 32C, 50X
89


Figura 5.34 PEG modificado a 35C, 50X. Figura 5.35 PEG modificado a 32C, 50X.

No processo de nucleao (Figura 5.34 e Figura 5.35), nota-se naturalmente que, os
esferulitos das cadeias de PEG modificado so maiores, e a taxa do crescimento respectivo
tambm maior em relao do PEG 20K (Figura 5.33). O fato pode ser explicado pela
diferena em morfologia e estrutura das cadeias polimricas. Para PEG20K, por ser uma
cadeia homognea e simples, os esferulitos aparecem logo abaixo da sua temperatura de
fuso (T
m
), analisado junto com as curvas de DSC. Por outro lado, a cadeia apresenta um
elevado comprimento por causa da sua alta massa molar, sendo assim, o rearranjo
estrutural dificultado. Ao contrrio do anterior, a ligao uretana do PEG modificado
atrapalha os dobramentos das cadeias durante a nucleao, por isso, nesse caso, apareceram
tardiamente os primeiros esferulitos, mas uma vez organizada a cadeia, os esferulitos
crescem com maior facilidade por causa do menor nmero de ncleos formados.
A temperatura de cristalizao (Tc) dos copolmeros 1, 2 e 3 so similares, porm a
distncia entre T
m
e T
c
de aproximadamente 10C, maior do que da PEG20K. Isso
devido sua estrutura de copolmero tribloco, cujas ligaes covalentes unindo os
segmentos diversos prejudicam a movimentao dos trechos para formao de ncleos e
90
lamelas. Todos os homopolmeros apresentam sua prpria T
m
e T
c
, porm juntos, um bloco
eventualmente dificulta o processo de fuso e de cristalizao dos outros. Isto tambm
explica o fato dos trs copolmeros apresentaram tamanho menor de esferulitos em relao
aos do PEG20K. Pode-se afirmar que quando o bloco PEG estiver na temperatura de fuso
isotrpica, so miscveis com os trechos PLA-PCL. Comparando somente o copolmero 1 e
2, percebe-se que h pouca diferena entre as T
nucleao
, porm a temperatura ambiente, os
esferulitos do copolmero 2 mostram tamanho maior. J no copolmero 3, o retardamento
de nucleao e o menor tamanho dos esferulitos indica que a maior quantidade de polister
no copolmero dificulta a cristalizao.
Os copolmeros 4 e 5 no foram analisados porque no havia nucleao mesmo a
temperatura ambiente.
Para esta classe de copolmeros, semicristalinos, o tamanho dos cristalitos tem uma
grande influncia sobre suas propriedades mecnicas. Porm, uma anlise mais profunda
sobre a estrutura dos esferulitos, utilizando uma combinao da MOLP com outras tcnicas
de anlise como a microscopia de fora atmica ser mais precisa para caracterizar a
morfologia presente nestas amostras.
[52]








91
5.7. Microscopia eletrnica de varredura (MEV)

No MEV, os eltrons so acelerados na coluna atravs de duas ou trs lentes
eletromagnticas por tenses de 1 a 30kV. Estas lentes obrigam um feixe de eltrons
bastante colimado (50 a 200 de dimetro) a atingir a superfcie da amostra. Bobinas de
varredura obrigam o feixe a varrer a superfcie da amostra na forma de uma varredura
quadrada similar a uma tela de televiso. A corrente que passa pela bobina de varredura,
sincronizada com as correspondentes bobinas de deflexo de um tubo de raios catdicos,
produz uma imagem similar, mas aumentada. Os eltrons emitidos atingem um coletor e a
corrente resultante amplificada e utilizada para modular o brilho do tubo de raios
catdicos. Os tempos associados com a emisso e coleta dos eltrons, comparados com o
tempo de varredura, so desprezveis, havendo assim uma correspondncia entre o eltron
coletado de um ponto particular da amostra e o brilho de mesmo ponto na tela do tubo. O
limite de resoluo de um MEV cerca de uma ordem de grandeza melhor do que o do
microscpio ptico, e as imagens formadas so tridimensionais, ntidas e facilitando a
interpretao da mesma.
[112]

Neste trabalho de mestrado, as amostras so prensadas primeiramente sob vcuo
para reduzir a espessura at menor que 2 mm, tendo tambm outra finalidade que a
reduo de bolhas de ar dentro delas. Em seguida, elas foram imersas no nitrognio lquido
durante 3 minutos e fraturadas logo depois ao retirar do ambiente de N
2
lquido. Os corpos
de prova passaram por recobrimento de ouro antes de serem submetidos anlise pela
MEV.
As fotos apresentadas abaixo correspondem s imagens de fratura frgil dos
copolmeros 1, 2 e 3.
92
Comparando-se as micrografias obtidas para essas trs amostras, o copolmero 1
apresenta uma fratura no totalmente frgil, mesmo a temperatura baixa, e filamentos
tpicos de fratura de elastmeros podem ser observados em algumas regies da superfcie.
Comparando-se o copolmero 1 e o copolmero 2, o segundo demonstra sua superioridade
em dureza e fragilidade. A superfcie de fratura relativamente lisa na regio central e com
relevos nas bordas sem apresentar os filamentos da amostra anterior. J a fragilidade
propriedade mecnica do copolmero 3 foi verificada pelas micrografias, nas quais
superfcies homogneas e com baixa rugosidade so observadas. Os copolmeros 4 e 5 no
foram analisados por MEV devido s dificuldades na preparao de amostra.
Essas fotos mostram certa coerncia em comparao aos resultados anteriores
como, por exemplo, as cristalinidades calculadas em anlise de difrao de Raio-X. Uma
vez, o copolmero 1 menos cristalino entre os 3 copomeros, nele tambm identificada a
propriedade de fratura de elastmeros, o nico apresentado entre os 3.


Figura 5.36 MEV do copolmero 1, 500X de
aumento.
Figura 5.37 MEV do copolmero 1, 2000X
de aumento.

93



Figura 5.38 MEV do copolmero 2, 350X de
aumento.
Figura 5.39 MEV do copolmero 2, 5000X de
aumento.



Figura 5.40 MEV do copolmero 3, 2000X de
aumento.
Figura 5.41 MEV do copolmero 3, 5000X de
aumento.



94
5.8. Testes de biocompatibilidade

Com o controle cada vez mais rigoroso em relao ao uso de animais de laboratrio,
surge a necessidade de desenvolver e padronizar testes in vitro que possam detectar a
toxidade de materiais para uso em seres humanos, principalmente os biomateriais os quais
no devem causar inflamao tecidual significativa e nem lesar o organismo do paciente.
Vrios mtodos in vitro so utilizados para avaliar a toxicidade de biomateriais,
utilizando culturas celulares. Estes testes de citotoxicidade consistem em colocar o material
direta ou indiretamente em contato com uma cultura de clulas de mamferos, verificando-
se as alteraes celulares por diferentes mecanismos, entre os quais a incorporao de
corantes vitais ou a inibio da formao de colnias celulares.
A determinao da citotoxicidade pode ser atravs de avaliao qualitativa ou
quantitativa. A primeira realizada pelo exame microscpio das clulas para verificao
de mudanas na morfologia geral, vacuolizao, destacamento, lise celular ou de
membranas e o resultado relatado como atxica, leve, moderada ou severa
citotoxicidade.
[113-115]
Na avaliao quantitativa realizada medida de morte celular,
proliferao celular ou formao de colnias celulares.
Neste Trabalho, a avaliao consistiu somente em anlise qualitativa efetuada em
laboratrio do INCOR (Instituto do Corao), orientada pela Dr Helena Oyama. O corpo
de prova foi preparado do copolmero 1 em formato de filme fino e as clulas escolhidas
para a cultura foram clulas renais (COS-7) obtidas pela sua exposio tripsina por 5
minutos, e cultivadas em meio DMEM (Dulbecco's modified Eagle's mdium, Cellgro,
Herndon, VA) suplementado com 10% de soro fetal bovino, juntamente com 100 U/mL
95
de penicilina e 100L/mL de estreptomicina. A cultura foi mantida em estufa umidificada
a 37C, a 5% de CO
2
para simular o ambiente corpreo.
As clulas foram marcadas com o composto fluorescente CM-Dil (chloromethyl-
benzamidodialkylcarbocyanine)e MTT ((3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)_2,5-diphenyl
tetrazolium bromide) que cora mitocndrias e colocadas no polmero. A visualizao foi
realizada aps 24 horas e 96 horas em microscpio tico com 6,3X de aumento.



Figura 5.42 Visualizao de clulas marcadas
por CM-Dil aps 24 horas.
Figura 5.43 Visualizao de clulas marcadas
por MTT aps 96 horas.

As clulas aparecem como pontos vermelhos brilhantes e pretos, respectivamente, na
Figura 5.42 e Figura 5.43. Pode-se verificar aps 4 dias, que h ainda clulas vivas aderidas
na superfcie do copolmero, alm disso, as clulas que ficaram no frasco juntamente com a
amostra tambm permaneceram vivas, tornando perceptvel a viabilidade do material.
A no-citotoxicidade do copolmero confirmada pelos testes valida o uso deste como
biomaterial.
H vrios fatores que podem ter grande influncia na aderncia celular e,
conseqentemente, na futura proliferao celular no material. Um dos fatores importantes
96
a porosidade, sendo mais porosa a amostra, aumenta a rea de contato, as clulas penetram e
se fixam com maior facilidade. Como se pode observar comparando Figura 5.44 com Figura
5.45 e 5.46, num exemplo de amostra de poliuretano poroso, onde houve uma adeso bem
maior das clulas em relao amostra anterior.

Figura 5.44 Superfcie lisa da amostra anterior antes de ser submetida cultura celular.



Figura 5.45 Poliuretano poroso antes de
adeso de clulas.
Figura 5.46 Poliuretano poroso com clulas
aderidas.

Com o objetivo de melhorar o desempenho biolgico das membranas dos
copolmeros, foram feitas vrias tentativas no bem sucedidas para a preparao de
membranas com maior porosidade, em que foram utilizados como porgenos cloreto de
sdio e PEG.
97
6. CONCLUSES

O poli(xido de etileno) modificado pode ser sintetizado a partir do PEG4K
utilizando o HDI como extensor de cadeia. No entanto, quando empregado para
sintetizar o copolmero tribloco, a presena das ligaes uretanas dificulta a
incorporao dos monmeros LL e -CL.
O tempo prolongado da reao induz a melhoria nas propriedades mecnicas do
material como mostrado pelos resultados obtidos pela anise DMTA, a
temperatura ambiente, para os copolmeros 1 e 2. ambas com a mesma composio
na alimentao. O mdulo de armazenamento do copolmero 1 (168 horas de
reao) foi de 16,9 MPa, enquanto o copolemro 2 (336 horas de reao) apresentou
32,6 MPa, um valor bem maior.
O aumento da concentrao de LL nos copolmeros promove a melhoria nas
propriedades mecnicas do produto sintetizado, como verificado tambm pela
anlise DMTA, para as amostras 2 e 3, ambas com os mesmos tempos de ativao e
reao, a amostra 2, tendo 40% de LL na alimentao, o seu mdulo de
armazenamento de 32,6MPa, enquanto amostra 3 com 60% de LL na alimentao,
o seu mdulo de 87,8MPa, um aumento de 170% em relao ao anterior.
As diversas tcnicas de caracterizao utilizadas confirmaram a formao do
copolmero tribloco amfiflico poli(l,l-lactdeo-stat--caprolactona)-bloco-
poli(xido de etileno)-bloco-poli(l,l-lactdeo-stat---caprolactona), a partir dos
monmeros LL, -CL, PEG e o iniciador Sn(Oct)
2
e apresentam aspectos
elastomricos.
A presena de bloco estatstico foi observada pelas anlises dos espectros RMN-
13
C.
98
O meio reacional influiu na reatividade do segmento LL, a qual foi reduzida pela
presena da cadeia de PEG, diferentemente da sua maior reatividade em relao a
CL, citada na literatura
[28]
.
A cristalinidade do copolmero abaixo de 15%, este fato torna os copolmeros
vantajosos na rpida biodegradao.
O copolmero tribloco tem sua morfologia modificada como se observa pela MOLP.
A cadeia extensa e no homognea prejudica a cristalizao do copolmero, o que
pode ser considerado como um indicativo de maior facilidade de biodegradao.
A no citotoxicidade foi verificada pelo cultivo de clulas renais, confirmando a
biocompatibilidade do copolmero tribloco sintetizado.













99
7. BIBLIOGRAFIA

[1]. OKADA, M. Chemical syntheses of biodegradable polymers. Progress in polymer
science, 2002, v. 27, p. 87-133.
[2]. GRIFFIN, G.J.L.; Chemistry and technology of biodegradable polymers. Ed.
Blackie academic & professional.
[3]. DOI, Y.; FUKUDA, K. Biodegradable plastics and polymers. Ed. Elservier. 1994.
[4]. MOORE, G.F.; SAUNDERS, S.M. Advances in biodegradable polymers. Rapra
technology, 1997, v. 9, N2.
[5]. MIDDLETON, J.C.; TIPTON, A.J. Synthetic biodegradable polymer as medical
devices. Medical Plastics and Biomaterials Magazine, 1998, March.
[6]. KUMAR, N.; RAVIKUMAR, M.N.V.; DOMB, A.J. Biodegradable block
copolymers. Advanced Drug Delivery Reviews, 2001, v. 53, p. 23-44.
[7]. SHALABY, S.W. Biodegradable polymers. In: Encyclopedia of Pharmceutical
Technology. SWARBRICK, J.; BOYLAN, J.C. Eds. v. 1.
[8]. EL-TAWEEL, S.H.; STOLL, B.; HHNE, G.W.H.; MANSOUR, A.A.;
SELIGER,H. Stree-Strain behavior of blends of bacterial polyhydroxybutyrate.
J.Appl.Polym.Sci., 2004, v. 94, p. 2528-2537.
[9]. AMASS, W.; AMASS, A.; TIGHE,B. A review of biodegradable polymers: uses,
current developments in the synthesis and characterization of biodegradable polyesters,
blends of biodegradable polymers and recent advances in biodegradation studies.
Polymer international, 1998, v. 47, p. 89-144.
[10]. inventabrasilnet.t5.com.br/plastico.htm
100
[11]. HASIRCI, V.; LEWANDROWSKI, K.; GRESSER, J.D.; WISE, D.J.;
TRANTOLO, D.J. Versatility of biodegradable biopolymers: degradability and in vivo
application. Journal of biotechnology, 2001, v. 86, p.135-150.
[12]. RILEY, T.; STOLNIK, S.; HEALD, C.R.; XIONG, C.D.; GARNETT, M.C.;
ILLUM, L.; DAVIS, S.S. Physicochemical evaluation of nanoparticles assembled from
poly(lactic acid) poly(ethylene glycol) (PLA-PEG) block copolymers as drug delivery
vehicles. Langmuir, 2001, v. 17, p. 3168-3174.
[13]. YASUGI, K.; NAGASAKI, Y.; KATO, M.; KATAOKA, K. Preparation and
characterization of polymer micelles from poly(ethylene glycol)-poly(D,L-lactide)
block copolymers as potential drug carrier. J. Control. Release, 1999, v. 62, p. 89-100.
[14]. KWON, G.S.; OKANO,T. Polymeric mecelles as new drug carriers. Adv.Drug.Rev,
1996, v. 21, p. 107-116.
[15]. ERTL, B.; PLATZER, P.; WIRTH, M.; GABOR, F. Poly(D,L-lactic-co-glycolic
acid) microspheres for sustained delivery and stabilization of camptothecin. J.Control.
Release, 1999, v. 61, p. 305-317.
[16]. GE, H.; HU,Y.; YANG, S.; JIANG, X.; YANG, C. Preparation, characterization,
and drug release behaviors of drug-loaded -caprolacone /L-lactide copolymer
nanoparticles. J.Appl.Polym.Sci., 2000, v. 75, p. 874-882.
[17]. STORCK, M.; OREND, K.H.; SCHMITZRIXEN, T. Absorbable suture in vascular
surgery. Vasc. Surg., 1993, v. 27, p. 413-424.
[18]. ELKE,M.; ROLF-JOACHIM, M.; WOLF-DIETER, D. Studies on the enzymatic
hydrolysis of polyesters I. Low molecular mass model esters and aliphatic polyesters.
Polymer degradation and stability, 2000, v. 80, p. 485.
101
[19]. HUTMACHER, D.W. Scaffolds in tissue engineering bone and cartilage.
Biomaterials, 2000, v. 21, p. 2529.
[20]. HAYASHI, T. Biodegradable polymers for biomedical applications. Progress in
Polymer Science, 1994, v. 19, p. 663-702.
[21]. KULIG, K.M.; VACANTI,J.P. Hepatic tissue engineering. Transpl.Immunol, 2004,
v. 12, p. 303-310.
[22]. ABUKAWA, H.; SHIN, M.; WILLIAMS, W.B.; VACANTI, J.P.; KABAN, L.B.;
TROULIS, M.J.J. A novel fused interconnected scaffold for bone tissue engineering.
Oral Maxillofac.Surg., 2004, v. 62, p. 36.
[23]. KOMIYAMA, T.; NAKAO, Y.; TOYAMA, Y.; VACANTI, C.A.; VACANTI,
M.P.; IGNOTZ, R.A. Novel technique for peripheral nerve reconstruction in the
absence of an artificial conduit. J.Neurosci.Methods., 2004, v. 134, p. 133-140.
[24]. ATALA, A. Whats new in urology. Journal of the American College of Surgeons,
2004, v. 199, p. 446-461.
[25]. OPITZ, F.; SCHENKE-LAYLAND, K.; COHNERT, T.U.; STARCHER, B.;
HALBHUBER, K.J.; MARTIN, D.P.; STOCK,U.A. Tissue engineering of aortic
tissue: dire consequence of suboptimal elastic fiber synthesis in vivo. Cardiovasc.Res.,
2004, v. 63, p. 719.
[26]. ISHAUG, S.L.; CRANE, G.M.; YASZEMSKI, M.J.; MIKOS, A.G. Three-
dimensional culture of rat calvarial osteoblasts in porous biodegradable polymers.
Biomaterials, 1998, v. 19 p. 1405.
[27]. MATSURA, L.T.; WANG, S.H. New synthetic routes to lactic acid polymers.
Dept.de Engenharia de Metalurgica e de materiais POLI USP.
102
[28]. CASTRO, M.L.; WANG, S.H. Statistical copolymers of l,l-lactide and -
caprolactone. Polymer Bulletin, 2003, v. 51, p. 151-158.
[29]. SDERGRD, A.; STOLT, M. Properties of lactic acid based polymers and their
correlation with composition. Progress in polymer science, 2002, v. 27, p. 1123-1163.
[30]. AJIOKA, M.; SUIZU, H.; HIGUCHI, C.; KASHIMA, T. Aliphatic polyesters and
their copolymers synthesized through direct condensation polymerization. Polymer
degradation and stability, 1998. v. 59, p. 137-143.
[31]. REED, A.M.; GILDING, D.K. Biodegradable polymers for use surgery-
poly(glycolic)/poly(lactic acid) homeo and copolymers 2. in-vitro degradation.
Polymer, 1981. v. 22, p.497-504.
[32]. KRICHELDORF, H.R.; SAUNDERS, I. Polylactides-Syntheses, characterization
and medical applications. Macromol.Sym, 1996. v.103, p.149-162.
[33]. KRICHELDORF, H.R. Syntheses and application of polylactides. Chemosphere,
2001. v.43, p. 49-54.
[34]. MIDDLETON, JOHN C.; TIPTON, ARTHUR J. Synthetic biodegradable polymers
as orthopedic devices. Biomaterials 2000. v. 21, p. 2335-2346.
[35]. NARAYANAN, NIJU.; ROYCHOUDHURY, PRADIP K.; SRIVASTAVA,
ARADHANA. L (+) lactic acid fermentation and its product polymerization. Eletronic
Journal of biotechnology. Vol. 7 No. 2, Issue of August 15, 2004.
[36]. LUNT, JAMES. Large-scale production, properties and commercial applications of
polylactic acid polymers. Polymer Degradation and Stability, 1998. v.59, p.145-152.
103
[37]. DRUMOND, W.S. Estudo do poli(l,l-lactdeo)-b-poli(glicol etilnico)-b-poli(l,l-
lactdeo): sntese, caracterizao e preparao de micropartculas. Tese de doutorado.
Departamento de engenharia metalrgica e de materiais POLI-USP.
[38]. MILLER, R.A.; BRADY, J.M.; CUTRIGHT, D.E. Degradation rates of oral
resorbable implants (polylactates andpolyglycolates): rate modification with changes in
PLA/PGA copolymer rations. - J. Biomed. Mater. Res., 1977. v.11, p.711.
[39]. AGRAWAL, C.M.; ATHANASIOU, K.A.; HECKMAN, J.D. Biodegradable
PLA/PGA polymers for tissue engineering in orthopaedica. Material Science Forum
1997, v.250, p.115-128.
[40]. LANDO, GILAD.; COHN, DANIEL. Introducing lactide-based biodegradable
tissue adhesives. Journal of Material Science: materials in medicine 2003, v.14, p. 181-
186.
[41]. BURG, K.J.L.; POTER, S.; KELLAM, J.F. Biomaterials development for bone
tissue engineering. Biomaterials, 2000, v. 21, p. 2347-2359.
[42]. DUDA, A.; PENCZEK, S.; DUBOIS, P.; MECERREYES, D.; JRME, R. Block
and random copolymers of -caprolactone. Polymer Degradation and Stability, 1998,
v.59, p.215-222.
[43]. YOUNES, H.M.; BRAVO-GRIMALDO, ELDA.; AMSDEN, BRIAN.G. Synthesis,
characterization and in vitro degradation of a biodegradable elastomer. Biomaterials
2004, v. 25, p.5261-5269.
[44]. QIAN, HAITAO.; BEI, JIANZHONG.; WANG, SHENGUO. Synthesis,
characterization and degradation of ABA block copolymer of L-lactide and -
caprolactone. Polymer Degradation and Stability, 2000, v. 68, p. 423-429.
104
[45]. LEE, S.H.; KIM, B.S.; KIM, S.H.; CHOI, S.W.; JEONG, S.I.; KWON, I.K.;
KANG, S.W.; NIKOLOVSKI, J.; MOONEY, D.J.; HAN, Y.K.; KIM, Y.H. Elastic
poly(glicolide-co-caprolactone) scaffold for tissue engineering. J. Biomed.Mater Res
2003, v. 66A, p. 29-37.
[46]. COHN, D.; SALOMON, A.HOTOVELY. Designing biodegradable multiblock
PCL/PLA thermoplastic elastomers. Biomaterials 2004, v.7.
[47]. HARRIS, J.MILTON.; Poly(Ethylene Glycol) Chemistry: Biotechnical and
Biomedical Applications. The University of Alabama, Huntsville, USA.
[48]. GLASS,J.E. Hidrophilic polymers, performance with environmental acceptability.
Ed. Advances in chemistry series 248. ACS. 1996.
[49]. STEVENS, M.P. Polymer chemistry, an introduction. 3 Ed. Oxford university
press. 1999.
[50]. LU, S.; ANSETH, K.S. Release behavior of high molecular weight soluts from
poly(ethylene glycol)-basead degradable networks. Macromolecules 2000, v.33, p.
2509-2515.
[51]. CHO, HANJIN.; CHUNG, DONGJUN.; AN, JEONGHO. Poly(D,L-lactide-ran--
caprolactone)-poly(ethylene glycol)-poly(D,L-lactide-ran--caprolactone) as parenteral
drug-delivery systems. Biomaterials 2004, v. 25, p.3733-3742.
[52]. SUN, JINGRU; HONG,ZHONGKUI.; YANG,LIXIN.; TANG, ZHAOHUI.;
CHEN, XUESI.; JING, XIABIN. Study on crystalline morphology of poly(L-lactide)-
poly(ethylene glycol) diblock copolymer. Polymer 2004, v. 45, p. 5969-5977.
[53]. DENG, XIANMO.; ZHU, ZHIXUE.; XIONG, CHENGDONG.; ZHANG,
LIANLAI. Synthesis and Characterizaition of Biodegradable Block Copolymers of -
105
caprolactone and D.L-Lactide initiated by Potassium poly(ethylene glycol)ate. Journal
of Polymer Science: Part A: polymer chemistry, 1997, v.35, p. 703-708 (1997).
[54]. HUANG, M.H.; LI, S.; HUTMACHER, D.W.; SCHANTZ, J.T.; VACANTI, C.A.;
BRAUD, C.; VERT, M. J. Biomed. Mater. Res., 1999, v. 69A. p.342.
[55]. KOWALSKI, A.; DUDA, A.; PENCZEK, S. Kinetics and Mechanism of Cyclic
Esters Polymerization Initiated with Tin(II) Octoate Polymerization of L,L-Dilactede.
Macromolecules 2000, v.33, p. 7395-7370.
[56]. KRICHELDORF, H. R.; KREISER-SAUNDERS, I.; BOETTCHER, C.
Sn(II)octoate-initiated polymerization of L-lactide: a mechanistic study. Polymer,
1995, v.36, p. 1253-1259.
[57]. STOREY, R.F.; TAYLOR, A.E. Effect of stannous octoate on the composition,
molecular weight, and molecular weight distribution of ethyleneglycol-initiated poly(-
caprolactone). J.Macromol Sci Pure Appl Chem. 1998, v.A35, p.723-750.
[58]. DONG, C.M.; QIU, K.Y.; GU, Z.W.; FENG, X.D. Synthesis of star-shaped
poly(D,L-lactic acid-alt-glycolic acid) with multifunctional initiator and SnOct
2

catalyst. Polymer 2001, v. 42, p.6891-6896.
[59]. KRICHELDORF, H.R.; HAACK, J.M. ABA triblock copolymers of L-lactide and
poly(ethylene glycol). Makromol. Chem.1993, v. 194, p. 715-725.
[60]. STOREY, R.F.; SHERMAN, J.W. Kinetics and mechanism of the stannous octoate
catalyzed bulk polymerization of -caprolactone. Macromolecules 2002, v. 35, p. 1504-
1512.
[61]. ODIAN, G. Principles of polymerization, (2
nd
ed). New York: Wiley Interscience,
1981.
106
[62]. FREED, L.E.; VUNJAK-NOVAKOVIC, G.; BIRON, R.J.; EAGLES, D.B.;
LESNOY, D.C.; BARLOW, S.K.; LANGER, R. Biodegradable polymer scaffolds for
tissue engineering. Biotechnology 1994, v. 2, p. 689-693.
[63]. ALI, S.A.M.; ZHONG, S.P.; DOHERTY, P.J.; WILLIAMS, D.F. - Biomaterials,
1993, v. 14, p.648.
[64]. MASAKI, H.; TOSHIKAZU, Y.; MINORU, U.; KOJI, K. Cartilage formation by
cultured chondrocytes in a new scaffolds made of poly(L-lactide--caprolactone)
sponge. J Oral Maxillofac Surg. 2000, v. 58, p.767-775.
[65]. KWEON, H.Y.; YOO, M.K.; PARK, I.K.; KIM, T.H.; LEE, H.C.; LEE, H.S.; OH,
J.S.; AKAIDE, T.; CHO, C.S. A novel degradable polycaprolactone networks for tissue
engineering. Biomaterials, 2003, v. 24, p.801-808.
[66]. ZHANG, LEYANG.; HU, YONG.; JIANG, XIQUN.; YANG, CHANGZHENG.;
LU, WEI.; YANG, YONGHUA. Camptothecin derivative-loaded poly(caprolactone-
co-lactide)-b-PEG-b-poly(caprolactone-co-lactide) nanoparticles and their
biodistribution in mice. Journal of Controlled Release 2004, v. 96, p.135-148.
[67]. WANG, Y.; AMEER, G.A.; SHEPPARD, B.J.; LANGER, R. A tough
biodegradable elastomer. Nature 2002, v.20, p. 602-606.
[68]. PITT, C.G.; JEFFCOAT, A.R.; ZWEIDINGER, R.A.; SCHIDLER, A. Sustained
drug delivery systems I: the permeability of poly(-caprolactone), poly(DL-lactic acid)
and their copolymers. J.Biome.Mater.Res. 1979, v.13, p. 497-507.
[69]. CHEN, D.; CHEN, H.; BEI, J.; WANG, S. Morphology and Biodegradation of
microspheres of polyester-polyether block copolymer based on polycaprolactone
/polylactide /poly(ethylene oxide). Polymer. Int. 2000, v.49, p.269-276.
107
[70]. GUNATILLAKE, PATHIRAJA A.; ADHIKARI, RAJU. Biodegradable synthetic
polymers for tissue engineering. European Cells and Materials 2003, v. 5, p. 1-16.
[71]. JEONG, SUNG IN.; KIM, BYUNG-SOO.; KANG, SUN WOONG.; KWON, JAE
HYUN.; LEE, YOUNG MOO.; KIM, SOO HYUN.; KIM, YOUNG HA. In vivo
biocompatibility and degradation behavior of elastic poly(L-lactide-co--caprolactone)
scaffolds. Biomaterials 2004, v.25, p. 5939-5946.
[72]. KOHN, J.; LANGER, R. Bioresorbable and bioerodible materials. In: An
introduction to materials in medicine. Ed.Academic Press, San Diego. (1997).
[73]. YE, WEI PING.; DU, FU SHENG.; JIN, WEI HUA.; YANG, JI YUAN.; XU,
YONG. In vitro degradation of poly(caprolactone), poly(lactide) and their block
copolymers: influence of composition, temperature and morphology. Reactive &
Functional Polymers 1997, v. 32, p.167-168.
[74]. THOMSON, R.C.; WAKE, M.C.; YASZEMSKI, M.J.; MIKOS, A.G.
Biodegradable polymer scaffolds to regenerate organs. Adv. Polymer Sci 1995, v. 122,
p.245-274.
[75]. BERGSMA, J.E.; DE BRUIJN, W.C.; ROZEMA, F.R.; BOS, R.R.M.; BOERING,
G. Late degradation tissue response to poly(L-lactide) bone plates and screws.
Biomaterials 1995, v.16, p. 25-31.
[76]. TAYLER, M.S.; DANIELS, A.U.; ANDRIANO, K.P.L.; HELLER, J. Six
bioabsorbable polymers: in-vitro acute toxicity of accumulated degradation products.
J.Appl. Biomaterial 1994, v. 5, p.151-157.
108
[77]. SACHLOS,E.; CZERNUSZKA, J.T. Making tissue engineering scaffolds work.
Review on the application of solid freeform fabrication technology to the production of
tissue engineering scaffolds. European cells and materials 2003, v.5, p. 29-40.
[78]. SAWHNEY, A.S.; DRUMHELLER, P.D. Polymer synthesis. In: Frontiers in tissue
engineering. Ed. Pergamon, New York. P. 83-106.
[79]. WONG, W.H.; MOONEY, D.J. Synthesis and properties of biodegradable
polymers used as synthetic matrices for tissue engineering. In: Synthetic biodegradable
polymer scaffolds.; Ed. Burkhuser, Boston.
[80]. SINHA, V.R.; BANSAL, K.; KAUSHIK, R.; KUMRIA, R.; TRECHAN, A. Poly--
caprolactone microspheres and nanospheres: an overview. International Journal of
Pharmaceutics 2004, v. 278, p.1-23.
[81]. NG, S.Y.; VANDAMME, T.; TAYLER, M.S.; HELLER, J. Synthesis and erosion
studies of self-catalysed poly(orthoester)s. Macromolecules 1997, v.30, p.770-772.
[82]. PRANAMUDA, H.; TSUCHII, A.; TOKIWA, Y. Poly(L-lactide) Degrading
enzyme produced by amycolatopsissp. Macromol. Biosci. 2001, v.1, p. 25-29.
[83]. RASHKOV, I.; MANOLOVA, N.; LI, S.M.; ESPARTERO, J.L.; VERT, M.
Synthesis, characterization, and Hydrolytic Degradation of PLA/PEO/PLA triblock
copolymers with short poly(L-lactic acid) chains. Macromolecules 1996, v. 29, p.50-56.
[84]. HUH, K.M.; Y.H.B. Synthesis and characterization of poly (ethylene glycol)/poly
(L-lactic acid) alternating multiblock copolymers. Polymer 1999, v. 40, p.6147-6155.
[85]. COHN, D.; STERN, T.; GONZALEZ, M.F.; EPSTEIN, J. Biodegradable
poly(ethylene oxide)/poly((-caprolactone) multiblock copolymers. J.Biomed Mater
Res. 2002, v. 59, p.573-581.
109
[86]. GE, H.; HU, Y.; JIANG, X.; CHENG, D.; YUAN, Y.; BI, H.; YANG, C.
Preparation, characterization, and drug relase behaviors of drug nimodipine-loaded
poly(-caprolactone)-poly(ethylene oxide)-poly((-caprolactone) amphiphilic triblock
copolymer micelles. J. Pharm. Sci. 2002, v. 91, p.1463-1473.
[87]. KASPERCZYK, J.; BERO, M. Microstructure determination of poly(L,L-lactide)-
co-(-caprolactone) with
13
C nuclear magnetic resonance spectroscopy.
Makromol.chem. 1991, v.192, p.1777-1787.
[88]. TSUJI, H.; FUKUI, I.; DAIMON, H.; FUJIE, K. Poly(L-lactide) XI lactide
formation by thermal depolymerisation of poly(L-lactide) in a closed system. Polymer
degradation and stability. 2003, v. 81, p. 501-509.
[89]. MATSUI, T.; NAKAMURA, T.; TSUDA, T. Bioabsorption of poly caprolactone
and copolymer of -caprolactone and L.-lactide. J. Jpn Soc Biomater 1993, v.11, p.
330-339.
[90]. TEMENOFF, J.S.; MIKOS, A.G. Injectable biodegradable materials for ortopaedic
tissue engineering. Biomaterials 2000, v.21, p. 2405-2412.
[91]. KARJOMAA, S.; SUORTTI, T.; LEMPIINEN, R.; SELIN, J.F.; ITVAARA, M.
Microbial degradation of poly (L-lactic acid) oligomers. Polymer degradation and
stability 1998, v.59, p.333 336.
[92]. ZHAO, Y.; HU, T.; LV, Z.; WANG, S.; WU, C. Laser light-scattering studies of
poly(caprolactone-b-ethylene oxide-b-caprolactone) nanoparticles and their enzymatic
biodegradation. Journal of polymer science 1999, v.37B, p.3288-3293.
110
[93]. ROSA, D.S.; FRANCO, B.L.M.; CALIL, M.T. Biodegradabilidade e propriedades
mecnicas de novas misturas polimricas. Polmero: cincia e tecnologia. 2001, v.11,
p.82-88.
[94]. METTERS, A.T.; ANSETH, K.S.; BOWMAN, C.N. Fundamental studies of a
novel, biodegradable PEG-b-PLA hydrogel. Polymer 2000, v. 41, p.3993-4004.
[95]. BURKERSRODA, F.V.; GREF, R.; GPFERICH, A. Erosion of biodegradable
block copolymers made of poly(d,l-lactic acid) and poly(ethylene glycol). Biomaterials
1997, v. 18, p. 1599-1607.
[96]. SILVERSTEIN, R.M.; WEBSTER, F.X.; KIEMLE, D.J. Spectrometric
identification of organic compounds. 7 Ed. John Wiley & Sons Inc. 2005.
[97]. HARWOOD, L.M.; CLARIDGE, T.P.W. Introduction to organic spectroscopy. Ed.
Oxford chemistry primers. 1997.
[98]. FEINSTEIN, K. Guide to spectroscopic identification of organic compounds. Ed.
CRC Press. 1995.
[99]. DYER, J.R. Application of absorption spectroscopy of organic compounds. Ed.
Foundations of modern organic chemistry series. 1965.
[100]. IBBETT, R.N. NMR spectroscopy of polymers. Ed. Blackie academic &
professional. 1993.
[101]. CAMPBELL, D.; .PATHRICK, R.A.; WHITE, J.R. Polymer characterization
physical techniques. 2 Ed. Stainley thornes, 2000.
[102]. RIESSEN, R.; SCHAWER, J. The glass transition temperature measured by
different TA techniques. Cataloque Metller Toledo thermal analysis, 2003.
[103]. JAMSHIDI, K.; HYON, S.H.; IKADA, Y. Thermal characterization of polylactides.
Polymer 1998, v.29, p.2229-2234.
111
[104]. UserCom-information for users of mettler Toledo thermal analysis systems.
[105]. SIVALINGAM, G.; MADRAS, G. Thermal degradation of binary physical mistures
and copolymers of poly(-caprolactone), poly(D,L-lactide), poly(glycolide). Polymer
degradation and stability 2004, v.84, p.393-398.
[106]. SIVALINGAM, G.; KARTHIK, R.; MADRAS, G. Blends of poly(-caprolactone)
and poly(vinyl acetate): mechanical properties and thermal degradation. Polymer
degradation and stability 2004, v.84, p.345-351.
[107]. NATTA, G. Une Nouvelle classe de polymeres d'-olefines ayant une rgularit de
structure exceptionnelle. Journal of Polymer Science 1995, v.16, p. 143-154.
[108]. RULAND, W. Crystallinity and disorder parameters in nylon 6 and nylon 7.
Polymer 1964, v.5, p.89-102.
[109]. WEIDINGER, A.; HERMANS, P.H. On the determination of the crystalline
fraction of isotactic polypropylene from X-ray diffraction. Makromol.Chem 1961, v.50,
p.98-115.
[110]. HERMANS, P.H.; WEIDINGER, A. Estimation of crystallinity of some polymers
from X-ray intensity measurements. J. polym.sci 1949, v.4, p.709-723.
[111]. HERMANS, P.H.; WEIDINGER, A. On the determination of the crystalline
fraction of isotactic polypropylene from X-ray diffraction. Makromol. Chem. 1961,
p.44-46, 24-36.
[112]. KOENIG, J.L. Microspectroscopic imaging of polymers. Ed. ACS professional
Reference Book. 1998.
112
[113]. LAURENCIN, C.T.; PIERRE-JACQUES, H.M.; LANGER, R. Toxicology and
biocompatibility considerations in the evaluation of polymeric materials for biomedical
applications. Clin. Lab. Med. 1990, v.10, p.549-570.
[114]. VANSLEDREGT, A.; VANBLITTERSWIJK, C.A.; HESSELING, S.C.; GROTE,
J.J.; DEGROOT, K. The effect of the molecular weight of polylactic acid on in-vivo
biocompatibility. Adv. Biomaterials, 1990, v. 9, p.207-212.
[115]. VANSLIEDREGT, A.; RADDER, A.M.; DEGROOT, K.; VANBLITTERSWIJK,
C.A. In-vitro biocompatibility testing of polylactides Part I: proliferation of different
cell types. J. Mater. Sci: Mater Med 1992, v.3, p.365-370.