Farmcia 4 Perodo/2014

MICROBIOLOGIA BSICA
Prof Esp.Luciana S. de Mello Cordeiro
Mdica Veterinria


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Aula Prtica 01 Data: ........../........../.............
Disciplina: MICROBIOLOGIA BASICA Professora: LUCIANA CORDEIRO
Tema da Aula: LABORATRIO DE MICROBIOLOGIA
Assunto: Equipamentos e Materiais Utilizados, Definies Aplicadas ao Controle
de Microrganismos nas Prticas Laboratoriais de Microbiologia.
Objetivo(s):
Apresentao do Laboratrio de Microbiologia
Promover o conhecimento e identificao dos materiais de uso
microbiolgico
Reconhecimento e identificao dos equipamentos laboratoriais de
microbiologia
Conhecimento da funo do emprego dos equipamentos de microbiologia
Manuseio, e cuidados gerais com as vidrarias requeridas para pratica
microbiolgica
Conhecimento das prticas laboratoriais de microbiologia desenvolvidas com
utilizao dos principais equipamentos microbiolgicos
Definir os conceitos de esterilizao, desinfeco, antissepsia e assepsia.

LABORATRIO DE MICROBIOLOGIA

INTRODUO

Um laboratrio uma sala ou espao fsico com parmetros ambientais
controlados; e equipado com diversos elementos, que permitem a correta medida
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ou anlise ao objeto de estudo de carater microbiano. Engloba uma srie de
componentes constituidores como um todo.

Dentre os componentes constituidores do laboratrio de microbiologia as
vidrarias e alguns equipamentos especficos se fazem indispensveis na prtica
microbiolgica. Assim de extrema importncia o conhecimento de cada uma das
diversas vidrarias empregadas, e de todos equipamentos requeridos, bem como o
devido manuseio e adoo do adequado procedimento operacional aliado as aes
de cuidados gerais. No deixando de lado o conhecimento e entendimento das
funes pertinentes a utilizao de cada item no emprego das inmeras tcnicas e
procedimento de microbiologia laboratorial.


EQUIPAMENTOS

Estufa incubadora (Microbiolgica):

um tipo especfico de estufa que
apresenta alm da porta metlica, uma porta de
vidro. Apresenta um sistema de aquecimento
controlado por resistncia eltrica. O
aquecimento controlado atravs de um
termostato e a temperatura acompanhada com
termmetro analgico ou digital. A temperatura
no deve ter uma variao superior 0,5C.
Para determinar a temperatura, coloca-se um
termmetro com o bulbo submerso em lquido
(glicerina, gua, etc.) para maior homogeneidade
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da medida. Esse equipamento utilizado como auxiliar no crescimento e
reproduo dos microrganismos, uma vez que fornece a temperatura adequada a
cada espcie microbiana.

Incubadora de banho de gua (banho-maria):

um equipamento indispensvel para
realizaes dos ensaios de coliformes
termotolerantes (44,5C 0,2C). O mesmo
dotado de um termmetro, termostato e tampa
para o controle de temperatura do banho.


Estufa de Esterilizao:

um tipo especfico de estufa que apresenta um
sistema de aquecimento controlado por resistncia
eltrica, munida de termostato e termmetro para o
controle de temperatura. Em geral este equipamento
utilizado para esterilizar vidrarias.




Potencimetro;

um equipamento muito utilizado no
laboratrio de Microbiologia para se determinar o
pH dos diferentes tipos de meios de culturas e
solues tampo. constitudo por eletrodos,
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botes de ajuste e dotado de um sistema eletrnico capaz de fornecer leituras
diretas com exatido de 0,1 unidades de pH.
Verifica-se a exatido do aparelho pelo menos duas vezes ao dia, usandose
solues-padro tamponadas.
H medidores portteis de fcil uso.


Balanas:

So destinadas a pesagens das diferentes substncias
usadas no preparo dos vrios tipos de meios de cultura,
solues e corantes. Podem ser analgicas ou digitais. As
balanas devem ser mantidas sobre uma base slida
protegidas de vibraes, e tambm de umidade e mudanas
bruscas de temperatura.

Autoclave:

um equipamento destinado esterilizao pelo
calor mido (vapor dgua sob presso). Normalmente, so
utilizados para esterilizar guas de diluies, meios de
cultura que suportem temperaturas elevadas (115-120C),
materiais contaminados que vo ser descartados e outros.
A autoclave de laboratrio pode ser do tipo horizontal ou
vertical, contendo os seguintes acessrios: caldeira
cilndrica hermeticamente fechada por uma tampa de
bronze ou cobre, dotada de manmetro, vlvula de escape
de ar e de segurana. Em seu interior existe uma cesta
metlica (mvel) onde so colocados todos os materiais a
serem esterilizados.
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empregado o uso de bioindicadores ou fitas de controle para se testar a
eficincia deste equipamento.

Geladeiras e Congeladores (Freezers):

As geladeiras so utilizadas para a conservao
de meios de cultura estreis, solues e amostras de
contra-prova. As culturas microbianas e solues no
devem ser colocados no mesmo equipamentos que as
amostras. Jamais poder guardar refeies, lanches,
bebidas ou qualquer outro alimento que ir ser consumido. Se contiver material
com risco biolgico dever ser identificada com o pictograma adequado. Culturas
vivas no devem ser congeladas.
A verificao diria da temperatura regra geral de controle destes
equipamentos.


Agitador Magntico:
munido de uma plataforma metlica onde o
recipiente contendo o meio lquido e uma barra magntica
revestida de material inerte colocado. O mesmo gira a
barra magntica de modo circular, agitando o meio
continuamente durante a incubao e tambm expondo
maior superfcie do meio fase gasosa,


Microscpio tico:
Equipamento utilizado para o estudo dos microrganismos. Os equipamentos
mais usados permitem o aumento de at 1.250 vezes e podem ser monocular ou
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binocular. Deve-se ter cuidado para no utilizar preparaes a fresco com a
objetiva de imerso.

Cabines de Fluxo Laminar Horizontal (A) e Vertical (B):


As cabines de fluxo horizontal se prestam para a
manipulao de materiais estreis como meios de cultura
esterilizados e amostras de materiais estreis (solues
injetveis, nutrio parenteral, etc). No devem ser usadas
para materiais muito contaminados ou culturas puras de
microrganismos, pois o fluxo de direcionado no sentido do
operador.




VIDRARIAS

Vidraria refere-se a uma grande variedade de equipamentos de laboratrio
que tradicionalmente so feitos de vidro, mas tambm podem ser plsticos. Em
geral so utilizados em anlises e experimentos. Contudo o vidro ainda muito
utilizado devido a sua transparncia, resistncia ao calor e por ser praticamente um
material inerte.


Tipos de Vidrarias e suas Funes

Geralmente a vidraria de laboratrio apresenta graduaes e marcas
volumtricas em suas paredes. Essa marcao pode ser de maior ou de menor
preciso conforme o tipo de vidraria e sua funo.
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Alm das marcaes, da preciso e do tipo de material, a funo da
vidraria tambm determinada pelo seu formato. Em alguns casos, a vidraria no
apresenta marcao. Algumas tem formato especfico para algumas vidrarias (ex.
algumas mantas aquecedoras), e da mesma forma algumas vidrarias tem formatos
especficos para o equipamento (ex. tubos falcon).
As vidrarias tambm podem apresentar cores e materiais diferenciados:
Vidro cristal: vidro de alta qualidade e transparncia, geralmente
denominado vidro boro que possui maios resistncia a choques trmicos,
mecnicos e qumicos.
Vidro mbar: o vidro escurecido, utilizado na maioria das vezes para
diminuir o efeito da luz no armazenamento de compostos fotossensveis.
Plstico: Atualmente alguns equipamentos esto sendo fabricados com
plstico, em sua maioria por razes econmicas, porm sem apresentar muitas das
qualidades do vidro.
Outros materiais: porcelana, borrachas, metais, entre outros tambm podem
ser encontrados entre os materiais que compem as vidrarias de laboratrios.


Descrio das Vidrarias Empregadas em Microbiologia

1. Anel para funil: usado como suporte de funis.
2. Ala de platina: usada basicamente em microbiologia. Pode ser usada para
outros fins.
3. Lmina: usada por vrios setores tcnicos e para diversos fins.
4. Lamnula: usada por vrios setores e para diversos fins.
5. Cmara de Neubauer: usada para contagem global de clulas bactrias, e
sanguneas.
6. Balo de destilao: usado em destilaes. Possui sada lateral para
condensao de vapores.
7. Balo de fundo chato: usado para aquecimento e armazenamento de lquidos.
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8. Balo de fundo redondo: usado para aquecimento de lquidos e reaes de
desprendimento de gases.
9. Balo volumtrico: usado para preparar e diluir solues.
10. Becker: usado para aquecimento de lquidos, reaes de precipitao etc.
11. Bico de Bunsen: usado para aquecimento.
12. Bureta: usada para medidas precisas de lquidos. Usada em anlises
volumtricas.
13. Capilares: tubos de dimetro reduzido usados em micropesquisas. So
usados tambm em hematologia (hematcrito) e bacteriologia.
14. Condensador: usados para condensar os gases ou vapores na destilao.
15. Dessecador: usado para resfriar substncias em ausncia de umidade.
16. Erlenmeyer: usado para titulaes e aquecimento de lquidos.
17. Escovas: usadas para limpeza de tubos de ensaio e outros materiais.
18. Estante para tubos de ensaio: suporte de tubos de ensaio.
19. Frasco de reagentes: usado para o armazenamento de solues.
20. Funil de Buchner: usado em conjunto com o Kitassato para filtrao a
vcuo.
21. Funil de haste longa: usado em transferncias de lquidos e em filtraes
de laboratrio.
22. Funil de separao / decantao: usado para separao de lquidos
imiscveis.
23. Garra metlica: usadas em filtraes, sustentao de peas tais
como condensador, funil de decantao e outros fins.
24. Kitassato: usado para filtrao a vcuo.
25. Pina de madeira: usada para segurar tubos de ensaio durante
aquecimentos diretos no bico de Bunsen.
26. Pina de Mohr e Pina de Hoffman: usadas para impedir ou diminuir fluxos
gasosos.

27. Pina metlica: usada para transporte de cadinhos e outros fins.
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28. Pipeta de Pasteur: usada para a transferncia de lquidos.
29. Pipeta de Sahli: usada na dosagem de hemoglobina sangnea.
30. Pipeta de Thoma: usada para medir a quantidade de clulas sangneas.
31. Pipeta de Westergreen: usada na determinao da velocidade de
hemossedimentao.
32. Pipeta graduada: usada para medir volumes variveis de lquidos.
33. Pipeta volumtrica: para medir volumes fixos de lquidos.
34. Pisseta: usada para lavagens, desinfeo, remoo de precipitados e outros
fins.
35. Placa de Petri: usada para fins diversos, especialmente cultivo de
microrganismos.
36. Proveta graduada: usada para medidas aproximadas de volumes de
lquidos.
37. Termmetro: usado para a medida de temperaturas.
38. Tubo cnico: usados em pesquisas bacteriolgicas,
sedimentoscopia urinria, pesquisas parasitolgicas e bioqumica.
39. Tubo de Ensaio: usado em reaes qumicas, principalmente testes de
reao.
40. Tubo de Wintrobe: usada na determinao do volume celular sanguneo
hematcrito.
41. Vidro de relgio: usado para cobrir beckers em evaporaes, pesagens e
fins diversos.




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CONCEITOS E DEFINIES EMPREGADOS AO CONTORLE DE
MICRORGANISMOS ENQUANTO MEDIDAS DE BIOSSEGURANA QUE VISAM
MINIMIZAR RISCOS DE CONTAMINAO
1. Antissepsia: a eliminao das formas vegetativas de bactrias patognicas e
grande parte da flora residente da pele ou mucosa, atravs da ao de substncias
qumicas (antisspticos).
2. Antissptico: substncia ou produto capaz de deter ou inibir a proliferao de
microrganismos patognicos, temperatura ambiente, em tecidos vivos.
3. Assepsia: Mtodo empregado para impedir que um determinado meio seja
contaminado. Quando este meio for isento de bactrias chamamos de meio
assptico.
4. Degermao: a remoo de detritos, impurezas, sujeira e microrganismos da
flora transitria e alguns da flora residente depositados sobre a pele do paciente ou
das mos da equipe laboratorial atravs da ao mecnica de detergente, sabo
ou pela utilizao de substncias qumicas (antisspticos).
5. Descontaminao: tem por objetivo a diminuio dos microrganismos sem
eliminao completa devido presena de matria orgnica, realizado em
instrumentais e superfcies.
6. Desinfeco: a eliminao de microrganismos patognicos na forma
vegetativa de laboratrios e demais ambientes de sade, geralmente feita por
meio qumicos (desinfetantes).
7. Desinfetantes: substncia ou produto capaz de deter ou inibir a proliferao de
microrganismos patognicos em ambientes e superfcies do laboratrio,
temperatura ambiente.
8. Detergente: substncia ou preparao qumica que produz limpeza; possui uma
ou mais propriedades: tensoatividade, solubilizao, disperso, emulsificao e
umectao.
9. Equipamento de proteo individual (EPI'S): so equipamentos de proteo
utilizados pelo profissional, pessoal auxiliar, paciente e equipamentos, a fim de
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evitar contaminao e acidentes (gorro, mscara, avental, luvas, culos de
proteo...)
10. Esporos: os esporos nada mais so que a forma mais resistente dos
microrganismos, sendo mais difcil de serem eliminados.
11. Esterilizao: a destruio dos microrganismos nas formas vegetativas e
esporuladas. A esterilizao pode ser por meio fsico (calor) ou qumico (solues
esterilizantes).
12. Esterilizante: agente fsico (estufa, autoclave) ou qumico (glutaraldedo 2%,
formaldedo 38%) capaz de destruir todas as formas de microrganismos, inclusive
as esporuladas.
13. Infeco cruzada: a infeco ocasionada pela transmisso de um
microrganismo de um indivduo para outro, geralmente pelo pessoal, ambiente ou
um instrumento laboratorial contaminado.





BIBLIOGRAFIA

BRASIL. Biossegurana em laboratrios biomdicos e de microbiologia. Ministrio da Sade. Secretaria
de Vigilncia em Sade. Departamento de Vigilncia Epidemiolgica. 3.ed. Braslia: Ministrio da Sade,
2006. 290p.

LACAZ, R.. Manual Prtico de Microbiologia Bsica. 1 ed. So Paulo: EDUSP - Editora da Universidade
de So Paulo, 2000.

VERMELHO, A. B.. Prticas de Microbiologia. 1 ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2006.



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RELATRIO DE AULA PRTICA DE MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA
Data: ........../............./..............
Curso: FARMCIA Turno: NOTURNO Srie: 4 PERODO Srie: ................
Disciplina: MICROBIOLOGIA BSICA Professora: LUCIANA CORDEIRO
Tema da Aula: LABORATRIO DE MICROBIOLOGIA
Aluno: ....................................................................................................................................

EXERCCIOS DE FIXAO

1. Quanto a contextualizao descrita nesta apostila, cite trs dos
equipamentos requeridos nas prticas de microbiologia, os quais considera
de maior importncia para garantir segurana tcnica, processual, e de
resultados, e justifique sua resposta.









2. Estabelea a funo de cada uma das vidrarias citadas abaixo.
A) Cmara de Neubauer:
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B) Ala de Platina:

C) Tubo de Ensaio:

D) Placa de Petri:

E) Erlermayer:

F) Pisseta:

G) Becker:


3. Diferencie os termos abaixo:
A) Antissepsia de Assepsia:


B) Detergente de Desinfetante:



C) Esterilizao de Descontaminao: