Informe 5 Santos Surez Luis Francisco Clave 17 Grupo 27

CROMATOGRAFA EN COLUMNA


Palabras clave: Polaridad, Adsorbente, Eluatos, Muestra Patrn.


Resumen

Se realiz cromatografa en columna de un medicamento para obtener su principio activo,
el eluyente usado fue acetato de etilo y el adsorbente fue el gel slice, se obtuvieron 8
eluatos, se hizo cromatografa en capa fina para identificar los componentes
comparndolos con una muestra patrn. Los eluatos que se asemejaban a la muestra
patrn se les aplic una destilacin simple para purificarlos.


Introduccin


La cromatografa es una tcnica de
separacin descubierta por el botnico
ruso Mikhail Tswett en 1906. Es una
tcnica de separacin que se basa en el
principio general de distribucin de un
compuesto entre dos fases, una fija y una
mvil. Bsicamente, es la remocin
selectiva de los componentes de una
mezcla por accin de la fase mvil que
fluye a travs de la fase estacionaria
donde se encuentran. La cromatografa,
adems de una tcnica de separacin, es
empleada para identificar y determinar el
nmero de componentes en una mezcla,
como tcnica de purificacin y para
monitorear una reaccin. La
cromatografa de adsorcin se basa en la
separacin de un soluto entre una fase
slida de adsorbente y una fase mvil, el
soluto es adsorbido en la superficie del
adsorbente y luego desorbido por el
solvente de fase mvil, este tipo de
cromatografa se utiliza en la
cromatografa en capa fina y
cromatografa en columna. La
cromatografa en capa fina es una tcnica
analtica que se usa comnmente para
monitorear una reaccin , determinar el
nmero de componentes en una mezcla y
para la eleccin del eluyente adecuado
para una cromatografa en columna. La
fase slida es la fase estacionaria
(adsorbente), el adsorbente usado en esta
practica es gel slice (para ambas
cromatografas). La fase lquida es la fase
mvil (eluyente), el eluyente usado en esta
practica es acetato de etilo. La
cromatografa en columna es similar a la
cromatografa en capa fina, en una
cromatografa en columna el adsorbente
se introduce en un tubo o columna
(generalmente de vidrio) y el adsorbente
se hace descender por gravedad a travs
de la columna. En este tipo de
cromatografa los distintos componentes
de la mezcla se adsorbern en la
superficie del slido con afinidades
diferentes, la fase mvil desplazara y
disolver estos componentes de acuerdo
con su afinidad por la superficie slida y
la solubilidad de la sustancia en ella. La
cromatografa en columna se usa
principalmente para separar grandes
cantidades, conocidos como eluatos, se
usa una cromatografa en capa fina para
identificar los componentes en los eluatos
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comparndolos con una muestra patrn
(cafena) aquellos que sean semejantes a
la mezcla patrn se obtienen por
destilacin simple. La distancia que
recorre la sustancia en la placa y la
distancia que recorre el eluyente a partir
del punto de aplicacin se conoce como
frente de referencia (Rf), este valor nos da
una idea del eluyente o mezcla de
eluyentes adecuados para la separacin.
Un Rf < 0.5 indica que el eluyente es de
muy baja polaridad para la separacin,
un Rf > 0.5 indica el eluyente es muy
polar, un valor ideal de Rf se encuentra
entre 0.5 y 0.7.
Resultados y Discusin
Muestra problema: Cafiaspirina

Muestra patrn: Cafena

Adsorbente: Gel de slice

Eluyente: Acetato de Etilo

Cromatografa en columna

A partir del uso de esta tcnica se
obtuvieron 8 eluatos, cada uno de 6 ml.
En teora los primeros eluatos no
presentan una gran cantidad del
componente de inters, los eluatos que nos
interesan son los 4,5 y 6, para
comprobarlo usamos cromatografa en
capa fina.

Cromatografa en capa fina

Primer Cromatoplaca

Rf patrn: 0.65

Rf muestra: 0.59


Segunda Cromatoplaca

Rf patrn: 0.77

Rf muestra: 0.7

Tercer Cromatoplaca

Rf patrn: 0.6

Rf muestra: 0.5

Cuarta Cromatoplaca

Rf patrn: 0.68

Rf muestra: 0.68

Quinta y Sexta Cromatoplaca

Rf patrn: 0.59

Rf muestra 5: 0.63

Rf muestra 6: 0.53

Destilacin Simple

Peso de la muestra: 0.55g

Peso del recuperado: 0.1168

%recuperado: 21%

No se hizo cromatografa en capa fina
para los eluatos 7 y 8 debido a que el
componente de inters probablemente ya
no estara presente en los eluatos.

Como se puede observar, la muestra
patrn (cafena) muestra un rango de Rf
desde 0.6 a 0.7, lo cual indica que el
eluyente es el adecuado para la sustancia,
en la primer, segunda y tercer
cromatoplaca el Rf de la muestra es
cercano al Rf del patrn, pero es en la
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cuarta cromatoplaca en la que los Rf son
idnticos, en la quinta cromatoplaca la
diferencia es muy pequea por lo cual
tambin se tomo el eluato 5, el eluato 6
tambin se eligi debido a que pudo haber
errores experimentales al obtener su Rf,
pues en teora el componente de inters
tambin se encuentra en ese eluato, al
eluato 4, 5 y 6 se les purifico por
destilacin simple.

Conclusiones

Fue posible obtener un porcentaje
adecuado del componente de inters
(21%), los errores experimentales
influyen mucho en este porcentaje, pues
en la segunda y tercer cromatoplaca, la
cromatoplaca eluyo casi hasta el final de
la misma, tambin es posible determinar
un eluyente ms adecuado para la
cromatografa en columna, uno que sea
ms polar, es posible que si se hubiera
seguido con la cromatografa en columna,
los eluatos posteriores hubieran contenido
a la cafena pura, pero no se pudo hacerlo
debido a la falta de tiempo. En esta
practica se usan 3 tcnicas de purificacin
y separacin, la cromatografa en
columna permiti separar grandes
cantidades de la muestra problema, la
cromatografa en capa fina nos ayudo a
identificar el componente de inters y la
destilacin simple se uso para obtenerlo.












Referencias Bibliogrficas


Qumica Orgnica Experimental. Dupont
Durst, George W.Gokel. Pgs. 78,80