268

CAPITULO VII
METABOLISMO MICROBIANO DE LIPIDOS
Los lpidos biolgicos constituyen un grupo qumicamente diversos de compuestos,
cuya caracterstica comn y definitoria es su insolubilidad en agua. La mayor parte de
estos lpidos de los microorganismos deben formar parte de estructuras moleculares
ms complejas de la pared celular o de la membrana protoplasmtica.
En E.coli los lpidos totales contienen del 10 al 15% del carbono total de la clula y una
proporcin semejante del peso seco. Se encuentran repartidos entre la pared celular y
la membrana protoplasmtica. Algunas bacterias acumulan poli--hidroxibutirato, que
es una eficaz reserva energtica. En las micobacterias se encuentran lpidos
estructurales especiales que pueden llegar a constituir el 10% del peso seco.
Excluyendo el lipopolisacarido, los lpidos del E. coli son fosfolpidos. Los cidos grasos
ms frecuentes que se encuentran en estas molculas son el palmtico (43%), el
palmitoleico (33%) y el cis-vaccnico (25%). (Figura N
0
7.1).
La estructura del lipopolisacarido (LPS) vara de una bacteria a otra, e incluso entre
diferentes cepas, pero se presenta en todas las bacterias gram negativas.
Figura N
0
7.1. Fosfolipdos de E. coli
Fuente: (M.T. Madigan, J.M. Martinko y J. Parker., 2002).
269
La estructura del lipopolisacarido (LPS) vara de una bacteria a otra, e incluso entre
diferentes cepas, pero se presenta en todas las bacterias gram negativas.
El lpido A es un disacrido de glucosamina fosforilado y esterificado con distintos
cidos grasos (R
12
: dodecanoico, R
14
: tetradecanoico, R
16
: hexadecanoico y OH-R
14
: 3-
hidroxitetradecanoico). El ncleo es un oligosacrido que comnmente incluye L-
glicero-d-manoheptosa y cido ceto-desoxi-octanoico (3-desoxi-D-manooctulosmico).
El lpido A y el ncleo correspondientes al LSP de las distintas enterobactericeas
parecen ser semejantes. La cadena O, que es especfica de cada cepa, tiene mayor
longitud que el ncleo y est formada por la repeticin de varias subunidades de tri-,
tetra- o pentasacridos, constituidos por azucares poco comunes. Figura N
0
7.2.
Figura N
0
7.2. Subunidad del Lipopolisacarido (LPS) de Salmonella.
Fuente: (Pares I.F. y A. Jurez, 1997.
270
Las bacterias gran positivas no tienen LPS, pero pueden presentar cidos teicoicos
asociados a la murena. Se trata de polmeros del glicerol o del ribitol unidos por
enlaces fosfodister y con uno o ms aminocidos como sustituyentes.
7.1. OXIDACIN DE LOS CIDOS GRASOS
Los microorganismos para realizar sus funciones vitales necesitan de energa. La
obtencin de esta energa se realiza, mediante el catabolismo de diversos
nutrientes, como carbohidratos, lpidos, entre otros.
Un organismo escoge catabolizar nutrientes dependiendo de la disponibilidad de los
mismos en el medio. Los diferentes nutrientes de los cuales se pueda obtener energa,
se encuentran en diferentes proporciones. El orden en el cual se asimilan nutrientes es
en primer lugar carbohidratos, luego lpidos y por ltimo protenas.
7.1.1. Hidrlisis del Enlace Ester.
Numerosos microorganismos del suelo y de alimentos producen lipasas, capaces de
hidrolizar los glicridos dando glicerol y cidos grasos, as como fosfolipasas.
El catabolismo posterior de los cidos grasos se lleva a cabo por una serie de b-
oxidaciones, pero en el suelo esta degradacin es lenta y limitada. Muchas levaduras
de la filosfera degradan las ceras de la epidermis vegetal, tambin mohos tales como
Penicillium y Mucorales, y algunas bacterias.
Las grasas, especficamente los triglicridos, son steres que se forman en la reaccin
de glicerol y cidos grasos. Como de este modo los microorganismos no pueden
utilizarlas para nutrirse, excretan una enzima llamada lipasa. Esta enzima no es muy
selectiva e hidroliza el enlace ster. Esta reaccin libera glicerol y cidos grasos sin
diferenciar el largo de la cadena.
La Figura N
0
7.3 muestra un esquema de la hidrlisis de un triacilglicrido y la Figura
N
0
7.4 las fases de la oxidacin de triacilgliceroles.
271
Figura N
0
7.3. Hidrlisis de Triacilgliceroles.
Fuente: (T. Audesirk y G.Audesirk, 2003).
Figura N
0
7.4. Fases de la oxidacin de triacilgliceroles.
Fuente: (C.K. Mathews, K.E. Van Holde y K.B. Ahern, 2002).
272
Por otra parte los fosfolpidos son hidrolizados por otras enzimas especficas llamadas
fosfolipasas.
Como existen varias, se les aade una letra como designacin del enlace ster que
desdoblan.
Las fosfolipasas A y B liberan cidos grasos y se parecen por tanto a las lipasas.
Las fosfolipasas C y D rompen enlaces ster del fosfato y en consecuencia son
un tipo de enzima muy diferente.
Los cidos grasos y glicerol son atacados tanto anaerbica como aerbicamente por
diferentes microorganismos.
Una vez roto el enlace ster, los cidos grasos libres pueden ser degradados para
obtener carbono, energa o ambas cosas, o bien ser reutilizados en la biosntesis
de diversos lpidos, incluso de la clase a la que pertenecan antes de su liberacin.
7.1.2. Metabolizacin del glicerol
El glicerol como componente de las grasas es metabolizado por los microorganismos
por la va conectada con el metabolismo de los carbohidratos: (Figura N
0
7.5).
273
Figura N
0
7.5. Conversin de la hidrlisis del Glicerol a D-Gliceraldehdo 3-
fosfato.
Fuente: (Ganong, W. F.,1996).
El fosfato de dihidroxiacetona formado se metaboliza por los mecanismos centrales.
274
7.1.3. Activacin de los cidos Grasos
Sea para su reutilizacin o para su degradacin posterior, los cidos libres se
convierten primero en tiosteres de la coenzima A (CoA SH), los cuales son las formas
activas de alta energa del grupo acilo.
El proceso de activacin ms comn implica la participacin de una tiocinasa de los
acidos grasos dependiente del ATP. Se sabe que existen por lo menos tres tiocinasas
distintas en la naturaleza, y que tienen diferente especificidad por el sustrato.
Una es muy especfica para el acetato (C2)
Otra lo es para los cidos con cadena de longitud intermedia (C4 a C12)
La tercera para los cidos de cadena larga (C14 a C22).
Las dos ltimas actan sobre cidos saturados e insaturados. Independientemente de
su tipo, se sabe que las tiocinasas son enzimas en forma de partculas que se localizan
en las membranas celulares. En los eucariotes se encuentran en la membrana
mitocondrial externa.
El mecanismo de la reaccin comprende un intermediario Acil-adelinato formado por la
reaccin de un cido graso con ATP.
El ataque nucleoflico por el tomo de azufre de la coenzima A sobre el carbono del
grupo acilo lleva la liberacin de AMP y del tioster cido graso de CoA.
El Acil CoA es un metabolito que surge de la unin de un cido graso con la CoA. Esa
unin se produce entre el grupo carboxilo del cido (-COOH) y el grupo sulfhidrilo de la
coenzima (-SH) liberando agua.
La hidrlisis de Pirofosfato proporciona la energa suficiente para la activacin de
cidos grasos. Figura N
0
7.6.
275
Figura N
0
7.6. Proceso de Activacin del cido graso formando Tioster de la
Coenzima A.
Fuente: (Murray, R. K. et. al. 2005).
276
Figura N
0
7.7. Energa libre para la Activacin de cidos grasos.
Fuente: (Smith, C.A. y Wood, E.J.1998)
La oxidacin de los cidos grasos de cadena larga a acetil-CoA es la va central de
aporte de energa en los animales, muchos protistas y algunas bacterias. Los
electrones removidos durante la oxidacin de los cidos grasos es donada a la cadena
respiratoria en la mitocondria para generar ATP y el acetil-CoA producido a partir de los
cidos grasos es completamente oxidado a CO
2
va el ciclo del cido ctrico. Figura N
0
7.7.
Figura N
0
7.7. Formacin de Acetil CoA y su estructura qumica.
277
Fuente: (J. Koolman y KH Rhm, 2004).
Los cidos grasos se degradan a grupos acetilo (C2) los cuales alimentan el ciclo de
Krebs adicinandose a intermediarios C4 para producir C6. Durante el ciclo, el C2
adicionado se pierde como CO
2
y se produce C4. Sobre todo, no ocurre ningn
incremento en el nmero de molculas intermediarias del ciclo. Por lo tanto si los
cidos grasos son la nica fuente de carbono los intermediarios del ciclo de Krebs no
pueden ser removidos sin que el ciclo se interrumpa. Figura N
0
7.8.
Figura N
0
7.8. Etapas del Catabolismo de cidos Grasos.
Fuente: (C.K. Mathews, K.E. Van Holde y K.B. Ahern, 2002).
278
Los tomos de carbono del cido graso se numeran a partir del carboxilo.
Los tomos de carbono 2 y 3 se indican como , en el y el carbono del metilo del
extremo distal de la cadena se llama carbono .
Los cidos grasos pueden formarse a partir del ataque primario de hidrocarburos por el
sistema de la -hidroxilasa y luego la carboxilacin oxidativa en dos etapas, pasando
por el aldehdo. Ulteriormente, el cido graso puede ser oxidado en el carbono , en el
o en el .
7.2. ALFA OXIDACIN
En la -oxidacin, que es especialmente importante para el metabolismo de cidos
grasos ramificados, se hidroxila el carbono . Tiene lugar en el retculo
endoplasmtico y en la mitocondria, donde interviene la oxidasa de funcin mixta, y en
el peroxisoma, donde interviene una hidroxilasa.
La - oxidacin de los cidos grasos de elevado peso molecular se lleva a cabo
mediante un sistema enzimtico que cataliza la hidroxilacin en el carbono 2. El
resultado de esta reaccin oxidativa es de ordinario la descarboxilacin con formacin
de un cido graso de un carbono menos. La primera etapa de la formacin del -
oxidacin es una reaccin de una oxidasa de funcin mixta y la segunda es una
descarboxilacin oxidativa. Sin embargo, el mecanismo de la -oxidacin de los cidos
grasos es todava poco conocido.
Alfa oxidacin:
1. Tiene lugar en la mitocondria y en retculo endoplasmtico
2. En el caso de los cidos grasos ramificados tiene lugar en los peroxisomas.
El cido fitnico es el producto de la ruptura de la cadena lateral fitil de la clorofila cuyo
grupo metilo localizado en el carbono 3 impide su catabolismo por beta oxidacin En
esta va catablica la oxidacin incial se produce en el carbono alfa. Figura N
0
7.9.
La oxidacin de cadenas ramificadas como esta son metabolizadas por la oxidacin,
en donde el C del cido graso es hidroxilado y el producto es oxidativamente
279
descarboxilado para dar un nuevo cido graso con un C no sustituido; el resto de la
molcula sigue degradndose va oxidacin. Figura N
0
7.10.
La acumulacin de este metabolito, como una deficiencia gentica se conoce como la
enfermedad de Refsum o sndrome del almacenamiento de cido fitnico (dificultades
neurolgicas: temblores, caminar tembloroso, y pobre visin nocturna), se debe a la
poca actividad de hidroxilacin, lo cual puede ser atenuado con una dieta baja de
alimentos que contengan cido fitnico.
Figura N
0
7.9. Lpidos de Arqueobacterias
C
(a) estructura general de los diteres (izquierda) y tetrateres (derecha); (b) cadenas tpicas de
hidrocarburo: gitano (en diteres), y bifitano y sus derivados pentacclicos (en tetrateres); (c)
supuesto ordenamiento de tetrateres para formar una membrana monocapa. X puede ser H o
cualquiera de una variedad de derivados sacridos o fosfato.
Fuente: (Pares I.F. y A. Jurez, 1997).
280
Figura N
0
7.10. Alfa-Oxidacin de cidos grasos.
Fuente: (Nelson D.L., M.M. Cox y C.M. Cuchillo 2005).
7.3. BETA OXIDACIN
La - oxidacin es un sistema de oxidacin de los cidos grasos muy bien conocido y
probablemente el que tiene lugar con mayor frecuencia. De la -oxidacin resulta la
formacin continuada de unidades de cido actico (acetil CoA), a medida que la
longitud del cido graso por formacin del correspondiente acil-CoA. Es la separacin
281
secuencial de los fragmentos de dos carbonos desde el extremo carboxilo. Durante
este proceso se rompe el enlace alfa-beta y se forma acetil-CoA. Y se le conoce como
beta-oxidacin porque se oxida el carbono beta de los acidos grasos, que es el que se
encuentra separado dos carbonos del grupo carboxilo.
7.3.1. Beta Oxidacin de Acidos Grasos Saturados
ETAPAS
A. Activacin de Acidos Grasos Saturados
Esta activacin ocurre en dos reacciones.
282
Estas dos reacciones se hacen irreversible porque la pirofofatasa hidroliza el
pirofosfato (PP
1
) a fosfato inorgnico. Se requieren iones magnesio.
La formacin del tioster del cido graso (acil-CoA) tambin puede tener lugar
directamente, por transferencia del coenzima A, a partir de otro acil-CoA, que puede
ser el producto final de la oxidacin del cido graso inicial:
B. Secuencia Repetitiva de cuatro fases:
Durante este proceso, la cadena de cidos grasos experimenta una degradacin cclica
en 4 fases:
Deshidrogenacin,
Hidratacin,
Deshidrogenacin
y Fraccinamiento.
Estas 4 fases de la oxidacin se repiten hasta que el cido graso est completamente
degradado a acetil-CoA.
En la primera el acil-CoA es deshidrogenado entre los carbonos y por la acil-CoA
deshidrogenasa, formndose el acil-CoA insaturado entre los carbonos 2 y 3.
283
Se conocen por lo menos dos formas de este enzima, ambas metaloprotenas. El
grupo prosttico es el FAD. Hay una E (Cu)-FAD que ataca los cidos grasos de
cadena corta y otra E (Fe)-FAD para los de cadena ms larga.
La siguiente reaccin es la hidratacin del doble enlace entre los carbonos 2 y 3. Se
lleva a cabo por accin de la crotonasa:
No parece intervenir ningn coenzima y slo produce los L-ismeros a partir del enlace
trans-
2
. Este enzima tambin acta sobre el doble enlace cis-
2,
pero entonces slo
produce D-ismero. La crotonasa (acil-CoA hidratasa) proporciona asimismo un medio
reversible de conversin de los cidos --insaturados (
3
) a - insaturados (
2
), a
travs del -hidrxido comn:
La tercera reaccin es la oxidacin del -hidroxi-acil-CoA por la 3-hidroxi-acil CoA
deshidrogenasa que utiliza NAD
+
:
Slo se oxida el L-ismero.
La cuarta y ltima reaccin de la secuencia es la reaccin de la -tiolasa, El -cetoacil-
CoA es escindido entre los carbonos 2 y 3 con la incorporacin concomitante de un mol
de CoA. El CoA original permanece en la molcula C
2
:
283
Se conocen por lo menos dos formas de este enzima, ambas metaloprotenas. El
grupo prosttico es el FAD. Hay una E (Cu)-FAD que ataca los cidos grasos de
cadena corta y otra E (Fe)-FAD para los de cadena ms larga.
La siguiente reaccin es la hidratacin del doble enlace entre los carbonos 2 y 3. Se
lleva a cabo por accin de la crotonasa:
No parece intervenir ningn coenzima y slo produce los L-ismeros a partir del enlace
trans-
2
. Este enzima tambin acta sobre el doble enlace cis-
2,
pero entonces slo
produce D-ismero. La crotonasa (acil-CoA hidratasa) proporciona asimismo un medio
reversible de conversin de los cidos --insaturados (
3
) a - insaturados (
2
), a
travs del -hidrxido comn:
La tercera reaccin es la oxidacin del -hidroxi-acil-CoA por la 3-hidroxi-acil CoA
deshidrogenasa que utiliza NAD
+
:
Slo se oxida el L-ismero.
La cuarta y ltima reaccin de la secuencia es la reaccin de la -tiolasa, El -cetoacil-
CoA es escindido entre los carbonos 2 y 3 con la incorporacin concomitante de un mol
de CoA. El CoA original permanece en la molcula C
2
:
283
Se conocen por lo menos dos formas de este enzima, ambas metaloprotenas. El
grupo prosttico es el FAD. Hay una E (Cu)-FAD que ataca los cidos grasos de
cadena corta y otra E (Fe)-FAD para los de cadena ms larga.
La siguiente reaccin es la hidratacin del doble enlace entre los carbonos 2 y 3. Se
lleva a cabo por accin de la crotonasa:
No parece intervenir ningn coenzima y slo produce los L-ismeros a partir del enlace
trans-
2
. Este enzima tambin acta sobre el doble enlace cis-
2,
pero entonces slo
produce D-ismero. La crotonasa (acil-CoA hidratasa) proporciona asimismo un medio
reversible de conversin de los cidos --insaturados (
3
) a - insaturados (
2
), a
travs del -hidrxido comn:
La tercera reaccin es la oxidacin del -hidroxi-acil-CoA por la 3-hidroxi-acil CoA
deshidrogenasa que utiliza NAD
+
:
Slo se oxida el L-ismero.
La cuarta y ltima reaccin de la secuencia es la reaccin de la -tiolasa, El -cetoacil-
CoA es escindido entre los carbonos 2 y 3 con la incorporacin concomitante de un mol
de CoA. El CoA original permanece en la molcula C
2
:
284
La reaccin de la tiolasa forma un nuevo tioster con una cadena de dos tomos de
carbono menos que la original y una molecula de acetil CoA.
El acil-CoA acortado puede seguir oxidndose partiendo de la reaccin de la acil-CoA
deshidrogenasa. Figura N
0
7.11.
Figura N
0
7.11. Esquema completo de la Beta-Oxidacin de cidos grasos.
Fuente: (J. Koolman y KH Rhm, 2004).
285
7.3.2. Beta Oxidacin de Acidos Grasos Insaturados
1. Monoinsaturados. Requiere un enzima especial: 32- Enoil- CoA isomerasa
que transforma un enlace cis 3 en un trans 2. Figura N
0
7.12.
Figura N
0
7.12. Oxidacin de un cido graso monoinsaturado
Fuente: (Voet, D. y J. G. Voet. 2006).
2. Polinsaturados:
La enzima 32- Enoil- CoA isomerasa transforma un enlace cis 3 en un trans 2.
Requiere adems otra enzima: 2-4-dienoil CoA reductasa (peroxisomal) que permite la
hidrogenacin de los carbonos 2 y 5, convierte dos enlaces conjugados (trans 2 cis4)
en un doble enlace trans 3 . Figura N
0
7.13.
286
Figura N
0
7.13. Oxidacin del cido graso poliinsaturado Linoleil CoA.
287
Fuente: (Nelson D.L., M.M. Cox y C.M. Cuchillo 2005).
7.4. FORMACIN DE PROPIONIL COA
Los cidos grasos que contienen un nmero par de tomos de carbono y que tienen la
composicin general C
2n-1
H
4n-2
COOG, pueden producir n molculas de acetil-CoA. Los
de nmero impar de frmula C
2n-1
H
4n+1
COOG, proporcionarn una molcula propionil-
CoA y n 1 de acetil-CoA.
288
El propionil-CoA puede metabolizarse de dos maneras para su ulterior oxidacin. Por
una carboxilacin inicial a metil malonil-CoA que luego se convertir en succinil-CoA, el
cual puede incorporarse al CAT:
Este proceso en la ltima vuelta produce propionil-CoA el cual es convertido a succinil-
CoA para entrar al ciclo del cido ctrico Figura N
0
7.14. El succinil-CoA tambin es
producido por la oxidacin de aminocidos como la isoleucina, valina y metionina.
Figura N
0
7.15.
Figura N
0
7.14. Etapa final de la oxidacin de los cidos grasos de nmero impar
de tomos de carbono que muestra la transformacin del propionil-coa en
succinil-coA.
Fuente: (Nelson D.L., M.M. Cox y C.M. Cuchillo 2005).
289
Figura N
0
7.15. Productos finales del Metabolismo de Acidos grasos Impares
Fuente: (Moat, A.G.; Foster, J.W. y M.P. Spector. 2002)
O bien, tal como sucede en E. coli, el propionato se condensa con el glioxilato para dar
-hidroxiglutarato, que luego se desdobla en lactato y acetato. Figura N
0
7.16.
El succinato puede ser oxidado por el CAT.
Figura N
0
7.16. Formacin de lactato y acetato a partir de propionato por E. coli
Fuente: (Frenchel, T.G.M. y T.H. Blackburn. 2005)
289
Figura N
0
7.15. Productos finales del Metabolismo de Acidos grasos Impares
Fuente: (Moat, A.G.; Foster, J.W. y M.P. Spector. 2002)
O bien, tal como sucede en E. coli, el propionato se condensa con el glioxilato para dar
-hidroxiglutarato, que luego se desdobla en lactato y acetato. Figura N
0
7.16.
El succinato puede ser oxidado por el CAT.
Figura N
0
7.16. Formacin de lactato y acetato a partir de propionato por E. coli
Fuente: (Frenchel, T.G.M. y T.H. Blackburn. 2005)
289
Figura N
0
7.15. Productos finales del Metabolismo de Acidos grasos Impares
Fuente: (Moat, A.G.; Foster, J.W. y M.P. Spector. 2002)
O bien, tal como sucede en E. coli, el propionato se condensa con el glioxilato para dar
-hidroxiglutarato, que luego se desdobla en lactato y acetato. Figura N
0
7.16.
El succinato puede ser oxidado por el CAT.
Figura N
0
7.16. Formacin de lactato y acetato a partir de propionato por E. coli
Fuente: (Frenchel, T.G.M. y T.H. Blackburn. 2005)
290
El destino ulterior del lactato es desconocido en este caso.
Algunas bacterias acumulan acetil fosfato, aparentemente como reserva energtica. El
aceti fosfato se convierte fcilmente en acetil-CoA mediante la fosfotransacetilasa:
Por otra parte, como ya ha sido comentado anteriormente, puede producir ATP y
acetato.
7.5. OXIDACIN DE GAMMA HIDROXIACIDOS
Aparte la y oxidacin, los cidos grasos tambin pueden oxidarse a -
hidroxicidos que ulteriormente pueden pasar a cidos dicarboxlicos:
Otra ruta minoritaria para la oxidacin de cidos grasos es la -oxidacin, que tiene
lugar en el retculo endoplasmtico de muchos tejidos; se produce una hidroxilacin
sobre el carbono metlico (CH
3
) en el extremo de la molcula opuesto al
grupo carboxilo (COOH). Utiliza el tipo de reaccin de la oxidasa de funcin mixta y
requiere citocromo P450, O
2
y NADPH. Luego, el cido graso hidroxilado se oxida en
el citosol a un cido dicarboxlico (un grupo carboxilo en cada extremo de la molcula);
este proceso se da principalmente en cidos grasos de mediana longitud.
La oxidacin requiere la participacin de las cadenas respiratorias, posiblemente con
citocromo P
450
o tiorredoxina y NADPH-citrocromo P
450
reductasa.
En las especies de Pseudomonas los cidos grasos producidos por hidrocarburos se
oxidan simultneamente por y oxidacin. Figura N
0
7.17.
290
El destino ulterior del lactato es desconocido en este caso.
Algunas bacterias acumulan acetil fosfato, aparentemente como reserva energtica. El
aceti fosfato se convierte fcilmente en acetil-CoA mediante la fosfotransacetilasa:
Por otra parte, como ya ha sido comentado anteriormente, puede producir ATP y
acetato.
7.5. OXIDACIN DE GAMMA HIDROXIACIDOS
Aparte la y oxidacin, los cidos grasos tambin pueden oxidarse a -
hidroxicidos que ulteriormente pueden pasar a cidos dicarboxlicos:
Otra ruta minoritaria para la oxidacin de cidos grasos es la -oxidacin, que tiene
lugar en el retculo endoplasmtico de muchos tejidos; se produce una hidroxilacin
sobre el carbono metlico (CH
3
) en el extremo de la molcula opuesto al
grupo carboxilo (COOH). Utiliza el tipo de reaccin de la oxidasa de funcin mixta y
requiere citocromo P450, O
2
y NADPH. Luego, el cido graso hidroxilado se oxida en
el citosol a un cido dicarboxlico (un grupo carboxilo en cada extremo de la molcula);
este proceso se da principalmente en cidos grasos de mediana longitud.
La oxidacin requiere la participacin de las cadenas respiratorias, posiblemente con
citocromo P
450
o tiorredoxina y NADPH-citrocromo P
450
reductasa.
En las especies de Pseudomonas los cidos grasos producidos por hidrocarburos se
oxidan simultneamente por y oxidacin. Figura N
0
7.17.
290
El destino ulterior del lactato es desconocido en este caso.
Algunas bacterias acumulan acetil fosfato, aparentemente como reserva energtica. El
aceti fosfato se convierte fcilmente en acetil-CoA mediante la fosfotransacetilasa:
Por otra parte, como ya ha sido comentado anteriormente, puede producir ATP y
acetato.
7.5. OXIDACIN DE GAMMA HIDROXIACIDOS
Aparte la y oxidacin, los cidos grasos tambin pueden oxidarse a -
hidroxicidos que ulteriormente pueden pasar a cidos dicarboxlicos:
Otra ruta minoritaria para la oxidacin de cidos grasos es la -oxidacin, que tiene
lugar en el retculo endoplasmtico de muchos tejidos; se produce una hidroxilacin
sobre el carbono metlico (CH
3
) en el extremo de la molcula opuesto al
grupo carboxilo (COOH). Utiliza el tipo de reaccin de la oxidasa de funcin mixta y
requiere citocromo P450, O
2
y NADPH. Luego, el cido graso hidroxilado se oxida en
el citosol a un cido dicarboxlico (un grupo carboxilo en cada extremo de la molcula);
este proceso se da principalmente en cidos grasos de mediana longitud.
La oxidacin requiere la participacin de las cadenas respiratorias, posiblemente con
citocromo P
450
o tiorredoxina y NADPH-citrocromo P
450
reductasa.
En las especies de Pseudomonas los cidos grasos producidos por hidrocarburos se
oxidan simultneamente por y oxidacin. Figura N
0
7.17.
291
Figura N
0
7.17. Oxidacin simultnea por y oxidacin en especies de
Pseudomonas
Fuente: (Murray, R. K. et. al. 2005).
Cuando no tiene lugar la -oxidacin es cuando se acumulan cera.
La omega oxidacin (-oxidacin) es una ruta metablica del catabolismo de
los cidos grasos, alternativa a la -oxidacin; a diferencia de sta, en la que
se oxida el tercer carbono de la cadena (carbono ), contando a partir del
extremo carboxlico (COOH), en la -oxidacin se oxida el carbono opuesto, el ms
alejado del grupo carboxilo (carbono ). Este proceso es generalmente minoritario y
afecta en especial a cidos grasos de mediana longitud (10-12 tomos de carbono),
pero puede ser importante cuando la -oxidacin est alterada.
En vertebrados, los enzimas para la -oxidacin se localizan en el retculo
endoplsmico y en el citosol, especialmente del hgado y los riones, en vez de en
la mitocondria como en el caso de la -oxidacin.
Los pasos del proceso se sumarizan en el siguiente orden:
1. Hidroxilacin
En el primer paso se incorpora un grupohidroxilo (OH) en el carbono . El
oxgeno del grupo proviene deloxgeno molecular en una compleja reaccin en
que intervienen el citocromo P450 y el NADPHcomo dador deelectrones.
292
La enzima es una oxidasa de funcin mixta y la reaccin ocurre en el Retculo
endoplasmtico.
2. Oxidacin
El siguiente paso es la oxidacin del grupo hidroxilo a aldehdo por el NAD+. La
enzima es la alcohol deshidrogenasa y la reaccin ocurre en el citosol.
3. Oxidacin
El tercer paso es la oxidacin del grupo aldehdo a un cido carboxlico por el
NAD
+
. El producto es un cido graso con un grupocarboxilo en cada extremo
(cido dicarboxlico). La enzima es la alcohol deshidrogenasa y la reaccin
ocurre en el citosol.
Tras estos tres pasos, cualquiera de los extremos del cido graso puede unirse
al coenzima A para formar un acil-CoA graso que puede sufrir la -oxidacin para
producir cidos de cadena ms corta como el cido succnico (C
4
), que puede ingresar
en el ciclo de Krebs, y el cido adpico (C
6
); este proceso tiene lugar principalmente en
los peroxisomas.
293
7.6. CICLO DEL ACIDO GLIOXILICO
Las bacterias utilizan el ciclo del glioxilato (Figura N
0
7.18), es una modificacin del
Ciclo de Krebs en el cual se saltan los pasos enzimticos en los cuales dos molculas
de CO2 son removidas de los intermediarios de C6. El intermediario C6 se convierte en
dos compuestos C4 (ambos componentes del ciclo). Por lo tanto por cada grupo acetilo
(de los cidos grasos) un intermediario adicional del ciclo se produce. La ruta del
glioxilato generalmente no se encuentra en clulas animales, ya que se utilizan cidos
grasos preformados y presentes en los alimentos.
Figura N
0
7.18. Modificacin del Ciclo Krebs que lleva a la formacin de glucosa a
partir de Acetil CoA.
Fuente: (C.K. Mathews, K.E. Van Holde y K.B. Ahern, 2002).
294
7.6.1. Caractersticas principales
En Plantas, Bacterias y Levaduras, no en animales
Produce Glucosa partiendo de acetato y permite a las clulas crecer en
ambientes mnimos
Los pasos de las descarboxilaciones del Ciclo de Krebs no se llevan acabo
Ocurre en el Glioxisoma
El succinato generado se transporta desde el glioxisoma a la mitocondria,
donde se convierte, a travs de las reacciones 6,7, y 8 del ciclo del cido ctrico
en Oxalacetato
Es la fuente ms importante de oxalacetato cuando la bacteria se alimenta
exclusivamente de fracciones de dos tomos de carbono.
7.6.2. Enzimas exclusivas del Ciclo de glioxilato
Esta va implica dos enzimas: la isocitrato liasa y la malato sintasa. Comprende una
condensacin de acetil CoA con cido glioxlico que de cido mlico con intervencin
del enzima malato sintasa. El malato es subsiguiente oxidado a oxalacetato.
La isocitrato liasa cataliza el desdoblamiento del isocitrato en succinato y glioxilato:
De esta forma se consigue sintetizar succinato a partir de Acetil-CoA, mientras el
C.A.T. puede seguir funcionando. El succinato se puede utilizar con fines anablicos,
por ejemplo para la sntesis de glucosa. Es una ruta muy til en la germinacin de las
semillas.
295
El glioxilato condensa entonces con acetil CoA para formar Malato:
El malato es subsiguientemente oxidado a oxalacetato (Figura N
0
7.19)
La combinacin de estas dos reacciones constituye un bypass de las reacciones de
descarboxilacion del CAT y un proceso cclico a travs del cual se metabolizan dos
grupos acetilo a oxalacetato:
Figura N
0
7.19. Esquema detallado del Ciclo del Glioxilato y sus enzimas
representativas.
296
Fuente: (M.T. Madigan, J.M. Martinko y J. Parker., 2002).
7.6.3. Rol Bioqumico y Regulacin del Ciclo de Glioxilato
El ciclo del glioxilato regula el drenaje del CAT y adicionalmente proporciona una
fuente de cido pirvico para la glucognesis como consecuencia de la oxidacin de
cidos C
4
. Figura N
0
7.20.
Los enzimas del ciclo se sintetizan durante el crecimiento sobre acetato o sus
precursores metablicos inmediatos. La mineralizacin tiene lugar cuando el isocitrato
sigue el ciclo del CAT y no es el sustrato de la isocitrato liasa.
El funcionamiento del ciclo del cido glioxlico se halla sujeto a un control muy estricto,
tanto a nivel de actividad como a nivel de sntesis de sus enzimas. Los trabajos ya
clsicos de Kornberg han demostrado que le control fino de la actividad se localiza en
el isocitrato liasa, siendo sta inhibida totalmente por bajos niveles PEP. La sntesis de
este enzima se reprime a nivel de transcripcin pudiendo ser el correpresor el PEP, el
piruvato o uno de sus derivados metablicos.
297
Figura N 7.20. Ciclo del cido glioxlico. Se generan molculas C
4
a partir de
acetil CoA.
La condensacin de oxalacetato con acetil CoA sigue algunas reacciones del ciclo de
Krebs. La isocitrato liasa desdobla el isocitrato, produciendo succinil CoA, que se
transforma en oxalacetato siguiendo las reacciones del CAT. Por su parte, el glioxilato
condensa con una segunda molcula de acetil CoA, generando malato. El resultado
del proceso es la transformacin neta de dos molculas de acetil CoA en una de
oxalacetato, que queda disponible para finalidades biosintticas. En trazo continuo se
representan las reacciones del CAT, y en trazo discontinuo las del ciclo glioxilato.
Fuente: (Pares I.F. y A. Jurez, 1997).