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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS



CARRERA DE BIOQUMICA CLNICA

LABORATORIO DE PARASITOLOGIA CLINICA

PRACTICA N1

Nombres: -Paola Castillo
-Santiago Lpez
-Mara Molina


1. TEMA: Flebotoma, frotis sanguneo y morfologa sangunea

2. OBJETIVO DE LA PRCTICA:

2.1. General:

Aplicar los conocimientos previos de la anatoma del sistema circulatorio, para
efectuar una flebotoma y sus respectivos anlisis
2.2. Objetivos especficos

Obtener una muestra de sangre venosa
Aprender a realizar un frotis sanguneo y proceder a colorear con Wright y
proceder a observarlo al microscopio
Conocer los parmetros que nos permitan identificar las clulas sanguneas

3. MARCO TEORICO:
3.1. FLEBOTOMIA
La flebotomaes la primera y principal tcnica realizada en la biometra hemtica
(BH), es utilizada para diagnosticar una enfermada de la sangre del paciente y
tambin es hecha en pacientes para disminuir el exceso de hierro ya que este
puede provocar en fechas futuras algunos sntomas como lo es la
hemocromatosis.
El trmino "flebotoma" es utilizado para describir una incisin practicada en la
vena por motivos diversos. El procedimiento quirrgico insertado de un catter en
una vena perifrica, sea para la administracin de frmacos en un paciente de
difcil acceso venoso (dificultaden puncionar venas), sea para la insercin de
catter unido al corazn, para monitorizacin de la presin venosa central en
pacientes graves.
La flebotoma constituye una de las etapas ms importantesen el trabajo del
laboratorio clnico. Por una parte representa el primer contacto entre el laboratorio
y sus pacientes y desde el punto de vista de la muestra sangunea, la enorme
importancia queconlleva una muestra apropiadamente colectada, la seguridad de
su origen y el correcto envasado y transporte, constituyen factores fundamentales
en la evaluacin e informe de los exmenes a realizar. (Prez Pardo)

3.2. FROTIS SANGUNEO
Una extensin o frotis sanguneo consiste en recubrir parcialmente un porta con
una gota de sangre, de tal manera que las clulas de sta se dispongan formando
una sola capa de ellas. Esto puede hacerse manual o automticamente.
PARTES DE UNA EXTENSIN.
CABEZA.
Es la zona inicial de la extensin.
Es la regin ms gruesa.
En ella se encuentra una mayor proporcin de linfocitos, y los hemates forman
aglomerados
CUERPO.
Es la zona media del frotis.
Su espesor es el apropiado.
En ella existe una adecuada proporcin entre los distintos tipos de leucocitos.
Contiene la "zona ideal" de observacin, que corresponde a la porcin que limita con
la cola.
COLA.
Es la zona final de la extensin.
Suele tener un aspecto redondeado.
Es la regin ms fina.
En ella se encuentra una mayor proporcin de leucocitos grandes (granulocitos y
monocitos), y adems. los hemates estn deformados y presentan una tonalidad
uniforme.
En su porcin terminal suelen ser ms abundantes las plaquetas, sobre todo si son
grandes.
BORDES.
Contienen una mayor proporcin de leucocitos grandes.
Si estn deshilachados, en ellos las clulas son difciles de reconocer por estar
deformadas o destruidas

DEFECTOS DE UNA EXTENSIN.
Excesiva longitud y escaso grosor o escasa longitud y excesivo grosor. Esto se debe a
un inadecuado tamao de la gota de sangre o/y a un error en la velocidad o/y a un fallo en el
ngulo de extensin de la misma.
Presencia de escalones o estras. Esto est ocasionado por una falta de uniformidad en el
deslizamiento de la gota.
Existencia de abundantes zonas redondeadas que carecen de sangre. Esto se produce
por la presencia de restos de grasa o de suciedad en el porta.
Extremo final excesivamente dentado. (Suardiaz, J. 2004)










3.3. MORFOLOGA DE LA CLULAS SANGUNEAS
La sangre Estn constituidas por los tres grupos celulares: eritrocitos, leucocitos y
plaquetas, las cuales se producen en la mdula sea, a partir de clulas madre que se
multiplican a gran velocidad.
Los eritrocitos o glbulos rojos: son clulas anucleadas (sin ncleo) con forma de
disco bicncavo, en su interior llevan una sustancia llamada hemoglobina (protena
que contiene hierro), lo que le confiere el color a la sangre, especializados en el
transporte de oxgeno (O2) y dixido de carbono (CO2) entre los tejidos y la
circulacin pulmonar.

Los leucocitos contienen ncleo y mitocondrias, y pueden moverse de una manera
ameboide. Debido a su capacidad de movimiento ameboide, los leucocitos pueden
pasar a travs de poros en las paredes de los capilares, y moverse hacia un sitio
de infeccin, mientras que los eritrocitos por lo general permanecen confinados
dentro de los vasos sanguneos.

Los leucocitos son casi invisibles bajo el microscopio a menos que se coloreen;
por ende, se clasifican de acuerdo con sus propiedades de tincin.
Los leucocitos que tienen grnulos en su citoplasma se llaman leucocitos
granulares; aquellos sin grnulos claramente visibles son conocidos
como leucocitos agranulares.
Los leucocitos granulares con grnulos que se tien de color rosado se llaman
eosinfilos, y aquellos con grnulos que se colorean de azul se
denominan basfilos. Aquellos con grnulos que tienen poca afinidad por una u
otra tincin son neutrfilos. Los neutrfilos son el tipo de leucocito ms abundante.
Hay dos tipos de leucocitos granulares: linfocitos y monocitos. Los linfocitos por lo
general son el segundo tipo de leucocito ms numeroso; son clulas pequeas con
ncleo redondo y poco citoplasma. En contraste, los monocitos son los leucocitos
de mayor tamao y por lo general tienen ncleo en forma de rin o de herradura

Los Trombocitos o plaquetas, son los componentes celulares ms pequeos de la
sangre. Son clulas anucleadas encargadas de la primera fase de la coagulacin,
por lo que sus funciones estn limitadas al torrente sanguneo (Prieto V 2006)







4. MATERIALES

Agujas: de 0.9 mm a 1.1 mm de dimetro ( 20G 19G )
Jeringuillas
Adaptador para tubos-Vacutainer
Torniquete
Alcohol Etlico
Algodn
Gasa
Guantes
Bata
Cubre boca
tubo Vacutainer de 4 ml con anticoagulante
E.D.T.A
2 portaobjetos
Microscopio
Aceite de inmersin


5. PROCEDIMIENTO

5.1 FLEBLOTOMIA
Se revisa y prepara el material, se rotulan los tubos, colocar la aguja en la funda y el
tubo sin perforar el tapn.
Colocar torniquete
localizar vena y desinfectar el rea.
Puncionar vena, estabilizar aguja y funda y con el dedo pulgar en el tubo,ndice y
medio en aletas presionar para perforar el tapn del tubo
Comprobar que fluya la sangre en el tubo
Retirar el torniqute
Retirar el tubo cuando se llene.
Colocar torunda y retirar aguja y funda.
Doblar el brazo suavemente y llevar a sentar al donador.


5.2 FRONTIS SANGUINEO Y COLORACION DE WRIGHT

Recoger una pequea gota de sangre y depositarla a 1cm del extremo de un porta
objetos totalmente limpio.
Extender mediante otro portaobjetos de la manera siguiente: poner el portaobjetos en
contacto con la gota, que en principio se alargar en una lnea en la zona de contacto
de los dos portas. Hacer deslizar el portaobjetos esmerilado sobre el porta soporte en
direccin opuesta a la de la gota de sangre; sta, por tensin superficial, se extiende
formando una lmina muy delgada. De esta manera, la gota es atrada por el
portaobjetos esmerilado y no empujada.
Dejar secar al aire.


Colocar el frotis secado al aire sobre una rejilla o cubeta de tincin con la sangre hacia
arriba.
Cubrir completamente el portaobjetos con el colorante de Wright gota a gota
Dejarlo que permanezca en el frotis aproximadamente de 5-8 minutos, para fijar los
glbulos sanguneos. El colorante deber cubrir completamente el portaobjetos, pero
no debe derramarse por los bordes. Deber agregarse una cantidad adicional si ste
se comienza a evaporar.
Agregar directamente al colorante un volumen igual de amortiguador de Wright, para
evitar la coloracin dbil.
Esperar la formacin de brillo metlico. Puede usarse de igual manera agua destilada.
Dejar actuar de 10-15 minutos.
Lavar con agua en el chorro cuidadosamente hasta que la extensin presente un
aspecto rosado al examinarlo a simple vista.
Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa o algodn humedecido en alcohol para
eliminar cualquier resto de colorante.
Secar al aire


5.3 MORFOLOGIA SANGUNEA
Con el frotis seco colocar una gota de aceite de inmersin
Observar al microscopio con el objetivo de inmersin.
Diferenciar cada celula sangunea


6. GRAFICO DE LAS CELULAS





FROTIS SANGUINEO








7. OBSERVACIONES
- Despus de realizar un frotis sanguneo se observ la presencia de glbulos rojos y glbulos
blancos.
- Los glbulos blancos o leucocitos que identificamos fueron monocitos, linfocitos, neutrfilos,
basfilos, eosinofilos.
- Se observ gran cantidad de glbulos rojos ya que es el segundo componente ms abundante
de la sangre.
- Los ncleos de los linfocitos y neutrfilos se observan de color prpura oscuro. Los ncleos de
los monocitos de color prpura algo ms claros
- Los grnulos de los eosinfilos se observan de color rojo-anaranjado intenso. Los grnulos de
los basfilos prpura azulado muy oscuro. Los grnulos de los neutrfilos se aprecian de color
lila, bastante finos.
- Los eritrocitos se observarn de color naranja o rosado

8. CONCLUSIONES

- Se logr efectuar una flebotoma en base a la aplicacin los conocimientos previos de la
anatoma del sistema circulatorio y sin mayores percances.
- Se pudo obtener una muestra de sangre venosa al practicar una flebotoma entre los
compaeros de laboratorio.
- Se pudo realizar un frotis sanguneo con la sangre extrada en la flebotoma y colorear con
Wright para poder observarlo al microscopio
- Se identific los parmetros para poder identificar las clulas sanguneas.

PLAQUETAS EOSINOFILOS
S
MONOCITO BASOFILO
LINFOCITO

EOSINOFILOS
NEUTROFILO

9. CUESTIONARIO
Anomalas morfolgicas de los glbulos rojos.
- Tamao

MACROCITOS:
Son eritrocitos con dimetro superior a 8.5 micras. Su aparicin puede
estar asociada a: Deficiencia de vitamina B12 y/o cido flico.



MICROCITOS:
Recibe este nombre el glbulo rojo que presenta un dimetro inferior
a 6.0 micras. Se observan microcitos en entidades que cursan anemias
por deficiencia de hierro y las talasemias.


MEGALOCITOSIS:
Consiste en la existencia de unos hemates con un dimetro
longitudinal superior a 11 micras. Se produce en las anemias
megaloblsticas.hemates de gran tamao


- Forma

ACANTOCITO:
Se presenta como un eritrocito con espculas y proyecciones cortas
espaciadas


EQUINOCITOS:
Tambin llamados estereocitos o astrocitos, consiste en la existencia de
unos hemates con espculas cortas y distribuidas regularmente a lo
largo de toda su superficie. Se produce en la uremia y en las
hepatopatas neonatales.

ESTOMATOCITOSIS:
Consiste en la existencia de hemates con una invaginacin central en
forma de boca. Se produce en el alcoholismo y en las hepatopatas
crnicas.

EXCENTROCITOSIS
Consiste en la existencia de unos hemates cuya Hb est concentrada en
uno de sus polos

- Color

ANISOCROMA
Consiste en una falta de uniformidad en la coloracin entre unos
hemates y otros





HIPERCROMA
Consiste en la existencia de unos hemates intensamente coloreados




- Inclusiones intraeritrocitarias


CUERPO DE HOWELL-JOLLY:
Es un pequeo residuo nuclear




CUERPO DE PAPENHEIMER:
Son acmulos de hemosiderina unida a protenas.







ANILLOS DE CABOT:
Estn formados por restos de la membrana nuclear o de microtbulos




Bibliografa
Prez Pardo, E. (2005). Prcticas de Laboratorio de Qumica Orgnica. La Habana:
Science.
Prieto Valtuea, J. (2006). La clnica y el laboratorio (20 ed.). Barcelona, Espaa:
Elsevier.
Suardiaz, J. (2004). Laboratorio clnico. La Habana, Cuba: Ciencias Mdicas.