PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI

BLOK DASAR DIAGNOSTIK DAN TERAPI

A. HASIL BIAKAN (KOLONI) BERMACAM-MACAM BAKTERI
Acuan:
Koloni adalah massa pertumbuhan di atas permukaan medium padat
yang berasal dari satu sel bakteri. Sel-sel bakteri yang terdapat dalam
satu koloni satu clone bakteri. Sifat-sifat dari satu koloni bisa menjadi
salah satu alat untuk identifkasi bakteri karena setiap species bakteri
akan menunjukkan sifat koloni yang berbeda-beda. Sifat koloni yang
harus diperhatikan antara lain adalah:
Ukurannya: besar atau kecil
Bentuknya: bulat, lonjong atau tak beraturan,
epinya: rata, berombak, bergerigi atau merupakan rambut
!medosa!,
"ermukaannya: licin, kasar, kering atau berlendir
Kejernihannya: kjeruh atau ntransparant
#le$asinya: rata, cembung atau cembung dengan cekungan
ditengahnya.
%arnanya: akibat dihasilkannya pigment &hitam atau merah'
atau perubahan (arna p) indikator pada medium disekitarnya.
Tujuan Pembelajaran
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan sudah mampu
mengambarkan ciri-ciri medium serta ciri-ciri gambar koloni bemacam-
macam bakteri positif-*ram dan negatif-*ram di atas permukaan
bermacam-macam medium.
1. Koloni Bakt!i Po"iti#-G!a$ %i ata" P!$&kaan
L$'n( A(a! N&t!in (N&t!int A(a! Plat)
Disediakan
a. +empeng agar nutrien
b. )asil biakan Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis
dan Bacillus subtilis pada lempeng agar nutrien
Sasaran Pembelajaran
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan sudah
mampu:
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 1
a. ,enyebutkan ciri-ciri lempeng agar nutrien
b. ,enyebutkan ciri-ciri koloni Staphylococcus aureus,
Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis pada lempeng
agar nutrien,
c. ,enggambarkan morfologi dari koloni Staphylococcus aureus,
Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis pada lempeng
agar nutrient.
Dikerjakan
+akukan pengamatan sifat-sifat lempeng agar nutrien
+akukan pengamatan bentuk dan sifat-sifat koloni
Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan Bacillus
subtilis pada lempeng agar nutrien.
*ambarkan morfologi dari koloni Staphylococcus aureus,
Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis pada lempeng
agar nutrien.
Hasil Pengamatan
a. Ci!i-)i!i $%i&$ L$'n( A(a! N&t!in
Ci!i-)i!i L$'n( A(a! N&t!in
*a!na
Kon"i"tn"i
K+!ni,an
-. Ciri-ciri dan koloni Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis
pada Lempeng Agar Nutrien
Ci!i-)i!i Staphylococcus
aureus
Staphylococcus
epidermidis
Bentuk
epi
"ermukaa
n
Kejerniha
n
%arna
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 2
*ambar
). Ci!i-)i!i %an koloni Bacillus subtilus 'a%a L$'n( A(a!
N&t!in
Ci!i-)i!i Bacillus subtilus
Bentuk
epi
"ermukaa
n
Kejerniha
n
#le$asi
%arna
*ambar
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 3
.. Koloni Bakt!i N(ati#-G!a$ %i ata" P!$&kaan
B!$a)a$-$a)a$ L$'n( A(a!
Disediakan
a. +empeng agar ,ac-onkey dan Salmonella Shigella &SS' agar
b. Biakan Klebsiela spp, Escherechia spp, Aerogenes spp, Proteus
spp, dan Pseudomonas spp di atas permukaan +empeng .gar
,ac -onkey,
c. Biakan Klebsiela spp, Escherechia spp, Aerogenes spp, Proteus
spp, Pseudomonas spp , Salmonella spp dan Shigella spp di atas
permukaan +empeng .gar /utrien,
d. Biakan Salmonella spp dan Shigella spp di atas permukaan
+empeng .gar Salmonella-Shigella &SS .gar'
Sasaran Pembelajaran
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan sudah
mampu:
a. ,enyebutkan ciri-ciri lempeng ciri-ciri lempeng agar ,ac-onkey
dan SS agar.
b. ,enyebutkan ciri-ciri koloni:
Klebsiela spp, Escherechia spp, Aerogenes spp, Proteus spp,
dan Pseudomonas spp di atas permukaan +empeng .gar ,ac
-onkey,
Klebsiela spp, Escherechia spp, Aerogenes spp, Proteus spp,
Pseudomonas spp, Salmonella spp dan Shigella spp di atas
permukaan +empeng .gar /utrien,
Salmonella spp dan Shigella spp di atas permukaan +empeng
.gar Salmonella-Shigella
c. ,enggambarkan morfologi dari koloni: .
Klebsiela spp, Escherechia spp, Aerogenes spp, Proteus spp,
dan Pseudomonas spp di atas permukaan +empeng .gar ,ac
-onkey,
Klebsiela spp, Escherechia spp, Aerogenes spp, Proteus spp,
Pseudomonas spp, Salmonella spp dan Shigella spp di atas
permukaan +empeng .gar /utrien,
Salmonella spp dan Shigella spp di atas permukaan +empeng
.gar Salmonella-Shigella
Dikerjakan
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 4
a. +akukan pengamatan sifat-sifat lempeng agar ,ac-onkey dan SS
agar.
b. +akukan pengamatan bentuk dan sifat-sifat koloni
Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis dan Bacillus
subtilis pada lempeng agar nutrien.
c. *ambarkan morfologi dari koloni Staphylococcus aureus,
Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis pada lempeng
agar nutrien.
Hasil Pengamatan
a. Ci!i-)i!i $%i&$ L$'n( A(a! Ma)Conk/ 0 SS A(a!
Ci!i-)i!i Ma)Conk/ A(a! SS A(a!
*a!na
Kon"i"t
n"i
K+!ni,a
n
b. Ci!i-)i!i %an (a$-a! koloni Klebsiela spp !scherechia
Aerogenes Proteus %i ata" '!$&kaan L$'n( A(a! Ma)
Conk/
Ci!i-)i!i !scherechia Klebsiela Aerogenes Proteus
Bentuk
epi
"ermuka
an
Kejernih
an
#le$asi
%arna
*ambar
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 5
c. Ci!i-)i!i %an (a$-a! Koloni Klebsiela spp !scherechia
Aerogenes Proteus 'a%a L$'n( A(a! N&t!in
Ci!i-)i!i Escherechia Klebsiela Aerogenes Proteus
Bentuk
epi
"ermuka
an
Kejernih
an
#le$asi
%arna
*ambar

d. Ci!i-)i!i %an (a$-a! koloni Pseudomonas "'' 'a%a
L$'n(A(a! Ma)Conk/ %an L$'n( A(a! N&t!in
Ci!i-)i!i Ma)Conk/ a(a! N&t!int a(a!
Bentuk
"ermukaa
n
Kejerniha
n
#le$asi
%arna
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 6
*ambar
e. Ci!i-)i!i %an (a$-a! koloni Salmonella "'' %an Shigella "''
'a%a '!$&kaan L$'n( A(a! Sal$onlla S,i(lla (SS
A(a! Plat)
Ci!i-)i!i Salmonela "'' Shigella "''
Bentuk
epi
"ermukaa
n
Kejerniha
n
#le$asi
%arna
*ambar
". Ci!i-)i!i %an (a$-a! koloni Salmonella "'' %an Shigella "''
'a%a '!$&kaan L$'n( A(a! N&t!in (N&t!int A(a!
Plat)
Ci!i-)i!i Salmonela "'' Shigella "''
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 7
Bentuk
epi
"ermukaa
n
Kejerniha
n
#le$asi
%arna
*ambar
B. HASIL BIAKAN DAN MEDIUM UNTUK ISOLASI 1AMUR
Tujuan Pembelajaran
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan sudah
mampu mengambarkan ciri-ciri medium serta ciri-ciri dan gambar
koloni dua species jamur pada medium Sabouraud
Disediakan
a. +empeng agar Sabouraud
b. )asil biakan jamur Species Candida dan Aspergillus pada
lempeng agar Sabouraud.
Sasaran Pembelajaran
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan sudah
mampu:
,enyebutkan ciri-ciri lempeng agar Sabouraud
,enyebutkan ciri-ciri koloni Species Candida dan Aspergillus
pada lempeng agar Sabouraud,
,enggambarkan morfologi dari koloni Species Candida dan
Aspergillus pada lempeng agar Sabouraud.
Sasaran Pembelajaran
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 8
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan sudah
mampu:
a. ,enyebutkan ciri-ciri lempeng agar Sabouraud.
b. ,enyebutkan ciri-ciri koloni species Candida dan Aspergillus
pada lempeng agar Sabouraud,
c. ,enggambarkan morfologi dari koloni species Candida, dan
Aspergillus pada lempeng agar Sabouraud.
Dikerjakan
+akukan pengamatan sifat-sifat lempeng agar Sabouraud
+akukan pengamatan bentuk dan sifat-sifat koloni species
Candida dan Aspergilluss pada lempeng agar Sabouraud
*ambarkan morfologi dari koloni species Candida dan
Aspergillus pada lempeng agar Sabouraud.
Hasil Pengamatan
a. Ci!i-)i!i $%i&$ L$'n( A(a! Sa-o&!a&%
-. Ci!i-)i!i %an (a$-a! koloni "')i" #andida %an
Aspergillus 'a%a l$'n( a(a! Sa-o&!a&%
Ci!i-)i!i #andida "'' Aspergillus "''
Bentuk
Tepi
Permukaan
Kejernihan
Elevasi
Warna
Gamar
C. TES BIOKIMIA
Tujuan Pembelajaran
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age !
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan sudah
mampu menjelaskan dan mengambarkan hasil beberap tes biokimia
untuk bakteri positif dan negatif *ram.

T"-t" -ioki$ia &nt&k -akt!i 'o"iti# (!a$
1. T" '!a(ian $annitol
Tujuan melakukan tes mannitol
Untuk mengeta0hui apakah bakteri yang dites bisa meragikan
mannitol atau tidak
.
Prinsip dari tes mannitol
Bila bakteri yang dites meragikan mannitol yang terdapat dalam
medium, maka p) disekitar koloni akan berubah menjadi asam dan
(arna p) indikator dalam medium akan b(erubah menjadi kuning.
Disediakan
Biakan bakteri yang meragikan mannitol dan yang tak
meragikan mannitol pada mannitol salt agar
,edium ,annitol salt agar
Sasaran Pembelajaran
1. Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan
mampu menjelaskan ciri-ciri hasil tes mannitol yang positif dan
yang negatif.
2. ,ampu menyebutkan ciri-ciri medium mannitiol salt agar
Hasil Pengamatan
a. Ha"il t" Mannitol
Ci!i-)i!i Po"iti# N(ati#
%arna
*ambar
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 1"
b. Ciri-ciri Mannitol Salt Agar
Ciri-ciri Mannitol Salt Agar
Warna
Konsistensi
Kejernihan
.. T" DNA"
Tujuan melakukan tes D$Ase
.dalah untuk mengetahui apakah bakteri yang dites menghasilkan
3/.se atau tidak.
Prinsip dari tes D$Ase
Bila bakteri yang dites menghasilkan 3/.se, maka 3/.se tersebut
akan memecahkan 3/. yang terdapat disekitar koloni bakteri. Bila
disekitar koloni ditetesi larutan )-+ 45 maka )-+ ini akan
menyebabkan koagulasi 3/. yang ada pada medium. Karena
disekitar koloni bakteri 3/.nya sudah tak ada, maka pada daerah
tersebut akan terdapat halo yang jernih.
Disediakan
Biakan bakteri yang menghasilkan 3/.se dan yang tak
menghasilkan 3/.se pada 3/. agar medium,
,edium 3/. agar dan reagensia )-1 4 5
Sasaran Pembelajaran
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan mampu:
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 11
a. menjelaskan ciri-ciri hasil tes 3/.se yang positif dan yang
negatif.
b. menyebutkan medium dan bahan yang diperlukan untuk tes ini
c. menyebutkan ciri-ciri medium 3/. agar

Hasil Pengamatan
a. Ci!i-)i!i DNA A(a!
Ci!i-)i!i DNA A(a!
*a!na
Kon"i"tn"i
K+!ni,an
-. Ha"il t" DNA"
Ci!i-)i!i Po"iti# N(ati#
)alo
sekitar
koloni
.da6tidak ada7 .da6tidak ada7
Gamar
*Coret ang tak perlu
2. T" Koa(&la"
Tujuan melakukan tes Koagulase
.dalah untuk mengetahui apakah bakteri yang dites menghasilkan
koagulase atau tidak.
Prinsip dari tes Koagulase
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 12
Bila bakteri yang dites menghasilkan koagulase, maka en8im
tersebut akan mengkuagulasi plasma yang ada disekitarnya. .
Disediakan
Biakan bakteri yang menghasilkan dan yang tak menghasilkan
koagulase pada medium agar nutrien miring &Slant',
"lasma
2 buah tabung reaksi yang bersih
Sasaran Pembelajaran
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan mampu:
a. menjelaskan ciri-ciri hasil tes Koagulase yang positif dan yang
negatif.
b. menyebutkan bahan yang diperlukan untuk tes ini
Hasil Pengamatan
a. Ha"il t" Koa(&la"
Ha"il t" Po"iti# N(ati#
Koagulasi .da6tidak ada7 .da6tidak ada7
*ambar
3Co!t /an( tak '!l&
4. T" Katala"
Tujuan melakukan tes Katalase
.dalah untuk mengetahui apakah bakteri yang dites menghasilkan
katalase atau tidak.
Prinsip dari tes Katalase
Bila bakteri yang dites menghasilkan katalase, maka en8im
tersebut akan mengkataliser )
2
9
2
menjadi )
2
9 dan 9
2
yang
nampak sebagai buih . .
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 13
Disediakan
Biakan bakteri yang menghasilkan dan yang tak menghasilkan
katalase pada medium agar nutrien miring &Slant',
)
2
9
2
4 5
Sasaran Pembelajaran
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan mampu:
a. menjelaskan ciri-ciri hasil tes Katalase yang positif dan yang
negatif.
b. menyebutkan bahan yang diperlukan untuk tes ini
Hasil Pengamatan
Ha"il t" Katala"
Ha"il t" Po"iti# N(ati#
Buih .da6tidak ada7 .da6tidak ada7
*ambar
3Co!t /an( tak '!l&
5. T" Ok"i%a"
Tujuan melakukan tes %ksidase
.dalah untuk mengetahui apakah bakteri yang dites menghasilkan
oksidase atau tidak.
Prinsip dari tes %ksidase
Bila bakteri yang dites menghasilkan oksidase, maka en8im
tersebut bereaksi dengan reagen tetra-methyl-p-phenylene diamine
o:alate 4 5 yang akan menimbulkan (arna coklat kehitaman
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 14
Disediakan
Biakan bakteri yang menghasilkan dan yang tak menghasilkan
oksidase pada medium agar nutrien miring &Slant',
reagensia : tetra-methyl-p-phenylene diamine o:alate 4 5
Satu lembar kerta0s saring
Sasaran Pembelajaran
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan mampu:
1. menjelaskan ciri-ciri hasil tes oksidase yang positif dan yang
negatif.
2. menyebutkan bahan yang diperlukan untuk tes ini
Hasil Pengamatan
Ha"il t" Katala"
Ha"il t" Po"iti# N(ati#
%arna
*ambar

T"-t" -ioki$ia -a"il n(ati# (!a$
1. Rak"i 'a%a TSI A(a!
Tujuan
Unruk melihat reaksi peragian gula-gula, pembentukan gas dari
peragian glukosa, dan pembentukan )2S dari metabolisme protein
Disediakan
a. Biakan pada S; dengan reaksi :
abung 1: .s6.s *&<')2S&-'= abung 2: .s6.s *&-')2S&<'= abung
>: .lk6.s *&-' )2S&<'= abung ?: .lk6.s *&<')2S&-'= abung 4:
.lk6.s *&-')2S&-'= abung @: .lk6/.
b. ,edium S;
Sasaran Pembelajaran
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan mampu:
1. menjelaskan ciri-ciri Aeaksi pada S; agar
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 15
2. menyebutkan ciri-ciri medium S; agar
Hasil Pengamatan
Ci!i-)i!i $%i&$ TSI A(a!
Ci!i-)i!i TSI
Bnt&k
*a!na
Kon"i"tn"i
K+!ni,an
Ga$-a!
Rak"i 'a%a TSI a(a!
Ta-&n( 1 2 > ? 4 @
Slant kunin
g
kuning pink pink pink pink
Butt kunin
g
kuning kunin
g
kuning kuning ak beubah
*as positif negatif negati
f
positif negatif negatif
)2S negati
f
positif positif negatif negatif negatif
*ambar
Prinsip reaksi: li,at 'a%a M%i&$ (D)
.. Rak"i 'a%a SIM a(a!
Tujuan
es ini dilakukan untuk melihat hasil metabolisme protein
&tryptophan' dan pergetrakan &motility' baktei yang dites.
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 16
Prinsip tes
)asil ahir dari protein &tryptophan' adalah )2S yang berbentuk gas
dan indol. Karena )2S tak bisa dilihat maka ke dalam medium
ditambahkan 6SO4 dan Na
.
S
.
O
2
7 yang bila bereaksi dengan )2S
akan menghasilkan Be2S29> yang ber(arna hitam.
,edium ini adalah medium yang semisolid &setengah padat' maka
gerakan bakteripun bisa dilihat dengan memperhatikan pada
pertumbuhan bakteri di tempat tusukan pada medium.
;ndol yang dihasilkan akan bereaksi dengan reagens ko$acs
memmbentuk cincin pink.
Disediakan
1. Biakan pada S;, agar dengan reaksi : abung 1: ,&<';&<')2S&-'=
abung2 : ,&-';&<')2S&-'= abung >: ,&-';&-')2S&-'= dan tabung ?:
,&<';&-')2S&<'
.. Aeagensia: larutan Ko$acs
Sasaran Pembelajaran
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan mampu:
a. menjelaskan ciri-ciri Aeaksi pada S;, n agar
b. menyebutkan ciri-ciri medium S;, agar
Hasil Pengamatan
Ci!i-)i!i $%i&$ SIM A(a!
Ci!i-)i!i SIM A(a!
Bnt&k A(a! t(ak
*a!na A(a!8'&ti,
Kon"i"tn"i S$i "oli%
K+!ni,an 1!ni,
Ga$-a!
Rak"i 'a%a SIM a(a!
Ta-&n( 1 2 > ?
,otility positif negatif negatif positif
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 17
;ndol positif positif negatif negatif
)2S negatif negatif negatif negatif
*ambar
2. T" U!a"
Tujuan melakukan tes urease
.dalah untuk mengetahui apakah bakteri yang dites menghasilkan
urease atau tidak.
Prinsip dari tes urease
Bila bakteri yang dites menghasilkan urease, maka en8im
mengkataliser urea dalam medium menjadi ureum yang bersifata
alkalis, sehingga (arna p) indikator berubah menjadi pink.
Disediakan
Biakan bakteri yang menghasilkan dan yang tak menghasilkan
urease pada medium urea agar
Sasaran Pembelajaran
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan mampu:
a. menjelaskan ciri-ciri hasil tes urease yang positif dan yang
negatif.
b. ,enjelaskan ciri-ciri medium urease
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 18
Hasil Pengamatan
Ha"il t" U!a"
Ha"il t" Po"iti# N(ati#
%arna
*ambar
Ci!i-)i!i $%i&$ &!a
Ci!i-)i!i U!a A(a!
Bnt&k Slant
*a!na "utih kekuningan
Kon"i"tn"i Solid
K+!ni,an Cernih
Ga$-a!
4. T" Mt,/l R%
Tujuan tes
Untuk melihat dihasilkanya asam stabil metabolisme karbohidrat
Prinsip tes
Bila dihasilkan asam stabil maka bila ditetesi reagens methyl Aed
Disediakan
Biakan pada ,A-D" medium tes methyl rea positif dan negatif,
Aeagensia ,ethyl red
Sasaran Pembelajaran
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan mampu:
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 1!
a. menjelaskan ciri-ciri hasil tes ,ethyl Aed yang positif dan yang
negatif.
b. ,enjelaskan ciri-ciri medium ,A
Hasil Pengamatan
Ha"il t" Mt,/l R%
Ha"il t" Po"iti# N(ati#
%arna
*ambar
Ci!i-)i!i $%i&$ MR-9P
Ci!i-)i!i MR-9P M%i&$
Bnt&k -airan
*a!na
Kon"i"tn"i -air
K+!ni,an Cernih
Ga$-a!
5. T" 9o(" P!oka&!
Tujuan tes
Untuk melihat dihasilkanya asam tidak stabil pada metabolisme
karbohidrat
Prinsip tes
Bila dihasilkan asam tidak stabil maka bila maka asam tersebut
akan diubah menjadi alkohol dan ahirnya menjadi acethyl methyl
carbinol yang buila ditetesi -naftol 4 5, kemudian dengan K9) ?E5
akan menimbulkan cincin ber(arna merah lembayung.
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 2"
Cadi umumnya yang ,A positif akan negatif pada D" test
Disediakan
Biakan Bakteri yang menghasilkan asam tak stabil dan yang
menghasilkan asam stabil pada ,A-D" medium
reagensia F-naftol 4 5 dan K9) ?E5
Sasaran Pembelajaran
Setelah selesai pembelajaran ini mahasis(a diharapkan mampu:
menjelaskan ciri-ciri hasil tes Doges "roskauer yang positif dan
yang negatif.
Hasil Pengamatan
Ha"il t" 9o(" P!o"ka&!
Ha"il t" Po"iti# N(ati#
%arna
*ambar
:. T" Cit!at
Tujuan tes
Untuk melihat apakah bakteri yang dites mampu menggunakan
citrat sebagai satu-satunya sumber karbon.
Prinsip Tes
Bila bakteri yang dites mampu menggunakan citrat sebagai satu-
satunya sumber carbon, maka bakteri tersebut bisa tumbuh di atas
medium citrat dan mengubah p) medium, sehingga (arna indikator
p) dalam medium yang hijau berubah menjadi biru.
Disediakan
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 21
Biakan yang bisa menggunakan dan yang tak bisa menggunakan
citrat sebagai satu-satunya sumber energi pada medium citrat
,edium citrat
Sasaran Pembelajaran
Setelah pembelajaran ini selesai diharapkan mahasis(a sudah
mampu menyebutkan:
1. -iri-ciri tes citrat yang positif dan yang negatif,
2. -iri-ciri medium citrat
Hasil Pengamatan
Ci!i-)i!i $%i&$ Cit!at
Ci!i-)i!i Cit!at M%i&$
Bnt&k
*a!na
Kon"i"tn"i
K+!ni,an
Ga$-a!
Ha"il t" Cit!at
Ha"il t" Po"iti# N(ati#
%arna
*ambar
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 22
;. P!a(ian Gl&ko"a
Tujuan Tes
Untuk melihat apakah bakteri yang dites meragikan glukosa atau
tidak, dan bila meragikan apakah menghasilkan gas atau tidak.
Prinsip Tes
Bakteri ditanam pada air pepton yang mengandung glukosa dan
phenolptahalin sebagai indikator p). Bila bakteri meragikan glukosa
maka p) akan berubah menjadi asam dan (arna indikator p)
menjadi kuning. 3an bila peragian itu menghasilkan gas maka gas
akan ditempung pada tabung 3urham yang ada pada dasar tabung.
Bila tak meragikan maka tak terjadi asam sehingga (arna p)
indikator tetap merah muda6pink.
Disediakan
1. ? tabung medium glukosa, tabung 1: dengan bakteri yang
meragikan glukosa dengan gas= abung 2: dengan bakteri yang
meragikan glukosa tanpa gas= abung >: dengan bakteri yang tak
meragikan glukosa= abung ?: anpa pertumbuhan bakteri
2. Satu tabung medium laktose
Sasaran Pembelajaran
Setelah pembelajaran ini selesai, diharapkan mahasis(a sudah
mampu menyebutkan:
-iri-ciri tes glukosa yang positif dengan gas, positif tanpa gas dan
tes glukosa yang negatif.
-iri-ciri medium gula-gula
Hasil Pengamatan
Ci!i-)i!i $%i&$ (&la-(&la
Ci!i-)i!i M%i&$ (l&ko"a
(Ta-&n( 4)
M%i&$ lakto"a
(Ta-&n( 5)
*a!na
Ta-&n(
D&!,a$
.da6tidak ada7
7-oret yang tak perlu
.da6tidak ada7
7-oret yang tak perlu
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 23
Ga$-a!
Ha"il T" (&la-(&la
Ci!i-)i!i Ta-&n( 1 Ta-&n( . Ta-&n( 2
*a!na
Ga" .da6tidak ada7 .da6tidak ada7 .da6tidak ada7
Ga$-a!
3Co!t /an( tak '!l&
D. MACAM-MACAM MEDIUM
Tujuan Pembelajaran
Setelah pembelajaran ini mahasis(a diharapkan sudah dapat
menyebutkan bermacam-macam medium dan penggunaannya masing-
masing.
Sasaran pembelajaran
Setelah pembelajaran ini mahasis(a diharapkan sudah dapat
menyebutkan jenis-jenis medium yang digunakan sebagai medium
dasar, medium enrichment, medium diGerensial, medium selektif
diGerensial, medium enriched.
Disediakan
Dikerjakan
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 24
"erhatikan dan catat nama dari masing-masing medium pada tiap
kelompok.
"erhatikan dan catat isi yang penting dari masing-masing medium
Hasil Pengamatan
a. Klo$'ok M%i&$ Da"a!.
N&t!int A(a! (NA) N&t!in B!ot, (NB)
B!ain Ha!t A(a! (BHA) B!ain Ha!t B!ot,
(BHB)7
B!ain Ha!t In#&"ion A(a!
(BHIA)
B!ain Ha!t In#&"ion
B!ot, (BHIB)
-. Klo$'ok M%i&$ Di<!n"ial
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 25
TSI $%i&$
SIM $%i&$
M%i&$ G&la-(&la
M%i&$ U!a M%i&$ Cit!at M%i&$ MR-9P
). Klo$'ok M%i&$ Slkti# %#!n"al
M)Conk/ A(a! Sal$onlla-S,i(lla (SS) A(a!
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 26
TCBS A(a! Tll&!it M%i&$
%. Klo$'ok M%i&$ En!i),$nt
Slnit -!ot, M%i&$ $'%&
T,/o(l&)olat
Ra''a'o!t $%i&$ Ai! ''ton
alkali"
. Klo$'ok M%i&$ En!i),%

Bloo% A(a! C,o)olat A(a!
#. Klo$'ok M%i&$ T!an"'o!t
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 27
St&a!t M%i&$ Ca!!/ an% Blai!
M%i&$.
(. Klo$'ok M%i&$ K,&"&"
&raian masing'masing medium
a. Klo$'ok M%i&$ Da"a!=
3isebut medium dasar karena dipakai untuk membuat medium lain
dengan menambahkan bahan-bahan yang diperlukan oleh bakteri:
misalnya bahan makanan khusus, suplemen atau bahan yang bisa
menghambat pertumbuhan bakteri tertentu.
/utrient agar &/.' dan /utrien Broth &/B': medium yang hanya
mengandung bakan makanan biasa dan air. Untuk memadatkan
ditambahkan agar murni.
Brain )eart .gar &B).' dan Brain )eart Broth &B)B': medium
yang mengandung kaldu dari jaringan otak dan jantung sapi.
Brain )eart ;nfusion .gar &B);.', dan Brain )eart ;nfusion Broth
&B);B': medium yang mengandung infusi dari otak dan jantung
sapi.
.ir pepton: medium yang mengandung pepton dan air
-. Klo$'ok M%i&$ Di<!n"ial
Triple Sugar (ron )TS(* agar: disamping bahan makanan
dan agar juga mengandung :
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 28
Lo>n"tin-1n"n
M%i&$
Gl&)o"a7 lakto"a7 %an "&k!o"a, untuk menunjukkan
peragian ketiga gula-gula ini secara respirasi atau secara
fermentasi.
P!otin (t!/'to',an)7 yang menghasilkan )2S sebagai hasil
metabolismenya.
6SO4 dan Na
.
S
.
O
2
7 yang bila bereaksi dengan )2S akan
menghasilkan Be2S29> yang ber(arna hitam.
Cuga dipakai untuk melihat pembentukan gas pada peragian
glukosa.
S(+ agar )Sugar indol , motility*: isinya sama dengan
S; tapi disamping untuk melihat hasil fermentasi gula-gula
pembentukan gas, dan )2S, juga bisa dipakai untuk melihat
pergerakan bakteri.
+edium gula'gula: glukosa, laktosa, sukrose dan maltose
erdiri dari air pepton ditambah gula-gula yang bersangkutan.
3ipakai untuk melihat kemampuan bakteri untuk meragikan gula-
gula tersebut dan khusus untuk glukosa kemampuannya untuk
meraguikan dengan pembentukan gas atau tidak. Untuk melihat
ada tidaknya gas, maka ke dalam medium tersebut dimasukkan
tabung kecil yang tertelungkup untuk menampung gas bila ada.
Agar urea: medium dasar ditambah dengan urea dan indikator
p).
3ipakai untuk melihat apakah bakteri yang dites menghasilkan
urease atau tidak Bila en8im tersebut dihasilkan maka urea
dalam medium akan dipecah menjadi ureum sehingga p)
menjadi alkaalis dan (arna indikator p) berubah menjadi merah.
Agar citrate: hanya terdiri dari agar dan citrat tanpa sumber
karbon yang lain.
3ipakai untuk melihat apakah bakteri yang dites mampu
menggunakan citrat sebagai sumber karbon satu-satunya atau
tidak.
+-'.P medium= adalah medium dasar cair ditambah karbo
hidrat.
3ipakai untuk melihat apakah fermentasi karbo hidrat olerh
bakteri yang dites menghasilkan asa0m stabil atau tidak. Bila
tidak stabil maka hasil ahir dari fermentasi karbon hidrat adalah
acethyl methyl carbinol bukan asam.
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 2!
). Klo$'ok M%i&$ Slkti# %#!n"al= medium yang
bisa dipakai untuk membedakan bakteri tertentu.
M)Conk/ a(a!7 disamping bahan makanan dan agar juga
mengandung :
k"t!ak $'%&7 sehingga hanya dapat ditumbuhi
oleh basil negatif gram &selektif',
la)to" %an n&t!al !% sebagai indicator p),
sehingga bakteri yang meragikan lactose akan tumbuh
sebagai koloni yang merah diGerensial
Tll&!it $%i&$ : ,engandung tellurite dengan kadar
tertentu sehingga hanya bisa ditumbuhi oleh Corynebacterium
diphtheriae. %arna koloni yang tumbuh dapat membedakan
beberapa jenis C. diphtheriae.
%. Klo$'ok M%i&$ "lkti#
Sal$onlla-",i(lla (SS) a(a! = yang bisa tumbuh subur
hanyalah genus salmonella dan shigella saja.
TCBS a(a! : yang bisa tumbuh subur hanyalah genus $ibrio
. Klo$'ok M%i&$ En!i),$nt
Slnit -!ot, : hanya bisa ditumbuhi dengan subur oleh
salmonella atau shigella dari tinjau atau usap rectum
Ra''a'o!t $%i&$= sama dengan selenit
M%i&$ $'%& = dipakai untuk mempersubur
pertumbuhan salmonella pada darah
Ai! ''ton alkali" : hanya bisa ditumbuhi dengan subur
oleh $ibrio
T,/o(l&)olat: untuk bakteri anaerobe
#. Klo$'ok M%i&$ En!i),%
Bloo% a(a!= terdiri dari B);B ditambah 25 darah domba.
3ipakai untuk bakteri yang butuh faktor pertumbuhan yang ada
dalam darah dan untuk melihat sifat hemolisis dari bakteri.
C,o)olat a(a!= terdiri dari B);B ditambah 25 darah domba
lalu dipanaskaan sehingga eritrositnya pecah. 3ipakai untuk
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 3"
mengisolasi bakteri yang membutuhkan faktor pertumbuhan
yang ada dalam erytrosit.
(. Klo$'ok M%i&$ T!an"'o!t
St&a!t $%i&$ : dipakai untuk transportasi specimen yang
mengandung bakteri positif gram dan negatif gram
Ca!!/ an% Blai! $%i&$ : dipakai untuk transportasi tinja
atau apusan rectum yang dicurigai mengandung $ibrio atau
enterobacteriaceae yang patogen.
,. Klo$'ok M%i&$ K,&"&"
Lo>n"tin-1n"n M%i&$= terbuat dari telur ditambah
malachit green, yang disterilkan secara secara khusus dalam
bentuk slant. ,edium ini dipakai untuk menumbuhkan
Mycobacterium tuberculosa.
Lo?! M%i&$= terbuat dari serum atau plasma yang
disterilkan secsara khusus dalam bentuk slant. ,edium ini
dipakai untuk mengembangbiakkan Corynhebacterium
diphtheriae, dimana bakteri ini mudah diidentifkasi karena
adanya butir-butir
PENUNTUN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI BLOK DDT "age 31